小鼠P53基因(4)

八年级生物下册第八单元《生物的生殖、发育与遗传》单元测试题-苏教版（含答案）一、选择题1. “稻花香里说丰年，听取蛙声一片”，意味着蛙进入了繁殖季节。

下列关于蛙生殖和发育的说法中，正确的是（）A．雄蛙鸣叫属于学习行为 B．雌雄蛙抱对有利于完成体内受精C．幼体的发育在水中进行 D．蛙的发育过程为完全变态2.早上吃煮鸡蛋时，小林发现蛋黄上有个灰绿色的圆点，他又好奇地打开妈妈刚买的新鲜鸡蛋，发现“圆点”的颜色是（）A．灰绿色 B．黑色C．红色D．白色3. “捕虫能手”丽草蛉的完全变态发育过程如图。

它的蛹藏在（）A．卵中B．茧中C．幼虫体内D．成虫体内4. 2021年6月24日《细胞（Cell）》杂志报道，我国科学家黄三文团队培育出一种用种子繁殖的杂交马铃薯新品种——“优薯1号”。

用种子繁殖马铃薯与用薯块（茎）繁殖相比，优势之一是（）A．子代能保持母体的优良特性B．子代个体间株高完全一致C．子代个体间产量完全相同D．子代具有双亲的遗传特性，适应环境的能力较强5.小林同学在一本英文科普书中看到一幅马铃薯图片（如图）。

马铃薯的“Seed”来源于其“Flower”中的（）A．柱头B．花柱C．子房壁D．胚珠6.南瓜根系发达，抗病力强。

在南瓜植株上嫁接西瓜苗，不仅西瓜产量高、单瓜大，还保留了原有的甘甜。

下列相关描述正确的是（）A．嫁接时南瓜植株作接穗，西瓜苗作砧木B．该方法应用了植物的无性生殖C．用该方法繁育出的西瓜含有南瓜的优良基因D．这种产量高、单瓜大的变异是可遗传的变异7.新冠肺炎疫情期间，生物学老师在线远程指导同学们在家做“观察鸡卵的结构”实验。

小华将鸡卵内容物轻轻倒入一个无色透明的玻璃杯中进行观察，却没看到胚盘。

老师建议他采取的方法可能是（）①将玻璃杯举起，从底部观察②用牙签刺破卵黄膜进行观察③用小勺轻翻卵黄再观察④再取一个鸡卵，用小勺敲开其钝端直接观察⑤将一个煮熟的鸡卵剥开卵壳和卵白等，观察卵黄A．②③⑤B．②③④C．①③⑤D．①④⑤8.如图为未受精的鸡卵结构图。

P53基因的功能1 阻滞细胞周期在细胞周期中，P53的调节功能主要体现在G1和G2/M期校正点的监测，与转录激活作用密切相关。

P53下游基因P21编码蛋白是一个依赖Cyclin(细胞周期蛋白)的蛋白激酶抑制剂，一方面P21可与一系列Cyclin-cdk （细胞周期蛋白依赖性激酶）复合物结合，抑制相应的蛋白激酶活性，导致低磷酸化Rb 蛋白（视网膜母细胞瘤蛋白）堆积，后者使E2F转录因子（参与细胞周期调控的细胞因子）不能活化，引起G1期阻滞；另外P53的另外3个下游基因Cyclin B1,CADD45 和14-3-3σ则参与G2/M期阻滞。

2 促进细胞调亡Bcl-2（调控线粒体外膜通透性的基因家族）可阻止凋亡形成因子如细胞色素C等从线粒体释放出来，具有抗凋亡作用，而Bax （促凋亡基因）可与线粒体上的电压依赖性离子通道相互作用，介导细胞色素c的释放，具有凋亡作用，p53可以上调Bax的表达水平，以及下调Bcl-2的表达共同完成促进细胞凋亡作用。

P53还可通过死亡信号受体蛋白途径诱导凋亡，T NF受体（在真核细胞表达具有生物活性的可溶性肿瘤坏死因子）和Fas蛋白（一种细胞膜抗原，主要功能是介导细胞凋亡）。

3 维持基因组稳定DNA受损后，由于错配修复的累积，导致基因组不稳定，遗传信息发生改变。

P53可参与DNA的修复过程，其DNA结合结构域本身具有核酸内切酶的活性，可切除错配核苷酸，结合并调节核苷酸内切修复因子XPB和XPD的活性，影响其DNA重组和修复功能。

4 抑制肿瘤血管生成肿瘤生长到一定程度后，可以通过自分泌途径形成促血管生成因子，刺激营养血管在瘤体实质内增生。

P53蛋白能刺激抑制血管生成基因Smad4等表达，抑制肿瘤血管形成。

在肿瘤进展阶段，P53基因突变导致新生血管生成，有利于肿瘤的快速生长，这常常是肿瘤进入晚期的表现。

ASDDAp53既可阻滞细胞周期，也可诱导细胞凋亡。

两种作用方式都是为了维护基因组的稳定，但二者的性质截然不同。

P53综述刘仍允（2006年5月）仅从90年代至今，关于p53作为肿瘤抑制因子的研究报道就有多于20000篇，是什么让p53得到科学界如此多的关注？在27年前（1979年），p53首次被发现。

在上世纪80年代，TP53（p53的编码基因）被认为是一个原癌基因（proto-oncogene），直到90年代早期，TP53被广泛认为是一个肿瘤抑制基因，它处在细胞各种胁迫反应途径的十字路口上。

p53在细胞周期捕获，DNA修复，细胞衰老、分化、调亡等过程中都起着重要的作用，它能修复损伤细胞，或者除去严重损伤的细胞从而避免这些细胞对机体的危害作用。

由于p53的多功能性，在它的编码基因TP53上发现很多突变都会影响到p53的功能。

在很多（75%）人的癌症中都存在p53的突变。

有关p53的研究已经拓展到毒物学和治疗学领域。

P53基因是迄今发现与人类肿瘤相关性最高的基因。

在短短的十多年里，人们对P53基因的认识经历了癌蛋白抗原，癌基因到抑癌基因的三个认识转变，现已认识到，引起肿瘤形成或细胞转化的P53蛋白是P53基因突变的产物，是一种肿瘤促进因子，它可以消除正常P53的功能，而野生型P53基因是一种抑癌基因，它的失活对肿瘤形成起重要作用。

一、P53基因结构及表达P53基因在人类、猴、鸡和鼠等动物中相继发现后，对其进行了基因定位，人类P53基因定位于17P13.1，鼠P53定位于11号染色体，并在14号染色体上发现无功能的假基因，进化程度迥异的动物中，P53有异常相似的基因结构，约20Kb长，都由11个外显子和10个内含子组成，第1个外显子不编码，外显子2、4、5、7、8、分别编码5个进化上高度保守的结构域，P53基因5个高度保守区即第13～19、117～142、171～19 2、236～258、270～286编码区。

P53基因转录成2.5KbmRNA，编码393个氨基酸蛋白，分子量为53KD，P53基因的表达至少受转录及转录后二种水平的调控。

P53信号通路中另一个重要成员――miRNA人们在最近几项研究中发现了一个保守的miRNA家族――miR-34家族。

miR-34家族是p53直接的转录靶标。

miR-34的激活可以诱导细胞周期停滞和细胞凋亡，这些都是p53的活性效应。

此外，miR-34的缺失会减少p53介导的细胞死亡。

上述发现再一次告诉我们：miRNA是肿瘤抑制网络中的核心角色之一，非编码RNA同样是肿瘤发生过程中的关键分子。

过去数十年里对p53的深入研究使我们了解到，p53在负责调节多种与癌症相关应激状态的生理应答的复杂分子网络中，处于核心地位[1,2]。

直至最近几年，人们仍然认为，p53网络完全由蛋白质编码基因构成，这些基因包括上游启动p53活性的基因、下游介导p53效应的基因以及组成调节性反馈环的基因。

新近的几项研究中，人们发现了一种组成p53网络的“新面孔”――miR-34，它是一种miRNA。

这是研究人员第一次发现在关键性的肿瘤抑制通路中，还存在蛋白质与非编码RNA的相互作用[3~7]。

miRNA是一类介导特异靶向mRNA 发生转录后沉默的小分子调节RNA。

miR-34家族中在进化上相当保守的miRNA 可以直接在p53诱导下对DNA损伤及肿瘤发生做出应答[3~7]。

研究人员发现，异位表达的miR-34可以产生与p53相同的生物学效应，如诱导细胞生长停滞及细胞凋亡，miR-34则是通过减少促增殖基因及抗凋亡基因的表达来发挥上述作用的[3~7]。

以上研究结果表明，miRNA――或者从更广泛的角度来讲――非编码RNA是癌基因及肿瘤抑制网络中的重要分子，这是通过最近的研究发现才认识到的。

癌症中的miRNA人们首次在线虫中发现miRNA，它们是小的非编码RNA，在幼虫发育的时间选择方面具有重要作用。

随后，几乎在所有多细胞生物中都发现了大量miRNA。

大部分动物miRNA具有相同的生成和作用机制（图1）。

通常在经过接连两次的加工处理后，形成由18～22个核苷酸组成的成熟的miRNA，这些miRNA是由其具有茎环结构的前体剪接而来[8,9]。

《中国癌症杂志》2009年第19卷第5期CHINA ONCOLOGY 2009 Vol.19 No.5335p53-/-,k-ras基因型小鼠肺癌细胞株的建立与鉴定 ［摘要］　背景与目的：在肺癌的基础研究中，有特定基因变化的肺癌细胞株非常重要。

k-ras激活和p53突变在肺癌的发生发展中有重要作用。

本研究通过诱导小鼠肺癌生成，对肿瘤进行培养，建立p53-/-,k-ras 基因型的小鼠肺癌细胞株。

方法：用病毒吸入法，对p53loxp/loxp ，Loxp-Stop-Loxp k-ras G12D 转基因小鼠肺部细胞进行条件性基因敲除，诱导小鼠产生肺癌。

通过HE染色和PCR法对小鼠肺癌组织进行组织病理学和基因型鉴定，对肿瘤细胞原代培养建立p53-/-,k-ras基因型的小鼠肺癌细胞株，并通过软琼脂克隆形成实验、生长曲线分析和核型分析对细胞株进行验证。

结果：成功建立p53-/-,k-ras基因型的小鼠肺腺癌细胞株。

p53-/-,k-ras基因型的小鼠肺癌细胞株体外生长速度与人肺腺癌细胞A549生长速度接近，能够在软琼脂中形成肉眼可见的克隆。

结论：成功建立p53-/-,k-ras基因型的小鼠肺癌细胞株，为下一步的实验研究打下了基础。

［关键词］　肺癌；　小鼠；　细胞株；　原代培养 中图分类号：R73-35+4 文献标识码：A 文章编号：1007-3639(2009)05-0335-05Establishment of a mouse lung cancer cell line with the genotype of p53-/-,k-ras SUN Yi-hua,LI Li,PAN-Jun,YE Xiao-lei,WANG Zuo-yun,FENG Yan,CHEN Hai-quan (Department of Cardiothoracic Surgery, The Affiliated Sixth People's Hospital,Shanghai Jiao Tong University,Shanghai 200233,China)Correspondence to：CHEN Hai-quan E-mail：hqchen1@ ［Abstract ］ Background and purpose ：The lung cancer cell line with speci fic gene mutation is very important in research of lung cancer. k-ras and p53 play important roles in tumorgenesis, but there was little research about mouse p53-/-,k-ras lung cancer cell line in China. We established mice lung cancer cell lines with the genotype of p53-/-,k-ras. Methods ：We induced lung cancer in p53loxp/loxp , Loxp-Stop-Loxp k-ras G12D transgenic mice by intranasal infection with recombinant Cre adenoviruses that conditionally knock out p53 and activate k-ras in lung epithelium cells. Pathological histology of the mice lung cancer was identi fi ed by HE staining and con fi rmed the genotype of the mouse lung cancer by PCR. A mouse lung cancer cell line was established by tissue primary cell culture. The anchorage-independent growth ability and proliferation rate were indentified compared with A549 cell line. Results ：A mouse lung adenocarcinoma cell line with the genotype of p53-/-, k-ras was established. This cell line had a similar proliferation rate with A549, and showed anchorage-independent growth in soft agar. Conclusion ：We have successfully established a mouse lung cancer cell line with the genotype of p53-/-, k-ras, which provided us a platform for further studying. ［Key words ］　lung cancer; mouse; cell line; primary culture通讯作者：陈海泉　E-mail:hqchen1@ 据世界卫生组织统计，肺癌已成为癌症中的第一杀手，全球每年约新增1 200万的肺癌患者［1］，尽管有手术、放疗和化疗等综合治疗，但疗效仍然不佳，有报道显示1996年到2003年的肺癌5年生存率仅为16%［2］。

2023－2024学年度第一学期期中练习题年级：高三科目：生物考试时间90分钟，满分100分一、单选题（每小题2分，共30分）1.真核细胞中大分子物质与其组成单体、合成部位，对应正确的是（）A.淀粉：蔗糖、叶绿体基质B.糖原：葡萄糖、线粒体内膜C.蛋白质：氨基酸、核糖体D.DNA：脱氧核糖核酸、核孔2.环孢菌素A是一种从真菌培养液中分离出的由11个氨基酸组成的天然环肽，其具有膜穿透性，是临床上常用的免疫抑制药物。

下列关于环孢菌素A说法正确的是（）A.结构中含有10个肽键B.在真菌的高尔基体上合成C.可用于治疗免疫缺陷综合征D.可能是一种脂溶性肽类分子3.胞内体是动物细胞内的囊泡结构，能将细胞摄入的物质运往溶酶体降解。

下列推测不合理的是（）A.胞内体可以将胞吞摄取的多肽运往溶酶体B.胞内体与溶酶体融合体现膜的选择透过性C.胞内体的膜由磷脂、蛋白质等分子构成D.溶酶体水解产生的物质可被细胞再利用4.乙醇是生物学实验中常用的试剂。

下表列出了乙醇在实验中的作用，其中错误的是（）选项实验乙醇的作用A DNA粗提取与鉴定溶解DNA，初步分离DNA与蛋白质B菊花的组织培养工作台、手部、外植体的消毒C绿叶中的色素的提取溶解绿叶中的色素D检测生物组织中的脂肪洗去浮色A.AB.BC.CD.D5.p53蛋白能延迟细胞周期进程以修复DNA损伤，或在DNA损伤严重时参与启动细胞凋亡而防止癌变。

下列叙述错误的是（）A.推测p53基因为抑癌基因B.连续分裂的细胞p53基因表达水平较高C.p53蛋白能使细胞周期停滞在分裂间期D.p53蛋白能参与启动细胞的程序性死亡6.端粒酶由蛋白质和RNA组成，能以自身RNA为模板修复端粒，其活性在正常细胞中被抑制，在肿瘤细胞中被重新激活。

研究芪莲舒痞颗粒（QLSP）对胃炎模型鼠胃黏膜细胞端粒酶活性的影响，结果如图。

注：胃复春是一种主治胃癌前期病变的临床用药。

下列叙述错误．．的是（）A.端粒酶是一种逆转录酶，可被RNA酶彻底降解B.相对正常鼠，胃炎模型鼠的黏膜细胞更易癌变C.随QLSP浓度升高，实验组端粒酶活性逐渐降低D.测定端粒酶活性时，应控制温度、pH等一致7.研究者发现一种单基因遗传病——线粒体解偶联综合征，患者线粒体的氧化功能异常活跃，使他们摄入远超身体所需的营养物质，但体重却很低。

・2・生物学教学2020年（第45卷）第5期P53蛋白的结构与功能及磷酸化修饰的生物学效应研究概述郭瑞"李绍军#'*（1西北农林科技大学创新实验学院杨凌712100；2西北农林科技大学生命科学学院杨凌712100）摘要P53是一个重要的抑癌基因,其表达产物在肿瘤的发生发展中起着非常重要的作用。

本文概述p53蛋白的结构与功能，以及磷酸化修饰的生物学效应。

关键词肿瘤抑制因子蛋白位点修饰p53磷酸化疾病治疗p53蛋白（以下简称&53）发现于猴空泡病毒40（SV40）感染的小鼠细胞中，是人体抑癌基因p53（以下简称p53）编码的一种蛋白质，因其电泳条带出现在预染标记蛋白的53kDa处,故名。

p53被认为是一种重要的肿瘤抑制基因，翻译后修饰（如蛋白磷酸化、泛素化及乙酰化等）是&53功能多样化的重要原因。

&53的磷酸化修饰是其翻译后修饰中最普遍的一种，已经被广泛研究。

1P53的结构和功能1.1p53的结构人源p53位于染色体17&13.1,共包含10个内含子和11个外显子。

其编码的蛋白质p53由393个氨基酸组成，天然状态下以四聚体形式存在，单体之间通过反向！螺旋和反向"折叠相互作用形成二聚体，二聚体借助于平行的螺旋一螺旋接触面形成四聚体。

p53主要包含4个功能结构域：N端转录激活区、中段核心DNA结合区、C端四聚化功能区以及C端非特异结合功能调控区［1］%与许多抑癌基因一样p也以家族形式存在,其家族成员自1997年以来陆续被发现，如p73、P P1等基因［2］%P73基因位于染色体1p36，共包含13个外显子和12个内含子，由Kaghad于1997年在进行SV40转化的非洲绿猴肾纤维样细胞系（COS）细胞cDNA文库杂交筛选时所发现，其在转录激活区、DNA结合区和四聚化功能区分别与p53有29%、63%及38%的相同氨基酸编码序列。

与p53相同,p73也有与鼠双微体2（MDM2）的基因结合序列，目前共发现p73有！、"、#、$和%5种亚型。

P53基因概述及应用实例姓名;赵飞1.P53基因概述1.1 P53基因的发现1979年，在大家都在研究SV40病毒的癌蛋白时，好几个科研小组都无意中分别独立发现了P53蛋白。

当时在伦敦癌症研究所(London Research Institute)工作的David Lane和Lionel Crawford发现，用感染了SV40病毒的动物血清与SV40大T抗原发生免疫沉淀反应时能共沉淀下来一个分子量约为53kDa的宿主细胞蛋白。

另外三个科研小组也都在1979年同时发表文章报道了同样的结论，他们分别是法国的Pierre May科研小组、美国纽约的Robert Carroll科研小组和英国的Alan Smith科研小组。

1.2P53基因的命名在这个基因在发现之初，每一个发现它的实验室分别给这种分子量为53 kDa的蛋白质取了各自的名字，并且使用这些名字发表了很多论文，这样就造成极大的混乱。

它的真正命名是在1983年在英国牛津举办的第一届国际P53蛋白研讨会上，来自各国的代表专门就这个蛋白的命名进行了讨论。

经过一番激烈争论之后，大家一致认为，P53这个名字最为合适，自此被保留下来一直沿用至今。

其实P53这个名字根本就不是一个名字，只是因为这个蛋白在SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳试验中表现出的分子量大约为53 kDa才因此而得名。

后来大家才发现，这个表观分子量其实也只是一个大概的估计，因为该蛋白富含脯氨酸，所以在SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳试验中的迁移率偏慢，表现出来的分子量要比它实际的分子量大。

该蛋白的实际分子量只有43.7 kDa，而小鼠体内P53蛋白的分子量会更小。

1.3P53 基因的功能P53基因是因编码一种分子质量为53 kDa 的蛋白质而得名，是一种抗癌基因。

其表达产物为基因调节蛋白( P53 蛋白) ，当DNA 受到损伤时表达产物急剧增加，可抑制细胞周期进一步运转。

一旦P53 基因发生突变，P53 蛋白失活，细胞分裂失去节制，发生癌变，人类癌症中约有一半是由于该基因发生突变失活。

p53蛋白性质与结构分析刘严木【摘要】p53作为关键肿瘤抑制蛋白参与了50％以上肿瘤的发生,本文对p53基本特性进行了初步地分析,通过分析p53氨基酸组成、疏水性表明p53蛋白具有酸性蛋白质、胶原蛋白、核蛋白、一些RNA结合模体等特征,整体呈现亲水性.利用MEGA软件进行p53系统发育分析,结果表明人p53与日本猕猴,食蟹猴,猕猴的p53亲缘关系高度相近.使用PSORT Ⅱ分析工具对p53亚细胞定位进行预测,表明p53蛋白主要分布在细胞核中.使用PRABI-GERLAND算法对p53二级结构进行预测,结果表明18.07％为α螺旋,18.07％为β折叠,63.87％为无规则卷曲.最后,采用同源建模(比较建模)方法构建了p53蛋白的三级结构,从建模质量评估表明预测结果准确.%p53, as a key tumor suppressor protein, is involved in the occurrence of more than 50 ％ of tumor. This paper makes a preliminary analysis of the basic characteristics of p53 and through the analysis of p53 amino acid composition and hydrophobicity, the results indicate that p53 protein has the feature of acidic protein, collagen, nuclear protein, some RNA binding motifs and it presents hydrophilic as a whole. Using the MEGA software to make the phylogenetic analysis of p53, the results show that it has a close genetic relationship with the p53 of Japanese macaques, crabmonkeys and rhesus monkeys. Using PSORT Ⅱ analysis tool to predict p53 subcellular localization, it showed that p53 protein was mainly distributed in the nucleus. Using the PRABI-GERLAND algorithm to predict p53 secondary structure, the results show that 18.07％ present alpha helix, 18.07％ present beta folding, and 63.87％ present random coil. Finally, thethree-level structure of p53 protein was constructed by homologous modeling (comparative modeling) method, and the prediction results were indicated to be accurate from the modeling quality assessment.【期刊名称】《化工中间体》【年(卷),期】2017(000)007【总页数】3页(P112-114)【关键词】p53蛋白;系统发育分析;亚细胞定位预测;二级结构预测;三级结构预测【作者】刘严木【作者单位】四川师范大学附属中学四川 610000【正文语种】中文【中图分类】Op53基因是迄今为止发现的与人类肿瘤相关性最高的基因之一.自1979年伦敦癌症研究所工作的David Lane和Lionel Crawford,美国普林斯顿大学(Princeton University)的Daniel Linzer和Arnold Levine等研究小组发现p53基因后,对其相关研究一直在持续进行.人们对p53基因的研究经历了癌蛋白抗原,癌基因到抑癌基因的认识转变.p53蛋白的实际分子量只有43.7kDa,因为该蛋白富含脯氨酸,所以在SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳试验中的迁移率偏慢,于SDS凝胶电泳中测得分子量约53kDa.p53蛋白主要通过以下机制来避免癌症发生:(1)当DNA受损失,p53蛋白活化DNA修复蛋白以修复DNA.(2)p53蛋白能抑制细胞周期于G1/S节律点上,检查细胞基因组的完整性,并使DNA修复蛋白有更充足时间修复DNA损伤部位.(3)若细胞DNA损伤,p53蛋白开启细胞凋亡程序,避免细胞不正常增值.突变型p53蛋白使细胞无限生长,与肿瘤发生密切相关.p53与大部分人类肿瘤有关,如肝癌,乳腺癌,膀胱癌,胃癌等.在癌症高发的当今社会,研究p53基因及其基因产物无疑具有重要意义.本研究通过氨基酸组成分析,亚细胞定位预测,p53系统发育分析以及p53的二、三级结构预测对p53蛋白的序列特性与蛋白结果做了初步分析,以期对p53蛋白有更进一步地认识.(1)材料人与其它物种p53蛋白氨基酸序列从uniprot上下载人或其它物种p53蛋白氨基酸序列(FASTA格式),以人p53蛋白序列为例:gt;sp|P04637|P53_HUMAN Cellular tumor antigen p53 OS=Homo sapiens GN=TP53 PE=1 SV=4 MEEPQSDPSVEPPLSQETFSDLWKLLPENNVLSPLPSQAMDDLMLSPD DIEQWFTEDPGP DEAPRMPEAAPPVAPAPAAPTPAAPAPAPSWPLSSSVPSQKTYQGSYG FRLGFLHSGTAK SVTCTYSPALNKMFCQLAKTCPVQLWVDSTPPPGTRVRAMAIYKQSQH MTEVVRRCPHHERCSDSDGLAPPQHLIRVEGNLRVEYLDDRNTFRHSVVVPY EPPEVGSDCTTIHYNYMCNSSCMGGMNRRPILTIITLEDSSGNLLGRNSFEV RVCACPGRDRRTEEENLRKKGEPHHELPPGSTKRALPNNTSSSPQPKKKPLD GEYFTLQIRGRERFEMFRELNEALELKDAQAGKEPG GSRAHSSHLKSKKGQSTSRHKKLMFKTEGPDSD(2)方法①p53氨基酸组成分析利用ProtParam进行p53氨基酸组成分析.ProtParam允许各种物理和化学的一个给定的存储蛋白参数计算Swiss-Prot和TrEMBL或用户输入的蛋白序列.计算参数包括分子量,理论等电点,氨基酸组成,原子组成,消光系数,估计的半衰期,不稳定指数、脂肪总平均指数和亲水性.②系统发育分析(分子进化分析)使用MEGA(版本5.2)软件进行p53系统发育分析.MEGA是一款可以根据所提供的氨基酸序列,分析在物种进化过程中物种的亲缘关系的一种算法,并将结果以进化树的形式呈现,是目前最为常用的系统发育分析软件之一.③亚细胞定位预测利用PSORT II分析工具对p53亚细胞定位进行预测.PSORT II从氨基酸序列预测亚细胞定位.它将动物蛋白质定位于细胞质,细胞骨架,细胞核,细胞膜,内质网,高尔基体,溶酶体,线粒体,等细胞结构.④p53蛋白二级结构预测使用PRABI-GERLAND算法对p53二级结构进行预测.PRABI-GERLAND是一种利用GORIV法进行蛋白质二级结构预测的工具.GORIV法是一种基于信息论和贝叶斯统计学将蛋白质序列当作一连串的信息值来处理的方法,该方法有预测结果准确,运行速度快等优点.⑤p53蛋白三级结构预测进行p53三级结构预测将利用SWISS-MODEL.SWISSMODEL是一个完全自动化的蛋白质结构同源建模服务器,采用同源建模(比较建模)方法构建蛋白质结果.该方法包括:A.搜索与目标蛋白序列相似的模板蛋白;B.BLAST搜索;C.目标序列与模板序列比对;D.ClustalW/X;E.建立骨架(将模板结构叠加起来,找结构保守区域).(1)氨基酸组成分析氨基酸组成分析:占比大于5.0%,即含量高于平均值的有丙氨酸(Ala,A),天冬氨酸(Asp,D),谷氨酸(Glu,E),甘氨酸(Gly,G),赖氨酸(Lys,K),亮氨酸(Leu,L),脯氨酸(Pro,P),精氨酸(Arg,R),丝氨酸(Ser,S),苏氨酸(Thr,T).最高为脯氨酸(Pro,P),占比11.45%,最低为色氨酸(Trp,W),占比1.02%.根据特定高含量氨基酸对应蛋白质的类型,推断该蛋白质具有以下特点:①酸性蛋白质.因为D,E含量较高;②胶原蛋白.因为G含量较高;③核蛋白.因为K,R含量较高;④一些RNA结合模体,因为S,R含量较高;⑤黏蛋白,寡聚糖结合位点,因为S,T含量较高.(2)疏水性分析横轴表示氨基酸位点,纵轴表示疏水性值.蓝色线条表示疏水性参考线,蓝线上方表示疏水,下方表示亲水.据图可知,p53蛋白约有4个疏水性区域,氨基酸呈疏水性对应区域分别约为20-40位,70-90位,110-150位,250-260位.其余均为亲水性区域,其中280-310区间呈现显著的亲水性.总体分析来看,因为p53蛋白多数曲线位于蓝线下方,即p53蛋白总体呈现亲水性.(3)系统发育分析(进化分析)接着,我们想了解p53蛋白在不同物种之间的进化关系是怎样的,为此我们做了p53系统发育分析.最大进化树根据亲缘关系将不同物种进行分类,每个大类下还有相应小类.数值越大表明预测的亲缘关系越可靠.本次的材料选用了家猫(Felis catus)、家犬(Canis lupus familiaris)、马(Equus caballus)、白鲸(Delphinapterus leucas)、牛(Bos taurus)、野猪(Sus scrofa)、树鼩(Tupaia belangeri)、智人(Homo sapiens)、日本猕猴(Macaca fuscata)、食蟹猴(Macaca fascicularis)、猕猴(Macaca mulatta)、灰仓鼠(Cricetulus griseus)、小鼠(Mus musculus)以及大鼠(Rattus norvegicus)的p53蛋白序列.据上图分析,最大进化树一共有11种分类(包括大分类和小分类).其中灰仓鼠,小鼠,大鼠的亲缘关系高度相近.日本猕猴,食蟹猴,猕猴的亲缘关系高度相近.人与日本猕猴,食蟹猴,猕猴的亲缘关系高度相近,推测是因为人是由灵长类动物进化而来所有保留高度的相似性.白鲸,牛,猪的值小于50,证明三者的亲缘关系相距较远.(4)亚细胞定位预测PSORT II部分运行结果显示p53蛋白有91.3%为细胞核,4.3%为细胞骨架,4.3%为囊泡分泌系统.这说明p53蛋白绝大多数在细胞核中,这与多数情况p53与DNA结合从而发挥生物学功能有关.(5)二级结构预测从上述结果可以知晓,p53蛋白18.07%为α螺旋,18.07%为β折叠,63.87%为无规则卷曲.其中无规则卷曲占绝大多数.(6)三级结构预测选用SWISS-MODEL提供的MODEL 01(此模板为p53-DNA结合的三级结构数据),通过同源模建方法对p53蛋白结构进行预测.3D结构如下:从图7可以看出,SWISS-MODEL对p53蛋白的约90-280个氨基酸与模板的相似性较高,从而说明这一预测区间较为准确,300-320区间由于与模板的序列差异较大,从而相对预测准确性偏低.从全局模型质量评估(GMQE)数值来看(值为0.60),说明整体模型预测分析较准确.刘严木(2000-),男,四川师范大学附属中学;研究方向:生物科学.【相关文献】[1]Arnold J. Levine and Moshe Oren. (2009) The first 30 years of p53: growing ever more complex. Nature Reviews Cancer, 9:749-757.[2]李文娟,潘庆杰,李美玉.p53基因及其功能研究进展.生物技术通讯,2014,282-285.[3]贾春平.抑癌基因p53与肿瘤研究的最新进展.生命科学,2008,450-453.[4]The UniProt C: Uniprot: The universal protein knowledgebase. Nucleic acids research 2017,45:D158-D169.[5]Tamura K, Peterson D, Peterson N, Stecher G, Nei M,Kumar S: Mega5: Molecular evolutionary genetics analysis using maximum likelihood, evolutionary distance, and maximum parsimony methods. Molecular biology and evolution 2011,28:2731-2739. [6]Biasini M, Bienert S, Waterhouse A, Arnold K, Studer G, Schmidt T, Kiefer F, Gallo Cassarino T, Bertoni M, Bordoli L, Schwede T: Swiss-model: Modelling protein tertiary and quaternary structure using evolutionary information.Nucleic acids research 2014,42:W252-258.。

B-p53基因敲除小鼠----明星鼠系列之肿瘤疾病研究利器P53基因是迄今发现与人类肿瘤相关性最高的基因。

根据研究显示，人类大约一半的肿瘤发生与p53基因异常有关，因此p53基因的相关功能成为当前肿瘤分子生物学研究的热点。

因此，B-p53基因敲除小鼠成为了研究人类肿瘤的最佳模型鼠。

同时，B-p53基因敲除小鼠也成为了深入研究肿瘤疾病的重要工具。

p53基因介绍p53是一种肿瘤抑制基因。

在所有恶性肿瘤中，50%以上会出现该基因的突变。

由这种基因编码的蛋白质是一种转录因子其控制着细胞周期的启动。

许多有关细胞健康的信号向p53蛋白发送。

关于是否开始细胞分裂就由这个蛋白决定。

如果这个细胞受损，又不能得到修复，则p53蛋白将参与启动过程，使这个细胞在细胞凋亡中死去。

正常p53基因的生物功能好似“基因组卫士”，在G1期检查DNA损伤点，监视基因组的完整性。

如有损伤，p53蛋白阻止DNA复制，以提供足够的时间使损伤DNA修复；如果修复失败，p53蛋白则引发细胞凋亡；如果p53基因的两个拷贝都发生了突变，对细胞的增殖失去控制，导致细胞癌变。

B-p53基因敲除小鼠发展前景目前，我国很多实验室所用的p53基因敲除小鼠多来自国外实验室，仅限于科研交流，不能用来进行商业性的药理毒理及致癌实验。

由于这些小鼠在不同实验室里与不同遗传背景的小鼠进行交配繁殖之后，遗传背景非常复杂且不稳定，造成实验结果重复性差，不同实验室得到的结果不能进行平行比较，所以不能作为国家致癌实验检定标准。

而致癌性实验却是药物非临床安全性评价的重要内容。

所以，B-p53基因敲除小鼠可以更好的解决p53基因敲除模式小鼠品系不纯，遗传背景复杂的问题，利用C57BL/6近交系遗传背景的小鼠胚胎干细胞制备B-p53基因敲除小鼠，并成功得到F1代小鼠，经过种群扩增后，B-p53基因敲除小鼠遗传背景清晰，可以做为标准动物用于致癌实验，改变国家药物致癌实验的动物模型不统一的局面。

P53基因的研究进展摘要：P53作为肿瘤抑制物的作用早已被发现，而他对于许多其他疾病和正常生活的影响最近才被提及。

这些对于P53新兴的一系列作用是通过很多机制表现出来的。

通过这些机制，P53可以发挥作用。

控制P53转录活性是决定P53哪种反应被激活的关键。

激活或者抑制P53基因的药物的研发值得探究。

关键词：P53 肿瘤抑制物简介：P53是一种众所周知的肿瘤抑制物，但是这些年来，越来越多的关于P53的新的作用被报道出来。

这些报道包括P53对于新陈代谢，生殖，还有分化和发育的许多方面的调节。

人们正开始对于P53的部分功能和P53被调节的机制进行初级理解。

很明显，例如，P53是一种转录因子，可以调节一系列不同基因的表达（这些基因编码蛋白质和microRNA）而这些基因的表达会介导P53作出反应。

综述：什么是P53因编码一种分子质量为53 kDa的蛋白质而得名，是一种抗癌基因。

其表达产物为基因调节蛋白（P53蛋白），当DNA受到损伤时表达产物急剧增加，可抑制细胞周期进一步运转。

一旦p53基因发生突变，P53蛋白失活，细胞分裂失去节制，发生癌变，人类癌症中约有一半是由于该基因发生突变失活。

P53作为肿瘤抑制物P53对于抑胞增殖有着强烈的抑制作用，。

它阻断细胞周期进程和促进细胞凋亡死亡。

这对肿瘤干细胞的生长提供了明确的机制而且抑制了肿瘤的生长，P53的活化可以由许多种压力信号引起，这些信号可以在恶性进程中遇到。

这些恶性过程包括具有遗传毒性的损伤，癌基因激活，失去正常细胞屏蔽和缺氧等。

这些恶性过程导致一种使P53的生长抑制功能显现的模式。

这种模式通常只在新生的癌细胞中出现。

然而现在形式复杂多了。

我们现在发现一些P53的功能并不是通过急性压力修复活化而且P53可以促进那些看起来完全相反的结果。

尽管他们中的任何一个都对肿瘤抑制产生重要作用。

P53可以作为肿瘤抑制物的原因1、P53可以杀死癌细胞P53可以杀死癌细胞的概念是由P53可以选择性的导致肿瘤细胞的凋亡，同时导致可逆的细胞周期停滞延伸而来的。

第24课时生物的遗传和变异(一)▶基础巩固1.(2022阳泉)科学家发现,除去p53基因的小鼠会在发育早期形成肿瘤。

这一事实说明( B )A.基因就是性状B.基因控制性状C.环境影响性状D.p53基因可诱发肿瘤形成解析:p53是一个拥有广泛而强大功能的抑癌基因,除去p53基因的小鼠会在发育早期形成肿瘤,这一事实说明基因控制性状。

2.(2022凉山)如图所示,与遗传有关的结构示意图叙述正确的是( A )①细胞核②染色体③DNA ④基因A.③DNA分子呈双螺旋结构,是主要的遗传物质B.②染色体在体细胞中成对存在,③DNA分子成单存在C.正常人体的所有细胞中,②染色体的数量都为23对D.④基因的数目和③DNA分子的数目相等解析:体细胞中的②染色体是成对存在的,③DNA也成对存在,B错误;正常人的体细胞中染色体的数量为23对,生殖细胞中有23条染色体,C错误;DNA分子中含有多个④基因,D错误。

3.(2022苏州)某细胞中有两对基因A和a、B和b,分别位于两对染色体上,并且这两对基因分别位于成对的两条染色体的相同位置。

下列有关这两对基因在染色体上位置的图解,正确的是( C )解析:等位基因一般指位于一对同源染色体的相同位置上控制着相对性状的一对基因。

在体细胞中,染色体成对存在,基因成对存在。

成对的基因在成对的染色体上,且在染色体的相同位置。

C项中A与a、B 与b分别在同一对染色体上,而且位置相同,因此,C正确。

4.(2022乐山)下列关于生物性状的表述,正确的是( C )A.生物的性状都是肉眼可以观察到的特征B.生物体所表现出来的性状都是显性性状C.男女性别也属于人的性状,由遗传物质决定D.生物体的性状相同,基因组成一定相同解析:并不是所有的性状都是肉眼可以观察到的,如血型,A错误;生物体所表现出来的性状有显性性状,也有隐性性状,B错误;生物体的性状相同,基因组成不一定相同,D错误。

5.(2022德阳)生物有多种多样的性状,下列性状中属于相对性状的是( C )A.人的身高与体重B.猫的白毛和蓝眼C.兔的黑毛和白毛D.棉花的细绒和长绒解析:人的身高与体重、猫的白毛和蓝眼、棉花的细绒和长绒,都是两种性状,不属于相对性状;兔的黑毛和白毛是同种生物同一性状的不同表现形式,属于相对性状。