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生理学实验报告-蛙心灌流————————————————————————————————作者: ————————————————————————————————日期:ﻩ蛙类离体心脏灌流一、【目的要求】1、学习离体蛙心灌流法。
2、观察Nａ＋,K+,Ｃa2+及肾上腺素(Adｒ),乙酰胆碱（ＡCｈ)，乳酸对离体心脏活动的影响。
二、【原理】将离体蛙心（失去神经支配的蛙心）保持在适宜的环境中，在一定的时间内仍然能够保持节律性收缩,心脏正常的节律性活动需要一个适宜的理化环境，离体心脏也是如此，离体心脏脱离了机体的神经支配和全身体液因素的直接影响，可以通过改变灌流液的某些成分,观察其对心脏活动的作用。
心肌细胞的自律性、兴奋性、传导性及收缩性，都与钠、钾及钙等离子有关。
外源性给予去甲肾上腺素或乙酰胆碱可产生类似心交感神经或迷走神经兴奋时对心脏的作用。
三、【实验仪器】青蛙、常用手术器械、蛙板（或蜡盘)、蛙心夹、计算机采集系统、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿(或小烧杯)、棉线、任氏液。
套管夹、0．６5％ＮaＣl、２％ＣａＣl2、1%KCl、１：1０000肾上腺素、1：10000乙酰肌碱、3%乳酸。
四、【方法与步骤】１、斯氏蛙心插管法(１)一只青蛙,双毁髓后背位置于蜡盘中,按前面的方法暴露心脏。
仔细识别心脏周围的大血管(见右图)。
在左主动脉下方穿一线，于动脉圆锥处结扎(动物个体小时,结扎位置可靠上些)。
再从左右两主动脉下方穿一线，并打一活结备用。
左手提起主动脉上的结扎线,右手用眼科剪在结扎线下方、沿向心方向将动脉上壁剪一斜口。
选择大小适宜的蛙心套管，然后将盛有少量(套管内2～3cm高度)任氏液(内加入一滴肝素溶液)的斯氏蛙心套管，山开口处插入动脉圆锥(见右图)。
当套管尖端到达动脉圆锥基部时,应将套管稍稍后退,使尖端向动脉圆锥的背部后下方及心尖方向推进,经主动脉瓣插入心室腔内（于心室收缩时插入,但不可插得过深,以免心室壁堵住套管下口)。
第1篇一、实验目的1. 学习离体蛙心灌流的方法。
2. 观察理化因素对蛙心活动的影响。
3. 探究心脏节律性活动的生理机制。
二、实验原理蛙心灌流实验是一种常用的生物学实验方法，通过将蛙心取出并置于人工灌流液中，使其在一定时间内保持节律性收缩。
实验中，通过改变灌流液的成分，可以观察不同理化因素对心脏活动的影响，从而了解心脏生理活动的调节机制。
蛙心无营养性血管，离体后采用人工灌流的方法，仍可保持其新陈代谢，心脏仍能有节律的自动收缩、舒张，并维持较长时间。
心肌细胞的自律性、兴奋性、传导性及收缩性，都与钠、钾及钙等离子有关。
外源性给予去甲肾上腺素或乙酰胆碱可产生类似心交感神经或迷走神经兴奋时对心脏的作用。
三、实验材料与仪器1. 实验动物：青蛙2. 实验器材：蛙心夹、常用手术器械、蛙板（或蜡盘）、任氏液、0.65%NaCl、2%CaCl2、1%KCl、1：10000肾上腺素、1：10000乙酰胆碱、3%乳酸、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿（或小烧杯）、棉线、套管夹。
3. 生理信号采集系统、计算机。
四、实验方法与步骤1. 暴露蛙心：取一只青蛙，双毁髓后背位置于蛙板上，按前面的方法暴露心脏。
仔细识别心脏周围的大血管，在左主动脉下方穿一线，于动脉圆锥处结扎。
2. 插管：用斯氏蛙心插管法，将蛙心夹插入心脏，并通过蛙心夹上的管道与灌流系统连接。
3. 灌流：将蛙心置于任氏液中，开始灌流，调节灌流速度和压力，使心脏保持节律性收缩。
4. 观察与记录：观察心脏的收缩、舒张情况，记录心率和心搏曲线。
5. 改变灌流液成分：分别用0.65%NaCl、2%CaCl2、1%KCl、1：10000肾上腺素、1：10000乙酰胆碱、3%乳酸等灌流液替换任氏液，观察心脏活动的变化。
6. 分析与讨论：分析不同灌流液对心脏活动的影响，讨论心脏生理活动的调节机制。
五、实验结果与分析1. 在正常任氏液中，心脏保持节律性收缩，心率为60-100次/分钟。
第1篇一、实验目的1. 观察离体蛙心的生理特性，了解心脏在离体条件下的收缩和舒张规律。
2. 探讨神经递质、激素等对离体蛙心功能的影响。
3. 掌握离体蛙心灌流实验的操作方法。
二、实验原理离体蛙心灌流实验是研究心脏生理学的重要方法之一。
在实验过程中，通过灌流装置向蛙心提供氧气和营养物质，同时可以观察心脏的收缩和舒张情况。
实验中，可以通过改变灌流液成分、温度、pH值等条件，观察心脏功能的改变，从而了解心脏生理特性及影响因素。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：蟾蜍、蛙心套管、蛙心夹、蛙板、蛙类手术器械、二道仪、任氏液、氯化钙、肾上腺素、乙酰胆碱等。
2. 实验仪器：手术显微镜、蛙心灌流装置、注射器、秒表、滴管等。
四、实验方法与步骤1. 准备工作：将蟾蜍置于蛙板上，用手术剪剪开胸腔，暴露心脏。
用蛙心夹固定心脏，并连接灌流装置。
2. 灌流液准备：配制任氏液、氯化钙溶液、肾上腺素溶液、乙酰胆碱溶液等。
3. 实验分组：将实验分为对照组、氯化钙组、肾上腺素组、乙酰胆碱组。
4. 实验步骤：a. 对照组：灌流任氏液，观察心脏的收缩和舒张情况。
b. 氯化钙组：灌流氯化钙溶液，观察心脏功能的改变。
c. 肾上腺素组：灌流肾上腺素溶液，观察心脏功能的改变。
d. 乙酰胆碱组：灌流乙酰胆碱溶液，观察心脏功能的改变。
5. 记录数据：观察心脏的收缩和舒张频率、收缩幅度等，并记录数据。
五、实验结果与分析1. 对照组：心脏呈现规律的收缩和舒张，收缩幅度适中，频率约为60次/分钟。
2. 氯化钙组：心脏收缩幅度明显增大，频率加快，收缩时间延长，舒张时间缩短。
3. 肾上腺素组：心脏收缩幅度增大，频率加快，收缩时间延长，舒张时间缩短。
4. 乙酰胆碱组：心脏收缩幅度减小，频率减慢，收缩时间缩短，舒张时间延长。
六、实验结论1. 离体蛙心在灌流条件下可以维持一定时间的收缩和舒张功能。
2. 氯化钙和肾上腺素可以增强离体蛙心的收缩功能，使收缩幅度增大、频率加快。
第1篇一、实验目的1. 学习蛙的解剖结构，掌握青蛙坐骨神经-腓肠肌标本的制备方法。
2. 了解神经和肌肉的兴奋、兴奋性，刺激与反应的规律和肌肉收缩的特征。
3. 掌握蛙心灌流实验方法，观察心脏活动的影响因素。
二、实验原理1. 蛙的坐骨神经-腓肠肌标本制备：蛙的坐骨神经和腓肠肌在生理条件下具有兴奋性和传导性，通过制备坐骨神经-腓肠肌标本，可以观察神经和肌肉的兴奋、兴奋性，刺激与反应的规律和肌肉收缩的特征。
2. 蛙心灌流实验：离体心脏灌流实验是研究心脏生理功能的重要方法，通过改变灌流液的成分，可以观察其对心脏活动的影响，了解心脏的正常节律性活动。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：青蛙、任氏液、生理盐水、剪刀、手术剪、眼科镊、金属探针、玻璃分针、蛙板、蛙钉、细线、培养皿、滴管、电子刺激器、蛙心夹、计算机采集系统、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、套管夹、65%NaCl、2%CaCl2、1%KCl、1:10000肾上腺素、1:10000乙酰胆碱、3%乳酸。
2. 实验仪器：蛙类解剖台、显微镜、电生理实验系统、刺激器、数据采集系统、蛙心灌流装置。
四、实验方法与步骤1. 蛙的坐骨神经-腓肠肌标本制备：（1）取青蛙一只，用生理盐水冲洗干净，左手握住蛙，使其背部向上。
（2）用眼科镊和剪刀在青蛙的坐骨神经和腓肠肌处剪开，分离出坐骨神经和腓肠肌。
（3）将坐骨神经和腓肠肌置于任氏液中，用玻璃分针轻轻拨动腓肠肌，观察肌肉收缩情况。
2. 蛙心灌流实验：（1）将青蛙的左心耳和左肺静脉用细线结扎，然后剪断，使心脏与体循环分离。
（2）将心脏置于蛙心灌流装置中，连接计算机采集系统和刺激器。
（3）将灌流液（任氏液）通过灌流装置注入心脏，观察心脏搏动情况。
（4）改变灌流液的成分，如加入肾上腺素、乙酰胆碱、乳酸等，观察心脏活动的影响。
五、实验结果与分析1. 蛙的坐骨神经-腓肠肌标本制备成功，腓肠肌在刺激下产生明显的收缩反应。
2. 蛙心灌流实验成功，心脏在灌流液的作用下保持节律性搏动。
蛙心灌流实验结果分析一、蛙心灌流：1、用0．65％Nacl溶液灌注蛙心出现心跳减弱心肌的收缩活动是由Ca2+排触发的，由于心肌细胞的肌浆网不发达，故心肌收缩的强弱与细胞外Ca2+浓度呈正比。
用0．65％NaCL溶液灌注心，由于灌注液中缺乏Ca2+，以致心肌细胞动作电位二期内流Ca2+减少，胞浆Ca2+浓度减少，心肌的收缩活动也随之减弱。
如果长时间用0．65％NaCL溶液灌流蛙心，心脏最终会停止收缩，但心肌仍能产生动作电位（即产生兴奋），这种现象称为兴奋一收缩脱耦联，是心肌细胞内缺少Ca2+后的表现。
2、用高K+任氏液灌注蛙心时，心跳减弱用高K+任氏液灌注蛙心时，心跳明显减弱，甚至出现心脏停止于舒张状态的现象。
因为细胞外K+浓度增高时K+与Ca2+有竞争性拮抗作用，K+可抑制细胞膜对Ca2+的转运，使进人细胞内Ca2+减少，心肌的兴奋一收缩耦联过程减弱心肌收缩力降低。
当细胞外K+浓度显著增高时，膜内外的K+浓度梯度减小，静息电位的绝对值过度减少，Na+通道失活，心肌的兴奋性完全丧失，心肌不能兴奋和收缩，停止于舒张状态。
3、滴加2％CaCL2后，离体蛙心收缩力增强用高Ca2+任氏液灌注蛙心，可见蛙心收缩力增强，但舒张不完全，以致收缩基线上移。
在Ca2+浓度较高的情况下，心脏会停止在收缩状态。
这种现象称为“钙僵”。
心肌的舒缩活动与心肌肌浆中Ca2+浓度高低有关。
当Ca2+浓度升高至10-5M水平时，作为钙受体的肌钙蛋白结合了足够的Ca2+，这就引起肌钙蛋白分子构型的改变，从而触发肌丝滑行，肌纤维收缩。
当肌浆中Ca2+浓度降至10-7时，Ca2 任氏液灌注蛙心,使得肌浆中Ca2+浓度不断升高，Ca2+与肌钙蛋白结合数量不断增加，甚至达到只结合而不解离的程度，于时心肌将持续收缩，因而出现“钙僵”。
4、滴加肾上腺素后，蛙心收缩增强向蛙心滴加肾上腺素后，可见蛙心收缩增强，心脏舒张完全，其机理为肾上腺素与心肌细胞膜的β受体结合，提高心肌细胞和肌浆网膜Ca2+通透性导致肌浆中Ca2+浓度增高，使心肌改缩增强。
一、实验目的1. 学习离体蛙心灌流的方法。
2. 观察理化因素对蛙心活动的影响，如离子浓度、药物等。
3. 掌握实验记录和分析方法。
二、实验原理蛙心灌流实验是生理学中常用的一种实验方法，通过将蛙心置于人工灌流系统中，模拟心脏在体内的生理环境，研究各种因素对心脏活动的影响。
蛙心无营养性血管，离体后采用人工灌流的方法，仍可保持其新陈代谢，心脏仍能有节律的自动收缩、舒张，并维持较长时间。
三、实验材料1. 实验动物：蟾蜍2. 实验器材：蛙心夹、常用手术器械、蛙板（或蜡盘）、蛙心夹、计算机采集系统、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿（或小烧杯）、棉线、任氏液、0.65%NaCl、2%CaCl2、1%KCl、1:10000肾上腺素、1:10000乙酰胆碱、3%乳酸。
四、实验方法与步骤1. 蛙心制备：- 使用手术刀将蛙麻醉，然后破坏蛙的中枢神经系统。
- 暴露心脏，固定蛙心，将动脉圆锥下方穿一线，用于连接灌流装置。
- 游离心脏，将心脏的主动脉和肺动脉分别插入蛙心夹。
2. 连接实验装置：- 将蛙心夹固定在支架上，连接张力传感器。
- 将灌流液（任氏液）置于培养皿中，通过滴管控制灌流液的流速。
- 将灌流液通过动脉圆锥下方的线，连接到蛙心夹的主动脉。
3. 观察记录：- 观察蛙心的收缩和舒张情况，记录心脏跳动频率和幅度。
- 分别进行以下实验：- 以0.65%NaCl溶液替换任氏液，观察心脏跳动频率和幅度变化。
- 在灌流液中加入2%CaCl2（50ul）溶液，观察心脏跳动频率和幅度变化。
- 在灌流液中加入1%KCl（50ul）溶液，观察心脏跳动频率和幅度变化。
- 在灌流液中加入1:10000肾上腺素（50ul）溶液，观察心脏跳动频率和幅度变化。
- 在灌流液中加入1:10000乙酰胆碱（50ul）溶液，观察心脏跳动频率和幅度变化。
4. 数据分析：- 对实验数据进行统计分析，比较不同处理组之间的差异。
五、实验结果与分析1. 正常蛙心收缩活动：- 在任氏液中，蛙心以正常节律收缩和舒张，跳动频率和幅度适中。
一、实验目的1. 学习离体器官（蛙心）灌流的方法。
2. 观察理化因素对蛙心活动的影响。
3. 掌握实验操作技巧，提高实验技能。
二、实验原理离体蛙心灌流实验是生理学实验中的一个重要实验，通过人工灌流的方法，使离体蛙心在适宜的生理条件下保持正常节律性收缩和舒张。
实验原理如下：1. 蛙心无营养性血管，离体后采用人工灌流的方法，仍可保持其新陈代谢，心脏仍能有节律的自动收缩、舒张，并维持较长时间。
2. 心肌的营养是通过心脏内膜液体的直接渗透而得。
3. 通过改变灌流液中的离子浓度、pH值等理化因素，可以观察蛙心活动的变化，了解理化因素对心脏活动的影响。
三、实验对象与用品1. 实验对象：蟾蜍2. 实验用品：斯氏蛙心套管、蛙心夹、蛙板、蛙类手术器械、二道仪、任氏液、长滴管、铁支架、生理盐水、KCl溶液、CaCl2溶液、肾上腺素、乙酰胆碱等。
四、实验方法与步骤1. 实验准备：将蟾蜍仰卧固定于蛙板上，用剪刀剪开胸壁，暴露心脏。
用蛙心夹夹住蛙心尖部，固定在蛙板上。
2. 动脉插管：在主动脉分支下预埋一条棉线，结扎主动脉左支，剪一向心斜切口，插入斯氏蛙心套管，送入动脉球。
3. 连接实验装置：将蛙心套管与二道仪相连，记录蛙心活动。
4. 灌流液准备：配制正常灌流液（任氏液）和实验灌流液（分别含有不同离子浓度的生理盐水、KCl溶液、CaCl2溶液、肾上腺素、乙酰胆碱等）。
5. 实验操作：a. 将蛙心置于正常灌流液中，观察蛙心活动，记录心率、收缩幅度等指标。
b. 分别将蛙心置于不同实验灌流液中，观察蛙心活动的变化，记录心率、收缩幅度等指标。
c. 对比分析不同灌流液对蛙心活动的影响。
五、实验结果与分析1. 正常灌流液条件下，蛙心以正常节律收缩和舒张，心率适中，收缩幅度适中。
2. 在0.65%NaCl溶液替换任氏液后，蛙心收缩幅度稍微减小，收缩力稍微减弱。
分析原因：相当于细胞外环境中缺乏Ca2+，动作电位2期Ca2+内流减少，胞浆中Ca2+减少，心肌收缩力降低。
蛙类离体心脏灌流一、【目的要求】1、学习离体蛙心灌流法。
2、观察Na+,K+,Ca2+及肾上腺素(Adr),乙酰胆碱(ACh),乳酸对离体心脏活动的影响。
二、【原理】将离体蛙心（失去神经支配的蛙心）保持在适宜的环境中，在一定的时间内仍然能够保持节律性收缩，心脏正常的节律性活动需要一个适宜的理化环境，离体心脏也是如此，离体心脏脱离了机体的神经支配和全身体液因素的直接影响，可以通过改变灌流液的某些成分，观察其对心脏活动的作用。
心肌细胞的自律性、兴奋性、传导性及收缩性，都与钠、钾及钙等离子有关。
外源性给予去甲肾上腺素或乙酰胆碱可产生类似心交感神经或迷走神经兴奋时对心脏的作用。
三、【实验仪器】青蛙、常用手术器械、蛙板(或蜡盘)、蛙心夹、计算机采集系统、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿(或小烧杯)、棉线、任氏液。
套管夹、0．65％NaCl、2％CaCl2、1％KCl、1：10000肾上腺素、1：10000乙酰肌碱、3%乳酸。
四、【方法与步骤】1、斯氏蛙心插管法（1）一只青蛙，双毁髓后背位置于蜡盘中，按前面的方法暴露心脏。
仔细识别心脏周围的大血管(见右图)。
在左主动脉下方穿一线，于动脉圆锥处结扎(动物个体小时，结扎位置可靠上些)。
再从左右两主动脉下方穿一线，并打一活结备用。
左手提起主动脉上的结扎线，右手用眼科剪在结扎线下方、沿向心方向将动脉上壁剪一斜口。
选择大小适宜的蛙心套管，然后将盛有少量(套管内2～3 cm高度)任氏液(内加入一滴肝素溶液)的斯氏蛙心套管，山开口处插入动脉圆锥(见右图)。
当套管尖端到达动脉圆锥基部时，应将套管稍稍后退，使尖端向动脉圆锥的背部后下方及心尖方向推进，经主动脉瓣插入心室腔内(于心室收缩时插入，但不可插得过深，以免心室壁堵住套管下口)。
此时可见套管中血液冲人套管，并使液面随心脏搏动而亡下移动，表明操作成功(否则需退回并重新插入)。
用滴管吸去套管中的血液，更换新鲜任氏液。
一、实验目的1. 学习离体蛙心灌流的方法。
2. 观察理化因素对蛙心活动的影响。
3. 掌握实验操作技巧，提高实验技能。
二、实验原理蛙心灌流实验是研究心脏生理功能的一种常用方法。
在实验中，通过离体蛙心灌流装置，将蛙心置于人工灌流液中，模拟心脏在体内的生理环境，观察和分析不同理化因素对心脏活动的影响。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：青蛙、任氏液、0.65%NaCl溶液、2%CaCl2溶液、1%KCl溶液、1:10000肾上腺素溶液、1:10000乙酰胆碱溶液、3%乳酸溶液。
2. 实验仪器：手术器械、蛙板、蛙心夹、计算机采集系统、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿、棉线、套管夹。
四、实验方法与步骤1. 制备蛙心标本：将青蛙进行双毁髓处理后，置于蛙板上，暴露心脏。
在左主动脉下方穿一线，于动脉圆锥处结扎。
游离心脏，用蛙心夹固定于支架上。
2. 连接实验装置：将蛙心标本与张力传感器连接，张力传感器连接计算机采集系统。
3. 灌流液准备：将任氏液、0.65%NaCl溶液、2%CaCl2溶液、1%KCl溶液、1:10000肾上腺素溶液、1:10000乙酰胆碱溶液、3%乳酸溶液分别装入培养皿中。
4. 观察不同灌流液对蛙心活动的影响：a. 以任氏液作为正常对照组，观察蛙心收缩活动。
b. 将灌流液更换为0.65%NaCl溶液，观察蛙心收缩活动变化。
c. 将灌流液更换为2%CaCl2溶液，观察蛙心收缩活动变化。
d. 将灌流液更换为1%KCl溶液，观察蛙心收缩活动变化。
e. 将灌流液更换为1:10000肾上腺素溶液，观察蛙心收缩活动变化。
f. 将灌流液更换为1:10000乙酰胆碱溶液，观察蛙心收缩活动变化。
g. 将灌流液更换为3%乳酸溶液，观察蛙心收缩活动变化。
五、实验结果与分析1. 任氏液灌流：蛙心收缩活动正常，表现为规律性的收缩和舒张。
2. 0.65%NaCl溶液灌流：蛙心收缩幅度稍微减小，舒张幅度稍微减弱，表现为细胞外环境中缺乏Ca2+，动作电位2期Ca2+内流减少，胞浆中Ca2+减少，心肌收缩力降低。
蛙心灌流实验报告蛙心灌流实验报告引言：蛙心灌流实验是一种常用的生物学实验方法，通过将溶液注入蛙心，观察其对心脏功能的影响，以研究心血管系统的生理和病理变化。
本实验旨在探究不同溶液对蛙心的影响，并从中得出相关结论。
实验材料和方法：1. 实验材料：蛙心、生理盐水、咖啡因溶液、酒精溶液、糖水溶液、酸性溶液。
2. 实验方法：将蛙心取出，用生理盐水清洗后，分别将不同溶液注入蛙心，并记录下观察到的变化。
实验结果与讨论：1. 生理盐水组：将生理盐水注入蛙心后，观察到心脏跳动平稳，无明显变化。
这表明生理盐水对蛙心的影响较小，不会引起明显的生理变化。
2. 咖啡因溶液组：将咖啡因溶液注入蛙心后，观察到心脏跳动加快，并出现明显的兴奋状态。
咖啡因具有兴奋中枢神经系统和心血管系统的作用，因此可以加快心脏跳动。
3. 酒精溶液组：将酒精溶液注入蛙心后，观察到心脏跳动减慢，并出现明显的抑制状态。
酒精具有抑制中枢神经系统和心血管系统的作用，因此可以减慢心脏跳动。
4. 糖水溶液组：将糖水溶液注入蛙心后，观察到心脏跳动加快，并出现明显的兴奋状态。
糖水中的葡萄糖可以提供能量，激活心脏细胞，从而加快心脏跳动。
5. 酸性溶液组：将酸性溶液注入蛙心后，观察到心脏跳动减慢，并出现明显的抑制状态。
酸性溶液会改变细胞内外的酸碱平衡，影响心脏细胞的正常功能，从而减慢心脏跳动。
结论：通过以上实验结果可以得出以下结论：1. 咖啡因具有兴奋心脏的作用，可以加快心脏跳动。
2. 酒精具有抑制心脏的作用，可以减慢心脏跳动。
3. 糖水中的葡萄糖可以提供能量，激活心脏细胞，从而加快心脏跳动。
4. 酸性溶液会改变细胞内外的酸碱平衡，影响心脏细胞的正常功能，从而减慢心脏跳动。
5. 生理盐水对蛙心的影响较小，不会引起明显的生理变化。
实验的局限性：1. 本实验仅使用了蛙心作为研究对象，结果可能不具有普遍性。
2. 实验中只考虑了溶液对心脏跳动的影响，未涉及其他心血管系统的参数。
蛙心灌流实验报告实验报告：蛙心灌流实验实验目的：1. 了解蛙的心脏解剖结构及其生理特性；2. 掌握蛙心脏灌流的技术操作方法；3. 通过观察和记录实验结果，研究蛙心脏的生理功能。
实验原理：蛙心脏是一种三心室的心脏，左、右心房和右心室之间没有明显的分隔。
在正常情况下，蛙的心脏是按照一定的顺序进行收缩和舒张，完成心脏循环。
通过将生理盐水灌入蛙的心腔，可以模拟蛙的心脏循环过程，使心脏继续收缩和舒张。
实验材料：蛙、生理盐水、手术刀、缝合线、生理盐水注射器。
实验步骤：1. 用手术刀在蛙的腹部切开一小块皮肤，暴露心脏；2. 用手术刀小心地在蛙的心脏下切开一个小孔，用生理盐水注射器将生理盐水注入腔内；3. 观察心脏的收缩和舒张过程，并通过观察流入和流出的生理盐水量来评估心脏的功能；4. 实验结束后，用缝合线将心脏切开的部位缝合，然后将蛙恢复到原来的容器中。
实验结果：在实验过程中，我们观察到蛙心脏在收缩和舒张过程中有规律地推动生理盐水的流动。
正常情况下，心脏的收缩和舒张过程应该是有序的，流入和流出的生理盐水量应该是相等的。
实验结果显示，蛙心脏收缩和舒张过程正常，流入和流出的生理盐水量基本相等。
实验讨论：蛙心灌流实验是一种常用的生理实验方法，通过观察和记录心脏的生理功能，可以研究心脏的结构和功能。
实验中，我们灌流生理盐水来模拟心脏循环过程，这是比较接近真实情况的实验方法之一。
实验结果显示，蛙心脏有较好的收缩和舒张功能，流入和流出的生理盐水量相等，说明心脏的功能正常。
这与虽然虫是体型很小的生物，但它们的心脏结构和功能已经与人的心脏非常相似。
因此，蛙心灌流实验可以作为心脏生理学研究的重要工具之一。
总结：通过蛙心灌流实验，我们可以更深入地了解和研究心脏的结构和功能。
实验过程需要小心谨慎地操作，以确保实验的可靠性和准确性。
通过观察和记录实验结果，我们可以评估和分析心脏的生理功能，为进一步研究心脏疾病提供参考。
一、实验目的1. 学习离体蛙心灌流的方法。
2. 观察理化因素对蛙心活动的影响。
3. 掌握心脏生理学基本知识，提高实验操作技能。
二、实验原理蛙心灌流实验是一种常用的生物学实验方法，通过将蛙心取离体后，采用人工灌流的方法，模拟心脏在体内的血液供应，观察灌流液中理化因素对心脏活动的影响。
蛙心灌流实验中，常用的灌流液为任氏液，其中含有与心脏内环境相似的离子成分，如Na+、K+、Ca2+等。
改变灌流液中这些离子的浓度，可以观察到心脏活动的变化。
三、实验材料与方法1. 实验材料：蟾蜍、任氏液、生理盐水、CaCl2、KCl、注射器、灌流管、蛙心夹、显微镜等。
2. 实验方法：（1）将蟾蜍处死，剥皮，暴露心脏，用蛙心夹固定心脏。
（2）将心脏的动脉插管，连接灌流管，并调整灌流速度。
（3）用生理盐水冲洗灌流管，使灌流液充满管内。
（4）观察心脏在任氏液中的正常活动，记录心率、振幅等指标。
（5）分别改变灌流液中Na+、K+、Ca2+的浓度，观察心脏活动的变化，记录心率、振幅等指标。
（6）对实验结果进行分析和讨论。
四、实验结果与分析1. 正常蛙心在任氏液中的活动：心率适中，振幅适中，处于与内环境相似的任氏液中，蛙心以正常节律收缩和舒张。
2. 改变灌流液中Na+浓度：当灌流液中Na+浓度降低时，心率减慢，振幅减小；当灌流液中Na+浓度升高时，心率加快，振幅增大。
3. 改变灌流液中K+浓度：当灌流液中K+浓度升高时，心率加快，振幅增大；当灌流液中K+浓度降低时，心率减慢，振幅减小。
4. 改变灌流液中Ca2+浓度：当灌流液中Ca2+浓度升高时，心率加快，振幅增大；当灌流液中Ca2+浓度降低时，心率减慢，振幅减小。
五、结论与展望1. 结论：通过本实验，我们掌握了离体蛙心灌流的方法，观察到理化因素对蛙心活动的影响，进一步了解了心脏生理学的基本知识。
2. 展望：本实验为后续心脏生理学实验奠定了基础。
在今后的实验中，我们可以进一步研究其他因素对心脏活动的影响，如pH值、温度等，以深入了解心脏生理学的基本原理。
生理学实验报告-蛙心灌流-标准化文件发布号：（9456-EUATWK-MWUB-WUNN-INNUL-DDQTY-KII实验名称：蛙类离体心脏灌流课程名称：生理学实验指导教师：龙天澄张碧鱼陈笑霞实验人：叶永锋 08344031学院：海洋学院实验时间： 2009年12月09日一、【目的要求】1、学习斯氏离体蛙心灌流法。
2、了解心肌的生理特性。
3、观察Na+,K+,Ca2+及肾上腺素(Adr),乙酰胆碱(ACh)等对离体心脏活动的影响。
二、【原理】将离体蛙心（失去神经支配的蛙心）保持在适宜的环境中，在一定的时间内仍然能够保持节律性收缩，心脏正常的节律性活动需要一个适宜的理化环境，离体心脏也是如此，离体心脏脱离了机体的神经支配和全身体液因素的直接影响，可以通过改变灌流液的某些成分，观察其对心脏活动的作用。
心肌细胞的自律性、兴奋性、传导性及收缩性，都与钠、钾及钙等离子有关。
血钾浓度过高时（高于7.9mmol/L），心脏兴奋性、自律性、传导性及收缩性都下降，表现为收缩力减弱、心动过缓和传导阻滞，严重时心脏可停搏于舒张期。
血钙浓度升高时，心脏收缩力增强，过高可使心室停搏于收缩期。
血钙浓度降低，心肌收缩力减弱。
血中钠离子浓度的轻微变化，对心肌影响不明显，只有发生明显变化时，才会影响心肌的生理特性。
肾上腺素可使心率加快、传导加快及心肌收缩力增强，乙酰胆碱则与肾上腺素的作用相反。
三、【实验仪器】青蛙、常用手术器械、蛙板(或蜡盘)、蛙心夹、计算机采集系统、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿(或小烧杯)、纱布、棉线、橡皮泥、任氏液。
蛙心套管(斯氏套管或八木氏套管)、套管夹、0．65％NaCl、5％NaCI、2％CaCl2、1％KCl、1：5 000肾上腺素、1：10 000乙酰肌碱、300U／mL肝素。
四、【方法与步骤】1、斯氏蛙心插管法（1）一只青蛙，双毁髓后背位置于蜡盘中，按前面的方法暴露心脏。
一、实验目的1. 学习离体蛙心灌流实验的操作方法。
2. 观察不同理化因素对蛙心活动的影响。
3. 了解心肌细胞自律性、兴奋性、传导性和收缩性之间的关系。
二、实验原理离体蛙心灌流实验是生理学研究中常用的一种方法。
通过将蛙心取出并置于适宜的环境中，在一定时间内保持其节律性收缩和舒张。
通过改变灌流液的成分，观察其对心脏活动的影响，从而了解心肌细胞自律性、兴奋性、传导性和收缩性之间的关系。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：青蛙、任氏液、0.65%NaCl、2%CaCl2、1%KCl、1：10000肾上腺素、1：10000乙酰胆碱、3%乳酸。
2. 实验仪器：蛙板、蛙心夹、计算机采集系统、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿、棉线、套管夹。
四、实验方法与步骤1. 取一只青蛙，双毁髓后背位置于蛙板上，按实验方法暴露心脏。
2. 仔细识别心脏周围的大血管，于左主动脉下方穿一线，于动脉圆锥处结扎。
3. 将蛙心游离，插入蛙心夹，连接计算机采集系统和张力传感器。
4. 将蛙心置于任氏液中，观察心脏的节律性收缩和舒张。
5. 分别用0.65%NaCl、2%CaCl2、1%KCl、1：10000肾上腺素、1：10000乙酰胆碱、3%乳酸替换任氏液，观察心脏活动的变化。
6. 记录不同灌流液对心脏活动的影响，包括心率、心收缩力和心舒张力等指标。
五、实验结果与分析1. 正常蛙心在任氏液中呈现正常的节律性收缩和舒张。
2. 当用0.65%NaCl溶液替换任氏液时，心脏跳动频率和幅度略微减小，说明细胞外液中缺乏Ca2+，导致心肌收缩力降低。
3. 当向灌流液中加入2%CaCl2溶液时，心脏跳动频率和幅度略微增大，心率加快，说明细胞外液浓度升高，动作电位2期Ca2+内流增加，心肌收缩力增强。
4. 当向灌流液中加入1%KCl溶液时，心脏跳动频率和幅度略微增大，心率加快，说明K+与Ca2+在细胞膜上有竞争性抑制，细胞外液中K+浓度升高，Ca2+内流减少，心肌的兴奋性降低。
第1篇一、实验目的1. 了解蛙心解剖结构及其功能。
2. 观察心脏搏动规律，掌握心脏搏动曲线的记录方法。
3. 掌握心脏灌流实验的基本原理和操作方法。
4. 分析灌流液成分对心脏搏动的影响。
二、实验原理心脏是人体循环系统的核心器官，主要负责泵血，维持血液循环。
蛙心作为实验材料，具有解剖结构简单、易于操作等优点。
心脏搏动曲线可以反映心脏搏动的规律和强度，通过观察和分析搏动曲线，可以了解心脏功能。
三、实验材料1. 实验动物：牛蛙2. 实验器材：蛙心夹，常用手术器械，生理信号采集系统，张力传感器，支架，双凹夹，培养皿，滴管，任氏液，秒表，棉线，套管夹，0.65%NaCl，2%CaCl2，1%KCl，1:10000肾上腺素，1:10000乙酰胆碱，3%乳酸。
四、实验方法与步骤1. 暴露蛙心：取牛蛙一只，用刺蛙针通过枕骨大孔损毁脑和脊髓后，背位固定于蛙板上。
左手持有齿镊提起胸骨剑突下端的皮肤，用手术剪剪开一个小口，然后将剪刀由切口处伸入皮下，沿左、右两侧锁骨方向剪开皮肤。
将皮肤掀向头端，再用有齿镊提起胸骨剑突下端的腹肌，在腹肌上剪一口，将剪刀伸入胸腔（勿伤及心脏和血管）。
2. 蛙心夹夹持心脏：用蛙心夹夹住心脏的左心房和左心室交界处，将心脏固定在支架上。
3. 记录心搏曲线：将张力传感器连接到生理信号采集系统，将传感器放置在心脏表面，记录心脏搏动曲线。
4. 心脏灌流实验：按照以下步骤进行灌流实验：a. 以0.65%NaCl作为基础灌流液，观察心脏搏动曲线；b. 将灌流液更换为2%CaCl2，观察心脏搏动曲线；c. 将灌流液更换为1%KCl，观察心脏搏动曲线；d. 将灌流液更换为1:10000肾上腺素，观察心脏搏动曲线；e. 将灌流液更换为1:10000乙酰胆碱，观察心脏搏动曲线；f. 将灌流液更换为3%乳酸，观察心脏搏动曲线。
5. 观察并记录灌流液成分对心脏搏动的影响。
五、实验结果与分析1. 心脏搏动曲线记录结果显示，心脏搏动具有规律性，搏动曲线呈现周期性变化。
蛙类离体心脏灌流一、【目的要求】1、学习离体蛙心灌流法。
2、观察Na+,K+,Ca2+及肾上腺素(Adr),乙酰胆碱(ACh),乳酸对离体心脏活动的影响。
二、【原理】将离体蛙心（失去神经支配的蛙心）保持在适宜的环境中，在一定的时间内仍然能够保持节律性收缩，心脏正常的节律性活动需要一个适宜的理化环境，离体心脏也是如此，离体心脏脱离了机体的神经支配和全身体液因素的直接影响，可以通过改变灌流液的某些成分，观察其对心脏活动的作用。
心肌细胞的自律性、兴奋性、传导性及收缩性，都与钠、钾及钙等离子有关。
外源性给予去甲肾上腺素或乙酰胆碱可产生类似心交感神经或迷走神经兴奋时对心脏的作用。
三、【实验仪器】青蛙、常用手术器械、蛙板(或蜡盘)、蛙心夹、计算机采集系统、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿(或小烧杯)、棉线、任氏液。
套管夹、0．65％NaCl、2％CaCl2、1％KCl、1：10000肾上腺素、1：10000乙酰肌碱、3%乳酸。
四、【方法与步骤】1、斯氏蛙心插管法（1）一只青蛙，双毁髓后背位置于蜡盘中，按前面的方法暴露心脏。
仔细识别心脏周围的大血管(见右图)。
在左主动脉下方穿一线，于动脉圆锥处结扎(动物个体小时，结扎位置可靠上些)。
再从左右两主动脉下方穿一线，并打一活结备用。
左手提起主动脉上的结扎线，右手用眼科剪在结扎线下方、沿向心方向将动脉上壁剪一斜口。
选择大小适宜的蛙心套管，然后将盛有少量(套管内2～3 cm高度)任氏液(内加入一滴肝素溶液)的斯氏蛙心套管，山开口处插入动脉圆锥(见右图)。
当套管尖端到达动脉圆锥基部时，应将套管稍稍后退，使尖端向动脉圆锥的背部后下方及心尖方向推进，经主动脉瓣插入心室腔内(于心室收缩时插入，但不可插得过深，以免心室壁堵住套管下口)。
此时可见套管中血液冲人套管，并使液面随心脏搏动而亡下移动，表明操作成功(否则需退回并重新插入)。
用滴管吸去套管中的血液，更换新鲜任氏液。
蛙类离体心脏灌流一、【目要求】1、学习离体蛙心灌流法。
2、观察Na+,K+,Ca2+及肾上腺素(Adr),乙酰胆碱(ACh),乳酸对离体心脏活动影响。
二、【原理】将离体蛙心（失去神经支配蛙心）保持在适宜环境中, 在一定时间内仍然能够保持节律性收缩, 心脏正常节律性活动需要一个适宜理化环境, 离体心脏也是如此, 离体心脏脱离了机体神经支配和全身体液原因直接影响, 能够经过改变灌流液一些成份, 观察其对心脏活动作用。
心肌细胞自律性、兴奋性、传导性及收缩性, 都与钠、钾及钙等离子相关。
外源性给予去甲肾上腺素或乙酰胆碱可产生类似心交感神经或迷走神经兴奋时对心脏作用。
三、【试验仪器】青蛙、常见手术器械、蛙板(或蜡盘)、蛙心夹、计算机采集系统、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿(或小烧杯)、棉线、任氏液。
套管夹、0．65％NaCl、2％CaCl2、1％KCl、1: 10000肾上腺素、1: 10000乙酰肌碱、3%乳酸。
四、【方法与步骤】1、斯氏蛙心插管法（1）一只青蛙, 双毁髓后背位置于蜡盘中, 按前面方法暴露心脏。
仔细识别心脏周围大血管(见右图)。
在左主动脉下方穿一线, 于动脉圆锥处结扎(动物个体小时, 结扎位置可靠上些)。
再从左右两主动脉下方穿一线, 并打一活结备用。
左手提起主动脉上结扎线, 右手用眼科剪在结扎线下方、沿向心方向将动脉上壁剪一斜口。
选择大小适宜蛙心套管, 然后将盛有少许(套管内2～3 cm高度)任氏液(内加入一滴肝素溶液)斯氏蛙心套管, 山开口处插入动脉圆锥(见右图)。
当套管尖端抵达动脉圆锥基部时, 应将套管稍稍后退, 使尖端向动脉圆锥背部后下方及心尖方向推进, 经主动脉瓣插入心室腔内(于心室收缩时插入, 但不可插得过深, 以免心室壁堵住套管下口)。
此时可见套管中血液冲人套管, 并使液面随心脏搏动而亡下移动, 表明操作成功(不然需退回并重新插入)。
用滴管吸去套管中血液, 更换新鲜任氏液。
实验名称：蛙类离体心脏灌流课程名称：生理学实验指导教师：龙天澄张碧鱼陈笑霞实验人：叶永锋08344031学院：海洋学院实验时间：2009年12月09日一、【目的要求】1、学习斯氏离体蛙心灌流法。
2、了解心肌的生理特性。
3、观察Na+,K+,Ca2+及肾上腺素(Adr),乙酰胆碱(ACh)等对离体心脏活动的影响。
二、【原理】将离体蛙心（失去神经支配的蛙心）保持在适宜的环境中，在一定的时间内仍然能够保持节律性收缩，心脏正常的节律性活动需要一个适宜的理化环境，离体心脏也是如此，离体心脏脱离了机体的神经支配和全身体液因素的直接影响，可以通过改变灌流液的某些成分，观察其对心脏活动的作用。
心肌细胞的自律性、兴奋性、传导性及收缩性，都与钠、钾及钙等离子有关。
血钾浓度过高时（高于7.9mmol/L），心脏兴奋性、自律性、传导性及收缩性都下降，表现为收缩力减弱、心动过缓和传导阻滞，严重时心脏可停搏于舒张期。
血钙浓度升高时，心脏收缩力增强，过高可使心室停搏于收缩期。
血钙浓度降低，心肌收缩力减弱。
血中钠离子浓度的轻微变化，对心肌影响不明显，只有发生明显变化时，才会影响心肌的生理特性。
肾上腺素可使心率加快、传导加快及心肌收缩力增强，乙酰胆碱则与肾上腺素的作用相反。
三、【实验仪器】青蛙、常用手术器械、蛙板(或蜡盘)、蛙心夹、计算机采集系统、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿(或小烧杯)、纱布、棉线、橡皮泥、任氏液。
蛙心套管(斯氏套管或八木氏套管)、套管夹、0．65％NaCl、5％NaCI、2％CaCl2、1％KCl、1：5 000肾上腺素、1：10 000乙酰肌碱、300U／mL肝素。
四、【方法与步骤】1、斯氏蛙心插管法（1）一只青蛙，双毁髓后背位置于蜡盘中，按前面的方法暴露心脏。
仔细识别心脏周围的大血管(见右图)。
在左主动脉下方穿一线，于动脉圆锥处结扎(动物个体小时，结扎位置可靠上些)。
再从左右两主动脉下方穿一线，并打一活结备用。
左手提起主动脉上的结扎线，右手用眼科剪在结扎线下方、沿向心方向将动脉上壁剪一斜口。
选择大小适宜的蛙心套管，然后将盛有少量(套管内2～3 cm高度)任氏液(内加入一滴肝素溶液)的斯氏蛙心套管，山开口处插入动脉圆锥(见右图)。
当套管尖端到达动脉圆锥基部时，应将套管稍稍后退，使尖端向动脉圆锥的背部后下方及心尖方向推进，经主动脉瓣插入心室腔内(于心室收缩时插入，但不可插得过深，以免心室壁堵住套管下口)。
此时可见套管中血液冲人套管，并使液面随心脏搏动而亡下移动，表明操作成功(否则需退回并重新插入)。
用滴管吸去套管中的血液，更换新鲜任氏液。
稳定住套管后，轻轻提起备用线，将左、右主动脉连同插入的套管用双结扎紧(不得漏液)，再将结线固定在套管的小玻璃钩上，然后剪断结扎线上方的血管。
轻轻提起套管和心脏，看清静脉窦的位置，于静脉窦下方剪断有牵连的组织，仅保留静脉窦与心脏的联系，使心脏离体(切勿损伤静脉窦)。
用任氏液反复冲洗心室内余血，使套管内灌流液不再有残留血液。
保持套管内液面高度一致(1.5～2 cm)，即可进行实验。
（2）将插好离体心脏的套管固定在支架上，用蛙心夹夹住少许心尖部肌肉(不可夹得过多，以免因夹破心室而漏液)。
再将蛙心夹上的系线绕过一个滑轮与张力传感器相连（如右图）。
注意：勿使灌流液滴到传感器上。
调节显示器上心脏收缩曲线的幅度适中。
2、实验观察(1)记录正常心搏曲线(2)改用0．65％NaCI溶液灌流，并作好加药标记，观察心搏变化。
待曲线氏插管装置出现明显变化时，立即吸去套管中的灌流液，同时做好冲洗标记，并用新鲜任氏液清洗2—3次，待心搏恢复正常。
注意：换液时切勿碰套管，以免影响描记曲线的基线，同时保持灌流液面一致(以下同)。
观察可得，NaCI溶液会阻遏心脏搏动。
(3)向套管内加2～6滴5％NaCI(较细的套管需少加)溶液，作好加药记号，观察心搏曲线的频率及振幅变化。
当曲线出现明显变化时，应立即吸去套管中的灌流液，并做好冲洗标※记，迅速用新鲜任氏液清洗2～3次，待心搏恢复正常。
(4)同法向套管内加入1～3滴2％CaCI：溶液，观察并记录心搏曲线的变化。
当出现明显变化时，立即更换任氏液，待心搏恢复正常(如果恢复迟缓，可多次冲洗)。
(5)向套管中加1—2滴1％KCl溶液，记录心搏曲线的变化。
当心搏曲线变化时，同法更换灌流液，待心搏恢复正常。
(6)同法记录套管中加入l～2滴的肾上腺素溶液(1：10 000)后心搏曲线的变化。
(7)同法记录套管中加入1—2滴乙酰胆碱溶液(1：10 000)后心搏曲线的变化。
3、实验结果与分析将记录到的各段心搏曲线附在实验报告中，计算给药前后曲线的频率、振幅和基线变化。
测量结果填入表中。
五、【实验结果】1、正常博击曲线图2、滴加0.65%NaCl溶液图分析：滴加0.65%NaCl溶液后，心跳减弱，这是由于用0.65%NaCl溶液灌注蛙心时，由于灌注液中缺乏Ca2+，以致心肌细胞动作电位2期内流Ca2+减少，细胞质Ca2+浓度减少，心肌的收缩活动也随之减弱。
3、滴加5%NaCl溶液分析：由于细胞外液中钠浓度差梯度的变化一般对心肌活动影响不明显。
因此上图的心率变化与图2滴加0.65%NaCl溶液里变化并不是很大，两个不同浓度的相同溶液作用机理是一样的，在此一不作过多相同分析。
但如果实验中滴加溶液顺序不一样，若先滴加5%NaCl.再滴加0.65%NaCl溶液，所得的心搏变化就不如图3那样明显了，收缩力仅出现很微弱的变化。
4、滴加2%CaCl溶液分析：细胞外Ca2＋在细胞膜上对Na＋内流有竞争性抑制作用，称为膜屏障作用。
[Ca2＋]增高时，Na＋内流受抑制，细胞0期除极速度与幅度减小，使兴奋性及传导性均降低。
[Ca2 0＋]增高使Ca2＋内流增多，因此慢反应细胞0期去极化加快加强，传导性增高，而快反应细 0胞平台期缩短，有效不应期缩短，复极加速。
Ca2＋内流增多，使心肌收缩能力增强。
[Ca2＋]降低时，所引起的变化与高钙时相反。
因此加入CaCl2后，心率减少、振幅减少，基线上0移。
5、滴加1%KCl溶液分析：滴加1％KCl后的心搏曲线发现，曲线的频率逐渐减小，愈来愈疏，幅度逐渐下降，最后停止在基线处，即心脏停博于舒张状态。
因为当细胞K+浓度增高时，K+与Ca2+有竞争性拮抗作用，K+抑制细胞膜对Ca2+的转运，使进入细胞内Ca2+减少，心肌的兴奋—收缩偶联过程减弱，心肌收缩力降低。
所以心搏曲线振幅减小。
6、滴加1：10000肾上腺素溶液分析：滴加肾上腺素后，蛙心收缩增强，心脏舒张完全，描记的心搏曲线幅度明显增大。
其作用机理是，肾上腺素可与心肌细胞膜上的B受体结合，提高心肌细胞和肌浆网膜Ca2+通透性，导致肌浆中Ca2+浓度增高，使心肌收缩增强。
另外，肾上腺素还有降低肌钙蛋白与Ca2+亲和力，促使肌钙蛋白对Ca2+的释放速率增加，提高肌浆网膜摄取Ca2+的速度，刺激Na+与Ca2+交换，使复极期向细胞外排出Ca2+的作用加速，这样，将使心肌舒张速度增快，整个舒张过程明显增强。
7、滴加1：10000乙酰胆碱溶液分析：上图可示，蛙心收缩减弱，心率减慢，最后出现蛙心停止舒张阶段。
其机理为：乙酰胆碱与心肌细胞膜M受体结合，一方面提高心肌细胞膜K+通道的通透性，促使K+外流，将引起：1）窦房强细胞复极时K+外流增多，最大复极电位绝对值增大；Ik衰减过程减弱，自动除极速度减慢。
这两方面因素导致窦房自律性降低，心率减慢。
2）复极过程中K+外流增加，动作电位2、3期缩短，Ca2+进入细胞内减少，使心肌收缩减弱；另一方面乙酰胆碱可直接抑制Ca2+通道，减少Ca2+内流，进而使心肌收缩减弱。
表一：各测量结果比较表1改变灌流成分对蛙离体心脏活动的影响六、【注意事项】1. 制备蛙心标本时，勿伤及静脉窦。
2 .上述各实验项目，一旦出现作用应立即用正常任氏液换洗，以免心肌受损，而且必须待心搏恢复正常后方能进行下一步实验。
3. 复习心肌生物电的产生机制及各种离子对心脏活动的影响。
4. 尽量选用健壮、体大的雄性蟾蜍，手术过程中注意保护心脏，避免损伤。
5. 实验中及时用任氏液冲洗心脏，待曲线恢复平稳后再进行下一步操作。
6. 每次更换任氏液都必须保持灌流液液面高度恒定，以免因灌流量变化而影响结果。
7. 严格控制每次药品加入量，先加一滴，效果不明显再加一滴。
8. 滴加药品和换取正常任氏液，须及时标记，以便观察分析。
9. 吸滴瓶中的任氏液和吸蛙心套管内溶液的吸管应区分专用，不可混淆使用，以免影响实验结果。
【思考题】1. 离体蛙心制备好后，有时候馆内的液面上下移动很不明显，是何原因？如何处理？答：离体蛙心制备好后，蛙心插管内的液体应随蛙心室的收缩和舒张活动而上下移动。
其实质是：在心室收缩时，心室容积减少，室内压升高，将心室内的液体压入插管内，管内液面上升；在心室舒张的时候，心室容积增大，心室内压减少，将插管内液体吸入心室，管内液面下降。
但是有时候蛙心插管内液面波动不明显，其主要原因是：⑴插管内尖端出现血凝块。
插管内液体不能顺畅的进出心室腔内。
解决方法为用长吸管将血凝块吸出，在吸出血凝块后，应立即用新鲜任氏液换洗插管内液体几次，直至蛙心颜色变淡，插管内无血液和小血块为止。
⑵插管尖端不在心室腔内，而是在心房或者脉间结缔组织等地方。
解决方法为将插管重新插入心室，确定无误后，再结扎固定。
⑶插管进入心室腔内过深，以致尖端抵住了心室壁。
解决方法为将插管稍稍外提，使插管口正好处于心室腔内，且开口正对着液体喷射的轴流方向。
⑷蛙心由于长期心肌失血，导致活力下降。
解决方法为向插管内滴加少许肾上腺素或者对其进行外加力使其起搏，使其活动增强。
⑸房室传导阻滞。
在插管的操作中，由于操作失误，对心脏造成的损害过大，最后导致房室传导阻滞。
由于这种伤害是不可逆转的，所以必须改换蛙心重做实验。
2. 实验过程中，为什么必须保持蛙心插管内液面高度的恒定？液面过高或过低会产生怎样的影响？答：在实验过程中，蛙心插管内液面高度发生变化，心脏收缩曲线会相应发生变化。
心肌缩短幅度和速度受到前负荷和后负荷的影响。
插管液面高度所产生的压力，在心室舒张期末期相当于心肌的前负荷，心室开始收缩的时候，此液体所产生的压力又成为心肌收缩时的后负荷。
故高度的改变，进而引起的前后负荷的改变将改变心肌收缩的幅度和频率。
当液面过高时。
心缩曲线幅度将降低。
因为过高的液面，将使心室前负荷超过了最适前负荷，将导致粗细肌丝过于疏远，而导致收缩的潜力减少，心肌收缩不再增加或下降。
而类似的，过高的后负荷，也使心肌收缩的幅度和速度大大下降。
而当液面过低时，心室收缩的幅度也会减少。
因为前负荷过小，将导致粗细肌丝过于接近，而导致收缩的潜力减少，实际上，此时由于前负荷的减少导致心室收缩的效力的减少比前负荷增加而导致的还有明显。
