邻二氮菲分光光度法测定铁

实验二 邻二氮菲分光光度法测定铁的含量一、实验目的1．掌握邻二氮菲分光光度法测定铁的方法;2．了解分光光度计的构造、性能及使用方法。

二、实验原理邻二氮菲（又称邻菲罗啉）是测定微量铁的较好试剂，在pH=2～9的条件下，二价铁离子与试剂生成极稳定的橙红色配合物。

配合物的稳K lg ＝21.3，摩尔吸光系数510 ＝11000 L·mol -1·cm -1。

在显色前，用盐酸羟胺把三价铁离子还原为二价铁离子。

4Fe 3+＋2NH 2OH →4Fe 2+ ＋ N 2O ＋ 4H ＋＋ H 2O测定时，控制溶液pH ＝3较为适宜，酸度高时，反应进行较慢，酸度太低，则二价铁离子水解，影响显色。

用邻二氮菲测定时，有很多元素干扰测定，须预先进行掩蔽或分离，如钴、镍、铜、铅与试剂形成有色配合物；钨、铂、镉、汞与试剂生成沉淀，还有些金属离子如锡、铅、铋则在邻二氮菲铁配合物形成的pH 范围内发生水解；因此当这些离子共存时，应注意消除它们的干扰作用。

三、仪器与试剂1．醋酸钠：l mol·L -1；2．氢氧化钠：0.4 mol·L -1；3．盐 酸：2 mol·L -1；、4．盐酸羟胺：10％（临时配制）；5．邻二氮菲（0.1%）：0.lg 邻二氮菲溶解在100mL1:1乙醇溶液中。

6．铁标准溶液(1)10-4mol·L -1铁标准溶液：准确称取0.1961g （NH 4）2 Fe （SO 4）2·6H 20于烧杯中，用2 mol·L -1盐酸15 mL 溶解，移至500 mL 容量瓶中，以水稀释至刻度，摇匀；再准确稀释10倍成为含铁10 - 4mol·L -l 标准溶液。

(2)10 μg·mL -1（即0.01 mg·mL -1）铁标准溶液：准确称取0.3511g （NH 4）2 Fe （SO 4）2·6H 20于烧杯中，用2 mol·L -l 盐酸15 mL 溶解，移入500 mL 容量瓶中，以水稀释至刻度，摇匀。

实验邻二氮菲分光光度法测定铁一、实验目的1、通过分光光度法测定铁的条件实验，学会如何选择分光光度分析的条件及分光光度测定铁的方法。

2、了解分光光度计的性能、结构及其使用方法3、学会使用TU-1810紫外可见分光光度计二、实验原理邻二氮菲(phen)和Fe2+在pH3～9的溶液中，生成一种稳定的橙红色络合物Fe(phen) 32+，其lgK=21.3，κ508=1.1 ×104L·mol-1·cm-1，铁含量在0.1～6μg·mL-1范围内遵守比尔定律。

其吸收曲线如图1-1所示。

显色前需用盐酸羟胺或抗坏血酸将Fe3+全部还原为Fe2+，然后再加入邻二氮菲，并调节溶液酸度至适宜的显色酸度范围。

有关反应如下：2Fe3++2NH2OH·HC1＝2Fe2++N2↑+2H2O+4H++2C1－图1-1 邻二氮菲一铁(Ⅱ)的吸收曲线用分光光度法测定物质的含量，一般采用标准曲线法，即配制一系列浓度的标准溶液，在实验条件下依次测量各标准溶液的吸光度(A)，以溶液的浓度为横坐标，相应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。

在同样实验条件下，测定待测溶液的吸光度，根据测得吸光度值从标准曲线上查出相应的浓度值，即可计算试样中被测物质的质量浓度。

三、仪器和试剂1．仪器TU-1810紫外可见分光光度计，pH酸度计等2．试剂(1)100ug·mL-1铁标准储备液准确称取0.702 0 g NH4Fe(S04)2·6H20置于烧杯中，加少量水和20 mL 1:1H2S04溶液，溶解后，定量转移到1L容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。

(2)10 ug·mL-铁标准溶液用吸量管移取25mL 100ug·mL-1铁标液于250mL容量瓶中，加入4mL6mol·L-1HCl溶液，用水稀释至刻度，摇匀。

（学生自配）(3)100 g·L-1盐酸羟胺水溶液用时现配。

邻二氮菲分光光度法测定铁的条件实验和测定微量铁邻二氮菲是一种常用的有机染料，在化学分析中常用于铁离子的测定。

邻二氮菲与铁离子生成的络合物具有明显的吸收光谱峰，可以通过分光光度法进行定量分析。

本文将介绍邻二氮菲分光光度法测定铁的条件实验和测定微量铁的方法。

实验条件1. 试剂和仪器（1）邻二氮菲：纯度应在98%以上。

（3）盐酸：纯度应在37%以上，用于控制溶液的酸度。

（4）标准铁溶液：浓度为1000μg/mL。

（5）分光光度计：用于测定吸收光谱曲线。

2. 操作步骤（1）制备邻二氮菲工作溶液：将1g邻二氮菲溶于100mL 乙醇中，稀释至1000μg/mL。

（2）制备硝酸铁标准溶液：取适量的硝酸铁溶于水中，调节pH至5.5-6.5，使用标准铁溶液调节溶液浓度。

（3）取一定量的样品，加入盐酸和邻二氮菲工作溶液，使其浓度为3×10^-4 M，pH 为5.5-6.5。

（5）根据吸收光谱曲线计算出样品中铁离子的浓度。

测定微量铁针对微量铁的测定，可以采用前处理方法和放大测量方法，使得样品浓度达到设备测量范围的要求。

1. 前处理方法对于低浓度的样品，需要进行前处理以提高铁离子浓度，通常采用离子交换树脂柱、萃取和浓缩等方法。

离子交换树脂柱：树脂柱具有强的选择性，可以去除多余的离子，使得测量结果更加准确。

荧光光谱法测定铁离子萃取：使用萃取剂提取样品中的铁离子，可以增加铁离子的浓度，使得测量结果更加准确。

2. 放大测量方法放大测量方法可以克服微量铁浓度过低的问题，通常使用衍射法、磁光法和荧光法等方法。

荧光法：荧光法利用荧光染料与铁离子生成荧光复合物，测量荧光信号强度来定量分析铁离子的浓度。

总之，邻二氮菲分光光度法是一种方便可靠的测定铁离子的方法，而在测定微量铁时，需要采用前处理方法和放大测量方法。

这些方法不仅可以提高铁离子浓度，还可以克服微量铁浓度过低而带来的精度低下的问题，提高测量的准确性。

邻菲罗啉分光光度法测定铁邻菲罗啉分光光度法是一种常用的测定铁的方法。

邻菲罗啉，也称为邻二氮菲，是一种常用的螯合剂，可以与铁离子形成稳定的络合物。

下面将对这种方法进行详细的介绍。

一、实验原理邻菲罗啉分光光度法是一种基于络合反应的分光光度法，用于测定铁离子。

邻菲罗啉与铁离子形成稳定的络合物，该络合物的最大吸收波长位于530nm左右，因此可以通过测量该波长下的吸光度来测定铁离子的浓度。

二、实验步骤1.准备试剂和样品：邻菲罗啉溶液、铁标准溶液、缓冲溶液（PH=7）、去离子水、待测样品。

2.校准仪器：使用空白试剂校准仪器，确保仪器处于正常状态。

3.绘制标准曲线：分别取不同浓度的铁标准溶液于比色皿中，加入等体积的邻菲罗啉溶液和缓冲溶液，摇匀后静置片刻，记录各浓度下的吸光度。

以吸光度为纵坐标，铁离子浓度为横坐标绘制标准曲线。

4.测定样品：取适量待测样品于比色皿中，加入等体积的邻菲罗啉溶液和缓冲溶液，摇匀后静置片刻，测量吸光度。

5.计算结果：根据标准曲线计算待测样品中铁离子的浓度。

三、实验结果与分析1.结果记录：记录实验过程中各浓度下的吸光度和待测样品中铁离子的浓度。

2.结果分析：通过对比标准曲线和样品的吸光度值，可以得出待测样品中铁离子的浓度。

如果需要进一步分析，可以对实验数据进行处理和分析，例如计算相对误差、变异系数等指标，以评估实验结果的准确性和可靠性。

四、实验注意事项1.实验过程中要注意安全，避免直接接触皮肤或吸入粉尘。

2.试剂和样品应当存放在棕色瓶中，避免阳光直射和长时间暴露在空气中。

3.在绘制标准曲线时，要使用相同浓度的缓冲溶液和邻菲罗啉溶液，以确保实验条件的一致性。

4.在测定样品时，要保证样品的均匀性和稳定性，避免出现误差。

5.在计算结果时，要根据标准曲线进行线性回归分析，以得出准确的浓度值。

五、实验结论通过邻菲罗啉分光光度法测定铁离子的实验，可以得出待测样品中铁离子的浓度。

该方法具有操作简便、灵敏度高、准确度高等优点，适用于测定水中、土壤中或生物样品中的铁离子浓度。

实验二邻二氮菲分光光度法测定铁一、目的要求1.了解分光光度计的结构和正确的使用方法。

2.掌握邻二氮杂菲分光光度法测定铁的原理及方法。

3.学会制作标准曲线的方法。

二、原理邻二氮杂菲是测定微量铁较好的试剂。

在pH为2~9的溶液中，邻二氮杂菲与Fe2+生成稳定的橙红色配合物，显色反应如下：Fe2+＋其lgK稳＝21.3，摩尔吸光系数ε510＝1.1×104。

橙红色配合物的最大吸收峰在510nm 波长处。

Fe3+与邻二氮杂菲作用形成蓝色配合物，稳定性较差，因此在实际应用中常加入还原剂使Fe3+还原为Fe2+，再与邻二氮杂菲作用。

常用盐酸羟胺NH2OH·HCl（或对苯二酚）作还原剂。

4Fe3+＋2NH2OH 4Fe2+＋4H+＋N2O＋H2O 测定时酸度高，反应进行较慢；酸度太低，则离子易水解。

本实验采用HAc-NaAc缓冲溶液控制溶液pH≈5.0，使显色反应进行完全。

本方法的选择性很高，相当于含铁量40倍的Sn2+、Al3+、Ca2+、Mg2+、Zn2+、SiO32-；20倍的Cr3+、Mn2+、VO3-、PO43-；5倍的Co2+、Ni2+、Cu2+-等离子不干扰测定。

但Bi3+、Cd2+、Hg2+、Zn2+、Ag+等离子与邻二氮杂菲作用生成沉淀干扰测定。

三、仪器与试剂仪器：分光光度计（型号以实际为准）一台（含一套比色皿），吸量管一套（1ml，1ml，2ml，5ml）, 50ml比色管一套，洗瓶一个，滴管一个，吸耳球一个，滤纸盒一个试剂：1.铁标准溶液（100μg·mL-1）：准确称取0.8634g铁盐NH4Fe(SO4)2·12H2O(A.R)，置于烧杯中，加入20mL 6mol·L-1HCl溶液和少量水，溶解后，定量转移至1000mL容量瓶中，加水稀释至刻度，充分摇匀。

或准确称取铁粉0.1g左右，加入10mL 10%硫酸，待完全溶解后，冷却，用水稀释至100mL。

实验邻二氮菲分光光度法测定铁一、实验目的1 掌握研究显色反应的一般方法；2 测定未知试样中的铁含量．二、实验原理由于某些无机离子本身没有颜色或者浓度低颜色过浅，其吸光值与浓度的关系不在线形范围内，则需要显色剂与被测物形成有色配合物。

该配合物的浓度与吸光度能够符合朗伯比尔定律。

因而可以间接测定出被测物的浓度。

(1) 显色剂与被测物的λmax应相距60 nm以上(2) 显色剂的用量：a保证显色完全，b用量过多会产生副反应(3) 显色时间：有些反应瞬时完成，溶液颜色很快达到平衡状态，并长时间保持不变．有些能迅速完成，但褪色较快，有些反应则较慢。

(4) pH值的影响：影响显色剂的溶解和金属的离子状态，进而影响有色配合物的生成和稳定性。

HR＝H- + R+酸浓度改变，平衡移动三、实验步骤(一) 绘制吸收曲线取两个25mL容量瓶，其中一个加入0.3mL铁标准溶液，然后在两国容量瓶中各加入0.5mL盐酸羟胺溶液，摇匀，放置2min。

各加入1.0mL邻二氮菲溶液和2.5mL 醋酸钠溶液，用水稀释至刻度，摇匀。

用水作参比溶液，分别绘制上述两种溶液的吸收曲线。

再用不含铁的试剂溶液作参比溶液，绘制有色配合物的吸收光谱。

比较上述3种吸收光谱，选取合适的测定波长。

（二）显色剂用量实验：在8个50 mL比色管中，加入0.30 mL铁标准溶液，0.5 mL盐酸羟氨溶液，然后分别加入邻二氨菲溶液0，0.1，0.3，0.5，0.7，1.0，1.5和2.0 mL。

最后在个瓶中加入2.5 mL醋酸钠溶液，用水稀释至25 mL刻度，摇均，用1 mL比色皿，从不含显色剂的溶液作参比溶液，在508 nm下测定吸光度，记下各个吸光度值。

(三) pH值的影响：在7个50 mL比色管中，加入0.3 mL铁标准溶液，0.5 mL盐酸羟氨溶液．静置2 min后，个加入1.0 mL邻二氨菲溶液，然后用滴定管依次加入0，2.5，5.0，7.5，10.0，12.5，15.0 mL氢氧化钠溶液，用水稀释至25 mL刻度摇均（用pH计测定上列溶液的pH值，记下其数值）．用1 cm比色皿，以水作参比溶液，在508 nm测定吸光度，记下吸光度值。

实验五 邻二氮菲分光光度法测定铁的含量一、实验目的1．掌握邻二氮菲分光光度法测定铁的方法; 2．了解分光光度计的构造、性能及使用方法。

二、实验原理邻二氮菲（又称邻菲罗啉）是测定微量铁的较好试剂，在pH=2～9的条件下，二价铁离子与试剂生成极稳定的橙红色配合物。

配合物的稳K lg ＝21.3，摩尔吸光系数510 ＝11000 L·mol -1·cm -1。

在显色前，用盐酸羟胺把三价铁离子还原为二价铁离子。

4Fe 3+＋2NH 2OH →4Fe 2+ ＋ N 2O ＋ 4H ＋＋ H 2O测定时，控制溶液pH ＝3较为适宜，酸度高时，反应进行较慢，酸度太低，则二价铁离子水解，影响显色。

用邻二氮菲测定时，有很多元素干扰测定，须预先进行掩蔽或分离，如钴、镍、铜、铅与试剂形成有色配合物；钨、铂、镉、汞与试剂生成沉淀，还有些金属离子如锡、铅、铋则在邻二氮菲铁配合物形成的pH 范围内发生水解；因此当这些离子共存时，应注意消除它们的干扰作用。

三、仪器与试剂 1．醋酸钠：l mol·L -1； 2．氢氧化钠：0.4 mol·L -1； 3．盐 酸：6 mol·L -1；、4．盐酸羟胺：100g·L -1（临时配制）；5．邻二氮菲（1.5g·L -1）：0.l5g 邻二氮菲溶解在100mL1:1乙醇溶液中。

6．铁标准溶液(1)100μg ·mL -1铁标准溶液：准确称取0.8634gNH 4Fe （SO 4）2·12H 20于200ml 烧杯中，用6 mol·L -1盐酸20 mL 溶解，移至1 L 容量瓶中，以水稀释至刻度，摇匀。

(2)10 μg·mL -1（即0.01 mg·mL -1）铁标准溶液：用移液管吸取10ml100μg ·mL -1铁标准溶液于100ml 容量瓶中，加入2ml 6 mol·L -1盐酸，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。

邻二氮杂菲分光光度法测定铁量邻二氮杂菲分光光度法（o-Phenanthroline Spectrophotometric Method）是一种常用于测定水或土壤中铁含量的方法。

本文将介绍该方法的原理、步骤、注意事项和优缺点等。

一、原理该方法基于邻二氮杂菲（o-Phenanthroline）与铁离子形成的配合物在特定波长下具有特征的吸收光谱。

在酸性条件下，铁离子与邻二氮杂菲反应生成红色的三价铁-邻二氮杂菲配合物，其在510nm处有一明显的吸收峰。

因此，可以根据该峰的吸光度值计算出样品中铁的浓度。

二、步骤1.样品的制备：将待测样品中的铁离子还原成两价铁。

通常使用稀硫酸或氢氧化钠溶液作为还原剂。

具体方法为：取约1g待测样品，加入10ml稀硫酸或氢氧化钠溶液，加热至沸腾，保持沸腾1-2分钟，冷却至室温。

2.标准曲线的制备：取0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5ml等不同体积的0.1mol/L FeSO4溶液分别置于不同的10ml量瓶中，加稀硫酸或氢氧化钠溶液定容至刻度线，得到含铁浓度从0到5mg/L不等的标准溶液。

将标准溶液分别用同样的方法制备成多个含铁浓度不同的溶液。

3.测定：在比色皿中分别放入10ml标准溶液和处理后的待测样品溶液，加入适量的邻二氮杂菲溶液和稀硫酸和。

混合均匀后，用分光光度计在510nm测定溶液的吸光度值，并记录。

4.计算：根据标准曲线上对应的吸光度值和铁的浓度，计算待测样品中铁的浓度。

三、注意事项1.为保证测定结果准确，建议在同一天内测定所有样品，避免不必要的误差。

2.邻二氮杂菲吸收光谱易受到空气氧化的影响，因此需在实验过程中尽量避免接触空气。

3.样品中存在其他金属离子时，可能会影响铁的测定结果。

在此情况下，可选用其他方法或采取特殊的前处理方法（如离子交换树脂法）。

4.注意安全操作，避免酸和邻二氮杂菲对身体造成伤害。

四、优缺点优点：测定方法简单、对常见杂质不敏感、灵敏度高。

缺点：其他离子的存在可能会影响测定结果，样品预处理过程复杂，操作需要熟练。

实验1 邻二氮菲分光光度法测定铁一、实验原理邻二氮菲(phen)和Fe2+在pH3～9的溶液中，生成一种稳定的橙红色络合物Fe(phen) 32+，其lgK=21.3，κ508=1.1 ×104L·mol-1·cm-1，铁含量在0.1～6μg·mL-1范围内遵守比尔定律。

其吸收曲线如图1-1所示。

显色前需用盐酸羟胺或抗坏血酸将Fe3+全部还原为Fe2+，然后再加入邻二氮菲，并调节溶液酸度至适宜的显色酸度范围。

有关反应如下：2Fe3++2NH2OH·HC1＝2Fe2++N2↑+2H2O+4H++2C1－图1-1 邻二氮菲一铁(Ⅱ)的吸收曲线用分光光度法测定物质的含量，一般采用标准曲线法，即配制一系列浓度的标准溶液，在实验条件下依次测量各标准溶液的吸光度(A)，以溶液的浓度为横坐标，相应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。

在同样实验条件下，测定待测溶液的吸光度，根据测得吸光度值从标准曲线上查出相应的浓度值，即可计算试样中被测物质的质量浓度。

二、仪器和试剂1．仪器721或722型分光光度计。

2．试剂(1)0.1 mg·L-1铁标准储备液准确称取0.702 0 g NH4Fe(S04)2·6H20置于烧杯中，加少量水和20 mL 1:1H2S04溶液，溶解后，定量转移到1L容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。

(2)10-3 moL-1铁标准溶液可用铁储备液稀释配制。

(3)100 g·L-1盐酸羟胺水溶液用时现配。

(4)1.5 g·L-1邻二氮菲水溶液避光保存，溶液颜色变暗时即不能使用。

(5)1.0 mol·L-1叫乙酸钠溶液。

(6)0.1 mol·L-1氢氧化钠溶液。

三、实验步骤1．显色标准溶液的配制在序号为1～6的6只50 mL容量瓶中，用吸量管分别加入0，0.20，0.40，0.60，0.80，1.0 mL铁标准溶液(含铁0.1 g·L-1)，分别加入1 mL 100 g·L-1盐酸羟胺溶液，摇匀后放置2 min，再各加入2 mL 1.5 g·L-1邻二氮菲溶液、5 mL 1.0 mol·L-1乙酸钠溶液，以水稀释至刻度，摇匀。

邻二氮菲分光光度法测定铁的含量邻二氮菲分光光度法测定铁的含量一. 实验目的1．掌握邻二氮菲分光光度法测定铁的原理及方法。

2．学习标准曲线的制作方法。

3．了解721型分光光度计的构造及使用方法。

二．实验原理在测定微量铁时，通常以盐酸羟胺还原Fe3+为Fe2+，在PH为2—9的范围内，Fe2+与邻二氮菲反应生成稳定的橙红色配合物，其lgK fθ=21.3。

该配合物的最大吸收波长为510nm。

本方法不仅灵敏度高（摩尔吸光系数ε=1.1×104），而且选择性好。

相当于含铁量40倍的Sn2+、Al3+、Ca2+、Mg2+、Zn2+、SiO2-3，20倍的Cr3+、Mn2+、V(V)、PO3-4，5倍的Co2+、Cu2+等均不干扰测定。

Fe2+与邻二氮菲在PH=2—9范围内均能显色，但酸度高时，反应较慢，酸度太低时Fe2+易水解，所以一般在PH=5—6的微酸性溶液中显色较为适宜。

邻二氮菲与Fe3+能生成3:1的淡蓝色配合物（lgK fθ=14.1），因此在显色前应先用还原剂盐酸羟胺将Fe3+全部还原为Fe2+（2Fe3++2NH2OH·HCl=2Fe2++N2↑+2H2O+4H++2Cl-）。

三．仪器与试剂1. 仪器：(1) 721型分光光度计。

(2) 50mL容量瓶7只/组。

(3) 10mL、5mL、2mL、1mL移液管。

2. 试剂：(1)100µg·mL-1的铁标准溶液：准确称取0.8634gNH4Fe(SO4)2·12H2O于烧杯中，加入20mL1:1的HCl和少量水溶解后，定量转移至1升容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。

所得溶液含Fe3+100µg·mL-1。

(2) 10µg·ml-1的铁标准溶液：准确移取25.0mL 100µg·mL-1的铁标准溶液于250mL容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。

分析化学实验报告实验题目：邻二氮杂菲分光光度法测定铁学院：专业：食品科学与工程班级：姓名：学号：同组者姓名：一．实验目的1.了解分光光度法测定物质含量的一般条件及其选定方法2.掌握邻二氮杂菲分光光度法测定铁的方法3.了解722型分光光度计的构造和使用方法二．实验原理1.光度法测定的条件：分光光度法测定物质含量时应注意的条件主要是 显色反应的条件和测量吸光度的条件。

显色反应的条件有显色剂用量、介质的酸度、显色时溶液温度、显色时间及干扰物质的消除方法等;测量吸光度的条件包括应选择的入射光波长，吸光度范围和参比溶液等。

2.在PH=2-9的条件下，Fe 2+与邻二氮杂菲（o-ph ）生成极稳定的橘红色配合物，反应式如下：此配合物的lgK 稳 =21.3 摩尔吸收系数ε510 =1.1×104在显色前，首先用盐酸羟胺把Fe 2+ 还原成Fe 3+.其反应式如下： 2Fe 3+ +2NH 2 OH · HC1 ＝2Fe 2+ +N 2 ↑+2H 2 O+4H + +2C1-测定时，控制溶液酸度在PH=5左右较为适宜。

酸度过高时，反应进行较慢;酸度太低，则Fe 2+水解，影响显色。

三、实验仪器分光光度计、容量瓶、移液管、洗瓶NN四、实验步骤1.条件实验（1）吸收曲线的测绘准确吸取20 μg·mL-1铁标准溶液5 mL于50 mL容量瓶中，加入5%盐酸羟胺溶液1 mL，摇匀，加入1 mol·L-1NaOAc溶液5 mL和0.1%邻二氮杂菲溶液3 mL。

以水稀释至刻度，摇匀。

放置10 min，在722型分光光度计上，用1 cm比色皿，以水为参比溶液，波长从570 nm到430 nm为止，每隔10 nm测定一次吸光度。

如图1所示，其最大吸收波长为510 nm，故该实验选择测定波长为510 nm。

（2）邻二氮杂菲-亚铁配合物的稳定性用上面溶液继续进行测定，其方法是在最大吸收波长510 nm处，每隔一定时间测定其吸光度，及再加入显色剂后立即测定一次吸光度，经10、20、30、120 min 后，再各测一次吸光度。

Exp 21 光谱法测定铁一、原理作为二价铁的化合物中微量铁的测定采用的是分光光度法。

测定铁II使用的是经典的试剂（还原为二价铁后）是有机试剂1,10-邻菲罗啉。

这个试剂有一个分子式C12H8N2和结构式O-ph。

她的别名叫亚铁。

化合物中含有三分子的1,10-邻菲罗啉和一个铁：Fe2+ + 3(o-ph) = Fe (o-ph)3个别的金属离子也能与之形成化合物，但惟有含铁的化合物颜色很深。

Ag+、Co2+、Cu2+、Ni2+是主要干扰。

柠檬酸和EDTA的混合物可以隐蔽Ag+、Cu2+、Ni2+以及大量的其他金属离子。

这个方法用于测定铁的化合物有一个吸光系数（1.1×104）。

测定的极限（A＝0.01）大约是10-6，而在1cm吸收池中分析的范围在0.4至8个ppm。

在这个步骤中，铁首先用还原剂还原成二价铁，如盐酸羟胺（NH2OH·HCl）。

加入的1,10-邻菲罗啉与铁反应的量必须是超计量的，而溶液的pH是通过NaAc缓冲来控制（这一步很重要，因为真正显色就在这一pH区间）。

最后，溶液稀释至刻线然后用光度计测量吸光度。

二、步骤：1、用移液管吸取10.00ml的0.100mg/ml的Fe2+到50ml的容量瓶中。

用蒸馏水稀至刻线并混均。

该溶液含0.0200mg/ml的铁。

2、取10ml的数个（系列）比色管，吸取0.2、0.4、0.8、1.6ml的铁标液（20µg/ml）。

在比色管中加入1.0ml的蒸馏水【做空白】。

未知样品（1.00ml）装入6管。

对于回收，0.4ml的标液和1.00ml的未知物装入7管。

所有的管（包括未知物）加0.2ml的10%盐酸羟胺、0.5ml的0.1%的1,10-邻菲罗啉、通过加入1.0ml的10%醋酸钠缓冲液以产生出红色的1,10-邻菲罗啉，然后稀释至10.00ml。

Fe2+标液的浓度分别是0.40、0.80、1.60、3.20µg/ml。

实验十邻二氮菲分光光度法测定铁一、实验目的1.了解分光光度计的结构和使用方法；2.掌握用吸光光度法测定铁的原理和方法。

二、实验原理在可见光区进行吸光光度测量，如果被测组分本身很浅，或者无色，那么就要用显色剂与其反应，生成有色化合物，然后进行测量。

用光度法测定铁，显色剂种类较多，邻二氮菲光度法测铁，由于灵敏度较高，稳定性较好，干扰容易消除，因而目前普遍采用的一种测定方法。

在pH为2~9的溶液中，邻二氮菲与Fe2+反应生成稳定的橙红色络合物：F e2++3NNNN3F e2+在pH=2~9范围内，该反应能够迅速完成，生成的红色配位离子在510nm波长附近有一吸收峰，摩尔吸收系数为1.1×104，反应十分灵敏，Fe2+ 浓度与吸光度符合光吸收定律，适合于微量铁的测定。

实验中，采用pH=4.5-5的缓冲溶液保持标准系列溶液及样品溶液的酸度；采用盐酸羟胺还原标准储备液及样品溶液中的Fe3+并防止测定过程中Fe2+被空气氧化。

三、试剂和仪器试剂：1.00×10-3ug/mL 的铁标液、1mol/L的NaAc溶液、100g/L的盐酸羟胺溶液、1mol/L的NaAc 溶液。

仪器：50mL容量瓶、2.00mL、10mL、25.00mL吸量管、通用滴定管、玻璃比色皿、分光光度计四、实验过程1、吸收曲线的绘制用吸量管吸取10mL 1.00×10-3ug/mL 的铁标准溶液于50mL容量瓶中，加入1ml 100g/L的盐酸羟胺溶液，摇匀，再加入2mL 1.5g/L邻二氮菲溶液、5mL 1mol/L的NaAc溶液，以蒸馏水稀释至刻度，摇匀。

放置十分钟。

在可见光分光光度计上，用1cm的比色皿，以蒸馏水为参比溶液，从450nm至550nm每改变10 nm 测定一次吸光度。

绘制A~λ吸收曲线。

找出最大吸收波长。

2、标准曲线的绘制标准溶液及样品溶液的配制：在选定最大吸收波长处，用1cm比色皿，以0号溶液作为参比溶液，分别测定1至5号溶液的吸光度，绘制标准曲线。

实验十二 邻二氮菲分光光度法测定铁（3学时）一、实验目的1. 掌握用邻二氮菲分光光度法测定铁的原理和方法。

2. 练习分光光度计的操作技术。

3. 学会吸收曲线的制作，并选择测量铁的适宜波长。

二、实验原理邻二氮菲（又称邻菲罗啉）是测定微量铁的较好试剂。

在pH2～9的溶液中，试剂与Fe 2＋生成稳定的红色配合物，其log K f ＝21.3，摩尔吸光系数ε510＝1.1 × 104，其反应式如下： NN N N Fe 2+3+Fe+2生成的红色配合物的最大吸收峰在510nm 处。

本方法的选择性很高，相当于含铁量40倍的Sn 2＋、Al 3＋、Ca 2＋、Mg 2＋、Zn 2＋、SiO 32－，20倍的Cr 3＋、Mn 2＋、V (Ⅴ) 、PO 43－，5倍的Cu 2＋、Co 2＋等均不干扰测定。

Fe 3＋也能与邻二氮菲反应生成淡蓝色配合物，因此，在显色前，首先用盐酸羟胺把Fe 3＋离子还原为Fe 2＋离子，其反应式如下： 4Fe 3＋ + 2NH 2OH ·HCl → 2Fe 2＋ + N 2↑ + 2H 2O + 4H ＋ + 2Cl －测定时，pH 值控制在5左右，酸度高时，反应进行较慢，酸度太低，则Fe 2＋离子水解，影响显色。

三、仪器和试剂(一)仪器分光光度计1台，50mL 容量瓶 8个，1mL 吸量管 1支，2mL 吸量管2支，5mL 吸量管2支，10mL 吸量管1支。

(二)试剂(1)20μg·mL－1铁标准溶液：准确称取0.1727g NH 4Fe(SO 4)2·12H 2O 于烧杯中，加入20mL1︰1的HCl 溶液和少量水，溶解后定量转至1000mL 容量瓶中，稀释至刻度，摇匀。

即20μg·mL －1的Fe 3＋标准溶液。

(2)0.15％邻二氮菲溶液（临用时配制）。

(3)10％盐酸羟氨溶液（临用时配制）。

(4)l mol·L －1NaAc 溶液。