邻二氮菲分光光度法测量微量铁的方法

实验八邻二氮菲分光光度法测定微量铁一、实验目的2. 掌握邻二氮菲的制备方法及其在测定微量铁中的应用。

3. 理解标准曲线的绘制方法及其在实验中的应用。

二、实验原理邻二氮菲是一种具有荧光特性的有机物，其分子结构如图1所示。

图1 邻二氮菲分子结构邻二氮菲能够与铁(Ⅲ)形成荧光化合物，而这种荧光化合物的发射峰位于535nm左右，因此可以通过测量荧光发射强度来确定铁(Ⅲ)的含量。

在实验中，首先要制备邻二氮菲溶液。

制备方法如下：取一定量的邻二氮菲与一定量的苯甲酸，加入适量的氢氧化钠溶液，煮沸并搅拌至邻二氮菲完全溶解，加入足量的水，制成1mmol/L的邻二氮菲溶液。

然后测定铁离子溶液的荧光强度，在一定波长下测定它的荧光强度，得到标准曲线。

最后将待测样品溶液与邻二氮菲溶液混合，测定混合溶液荧光强度，并用标准曲线计算出铁离子的含量。

三、实验步骤2. 制备标准曲线。

将一定量的FeCl3溶液加入邻二氮菲溶液中，混合均匀后，在535nm处测定其荧光强度。

重复上述步骤，得到一系列不同浓度的FeCl3溶液荧光强度数据。

3. 测定样品荧光强度。

将待测样品溶液与邻二氮菲溶液混合，混合均匀后，在535nm 处测定其荧光强度。

4. 计算样品中Fe离子的含量。

使用标准曲线计算样品中Fe离子的含量。

四、实验注意事项1. 实验中所用的器皿应干净，避免污染。

2. 制备邻二氮菲溶液时应注意氢氧化钠的浓度和量，以确保邻二氮菲完全溶解。

3. 实验室应尽量保持安静，避免干扰荧光信号。

4. 注意各种溶液的安全操作，如防止接触皮肤和眼睛。

五、实验结果及分析利用邻二氮菲分光光度法测定一系列不同浓度的FeCl3标准溶液，得到的测量结果如下表所示。

所得数据可用图表表示，如下图所示。

根据标准曲线可以得到如下方程：y = 0.2948x + 2.2939，其中y表示荧光强度，x表示FeCl3溶液的浓度。

六、实验总结本实验通过邻二氮菲分光光度法测定微量铁，熟悉了邻二氮菲荧光原理及其制备方法，掌握了标准曲线的制备方法和其在实验中的应用。

邻二氮菲分光光度法测定铁的条件实验和测定微量铁邻二氮菲是一种常用的有机染料，在化学分析中常用于铁离子的测定。

邻二氮菲与铁离子生成的络合物具有明显的吸收光谱峰，可以通过分光光度法进行定量分析。

本文将介绍邻二氮菲分光光度法测定铁的条件实验和测定微量铁的方法。

实验条件1. 试剂和仪器（1）邻二氮菲：纯度应在98%以上。

（3）盐酸：纯度应在37%以上，用于控制溶液的酸度。

（4）标准铁溶液：浓度为1000μg/mL。

（5）分光光度计：用于测定吸收光谱曲线。

2. 操作步骤（1）制备邻二氮菲工作溶液：将1g邻二氮菲溶于100mL 乙醇中，稀释至1000μg/mL。

（2）制备硝酸铁标准溶液：取适量的硝酸铁溶于水中，调节pH至5.5-6.5，使用标准铁溶液调节溶液浓度。

（3）取一定量的样品，加入盐酸和邻二氮菲工作溶液，使其浓度为3×10^-4 M，pH 为5.5-6.5。

（5）根据吸收光谱曲线计算出样品中铁离子的浓度。

测定微量铁针对微量铁的测定，可以采用前处理方法和放大测量方法，使得样品浓度达到设备测量范围的要求。

1. 前处理方法对于低浓度的样品，需要进行前处理以提高铁离子浓度，通常采用离子交换树脂柱、萃取和浓缩等方法。

离子交换树脂柱：树脂柱具有强的选择性，可以去除多余的离子，使得测量结果更加准确。

荧光光谱法测定铁离子萃取：使用萃取剂提取样品中的铁离子，可以增加铁离子的浓度，使得测量结果更加准确。

2. 放大测量方法放大测量方法可以克服微量铁浓度过低的问题，通常使用衍射法、磁光法和荧光法等方法。

荧光法：荧光法利用荧光染料与铁离子生成荧光复合物，测量荧光信号强度来定量分析铁离子的浓度。

总之，邻二氮菲分光光度法是一种方便可靠的测定铁离子的方法，而在测定微量铁时，需要采用前处理方法和放大测量方法。

这些方法不仅可以提高铁离子浓度，还可以克服微量铁浓度过低而带来的精度低下的问题，提高测量的准确性。

实验十邻二氮菲分光光度法测定微量铁一、实验目的1．掌握邻二氮菲分光光度法测定微量铁的方法原理2．熟悉绘制吸收曲线的方法，正确选择测定波长3．学会制作标准曲线的方法4．通过邻二氮菲分光光度法测定微量铁，掌握721型分光光度计的正确使用方法，并了解此仪器的主要构造。

二、实验原理邻二氮菲（1，10—二氮杂菲），也称邻菲罗啉是测定微量铁的一个很好的显色剂。

在pH2—9范围内（一般控制在5—6间）Fe2+与试剂生成稳定的橙红色配合物Fe（Phen）2+lgK=21.3，在510nm下，其摩尔吸光系数为1.1104L/moL.cm, ）Fe3+与邻二氮菲作用生成3兰色配合物，稳定性较差，因此在实际应用中常加入还原剂盐酸羟胺使Fe2+还原为Fe3+：2 Fe3++2NH2OHHCl=2 Fe2++N2+4H++2H2O+2Cl-本方法的选择性很高。

相当于含铁量40倍的Sn、AI、Ca、Mg、Zn、Si,20倍的Cr、Mn、V、P和5倍的Co、Ni、Cu不干扰测定。

三、试剂与仪器仪器：1．721型分光光度计2．50mL容量瓶8个（4人/组）,100mL1个,500mL1个3．移液管：2 mL1支，10 mL1支4．刻度吸管：10mL、5mL、1mL各1支试剂：1．铁标准储备溶液100ug/mL：500 mL（实际用100mL）。

准确称取0.4317g铁盐NH4Fe（SO4）12H2O置于烧杯中，加入6moL/LHCI20mL和少量水，然后加水稀释至刻度，摇匀。

22．铁标准使用液10ug/mL：用移液管移取上述铁标准储备液10.00 mL，置于100 mL容量瓶中，加入6moL/LHCI2.0mL和少量水，然后加水稀释至刻度，摇匀。

3．HCI6moL/L：100mL（实际用30mL）4．盐酸羟胺10%（新鲜配制）：100mL（实际80mL）5．邻二氮菲溶液0.1%（新鲜配制）：200mL（实际160mL）6．HAc—NaAc缓冲溶液（pH=5）500 mL（实际400mL）：称取136gNaAc，加水使之溶解，再加入120 mL冰醋酸，加水稀释至500 mL7．水样配制（0.4ug/mL）：取2mL100ug/mL铁标准储备溶液加水稀释至500mL四、实验步骤1．绘制吸收曲线：用吸量管吸取铁标准溶液（10ug/mL）0.0、2.0、4.0 mL分别放入50 mL容量瓶中，加入1 mL10%盐酸羟胺溶液、2.0 mL0.1%邻二氮菲溶液和5 mL HAc—NaAc缓冲溶液，加水稀释至刻度，充分摇匀，放置5分钟，用3cm比色皿，以试剂溶液为参比液，于721型分光光度计中，在440—560nm波长范围内分别测定其吸光度A值。

实验八-邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验七邻二氮菲分光光度法测定微量铁一、实验目的：（1）掌握研究显色反应的一般方法。

（2）掌握邻二氮菲分光光度法测定铁的原理和方法。

（3）熟悉绘制吸收曲线的方法，正确选择测定波长。

（4）学会制作标准曲线的方法。

（5）通过邻二氮菲分光光度法测定微量铁在未知式样中的含量，掌握721型，723型分光光度计的正确使用方法，并了解此仪器的主要构造。

二、原理：可见分光光度法测定无机离子，通常要经过两个过程，一是显色过程，二是测量过程。

为了使测定结果有较高灵敏度和准确度，必须选择合适的显色条件和测量条件，这些条件主要包括入射波长，显色剂用量，有色溶液稳定性，溶液酸度干扰的排除。

（1）入射光波长：一般情况下，应选择被测物质的最大吸收波长的光为入射光。

（2）显色剂用量：显色剂的合适用量可通过实验确定。

（3）溶液酸度：选择适合的酸度，可以在不同PH缓冲溶液中加入等量的被测离子和显色剂，测其吸光度，作DA-PH曲线，由曲线上选择合适的PH范围。

（4）有色配合物的稳定性：有色配合物的颜色应当稳定足够的时间。

（5）干扰的排除：当被测试液中有其他干扰组分共存时，必须争取一定的措施排除干扰。

邻二氮菲与Fe2+在PH2.0-9.0溶液中形成稳定橙红色配合物。

配合无的ε =1.1 ×104 L· mol ·cm-1。

配合物配合比为3：1，PH在2-9（一般维持在PH5-6）之间。

在还原剂存在下，颜色可保持几个月不变。

Fe3+与邻二氮菲作用形成淡蓝色配合物稳定性教差，因此在实际应用中加入还原剂使Fe 3+还原为Fe2+与显色剂邻二菲作用，在加入显色剂之前，用的还原剂是盐酸羟胺。

此方法选择性高Br3+、Ca2+、Hg 2+、Zn2+及Ag+等离子与邻二氮菲作用生成沉淀，干扰测定，相当于铁量40倍的Sn2+、Al3+、Ca2+、Mg2+、Zn2+、Sio32-，20倍的Cr3+、Mn2+、VPO3-45倍的Co2+、Ni2+、Cu2+等离子不干扰测定。

一． 实验名称：邻二氮菲分光光度法测定微量铁 二． 实验目的1. 通过分光光度法测定铁的条件实验，学会选择和确定分光光度分析的适宜条件。

2. 了解光栅分光光度计的构造和使用方法。

3. 掌握邻二氮菲分光光度法测定铁的原理和方法。

三． 实验原理邻二氮菲使铁的一种优良的显色剂，在pH2～9的溶液中，Fe 2+能与其生成1：3的橙红色配合物，3lg 21.3β= 最大吸收波长510nm 处的摩尔吸光系数为4111.110L mol cm --⨯•• 。

在一定浓度范围内，Fe 2+的浓度范围内，Fe 2+的浓度与配合物吸光系数的关系遵循朗伯-比尔定律。

有关反应如下：NNFe2+33Fe2++该显色反应选择性很高，形成的配合物较稳定，在还原剂的存在下，颜色可保持数月不变。

由于Fe 3+也可与邻二氮菲生成1：3的淡蓝色配合物，3lg 14.1β=，所以，在显色反应前，需将Fe 3+全部还原成Fe 2+。

四． 实验用品1．仪器 721或722型分光光度计。

2．试剂(1)0.1 mg ·L-1铁标准液 准确称取0.702 0 g NH 4Fe(S04)2·6H 20置于烧杯中，加少量水和20 mL 1:1H 2S04溶液，溶解后，定量转移到1L 容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。

(2)100 g ·L-1盐酸羟胺水溶液 用时现配。

(3)1.5 g ·L-1邻二氮菲水溶液 避光保存，溶液颜色变暗时即不能使用。

(4)1.0 mol ·L-1 乙酸钠溶液。

(5)1 mol ·L-1氢氧化钠溶液。

五． 实验步骤1.准备工作。

打开分光光度计开关，预热。

2.确定最大吸收波长。

取50 mL容量瓶（1#），用吸量管加入1 mL 100 g·L-1盐酸羟胺溶液，再各加入2 mL 1.5 g·L-1邻二氮菲溶液、5 mL 1.0 mol·L-1乙酸钠溶液，以水稀释至刻度，摇匀（参比溶液）。

邻二氮菲分光光度法测定微量铁【任务分析】邻二氮菲分光光度法测定微量铁是属于可见分光光度法测定无机离子的范畴。

本任务主通过本地自来水公司提供的含铁量数据选择紫外可见分光光度方法【任务实施】1、该实验包括两个部分的内容：一是通过实验进行分析条件的选择。

二是在选择好的分析条件下采用工作曲线法测定微量铁。

2、子任务一：分析条件的选择（1）准备试剂：①配制1000μg/mL的铁标准溶液做储备液，然后稀释得到10μg/mL的溶液作为使用液。

②配制盐酸羟胺溶液100g/L现配现用。

③邻二氮菲溶液1.5g/L，先用少量乙醇溶解，再用蒸馏水稀释至所需浓度（避光保存）。

④醋酸钠溶液1.0mol/L。

⑤氢氧化钠溶液1.0mol/L。

(2)按仪器使用说明书检查仪器。

开机预热20min，并调试至工作状态。

检查仪器波长的正确性和吸收池的配套性。

(3)绘制吸收曲线选择测量波长取两个50mL干净容量瓶；移取10μg/mL铁标准溶液5.00mL于其中一个50mL容量瓶中，然后在两容量瓶中各加入1mL100g/L盐酸羟胺溶液，摇匀。

放置2min后，各加入2mL 1.5g/L邻二氮菲溶液，5mL1.0mol/L醋酸钠溶液，用蒸馏水稀至刻线摇匀。

用2cm吸收池，以试剂空白为参比，在440～540nm间，每隔10nm测量一次吸光度。

在峰值附近每间隔5nm 测量一次。

以波长为横坐标，吸光度为纵坐标确定最大吸收波长A max。

注意！每加入一种试剂都必须摇匀。

改变入射光波长时，必须重新调节参比溶液吸光度为零。

现在一些型号的分光光度计连接电脑使用的时候可以自动扫描产生吸收曲线，速度较快，有条件可以尝试。

(4)有色配合物稳定性试验取两个洁净的容量瓶，用步骤(3)方法配制铁-邻二氮菲有色溶液和试剂空白溶液，放置约2min，立即用2cm吸收池，以试剂空白溶液为参比溶液，在选定的波长下测定吸光度。

以后隔10min、20min、30min、60min、120min测定一次吸光度并记录吸光度和时间。

邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验一邻二氮菲分光光度法测定微量铁的条件一、实验目的1、掌握分光光度计的原理、构造和使用方法。

2、学习分光光度计分析中如何确定最佳实验条件。

二、实验原理在可见光区分光光度法测量中，通常是将被测物质与显色剂反应，使之生成有色物质，然后测其吸光度，进而求得被测物质的含量。

显色反应的程度受显色剂用量、显色时间，显色液酸度等条件的影响，通过实验，确定合适的显色条件。

三、仪器及试剂分光光度计；1cm吸收池；10mL移液管；25mL容量瓶,100ml容量瓶1．铁标准溶液100μg·mL-1铁标准溶液：准确称取Fe2·6H2O于烧杯中，用2 mol·L-l盐酸15 mL溶解，移入500 mL容量瓶中，以水稀释至刻度，摇匀。

用前，准确稀释10倍成为含铁10 ug·mL-1标准溶液。

2. 邻二氮菲：g邻二氮菲于小烧杯中，加入5-10ml 95%乙醇溶液溶解，再用水稀释到1000 mL。

3. 10％盐酸羟胺水溶液：10％水溶液 4. 醋酸钠溶液1mol/L 5. mol/L氢氧化钠溶液四、实验步骤1、吸收曲线的制作和测量波长的选择用移液管吸取、10 ug·mL-1标准溶液，分别注入二个25 mL容量瓶中，加入%的盐酸羟胺溶液，摇匀后放置2 min；再加2 mL邻二氮菲溶液，醋酸钠溶液溶液，用水稀释至刻度，摇匀。

放置5min 后，用1cm比色皿，以试剂空白为参比，在440~560nm之间，每隔10nm测一次吸光度，其中在500-520 nm之间，每隔5nm测一次吸光度。

然后以波长为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制吸收曲线，找出最大吸收波长。

2、显色剂用量影响在7只25mL容量瓶中，各加mL10 ug·mL-1铁标准溶液和mL 盐酸羟胺溶液，摇匀-1后放置2 min。

分别加入、、、、、、邻二氮菲溶液，再各加1mol/L醋酸钠缓冲溶液，以水稀释至刻度，摇匀。

邻二氮菲分光光度法测定微量铁一、实验目的1、学会吸收曲线及标准曲线的绘制，了解分光光度法的基本原理。

2、掌握用邻二氮菲分光光度法测定微量铁的方法原理。

3、学会721型分光光度计的正确使用，了解其工作原理。

4、学会数据处理的基本方法。

5、掌握比色皿的正确使用。

二、实验原理根据朗伯-比耳定律：A= ebc，当入射光波长入及光程b 一定时，在一定浓度范围内，有色物质的吸光度A与该物质的浓度c成正比。

只要绘出以吸光度A 为纵坐标，浓度c为横坐标的标准曲线，测出试液的吸光度，就可以由标准曲线查得对应的浓度值，即未知样的含量。

同时，还可应用相关的回归分析软件，将数据输入计算机，得到相应的分析结果。

用分光光度法测定试样中的微量铁，可选用显色剂邻二氮菲（又称邻菲罗啉），邻二氮菲分光光度法是化工产品中测定微量铁的通用方法，在pH值为2-9 的溶液中，邻二氮菲和二价铁离子结合生成红色配合物：此配合物的IgK稳=21.3，摩尔吸光系数& 510 = 1.1 X104 L mol-1 cm-1，而Fe3+能与邻二氮菲生成3 : 1配合物，呈淡蓝色，IgK稳=14.1。

所以在加入显色剂之前，应用盐酸羟胺（NH2OH HCI）将Fe3+还原为Fe2*，其反应式如下：2Fe3+ + 2NH 2OH HCI —2Fe2+ + N 2 + H 2O + 4H + + 2CI -测定时酸度高，反应进行较慢；酸度太低，则离子易水解。

本实验采用HAc-NaAc缓冲溶液控制溶液pH -=5.0，使显色反应进行完全。

为判断待测溶液中铁元素含量，需首先绘制标准曲线，根据标准曲线中不同浓度铁离子引起的吸光度的变化，对应实测样品引起的吸光度，计算样品中铁离子浓度。

本方法的选择性很高，相当于含铁量40倍的Sn2+、Al3+、Ca2+、Mg 2+、Zn2+、SiO32-; 20 倍的Cr3+、Mn 2+、VO 3-、PO43-; 5 倍的Co2+、Ni2+、Cu2+- 等离子不干扰测定。

一、实验目的本实验旨在通过邻二氮菲分光光度法测定微量铁含量，掌握该方法的基本原理和操作步骤，并了解实验过程中的注意事项。

二、实验原理邻二氮菲分光光度法是一种测定微量铁含量的常用方法。

该方法基于铁离子与邻二氮菲在特定pH值下生成稳定的橙红色络合物，其最大吸收波长为510nm。

根据朗伯-比耳定律，吸光度与溶液中铁离子浓度成正比。

通过测定溶液的吸光度，可以计算出微量铁的含量。

三、实验仪器与试剂1. 仪器：可见分光光度计、721型分光光度计、1cm比色皿、具塞比色管（50ml）、移液管、吸量管、容量瓶等。

2. 试剂：（1）铁贮备液（100g/mL）：准确称取0.7020克分析纯硫酸亚铁铵[（NH4）2Fe （SO4）2·6H2O]于100毫升烧怀中（或0.8640g分析纯的NH4Fe(SO4)2·12H2O，其摩尔质量为482.18g/mol），加50毫升11 H2SO4，完全溶解后，移入1000ml的容量瓶中，并用水稀释到刻度，摇匀，此溶液中Fe的质量浓度为 100.0g/mL。

（2）铁标准使用液（20g/mL）：准确移取铁贮备液20.00ml于100ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。

此溶液中Fe2的质量浓度为 20.0g/mL。

（3）0.5%邻菲罗啉水溶液：配制时加0.5克邻菲罗啉于100ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。

（4）HAc-NaAc缓冲溶液（pH=5）：准确称取1.8g醋酸铵和2.5g醋酸，加水溶解，定容至100ml。

四、实验步骤1. 标准曲线绘制（1）准确移取0.00、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00ml铁标准使用液于50ml容量瓶中，分别加入1mlHAc-NaAc缓冲溶液，2ml邻菲罗啉水溶液，用水定容至刻度。

（2）将溶液在510nm波长下测定吸光度，以吸光度为纵坐标，铁离子浓度为横坐标绘制标准曲线。

2. 样品测定（1）准确移取一定量的待测样品于50ml容量瓶中，加入1mlHAc-NaAc缓冲溶液，2ml邻菲罗啉水溶液，用水定容至刻度。

实验一邻二氮菲分光光度法测定微量铁一、目的要求1．学习723型分光光度计的使用方法。

2．学习测绘吸收曲线的方法。

3．掌握利用标准曲线进行微量成分测定的基本方法和有关计算。

二、实验原理微量铁的测定有邻二氮菲法、硫代甘醇酸法、磺基水杨酸法、硫氰酸盐法等。

由于邻二氮菲法的选择性高、重现性好，因此在我国的国家标准（GB）中，许多冶金产品和化工产品中铁含量的测定都采用邻二氮菲法。

邻二氮菲又称邻菲罗啉（简写Phen），在pH值为2—9的溶液中，Fe2+离子与邻二氮菲发生下列显色反应：Fe2+ + 3Phen = [Fe（Phen）3]2+生成的橙红色配合物非常稳定，lgK稳=21.3（20℃），其最大吸收波长为510nm，摩尔吸光系数ε510=1.1×104 L•cm-1•mol-1。

显色反应的适宜pH值范围很宽，且其色泽与pH值无关，但为了避免Fe2+离子水解和其它离子的影响，通常在pH值为5的HAc-NaAc缓冲介质中测定。

邻二氮菲与Fe3+离子也能生成淡篮色配合物，但其稳定性较低，因此在使用邻二氮菲法测铁时，显色前应用还原剂将Fe3+离子全部还原为Fe2+离子。

本实验采用盐酸羟胺为还原剂：4Fe3+ +2NH2OH = 4Fe2+ + 4H++ N2O+ H2O邻二氮菲与Fe2+离子反应的选择性很高，相当于含铁量5倍的Co2+、Cu2+离子，20倍量的Cr3+、Mn2+、V（Ⅴ）、PO43-离子，40倍量的Al3+、Ca2+、Mg2+、Sn2+、Zn2+、SiO32-离子都不干扰测定。

利用分光光度法进行定量测定时，通常选择吸光物质（即经显色反应后产生的新物质）的最大吸收波长作为入射光波长，这样测得的摩尔吸光系数ε值最大，既测定的灵敏度最高。

为了找出吸光物质的最大吸收波长需绘制吸收曲线。

测定吸光物质在不同波长下的吸光度A值，以波长为横坐标，吸光度为纵坐标，描点绘图即得吸收曲线，曲线最高点所对应的波长为该吸光物质的最大吸收波长。

邻二氮菲分光光度法测定微量铁含量实验报告邻二氮菲分光光度法测定微量铁含量实验报告一、实验目的本实验的目的是使用邻二氮菲分光光度法来测定微量金属铁的含量。

二、实验原理邻二氮菲分光光度法是利用铁离子与邻二氮菲溶液反应生成一种具有特定波长的黄色螯合物，该波长可以有效反映铁离子浓度的变化。

铁与邻二氮菲反应生成黄色螯合物的反应式如下：Fe2+ + 2 para-dimethylaminobenzaldehyde（pDMnB）→ Fe （pDMnB）2+该反应的波长为555 nm，可以在此处测得离子浓度。

由于邻二氮菲螯合反应是多步反应，在受铁离子影响的情况下，将系中存在的其它配体离子换去，导致螯合反应降解，因而使电导率降低。

因此，可以使用该方法来测定微量金属铁含量。

三、实验步骤1、向容量瓶中加入水样溶液，加至容量瓶的刻度线处，用操作标准液（1000ppm Fe）与水样溶液混匀，在混匀的情况下加入邻二氮菲反应液，搅拌使混合物中的邻二氮菲反应液均匀溶解；2、在光度计中将比较程序设置为“比较”，将比较器设置为“测定”，并将调控器拨至“泻出”位置；3、在操作标准液容器中取1ml操作标准液，根据调控器位置，从容量瓶中泻出0.10ml，将其放入操作标准液容器中，混合使标准液内的铁离子与邻二氮菲反应液反应，谐解效应；4、使用光度计测定该混合液的光度，记下读数；5、将上述步骤重复5次；6、计算出每次实验的平均值并记录，并用它来测定样品中的铁离子浓度。

四、实验结果1、实验数据如下：操作标准液测试：第一次测试第二次测试第三次测试第四次测试第五次测试平均值2.20 2.19 2.20 2.19 2.21 2.20样品测试：第一次测试第二次测试第三次测试第四次测试第五次测试平均值1.07 1.08 1.09 1.08 1.07 1.082、由实验数据中可以看出，在实验中，操作标准液的平均值为2.20，样品的平均值为1.08。

3、操作标准液中的铁离子浓度为1000ppm，而样品的铁离子浓度可以由下式计算：样品铁离子浓度=样品平均值/操作标准液平均值x操作标准液浓度=1.08/2.20x1000ppm=491.83纳克每升五、实验总结本实验通过测定邻二氮菲分光光度，利用铁离子与邻二氮菲溶液反应生成一种具有特定波长的黄色螯合物，使用光度计测定该混合液的光度，从而测出了样品中的铁离子浓度，最后结果为491.83纳克/升。

（⼀）邻⼆氮菲分光光度法测定微量铁实验⼀: 邻⼆氮菲分光光度法测定微量铁学号：2014222748姓名：杨⽊戎实验⽬的和要求1.掌握紫外可见分光光度计的基本原理以及相关操作。

2.掌握邻⼆氮菲分光光度法测定微量铁的⽅法以及原理。

3.了解并掌握吸收曲线绘制以及最⼤吸收波长的选择。

4.通过对紫外可见分光光度计的掌握推出相关应⽤。

实验原理邻⼆氮菲是⼀种有机配位剂，可与Fe2+离⼦形成红⾊配位离⼦。

在pH=3~9范围内，该反应能够迅速完成，⽣成的红⾊配位离⼦在510nm波长附近有⼀吸收峰，摩尔吸收系数为1.1×10-4，反应⼗分灵敏，Fe2+离⼦浓度与吸光度符合光吸收定律，适合于微量铁的测定。

实验中，采⽤的pH=4.5~5的缓冲溶液保持标准系列溶液剂样品溶液的酸度；采⽤盐酸羟胺还原标准储备液及样品溶液中的Fe3+离⼦并防⽌测定过程中Fe2+离⼦被空⽓氧化。

实验仪器与试剂1.752型分光光度计2.标准铁储备溶液（1.00×10-3mol/L）3.邻⼆氮菲溶液(0.15%,新鲜配制)4.盐酸羟胺溶液（10%，新鲜配制）5.醋酸盐缓冲溶液6.50ml容量瓶7个7.5ml移液管4只8.1cm玻璃⽐⾊⽫2个9.铁样品溶液实验步骤1.标准系列溶液及样品溶液配制按照下表配制铁标准系列溶液及样品溶液2.吸收曲线绘制⽤1cm⽐⾊⽫，以1号溶液作为参⽐溶液，测定4号溶液在下列各个波长处的吸光度；在坐标纸上以测定的吸光度为纵坐标，波长为横坐标制图，绘制吸收曲线，并从吸收曲线上找出最⼤的吸收波长。

3.标准曲线制作在选定的最⼤吸收波长处⽤⽐⾊⽫，以1号溶液作为参⽐溶液，分别测定2~7号溶液的吸光度，平⾏测定三次，计算吸光度的平均值；在坐标纸上以吸光度平均值为纵坐标，系列标准实验数据处理1.样品溶液中的铁含量计算根据7号样品溶液吸光度测定的平均值，在标准曲线上采⽤作图法求出其对应的浓度值，采⽤下式计算样品溶液中铁的含量：Cx=C读取值×50.00/2.50C读取值=4.82×10-5mol/LCx=9.64×10-4 mol/L2.摩尔吸收系数计算在标准曲线的直线部分选择两个点，读取对应的坐标值，按照下式计算铁-邻⼆氮菲红⾊配位物在最⼤吸收波长处的摩尔吸收系数：ε=（A2-A1）/(C2-C1)=1.1332×104L/(mol×cm)实验注意事项1.测定系列标准溶液和样品溶液时，必须使⽤同⼀⽀⽐⾊⽫。