厚朴树叶中酚酸性物质的分离及研究

将 厚 朴 树 叶 粉 碎 成 粉 末 状 ， 称 取 粉 末 100.0g 于 2000mL 圆底烧瓶中，进行水蒸气蒸馏，蒸馏至不再有 馏分流出为止，将得到的残渣倒入干净水槽中，用澄清 石灰水调节溶液的酸度为 pH=12～13，每隔 1h 用玻璃
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棒搅拌 1 次，12h 之后，用纱布过滤，将滤液盛于另一 干净水槽中，用浓 HCl 调节滤液的 pH=2～3，静置过 夜，将残渣再倒回原水槽中，调节至原酸度。重复以上 操作三次，将所得滤液合并进行离心，转速为 4500r/min，离心 10min，得到厚朴粗品。将粗品在 50℃ 下烘干，在研钵中研磨成粉末，然后以 1∶1 比例与硅 胶混合均匀，用石油醚在 80℃进行索式提取至无色，最 后在 75℃下进行旋转蒸发，得到晶体。 1.3.2 厚朴树叶中挥发油的提取
gas chromatography. We can get the crude products of Magnolia officinalis by alkali dissolution and acid deposition
method and centrifuge；mix the crude products with silica gel in the ratio of 1 ∶1；extract the mixture till colorless
oils were Caryophyleneoxide (32.0%)，Phenol，4-[2-propenyl]- (25.01%)，2-Naphthalene，thand，decahydro，a，α，4a-
trimethyl-8-methylene-，[2r-[2a，4aa，8aβ]]（- 15.01%），Bicyclo[2，2，1]heptan-2-ol，1，7，7-trimethyl-，[1s-endo]- (12.01%).
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厚朴树叶中酚酸性物质的分离及研究
张晓琦，田光兰
（陕西理工学院化学与环境科学学院，陕西 汉中 723000）
摘 要：以陕南秦巴山区干燥的厚朴树叶为原料，提取树叶中的厚朴酚与和厚朴酚，并分离出挥发油，分析挥发油的 组成。利用水蒸气蒸馏法提取挥发油，采用 GC-MS 联用技术对厚朴挥发油的组分进行分离和鉴定，利用气相色谱面 积归一化法确定各组分的相对含量；利用碱提酸沉法、离心后获得厚朴酚类物质粗品，然后与硅胶按 1∶1 比例混合 均匀，用石油醚进行索氏提取至无色，经旋转蒸发仪旋转得到厚朴酚晶体。从厚朴叶挥发油中鉴定出 41 种化合物， 并将厚朴粗品经精制后，测得厚朴酚的熔点为 101℃，和厚朴酚的熔点为 86℃。厚朴叶挥发油中含量较高的组分为 β—氧化石竹烯（32.0%），4—丙烯基苯酚（25.01%），喇叭醇（15.01%），龙脑香（12.01%）等。分离得到了较纯的起主要 药用作用的化合物 5，5′—二烯丙基—2，2′—联苯二酚（厚朴酚）和 5，3′—二烯丙基 -2，4′—联苯二酚（和厚朴酚）。 关键词：厚朴；挥发油；气相色谱—质谱法；抗菌活性；厚朴酚
中的抑菌物质为厚朴酚与和厚朴酚[16]，二者抑菌活性相
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当，因此开发成药效高、价值高的农药植物指日可待。 经熔点测定仪测定厚朴酚的熔点是 101℃，和厚朴酚的 熔点是 86℃。
OH
HO
OH
H2C CH2
OH
图 1 厚朴酚与和厚朴酚的结构式
Байду номын сангаас
Fig.1 Structural formula of Magnolol and Honokiol
年
2014
2 结果与分析
第
17
卷
2.1 厚朴树叶酚类物质的测定结果
厚朴酚与和厚朴酚是一对同分异构体，如图 1 所示
第
是厚朴酚与和厚朴酚的分子结构式，经崔乘幸等活性实
10
验研究表明厚朴酚类物质有很好的药理作用[2]。章观德
期
实验证明了厚朴酚、和厚朴酚对突变链球菌有很强的抑
制作用[1]，王海曼等人也进一步研究证实厚朴叶粗提物
1 材料与方法
1.1 材料与试剂 厚朴树叶 陕南秦巴山区 （由陕西理工学院生物科
学与工程学院赵桦教授鉴定和确认，是药用植物厚朴 （Magnolia officinalis Rehd. et Wils）. 的 树 叶）， 低 温 烘 干，粉碎，封闭保存。 1.2 仪器与设备
FINNIGAN DSQII 型 GC/MS 仪 美国热电公司； 气 象 色谱 美 国 安 捷 伦 利 科 技 有 限 公 司 ；Alilent GC 6890N FID 检测器；RE-52B 旋转蒸发器 上海亚荣生 化仪器厂；101 型电热鼓风干燥箱 北京科伟永兴仪器 有限公司；X—显微熔点测定仪 北京泰克仪器有限公 司；8002 型水浴锅；AL-204-IC 电子天平 梅特勒—托 利多仪器 （上海） 有限公司；水蒸气蒸馏装置 天津化 玻仪器厂；LD5-10 低速离心机 北京京立离心机有限 公司；FW177 型中草药粉碎机 天津市泰斯特仪器有限 公司。 1.3 方法 1.3.1 厚朴树叶中酚类物质的分离与鉴定
将水蒸气蒸馏所得的馏分用乙醚瓶收集，加过量氯 化钠饱和，待溶液澄清后，用乙醚进行萃取三次，把萃 取液合并于另一干净瓶中，再加无水硫酸钠干燥过夜。 每瓶馏分都重复上述操作。然后蒸馏回收乙醚，得到有 清香气味油状物，即黄绿色的厚朴挥发油 0.8g，得油率 0.8%，最后进行挥发油的 GC-MS 分析。 1.3.3 厚朴叶挥发油的 GC-MS 分析条件 1.3.3.1 气相色谱条件
The Separation and Analytical Study of Phenolic Compounds from the Leaves of Magnolia Officinalis
ZHANG Xiao-qi，TIAN Guang-lan （Shaanxi Institute of Chemistry and Environmental Science，Hanzhong 723000，China）
2.2 厚朴树叶挥发油的 GC-MS 分析结果 厚朴树叶挥发油的 GC-MS 分析谱图如图 4 所示，
厚朴树叶挥发油的 GC-MS 分析结构列于表 1，可见从 厚朴树叶挥发油中鉴定出 41 种组分，由 GC-MS 分析计 算机自动积分统计得出各组分的相对含量，含量较高的 组 分 为 β—氧 化 石 竹 烯 （32.0%）， 4—丙 烯 基 苯 酚 （25.01%），喇叭醇 （15.01%），龙脑香 （12.01%），顺— Z—α—氧化红没药烯 （8.48%），乙酸龙脑酯 （4.51%） 等，占检出物的 97.02%。
收稿日期：2014-09-17 作者简介：张晓琦（1992—）女，研究方向为天然产物化学。Email:15891676691@
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比较多[7-9]。厚朴为落叶乔木，是重要的林业资源，多年 生，生长周期长，一般要十多年才能供剥皮药用；现今 厚朴药材的来源是伐树剥皮，为掠夺式取材，不利于环 境。然而，厚朴叶含有厚朴的主要有效成分，即厚朴酚 与和厚朴酚等，而且厚朴叶资源丰富，叶中含有多种生物 活性物质，如果人们能充分开发和利用厚朴树叶资源[10-12]， 将会带来很大的经济效益和社会效益。翻阅记载文献我 们知道，厚朴是一种极为重要的中药材。人们熟知的厚 朴三物汤、平胃散、大承气汤、四七汤和栀子厚朴汤中 都含有生药厚朴；2005 版的 《中国药典》 I 部中有包括 藿香正气水、香砂养胃丸、开胸顺气丸、柴胡舒肝丸等 二十多个常用中成药的主要原料药均含厚朴。现代药理 学研究表明，厚朴具有抗菌、抗病毒、抗过敏、影响胃 肠活动、肌肉松弛和中枢抑制等作用。为了利用厚朴叶 中的生物活性成分，本实验采用水蒸气蒸馏法分离出厚 朴酚类物质，并提取出挥发油，用气相色谱—质谱联用 技术对其挥发油组分进行分离和鉴定，运用气相色谱面 积归一化法确定各组分的相对含量，利用碱提酸沉法、 离心、索氏提取和旋转蒸发后获得厚朴酚与和厚朴酚晶 体。
products by petroleum ether；obtain Magnolo crystal through rotary evaporators. 41 components were identified from
the volatile oils. The melting point of Magnolol is 101℃，and the Honokiol 86℃. The main constituents of the volatile
Abstact: Using the dry leaves of Magnolia officinalis as raw material，Magnolol and Honokiol were extracted from the
leaves， and volatile oils of Magnolo and Honokiol were separated and analyzed. We took measures of steam
distillation to extract the volatile oils. The components of the volatile oils were separated and structurally identified by
GC-MS. The relative contents of these components were determined by the peak-area normalization method adopted in
DB-5 弹性石英毛细管柱 （0.25mm×30m，0.25um）， 载气为高纯度的 He，以横流模式流量 1.84/min。升温程 序：柱温 50～280℃，初始温度为 50℃，保持 2min，以 5℃/min 程序升温至 100℃，再以 8℃/min 程序升温到 180℃，保持 5min，以 10℃/min 程序升温至 280℃，进 样量为 0.5μL。 1.3.3.2 质谱条件