精子形态学染色液(巴氏法)
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巴氏染色液说明书【产品名称】巴氏染色液【产品名称】巴氏染色液PAP Staining Solutions【产品编号】PAP-500ml,PAP-1000ml,PAP-2500ml【包装规格】苏木素染色液500ml、1000ml 2500ml;橘黄G6染色液500ml、1000ml 2500ml;EA50染色液500ml、1000ml 2500ml。
【预期用途】主要用于对脱落细胞的组织细胞学染色。
【检验原理】巴氏染色液由3部分组成:苏木素染色液、橘红G6染色液和EA50染色液。
苏木素染色液,是一种针对正常以及变态细胞学涂片染料,对核膜、核质、核仁染色效果非常清晰。
涂片标本可是妇科或非妇科的,如痰液,尿液及细胞学穿刺样本。
为获得优质的染色效果,苏木素染液技术完全按照帕氏染色法,以及OG-6染液;EA 31染液;同时供应选择性多色复染染料,如EA50试剂;EA65试剂,满足细胞学染色需求。
橘黄G6染色液,是橘黄G (Orange G) 染料添加磷酸(PMA)后的酒精溶液。
Papanicolaou染色,首先用苏木素将细胞核染色,之后用OG-6 试剂和EA试剂继续染色。
橘黄G染料对细胞质染色,并保持在成熟细胞和角质化细胞。
之后的EA试剂对未染色的细胞组分染色,如鳞状细胞,核仁,纤毛,红细胞。
测试样本可为妇科细胞样本和非妇科细胞样本,如痰液,尿液,细胞穿刺等。
为获得优质的染色效果,OG-6试剂特性与其他用于Papanicolaou染色法中染色试剂-苏木素试剂,EA 31试剂,及对比染色试剂EA50试剂,EA65试剂相符。
EA50染色液,为伊红Y和亮绿SF酸(加入了磷钨酸,PTA)染液的酒精溶液。
Papanicolaou染色,首先用苏木素将细胞核染色,之后用OG-6 试剂和EA试剂继续染色。
橘黄G染料对细胞质染色,并保持在成熟细胞和角质化细胞。
之后的EA试剂对未染色的细胞组分染色,如鳞状细胞,核仁,纤毛,红细胞。
巴氏染色巴氏(Papanicolaou)染色法是脱落细胞染色中最好的染色方法。
其适用于上皮细胞及间皮组织的标本。
是阴道脱落细胞检查中最常用的染色方法。
该染色法不但具有显示细胞核结构清晰,分色明显,透明度好,胞浆受色鲜艳等特点,而且所染标本不易脱色,可长久保存。
对如何染好巴氏染色,笔者有以下几点体会,报告如下。
1 EA 36染液pH值的测试EA 36染液的酸碱度对巴氏染色的成功起着关键性作用,EA 36染液由伊红、亮绿、桔黄及俾麦棕等染料配成。
伊红、亮绿、桔黄及俾麦棕等属于酸性染料。
在溶媒中其发色团是负离子部分。
发色团可与蛋白质中带正电的氨基结合,从而使胞浆显蓝色、绿色、桔黄色或红色。
但蛋白质所带正负电荷的多少是随溶液的pH值而改变的。
在偏碱环境中,蛋白质的羧基游离增多(带负电)。
在偏酸环境中蛋白质氨基游离增多(带正电)。
所以必须把染液pH值调至5.2为宜[1]。
EA 36染液pH的调节,可用石蕊试纸法,也可用酸度计测试。
当然用酸度计法最为准确。
但以上方法均比较麻烦,同时还要受到仪器设备的限制,不方便。
本文采用一种简单方便的方法。
即用10%磷钨酸及饱和碳酸锂溶液直接测试。
具体做法是,拿一张滤纸先滴少量染液于纸上,若滴染液处呈紫色,说明染液偏碱,则滴加少量10%磷钨酸。
若显绿色,说明染液偏酸,则滴加少量饱和碳酸锂。
并充分混匀。
直至染液滴在纸上既显绿色又有红色,颜色鲜艳为宜。
用此法测试染液pH同用石蕊试纸法测试一样,同样可获得满意的染色效果。
磷钨酸在染色过程中,不但作为媒染剂可增加染料的着色力。
同时磷钨酸与碳酸锂还是一对弱酸弱碱,实际上是一对缓冲剂。
可中和分色及蓝化时可能留下的少量酸或碱。
保证染色达到理想效果。
2 分色分色或酸化,对染色效果也很重要。
分色目的是去掉胞浆中染上的多余的苏木素,使胞核着色显示特异性。
因此,经分色后的胞浆在镜下观察应无色为佳。
若胞浆中还残留有苏木素染料,会影响EA 36染液的着色。
精子形态检验报告1. 引言精子形态检验是男性生育力评估的重要指标之一,它描述了精子的外形和结构,对于评估男性生育能力和诊断不孕症起着至关重要的作用。
本文将对精子形态检验的方法、结果和临床意义进行详细介绍。
2. 检验方法精子形态检验通常采用经典的巴斯氏涂片染色法。
具体的操作步骤如下:1.取新鲜精液标本,约1-2毫升;2.将精液样本放置于离心管中,离心速度为3000转/分钟,离心时间约10分钟;3.倒掉上清液,留下沉淀;4.加入一定量的称量无毒巴斯氏染色溶液,用酸性醇溶液或碘胶清洗染色后,将沉淀再次离心;5.倒掉上清液,将染色后的精液沉淀挤入载玻片上,加入一滴背景液;6.覆盖玻片,使用显微镜进行观察;7.根据预定标准,对于所检测的100个精子,计算形态正常的精子比例。
3. 检验结果根据我们的检测结果,您的精子形态正常的比例为XX%,属于正常范围。
正常形态的精子应当具备头部和尾巴的完整结构,并且比例应在40%以上。
4. 临床意义精子形态异常可能意味着存在生殖系统疾病或其他不孕症原因。
常见的精子形态异常包括头部畸形、尾巴畸形、双头精子、无尾精子等。
精子形态异常对受精过程的影响多种多样,可能导致受精能力下降,从而影响夫妻受孕。
对于形态异常的发现,建议尽早咨询专业医师进行评估和治疗。
医生可能会根据具体情况建议辅助生殖技术,如体外受精或微孵化等,提高受孕成功率。
5. 注意事项•精子形态检验结果需要结合其他指标综合分析,不能单独作为判断不孕原因的唯一依据;•精子形态检验结果可能受多种因素影响,如抽烟、饮酒、药物使用等,请在检验前向医生咨询;•精子形态检验需要在专业的实验室进行,确保操作的准确性和结果的可靠性。
6. 结论精子形态检验是男性生育力评估的重要指标之一,正常形态比例对于受孕能力具有重要意义。
通过精子形态检验,可以提供辅助诊断和治疗不孕症的依据,判断男性生育能力,并为临床医生选择合适的治疗方法提供参考。
请用户一定要密切配合医生的建议,定期进行生育力的评估和检查,以提高受孕成功的机会。
1.目的用于测定人类精子形态。
2.范围适用于男性精子畸形率测定。
3.原理细胞中的细胞核是由酸性物质组成,它与碱性染料的亲和力较强;而细胞浆则相反,它含有碱性物质和酸性染料的亲和力较大。
巴氏染色液利用这一特性对细胞进行多色性染色,细胞经染色后能清晰地显示细胞的结构,胞质透亮鲜丽,各种颗粒分明,细胞核染色质非常清楚,从而较容易发现异常细胞。
通过巴氏染色可反映出细胞在炎症刺激下和癌变后的形态学变化,对早期发现和诊断一些病变和肿瘤具有较重要意义。
4.试剂4.1本试剂由珠海贝索生物技术有限公司提供【医疗器械生产企业许可证编号】粤食药监械生产许20010407号【医疗器械注册证书编号】粤珠食药监械(准)字2013第1400001号【产品标准编号】YZB/粤珠0010-2013【说明书批准日期】2013年1月23日4.2试剂盒组成应避免不同批次试剂盒中的各组分混用(型号EA36、EA50) 试剂组成规格 主要成分 苏木素(Harris )染液1vial ×250ml 苏木素 橘黄G 染液1vial ×250ml 橘黄G EA36染液或EA50染液1vial ×250ml 亮绿、曙红 4.3试剂储存及效期:4.3.1有效期:未开封试剂有效期为18个月,其中EA36染液,EA50染液最佳使用时间为启用后5个月内。
4.3.2储存条件:本试剂盒应贮存于相对湿度不大于80%,无腐蚀性气体和通风良好的5O C-30O C 室温环境。
题目:精子形态学巴氏染色标准操作规程 编号:JY-3-GC- 文件检审: 页数:3附件:0 发布部门:质量管理科首次发布日期:2015-08-01 版本号:02本版发布日期:2015-08-01拟定部门:检验科审核:分管院长批准:院长5.实验设备及材料5.1奥林巴斯CX31显微镜5.2精密移液器规格:5-50μl和200-1000μl5.3载玻片5.4生理盐水、盐酸5.5移液器吸头5.6酒精5.7染缸6.样本6.1采集方法:以手淫法采集禁欲2-7天精液于采样杯,注意收集完全。
巴氏染色原理
巴氏染色液的染色原理:
核酸等电点为PH1.5-2.0,当PH>2.0时,能结合带正电荷的苏木素。
染料中的伊红、亮绿、橙黄等为酸性染料,俾士麦棕为盐基性染料,能与细胞浆中相反电荷的蛋白质结合,从而染出鲜艳的结构。
细胞学常规染色普遍使用巴氏(Papanicolaou)法,橘黄G与EA36或EA50联合使用可将胞浆染成颜色鲜明的绿色、蓝色和粉色,细胞中的细胞核是由酸性物质组成,它与碱性染料的亲和力较强;而细胞浆则相反,它含有碱性物质和酸性染料的亲和力较大。
巴氏染色液正是利用这一特性对细胞进行多色性染色,细胞经染色后能清晰地显示细胞的结构,胞质透亮鲜丽,各种颗粒分明,细胞核染色质非常清楚,从而较容易发现异常细胞。
HE染色和巴氏染色两种不同方法在宫颈液基细胞检查中应用价值1. 引言1.1 背景介绍宫颈液基细胞检查是一种常见的癌症筛查方法,通过对宫颈细胞进行染色和观察,可以及早发现潜在异常细胞的存在,从而帮助医生及时进行治疗和干预。
而在宫颈液基细胞检查中,HE染色和巴氏染色是两种常用的染色方法。
HE染色是指用苏木精红染色液对细胞组织进行染色,然后通过镜检查细胞结构和形态的变化,从而判断细胞是否正常。
HE染色在宫颈液基细胞检查中具有较高的分辨率和清晰度,可以清晰显示细胞的核质比和细胞核的形态,有利于医生进行细胞学分析和诊断。
巴氏染色是一种特殊的染色方法,可以通过染色剂对细胞核进行染色,使异常细胞核在显微镜下呈现出特殊的形态和颜色。
巴氏染色在宫颈液基细胞检查中常用于检测细胞的DNA含量和核型,可以帮助医生判断细胞的恶性程度和预后。
HE染色和巴氏染色在宫颈液基细胞检查中发挥着重要的作用,它们可以相互补充,提高检测的准确性和灵敏度,为患者提供更准确的诊断和治疗方案。
1.2 研究目的研究目的是通过比较分析HE染色和巴氏染色两种不同方法在宫颈液基细胞检查中的应用价值,探讨它们在临床实践中的优劣势和适用范围。
具体来说,我们的研究目的包括以下几个方面:1. 比较HE染色和巴氏染色在宫颈液基细胞检查中的染色效果和细胞形态学分析的准确性,评估它们对细胞结构和形态的显现能力。
2. 探讨HE染色和巴氏染色在宫颈液基细胞检查中的操作流程和技术难易度,比较它们的操作成本和时间消耗。
3. 调查HE染色和巴氏染色在宫颈液基细胞检查中的临床应用情况和效果评价,探讨它们在筛查、诊断和预后评估等方面的作用及价值。
通过深入研究HE染色和巴氏染色在宫颈液基细胞检查中的不同应用价值,我们旨在为临床医生提供更具参考意义的细胞学诊断方法,促进宫颈疾病的早期发现和治疗,提高宫颈液基细胞检查的准确性和可靠性。
1.3 意义宫颈液基细胞检查是一种重要的筛查方法,可用于早期发现宫颈病变及癌变,对于提高宫颈癌的早期发现率和治疗效果具有重要意义。
什么是巴氏染色巴氏染色的操作方法巴氏染色有4个步骤,分别是固定、核染色、胞浆染色和透明,那么你对巴氏染色了解多少呢?以下是由店铺整理关于什么是巴氏染色的内容,希望大家喜欢!巴氏染色的操作方法及注意事项染色有4个步骤:1、固定;2、核染色;3、胞浆染色;4、透明。
主要达到以下要求:1、核的结构清晰;2、透明度高;3、分色恰当。
固定固定的目的细胞制片的迅速固定是制片过程中关键的一步,否则会影响细胞学诊断的准确性。
对于不同的标本需要不同的固定方法。
最为常用的固定方法是95%酒精作为固定液的湿固定法。
酒精作为一种脱水剂能够防止细胞内的酶捋蛋白质分解而自容,并凝固细胞内的物质如蛋白质、脂肪和糖类等,使其保持与组织生活相仿的成分,从而使细胞各部分,尤其核染色质易于着色。
对于巴氏染色来说,酒精固定最为重要的。
如果酒精浓度不足引起的固定不佳,可造成细胞的人为变化,并可导致假阳性或假阴性的诊断。
1、固定方法湿固定法:作为用95%酒精固定液固定的细胞学标本一定使用湿固定法。
制片制备完后,趁标本新鲜而又湿润时,立即放入盛有95%酒精的固定缸内。
制片在固定液内至少保持15-30min。
固定时间通常不超过1周。
这种制片染色后,颜色鲜艳,结构清晰。
如果细胞制片需要送至另一实验室或邮寄他处染色时,可以固定15min后,把制片取出后立即密封的容器中或者使用甘油防止制片干燥。
因为无论固定前或固定后的制片,如果发生干燥后都会影响染色的效果。
2、固定注意事项固定液的过滤:为了防止细胞污染,凡是使用过的固定液,必须过滤后才能再使用。
使用过长的固定液,必须用酒精相对密度计测定,酒精浓度低于90%时应该及时更换新液。
湿固定的重要性:标本再新鲜时及时固定时保证染色效果的重要因素。
如苏木素对细胞核的染色,巴氏染色中胞浆的特殊着色作用,均可因标本干燥后固定而大受影响。
制片标本的邮寄:标本再固定15min后取出,立即加甘油数滴于制片上,装入密封的小盒中。
精形态染色参考标准精形态染色参考标准是一种用于观察和研究细胞结构的方法,它能够帮助科学家们更好地理解和解释细胞内部的结构和功能。
本文将介绍精形态染色参考标准的原理、方法和应用,并探讨其在生物学领域中的重要性。
精形态染色参考标准是一种通过特定的染色剂对细胞进行染色,以便观察和研究细胞形态和结构的方法。
这种染色方法通常使用的染色剂有吉姆萨染色剂、伊红染色剂和苏木精染色剂等。
这些染色剂可以与细胞内的不同成分结合,形成可见的色素沉积,从而使细胞的结构更加清晰可见。
精形态染色参考标准的方法主要包括固定、染色和观察三个步骤。
首先,需要将细胞固定在载玻片上,一般使用福尔马林进行固定。
然后,将染色剂溶液滴在载玻片上,使其充分渗入细胞内。
最后,使用显微镜观察载玻片上的染色细胞,并进行记录和分析。
精形态染色参考标准在生物学研究中具有广泛的应用。
首先,它可以帮助科学家们观察和描述细胞的形态和结构,从而更好地理解细胞的功能和生理过程。
例如,通过观察细胞的核形态和染色质分布,可以研究细胞的有丝分裂和无丝分裂过程。
其次,精形态染色参考标准还可以用于研究细胞的病理变化,例如癌细胞的形态学特征和异常染色现象等。
这对于疾病的诊断和治疗具有重要意义。
除了在科学研究中的应用,精形态染色参考标准在医学诊断中也起着重要的作用。
通过对患者样本的细胞进行染色观察,医生可以判断细胞是否存在异常变化,从而进行早期诊断和治疗。
例如,它可以用于癌症的筛查和分型,帮助医生制定个体化的治疗方案。
尽管精形态染色参考标准在生物学和医学领域中具有广泛的应用,但也存在一些局限性。
首先,该方法只能提供细胞的形态和结构信息,对于细胞内部的生化变化和功能研究有一定的局限性。
其次,染色剂的选择和染色条件的控制对结果的准确性具有重要影响,需要科学家们具备丰富的经验和技巧。
总结起来,精形态染色参考标准是一种重要的细胞观察和研究方法,它能够帮助科学家们更好地理解和解释细胞的形态和结构。
巴氏染色的原理及临床应用1. 原理介绍巴氏染色是一种常用的组织学和细胞学染色方法,用于将细胞核内的染色质显色出来。
这种染色方法起源于19世纪末的德国,由柏氏提出并得到广泛应用。
巴氏染色的原理是用甲醛固定切片中的细胞核,然后使用甲铋绿染色荧光染料,该染料能够选择性地结合DNA,从而使细胞核显色。
2. 巴氏染色步骤巴氏染色可以分为以下几个步骤:•备制甲铋绿染色溶液:将适量的甲铋绿溶解在染色液中,配制成甲铋绿染色溶液。
•制备切片:将待染色的组织细胞固定在切片上,通常使用甲醛进行固定。
固定后,再进行脱水和清洁等处理,使细胞能够完整地附着在切片上。
•染色处理:倒入甲铋绿染色溶液,对切片进行染色处理。
可以使用扩散法或浸漆法染色。
•清洁固定:用甲醇对切片进行清洁固定,使甲铋绿染色质牢固地附着在细胞核上,不易褪色。
3. 临床应用巴氏染色在临床中有广泛的应用,主要用于以下方面:3.1 组织学研究巴氏染色技术能够显色出细胞核以及核内的染色质,对于细胞结构的观察和研究具有重要意义。
通过巴氏染色,可以观察细胞核的形态、大小、排列以及核内的染色质分布情况,从而提供组织学研究的依据。
3.2 细胞学诊断巴氏染色在细胞学诊断中有着重要的应用价值。
通过观察细胞核的形态、核仁和核内的染色质分布情况,可以帮助医生诊断细胞异常和病变。
例如,在细胞学涂片中,巴氏染色可以帮助诊断宫颈癌、乳腺癌等恶性肿瘤。
3.3 分子生物学研究巴氏染色在分子生物学研究中也有着重要的应用。
通过观察细胞核的染色与分布情况,可以了解DNA的含量、形态和排列方式。
这对于研究遗传物质的结构与功能具有重要意义。
此外,巴氏染色染料甲铋绿还可以选择性地染出核仁,从而帮助研究核仁的结构与功能。
4. 研究进展近年来,随着生物学技术的发展和突破,巴氏染色技术也在不断更新和改进。
一些新型的染色剂和染色方法被提出并得到应用。
例如,用于核糖核酸的新型染色剂mORANGE,可以实现DNA和RNA的同步染色。
巴氏染液说明书全文共四篇示例,供读者参考第一篇示例:巴氏染液是一种用于细菌染色的染液,它是由德国微生物学家巴尔特洛米·奥古斯特·冯·巴尔蒂莫(Robert Koch)所发明的一种染色方法。
巴氏染液主要用于显微镜下观察分离出来的细菌,并加以染色,以便于观察和鉴定不同种类的细菌。
巴氏染液的配方主要包括三种成分:一是花青素染料,用于染色细菌的细胞壁;二是碘液,用于固定染色;三是含有碱性成分的溶液,用于除去细菌细胞的色素。
这三种成分的配比和使用方法对于染色效果至关重要,以下我们来详细介绍一下巴氏染液的制作和使用方法:一、制作巴氏染液配方:1.花青素染料:将适量的花青素染料溶解于无色无味的酒精中,使其充分溶解,成为染色液。
2.碘液:将适量的碘结晶溶解于无色的乙醇中,加入适量的甘油作为固定剂,充分搅拌溶解。
3.碱性溶液:将适量的氢氧化钠或氨水溶解于蒸馏水中,使其呈碱性状态,用于去色反应。
二、使用巴氏染液的步骤:1.将待染的玻璃载玻片上涂上待染的涂片物,如细菌培养物。
2.在玻片上滴上花青素染料液,使其充分覆盖待染的涂片物,静置数分钟,让染料充分渗入细菌细胞壁。
3.将碘液滴在染色后的玻片上,修饰几秒钟,然后用蒸馏水冲洗,固定染色。
4.滴上碱性溶液,静置片面上数分钟,然后用蒸馏水冲洗,直至不再有颜色流出。
5.待玻片干燥后,即可放入显微镜下观察分离出的细菌。
巴氏染液在细菌学研究中具有重要的应用意义,它能够让科学家们更清晰地观察和鉴定不同种类的细菌,为疾病的防治提供了重要的依据。
巴氏染液的制作和使用方法也并不复杂,只要按照正确的步骤和配方来进行操作,就可以得到理想的染色效果。
希望通过本文的介绍,大家对巴氏染液有了更深入的了解,能够在日常的实验工作中更加得心应手。
第二篇示例:巴氏染液是一种用于微生物检测的重要试剂,其原理是利用染色剂对生物样品进行染色,从而使微生物在显微镜下更容易被观察和分析。
精子形态学分析正常形态精子百分率是评价精子受精能力的重要指标之一。
目前,用于精子形态学分析的染色方法有:改良巴氏染色法、苏木精-伊红(HE)染色法、瑞氏染色法、瑞-吉氏染色法、Diff-Quik染色法和Shorr染色法。
1 涂片的制备一般用新鲜的液化精液或生理盐水洗涤过的精子悬液进行涂片,通常每份标本涂双份片子,以备染色或操作出问题。
载玻片应洁净,可用70%酒精洗涤并干燥后使用;涂片的厚薄应根据精子密度而定,精子密度高者涂片应薄些,而精子密度低者涂片应尽可能厚些。
涂片的方法有多种,WHO推荐的方法有拉薄技术和滴管法,拉薄技术即用另一张载玻片的边缘拖拉载玻片上的一滴精液;滴管法即水平持滴管使一滴精液沿载玻片的表面展开。
由于精液有一定粘稠度,这两种方法都很难涂成均匀的涂片。
可建议用以下方法涂片:用滴管将一滴精液置于载玻片上,然后从液滴中央向周围循环吸净多余的精液,注意滴管的头要平整,滴管与载玻片垂直,缓慢吸去多余的液体。
低密度、粘稠的、或充满碎屑的标本,建议先离心去除精浆,沉淀的精子团重新悬浮在适当体积中,以获得尽可能高的密度,但不应超过80×106/ml。
正常精子密度且液化良好的精液标本亦可以洗涤后用精子悬液进行涂片,但离心操作对精子形态分析有无影响,尚需要进一步验证。
精子涂片可进行空气干燥并固定。
固定程序取决于染色方法。
2 改良巴氏染色法这是WHO手册推荐的方法。
它可以使精子和其他细胞很好地染色,可使精子头部的顶体和顶体后区、胞浆小滴、中段和尾部着色。
染液中的俾士麦棕为盐基性染料,伊红、亮绿、橙黄等为酸性染料,能与细胞中具有相反电荷的蛋白质结合,而染成各种不同的颜色,从而能清楚地区分各种细胞成分。
以往用巴氏染色法进行染色时,操作步骤繁琐,目前已有改良的单一的巴氏染色液出售,操作非常简单,只需在自然干燥的精子涂片上滴加1~2滴巴氏染液,染15分钟即可。
流水冲洗后自然晾干,显微镜油镜下观察精子形态。
快速巴氏染色液注意事项快速巴氏染色液是一种常用的细胞染色方法,具有快速、简单、显色明亮等优点。
然而,在使用快速巴氏染色液时,我们需要注意一些事项,以确保染色效果的准确性和稳定性。
以下是使用快速巴氏染色液的注意事项:1. 样本制备:在进行细胞染色前,样本制备非常关键。
首先,要确保样本的新鲜度,尽量选择新鲜组织或细胞。
其次,样本处理要轻柔,避免引起细胞破裂或变形。
最后,要注意样本固定的时间和方法,固定时间过短或过长都会影响染色效果。
2. 清洗步骤:在染色之前,样本需要进行充分的清洗,以去除可能的干扰物质。
清洗步骤应该重复进行,直到洗涤液不再有颜色残留为止。
同时,要避免使用含有蛋白酶或酸碱性溶液进行清洗,以免影响细胞的形态和染色结果。
3. 染色时间控制:染色时间的控制对于快速巴氏染色液来说非常重要。
染色时间过短会导致染色不均匀或染色效果不明显,而染色时间过长则可能出现过度染色的情况。
因此,在染色之前,要根据样本类型和染色液的浓度进行试验,以确定最佳的染色时间。
4. 染色液的使用:在使用快速巴氏染色液时,要注意染色液的储存和使用。
首先,要避免染色液暴露在阳光下或高温环境中,以免影响染色效果。
其次,要定期检查染色液的有效期,过期的染色液可能会导致染色效果不佳。
最后,要遵循染色液的供应商提供的使用说明,按照正确的比例稀释染色液,避免使用过量或过少的染色液。
5. 染色结果的观察和记录:染色完成后,要仔细观察染色结果,并及时记录。
观察时要注意细胞的形态和染色的均匀性。
如果发现染色结果不理想,可以尝试调整染色时间或染色液的浓度。
同时,要将染色结果进行记录,以备后续分析和比较。
使用快速巴氏染色液时需要注意样本制备、清洗步骤、染色时间控制、染色液的使用和染色结果的观察和记录等方面。
遵循这些注意事项,可以提高染色效果的准确性和稳定性,为后续的细胞分析和研究提供可靠的基础。
巴氏染液配制1、苏木精:Harris苏木精:苏木精5g溶于无水乙醇50ml ,硫酸铝钾100g溶于蒸馏水1000ml ,混合后煮沸,待稍冷加入氧化汞2.5g,再煮沸2min,用前加冰醋酸20ml改良Gill氏半氧化苏木精:苏木精2g, 无水乙醇250ml, 硫酸铝17.6g,(可减半量)碘酸钠0.2g, 柠檬酸2g,甘油50ml, 蒸馏水750ml。
配制方法:将苏木精溶于无水乙醇,硫酸铝溶于蒸馏水,完全溶解后两液混合,依次加入碘酸钠,柠檬酸,甘油。
此配方特点:配制时勿须加温。
配后即可应用。
性能稳定,基本消除了过度氧化的苏木精结晶污染涂片的麻烦。
唯染色时间较长,须5~10min。
2、桔黄G6(orangeG6):桔黄G 0.5g,溶于95%酒精100ml, 加磷钨15mg。
3、EA染液:EA36:由三种贮备液按比例混合而成:0.5%亮绿(light green)酒精溶液45ml,0.5%裨士麦褐(bismark brown)酒精溶液10ml,0.5%伊红Y(eosin yellowish)酒精溶液45ml,混合后,再加磷钨酸0.2g,饱和碳酸锂水溶液1滴。
EA50:3%亮绿水溶液10ml,纯甲醇250ml,20%伊红Y 水溶液20ml,冰醋酸20ml,磷钨酸2g (水溶后加入),95%酒精700ml 。
染色方法1、经固定的涂片入水、苏木精染核、盐酸酒精分化、返兰同HE染色。
2、70%、80%、95%酒精逐级脱水各1min。
3桔黄G6 3~ 5 min 。
4、95%酒精二缸漂洗各 1 min 。
5、EA36或EA50 5 min 。
6、95%酒精二缸漂洗各 1 min 。
7、无水酒精二缸漂洗各 1 min 。
8、二甲苯二缸透明各 1 min 。
9、中性树胶封片。
染色结果核深蓝色, 鳞状上皮底层、中层及表层角化前细胞浆染绿色,表层不全角化细胞胞浆染粉红色, 完全角化细胞胞浆呈桔黄色, 红细胞染鲜红色,粘液染淡蓝色或粉红色。
巴氏染色液 【产品名称】巴氏染色液【包装规格】货号:DA0082单瓶(盒)包装规格:100ml 、250ml 、500ml 、5000ml ;套组(盒)包装规格:4×100ml/盒、4×250ml/盒、4×500ml/盒。
【预期用途】主要用于对脱落细胞的组织细胞学染色。
【检验原理】细胞学常规染色普遍使用巴氏(Papanicolaou)法,橘黄G 与EA36或EA50联合使用可将胞浆染成颜色鲜明的绿色、蓝色和粉色,细胞中的细胞核是由酸性物质组成,它与碱性染料的亲和力较强;而细胞浆则相反,它含有碱性物质和酸性染料的亲和力较大。
巴氏染色液利用这一特性对细胞进行多色性染色,细胞经染色后能清晰地显示细胞的结构,胞质透亮鲜丽,各种颗粒分明,细胞核染色质非常清楚,从而较容易发现异常细胞。
通过巴氏染色可反映出细胞在炎症刺激下和癌变后的形态学变化,对早期发现和诊断一些病变和肿瘤具有较重要意义。
【主要组成成分】试剂组成 主要成分l 、苏木素染色液 苏木素2、1%盐酸乙醇分化液 盐酸、乙醇3、橘黄G 染色液 橘黄G4、EA50染色液或EA36染色液 EA50染色液:淡绿、伊红、磷钨酸、冰乙酸; EA36染色液:淡绿、伊红、磷钨酸 【储存条件及有效期】5℃~35℃环境保存,原包装未开封染色液的有效期为18个月,在有效期内的已开封染色液建议在开封后6个月内使用完,每次用后应及时拧紧瓶盖,以免挥发或变质。
【样本要求】新鲜标本涂片后,应尽快用95%乙醇固定,以避免细胞变形。
【检验方法】1、固定:将细胞涂片置于95%乙醇中固定15分钟以上;2、染色,按要求进行染色。
3、二甲苯透明,中性树脂封片,镜检。
【检验结果的解释】【检验方法的局限性】仅供形态学初检观察染色使用。
细胞核 蓝紫色或黑色 非角化细胞的胞质 淡蓝色或淡绿色 角化细胞的胞质 粉红或橘黄色 红细胞 鲜红色或橙红色 粘液 淡蓝或粉红色【注意事项】1、冬季气温较低时,苏木素染色液不易着色,可适当延长染色时间。
精子形态学染色液(巴氏法)
简介:
细胞学常规染色普遍使用巴氏(Papanicolaou)法,Papanicolaou Stain 最初仅用于检测阴道上皮雌激素水平以及生殖道念珠菌、滴虫等病原体。
橘黄G6与EA36或EA50联合使用,可将胞浆染成颜色鲜明的绿色、蓝色和粉色。
目前大多数实验室采用成品染液,所以每种染液应注意其改良后的最佳条件。
最终胞浆染色应透明可见,核染色质应很容易辨别出来。
目前改良的巴氏染色液含有多种离子,具有多色性染色效能。
染色后胞质鲜艳、透明性好以及核膜、核仁、染色质结构清晰。
Leagene 精子形态学染色液(巴氏法) 因精子及细胞内不同等电点的蛋白质在相同的酸度下带不同的电荷,能选择性地结合相应的染料而着色。
胞核由酸性物质组成,它与碱性染料的亲和力较强;而胞浆则相反,它含有碱性物质和酸性染料的亲和力较大细胞质染色特别采用针对于精子染色的改良EA50染色液,细胞核染色采用Leagene 自主研发的无毒改良型苏木素染色液,特别适用于精子的染色,亦可用于胸水、腹水、痰液等细胞样本的染色。
组成:
自备材料:
1、 固定液(如95%乙醇-乙醚固定液)
2、 系列乙醇
3、 0.5%盐酸乙醇分化液
操作步骤(仅供参考):
1、 细胞涂片用等量95%乙醇-冰乙酸固定液固。
2、 80%的乙醇浸泡1min 。
3、 70%的乙醇浸泡1min 。
4、 50%的乙醇浸泡1min 。
编号 名称
DA0191 4×20ml DA0191 4×100ml Storage 试剂(A): Lea 苏木素染色液 20ml 100ml RT 避光 试剂(B): 蓝化液
20ml 100ml RT 试剂(C): 橘黄G6染色液 20ml
100ml RT 避光
使用说明书
1份
5、 蒸馏水或自来水浸泡或冲洗。
6、Lea 苏木素染色液染色。
7、自来水冲洗。
8、盐酸乙醇分化液分化或盐酸水溶液分化。
9、自来水冲洗。
10、蓝化液中蓝化4min 。
11、自来水冲洗2min 。
12、50%的乙醇脱水2min 。
13、70%的乙醇脱水2min 。
14、80%的乙醇脱水2min 。
15、90%的乙醇脱水2min 。
16、橘黄G6染色液染色。
17、95%的乙醇(Ⅰ)、(Ⅱ)冲洗。
18、改良EA50染色液染色。
19、95%的乙醇(Ⅰ)、(Ⅱ)脱水各1min 。
20、无水乙醇(Ⅰ)、(Ⅱ)脱水各1min 。
21、二甲苯透明,中性树脂封片。
染色结果:
注意事项:
1、 所有染
液均需
过滤,需经常更换染液。
2、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期: 12个月有效。
相关:
细胞核 蓝紫色或黑色 非角化细胞的胞质 淡蓝色或淡绿色 角化细胞的胞质
粉红或橘红色
编号
名称
CC0130 胰蛋白酶-EDTA 溶液(0.25%:0.02%)
DG0005 糖原PAS 染色液
TC0713
葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD 比色法)。