下载文档原格式
各种缓冲液的配制方法24Na2HP6 2H2O,分子量=178.05 0.2mol∕L 溶液含35.61g∕L柠檬酸.H2O,分子量=210.14 0.1mol∕L 溶液含21.01g∕L柠檬酸.H2O,分子量=210.14 0.1mol∕L 溶液含21.01g∕L 柠檬酸钠.2HO,分子量=294.12; 0.1mol∕L溶液(1)醋酸盐溶液的配制：醋酸—醋酸钠缓冲液(pH3.6)取醋酸钠5.1g,加冰醋酸20ml ,再加水稀释至250ml,即得。
醋酸—醋酸钠缓冲液(pH3.7)取无水醋酸钠20g,加水300ml溶解后，加溴酚蓝指示液1ml及冰醋酸60〜80ml ,至溶液从蓝色转变为纯绿色，再加水稀释至1000ml ,即得。
醋酸—醋酸钠缓冲液(pH3.8)取2mol/L醋酸钠溶液13ml与2mol/L醋酸溶液87ml,加每1ml含铜1mg的硫酸铜溶液0.5ml,再加水稀释至1000ml ,即得。
醋酸—醋酸钠缓冲液(pH4.5)取醋酸钠18g,加冰醋酸9.8ml,再加水稀释至1000ml,即得。
醋酸—醋酸钠缓冲液(pH4.6)取醋酸钠5.4g,加水50ml使溶解，用冰醋酸调节PH值至4.6,再加水稀释至100ml,即得。
醋酸—醋酸钠缓冲液(pH6.0)取醋酸钠54.6g,加1mol/L醋酸溶液20ml溶解后，加水稀释至500ml ,即得。
用醋酸和醋酸钠配制的缓冲溶液的PH=PKa+lg[C(NaAc)/C(HAC)K在此，C(HAC指醋酸的浓度，C(NaAC指醋酸钠的浓度，Ka是醋酸的解离常数=1.8*10-5 (1.8乘10的-5次方)，PKa=-IgKa=4.75,将PH=5.5代入，可得C(NaAC)/C(HAc)=5.6通常我们配制时会使C(HAC)=0.1mol∕L,或是C(HAC)=0.2mol/L 等。
若是配制C(HAC)=0.1mol/L,则C(NaAC)=0.56mol/L 称量醋酸钠固体质量为82*0.56=46克量取冰醋酸体积为0.1*1000∕17.5=5.7mL。
各种缓冲液的配制方法Na2HPO4-柠檬酸钠缓冲液24。
2柠檬酸. H2O，分子量=210.14 0.1mol/L溶液含21.01g/L2柠檬酸钠. 2H2O，分子量=294.12；0.1mol/L溶液含29.4 g/L2（1）醋酸盐溶液的配制：醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.6)取醋酸钠5.1g,加冰醋酸20ml，再加水稀释至250ml,即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.7)取无水醋酸钠20g,加水300ml溶解后，加溴酚蓝指示液1ml及冰醋酸60～80ml，至溶液从蓝色转变为纯绿色，再加水稀释至1000ml，即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.8)取2mol/L醋酸钠溶液13ml与2mol/L醋酸溶液87ml,加每1ml含铜1mg的硫酸铜溶液0.5ml,再加水稀释至1000ml，即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH4.5)取醋酸钠18g,加冰醋酸9.8ml,再加水稀释至1000ml,即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH4.6)取醋酸钠5.4g,加水50ml使溶解，用冰醋酸调节pH值至4.6，再加水稀释至100ml，即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH6.0)取醋酸钠54.6g，加1mol/L醋酸溶液20ml溶解后，加水稀释至500ml，即得。
用醋酸和醋酸钠配制的缓冲溶液的PH=PKa+lg[C(NaAc)/C(HAc)]（在此，C(HAc)指醋酸的浓度，C(NaAc)指醋酸钠的浓度,Ka是醋酸的解离常数=1.8*10-5（1.8乘10的-5次方），PKa=-lgKa=4.75，将PH=5.5代入，可得C(NaAc)/C(HAc)=5.6 通常我们配制时会使C(HAc)=0.1mol/L，或是C(HAc)=0.2mol/L等。
若是配制C(HAc)=0.1mol/L，则C(NaAc)=0.56mol/L 称量醋酸钠固体质量为82*0.56=46克量取冰醋酸体积为0.1*1000/17.5=5.7mL。
将称好的醋酸钠和量好的冰醋酸加入1000mL水中溶解、搅拌均匀即可。
各种缓冲液的配制方法24。
2柠檬酸. H2O，分子量=210.14 0.1mol/L 溶液含21.01g/L22(1)醋酸盐溶液的配制：醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.6)取醋酸钠 5.1g, 加冰醋酸20ml ，再加水稀释至250ml, 即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.7)取无水醋酸钠20g,加水300ml 溶解后，加溴酚蓝指示液1ml 及冰醋酸60～80ml，至溶液从蓝色转变为纯绿色，再加水稀释至1000ml，即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.8)取2mol/L 醋酸钠溶液13ml 与2mol/L 醋酸溶液87ml,加每1ml 含铜1mg 的硫酸铜溶液0.5ml,再加水稀释至1000ml，即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH4.5)取醋酸钠18g, 加冰醋酸9.8ml, 再加水稀释至1000ml, 即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH4.6)取醋酸钠 5.4g, 加水50ml 使溶解，用冰醋酸调节pH 值至 4.6，再加水稀释至100ml，即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH6.0)取醋酸钠54.6g ，加1mol/L 醋酸溶液20ml 溶解后，加水稀释至500ml ，即得。
用醋酸和醋酸钠配制的缓冲溶液的PH=PKa+lg[C(NaAc)/C(HAc)](在此，C(HAc)指醋酸的浓度，C(NaAc)指醋酸钠的浓度,Ka 是醋酸的解离常数=1.8*10-5(1.8 乘10 的-5 次方)，PKa=-lgKa=4.75 ，将PH=5.5 代入，可得C(NaAc)/C(HAc)=5.6 通常我们配制时会使C(HAc)=0.1mol/L，或是C(HAc)=0.2mol/L 等。
若是配制C(HAc)=0.1mol/L，则C(NaAc)=0.56mol/L 称量醋酸钠固体质量为82*0.56=46克量取冰醋酸体积为0.1*1000/17.5=5.7mL。
将称好的醋酸钠和量好的冰醋酸加入1000mL 水中溶解、搅拌均匀即可。
常用缓冲溶液的配制方法磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液24Na 2HPO 4·2H 2O 分子量 = 178.05，0.2 mol/L 溶液含35.01克/升。
C 4H 2O 7·H 2O 分子量 = 210.14，0.1 mol/L 溶液为21.01克/升。
pH 4.0 20mL ：Na2HPO4 0.219g + C4H2O7·H2O 0.258g柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液（0.1 mol/L ）6872柠檬酸钠Na 3 C 6H 5O 7·2H 2O ：分子量294.12，0.1 mol/L 溶液为29.41克/毫升。
pH 4.0 20mL ： C4H2O7·H2O 0.275g + Na3 C6H5O7·2H2O 0.203g乙酸–乙酸钠缓冲液（0.2 mol/L ）Na 2Ac·3H 2O 分子量= 136.09，0.2 mol/L 溶液为27.22克/升。
pH 4.0 20mL ：NaAc 0.098g + HAc 0.282mL甘氨酸–氢氧化钠缓冲液（0.05M ）甘氨酸分子量=75.07; 0.2M溶液含15.01克/升。
pH 10.0 20mL ：甘氨酸0.075g + NaOH 0.013g碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液（0.1M ） 2+2+ 无水Na 2CO 2分子量=105.99;0.1M 溶液为10.60克/升。
Na 2CO 2·10H 2O 分子量=286.2;0.1M 溶液为28.62克/升。
Na 2HCO 3分子量=84.0;0.1M 溶液为8.40克/升。
pH 10.0 20mL ：无水碳酸钠 0.127g +碳酸氢钠0.067g补注：pH 4.0 EDTA2-McIlvaine2O0. 05 mol/L EDTA（372.2）+ 0. 06 mol/L Na2HPO4·12HO（358.14）+ 0. 08 mol/L 柠檬酸（210.14）18. 61g/L EDTA + 21. 4884 g/L Na2HPO4·12HO + 16.8112 g/L 柠檬酸20mL 0. 372g EDTA + 0. 430 g Na2HPO4 ·12HO + 0.336 g 柠檬酸。
各种缓冲液配制方法不同缓冲液的缓冲范围pH缓冲液是化学实验室中常用的一种试剂，可以帮助维持溶液的酸碱度。
下面介绍三种常用缓冲液的配制方法和缓冲范围。
一、甘氨酸-盐酸缓冲液（0.05 mol/L）配制方法：取X毫升0.2 mol/L甘氨酸和Y毫升0.2 mol/L 盐酸，加入适量的水稀释至200毫升。
缓冲范围：pH值在2.2至3.6之间，X和Y的取值见上表。
二、邻苯二甲酸-盐酸缓冲液（0.05 mol/L）配制方法：取X毫升0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾和Y毫升0.2 mol/L盐酸，加入适量的水稀释至20毫升。
缓冲范围：pH值在2.2至3.8之间，X和Y的取值见上表。
三、磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液配制方法：根据上表中的数据，取相应的0.2 mol/L和0.1 mol/L的Na2HPO4和柠檬酸，加入适量的水稀释至20毫升。
缓冲范围：pH值在2.2至8.0之间，具体取值见上表。
以上缓冲液的配制方法和缓冲范围可根据实验需要进行调整和改变。
在实验过程中，正确选择缓冲液可以提高实验的成功率和准确性。
以下是已经修改好的文章：柠檬酸的浓度可以用毫升表示，其浓度数据如下：9.28 mL8.85 mL8.40 mL7.91 mL7.37 mL6.78 mL6.15 mL5.45 mL4.55 mL3.53 mL2.61 mL1.83 mL1.27 mL0.85 mL0.55 mL对于Na2HPO4，其分子量为141.98，0.2 mol/L的溶液需要28.40 g/L。
而Na2HPO4·2H2O的分子量为178.05，0.2 mol/L的溶液需要35.61 g/L。
最后，Na2HPO4·12H2O的分子量为358.22，0.2 mol/L的溶液需要71.64 g/L。
对于C6H8O7·H2O，其分子量为210.14，0.1 mol/L的溶液需要21.01 g/L。
以下是柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液的相关数据：pH: 2.2.3.1.3.3.4.3.5.3.5.8.6.5钠离子浓度(mol/L): 0.20.0.20.0.20.0.20.0.35.0.45.0.38柠檬酸(g) 氢氧化钠(g) 盐酸(mL)C6H8O7·H2O NaOH 97% HCl (浓)210 210 210210 245 285266 84 8383 144 186156 160 116106 45 68105 126最终体积(L)：10使用时可以每升中加入1克酚。
各种缓冲液的配制方法Na2HPO4-柠檬酸钠缓冲液24。
2柠檬酸. H2O，分子量=210.14 0.1mol/L溶液含21.01g/L2柠檬酸钠. 2H2O，分子量=294.12；0.1mol/L溶液含29.4 g/L2（1）醋酸盐溶液的配制：醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.6)取醋酸钠5.1g,加冰醋酸20ml，再加水稀释至250ml,即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.7)取无水醋酸钠20g,加水300ml溶解后，加溴酚蓝指示液1ml及冰醋酸60～80ml，至溶液从蓝色转变为纯绿色，再加水稀释至1000ml，即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.8)取2mol/L醋酸钠溶液13ml与2mol/L醋酸溶液87ml,加每1ml含铜1mg的硫酸铜溶液0.5ml,再加水稀释至1000ml，即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH4.5)取醋酸钠18g,加冰醋酸9.8ml,再加水稀释至1000ml,即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH4.6)取醋酸钠5.4g,加水50ml使溶解，用冰醋酸调节pH值至4.6，再加水稀释至100ml，即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH6.0)取醋酸钠54.6g，加1mol/L醋酸溶液20ml溶解后，加水稀释至500ml，即得。
用醋酸和醋酸钠配制的缓冲溶液的PH=PKa+lg[C(NaAc)/C(HAc)]（在此，C(HAc)指醋酸的浓度，C(NaAc)指醋酸钠的浓度,Ka是醋酸的解离常数=1.8*10-5（1.8乘10的-5次方），PKa=-lgKa=4.75，将PH=5.5代入，可得C(NaAc)/C(HAc)=5.6 通常我们配制时会使C(HAc)=0.1mol/L，或是C(HAc)=0.2mol/L等。
若是配制C(HAc)=0.1mol/L，则C(NaAc)=0.56mol/L 称量醋酸钠固体质量为82*0.56=46克量取冰醋酸体积为0.1*1000/17.5=5.7mL。
将称好的醋酸钠和量好的冰醋酸加入1000mL水中溶解、搅拌均匀即可。
柠檬酸盐缓冲液配制方法柠檬酸盐缓冲液配制方法 1我们经常使用的缓冲溶液，其pH值随温度变化略有变化，要知晓这一点，常用标准缓冲溶液pH值与温度对照表如下：标准缓冲液pH值与温度对照表温度℃四草酸氢钾0.05M邻苯二甲酸氢钾0.05M混合磷酸盐0.025M硼砂0.01M5 1.67 4.00 6.959.3910 1.67 4.00 6.029.3315 1.67 4.00 6.909.2820 1.68 4.00 6.889.2325 1.68 4.00 6.869.1830 1.68 4.01 6.859.1435 1.69 4.02 6.849.11再配制缓冲溶液，不用到处查阅了！柠檬酸盐缓冲液配制方法1，表格展示，轻松一览，赶快收藏吧……柠檬酸盐缓冲液配制方法 11．甘氨酸–盐酸缓冲液（0.05mol/L）X毫升0.2mol/L甘氨酸+Y毫升0.2mol/LHCI，再加水稀释至200毫升pH X Y pH X Y2.05044.03.05011.42.4 2.6 2.850505032.424.216.83.23.43.65050508.26.45.0甘氨酸分子量= 75.07，0.2mol/L甘氨酸溶液含15.01克/升。
2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（0.05 mol/L）X毫升0.2mol/L邻苯二甲酸氢钾+ 0.2mol/LHCl，再加水稀释到20毫升pH(20℃)X Y pH(20℃)X Y2.2 2.4 2.62.83.0555554.0703.9603.2952.6422.0223.23.43.63.855551.4700.9900.5970.263邻苯二甲酸氢钾分子量= 204.23，0.2mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升3．磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液pH0.2mol/LNa2HPO4（毫升）0.1mol/L柠檬酸（毫升）pH0.2mol/LNa2HPO4（毫升）0.1mol/L柠檬酸（毫升）2.20.4010.60 5.210.729.282.4 2.62.83.0 3.2 3.4 3.63.84.0 4.2 4.4 4.64.85.01.242.183.174.114.945.706.447.107.718.288.829.359.8610.3018.7617.8216.8315.8915.0614.3013.5612.9012.2911.7211.1810.6510.149.705.45.65.86.06.26.46.66.87.07.27.47.67.88.011.1511.6012.0912.6313.2213.8514.5515.4516.4717.3918.1718.7319.1519.458.858.407.917.376.786.155.454.553.532.611.831.270.850.55Na2HPO4分子量= 14.98，0.2mol/L溶液为28.40克/升。
1.甘氨酸–盐酸缓冲液(0。
0５mol/L)X毫升0、2 mｏl/Ｌ甘氨酸+Y毫升０。
2ｍoｌ/LＨCI,再加水稀释至２０0毫升甘氨酸分子量 = 7５。
07,0。
2 mol/L甘氨酸溶液含1５。
0１克/升、２。
邻苯二甲酸–盐酸缓冲液(0。
0５ mｏl/Ｌ)Ｘ毫升0、2mol／L邻苯二甲酸氢钾 + 0。
2 mol/L HＣl,再加水稀释到２0毫升邻苯二甲酸氢钾分子量= 20４.23,0、２ mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.8５克/升3.磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液Na2HＰO4分子量 = 1４、98,0、2 mｏｌ／Ｌ溶液为２８。
４0克/升。
Ｎａ2HPＯ4-2H２Ｏ分子量 = １78、０5,０。
2 mｏl／Ｌ溶液含35．01克/升。
C4H2Ｏ7·H2O分子量 = 2１０。
14,０。
１ moｌ/L溶液为21．０1克/升、4、柠檬酸–氢氧化钠－盐酸缓冲液① 使用时可以每升中加入1克克酚,若最后p Ｈ值有变化,再用少量50％ 氢氧化钠溶液或浓盐酸调节,冰箱保存。
②5.柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液(０、1 ｍol ／L)柠檬酸C ６H 8Ｏ7·H 2O:分子量210、1４,0.1 mol/L 溶液为21.0１克/升。
柠檬酸钠Na 3 C ６H 5O ７·２H ２Ｏ:分子量294。
1２,0。
1 mol/L 溶液为29.4１克/毫升。
６.乙酸–乙酸钠缓冲液(0.2 mo ｌ／L) Na 2Ac·３H 2O 分子量 = 1３６。
09,０.２ mol/Ｌ溶液为２7.２2克/升。
７.磷酸盐缓冲液(1)磷酸氢二钠–磷酸二氢钠缓冲液(0.2)Ｎａ２ＨＰＯ４·2H2O分子量 = 178、０5,0。
2ｍol/L溶液为85.６１克／升。
Na２HＰＯ４·2H２O分子量= ３58.２2,０。
２ mol/L溶液为7１。
64克/升。
Na2HPO4·2H2O分子量 = 156。
各种缓冲液的配制方法之迟辟智美创作Na2HPO4-柠檬酸钠缓冲液（1）醋酸盐溶液的配制：醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.6)取醋酸钠5.1g,加冰醋酸20ml，再加水稀释至250ml,即得. 醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.7)取无水醋酸钠20g,加水300ml溶解后，加溴酚蓝指示液1ml 及冰醋酸60～80ml，至溶液从蓝色转酿成纯绿色，再加水稀释至1000ml，即得.醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.8)取2mol/L醋酸钠溶液13ml与2mol/L醋酸溶液87ml,加每1ml含铜1mg的硫酸铜溶液0.5ml,再加水稀释至1000ml，即得.醋酸－醋酸钠缓冲液(pH4.5)取醋酸钠18g,加冰醋酸9.8ml,再加水稀释至1000ml,即得. 醋酸－醋酸钠缓冲液(pH4.6)取醋酸钠5.4g,加水50ml使溶解，用冰醋酸调节pH值至4.6，再加水稀释至100ml，即得. 醋酸－醋酸钠缓冲液(pH6.0)取醋酸钠54.6g，加1mol/L醋酸溶液20ml溶解后，加水稀释至500ml，即得.用醋酸和醋酸钠配制的缓冲溶液的PH=PKa+lg[C(NaAc)/C(HAc)]（在此，C(HAc)指醋酸的浓度，C(NaAc)指醋酸钠的浓度,Ka是醋酸的解离常数=1.8*10-5（1.8乘10的-5次方），PKa=-lgKa=4.75，将PH=5.5代入，可得C(NaAc)/C(HAc)=5.6 通常我们配制时会使C(HAc)=0.1mol/L，或是C(HAc)=0.2mol/L等.若是配制C(HAc)=0.1mol/L，则C(NaAc)=0.56mol/L 称量醋酸钠固体质量为82*0.56=46克量取冰醋酸体积为0.1*1000/17.5=5.7mL.将称好的醋酸钠和量好的冰醋酸加入1000mL水中溶解、搅拌均匀即可.固然若想配制其它的浓度，也可照公式计算即可，通常缓冲溶液不能配的太稀，否则缓冲能力要下降，太浓的话又浪费试剂.0.2mol/L苯二甲酸氢钾溶液：称取在硫酸干燥器中干燥过24小时的苯二甲酸氢钾20.44g溶于水中，稀释至500ml.磷酸盐缓冲液（PBS）配制方法0.01M PBSPBS (135 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 1.5 mM KH2PO4, and 8 mM K2HPO4，pH 7.2)称NaCl，KCl，KH2PO4(or Na2HPO4)和K2HPO4，溶于800 ml 蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，最后加蒸馏水定容至1 L.保管于4℃冰箱中即可.需要注意的是，通常所说的浓度0.01 M指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度，而非Na 离子或K 离子的浓度，Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的.母液的配制：Na2HPO4：称取Na2HPO4-12H2O，溶于1000ml 水NaH2PO4：称取NaH2PO4-2H2O，溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制：先配PB (pH=7.4，100ml)：取19ml 0.2mol/L的NaH2PO4，81ml 0.2mol/L 的Na2HPO4, 即可.然后只需将PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释即可，如：PB（PH=7.4）：取500ml PB，加水稀释至1000ml 即可. PB （PH=7.4）：取50ml PB，加水稀释至1000ml 即可. PB （PH=7.4）：取100ml 0.2 M PB，加水稀释至1000ml 即可.若需要NaCl的话，加入NaCl 至0.9%（g/100ml）即可.另：其它各种另PH值的PB（100ml)配方：pH NaH2PO4（ml）Na2HPO4（ml）5.8 92 85.9 90 106.1 85 156.8 51 496.9 45 557.0 38 627.1 33 677.2 28 727.3 23 777.4 19ml 81ml7.5 16 847.6 13 877.9 7 93磷酸盐缓冲液（PBS）配制方法称取8g NaCl、KCl、Na2HPO4和KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，最后加蒸馏水定容至1L即可.在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌（至少20分钟），保管存于室温或4℃冰箱中.需要注意的是，通常所说的浓度指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度，而非Na 离子或K 离子的浓度，Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的.如果是用于免疫组化的话，则需要在配置的时候分别加入100 u/ml青霉素和链霉素之后再调PH、定容、灭菌消毒.PH 7.6 7.4 7.2 7.0H2O 1000 1000 1000 1000NaCl 8.5 8.5 8.5 8.5Na2HPO4 2.2 2.2 2.2 2.2根据经验来看，新鲜配置的PBS搅匀后其PH值约在7.2-7.4之间，可是在温度的影响下，尤其在夏天，其电离常数发生了改变，在经过昼夜的时间后，PH值会明显改变（我亲自测过偏酸）.所以做实验的同学可要注意了，PH值可能会影响实验结果，甚至可能招致阴性.所以务必记得这个时候和天气，要加强实验条件控制问题.每次使用前最好用试纸测一下过夜了的PBS，如果发生偏酸或偏碱，注意重新换新液. PBS缓冲液称取NaCl 8g，KCl ，Na2HPO4?12H2O , KH2PO4 ，溶于900ml双蒸水中，用盐酸调pH值至7.4，加水定容至1L，常温保管备用.PBST缓冲液取300μl Tween-20 加入PBS 100ml中，混匀后即刻使用.现用现配.如果是把所有固体加年夜十倍，配置为浓缩液，工作时候十倍稀释，那么，在刚配好浓缩液时，PH在6.5左右，明显偏酸.不能用盐酸调.虽然可以用氢氧化钠颗粒调，可是有更方便的方法.十倍稀释以后，PH自动升高到所需要的值.不需要其它任何处置.这个可以先取少量试一试，配好之后再测一次~2. 向烧杯中加入约800 ml的去离子水，充沛搅拌溶解.3. 滴加浓盐酸将pH值调节至8.0，然后加入去离子水将溶液定容至1 L.4. 高温高压灭菌后，室温保管.注意：上述PBS Buffer中无二价阳离子，如需要，可在配方中弥补1 mM CaCl2和0.5 mM MgCl2.0.05mol/L PBS(磷酸缓冲液Phosphate Buffer Solution，PBS)的配制：甲液：0.05mol/L Na2HPO4溶液：称取磷酸氢二钠,加蒸馏水至1000ml ;乙液：0.05mol/L KH2P04溶液: 称取磷酸二氢钾, ,加蒸馏水至1000m1.将甲乙液分装在棕色瓶内，于4℃冰箱中保管，用时甲、乙两液各按分歧比例混合，即可得所需pH的缓冲液,见下表: pH 甲液ml 乙液mI5.29 2.5 97.55.59 5.0 95.05.91 10.0 90.06.24 20.0 80.06.47 30.0 70.06.64 40.0 60.06.81 50.0 50.06.98 60.0 40.07.17 70.0 30.07.38 80.0 20.07.73 90.0 10.08.04 95.0 5.0你要配制pH=6.8的PBS，可用甲、乙液各50ml混合即可.硼砂易失去结晶水，必需在带塞得瓶中保管；硼砂溶液也可以用半中和的硼酸溶液取代0.02mol/LKCl溶液：溶7.455g氯化钾于水中，稀释至500ml0.02mol/L苯二甲酸氢钾溶液：称取在硫酸干燥器中干燥过24小时额苯二甲酸氢钾20.44g溶于水中，稀释至500ml0.2mol/L磷酸二氢钾溶液：溶13.616g磷酸二氢钾于水中，稀释至500ml。
PH3-10 缓冲溶液的配制方法1Na 2HPO 4分子量 = 14.98 ，0.2 mol/L 溶液为 28.40 克/升。
Na 2HPO 4·2H 2O 分子量 = 178.05，0.2 mol/L 溶液含35.01 克/升。
C 4H 2O 7·H 2O 分子量 = 210.14 ， 0.1 mol/L 溶液为 21.01克/升。
2- ① 使用时可以每升中加入 1 克克酚， 若最后 pH 值有变化， 再用少量 50% 氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。
3． 甘氨酸–盐酸缓冲液（ 0.05mol/L ）X 0.2 mol/L +Y 0.2 mol/L HCI 200= 75.07 0.2 mol/L 15.01 /4．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（ 0.05 mol/L ）X0.2 mol/L + 0.2 mol/L HCl 20 邻苯二甲酸氢钾分子量 = 204.23 ， 0.2 mol/L 邻苯二甲酸氢溶液含 40.85 克/升50.1 mol/L柠檬酸 C 6H 8O 7·H 2O ：分子量 210.14，0.1 mol/L 溶液为 21.01 克/升。
柠檬酸钠 Na 3C 6H 5O 7·2H 2O ：分子量 294.12，0.1 mol/L 溶液为 29.41 克/升。
柠檬酸 C 6H 8O 7·H 2O: 2.1g柠檬酸钠 Na 3 C 6H 5O 7·2H 2O: 2.94gH2O: 100 ml6．乙酸–乙酸钠缓冲液（ 0.2 mol/L ）Na 2Ac ·3H 2O 分子量 = 136.09，0.2 mol/L 溶液为 27.22 克/升。
7．磷酸盐缓冲液10.2Na 2HPO 4·2H 2O 分子量 = 178.05， 0.2 mol/L 溶液为 85.61 克/升。
Na 2HPO 4·12H 2O 分子量 = 358.22 ， 0.2 mol/L 溶液为 71.64 克/升。
北京雷根生物技术有限公司
柠檬酸—柠檬酸钠缓冲液(1mol/L,pH6.0)
简介：
柠檬酸钠多与柠檬酸配合作为柠檬酸盐使用，柠檬酸—柠檬酸钠缓冲液在免疫组化过程中可以有效去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联，充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位，从而大大改善免疫染色效果。
柠檬酸—柠檬酸钠缓冲液(1mol/L,pH6.0)是柠檬酸与柠檬酸钠按照不同比例混合而得，其柠檬酸根浓度为1mol/L ，,pH=6.0，可用于抗原修复或其他用途。
组成：
操作步骤（仅供参考）：
1、 根据实验具体要求操作。
2、 如作为抗原修复液使用，应稀释100倍后使用，具体操作参考柠檬酸钠抗原修复液(50
×)使用说明书。
注意事项：
1、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期： 12个月有效。
编号
名称 R00524 R00524
Storage 柠檬酸—柠檬酸钠缓冲液(1mol/L,pH6.0)
100ml 500ml RT 使用说明书 1份。
柠檬酸钠缓冲液范围
柠檬酸钠缓冲液是一种在生物化学实验和研究中常用的溶液，其主要成分为柠檬酸和柠檬酸钠。
这种缓冲液的主要作用是维持实验体系的酸碱度稳定，防止pH值的变化对实验结果产生影响。
柠檬酸钠缓冲液的pH值通常控制在一定范围内，例如pH6.0。
这个范围的选择是根据实验的具体需求来定的，因为不同的生物化学反应需要不同的酸碱环境。
通过调整柠檬酸和柠檬酸钠的比例，可以得到不同pH值的缓冲液，以满足实验的需求。
在医学研究中，柠檬酸钠缓冲液常用于免疫分析，如ELISA法。
这是因为许多生物分子，如抗体和抗原，在特定的pH值下才能保持其活性和稳定性。
通过使用柠檬酸钠缓冲液，可以确保这些生物分子在反应过程中处于最佳的状态，从而提高实验的准确性和可靠性。
此外，柠檬酸钠缓冲液还常用于细胞培养和实验室诊断等领域。
在细胞培养中，细胞需要在一个稳定的酸碱环境中才能正常生长和繁殖。
而柠檬酸钠缓冲液能够提供这样的环境，确保细胞的生长和繁殖不受pH值变化的影响。
总的来说，柠檬酸钠缓冲液是一种非常重要的生物化学试剂，它在维持实验体系酸碱度稳定、保护生物分子活性以及提高实验准确性等方面发挥着重要作用。
在使用柠檬酸钠缓冲液时，需要注意其pH值的选择和调整，以及缓冲液的质量和稳定性等因素，以确保实验结果的准确性和可靠性。
常见缓冲溶液配制方法乙醇－醋酸铵缓冲液(pH3.7)：取5mol/L醋酸溶液15.0ml，加乙醇60ml和水20ml，用10mol/L氢氧化铵溶液调节pH值至3.7，用水稀释至1000ml。
三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.0)：取三羟甲基氨基甲烷12.14g，加水800ml，搅拌溶解，并稀释至1000ml，用6mol/L盐酸溶液调节pH值至8.0。
三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.1)：取氯化钙0.294g，加0.2mol/L三羟甲基氨基甲烷溶液40ml使溶解，用1mol/L盐酸溶液调节pH值至8.1，加水稀释至100ml。
三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH9.0)：取三羟甲基氨基甲烷6.06g，加盐酸赖氨酸3.65g，氯化钠5.8g，乙二胺四醋酸二钠0.37g，再加水溶解使成1000ml，调节pH值至9.0。
乌洛托品缓冲液：取乌洛托品75g，加水溶解后，加浓氨溶液4.2ml，再用水稀释至250ml。
巴比妥缓冲液(pH7.4)：取巴比妥钠4.42g，加水使溶解并稀释至400ml，用2mol/L盐酸溶液调节pH 值至7.4，滤过。
巴比妥缓冲液(pH8.6)：取巴比妥5.52g与巴比妥钠30.9g，加水使溶解成2000ml。
巴比妥－氯化钠缓冲液(pH7.8)：取巴比妥钠5.05g，加氯化钠3.7g及水适量使溶解，另取明胶0.5g 加水适量，加热溶解后并入上述溶液中。
然后用0.2mol/L盐酸溶液调节pH值至7.8，再用水稀释至500ml。
甲酸钠缓冲液(pH3.3)：取2mol/L甲酸溶液25ml，加酚酞指示液1滴，用2mol/L氢氧化钠溶液中和，再加入2mol/L甲酸溶液75ml,用水稀释至200ml,调节pH值至3.25～3.30。
邻苯二甲酸盐缓冲液(pH5.6)：取邻苯二甲酸氢钾10g，加水900ml,搅拌使溶解，用氢氧化钠试液(必要时用稀盐酸)调节pH值至5.6，加水稀释至1000ml，混匀。
枸橼酸盐缓冲液：取枸橼酸4.2g,加1mol/L的20％乙醇制氢氧化钠溶液40ml使溶解,再用20％乙醇稀释至100ml。
附录四常用缓冲溶液的配制（一）磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液pH 0.2 mol/LNa2HPO4(mL)0.1 mol/L柠檬酸(mL)pH0.2 mol/LNa2HPO4(mL)0.1 mol/L柠檬酸(mL)2.2 2.4 2.62.83.0 3.2 3.4 3.63.84.0 4.2 4.4 4.64.85.0 0.401.242.183.174.114.945.706.447.107.718.288.829.359.8610.3019.6018.7617.8216.8315.8915.0614.3013.5612.9012.2911.7211.1810.6510.149.705.25.45.65.86.06.26.46.66.87.07.27.47.67.88.010.7211.1511.6012.0912.6313.2213.8514.5515.4516.4717.3918.1718.7319.1519.459.288.858.407.917.376.786.155.454.553.532.611.831.270.850.55Na2HPO4分子量＝141.98；0.2 mol/L溶液为28.40 g/L。
Na2HPO4·2H2O分子量＝178.05；0.2 mol/L溶液为35.61 g/L。
Na2HPO4·12H2O分子量＝358.22；0.2 mol/L溶液为71.64 g/L。
C6H8O7·H2O分子量＝210.14；0.1 mol/L溶液为21.01 g/L。
柠檬酸：C6H8O7·H2O分子量＝210.14 ；0.1 mol/L溶液为21.01 g/L。
柠檬酸钠：Na3C6H5O7·2H2O分子量＝294.12 ；0.1 mol/L溶液为29.41 g/L。
NaAc·3H2O分子量＝136.09；0.2 mol/L溶液为27.22 g/L。
常用缓冲溶液的配制方法1．甘氨酸–盐酸缓冲液（0.05mol/L）X毫升0.2 mol/L甘氨酸+Y毫升0.2 mol/L HCI，再加水稀释至200毫升pH X Y pH X Y2.0 2.4 2.6 2.8 5050505044.032.424.216.83.03.23.43.65050505011.48.26.45.0甘氨酸分子量 = 75.07，0.2 mol/L甘氨酸溶液含15.01克/升。
2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（0.05 mol/L）X毫升0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾 + 0.2 mol/L HCl，再加水稀释到20毫升pH(20℃) X Y pH(20℃) X Y2.2 2.4 2.62.83.0 555554.0703.9603.2952.6422.0223.23.43.63.855551.4700.9900.5970.263邻苯二甲酸氢钾分子量 = 204.23，0.2 mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升3．磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液pH 0.2mol/LNa2HPO4（毫升）0.1mol/L柠檬酸（毫升）pH 0.2mol/LNa2HPO4（毫升）0.1mol/L柠檬酸（毫升）2.2 2.4 2.62.83.0 3.2 3.4 3.63.84.0 4.2 4.4 4.64.85.0 0.401.242.183.174.114.945.706.447.107.718.288.829.359.8610.3010.6018.7617.8216.8315.8915.0614.3013.5612.9012.2911.7211.1810.6510.149.705.25.45.65.86.06.26.46.66.87.07.27.47.67.88.010.7211.1511.6012.0912.6313.2213.8514.5515.4516.4717.3918.1718.7319.1519.459.288.858.407.917.376.786.155.454.553.532.611.831.270.850.55Na2HPO4分子量 = 14.98，0.2 mol/L溶液为28.40克/升。
常用缓冲溶液的配制方法1．甘氨酸–盐酸缓冲液（0.05mol/L）X毫升0.2 mol/L甘氨酸+Y毫升0.2 mol/L HCI，再加水稀释至200毫升pH X Y pH X Y2.0 2.4 2.6 2.8 5050505044.032.424.216.83.03.23.43.65050505011.48.26.45.0甘氨酸分子量 = 75.07，0.2 mol/L甘氨酸溶液含15.01克/升。
2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（0.05 mol/L）X毫升0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾 + 0.2 mol/L HCl，再加水稀释到20毫升pH(20℃) X Y pH(20℃) X Y2.2 2.4 2.62.83.0 555554.0703.9603.2952.6422.0223.23.43.63.855551.4700.9900.5970.263邻苯二甲酸氢钾分子量 = 204.23，0.2 mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升3．磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液pH 0.2mol/LNa2HPO4（毫升）0.1mol/L柠檬酸（毫升）pH 0.2mol/LNa2HPO4（毫升）0.1mol/L柠檬酸（毫升）2.2 2.4 2.62.83.0 3.2 3.4 3.63.84.0 4.2 4.4 4.64.85.0 0.401.242.183.174.114.945.706.447.107.718.288.829.359.8610.3010.6018.7617.8216.8315.8915.0614.3013.5612.9012.2911.7211.1810.6510.149.705.25.45.65.86.06.26.46.66.87.07.27.47.67.88.010.7211.1511.6012.0912.6313.2213.8514.5515.4516.4717.3918.1718.7319.1519.459.288.858.407.917.376.786.155.454.553.532.611.831.270.850.55Na2HPO4分子量 = 14.98，0.2 mol/L溶液为28.40克/升。
各种缓冲液的配制方法之杨若古兰创作Na2HPO4-柠檬酸钠缓冲液（1）醋酸盐溶液的配制：醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.6)取醋酸钠5.1g,加冰醋酸20ml，再加水浓缩至250ml,即得. 醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.7)取无水醋酸钠20g,加水300ml溶解后，加溴酚蓝唆使液1ml 及冰醋酸60～80ml，至溶液从蓝色改变成纯绿色，再加水浓缩至1000ml，即得.醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.8)取2mol/L醋酸钠溶液13ml与2mol/L醋酸溶液87ml,加每1ml含铜1mg的硫酸铜溶液0.5ml,再加水浓缩至1000ml，即得.醋酸－醋酸钠缓冲液(pH4.5)取醋酸钠18g,加冰醋酸9.8ml,再加水浓缩至1000ml,即得. 醋酸－醋酸钠缓冲液(pH4.6)取醋酸钠5.4g,加水50ml使溶解，用冰醋酸调节pH值至4.6，再加水浓缩至100ml，即得. 醋酸－醋酸钠缓冲液(pH6.0)取醋酸钠54.6g，加1mol/L醋酸溶液20ml溶解后，加水浓缩至500ml，即得.用醋酸和醋酸钠配制的缓冲溶液的PH=PKa+lg[C(NaAc)/C(HAc)]（在此，C(HAc)指醋酸的浓度，C(NaAc)指醋酸钠的浓度,Ka是醋酸的解离常数=1.8*10-5（1.8乘10的-5次方），PKa=-lgKa=4.75，将PH=5.5代入，可得C(NaAc)/C(HAc)=5.6 通常我们配制时会使C(HAc)=0.1mol/L，或是C(HAc)=0.2mol/L等.若是配制C(HAc)=0.1mol/L，则C(NaAc)=0.56mol/L 称量醋酸钠固体质量为82*0.56=46克量取冰醋酸体积为0.1*1000/17.5=5.7mL.将称好的醋酸钠和量好的冰醋酸加入1000mL水中溶解、搅拌均匀即可.当然若想配制其它的浓度，也可照公式计算即可，通常缓冲溶液不克不及配的太稀，否则缓冲能力要降低，太浓的话又浪费试剂.0.2mol/L苯二甲酸氢钾溶液：称取在硫酸干燥器中干燥过24小时的苯二甲酸氢钾20.44g溶于水中，浓缩至500ml.磷酸盐缓冲液（PBS）配制方法0.01M PBSPBS (135 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 1.5 mM KH2PO4, and 8 mM K2HPO4，pH 7.2)称NaCl，KCl，KH2PO4(or Na2HPO4)和K2HPO4，溶于800 ml 蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，最初加蒸馏水定容至1 L.保管于4℃冰箱中即可.须要留意的是，通常所说的浓度0.01 M指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度，而非Na 离子或K 离子的浓度，Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的.母液的配制：Na2HPO4：称取Na2HPO4-12H2O，溶于1000ml 水NaH2PO4：称取NaH2PO4-2H2O，溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制：先配PB (pH=7.4，100ml)：取19ml 0.2mol/L的NaH2PO4，81ml 0.2mol/L 的Na2HPO4, 即可.然后只需将PB (pH=7.4)按响应比例适当浓缩即可，如：PB（PH=7.4）：取500ml PB，加水浓缩至1000ml 即可. PB （PH=7.4）：取50ml PB，加水浓缩至1000ml 即可. PB （PH=7.4）：取100ml 0.2 M PB，加水浓缩至1000ml 即可.若须要NaCl的话，加入NaCl 至0.9%（g/100ml）即可.另：其它各种另PH值的PB（100ml)配方：pH NaH2PO4（ml）Na2HPO4（ml）5.8 92 85.9 90 106.1 85 15 6.8 51 496.9 45 557.0 38 627.1 33 677.2 28 727.3 23 777.4 19ml 81ml 7.5 16 847.6 13 877.9 7 93磷酸盐缓冲液（PBS）配制方法称取8g NaCl、KCl、Na2HPO4和KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，最初加蒸馏水定容至1L即可.在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌（至多20分钟），保管存于室温或4℃冰箱中.须要留意的是，通常所说的浓度指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度，而非Na 离子或K 离子的浓度，Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的.如果是用于免疫组化的话，则须要在配置的时候分别加入100 u/ml青霉素和链霉素以后再调PH、定容、灭菌消毒.PH 7.6 7.4 7.2 7.0H2O 1000 1000 1000 1000NaCl 8.5 8.5 8.5 8.5Na2HPO4 2.2 2.2 2.2 2.2根据经验来看，新颖配置的PBS搅匀后其PH值约在7.2-7.4之间，可是在温度的影响下，特别在炎天，其电离常数发生了改变，在经过日夜的时间后，PH值会明显改变（我亲自测过偏酸）.所以做实验的同学可要留意了，PH值可能会影响实验结果，甚至可能导致阴性.所以务必记得这个时候和天气，要加强实验条件控制成绩.每次使用前最好用试纸测一下过夜了的PBS，如果发生偏酸或偏碱，留意从头换新液. PBS缓冲液称取NaCl 8g，KCl ，Na2HPO4?12H2O , KH2PO4 ，溶于900ml双蒸水中，用盐酸调pH值至7.4，加水定容至1L，常温保管备用.PBST缓冲液取300μl Tween-20 加入PBS 100ml中，混匀后即刻使用.现用现配.如果是把所有固体加大十倍，配置为浓缩液，工作时候十倍浓缩，那么，在刚配好浓缩液时，PH在6.5摆布，明显偏酸.不克不及用盐酸调.虽然可以用氢氧化钠颗粒调，但是有更方便的方法.十倍浓缩当前，PH主动升高到所须要的值.不须要其它任何处理.这个可以先取少量试一试，配好以后再测一次~2. 向烧杯中加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解.3. 滴加浓盐酸将pH值调节至8.0，然后加入去离子水将溶液定容至1 L.4. 高温高压灭菌后，室温保管.留意：上述PBS Buffer中无二价阳离子，如须要，可在配方中弥补1 mM CaCl2和0.5 mM MgCl2.0.05mol/L PBS(磷酸缓冲液Phosphate Buffer Solution，PBS)的配制：甲液：0.05mol/L Na2HPO4溶液：称取磷酸氢二钠,加蒸馏水至1000ml ;乙液：0.05mol/L KH2P04溶液: 称取磷酸二氢钾, ,加蒸馏水至1000m1.将甲乙液分装在棕色瓶内，于4℃冰箱中保管，用时甲、乙两液各按分歧比例混合，即可得所需pH的缓冲液,见下表: pH 甲液ml 乙液mI5.29 2.5 97.55.59 5.0 95.05.91 10.0 90.06.24 20.0 80.06.47 30.0 70.06.64 40.0 60.06.81 50.0 50.06.98 60.0 40.07.17 70.0 30.07.38 80.0 20.07.73 90.0 10.08.04 95.0 5.0你要配制pH=6.8的PBS，可用甲、乙液各50ml混合即可.硼砂易失去结晶水，必须在带塞得瓶中保管；硼砂溶液也能够用半中和的硼酸溶液代替0.02mol/LKCl溶液：溶7.455g氯化钾于水中，浓缩至500ml0.02mol/L苯二甲酸氢钾溶液：称取在硫酸干燥器中干燥过24小时额苯二甲酸氢钾20.44g溶于水中，浓缩至500ml0.2mol/L磷酸二氢钾溶液：溶13.616g磷酸二氢钾于水中，浓缩至500ml。
柠檬酸缓冲液（干粉）使用说明书产品货号：PM5100包装规格：10袋/50袋（配制2L/袋）储存条件：常温保存，保质期3年；配制好的工作液常温保存，保质期6个月。
产品简介：本公司生产的柠檬酸缓冲液预混干粉，精选优质原料，经过特殊加工处理，呈均一白色粉末状，溶解性好，使用起来方便快捷。
可迅速配制成0.01M，pH6.0的柠檬酸缓冲液，作为抗原修复液。
细胞或组织用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后，会导致细胞内抗原形成醛键、羧甲键，蛋白之间发生交联。
封闭或隐蔽部分抗原决定簇，导致免疫染色信号减弱，甚至出现一些假阴性染色结果。
免疫组化染色时需要先进行抗原修复或暴露，即将固定后分子之间所形成的交联破坏，恢复抗原的原有空间形态。
能够降低染色背景，提高抗原的检出率和检测的准确性。
0.01M，pH6.0的柠檬酸钠缓冲液是一种常用的抗原修复液，可以用于多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。
能有效去除蛋白交联，充分暴露样品中的抗原表位，从而改善免疫染色效果。
石蜡切片都需进行抗原修复，可以提高免疫染色效果，通常冰冻切片不进行抗原修复。
但免疫染色效果不理想时，可以考虑抗原修复，能不同程度的提高的染色效果。
按照每个片子需要10ml抗原修复液计算，2L抗原修复液可以用于200个样本的抗原修复。
使用说明：1．每袋粉剂可配制成2L，0.01M，pH6.0的柠檬酸缓冲液，作为抗原修复液。
2．配制时用去离子水或双蒸水作为溶剂。
3．打开包装袋，将包装袋中的粉剂全部溶于1800 ml的去离子水或者蒸馏水中，定容至2L。
4.柠檬酸修复液使用前需预热到95-100℃。
可以使用水浴锅、微波炉加热。
微波炉加热时，避免暴沸和水分蒸发过多。
抗原修复过程：1.石蜡切片：A.脱蜡：二甲苯3次，每次3-5min；无水乙醇2次，每次3-5min；95％乙醇1次，3-5min；90%乙醇1次，3-5min；75％乙醇1次，3-5min；蒸馏水洗2次，每次3-5min。
