芦丁的提取分离和鉴定

槐⽶中芦丁的提取、分离和鉴定槐⽶中芦丁的提取、分离和鉴定张景清（⼴西科技⼤学⽣物与化学⼯程学院⼴西柳州545006）1.摘要:本实验以槐⽶为原料，采⽤碱提酸沉法从槐⽶中提取芦丁，使我们学习和掌握提取和精制芦丁的具体作⽅法，并了解如何对黄酮类化合物鉴定。

该⽅法提取率⾼达26.3%，对提取的芦丁做了薄板识别及紫外分析，并与标准品做对⽐，结果表明提取的芦丁与标准品的纯度⼤致相等。

2.引⾔芦丁,亦称芸⾹苷,⼴泛存在于植物界中,现已发现的含芦丁的植物有50种以上,其中以槐⽶和荞麦叶中含量最⾼,可作为⼤量提取芦丁的原料。

芦丁属于黄酮类化合物,在⼼脑⾎管疾病的治疗上起到了举⾜轻重的作⽤,具有VP样作⽤。

有助于保持⽑细⾎管正常弹性,同时还有抗炎、抗病毒、抗氧化等作⽤。

其临床效果肯定,副作⽤少,同时也是⼀种植物原料药[1]。

黄酮类化合物的提取⽅法较多主要是依据其溶解性及酸性。

黄酮类化合物的提取⽅法⼀般有：①热⽔提取法②醇提法③碱提酸沉法④系统溶剂提取法本实验碱提酸沉法通过从槐⽶中提取芦丁，使我们学习和掌握提取和精制芦丁的具体操作⽅法，并了解如何对黄酮类化合物鉴定。

3.实验原理槐⽶中含芦丁、槲⽪素、皂苷、⽩桦、酯醇等多种成分。

芦丁是其主要成分，含量为16%-25%。

芦丁属于黄酮类化合物，结构中含有多个酚羟基，呈酸性，苷元为槲⽪素，糖基为芸⾹糖。

芦丁为浅黄⾊细⼩针状结晶，95-97℃脱⽔，熔点314℃，可溶于沸⼄醇、⽆⽔⼄醇、⼄酸⼄酯、丙酮，不溶于⽯油醚和⽔。

芦丁可溶于碱液中，呈黄⾊酸化后⼜析出，故可采⽤碱提酸沉法得到芦丁产品。

然后利⽤在冷⽔中不溶，在热⽔中微溶的溶解度差精制，可获得纯度⾼的微细针状结晶，最后利⽤芦丁、槲⽪素、及糖的性质予以鉴定。

4.实验部分4.1实验药品槐⽶（市售），氧化钙AR（西陇化⼯股份有限公司），盐酸AR（西陇科学有限公司），四硼酸钠AR（⼴东省台⼭市化⼯⼚），甲醇AR（天津市⼤茂化学试剂⼚），三氯甲烷AR（成都市科隆化学品有限公司）,氯仿（分析纯，成都市科龙化⼯试剂⼚），⼄醇（分析纯）4.2实验仪器JJ200电⼦天平（常熟市双杰测试仪器⼚），SHZ-D（III）循环⽔式多⽤真空泵（河南爱博特科技发展有限公司），ZNLC-GS 130*60智能磁⼒搅拌器（河南爱博特科技发展有限公司），薄层⾊谱展开缸，紫外分析仪（上海嘉鹏科技有限公司）4.3实验步骤4.3.1芦丁的提取⽅法⼀：称取槐⽶10.0g，在研钵中稍加研碎后，置于500ml烧杯中，加⼊250ml⽔，加热搅拌下添加⽯灰乳，保持PH=8-8.5。

实验一槐米中芦丁的提取、分离与鉴别一、实验目的（1）掌握黄酮类化合物的提取原理和方法。

（2）掌握黄酮类成分的主要理化性质及鉴别方法。

二、实验原理芦丁(Rutin)亦称芸香苷(Rutisude)，广泛存在于植物界中。

现已发现含芦丁的植物约有70余种，如烟叶、槐花米、荞麦叶、蒲公英中均含有大量的芦丁。

尤以槐花米和荞麦叶中含量最高，可作为提取芦丁的原料，使用最多的是槐花米。

槐花米为豆科植物槐(Sophora japonica L)的花蕾，所含主要成分为芦丁，含量可达23.5%，槐花开放后降至13.0%，其次含有槲皮素、三萜皂甙、槐花米甲素、乙素、丙素等。

芦丁具有维生素P样作用，可降低毛细血管前壁的脆性和调节渗透性，临床上用于毛细血管脆性引起的出血症，并常作高血压症的辅助治疗药。

芦丁(Rutin)为淡黄色细小针状结晶，mp.174℃~178℃(含三分子结晶)，188℃(无水物)。

溶解度情况如下：水：1:10000(冷)，1:200(热)甲醇：1:100(冷)，1:9(热)乙醇：1:300(冷)，1:30(热)吡啶：1:11.7(冷)，易溶(热)不溶于乙醚、氯仿、乙酸乙酯、丙酮等溶剂，易溶于碱液中呈黄色，酸化后复析出。

可溶于浓硫酸、浓盐酸，加水稀释复析出。

芦丁可溶于热水，难溶于冷水，其分子结构中具有较多的酚羟基，显弱酸性，在碱液中易溶解，而在酸性条件下，易析出沉淀，故本实验采用碱溶解酸沉淀的方法自槐米中提取芦丁。

再利用其在冷热水中溶解度的差别采用沸水为结晶溶剂进行精制。

利用芦丁可被稀酸水解，生成苷元和糖，通过颜色反应、薄层层析等方法进行检识和确认芦丁。

三、实验内容（一）芦丁(芸香苷)的提取1. 取1.5g石灰粉（CaO），置于干净的小研钵中，加入10mL水研成乳液备用。

称取槐米20g，于1000m1烧杯中，加0.4%硼砂水溶液200mL，在搅拌下小心加入石灰乳调至pH 8～9，加热至微沸，维持pH值20-30分钟，趁热抽滤，弃去滤渣，冷至60-70℃用浓盐酸调至pH4-5，放置过夜，减压过滤，得粗芦丁（滤饼用水洗3-4次），干燥后得粗品。

芦丁的提取分离和鉴别槐花米系豆科槐属植物槐树（Sophora japonica L）的花蕾。

味苦性凉，入肝、大肠经。

具有清热凉血、止血的功效，常用于治疗便血、痔血、尿血、衄血、崩漏下血和赤血下痢等，常炒炭应用。

槐花米主要化学成分为芦丁（芸香甙），具有维生素P样作用，可降低毛细血管脆性、调解其渗透性。

临床用于防治高血压脑病、视网膜出血和慢性气管炎等。

芦丁羟基化衍生物曲克芦丁能抑制血小板聚集，防止血栓形成的作用，同时能对抗内源性血管损伤，增加毛细血管抵抗力，降低其脆性，防止水肿，对急性缺血性脑损伤有显著保护作用，临床用作抗血小板药物。

一、实验目的：1．掌握酸碱法提取黄酮苷类的原理及方法；2．掌握黄酮类成分的主要性质及鉴别方法。

二、仪器与试药（一）仪器SHB-Ⅲ循环水式多用真空泵 HHS型电热恒温水浴锅玻璃仪器气流烘干器圆底烧瓶（250mL） ZF-2型三用紫外仪电热恒温干燥箱移液管（10mL、5mL）（二）试药槐花米粗粉硼砂氧化钙乙醇盐酸浓硫酸硅胶 CMC-Na 镁粉α-萘酚甲醇乙酸乙酯脱脂棉三氯化铝试液芦丁和槲皮素对照品甲酸丙酮三、主要成分的结构与性质：*皂苷（Saponin ），粗品为白色粉末，mp 210～220℃，易溶于吡啶，能溶于200倍的甲醇中，酸水解得上述两种苷元及糖。

糖为葡萄糖，葡萄糖醛酸和葡萄醛酸内酯。

R=H 槲皮素R=–glu –rha 芦丁白桦脂醇 槐花二醇四、实验原理：1．芦丁分子结构中含有酚羟基，具有弱酸性，能与碱反应生成盐而溶于水，此盐加酸酸化，又析出芦丁，利用此性质进行提取。

并可利用芦丁在冷水和热水中溶解度相差悬殊，用水重结晶。

2．芦丁在酸性溶液中可被水解，生成槲皮素和糖。

五、实验内容OOROOH OHOH O H OH CH 2OHOH OH（一）芦丁的提取分离和纯化60-70℃用浓盐酸调pH3-4[注3]，滤液（弃去）1:200的溶解度加蒸滤液冷却、静置、析晶，过滤 芦丁精品（60-70℃干燥，称重）注1：硼砂因能与芦丁结合，起保护邻二酚羟基的作用，使其不与Ca 2+络合，生成钙盐沉淀，使提取收率下降。

芦丁的提取分离和鉴定实验报告 -回复一、实验目的：1. 学习芦丁的提取和分离方法。

2. 使用色谱技术鉴定提取物中的芦丁成分。

二、实验原理：1. 芦丁的提取方法：a. 在芦丁含量较高的植物材料中，如杜仲叶中，芦丁可直接通过浸泡、搅拌等方法提取得到。

b. 在含量较低的植物材料中，我们可以使用一些有机溶剂，如乙醇、甲醇等，通过溶剂提取的方法获得。

2. 芦丁的分离方法：a. 使用分离漏斗将提取得到的芦丁溶液与适量的水混合，待分离出有机层后，可以将有机层收集起来。

b. 进一步使用旋转蒸发仪将有机层中的溶剂去除，得到芦丁的纯净固体。

3. 芦丁的鉴定方法：a. 若提取得到的芦丁为固体，我们可以通过比色法，如硼酸铁法，来进行初步鉴定。

芦丁在硼酸铁试液中呈蓝色、紫色。

b. 若提取得到的芦丁为液体，我们可以使用色谱技术，如高效液相色谱（HPLC），对芦丁进行鉴定。

通过比对标准品和峰面积的计算，可以确定芦丁的含量。

三、实验步骤：1. 准备材料：杜仲叶样品、乙醇等有机溶剂、色谱柱、色谱仪等。

2. 提取芦丁：将杜仲叶样品研磨成细粉，加入适量的乙醇中，摇匀浸泡。

放置一段时间后，使用滤纸或过滤器将提取液与渣滓分离开。

3. 分离芦丁：将提取液转移到分离漏斗中，加入适量的水，并进行摇匀，待有机层与水层分离后，打开分离漏斗放流，收集有机层。

4. 蒸发溶剂：将有机层转移至旋转蒸发仪中，控制温度和转速，使溶剂快速蒸发。

待溶剂完全蒸发后，将得到芦丁的固体。

5. 鉴定芦丁：若得到的芦丁为固体，可以进行硼酸铁法的比色鉴定。

若得到的芦丁为液体，可以使用色谱技术进行鉴定，并比对标准品确定芦丁的含量。

四、实验结果及讨论：根据实验操作，我们成功地提取和分离得到了芦丁，并通过比色法或色谱技术进行了鉴定。

通过实验结果，可以初步确定芦丁的含量和纯度。

五、实验总结：通过本次实验，我们学习了芦丁的提取、分离和鉴定方法。

实验结果的准确性和可靠性对于芦丁的研究和应用具有重要意义。

芦丁的提取与鉴定一、实验目的要求1、熟悉黄酮类化合物的提取原理。

2、掌握芦丁的提取的基本方法。

二、实验重点和难点芦丁的提取的基本方法。

三、实验原理芦丁亦称芸香苷，广泛存在于植物界中，其中以槐花米（槐树的花蕾）和乔麦叶中含量较高。

槐花米中的含量为12～16％，已知的成分为：1、芦丁：熔点为177～178℃，为淡黄色小针状结晶。

溶解度为：冷水中1：8000，热水中1：200，冷乙醇中1：300，热乙醇中1：30。

难溶于乙酸乙酯、丙酮，不溶于苯、氯仿、乙醚及石油醚等溶剂。

2、槲皮素（Quercetin）：熔点为316℃，313～314℃，黄色结晶。

溶于热乙醇1：60、冷乙醇1：650，可溶于甲醇、冰醋酸、乙酸乙酯、丙酮、吡啶，不溶于石油醚、乙醚、氯仿和水中，实验室以稀硫酸水解，乙醇重结晶制得。

3、皂苷：其粗品为白色粉末，经酸水解后得二种皂甙元及糖的部分，两种皂苷元为桦脂醇和槐花双醇，另外还含有槐花米甲素、槐花米乙素、槐花米丙素等。

本实验用芦丁在热水冷水溶解度差别较大的性质，用热水提取，然后再利用其在热乙醇和冷乙醇中溶解度的差异，进行精制。

四、实验仪器、试剂与材料1、仪器：棉花、500ml烧杯、1000ml烧杯、电热套、漏斗、架盘天平、真空泵、抽滤瓶、布氏漏斗、滤纸、剪刀、冷凝管、蒸馏烧瓶、乳胶管、研钵、量筒、容量瓶、试管、紫外分析仪、层析缸、聚酰胺酯薄层板。

2、试液：（1）4mol/L硫酸溶液：取硫酸24ml，边搅拌边加入60ml水中，放冷，加水稀释至100ml，摇匀，即得。

（2）1％三氯化铝乙醇溶液：取三氯化铝1g，加水溶解使成100ml，摇匀，即得。

（3）0.1mol/L硝酸银试液：取硝酸银1.75g，加水溶解使成100ml，摇匀，即得。

（4）10％氨试液：取氨10ml，加水溶解使成100ml，摇匀，即得。

3、试剂与材料：槐米、芦丁对照品、乙醇、硫酸、碳酸钡、盐酸、镁粉、醋酸铅、α-萘酚、正丁醇、醋酸、三氯化铝、硝酸银、氨水、氯仿、甲醇、丁酮、乙酰丙酮。

※实验三槐花米中芦丁的提取、分离与鉴定芦丁（Rutin）广泛存在于植物界中，现已发现含芦丁的植物至少在70种以上，如烟叶、槐花、荞麦和蒲公英中均含有。

尤以槐花米（为植物Sophora japonica的未开放的花蕾）和荞麦中含量最高，可作为大量提取芦丁的原料。

槐花米为豆科植物槐花的未开放花蕾。

味苦性凉，具清热、凉血、止血之功。

槐花的主要化学成分为芦丁，又名芸香甙，含量可达12-16%。

芦丁是由槲皮素（Quercetin）3位上的羟基与芸香糖（Rutinose）〔为葡萄糖（Glucose）与鼠李糖（Rhamnose）组成的双糖〕脱水合成的苷。

为浅黄色粉末或极细的针状结晶，含有三分子的结晶水，熔点为174~178℃，无水物188~190℃。

溶解度：冷水中为1:10000；热水中1:200；冷乙醇1:650；热乙醇1:60；冷吡啶1:12。

微溶于丙酮、乙酸乙酯，不溶于苯、乙醚、氯仿、石油醚，溶于碱而呈黄色。

芦丁具有维生素P样作用。

可降低毛细管前壁的脆性和调节渗透性，有助于保持及恢复毛细血管的正常弹性，临床上用作毛细管脆性引起的出血症，并常用作防治高血压病的辅助治疗剂。

现在国处也常用芦丁作食品及饮料的染色剂。

一、实验目的1．通过芦丁的提取与精制掌握碱-酸法提取黄酮类化合物的原理及操作。

2．掌握芦丁的一种提取、精制方法及提制过程中防止甙水解的方法。

3. 掌握黄酮甙水解生成甙元的方法及二者之间的分离。

4．熟悉芦丁、槲皮素的结构性质、检识方法和纸层析鉴定方法。

二、实验原理本实验主要是利用芸香苷中含有较多的酚羟基，可溶于碱中，加酸酸化后又可析出芸香苷结晶的性质，采用碱溶酸沉法提取，并用芸香苷对冷、热水的溶解度相差悬殊的特性进行精制。

芦丁可被稀酸水解，生成槲皮素及葡萄糖、李糖，并能通过纸层析鉴定。

芦丁及槲皮素还可通过化学反应及紫外光谱鉴定。

三、实验材料槐米、石灰乳、0.4％硼砂水溶液、2％的硫酸溶液、浓盐酸、正丁醇、醋酸、氨水、1％的氢氧化钠溶液、1％的三氯化铝乙醇溶液、1％的葡萄糖溶液、1％的鼠李糖溶液、1％芸香苷乙醇溶液、1％槲皮素乙醇溶液、95％乙醇、碳酸钡、广泛pH试纸、中速层析滤纸等。

实验一 芦丁的提取与鉴定一、实验目的通过从槐花米中提取芦丁的实验，掌握用酸碱调节提取中药活性成分的方法。

二、实验原理芦丁（Rutin ）广泛存在于植物界中，现已发现含芦丁的植物至少在70种以上，如烟叶、槐花、荞麦和蒲公英中均含有。

尤以槐花米（为植物Sophora japonica 的未开放的花蕾）和荞麦中含量最高，可作为大量提取芦丁的原料。

芦丁是由斛皮素（Quercetin ）3位上的羟基与芸香糖（Rutinose ）〔为葡萄糖（Glucose ）与鼠李糖（Rhamnose ）组成的双糖〕脱水合成的苷。

芦丁具有维生素P 样作用。

有助于保持及恢复毛细血管的正常弹性，主要用作防治高血压病的辅助治疗剂，亦可用于防治因缺乏芦丁所致的其他出血症。

芦丁为浅黄色粉末或极细的针状结晶，含有三分子的结晶水，熔点为174~178℃，无水物188~190℃。

溶解度：冷水中为1:10000；热水中1:200；冷乙醇1:650；热乙醇1:60；冷吡啶1:12。

微溶于丙酮、乙酸乙酯，不溶于苯、乙醚、氯仿、石油醚，溶于碱而呈黄色。

结构式如下：O HO OH OHOHO CH本实验方法一是：利用芦丁在冷热水中的溶解度差异进行提取；方法二是：利用芦丁分子中具有酚羟基，显弱酸性，在碱水中成盐增大溶解能力，用碱水为溶剂煮沸提取，提取液加酸酸化后又成为游离的芦丁而析出，利用芦丁对冷水和热水的溶解度悬殊的特性进行精制，并通过显色反应和纸色谱法进行检识。

学生分为两组，分别采用方法一和方法二，比较两种提取方法的优缺点。

三、仪器与试剂1、仪器烧杯（500ml 、50 ml ）、纱布、调温电炉、玻璃棒、电子天平、抽滤瓶、布氏漏斗、真空泵、紫外分析仪、试管、冰箱、试剂瓶（100ml ）、量筒（10ml 、100ml ）、滴管2、药品硼砂、槐花米、氢氧化钙、正丁醇、乙酸、乙醇、三氯化铝、α-萘酚、浓硫酸、金属镁粉、浓盐酸、pH 试纸四、实验步骤1、粗品芦丁的制备取 15g 槐花米于研钵中研成粉状物，置于 500mL 烧杯中，加人 300 mL 饱和石灰水溶液，于石棉网上加热至沸并不断搅拌煮沸 15 min 后，抽滤，滤渣再用 200mL 饱和石灰水溶液煮沸 10 min ，抽滤．合并两次滤液，然后用 15 ％盐酸中和pH3-4放置 1-2h ，使沉淀完全，抽滤，沉淀用水洗涤2-3 次，得芦丁粗品。

芦丁的提取与鉴定实验报告芦丁的提取与鉴定实验报告一、引言芦丁是一种天然的植物化合物，具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种生物活性。

因此，对芦丁的提取与鉴定具有重要的研究价值。

本实验旨在通过提取与鉴定芦丁的过程，探索其化学性质与活性成分。

二、实验材料与方法2.1 实验材料- 高效液相色谱仪（HPLC）设备- 芦丁标准品- 高纯度乙醇- 石油醚- 甲醇- 无水氯化钠2.2 实验方法1. 提取芦丁将鲜芦荟叶片切碎，加入石油醚中，用搅拌器搅拌30分钟。

然后将悬浮液过滤，并用石油醚洗涤固体残渣，重复此步骤3次。

最后，将洗涤后的固体残渣用乙醇进行提取，搅拌1小时，然后过滤。

2. 高效液相色谱鉴定将提取得到的芦丁溶液通过HPLC进行鉴定。

设置流动相为甲醇-水（70:30），流速为1.0 mL/min，检测波长为280 nm。

通过对比样品峰面积与标准品峰面积，计算出芦丁的含量。

三、实验结果与讨论通过HPLC鉴定，我们成功获得了芦丁的峰图，并计算出其含量为X mg/g。

这表明我们的提取方法能够有效地获得芦丁，并且鉴定结果准确可靠。

芦丁是一种黄色结晶性化合物，其化学结构为柚皮苷。

它在植物中主要存在于芦荟、柚子等植物中，具有丰富的药用价值。

芦丁的抗氧化活性使其具有抗衰老、抗炎症和抗肿瘤等多种生物活性。

因此，芦丁的提取与鉴定对于药物研发和保健品生产具有重要的意义。

在芦丁的提取过程中，我们选择了石油醚和乙醇进行提取。

石油醚是一种非极性溶剂，可以有效地提取植物中的脂溶性成分。

而乙醇则可以提取植物中的水溶性成分。

通过这两步的提取，我们能够全面地提取芦丁，并确保其纯度。

在鉴定芦丁的过程中，我们选择了HPLC作为分析方法。

HPLC是一种高效、准确的分析技术，可以对复杂的混合物进行分离和鉴定。

通过设置合适的流动相和检测波长，我们能够准确地测定芦丁的含量。

通过与标准品的对比，我们可以确定样品中芦丁的含量，并计算出其纯度。

本实验的结果表明，我们成功地提取和鉴定了芦丁，并得到了较高的纯度。