维生素C注射液含量测定 ppt课件

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七、注意事项 防止滴定管漏液、气泡
操作过程迅速，防止还原型Vc氧化 滴定过程 < 2min 滴定所用染料：1～4ml 酌情增减样液用量、改变提取液稀释度 浆状物泡沫太多，可加数滴丁醇或辛醇 实验必须在酸性条件下进行（干扰物反应慢）
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维生素C含量排行
冬寒菜 20.00 毫克
洗净、沥干
少量1% HCI
1）Vc的提取
研磨
静置
2～4层纱布过滤
定容（容量瓶）
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2）样品提取液Vc含量测定
滴定至粉红色，15s不褪色 记录体积（2～3份平行）
0.1% DCPIP
样品提取液 10ml
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六、计算
VA：滴定样品消耗染料的平均体积（ml） VB：滴定空白耗用的染料的平均体积（ml） C：样品提取液的总体积（ml） D：滴定时所取的样品提取液体积（ml） T：1ml染料相当于Vc溶液的量（mg） W：待测样品重量（g）
第一层
鲜枣、沙棘、猕猴桃、柚子
>100mg/100g
第二层
青椒、桂圆、番茄、草莓、甘
蓝、黄瓜、柑橘、菜花
>50mg/100g
第三层：
白菜、油菜、香菜、菠菜、芹
菜、苋菜、菜苔、豌豆、豇豆、
萝卜
>30～50mg/100g
绝大多数绿叶菜、甘蓝、
青椒等都含有丰富的Vc
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菠菜 32 辣椒(红、小) 144 柿子椒 72 西兰花 51 苦瓜 56 草莓 47 苹果 4 西瓜 6 鲜枣 243
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二、实验原理 Vc具强还原性：还原性、脱氢型 还原型Vc→→→还原染料DCPIP ，本身氧化为脱氢型 DCPIP：酸性溶液红色，还原后无色 Vc全部被氧化→→→多余染料使溶液成粉红色 无色→→→微红色：溶液Vc全部氧化→→→滴定终点。

参考文献
• 李 艳等，旋光法测定维生素c注射液的含量，辽 宁 药 物 与临 床，1999，2(2);11 • 杨婷等.菲林B近红外分光光度法测定维生素C.分析化学研究简 报.2005.11(33).1593-1595 • 陆 茜 等，紫外分光光度法测定维生素C含量，江汉大学学报(自 然科学版)，2005，33(2), • 仉玲等，紫外分光光度法测定维生素C注射剂的含量，安徽医药， 2001 ,S(4) • 肖本富等,高效液相色谱法测定血浆中维生素C的含量苏州大学学 报(医学版)2004；24(6) • 杨辉等,双波长薄层扫描法测定维生素C的含量锦州l矗学院学报， 2006，27(3) • 胡晓艳. HPLC测定力度申泡腾片中维生素C的含量.广东药 学.2005.15(1);8-10 • 谭甜有,钟世顺 ,李丽明. HPLC测定健元片中维生素C含量的方法 研究.国际医药卫生导报.2006 .12(12):107-109
菲林B近红外分光光度法
• 标准曲线制备 分别准确配制浓度为0-50.0 mg/L的维生素C系列标准工 作液，按上述实验方法测定吸光度 。 • 线性回归做标准曲线。 • 根据标准曲线求出维生素C含量。
紫外分光光度法
• 实验方法 在10mL比色管中依次加入pH=9.5醋酸一醋酸钠缓冲溶 液2mL，1．06μg/mL甲基紫2mL；在其中一个比色管 中加人一定量的维生素C注射液(在稀释后浓度小于50 mg／L)，在另一个比色管中不加维生素C注射液；用 二次蒸馏水定容，摇匀。用水作空白，1cm 比色皿于 265nm 处，测定吸光度 。
2，6-二氯靛酚滴定法
• 实验方法
精密量取注射液适量（约相当于维生素C50mg），置 于100mL容量瓶中，加偏磷酸-醋酸试液20mL，用水稀 释至刻度，摇匀；精密量取稀释液适量（约相当于维 生素C2mg）置50mL锥形瓶中，加加偏磷酸-醋酸试液 5mL，用2，6-二氯靛酚滴定液滴定，至溶液现玫瑰红 色，并持续5S不褪；另取偏磷酸-醋酸试液5.5mL，加 水15mL，用2，6-二氯靛酚滴定液滴定，作空白试验 校正。以2，6-二氯靛酚滴定液浓度体积以及相应维 生素C滴定度计算。

1. 整个操作过程要迅速，防止还原型抗坏血酸被氧化。
2. 滴定所用2，6-二氯酚靛酚的量应在1-4毫升之间， 超出或低于此范围，应增减样品液用量或改变提取 液稀释度。
3. 微量滴定管要小心操作。
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【实验报告】
• 实验标题
姓名，班级，学号
• 实验原理
DCPIP (蓝色) + H+ DCPIPH+ (粉红色)
滤纸过滤，滤饼可用少量 2%草酸 洗2-3次；
置滤液于50mL容量瓶中, 用2%草酸溶液定容并混匀。
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（二）标准抗坏血酸的滴定
2mL 标准Vc 溶液（0.1mg /mL） 8ml 2%草酸
2份
10ml 2%草酸 （空白对照）
2份
分别以0.1% 2,6- 二氯酚靛酚钠溶液滴定至淡红色， 并保持15秒不褪色，即达终点。
DCPIPH+ (粉红色) + Vc
DCPIPH2+ (无色)
• 实验方法及简单步骤
• 实验结果及计算
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实验报告
消耗DCPIP的量(ml)
1 标准Vc (X mg)
样品滤液(D ml)
2% 草酸
2
均值
VA
选材： 松针 样品量: g
VB １ml 染料相当于 T mg Vc
实际测得每100g 松针 中的维生素C含量为
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DCPIP
• The principle of this method is a titration with dichlorophenolindophenol (or phenolindo-2:6-dichlorophenol, also known as DCPIP). Ascorbic acid reacts with DCPIP, changing the color from blue to pink to colorless. They react in a 1:1 fashion, so if a known quantity of DCPIP solution reacts with the plant tissue extract, the quantity of DCPIP used gives a direct measure of the quantity of ascorbic acid present.

实验前准备：试剂及试药
仪器：酸式滴定管、碘量瓶4个、烧杯、量筒 (50ml\20ml)、胖肚移液管、洗耳球、滤纸 胶头滴管
试药：维生素C注射液、纯化水、丙酮、稀醋 酸、淀粉指示剂、碘滴定液
试液的配制： 碘滴定液：取碘13.0g，加碘化钾36g与水 50ml溶解后，加盐酸3滴与水适量使成 1000ml,摇匀，用垂熔玻璃滤器滤过。 淀粉指示剂：取可溶性淀粉0.5g，加水5ml搅 匀后，缓缓倾入100ml沸水中，随加随搅拌， 继续煮沸2分钟，放冷，倾取上层清液，即得 ，本液临用时新制。 稀醋酸：取冰醋酸60ml，加水稀释至 1000ml，即得。
通用名：维生素C注射液 英文名：Vitamin C Injection 维生素C又叫抗坏血酸， 是一种水溶性维生素， 其水溶液呈酸性反应， 在空气中易被氧化。 维生素C注射液：无色或 微黄色的澄明液体。含 维生素C（C6H8O6）应 为标示量的 90.0%~110.0%
实验原理
维生素C分子中的烯二醇基具有还原性，能被 I2 定量地氧化成二酮基
小组成员任务分配
滴定管试漏---滴定管清洗 陈吉（评分：王 晓宇 ） 移液管清洗---吸取注射液 汤芙蓉（评分： 陈嘉琦） 加水15ml---丙酮2ml---摇匀---加稀醋酸 4ml---淀粉指示剂1ml- 陈嘉琦（评分：汤 芙蓉） 滴定 房旭姣 王晓宇 （陈嘉琦、汤芙蓉）
注意事项
精密量取所需注射液 加水15ml与丙酮2ml，摇匀 加入稀醋酸与淀粉指示后，立即用碘滴定液滴 定，防止氧化 滴定至终点后必须盖上塞子 近终点时注意半滴控制 该法需要使用剧毒基准物As2O3 且样品易氧 且样品易氧 该法需要使用剧毒基准物 化．需尽快操作。 需尽快操作。
实验疑问
加水15ml与丙酮2ml后，为什么要 放置5分钟 丙酮在实验中起什么作用 在稀醋酸酸性溶液中滴定的原理

与文献数据的比较
文献数据收集
收集相关文献资料，获取不同研究或生产条件下维生素C含量的测 定结果。
数据对比分析
将实验结果与文献数据进行对比分析，了解本实验测定结果的可靠 性、准确性和一致性。
差异原因探讨
探讨实验结果与文献数据存在差异的原因，为后续研究提供改进方 向和思路。
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结论与展望
结论总结
维生素C含量测定在药物分析 中具有重要意义，能够确保药 品质量和安全。
详细描述
荧光分光光度法利用某些荧光物质与维生素C的特异性反应， 生成荧光产物，通过检测荧光产物的强度来推算维生素C的含 量。该方法具有高灵敏度和选择性，适用于对痕量维生素C的 测定。
微生物学方法
总结词
微生物学方法是利用微生物的生长与维生素C之间的依赖关系来测定维生素C含量的方法。
详细描述
微生物学方法利用某些对维生素C有依赖性的微生物，在含有不同浓度维生素C的培养基中生长，通过测定培养基 中微生物的数量或代谢产物来推算维生素C的含量。该方法具有较好的准确性和可靠性，但操作较为繁琐，需要 一定的实验条件和技术水平。
详细描述
高效液相色谱法利用不同物质在固定相和流动相之间的分配差异进行分离，通 过检测器检测待测物质的信号，从而确定维生素C的含量。该方法具有高分辨率 和准确度，适用于多种药物制剂中维生素C的测定。
荧光分光光度法
总结词
荧光分光光度法是一种灵敏度较高的维生素C含量测定方法， 通过荧光物质与维生素C的特异性反应来检测。
维生素C的来源和摄取
来源
富含维生素C的食物包括柑橘类水 果、草莓、番茄、绿叶蔬菜等。
摄取量
根据膳食指南，成年人每天需要 摄取约100-200毫克维生素C。

2020/5/31
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3．操作注意事项： （1）测定中加入稀醋酸，是使滴定在酸性溶液中进行，在酸性介质中 维生素C受空气中氧的氧化速度减慢，但样品溶于稀酸后仍需立即进行 滴定。 （2）应以重新煮沸冷却的水作为溶媒，目的是减少水中溶解氧对测定 的干扰。 （3）测定中加入丙酮，是为了消除注射液中的抗氧剂焦亚硫酸钠（或 亚硫酸氢钠）的干扰。
可以用碘量法测定其含量。
焦亚硫酸钠、亚硫酸氢钠或亚硫酸钠等抗氧剂，可与丙
酮或甲醛反应生成加成物，从而排除抗氧剂对测定的干扰
。 滴定反应式：
CH2OH
H C OH O O +I2 H+
CH2OH
H C OH O O +2HI
HO OH
OO
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一、测定原理
2．含量计算：
标示 % V 量 I2TF1 0 3V每支 10 % 0 V供 S标示
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二、实验内容及步骤
1．操作 精密量取本品1.0ml，加水15ml与丙酮2ml，摇 匀，放置5分钟，加稀醋酸4ml与淀粉指示液lml，用碘滴定 液（0. 1065mol/L）滴定，至溶液显紫蓝色并持续30秒钟不 褪，即为终点。
2. 每1ml碘滴定液（0.05mol/ L）相当于8.806mg的 C6H8O6。

• 烯醇式己糖酸内酯,有L型和D型的两种异构体
• 只有L型有生理功效
• 具有酯键,应具备酯的化学性质
• 在酸性环境中稳定存在
• 测定时pH值以保持在3-5为宜
• 一般用冰醋酸或偏磷酸-醋酸溶液作介质进行 测定
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维生素C的化学性质
• 又具有烯醇式结构 ,还原性强 • 水溶液中可解离成氧化型抗坏血酸
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维生素C的化学性质
• 在弱酸性条件下 ,可被碘氧化为脱氢抗坏血酸
可利用此性质滴定: 指示剂——淀粉溶液
202(1遇/3/7 碘变蓝)
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二.实验内容
① 直接碘量法 ② 间接碘量法 ③ 直接法的一种改进方法 ④ 用反滴定法对方法3的改进
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1．直接碘量法
• 稀淀粉溶液作为指示剂 • 以碘溶液直接滴定至溶液由无色变为蓝色 • 通常将碘溶解在KI溶液中以增大碘的溶解度 • 也是药典中采用的方法
• CuI2 不稳定随即分解为Cu2I2 和游离的碘
2C uI2=C u2I2+I2
• 生成的碘和维生素C反应 ,相当于直接碘量法
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3．直接碘量法的一种改进方法
具体实验步骤: • 在待测液中加入过量的KI标准溶液 • 以淀粉溶液为指示剂 • 以铜盐溶液滴定至溶液呈蓝色即为终点 • 优点:
反应, 但碘单质仍未消耗完 ，说明产生的
2碘021/3单/7 质的浓度较大。
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3．直接碘量法的一种改进方法
结论： ① KI浓度不应过大, 比较合适的浓度为10%～
20% ② KI必须是现用现配的KI ，KI应放在棕色瓶
中避光保存

、澄清，用吸液管取3ml 移至10ml容量瓶中，用缓冲液稀释至刻度。
2，4一二硝基苯肼分光光度法
5ml，加水15ml，用2，6-二氯靛酚滴定液滴定。
同一测试样品，在120min内，每隔3min测定一次差示旋光度。 脎在500nm波长有最大吸收
选定pH为
和 提高机体的应急能力：人体受到异常的刺激，如剧痛、寒冷、缺氧、精神强刺激，会引发抵御异常刺激的紧张状态。
• 胶原蛋白的合成：胶原蛋白的合成需要维生素C参加， • 治疗坏血病 • 预防牙龈萎缩、出血：牙龈是软组织，当缺乏蛋白质、钙、VC
时易产生牙龈萎缩、出血。
• 预防动脉硬化：可促进胆固醇的排泄，防止胆固醇在动脉内壁沉 积，甚至可以使沉积的粥样斑块溶解。
• 抗氧化剂：可以保护其它抗氧化剂，如维生素A、维生素E、不 饱和脂肪酸，防止自由基对人体的伤害。
• 优点：
• 解决了滴定分析中遇 到有色或浑浊溶液时 无法指示终点的问题
2，4一二硝基苯肼分光光度法
• 原理： • 维生素C在空气中尤其在碱性介质中极易被
氧化成脱氢抗坏血酸
• 反应式：
HH HO O O
HO C C C
C
H HH
OO
C C OO H
• pH>5,脱氢抗坏血酸内环开裂，形成二酮 古洛糖酸
• 二酮古洛糖酸
• 脱氢抗坏血酸，二酮古洛糖酸均能和2，4－二硝 基苯肼生成可溶于硫酸的脎
• 脎在500nm波长有最大吸收 • 脎的结构：
H
R CN N
RCNN
H
分光光度法
• 样品溶液与VC标准溶液按上述方法同样处 理
• 500nm处测吸光度 • 下图：721型分光光度计
差示旋光法

100%
F为碘滴定液浓度校正因子：T为滴定度：V为试验消耗 碘滴定液的体积,ml：Vs为维生素C共试品的取样量，ml： C标为标示量
维生素C (C6H806)应为标示量的90.0%～110.0%。
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注意事项：
⑴.碘液贮存在抗碱的棕色瓶子中，不可用软 木塞或橡皮塞，在阴凉处贮存。存放不用时应
密塞，用时，开瓶时间尽可能短。 ⑵.平行测定2份，并计算含量，两次平行测定 结果的相对偏差不得过0.2%,取其算数平均值为
测定结果。
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中，随加随搅拌，继续煮沸2分钟，放冷，倾取上层清液，即得。本液应临用新 制。
(3)碘滴定液(0.05 mol/L)的制备与标定 配制：取碘13.0 g，加碘化钾36g与水50 ml溶解后，加盐酸3滴与水适量
使成1000 ml，摇匀，用垂熔玻璃滤器滤过。 标定：精密量取本液25ml，置碘瓶中，加水100ml与盐酸（9→100）1ml，轻
(2)加稀醋酸4ml与淀粉指示液1ml，用碘滴定液 (0.05mol/L)滴定，至溶液显蓝色并持续30秒钟不褪。
(3)平行测定两份并计算本品含量，应符合规定。两 次平行结果的相对偏差不得超过0.2%，取其算术平均值为 测定结果。
(4)检验过程中及时做好原始记录。
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结果判断
标示量%
F T V Vs C标
生素C 0.2 g），加水15 ml与丙酮2 ml，摇匀，放 置5分钟，加稀醋酸4 ml与淀粉指示液l ml，用碘 滴定液(0.05 mol/L)滴定，至溶液显蓝色并持续30 秒钟不褪。每l ml碘滴定液(0.05 mol/L)相当于 8.806 mg的(C6H806).
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1.什么是传统机械按键设计？
摇混匀，用硫代硫酸钠滴定液（0.1mol/L）滴定至近终点，加淀粉指示液2ml，继 续滴定至蓝色消失。