中药制剂检测技术第五章含量测定

三、仪器及其工作原理 1.薄层扫描仪 中国药典采用双波长薄层扫描仪。 常用的有岛津CS-930型和CAMAG-Ⅱ型等。 2.扫描仪工作原理
3.测定方式 （1）吸收法
适用于有紫外（可见）吸收的成分，较常用。该法又可采 用反射法或透射法测定。理论上讲，透射法比反射法优越， 但实际工作中常用反射法，因为紫外光不能通过玻板。 （2）荧光法
二、含量测定方法
中药制剂含量测定的方法包括化学分析法和仪 器分析法两大类。由于中药制剂组成复杂，仪器 分析法更为常用。《中国药典》中药制剂含量测 定方法概况见下表。
本章重点介绍浸出物测定法、挥发油测定法、 分光光度法 、TLCS、 HPLC 和GC等。
方法 总数
仪
HPLC 339
器 分 分光光度法 18
滴定法 13
化 学 分
重量法 氮测定法
5 5
析 挥发油测定法 3
法 浸出物测定法 13
总计 456
修订 30 3 3 0 0 0 1 0 1 37
新增 282 12 19 3 3 1 1 0 2 327
删除 0 12 0 9 0 1 0 1 1 23
第一节 浸出物测定法 （Determination of Extractive）
供荧光测定，发射不连续光谱，常用波长为365nm。
四、含量测定方法（外标法）
TLCS含量测定有外标法和内标法，中国药典仅采用外标法。 1.原理
外标法系将一定量的供试品溶液和对照品溶液分别点加在 同一块薄层板上，展开，显色，定位，扫描被测成分和对照品 斑点，测得相应的吸收度或荧光强度积分值，根据定量关系， 计算出被测成分的含量。 2.类型
乙醚 乙醚
乙醚
方法 热浸法 热浸法 热浸法
冷浸法
限度（%） ≥60.0 ≥60.0
≥80mg/片 ≥3.0
≥8.0
≥1.2
≥0.35 ≥0.40
≥0.10 ≥0.30
≥0.25 ≥25.0
三、水溶性浸出物测定法
本法系以水为溶剂，对制剂中水溶性成分进行提取，并计 算其在制剂中的含量(%)。本法包括冷浸法和热浸法。后者适 用于不含或少含淀粉、粘液质等成分的样品。
1.甲醇、乙醇浸出物的测定
照水溶性浸出物测定法测定。
2.正丁醇浸出物的测定
按各品种项下规定的方法测定。一般说来，水溶液制剂可直 接用水饱和的正丁醇提取数次，合并提取液，置已干燥恒重的 蒸发皿中，蒸干，置105℃干燥3小时，移置干燥皿中，冷却30 分钟，迅速精密称定重量，计算供试品中正丁醇浸出物的含量 （W/V %）。固体制剂可先加水溶解，移至分液漏斗中，用水 饱和的正丁醇提取数次，合并提取液，照上述方法蒸干，干燥， 称定浸出物重量，计算出制剂中正丁醇浸出物的含量（W/W %）。
适用于有荧光性质的成分，例如小檗碱等。该法仅采用反 射法测定，其灵敏度比吸收法高。
4.测定波长 （1）单波长
一般用于荧光测定法，即用某一波长的紫外光（激发光） 进行扫描。对玻板和斑点的质量要求较高。 （2）双波长
主要用于吸收测定法。该法可消除背景干扰，对玻板和 斑点的质量要求不高，故较常用。测定时，样品波长（λs） 和参比波长（λR）依次扫描斑点，所测吸收度为 ΔA=Aλs －AλR 样品波长（λs）：即被测成分的λmax 参比波长（λR）：即被测成分的λmin或此波长处无吸收。
供试品需粉碎，使能通过二号筛，并混合均匀。
类别 醇溶 性浸 出物 测定
挥发 性醚 浸出 物测 定
水浸出物测 定 乙酸乙脂浸 出物测定
品名 七厘散 刺五加浸膏 刺五加片 儿康宁糖浆 独一味胶囊 鼻窦炎口服液 午时茶颗粒 沉香化气丸
九味羌活丸 龟龄集 暑症片
溶剂 乙醇 甲醇
甲醇 正丁醇
正丁醇
正丁醇
乙醚 乙醚
第五章 中药制剂的含量测定 （Content Determination）
概述
一、含量测定的定义和意义
中药制剂的含量测定是指用适当的化学方法或仪 器分析方法对制剂中某种（些）有效成分或有效部 位进行的定量分析。并以其测定结果是否符合药品 标准的规定来判断药品的优劣，是控制和评价药品 质量的重要方法。
5.光束扫描方式 （1）直线扫描
适用于规则的斑点，仅用于荧光测定法。 （2）锯齿扫描
适用于不规则的斑点，测量误差小，被测成分积分值重现性好，故吸 收测定法常用此扫描方式。 6.光源 （1）钨灯（W）
供可见光（350～800nm）测定，扫描有色成分的斑点。 （2）氘灯（D2）
供紫外光（200～400nm）测定，扫描有紫外吸收的成分斑点。 （3）氙灯（Xe）
供试品（S）4个（同一质量）分2组： 2S1 2S2
对照品与供试品应交叉点加在同一块薄层板上，目的在于消除各 种误差。测定时应保证供试品原点的量在线性范围内，必要时可 适当调整供试品溶液的点样量。
外标一点法
外标两点法
（4）展开
（5）显色定位
供试品色谱中待测斑点的比移值（Rf值）和光谱扫描得到的 吸收光谱最大吸收与最小吸收应与对照品相符，以保证测定结 果的准确性。
根据对照品标准曲线性质的不同，外标法又分为外标一点 法和外标两点法。
若标准曲线通过原点，采用外标一点法。 若标准曲线不通过原点，采用外标两点法。
、
外标一点法的直线方程： C = F A F 为斜率
外标两点法的直线方程： CF1AF2
F1为斜率
F1
C2 A2
C1 A1
F2为截距
F2
A2C1 A1C2 A2 A1
三、挥发油测定装置（图）
四、测定方法
供试品需粉碎后过二号至三号筛，混匀再测定。
1.甲法
本法适用于测定相对密度在1.0以下的挥发油。取供试品适量 （约相当于挥发油0.5ml～1.0ml），称重（准至0.01g），置烧 瓶中，加水300ml～500ml（或适量）与玻璃珠数粒，振摇混 合后，连接挥发油测定器与回流冷凝管。自冷凝管上端加水使 充满挥发油测定器的刻度部分，并溢流入烧瓶时为止。置电热 套中或用其他适宜方法缓缓加热至沸，并保持微沸约5小时， 至测定器中油量不再增加，放置片刻，开启测定器下端的活塞， 将水缓缓放出，至油层上端到达刻度0线上面5mm处为止。放 置1小时以上，再开启活塞使油层下降至其上端恰与刻度0线平 齐，读取挥发油量，计算即得。
一、意义
某些药品中的主要有效成分为挥发油，故《中国药 典》收载了挥发油测定法，采用水蒸气蒸馏法对药品 中挥发油总量进行测定，以控制药品质量。例如，正 骨水、牡荆油胶丸、保妇康栓和满山红油滴丸等中挥 发油的测定。
二、测定原理
首先利用挥发油的挥发性用水蒸气蒸馏法将其提取 完全；再利用其较强的亲脂性与水不相溶而分层，即 可读取油的总量并求算出含量。
五、含量计算
VO 含量（V/W ％）= WS ×100%
VO ×DO 含量（V/W ％）= WS ×100%
VO 含量（V/W ％）= VS ×100%
VO 挥发油体积（ml） VS 样品体积（ml） WS 样品重量（g）
DO 挥发油密度（g/ml）
第三节 可见-紫外分光光度法
（Ultraviolet and Visible Spectrophotometry）
3.注意事项 （1）回流加热乙醚须在水浴上进行。 （2）蒸发皿中挥去乙醚须在室温下风橱中进行。 （3）加热挥去浸出物中挥发性成分时，应缓缓加 热至 105℃ 4.实例
（1）儿康宁糖浆正丁醇浸出物的测定
（2）刺五加浸膏的甲醇浸出物测定
五、挥发性醚浸出物测定法
本法以乙醚为溶剂，对制剂中挥发性醚溶性成分进行提取，并计算 其在制剂中的含量（W/W %）。本法主要用于含挥发性成分较多的 制剂，专属性较强。
一、定义
浸出物测定法系根据制剂中化学成分的溶解性， 选择适当的溶剂浸提(提取)样品，并测定浸出物 （提取物）的含量，以此来控制药品的质量。
二、意义
这是一种较为粗略的定量分析方法。但对于有效成 分不明确或无法建立确切的定量分析方法的中药材及 其制剂，尚具有一定的意义。
《中国药典》附录收载了三种测定方法：水溶性浸出 物测定法、醇溶性浸出物测定法和挥发性醚浸出物测 定法。有的品种还采用了乙酸乙酯浸出物测定法。 《中国药典》收载的中成药浸出物测定品种及其规定 见表4-18。
含量（W/W %） = mi×100
20 × ms
×100%
mi 为水溶性浸出物重量（g）
ms 为 干 燥 供 试 品 的 重 量 （ g ） = 供 试 品 重 量 × （1﹣含水量%)）
2.热浸法(中成药较少用 自学)
3.实例 暑症片的水溶性浸出物测定（P128）
四、醇溶性浸出物测定法
本法系以甲醇、乙醇或正丁醇为溶剂，提取药品中相应的醇 溶性成分，并计算其含量（ %）。正丁醇浸出物测定法主要用 于含较多皂苷类成分的制剂，更具专属性。
A为吸收度 K为吸收系数 C为溶液浓度 L为溶液厚度
四、药典收载了三种测定方法 1.吸收系数法 仅用于UV,不需对照品。 2.对照品比较法 主要用于Vis,需用对照品。 3.标准曲线法 主要用于Vis,需用对照品。 （原计算分光光度法取消）
第四节 薄层扫描法
（ Thin Layer Chromatography Scan TLCS ） 一、定义
1.测定法
取供试品（过四号筛）2~5g，置五氧化二磷干燥器中，干燥12小时， 精密称定重量（ms）,置索氏提取器中，加乙醚适量，除另有规定外， 加热回流提取8小时，取乙醚液，置干燥至恒重的蒸发皿中，放置， 挥去乙醚，残渣置五氧化二磷干燥器中，干燥18小时，精密称定 （m1），缓缓加热至105℃，并于105℃干燥至恒重（m2）。其减失 重量即为挥发性醚浸出物的重量（m1-m2）。计算，即得。
3.操作步骤 （1）对照品溶液的制备 （2）供试品溶液的制备 （3）点样