专题3 课题1 菊花的组织培养
一、选择题
1．下列实例中能体现植物细胞全能性的是( )
①将离体的胡萝卜单个细胞培养成了可育的植株
②植物用种子繁殖后代
③用烟草的单个细胞培养出了可育的完整植株
A．①②B．①③
C．②③D．①②③
解析：选B。细胞全能性是指已经分化的细胞仍然具有发育为完整个体的潜能。其中①和③都属于由分化的细胞经过组织培养形成可育的植株，体现了细胞的全能性。植物用种子繁殖后代，实际上就是由受精卵通过细胞的增殖和分化发育成新个体，属于有性生殖。
2．(2019·上海嘉定调研)下列有关愈伤组织细胞的叙述中，不正确的是( )
A．细胞壁薄、分裂旺盛
B．细胞具有较高的全能性
C．由高度分化的植物细胞经脱分化和分裂形成
D．细胞有叶绿体，能进行光合作用
解析：选D。愈伤组织还没有分化，没有叶绿体，不能进行光合作用。
3．下面关于植物组织培养的叙述，错误的是( )
A．叶肉细胞脱分化后可形成无定形状态的薄壁细胞
B．叶肉细胞经再分化过程可形成愈伤组织
C．生长素和细胞分裂素使用比例要恰当
D．叶肉细胞离体培养时，可以表现出全能性
解析：选B。在植物组织培养过程中，细胞首先经脱分化形成愈伤组织，然后经再分化形成根或芽等器官，愈伤组织的细胞特点是细胞排列疏松无规则，是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞，植物组织培养的理论基础是细胞的全能性。生长素和细胞分裂素用量的比例会影响植物细胞的发育方向。
4．下列能正确表示菊花组织培养的基本步骤的是( )
A．制备MS培养基→外植体消毒→接种→培养→移栽→栽培
B．制备MS培养基→外植体消毒→接种→培养→栽培→移栽
C．制备MS培养基→外植体消毒→接种→栽培→培养→移栽
D．制备MS培养基→外植体消毒→接种→移栽→培养→栽培
解析：选A。移栽是指待培养基上培养的幼苗长壮后移栽到土壤中，栽培是对移栽后的幼苗进行精心管理和培养的过程，因此应先移栽后栽培。
5．(2019·聊城高二检测)MS培养基和培养微生物所配制的培养基的主要区别是( ) A．MS培养基一般含植物激素，微生物培养基不含植物激素
B．MS培养基需要氨基酸，微生物培养基不含各种氨基酸
C．MS培养基需要碳源，微生物培养基不含碳源
D．MS培养基含维生素B1和维生素B2，而微生物培养基不含
解析：选A。MS培养基是用于植物组织培养的培养基，其中一般含有植物激素，而培养微生物的培养基中不含植物激素，MS培养基中需提供植物生长必需的大量元素和微量元素；另外，由于培养的微生物一般都是异养微生物，所以在微生物的培养基中以有机物为主，一般含有碳源、氮源和生长因子。
6．(2019·河北辛集中学高二段考)下图为植物组织培养的流程图。据图分析下列说法正确的是( )
A．将配制好的培养基在灭菌后要及时分装避免冷却凝固
B．图中三种培养基的差异主要表现在植物激素含量方面
C．整个培养过程中温度控制在30 ℃以上
D．长出丛芽和生根的过程中细胞的遗传物质会发生改变
解析：选B。将配制好的培养基在灭菌前分装，A错误；图中三种培养基的差异主要表现在植物激素的含量上，B正确；培养过程中需要适宜的温度，一般控制在18～22 ℃，C
错误；长出丛芽和生根的过程是细胞分裂和分化的过程，遗传物质不会发生改变，D错误。
7．在植物组织培养过程中，接种时应注意的事项有( )
①接种室要消毒②只要戴口罩，操作时可随意说话③外植体可预先用体积分数为70%的酒精消毒，取出后用无菌水冲洗，再用质量分数为0.1%的氯化汞溶液消毒，并用无菌水冲洗干净④接种操作要在酒精灯火焰旁进行⑤接种完毕后立即盖好瓶盖A．①②③④⑤B．①②③④
C．①③④⑤D．②③④⑤
解析：选C。植物组织培养过程中，要进行严格的无菌操作，因为一旦出现细菌或真菌污染，就会导致实验失败。在此过程中工作人员即使戴上口罩，也不能随意说话。
8．(2019·广州高二检测)某生物兴趣小组用芦荟新鲜茎的一部分作为材料进行组织培养，愈伤组织能正常形成且继续长大，根和芽却迟迟不能形成。导致上述现象最可能的原因是( )
A．葡萄糖、氨基酸等有机营养供应不足
B．培养环境、光照、温度、pH或氧气浓度不适宜
C．生长素和细胞分裂素比例不协调
D．无菌条件没有控制好
解析：选C。因为“愈伤组织能正常形成且继续长大”，说明培养基营养充足、环境条件适宜且没有受到杂菌污染；当生长素和细胞分裂素的比例达到一定值的时候，才能使愈伤组织分化出根和芽。
9．(2019·江西上高二中月考)某植物组织培养实验室的愈伤组织被真菌严重感染，为查找污染原因设计了4个实验，实验条件除图示以外其他均相同。下列各图表示实验结果，据图可得出的初步结论是( )
A．污染主要是由培养基灭菌时间短造成的
B．污染主要来源于组织培养所用的离体组织
C．调节培养基pH能解决污染问题
D．调节培养温度能解决污染问题
解析：选B。通过4个实验结果可以看出培养基灭菌时间、培养基pH、培养温度对污染率没有太大的影响，由离体组织灭菌时间越长污染率越低可知，污染主要来源于组织培养所用的离体组织。
二、非选择题
10．(2019·福州高二检测)利用植物组织培养技术的有关知识回答以下问题：
(1)植物组织培养所用到的培养基为固体培养基，原因是培养基中添加了________，培养基的主要成分是____________、____________和有机物。
(2)培养基中添加有机物，说明外植体的代谢是______(填“自养”或“异养”)型。
(3)培养基中常要添加________________，且这两种激素的________影响植物细胞的分化方向。如果外植体是菊花的茎段，则________(填“必须”或“不必”)添加植物激素。
(4)除以上因素外，________________等外界因素对植物细胞的正常发育也起到很重要的作用。
(5)外植体要经过________(填“消毒”或“灭菌”)后，才能接种。
(6)在工作台上接种时，为了避免细菌等污染，接种过程要在____________旁进行。
解析：(1)植物组织培养常用MS培养基，其主要成分包括大量元素、微量元素、有机物和植物激素等。(2)外植体在培养到愈伤组织的过程中其代谢类型为异养型。(3)培养基中
生长素和细胞分裂素的用量配比决定培养物的分化方向。菊花的茎段培养可以不添加植物激素，因为菊花茎段组织培养比较容易。(4)pH、温度、光照等外界因素对培养的植物组织的生长情况有很重要的作用。(5)外植体要经过消毒处理后才能接种。(6)在接种时，要在酒精灯火焰旁进行，以防细菌污染。
答案：(1)琼脂(凝固剂) 大量元素微量元素
(2)异养(3)生长素和细胞分裂素用量比例不必
(4)pH、温度、光照(5)消毒(6)酒精灯火焰
11．利用植物组织培养的方法可快速、大量繁殖植物。在培养过程中，取某植物的花芽并将其分别培养在含有不同比例的生长素和细胞分裂素的培养基中，花芽的生长状况如下表所示。请结合下表回答下列问题：
花芽形成的条件是____________________________________________________________。
(2)上述实验结果说明，在植物组织培养过程中，诱导芽和根形成的关键是_________。
在生产实践中，欲快速、大量获得此植物的花芽，可选用________组的培养基进行扩大生产。
解析：脱分化、再分化过程与植物激素——生长素和细胞分裂素有关，且生长素用量与细胞分裂素用量的比值直接影响培养过程。当比值高时，有利于根的分化，抑制芽的形成；当比值低时，有利于芽的分化，抑制根的形成；当比值适中时，有利于促进愈伤组织的形成。
答案：(1)B、C、D 细胞分裂素浓度大于生长素浓度(2)培养基中细胞分裂素含量与生长素含量的比值(或培养基中细胞分裂素与生长素的浓度比) D
12．(2019·烟台高二检测)下图是胡萝卜的韧皮部细胞通过无菌操作，接入试管内的培养基后，在一定的条件下形成试管苗的培育过程。请据图回答下列问题：
(1)要促进植物细胞分裂生长，培养基中应含有营养物质和植物激素，营养物质包括________和有机物；植物激素包括细胞分裂素和________。
(2)此过程依据的原理是________________。A阶段和B阶段细胞进行的分裂方式主要是________，B阶段除了细胞分裂外，还进行细胞________。
(3)此过程要无菌操作，主要是指对____________进行灭菌消毒。B阶段需要光照，原因是______________________________________________________________________。
(4)试管苗的根细胞中没有叶绿素，而叶的叶肉细胞中具有叶绿素，这是_______的结果。
(5)将胡萝卜韧皮部组织块接种到培养基上时，为防止杂菌污染，应如何操作？
________________________________________________________________________。
解析：(1)植物组织培养使用的培养基中应含有供植物组织细胞生长发育所需要的无机物和有机物，还需有调节细胞分化方向的细胞分裂素和生长素等激素。(2)植物细胞的全能性是植物组织培养的理论基础，脱分化和再分化阶段中细胞的增殖方式均为有丝分裂，再分化阶段愈伤组织经细胞有丝分裂和分化形成试管苗。(3)植物组织培养过程一定要做到无菌操作，包括外植体、培养基、容器、接种工具等均应消毒灭菌，其中培养基的灭菌最为重要；再分化阶段需要光照，因为幼叶中叶绿素的合成需要光照条件。(4)同一植株的所有体细胞所含有的遗传信息相同，但基因的表达不同，故形态、功能存在差异。(5)酒精灯火焰旁温度较高，可有效杀死空气中的细菌。
答案：(1)无机物生长素
(2)植物细胞的全能性有丝分裂分化
(3)培养基芽发育成叶，叶肉细胞中叶绿素的合成需要光照条件
(4)基因选择性表达
(5)接种要在酒精灯火焰旁进行
13．植物组织培养是克隆植物的一种方法，请回答下列相关问题：
(1)为了获得脱毒植株，外植体往往取自植物的花芽、叶芽等处的分生组织，其原因是________________________________________________________________________。
(2)除营养物质外，培养皿中的培养基还需要添加植物激素，其目的是诱导外植体________________________________________________________________________。
(3)组织培养过程需要植物生长和繁殖的最适条件，否则在光学显微镜下可能观察到发生________________异常，进而使植物表现为遗传不稳定甚至不育。
解析：刚长出的茎尖或芽尖还没有受到病毒的侵染，因此用这些部位的细胞作植物组织培养的材料，可以获得脱毒植株。在植物组织培养时，常用生长素和细胞分裂素来诱导植物形成愈伤组织、生根发芽，从而形成新的植物体。在植物形成愈伤组织时，需提供适宜的条件，否则很容易发生变异，在光学显微镜下可观察到的是染色体结构或数目的变异。
答案：(1)这些部位很少受到病毒等病原体的侵害
(2)脱分化和再分化
(3)染色体结构与数目
14．紫草素是紫草细胞的代谢产物，可作为生产治疗烫伤药物的原料。用组织培养技术可以在生物反应器中通过培养紫草细胞产生紫草素。下图记录了生物反应器中紫草细胞数量、紫草素产量随培养时间发生的变化。据此回答下列问题：
(1)在生产前，需先加入紫草细胞作为反应器中的“种子”。这些“种子”是应用组织培
养技术，将紫草叶肉细胞经过______________________而获得的。这项技术的理论基础是________________________________________________________________________。
(2)从图中可以看出：生物反应器中紫草细胞的数量增长呈现__________________规律；影响紫草素产量的因素是__________________和______________________。
(3)在培养过程中，要不断通入无菌空气并进行搅拌的目的分别是____________________和__________________________。
解析：(1)紫草素是从大量培养的紫草愈伤组织细胞中提取的，所以生产以前必须要加入离体的紫草细胞进行脱分化，以获得大量的紫草愈伤组织细胞，这一过程利用了植物细胞的全能性。(2)从图中可以看出生物反应器中紫草细胞的数量呈“S”型增长，原因是开始时生长较慢，要经过适应期，然后进入稳定期，细胞的数目相对稳定。在这个时期紫草细胞要产生大量的次级代谢产物——紫草素，所以说紫草素产量的高低与紫草愈伤组织细胞的数目和生长期有关。(3)培养过程中为保证细胞代谢对氧气的需求需通入无菌空气，搅拌的目的是使细胞与培养液充分接触，保证对氧气供应充足。
答案：(1)脱分化(或脱分化形成愈伤组织) 植物细胞的全能性
(2)“S”型增长紫草细胞数量紫草细胞所处的生长期
(3)保证氧气供应充足使细
胞与培养液充分接触
3.1 菊花的组织培养导学案 【学习目标】 1.说明植物组织培养的基本原理，进行菊花或其它植物组织培养。 2.学习植物组织培养的基本技术。 3.植物组织培养过程中使用的无菌技术。 【自主学习】 一．植物组织培养的基本过程 1．细胞分化：植物的个体发育过程中，细胞在________、_________和_________上都会出现 ___________差异，形成这些差异的过程叫做细胞分化。 2．过程总结： _____________ ___________ 试管苗 完整的植物体 （注意：脱分化、再分化、愈伤组织三个概念） （1）愈伤组织（callus ），原指植物在受伤之后于伤口表面形成的一团薄壁细胞．在组织培养 中，则是指在人工培养基上由外植体组织的增生细胞产生的一团排列_________而无_________，高 度________化的呈_________状态的_________细胞。 阅读材料： ①植物细胞可以摆脱原来的遗传控制和生理制约，在一定条件下，发生回复变化，从而失去分 化状态，变为分生细胞，实现脱分化过程。 ②植物细胞的全能性，可以脱分化之后再次分化为完整的植株，几乎所有高等植物的各种器官 离体后都可以脱分化。 ③脱分化后的细胞经过连续的有丝分裂，形成愈伤组织。 （2）脱分化：____________________________________________________________ (3) 再分化：_____________________________________________________________ 二．影响植物组织培养的因素 1．材料 ①不同的植物组织，培养的难度差别较大。 ②对于同一种植物材料，材料的年龄、保存时间的长短也会影响实验结果。菊花的组织培养， 一般选用___________________________________。 2．营养——适宜的培养基 最常用的培养基是______培养基 成分：大量元素____________________________ 微量元素____________________________ 有机物_______________________________ 3．植物激素：_________和____________是启动_______、_______和______的关键激素。 在生长素存在的情况下，细胞分裂素的作用呈现_________的趋势。 （ ） （ ） 生芽、根 发育
人教版高中生物选修三专题一基因工程测试题 一．选择题（共20小题，每题2分，共20分） 1．基因型为AaBbDd的二倍体生物，其体内某精原细胞减数分裂时同源染色体变化示意图如图．叙述正确的是（） A．三对等位基因的分离均发生在次级精母细胞中 B．该细胞能产生AbD、ABD、abd、aBd四种精子 C．B（b）与D（d）间发生重组，遵循基因自由组合定律 D．非姐妹染色单体发生交换导致了染色体结构变异 2．为了增加菊花花色类型，研究者从其他植物中克隆出花色基因C（图1），拟将其与质粒（图2）重组，再借助农杆菌导入菊花中． 下列操作与实验目的不符的是（） A．用限制性核酸内切酶EcoRⅠ和连接酶构建重组质粒 B．用含C基因的农杆菌侵染菊花愈伤组织，将C基因导入细胞 C．在培养基中添加卡那霉素，筛选被转化的菊花细胞 D．用分子杂交方法检测C基因是否整合到菊花染色体上 3．一对夫妇所生子女中，性状上的差异较多，这种变异主要来源于（） A．基因重组B．基因突变C．染色体丢失D．环境变化 4．不属于基因操作工具的是（） A．DNA连接酶B．限制酶C．目的基因D．基因运载体 5．下列哪一项不是基因工程工具（） A．限制性核酸内切酶B．DNA连接酶 C．运载体D．目的基因 6．下列关于基因重组和染色体畸变的叙述，正确的是（） A．不同配子的随机组合体现了基因重组 B．染色体倒位和易位不改变基因数量，对个体性状不会产生影响 C．通过诱导多倍体的方法可克服远缘杂交不育，培育出作物新类型
D．孟德尔一对相对性状杂交实验中，F1紫花植株自交后代发生性状分离的现象体现了基因重组 7．通常情况下，下列变异仅发生在减数分裂过程中的是（） A．非同源染色体之间发生自由组合，导致基因重组 B．非同源染色体之间交换一部分片段，导致染色体结构变异 C．DNA复制时发生碱基对的增添、缺失或改变，导致基因突变 D．着丝粒分开后形成的两条染色体不能移向两极，导致染色体数目变异 8．下列关于基因突变和基因重组的说法中，正确的是（） A．mRNA分子中碱基对的替换、增添、缺失现象都可称为基因突变 B．基因重组只发生有丝分裂过程中 C．非同源染色体上的非等位基因发生自由组合属于基因重组 D．基因型为DdEE的个体自交，子代中一定会出现基因突变的个体 9．基因工程的正确操作步骤是（） ①目的基因与运载体相结合②将目的基因导入受体细胞③检测目的基因的表达④提取目的基因． A．③④②①B．②④①③C．④①②③D．③④①② 10．如图为DNA分子的某一片段，其中①②③分别表示某种酶的作用部位，则相应的酶依次是（） A．DNA连接酶、限制性核酸内切酶、解旋酶 B．限制性核酸内切酶、解旋酶、DNA连接酶 C．解旋酶、限制性核酸内切酶、DNA连接酶 D．限制性核酸内切酶、DNA连接酶、解旋酶 11．科学家利用生物技术将人的生长激素基因导入小鼠受精卵的细胞核中，经培育获得一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中，在医学研究及相关疾病治疗方面都具有重要意义．下列有关叙述错误的是（） A．选择受精卵作为外源基因的受体细胞是因为这种细胞具有全能性 B．采用DNA分子杂交技术可检测外源基因在小鼠细胞内是否成功表达 C．人的生长激素基因能在小鼠细胞表达，说明遗传密码在不同种生物中可以通用 D．将转基因小鼠体细胞进行核移植（克隆），可以获得多个具有外源基因的后代 12．用限制酶EcoRⅠ、KpnⅠ和二者的混合物分别降解一个1 000bp（1bp即1个碱基对）的DNA分子，降解产物分别进行凝胶电泳，在电场的作用下，降解产物分开，凝胶电泳结果如下图所示．该DNA分子的酶切图谱（单位：bp）正确的是（）
专题二胚胎工程测试 一、选择题 1．(2010年高考江苏卷)下列关于利用胚胎工程技术繁殖优质奶羊的叙述，错误的是() A．对受体母羊与供体母羊进行同期发情处理 B．人工授精后的一定时间内，收集供体原肠胚用于胚胎分割 C．利用胚胎分割技术可以获得两个基因型完全相同的胚胎 D．一次给受体母羊植入多个胚胎，可增加双胞胎和多胞胎的比例 2．(2010年高考江苏卷)老年痴呆症患者的脑血管中有一种特殊的β-淀粉样蛋白体，它的逐渐积累可能导致神经元损伤和免疫功能下降，某些基因的突变会导致β-淀粉样蛋白体的产生和积累。下列技术不能用于老年痴呆症治疗的是() A．胚胎移植技术 B．胚胎干细胞技术 C．单克隆抗体技术 D．基因治疗技术 3．下列有关动物胚胎移植的叙述中，错误的是() A．供体母畜体内的早期胚胎能够移植 B．受体母畜必须处于与供体母畜同期发情的状态 C．超数排卵技术要使用一定的激素 D．受体母畜需要遗传性状优良的品种，供体母畜可用遗传性状一般的品种 4．(2011年枣庄调研)中科院动物所和福州大熊猫研究中心合作，通过将大熊猫的细胞核植入去核后的兔子卵细胞中，在世界上最早克隆出一批大熊猫早期胚胎，这表明我国的大熊猫人工繁殖研究再次走在世界前列。下列有关克隆大熊猫胚胎的叙述中，错误的是() A．在形成早期胚胎的过程中，依次经历了卵裂、桑椹胚、囊胚、原肠胚等几个阶段B．兔子卵细胞质的作用是激发大熊猫细胞核的全能性 C．克隆出的早期胚胎中，各细胞间具有相同的遗传信息 D．在形成早期胚胎的过程中，尚未出现细胞的分化 5．试管婴儿、试管苗和克隆羊这三者可以说是现代生物科技的杰出成果，下列对其生物学原理及技术的叙述，正确的是() A．都属于无性生殖 B．都属于细胞工程的技术范畴 C．都不会发生基因重组 D．都体现了分化的细胞具有全能性 6．下列关于哺乳动物受精和发育的叙述正确的是() A．雌性动物排卵后遇精子即完成受精 B．胚胎发育至囊胚时即已开始了细胞分化，这是由于基因开始进行选择性表达 C．动物卵细胞形成过程始于初情期后 D．动物的个体发育过程是：受精卵→卵裂→桑椹胚→囊胚→原肠胚→幼体
专题3 植物的组织培养技术 课题1 菊花的组织培养 1．下列属于组织培养的是() A．花粉培养成单倍体植株 B．芽发育成枝条 C．根尖分生区发育成成熟区 D．受精卵发育成植株 [解析]植物组织培养是指离体的植物器官、组织或细胞脱分化、再分化形成完整植物体的过程。花粉培育成单倍体植株，是在一定条件下离体完成的。芽发育成枝条、根尖分生区发育成成熟区，是植物体发育的一部分。受精卵发育成植株，也属于正常的发育过程。 [答案]A 2．下列关于植物组织培养的叙述，错误的是() A．外植体可以来自植物的任何细胞 B．培养应在无菌条件下进行 C．以花粉作为外植体可得到单倍体植株 D．不同阶段的培养基中细胞分裂素和生长素的比例不同 [解析]外植体应选择分裂旺盛的部分，如根尖、茎尖等，A错误；培养应在无菌条件下进行，这样可防止微生物消耗营养物质，产生有毒代谢产物危害培养物的生长，B正确；花粉中含有配子，以花粉作
为外植体可得到单倍体植株；C正确；不同阶段的培养基中细胞分裂素和生长素的比例不同，诱导培养物的分裂和分化，D正确。 [答案]A 3．下列关于影响植物组织培养的因素，说法正确的是() A．不同植物组织培养的难易程度不同，同一种植物材料培养的难易程度相同 B．在植物组织培养中，培养基中必须添加植物激素 C．植物激素中生长素和细胞分裂素的作用是互相独立的 D．pH、温度、光照等条件对植物组织培养也特别重要 [解析]不同植物组织培养的难易程度不同，同一种植物材料也会因年龄、保存时间的长短等导致实验结果不同，故A错误；在植物组织培养中，培养基中常常要添加植物激素，但不是都必须添加植物激素，故B错；各种植物激素的作用是相互联系的，而不是互相独立的，故C错。 [答案]D 4．在菊花的组织培养操作完成3～4 d后，观察同一温室中的外植体，发现有的瓶内外植体正常生长，有的瓶内外植体死亡，你认为外植体死亡的原因不可能是() A．培养条件，比如光照、温度等不适宜 B．接种时外植体未灭菌 C．接种工具灼烧后未待冷却就接种外植体 D．将外植体倒插入培养基中 [解析]同一温室提供了相同的光照和温度，但有的瓶内外植体正
专题1 基因工程 基因工程的概念 基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过________________________，赋予生物以 _____________________，创造出______________________________________。基因工程是在____________上进行设计和施工的，又叫做__________________。 1. （1 （2 （3 2. (1)两种DNA ②区别：E· (2)与DNA 酸二酯键。 3. （1 （2 _____________________的双链___________DNA （3）其它载体： _________________________________ (二)基因工程的基本操作程序 第一步：__________________________ 1.目的基因是指： ______________________________________________________ 。 2.目的基因可采取_______________-获得，也可以用_____________________。人工合成目的基因的常用方 法有________________和_________________。 3.PCR技术扩增目的基因 （1）原理：_____________________ 将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是________________，其次还有基因枪法和花粉管通道法等。将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是 _______________。此方法的受体细胞多是 ____________。将目的基因导入微生物细胞：★原核生物作为受体细胞的原因是繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少， 最常用的原核细胞是 ____________，其转化方法是：先用 ________处理细
高中生物选修三基因工程知识点 基因工程：是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。 （一）基因工程的基本工具 1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶） （1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。 （2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。 （3）结果： 经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。 2.“分子缝合针”——DNA连接酶 （1）两种DNA连接酶（E·coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶）的比较： ①相同点：都缝合磷酸二酯键。 ②区别：E·coliDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。 （2）与DNA聚合酶作用的异同：
（2）目的：获取大量的目的基因 （3）原理：DNA双链复制 （4）过程： 第一步：加热至90～95℃DNA解链为单链； 第二步：冷却到55～60℃，引物与两条单链DNA结合； 第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始进行互补链的合成。 （5）特点：指数(2^n)形式扩增 第二步：基因表达载体的构建(核心) 1.目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。 2.组成：目的基因＋启动子＋终止子＋标记基因 （1）启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA 聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。 （2）终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。（3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素基因。 第三步：将目的基因导入受体细胞 1.转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。 2.常用的转化方法：
专题3 胚胎工程 一、体内受精和早期胚胎的发育 1.哺乳动物精子的发生是在___________内完成的。雄性动物从_________期开始，直到_________衰退。 2.精原细胞和卵原细胞是通过方式实现数量的增加。 3.精子细胞经过变形，__________变为_______的主要部分，_______发育为头部的_________，_________演变为______，__ __聚集在______的基部形成___ _。同时，其它物质浓缩为球状，叫 _。 成熟的精子外形似，分、和三大部分。不同的精子相似，大小略有不同，与动物的大小体型。 3.卵子的发生是在_________内完成的。MⅠ是在雌性动物_____ ____完成的， 其结果产生一个和，准备与精子受精。MⅡ是在________________过程中完成的。 4.一个卵泡中能形成________成熟的卵子。排卵是指卵子从____________ 排出。排除的卵子尚未完全成熟，仅完成_______________，需要在_________内进一步成熟，直到减数第二次分裂的_______期，才能与精子结合完成受精过程。 5.判断卵子是否受精的重要标志是___________________________________，受精完成的标志 6.精子和卵子在发生上的重要区别是。 7.受精是在完成的，哺乳动物的受精过程主要包括____________________、_____________、___________________。首先发生，精子穿入，再穿过，与接触。多精入卵受精的第一道屏障是________________，第二道屏障是___________________。精子入卵后另一变化：__________________充分发育，彼此接触合并，两组____________合为一组，形成________________。 二、动物胚胎发育的基本过程 1. 胚胎工程是指对动物所进行的多种显微操作和处理技术，如等技术。经过处理后获得的胚胎，还需移植到雌性动物体内生产后代，以满足人类的各种需求。 2. 动物胚胎发育的基本过程 （1）受精场所是母体的。 （2）卵裂期： 特点：细胞有丝分裂，细胞数量不断增加，但胚胎的总体体积。（3）： 特点：胚胎细胞数目达到32个左右时，胚胎形成致密的细胞团，形似桑椹。是。（4）囊胚：（孵化） 特点：细胞开始出现（该时期细胞的）。聚集在胚胎一端个体较大的细胞称为，将来发育成胎儿的各种组织。中间的空腔称为。（5）：特点：有了胚层的分化，具有囊胚腔和原肠腔。 三、胚胎干细胞 1. 哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞，来源于中分离出来。 2. 具有的特性，在形态上表现为；在功能上，具有，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。另外，在体外培养的条件
生物选修三 易考知识点背诵 专题1 基因工程 基因工程的概念 基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA 重组技术。 （一）基因工程的基本工具 1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶） （1）来源： 主要是从原核生物（微生物）中分离纯化出来的。 （2）功能： 能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。 （3）结果： 经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端（中心轴线的两侧）和平末端（中心轴线） EcoRⅠ)能识别GAATTC序列，SmaI识别CCCGGG序列: 他们识别的核苷酸序列不同,但是切点都是在G↓C之间。 （4）比较有关的DNA酶 （1）DNA水解酶：能够将DNA水解成四种脱氧核苷酸，彻底水解成膦酸、脱氧核糖和含氮碱基 （2）DNA解旋酶：能够将DNA或DNA的某一段解成两条长链，作用的部位是碱基和碱基之间的氢键。注意：使DNA解成两条长链的方法除用解旋酶以外，在适当的高温（如94℃）、重金属盐的作用下，也可使DNA解旋。 （3）DNA聚合酶：能将单个的核苷酸通过磷酸二酯键连接成DNA长链。 （4）DNA连接酶：是通过磷酸二酯键连接双链DNA的缺口。注意比较DNA聚合酶和DNA连接酶的异同点。 2.“分子缝合针”——DNA连接酶 (1)两种DNA连接酶（E·coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶）的比较： ①相同点：都缝合磷酸二酯键。 ②区别： E·coliDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4D NA连接酶来自T4噬菌体，能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。 (2)与DNA聚合酶作用的异同： DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。 3.“分子运输车”——载体 （1）载体具备的条件： ①能在受体细胞中复制并稳定保存。 ②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。 ③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。 （2）运载体使用的目的：①是用它做运载工具，将目的基因转运到宿主细胞中去。②是利用它在受体细胞内对目
高中生物选修三基因工程主要知识点（1.1、1.2） 一、基因工程：按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。 一、基因工程的三大工具：限制性核酸内切酶—“分子手术刀”；DNA连接酶—“分子缝合针”；基因进入受体细胞的载体—“分子运输车”。 二、限制性核酸内切酶的特点：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且是每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。 三、限制酶识别序列的特点：反向对称，重复排列。 四、限制酶在原核生物中的作用：切割外源DNA，保护细菌细胞。 五、为什么限制酶不剪切原核生物自身的DNA分子？原核生物本身不含相应特异性序列；对DNA分子进行甲基化修饰。 六、两种常见的DNA连接酶：E〃coli DNA连接酶：源自大肠杆菌，只连接黏性末端；T4DNA连接酶：提取自T4噬菌体，两种末端均可连接，连接平末端效率低。 七、DNA连接酶和DNA聚合酶的相同点：都是蛋白质；都能生成3'磷酸二酯键。不同：前者在两个片段之间形成3'磷酸二酯键，后者只能将单个核苷酸连接到已有片段上；前者不需要模版，后者需要。 八、载体需要满足的条件：有一到多个限制酶切点；对受体细胞无害；导入基因能在受体细胞内复制和表达；有某些标记基因；分子大小合适。 九、质粒：一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外，并具有自我复制能力的很小的双链环状DNA分子。 十、标记基因的作用：鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。 十一、三类载体：质粒；λ噬菌体的衍生物；动植物病毒。 十二、获取目的基因的方法：说法一：从自然界已有的物种中分体（鸟枪法、反转录法）、用人工的方法合成；说法二：从基因文库中获取（鸟枪法、反转录法）、利用PCR技术合成、用化学方法人工合成。 十三、基因库：一个物种中全部个体的全部基因的总和；基因文库：将含有某种生物不同基因的许多DNA片段，导入受体菌的群体中储存，个个受体菌分别含有这种生物的不同的基因；基因组文库：含有某种生物全部基因的基因文库；部分基因文库：只含有一种生物部分基因的基因文库；cDNA文库：用某种生物发育的某个时期的mRNA反转录产生的多种互补DNA片段，与载体连接后储存在一个受体菌群中。 十四、 文库类型cDNA文库基因组文库 文库大小小大 启动子无有 内含子无有 基因多少某种生物的部分基因某种生物的全部基因 物种间基因交流可以部分基因可以 十五、人工合成目的基因的两个条件：基因比较小；核苷酸序列已知。 十六、目的基因：主要是指编码蛋白质的基因，也可以使一些具有调控作用的因
专题一基因工程 基因工程的概念 基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在 DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。 （一）基因工程的基本工具 1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶） （1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。 （2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。 （3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。 黏性末端：当限制酶从识别序列的中心轴线两侧切开时，被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。 平末端：当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时，切开的DNA两条单链的切口，是平整的，这样的切口叫平末端。 2.“分子缝合针”——DNA连接酶 (1)两种DNA连接酶（E·coli DNA连接酶和T4-DNA连接酶）的比较： ①相同点：都缝合磷酸二酯键。 ②区别：E·coli DNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的 磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效 率较低。 (2)与DNA聚合酶作用的异同: DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是 DNA连接酶DNA聚合酶不同点连接的DNA 双链单链 模板不要模板要模板 连接的对象2个DNA片段单个脱氧核苷酸加到已存在的单链DNA片段上相同点作用实质形成磷酸二酯键 化学本质蛋白质 （1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。 ②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。 ③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。 ④对受体细胞无害。 （2）最常用的载体是质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。 （3）其它载体：λ噬菌体的衍生物、动植物病毒 (二)基因工程的基本操作程序 第一步：目的基因的获取 1.目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。 （1）获取方法：从基因文库中获取目的基因
2021人教版高中生物选修1专题3课题1《菊花的组 织培养》word 导学案 一．植物组织培养的相关概念和差不多过程 1. 植物组织培养的相关概念 （1）细胞分化：植物的个体发育过程中，细胞在__________、__________和__________上都会显现稳固性的差异，形成这些差异的过程就叫做细胞分化。细胞分化是基因__________的结果。 （2）细胞的全能性：__________的植物细胞仍旧具有发育成为__________的潜能。细胞全能性是组织培养的差不多原理。 （3）愈伤组织：由离体的植物器官、组织或细胞在一定的培养条件下通过__________过程形成的组织，就叫愈伤组织，愈伤组织的细胞排列疏松而无规则，是一种__________的呈无定形状态的__________。 （4）脱分化：由__________的植物组织或细胞产生__________的过程，称为脱分化，又叫去分化。 （5）再分化：脱分化产生的愈伤组织连续进行培养，又能够重新分化成__________，那个过程叫做再分化。 （6）外植体：用于离体培养的植物器官或组织片段。 2. 植物组织培养的差不多过程 移植 ——→试管苗———→完整的植物体 二．阻碍植物组织培养的因素 1.内部因素：不同的植物组织，培养的难易程度差别专门大。同种植物材料，__________ ，__________ 等也会阻碍实验结果。菊花的组织培养，一样选择 __________的茎上部新萌生的侧枝。 2.外部因素：（1）营养条件 常用的是__________ 培养基，其要紧成分包括： __________，如_____________________________；__________ ，如______________________________ ；__________ 等。 （2）植物激素 植物激素中__________ 和__________ 是启动细胞分裂、脱分化和再分 化的关键性因素。____________________、____________________ 以及__________ 等，都会阻碍实验结果。 （3）环境因素 __________ 、__________ 、 __________等条件也能阻碍植物组织培养。菊花组织培养，一样PH 操纵在 __________ ；温度操纵在 __________ ；每天用日光灯照耀__________小时。 【摸索】(1)MS 培养基中，各种营养成分各有什么作用？与微生物培养基的配方相比，有什么不同? 离体的植物组织、器官或细胞 组织培养 脱分化 愈伤组织 组织培养 再分化 根、芽等人为使用植物激素操纵
【成才之路】2016高中生物专题1基因工程综合检测新人教版选 修3 时间45分钟，满分100分。 一、选择题（每小题3分，共60分） 1. 下列关于基因工程技术的叙述，正确的是 （） A. 切割质粒的限制性核酸内切酶均特异性地识别6个核苷酸序列 B. PCF反应中温度的周期性改变是为了DNA聚合酶催化不同的反应 C. 载体质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因 D. 抗虫基因即使成功地插入到植物细胞染色体上也未必能正常表达 ［答案］D ［解析］本题考查基因工程的相关知识。不同的限制性核酸内切酶特异性地识别核苷序 列不同，A错误；酶具有专一性，PCF反应中温度的周期性改变是为了不同的酶将DNA解旋、扩增，B错误；载体质粒通常采用抗生素抗生基因作为筛选标记基因，C错误；基因成功插入也未必会表达，D正确。解答此类题目一定要准确把握基因工程的步骤、基因工程的工具。 2. 下列关于基因工程的说法中，正确的是（） A. 基因工程的设计和施工都是在细胞水平上进行的操作 B. 目前基因工程中所有的目的基因都是从供体细胞中直接分离得到的 C. 只要检测出受体细胞中含有目的基因，那么目的基因一定能成功表达 D. 基因工程能使科学家打破物种界限，定向改造生物性状 ［答案］D ［解析］基因工程是在分子水平上进行的操作，目前获取目的基因的方法有从基因文库 中获取、利用PCR技术扩增和人工合成三种。检测出受体细胞中含有目的基因，只能证明目的基因已导入受体细胞，目的基因是否翻译成蛋白质要用抗原一抗体杂交法检测。 3. 甲、乙两图表示从细菌细胞中获取目的基因的两种方法, 以下说法中错误的是（ 某细曲前DNA I Tl I I T11 liT I TT I TlTF lb 帀 A. 甲方法可建立该细菌的基因组文库 B. 乙方法可建立该细菌的cDNA文库
专题三胚胎工程 一、哺乳动物生殖细胞的发生和受精作用 1、精子的发生 场所：睾丸的曲细精管 时间：从性成熟开始，到生殖机能衰退 过程：体细胞精原细胞 1个初级精母细胞 2个次级精母细胞 4个精细胞 4个精子 注：精子的变形：细胞核变成精子头的主要部分；高尔基体发育成头部的顶体；中心体演变成精子的尾；线粒体集中在尾的基部形成线粒体鞘；细胞内的其他物质浓缩为球状，叫做原生质滴，最后脱落。 2、卵子的发生 场所：卵巢、输卵管 时间：性别分化以后（胎儿时期完成了卵泡的形成和在卵巢内的储备），从性成熟开始，到生殖机能衰退 过程：（1）卵原细胞→初级卵母细胞（胎儿期就已形成） （2）1个初级卵母细胞→1个次级卵母细胞＋第一极体（排卵前后完成） （3）1个次级卵母细胞→1个卵子＋第二极体（精子和卵子结合过程中完成）3、受精 概念：精子和卵子结合成合子（受精卵）的过程 场所：雌性的输卵管内 过程：（1）受精前的准备阶段1：精子获能：场所:雌性动物的生殖道（子宫和输卵管） （2）受精前的准备阶段2：卵子的准备：发育到减数第二次分裂中期 （3）受精阶段： a.精子穿越放射冠：顶体反应（顶体酶） b.精子穿越透明带：透明带反应（阻止多精入卵的第一道屏障） c.进入卵黄膜：卵黄膜封闭作用（阻止多精入卵的第二道屏障） d.原核形成（雄原核的体积略大于雌原核） e. 雌雄原核融合 注意：受精的标志与受精完成的标志
获能溶液或专用的受精溶液 a 受精的标志：在卵黄膜和透明带的间隙可以观察到两个极体时 b 受精完成的标志：雌雄原核融合 二、哺乳动物胚胎发育过程（从受精卵到幼体） 场所：输卵管、子宫 过程：整个胚胎发育可分为胚卵期、胚胎期和胎儿期 受精卵 卵裂 桑葚胚 囊胚 原肠胚 胎儿形成 场所： 输卵管 子宫 卵裂期：细胞在透明带中进行有丝分裂，数量增加，胚胎总体积不增加，每个细胞体积减小，有机物总量减少。 桑椹胚：胚胎细胞达32个左右，每一个细胞都具有全能性 囊胚：外表是一层扁平细胞，称为滋养层，滋养层发育成胎膜和胎盘。囊胚中心的腔称为囊胚腔，腔内一侧的细胞群称为内细胞团，内细胞团将来发育成胎儿。（细胞开始分化的时期） 原肠胚：分化成三个胚层，具有原肠腔（“一腔三层”） 三、胚胎工程的主要技术与应用 1、胚胎工程的概念：是由体外受精技术、胚胎移植技术、胚胎分割技术、胚胎冷冻保存技术和性别控制技术等组成的现代生物技术。 2、体外受精和早期胚胎培养 （1）卵母细胞的采集和培养 要培养到键鼠第二次分裂中期才具备受精能力 （2）精子的采集和获能 获能的方法（了解）：培养法（通过获能培养液）：对于啮齿目动物、家兔和猪等动物 化学诱导法（通过肝素或钙离子载体A23187）：对于牛、羊等家畜 （3）体外受精 受精：获能的精子 ＋培养成熟的卵子 完成受精 （4）胚胎早期培养 条件：受精卵在发育培养液中培养 培养液成分：无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清等 不同动物胚胎移植的时间不同：牛、羊一般要培养到桑椹胚或囊胚阶段，人的胚胎到8~16个细胞阶段移植
高二生物考前辅导选修三知识点 专题1 基因工程 基因工程的概念 基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以 新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做―DNA重组技术匚 (一) 基因工程的基本工具 1?“分子手术刀”一一限制性核酸内切酶(限制酶) (1)来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。 (2)功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。 (3)结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。 2?“分子缝合针” 一一DNA连接酶 (1) 两种DNA连接酶(E ? coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶)的比较： ①相同点：都缝合磷酸二酯键。 ②区别：E ? coliDNA连接酶来源于T4噬菌体，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。 (2) 与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。 DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。 3. “分子运输车”——载体 (1)载体具备的条件：① 能在受体细胞中复制并稳定保存。 ②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。 ③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。 (2)最常用的载体是质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有自我复_________ 能力的双链环状DNA分子。 (3)其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒 (二) 基因工程的基本操作程序 第一步：目的基因的获取 1. 目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。 2. 原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用方法有反转录法_和化学合 成法_。 3. PCR技术扩增目的基因 (1)原理：DNA复制 (2)过程：第一步：加热至90?95 C DNA解旋；第二步：冷却到55?60 C，引物结合到互补DNA链; 第三步：加热至70?75 C，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。 第二步：基因表达载体的构建 1. 目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。 2. 组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因 (1)启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA 聚合酶识别和结合的部位, 能驱动基因转录出mRNA最终获得所需的蛋白质。
2008学年度职教中心选修3专题三(胚胎工程)综合测试题 班级:__________ 姓名:_____________学号:________成绩：________________ 一、选择题：本题包括30小题，每题2分，共60分。每小题只有一个选项最符合题意。 1、体外受精的场所是（） A.在水溶液中 B.在盐溶液中 C. 在获能溶液或专用的受精溶液中 D.在酒精溶液中 2、在发情期，给良种母牛注射激素，促进母牛多排卵，这是属于什么技术？（） A、同期发情 B、人工受精 C、超数排卵 D、胚胎移植 3、下列人体细胞中分化程度最低的是（） A．胚胎干细胞B．造血干细胞C．胰腺细胞D．肌肉细胞 4、干细胞是一类保持旺盛分裂能力,将来可以分化成不同组织细胞的细胞群.在高等动物胚胎 发育过程中,不能作为胚胎干细胞来源的是哪些时期的细胞（） (1)受精卵(2)卵裂期(3)囊胚期(4)原肠胚期(5)原肠胚晚期 A、(1)(5) B、(3)(4)(5) C、(1)(3)(5) D、(4)(5) 5、胚胎工程的核心技术是（） A、胚胎分割与融合 B、人工授精和胚胎移植 C、胚胎性别鉴定 D、胚胎冷冻保存技术 6、胚胎干细胞直接来源于（） A、受精卵 B、骨髓细胞 C、早期胚胎 D、肌肉细胞 7、进行胚胎分割时，应选择发育良好，形态正常的（） A.受精卵 B.原肠胚 C.胚胎 D.桑椹胚或囊胚 8、不属于胚胎干细胞的用途的是（） A、阐明细胞分化中各调节因子的作用机制 B、生产有价值的药物 C、在试管中改良创造动物新品种 D、培育超级小鼠 9、在胚胎工程中，转基因动物培育、核移植等必须用到的两项技术是（） ①动物细胞培养②克隆③减数分裂④胚胎移植 A、①② B、①④ C、②③ D、②④ 10、下列有关克隆人的说法错误的是（） A克隆人是一种无性生殖方式 B、克隆人证明了人体细胞细胞核具有全能性 C、在现有克隆技术条件下，成功率为100% D、中国政府禁止生殖性克隆人 11、胚胎干细胞的特点是（） A.在形态上，表现为体积大，细胞核大，核仁明显；在功能上具有发育的全能性 B.在形态上，表现为体积小，细胞核大，核仁明显；在功能上具有发育的全能性 C.在形态上，表现为体积小，细胞核小，核仁不明显；在功能上不具有发育的全能性 D.在形态上，表现为体积大，细胞核小，核仁明显；在功能上具有发育的全能性 12、关于试管动物技术的概念叙述正确的是（） A.通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育为早期胚胎后， 再经过移植产生后代的技术 B.通过人工操作使卵子和精子在体内成熟，在体外受精，并通过培养发育为早期胚胎后， 再经过移植产生后代的技术
课题1 菊花的组织培养 学习目标：1.知道细胞分化、细胞的全能性、组织培养流程及影响组织培养的因素。(重点) 2.识记MS培养基的营养要素及功能。(重点) 3.尝试植物组织培养的实验操作过程。(难点) 1．植物组织培养的基本过程 (1)理论基础：植物细胞的全能性。 (2)细胞分化：在植物的个体发育过程中，细胞在形态、结构和生理功能上出现稳定性差异的过程。 (3)基本过程 离体的植物器官、组织或细胞――→ 脱分化愈伤 组织 ――→ 再分化 根、芽―→ 完整 植株 ①愈伤组织：由离体的植物组织或细胞经脱分化形成的一团排列疏松而无规则、高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞。 ②脱分化：又叫去分化，是由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程。 ③再分化：愈伤组织继续培养，重新分化成根或芽等器官的过程。 2．影响植物组织培养的因素 (1)植物材料 ①不同的植物组织，培养的难易程度差别很大。 ②同一种植物材料，材料的年龄、保存时间的长短等也会影响实验结果。菊
花的组织培养一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝。 (2)营养物质 ①大量元素，如N 、P 、K 、Ca 、Mg 、S 。 ②微量元素，如B 、Mn 、Cu 、Zn 、Fe 、Mo 、I 、Co 。 ③有机物，如甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素，以及蔗糖等。 (3)植物激素：生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素，二者的浓度、使用的顺序及用量的比例等都会影响实验结果。 (4)环境条件：如pH 、_温度、光照等，进行菊花的组织培养一般将pH 控制在5.8左右，温度控制在18～22 ℃，并且每日用日光灯照射12 h 。 3．菊花组织培养的实验操作 制备MS 固体培养基→外植体消毒 →接种→培养→移栽→栽培 (1)制备MS 固体培养基： 配制各种母液―→配制培养基―→灭菌。 (2)外植体消毒：取菊花嫩枝―→流水冲洗―→加洗衣粉刷洗―→流水冲洗20 min ――→吸干体积分数为70%的酒精消毒6～7 s ―→无菌水清洗――→吸干质量分数为0.1%的氯化汞溶液消毒1～2 min ―→无菌水清洗(至少3次)。 (3)接种：菊花茎段插入培养基时注意方向，不要倒插。每瓶接种6～8块外植体。 (4)培养：最好放在无菌箱中培养，并定期消毒。培养温度控制在18～22_℃，并且每日用日光灯照射12_h 。 (5)移栽：移栽前应先打开培养瓶的封口膜，让试管苗在培养间生长几日。然后用流水清洗根部的培养基，将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境下生活一段时间，等幼苗长壮后再移栽到土壤中。 (6)栽培：将幼苗移栽后，每天观察并记录幼苗的生长情况，适时浇水、施肥，直至开花。 1．判断对错 (1)一般来说，容易进行无性繁殖的植物，也容易进行组织培养。 ( )
胚胎工程 一、精子与卵细胞发生上的区别与联系 精子的变形: 细胞核----------精子头的主要部分; 高尔基体--------头部的顶体; 中心体----------精子的尾; 线粒体----------聚集在尾的基部形成线粒体鞘膜; 细胞内其他物质浓缩为球状-----原生质滴,随精子的成熟过程向后移动,直到最后脱落. 成熟的精子分头、颈和尾三大部分。 二、受精作用--受精的标志是在透明带和卵黄膜的空隙出现第二极体。 准备阶段:精子获能；卵子的准备(当达到减数第二次分裂的中期时,才具备与精子受精的能力) 受精过程:精子穿越放射冠和透明带,进入卵黄膜、原核形成和配子结合
三、胚胎发育 胚胎发育的过程包括卵裂期、桑葚期、囊胚期、原肠胚等时期。 卵裂期: 地点--透明带内进行 特点--有丝分裂，细胞数量不断增加，但胚胎总体积并不增加，或略有缩小。 桑葚期 特点--胚胎细胞数目达到32个左右时，胚胎形成致密的细胞团，形似桑椹。 这一阶段前的每一个细胞都具有完整胚胎的潜能,属于全能细胞 囊胚期 特点--细胞开始出现分化（该时期细胞的全能性仍比较高）。聚集在胚胎一端个体较大的细胞称为内细胞团，沿透明带展开和排列,个体较小的细胞,称为滋养层细胞。将来发育成胎儿的各种组织。中间的空腔称为囊胚腔。 原肠胚：特点：有了三胚层的分化，具有囊胚腔和原肠腔。 四、体外受精 卵母细胞的采集、精子的获取和受精 （1）卵母细胞的采集方法: 实验动物如小鼠,兔及家畜等,用促性腺激素处理,排除更多的卵子后从输卵管冲取卵子。 大家畜或大型动物：从屠宰母畜的卵巢或活体卵巢中吸取 需体外经人工培养成熟后,才能与获能的精子受精. （2）精子的采集方法:假阴道法、手握法、电刺激法等 精子获能方法:培养法、化学诱导法 (3) 受精：获能的精子和培养成熟的卵细胞在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程。