专题3植物的组织培养技术
利用植物的一块组织，甚至一个细胞，就能培养出完整的植株，靠的就是植物组织培养技术。运用这种技术，可以实现优良品种的快速繁殖，保持遗传性状的一致；可以培育出大量不含病毒的幼苗，提高作物的产量；可以实现花卉的连续生产，不受开花季节的限制……然而这一技术从设想到成熟，却经历了半个世纪。这项富有挑战性的工作，不仅会使你学到新的技术，还会带给你丰富的体验，宝贵的启迪。
课题1 菊花的组织培养
课题背景
科学研究表明，当植物细胞脱离了原来所在植物体的器官或组织而处于离体状态时，在一定的营养物质、激素和其他外界条件的作用下，就可能表现出全能性，发育成完整的植株。科学家用植物组织培养的方法，已经把许多种植物的离体的组织或细胞，培养成了完整的植物体。在本课题中，我们将通过菊花组织培养的实验来学习这一技术。
基础知识
（一）植物组织培养的基本过程
在植物的个体发育过程中，细胞在形态、结构和生理功能上都会出现稳定性的差异，形成这些差异的过程叫做细胞分化。已经分化了的细胞在结构和功能上都比较专一，要在离体条件下发育成完整的植株，并不容易。
离体的植物组织或细胞，在培养了一段时间以后，会通过细胞分裂，形成愈伤组织（图3-1）。愈伤组织的细胞排列疏松而无规则，是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞。由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程，称为植物细胞的脱分化，或者叫做去分化。脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成根或芽等器官，这个过程叫做再分化。再分化形成的试管苗，移栽到地里，可以发育成完整的植物体。图3-1简要地归纳了植物组织培养的过程。在这个过程中，往往需要使用植物激素，人为地控制细胞的脱分化与再分化。
（二）影响植物组织培养的因素
不同的植物组织，培养的难易程度差别很大。例如，烟草和胡萝卜的组织培养较为容易，而枸杞愈伤组织的芽诱导就比较难。因此，植物材料的选择直接关系到实验的成败。对于同一种植物材料，材料的年龄、保存时间的长短等也会影响实验结果。菊花的组织培养，一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝（图3-2）。
离体的植物组织和细胞，对营养、环境等条件的要求相对特殊，需要配制适宜的培养基。常用的一种培养基是MS培养基，其主要成分包括：大量元素，如N、P、K、Ca、Mg、S；微量元素，如B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co；有机物，如甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素，以及蔗糖等。在配制好的MS培养基中，常常需要添加植物激素。
你能说出各种营养物质的作用吗？同专题2中微生物培养基的配方相比，MS培养基的配方有哪些明显的不同？
植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。在生长素存在的情况下，细胞分裂素的作用呈现加强的趋势。按照不同的顺序使用这两类激素，会得到不同的实验结果。
素的浓度、使用的先后顺序以及用量的比例等，都会影响实验结果。植物激素的应用要做到得心应手，还得靠大量实践。
常用的植物激素有：生长素、细胞分裂素和赤霉素等。生长素类有：2，4-二氯苯氧乙酸（2，4-D）、吲哚乙酸（IAA）、萘乙酸（NAA）、吲哚丁酸（IBA）等。细胞分裂素类有：激动素（KT）、6-苄基嘌呤（6-BA）、玉米素（ZT）等。赤霉素类有赤霉酸（GA3）等。
生长素用量比细胞分裂素用量，比值高时，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低时，有利于芽的分化、抑制根的形成。比值适中时，促进愈伤组织的形成。
除了上述因素外，pH、温度、光照等条件也很重要。不同的植物对各种条件的要求往往不同。进行菊花的组织培养，一般将pH控制在5.8左右，温度控制在18～22℃，并且每日用日光灯照射12h。
实验操作
（―）制备MS固体培养基
MS培养基含有20多种营养成分，实验室一般使用4℃保存的配制好的培养基母液来制备。具体操作
如下。
1.配制各种母液配制母液时，无机物中大量元素浓缩10倍，微量元素浓缩100倍（MS培养基的配方参见附录3），常温保存。激素类、维生素类以及用量较小的有机物一般可按1mg/mL的质量浓度单独配制成母液。用母液配制培养基时，需要根据各种母液的浓缩倍数，计算用量。
为了避免每次配制培养基时都要称量几十种成分，可以将各种成分按比例配制成浓缩液，即培养基母液，使用时，根据浓缩比例计算用量，加水稀释。
2.配制培养基配制1L MS培养基时，先将称好的琼脂加入800mL蒸馏水，加热使琼脂熔化，然后加入蔗糖30g，取配制好的大量元素、微量元素、有机物和植物激素的母液，依次加入，加蒸馏水定容至1000mL，调节pH，最后分装到锥形瓶中，每瓶分装50mL或100mL。由于菊花茎段的组织培养比较容易，因此不必添加植物激素。如果有兴趣，你也可以试着添加一些激素。
3.灭菌将分装好的培养基连同其他器械一起进行高压蒸汽灭菌。
（二）外植体消毒
选取菊花茎段时，要取生长旺盛的嫩枝。菊花茎段用流水冲洗后可加少许洗衣粉，用软刷轻轻刷洗，刷洗后在流水下冲洗20min左右。用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入体积分数为70%的酒精中摇动2～3次，持续6～7S，立即将外植体取出，在无菌水中清洗。取出后仍用无菌吸水纸吸干外植体表面水分，放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中1～2min。取出后，在无菌水中至少清洗3次，漂净消毒液。
用于离体培养的植物器官或组织片段，叫做外植体。
对外植体进行表面消毒时，既要考虑药剂的消毒效果，又要考虑植物的耐受能力。
（三）接种
接种前用体积分数为70%的酒精将工作台擦拭一遍。工作台消毒后，首先点燃酒精灯。此后，所有的接种操作都必须在酒精灯旁进行，并且每次使用器械后，都需要用火焰灼烧灭菌。
将装有培养基的锥形瓶整齐地排列在酒精灯左侧。将消过毒的菊花茎段在无菌培养皿中切成小段（长约0.5～1cm）。左手持锥形瓶，右手拉开捆扎锥形瓶的绳子，并将封口膜攥于右手手心，以避免封口膜接触瓶口的一面被污染。左手持瓶，使瓶口旋转通过火焰；右手用镊子夹取菊花茎段，插入培养基中（图3-3）。插入时应注意方向，不要倒插。每瓶接种6～8块外植体。接种后，将封口膜重新扎好。
你打算做几个重复组？你打算设置对照实验吗？
（四）培养
接种后的锥形瓶最好放在无菌箱中培养，培养期间应定期消毒。培养温度控制在18～22℃，并且每日用日光灯光照12h。
（五）移栽
在移栽生根的菊花试管苗之前，应先打开培养瓶的封口膜，让试管苗在培养间生长几日。然后用流水清洗根部的培养基，将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境下生活一段时间，等幼苗长壮后再移栽到土壤中（图3-4）。
（六）栽培
将幼苗移栽后，每天观察并记录幼苗生长情况（图3-5），适时洗水、施肥，直至开花。
结果分析与评价
1.接种3～4d后，观察外植体的生长情况，统计有多少外植体被污染，有多少能正常生长。分析外植
体被污染的原因。
2.你培养出愈伤组织了吗？从接种到长出愈伤组织经历了多少天？你培养出的愈伤组织进一步分化出根和芽了吗？
3.两周后观察茎段的分化情况，填好结果记录表，并及时分析结果。
4.幼苗移栽到露地后，能够正常生长吗？
课题延伸
一般来说，容易进行无性繁殖的植物，也容易进行组织培养，如芦荟、豆瓣绿、秋海棠、月季等。你可以从中挑选一种你喜欢的植物，进行组织培养。
如果你对植物激素的作用感兴趣的话，可以在查阅资料的基础上，探究生长素与细胞分裂素的使用比例对植物组织培养的影响。例如，你可以设计一组对照实验，分别探究不加任何植物激素、生长素用量与细胞分裂素用量的比值为1、比值大于1以及比值小于1时，对实验结果的影响。
以下配方可供你参考。
诱导菊花愈伤组织：
在MS培养基中加入BA和NAA，质量浓度均为0.5mg/L。
诱导菊花丛芽：
在MS培养基中加入BA和NAA，质量浓度分别为2～3mg/L和0.02～0.3mg/L。
诱导菊花生根：
MS培养基各成分用量减半，并添加NAA或IAA，质量浓度均为0.1mg/L。
练习
1.在植物组织培养的过程中，为什么要进行一系列的消毒、灭菌，并且要求无菌操作？
2.在选取菊花茎段的时候，为什么要选取生长旺盛的嫩枝？
3.1 菊花的组织培养导学案 【学习目标】 1.说明植物组织培养的基本原理，进行菊花或其它植物组织培养。 2.学习植物组织培养的基本技术。 3.植物组织培养过程中使用的无菌技术。 【自主学习】 一．植物组织培养的基本过程 1．细胞分化：植物的个体发育过程中，细胞在________、_________和_________上都会出现 ___________差异，形成这些差异的过程叫做细胞分化。 2．过程总结： _____________ ___________ 试管苗 完整的植物体 （注意：脱分化、再分化、愈伤组织三个概念） （1）愈伤组织（callus ），原指植物在受伤之后于伤口表面形成的一团薄壁细胞．在组织培养 中，则是指在人工培养基上由外植体组织的增生细胞产生的一团排列_________而无_________，高 度________化的呈_________状态的_________细胞。 阅读材料： ①植物细胞可以摆脱原来的遗传控制和生理制约，在一定条件下，发生回复变化，从而失去分 化状态，变为分生细胞，实现脱分化过程。 ②植物细胞的全能性，可以脱分化之后再次分化为完整的植株，几乎所有高等植物的各种器官 离体后都可以脱分化。 ③脱分化后的细胞经过连续的有丝分裂，形成愈伤组织。 （2）脱分化：____________________________________________________________ (3) 再分化：_____________________________________________________________ 二．影响植物组织培养的因素 1．材料 ①不同的植物组织，培养的难度差别较大。 ②对于同一种植物材料，材料的年龄、保存时间的长短也会影响实验结果。菊花的组织培养， 一般选用___________________________________。 2．营养——适宜的培养基 最常用的培养基是______培养基 成分：大量元素____________________________ 微量元素____________________________ 有机物_______________________________ 3．植物激素：_________和____________是启动_______、_______和______的关键激素。 在生长素存在的情况下，细胞分裂素的作用呈现_________的趋势。 （ ） （ ） 生芽、根 发育
专题3 植物的组织培养技术 课题1 菊花的组织培养 1．下列属于组织培养的是() A．花粉培养成单倍体植株 B．芽发育成枝条 C．根尖分生区发育成成熟区 D．受精卵发育成植株 [解析]植物组织培养是指离体的植物器官、组织或细胞脱分化、再分化形成完整植物体的过程。花粉培育成单倍体植株，是在一定条件下离体完成的。芽发育成枝条、根尖分生区发育成成熟区，是植物体发育的一部分。受精卵发育成植株，也属于正常的发育过程。 [答案]A 2．下列关于植物组织培养的叙述，错误的是() A．外植体可以来自植物的任何细胞 B．培养应在无菌条件下进行 C．以花粉作为外植体可得到单倍体植株 D．不同阶段的培养基中细胞分裂素和生长素的比例不同 [解析]外植体应选择分裂旺盛的部分，如根尖、茎尖等，A错误；培养应在无菌条件下进行，这样可防止微生物消耗营养物质，产生有毒代谢产物危害培养物的生长，B正确；花粉中含有配子，以花粉作
为外植体可得到单倍体植株；C正确；不同阶段的培养基中细胞分裂素和生长素的比例不同，诱导培养物的分裂和分化，D正确。 [答案]A 3．下列关于影响植物组织培养的因素，说法正确的是() A．不同植物组织培养的难易程度不同，同一种植物材料培养的难易程度相同 B．在植物组织培养中，培养基中必须添加植物激素 C．植物激素中生长素和细胞分裂素的作用是互相独立的 D．pH、温度、光照等条件对植物组织培养也特别重要 [解析]不同植物组织培养的难易程度不同，同一种植物材料也会因年龄、保存时间的长短等导致实验结果不同，故A错误；在植物组织培养中，培养基中常常要添加植物激素，但不是都必须添加植物激素，故B错；各种植物激素的作用是相互联系的，而不是互相独立的，故C错。 [答案]D 4．在菊花的组织培养操作完成3～4 d后，观察同一温室中的外植体，发现有的瓶内外植体正常生长，有的瓶内外植体死亡，你认为外植体死亡的原因不可能是() A．培养条件，比如光照、温度等不适宜 B．接种时外植体未灭菌 C．接种工具灼烧后未待冷却就接种外植体 D．将外植体倒插入培养基中 [解析]同一温室提供了相同的光照和温度，但有的瓶内外植体正
菊花花瓣的组织培养 摘要: 述菊花花瓣组织培养的备件、生长与分化情况及意义。 关键词: 菊花、花瓣、组织培养。 前言： 植物组织培养的概念是指在人工控制的条件下，将植物体的任何一部分，或器官、或组织，或细胞，进行离体培养，使之发育形成完整的植物体。所谓人工控制的条件，即营养条件和环境条件；植物体的任伺一部分是指根、茎、叶、花、果以及它们的组织切片和细胞。它的优越性在于：可以在不受其他部分干扰的情况下研究被培养部分的生长和分化规律。特点是：取材少，培养材料经济；人为控制培养条件，不受自然条件影响；生长周期短，繁殖率高；管理方便，利于自动化控制。[1] 植物组织培养与细胞培养开始于19世纪后半叶，当时植物细胞全能性的概念还没有完全确定，但基于对自然状态下某些植物可以通过无性繁殖产生后代的观察，人们便产生了这样一种想法即能否将植物体的一部分在适当的条件下培养成一个完整的植物体，为此许多植物科学工作者开始了培养植物组织的尝试。最初的问题仍然是集中在植物细胞有没有全能性和如何使这种全能性表现出来。 植物组织培养的理论基础是植物细胞的全能性（totipotency）。一个生活的植物细胞，只要有完整的膜系统和细胞核，它就会有一整套发育成一个完整植株的遗传基础，在一个适当的条件下可以通过分裂、分化再生成完整植株，这就是所谓的细胞全能性。[2] 植物组织培养的基本方法是材料选择、培养基配置、接种与培养和最后的小苗移栽。 植物组织培养的应用 1、植物离体快速繁殖
2、植物脱毒苗木培育 3、植物新品种培育 4、植物次生代谢产物生产 6、人工种子 5、植物种质资源的离体保存 国内外研究进展 1 植物组织培养的光源研究早在1991 年，维斯康星大学的Bula 等利用以红光660 nm 为发光中心的GAALAS LED 阵列及其辅助光蓝色荧光灯，栽培了GRAND Rapids lettace（lactucasativa L），这大概是世界上最早利用LED 作为光源进行植物栽培的试验实例。经LED 光源处理的组培苗鲜重增量、碳酸酐酶活性以及叶绿素含量等明显高于对照的日光灯处理组培苗。[3] 2 无糖组织培养技术研究无糖组织培养是日本千叶大学古在丰树教授研究开发的一种新的植物组培技术。他首先研究发现容器 中的小植株也具有光合自养能力，从而考虑改变植株的营养方式以CO2作为植株的碳源，同时改善植株的生理和能量代谢，使植株更好地发挥自身的光合能力，降低生产成本。 3 植物组织培养的新型培养容器研究在传统的组织培养中，通常采用容积较小的培养容器以降低培养基中糖引起的污染，一般情况下容器中的空气流动性差，相对湿度高，CO2浓度低。为了增强培养容器内外的气体交换、降低容器内的相对湿度，近年来有不少学者研究了利用高分子膜材料制成的培养容器的有效性。[4] 1.实验材料 材料：在武汉市场购买的菊花，菊花花瓣呈黄色，取里层花瓣切块后接种于平底试管。 2.菊花的外植体的制备 2.1培养基是组织培养能否成功的关键，随着研究工作的进展，培养基的种类越来越多，但其组成主要有：
2021人教版高中生物选修1专题3课题1《菊花的组 织培养》word 导学案 一．植物组织培养的相关概念和差不多过程 1. 植物组织培养的相关概念 （1）细胞分化：植物的个体发育过程中，细胞在__________、__________和__________上都会显现稳固性的差异，形成这些差异的过程就叫做细胞分化。细胞分化是基因__________的结果。 （2）细胞的全能性：__________的植物细胞仍旧具有发育成为__________的潜能。细胞全能性是组织培养的差不多原理。 （3）愈伤组织：由离体的植物器官、组织或细胞在一定的培养条件下通过__________过程形成的组织，就叫愈伤组织，愈伤组织的细胞排列疏松而无规则，是一种__________的呈无定形状态的__________。 （4）脱分化：由__________的植物组织或细胞产生__________的过程，称为脱分化，又叫去分化。 （5）再分化：脱分化产生的愈伤组织连续进行培养，又能够重新分化成__________，那个过程叫做再分化。 （6）外植体：用于离体培养的植物器官或组织片段。 2. 植物组织培养的差不多过程 移植 ——→试管苗———→完整的植物体 二．阻碍植物组织培养的因素 1.内部因素：不同的植物组织，培养的难易程度差别专门大。同种植物材料，__________ ，__________ 等也会阻碍实验结果。菊花的组织培养，一样选择 __________的茎上部新萌生的侧枝。 2.外部因素：（1）营养条件 常用的是__________ 培养基，其要紧成分包括： __________，如_____________________________；__________ ，如______________________________ ；__________ 等。 （2）植物激素 植物激素中__________ 和__________ 是启动细胞分裂、脱分化和再分 化的关键性因素。____________________、____________________ 以及__________ 等，都会阻碍实验结果。 （3）环境因素 __________ 、__________ 、 __________等条件也能阻碍植物组织培养。菊花组织培养，一样PH 操纵在 __________ ；温度操纵在 __________ ；每天用日光灯照耀__________小时。 【摸索】(1)MS 培养基中，各种营养成分各有什么作用？与微生物培养基的配方相比，有什么不同? 离体的植物组织、器官或细胞 组织培养 脱分化 愈伤组织 组织培养 再分化 根、芽等人为使用植物激素操纵
课题1 菊花的组织培养 [学习目标] 1.说明植物组织培养的基本原理。 2.掌握植物组织培养过程中使用的无菌技术。(重难点) 3.学习植物组织培养的基本技术，进行菊花或其他植物的组织培养。 一、植物组织培养的基本过程及影响因素 1．植物组织培养 (1)理论基础：细胞的全能性。当植物细胞脱离了原来所在植物体的器官或组织而处于离体状态时，在一定的营养物质、激素和适宜的其他外界条件的作用下，就可能表现出全能性，发育成完整的植株。 (2)基本过程 离体的植物器官、组织或细胞――→脱分化愈伤组织――→再分化根、芽→完整植株 ①细胞分化：在植物的个体发育过程中，细胞在形态、结构和生理功能上出现稳定性差异的过程。 ②愈伤组织：由离体的植物组织或细胞经脱分化形成的一团排列疏松而无规则、高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞。 ③脱分化：又叫去分化，是由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程。 ④再分化：愈伤组织继续培养，重新分化成根或芽等器官的过程。 2．影响植物组织培养的因素 (1)材料选取 ①不同的植物组织，培养的难易程度差别很大。 ②同一种植物材料，材料的年龄、保存时间的长短等也会影响实验结果。菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝。 (2)营养成分 常用的一种培养基是MS 培养基，主要成分包括： ①大量元素，如N 、P 、K 、Ca 、Mg 、S 。
②微量元素，如B 、Mn 、Cu 、Zn 、Fe 、Mo 、I 、Co 。 ③有机物，如甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素，以及蔗糖等。 (3)植物激素：生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素，二者的浓度、使用的顺序及用量的比例等都会影响实验结果。 (4)外界条件：如pH 、温度、光照等环境条件。一般而言，菊花的组织培养所需pH 为5.8左右 ，温度为18～22_℃，光照条件为每日用日光灯照射12 h 。 1．马铃薯长期种植，会因感染病毒而导致产量降低，要想提高产量、培育无病毒的马铃薯应该如何处理？ 【提示】 植物的茎尖、芽尖等由于刚刚分化而成，病毒含量极少，甚至无病毒。可以用这部分组织进行植物培养，可获得脱毒苗。 2．植物组织培养中光照条件如何控制？ 【提示】 组织培养过程中，若外植体无叶绿体(如根尖)，脱分化时不需要光照，再分化时需要光照，以利于叶绿素的形成；若外植体含叶绿体，则需要光照，以便自养，提高成活率。 二、实验操作 制备MS 固体培养基：配制各种母液、配制培养基和灭菌 外植体消毒：嫩枝→流水冲洗――→吸干体积分数为70%的酒精 中摇动2～3次，持续6～7 s →无菌水中 清洗――→吸干放入质量分数为0.1%的氯化汞 溶液中1～2 min →在无菌水中至少清洗3 次 接种：所有的接种操作都必须在酒精灯旁进行。将菊
课题1 菊花的组织培养 学习目标：1.知道细胞分化、细胞的全能性、组织培养流程及影响组织培养的因素。(重点) 2.识记MS培养基的营养要素及功能。(重点) 3.尝试植物组织培养的实验操作过程。(难点) 1．植物组织培养的基本过程 (1)理论基础：植物细胞的全能性。 (2)细胞分化：在植物的个体发育过程中，细胞在形态、结构和生理功能上出现稳定性差异的过程。 (3)基本过程 离体的植物器官、组织或细胞――→ 脱分化愈伤 组织 ――→ 再分化 根、芽―→ 完整 植株 ①愈伤组织：由离体的植物组织或细胞经脱分化形成的一团排列疏松而无规则、高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞。 ②脱分化：又叫去分化，是由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程。 ③再分化：愈伤组织继续培养，重新分化成根或芽等器官的过程。 2．影响植物组织培养的因素 (1)植物材料 ①不同的植物组织，培养的难易程度差别很大。 ②同一种植物材料，材料的年龄、保存时间的长短等也会影响实验结果。菊
花的组织培养一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝。 (2)营养物质 ①大量元素，如N 、P 、K 、Ca 、Mg 、S 。 ②微量元素，如B 、Mn 、Cu 、Zn 、Fe 、Mo 、I 、Co 。 ③有机物，如甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素，以及蔗糖等。 (3)植物激素：生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素，二者的浓度、使用的顺序及用量的比例等都会影响实验结果。 (4)环境条件：如pH 、_温度、光照等，进行菊花的组织培养一般将pH 控制在5.8左右，温度控制在18～22 ℃，并且每日用日光灯照射12 h 。 3．菊花组织培养的实验操作 制备MS 固体培养基→外植体消毒 →接种→培养→移栽→栽培 (1)制备MS 固体培养基： 配制各种母液―→配制培养基―→灭菌。 (2)外植体消毒：取菊花嫩枝―→流水冲洗―→加洗衣粉刷洗―→流水冲洗20 min ――→吸干体积分数为70%的酒精消毒6～7 s ―→无菌水清洗――→吸干质量分数为0.1%的氯化汞溶液消毒1～2 min ―→无菌水清洗(至少3次)。 (3)接种：菊花茎段插入培养基时注意方向，不要倒插。每瓶接种6～8块外植体。 (4)培养：最好放在无菌箱中培养，并定期消毒。培养温度控制在18～22_℃，并且每日用日光灯照射12_h 。 (5)移栽：移栽前应先打开培养瓶的封口膜，让试管苗在培养间生长几日。然后用流水清洗根部的培养基，将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境下生活一段时间，等幼苗长壮后再移栽到土壤中。 (6)栽培：将幼苗移栽后，每天观察并记录幼苗的生长情况，适时浇水、施肥，直至开花。 1．判断对错 (1)一般来说，容易进行无性繁殖的植物，也容易进行组织培养。 ( )
课题1 菊花的组织培养 学科组：高二生物组时间：2012-2-24 主编：荆勇主审：车柳顺 寄语:以积极的心态迎接每一天，你会发现梦想其实并不遥远。 学习目标 1.说明植物组织培养的基本原理。 2.学习植物组织培养的基本技术。 3.进行菊花或其他植物的组织培养。 学习重点与难点 重点：1.植物组织培养的相关概念和过程 2.影响植物组织培养的因素 3.植物组织培养过程中使用的无菌技术。 难点：1.影响植物组织培养的因素。 2.植物组织培养过程中使用的无菌技术。 自主探究 一．植物组织培养的相关概念和基本过程 1.植物组织培养的相关概念 （1）细胞分化：在植物的个体发育过程中，细胞在__________、__________和__________上都会出现稳定性的差异，形成这些差异的过程就叫做细胞分化。细胞分化是基因__________的结果（细胞分化的实质）。（2）细胞的全能性：__________的植物细胞仍然具有发育成为__________的潜能。细胞全能性是组织培养的基本原理。 （3）愈伤组织：由离体的植物器官、组织或细胞在一定的培养条件下经过__________过程形成的组织，就叫愈伤组织，愈伤组织的细胞排列疏松而无规则，是一种__________的呈无定形状态的__________。 （4）脱分化：由__________的植物组织或细胞产生__________的过程，称为脱分化，又叫去分化。 （5）再分化：脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成__________，这个过程叫做再分化。（6）外植体：用于离体培养的植物器官或组织片段。 2.植物组织培养的基本过程 人为使用植物激素控制 移植 ——→试管苗———→完整的植物体 二．影响植物组织培养的因素 1.内部因素：不同的植物组织，培养的难易程度差别很大。同种植物材料，__________ ，__________ 等也会影响实验结果。菊花的组织培养，一般选择__________的茎上部新萌生的侧枝。 2.外部因素：（1）营养条件常用的是__________ 培养基，其主要成分包括：__________，如_____________________________；__________ ，如______________________________ ；__________ 等。（2）植物激素植物激素中__________ 和__________ 是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性因素。____________________、____________________ 以及__________等，都会影响实验结果。 （3）环境因素__________ 、__________ 、__________等条件也能影响植物组织培养。菊花组织培养，一般PH控制在__________ ；温度控制在__________ ；每天用日光灯照射__________小时。 【思考】(1)MS培养基中，各种营养成分各有什么作用？与微生物培养基的配方相比，有什么不同? (2)生长素使用的先后顺序、用量比例不同分别会造成哪些影响？
课题1菊花的组织培养 一、植物组织培养的相关概念和基本过程 1、(1)细胞全能性的表达：________的植物组织或细胞，在一定的____________、________和________________的作用下，发育成完整植株的过程。 (2)细胞分化：在植物的________过程中，细胞在________、________和____________上都会出现________的差异，形成这些差异的过程叫做细胞分化。 (3)植物组织培养的基本过程 离体的植物器官、组织或细胞(又叫________)――→ 愈伤组织――→ 胚状体、丛芽等 ――→ 生长 新个体 ①愈伤组织的特点：细胞________________，是一群________________的呈________________的薄壁细胞。 ②脱分化(去分化)：由____________的植物组织或细胞产生____________的过程。 ③再分化：由________________________重新分化成根或芽等器官的过程。 (4)条件：________的植物组织或细胞，在一定的________、________和其他外界条件的作用下就可能表现出全能性，发育成完整植株。离体的植物组织或细胞叫做________。 2．影响植物组织培养的因素 (1)培养材料的影响：不同的植物组织，培养的难易程度____________。对于同一种植物材料，材料的________、________________等也会影响实验结果。因此菊花的组织培养，一般选择________________的茎________部________的侧枝。 (2)营养物质的影响：常用的________培养基，主要成分包括____________、____________、________以及蔗糖等。其中____________和____________提供植物细胞所必需的无机盐；________提供碳源，维持细胞渗透压。 (3)植物激素的影响：MS 培养基常需添加植物激素。其中________和____________是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素，这两种激素的________、________________以及____________等，都会影响实验结果。 (4)环境因素的影响：________、________、________等条件也能影响植物组织培养。 类、培养基的营养条件、植物激素的种类和比例以及适宜的PH 、温度等。
专题3 课题1 菊花的组织 培养 一、选择题 1．下列实例中能体现植物细胞全能性的是( ) ①将离体的胡萝卜单个细胞培养成了可育的植株 ②植物用种子繁殖后代 ③用烟草的单个细胞培养出了可育的完整植株 A．①②B．①③ C．②③D．①②③ 解析：选B。细胞全能性是指已经分化的细胞仍然具有发育为完整个体的潜能。其中①和③都属于由分化的细胞经过组织培养形成可育的植株，体现了细胞的全能性。植物用种子繁殖后代，实际上就是由受精卵通过细胞的增殖和分化发育成新个体，属于有性生殖。 2．(2019·上海嘉定调研)下列有关愈伤组织细胞的叙述中，不正确的是( ) A．细胞壁薄、分裂旺盛 B．细胞具有较高的全能性 C．由高度分化的植物细胞经脱分化和分裂形成 D．细胞有叶绿体，能进行光合作用 解析：选D。愈伤组织还没有分化，没有叶绿体，不能进行光合作用。 3．下面关于植物组织培养的叙述，错误的是( ) A．叶肉细胞脱分化后可形成无定形状态的薄壁细胞 B．叶肉细胞经再分化过程可形成愈伤组织 C．生长素和细胞分裂素使用比例要恰当 D．叶肉细胞离体培养时，可以表现出全能性 解析：选B。在植物组织培养过程中，细胞首先经脱分化形成愈伤组织，然后经再分化形成根或芽等器官，愈伤组织的细胞特点是细胞排列疏松无规则，是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞，植物组织培养的理论基础是细胞的全能性。生长素和细胞分裂素用量的比例会影响植物细胞的发育方向。 4．下列能正确表示菊花组织培养的基本步骤的是( ) A．制备MS培养基→外植体消毒→接种→培养→移栽→栽培 B．制备MS培养基→外植体消毒→接种→培养→栽培→移栽 C．制备MS培养基→外植体消毒→接种→栽培→培养→移栽 D．制备MS培养基→外植体消毒→接种→移栽→培养→栽培 解析：选A。移栽是指待培养基上培养的幼苗长壮后移栽到土壤中，栽培是对移栽后的幼苗进行精心管理和培养的过程，因此应先移栽后栽培。
课题1 菊花的组织培养 抚顺二中王忠妍 【自主学习】 1.实验室内常见的灭菌方法有：、和。 2.细胞分化是指在过程中，相同细胞的后代在、和上发生的过程。 3.愈伤组织的细胞而，是一种高度的、呈状态的细胞。 4.在植物组织培养过程中，往往需要使用和等植物激素，人为地控制细胞的和 _______过程。 5.在诱导细胞分裂分化过程中，先使用生长素，后使用细胞分裂素，有利于细胞，但细胞；先使用细胞分裂素，后使用生长素，细胞；同时使用生长素和细胞分裂素，频率提高。 【互动课堂】 知识点一基础知识 资料分析一 阅读教材P32及下列资料，完成下列问题及右侧知识点填空 植物组织培养是指在无菌和人工控制的营养及环境条件下，将外植体（离体的植物器官、组织片段或细胞）培育成完整植物的技术。 ◆动动脑1◆ ⑴生物体内的细胞不表现全能性的原因是。 ⑵植物细胞全能性表达的条件： ①植物细胞处于状态； ②环境； ③种类齐全、比例适宜的物质； ④适宜的、、等环境条件； ⑤适宜物质的诱导和调节（如和）。 ⑶完成植物组织培养流程图 ①在上述过程中，细胞增殖的方式是。 ②图中d过程应先诱导，再诱导，若顺序颠倒，则无法生芽。 ③若想制作人工种子，应选用；若想获取细胞代谢产物，则培养进行到。 ④e到f过程指的是植物的生长和生长阶段。 ⑤同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因型______（相同/不同）。知识点一基础知识 1.植物组织培养的基本过程 ⑴细胞分化：在过程中，相同细胞的后代在、和上发生____________的过程。 ⑵植物组织培养的理论基础： ①概念：的植物细胞仍具有形成的潜能。 ②根本原因：每个细胞都含有 _______。 ⑶植物组织培养的基本过程 ①脱分化：由的植物组织或细胞产生的过程，也叫。 ②愈伤组织：的植物组织或细胞通过_____形成的________而_______、高度________的、呈______状态的____细胞。 ③再分化：经培养，重新分化成或等器官的过程。
专题3 植物的组织培养技术 3.1 菊花的组织培养（练） 1.下列不属于菊花茎段植物组织培养特点的是（） A．快速无性繁殖技术 B．能筛选具有优良变异的新品种 C．不改变原植物的基因型 D．需脱分化和再分化培养 【答案】B 【解析】菊花茎切断植物组织培养是快速无性繁殖技术，A错误；植物组织培养技术是无性生殖，能保持母本的优良性状，不能筛选具有优良变异的新品种，B正确；植物组织培养技术是无性生殖，不改变原植物的基因型，C错误；植物组织培养过程是离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽，最终形成植物体，D错误。 2.植物材料的选择直接关系到实验的成败，菊花选材一般选择（） A．未开花植株的茎上部新萌生的侧枝 B．开花植株的茎上部枝条 C．开花植株上的花药 D．未开花植株的茎下部的枝条 【答案】A 3.在菊花的组织培养操作完成3~4 d后，观察同一无菌箱中的外植体，发现有的瓶内外植体正常生长，有的瓶内外植体死亡，你认为外植体死亡的原因不可能是（） A．培养条件，比如光照、温度等不适宜 B．接种时外植体未消毒 C．接种工具灼烧后未待冷却就接种外植体 D．将外植体倒插入培养基中 【答案】A 【解析】一般来讲，进行植物组织培养时，培养条件应是相同的，若培养条件，比如pH、温度等不适宜，则所有的外植体均死亡，A正确；接种时外植体未消毒，就会受到微生物的污染，从而导致实验前功尽弃，B错误；接种工具灼烧后未待冷却就接种外植体，会导致高温杀死外植体，C错误；有些植物激素是极性运输的，即从形态学的上端运到形态学的下端，将外植体倒插入培养基中，会使得组织培养失败，D错误。 4.菊花种植多年后易积累病毒而导致品种退化。目前生产上采用茎尖分生组织离体培养的方法快速繁
——教学资料参考参考范本——【高中教育】最新高中生物专题3植物的组织培养技术课题1 菊花的组织培养练习1 ______年______月______日 ____________________部门
课题1 菊花的组织培养 1．下列属于组织培养的是( ) A．花粉培养成单倍体植株 B．芽发育成枝条 C．根尖分生区发育成成熟区 D．受精卵发育成植株 解析：植物组织培养是指离体的植物器官、组织或细胞脱分化、再分化形成完整植物体的过程。花粉培育成单倍体植株，是在一定条件下离体完成的。芽发育成枝条、根尖分生区发育成成熟区，是植物体发育的一部分。受精卵发育成植株，也属于正常的发育过程。 答案：A 2．用高度分化的植物细胞、组织和器官进行组织培养可以形成愈伤组织，下列叙述错误的是( ) A．该愈伤组织是细胞经过脱分化和分裂形成的 B．该愈伤组织的细胞没有全能性 C．该愈伤组织是由排列疏松的薄壁细胞组成的 D．该愈伤组织可以形成具有生根发芽能力的胚状结构 解析：愈伤组织的细胞仍具有全能性，在一定条件下继续培养，细胞会发生再分化，生成芽和根，进而发育成完整植株。 答案：B 3．下列关于影响植物组织培养的因素，说法正确的是( )
A．不同植物组织培养的难易程度不同，同一种植物材料培养的难 易程度相同 B．在植物组织培养中，培养基中必须添加植物激素 C．植物激素中生长素和细胞分裂素的作用是互相独立的 D．pH、温度、光照等条件对植物组织培养也特别重要 解析：不同植物组织培养的难易程度不同，同一种植物材料也会 因年龄、保存时间的长短等导致实验结果不同，故A错误；在植物组 织培养中，培养基中常常要添加植物激素，但不是都必须添加植物激素，故B错；各种植物激素的作用是相互联系的，而不是互相独立的，故C错。 答案：D 4．下列有关菊花的组织培养的说法，正确的是( ) A．需要有三种培养基，其营养成分中的碳源应该是无机碳源 B．要用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌，即在100 ℃下保持15～30 min C．在培养过程中要先让愈伤组织生根后再使其生芽 D．用酒精对外植体进行消毒时，持续的时间不能太长 解析：在该过程中，共需配制三种培养基，分别是脱分化培养基、生芽培养基和生根培养基，但这些培养基需要的碳源是蔗糖，而不是 无机碳；在对培养基进行高压蒸汽灭菌时，要在121 ℃下保持15～30 min，以便于杀死所有微生物的细胞、芽孢和孢子等，100 ℃下不能杀 死微生物的芽孢；在培养过程中要先让愈伤组织生芽后再使其生根； 用酒精对外植体进行消毒时，持续的时间不能太长，否则容易杀死外 植体细胞。
【优化设计】2018-2019学年高中生物专题3 课题1 菊花的组织培养课后习题（含解析）新人教版选修1 课时演练·促提升 A.壁虎断尾后重新长出尾部 B.小鼠骨髓造血干细胞形成各种血细胞 C.小蝌蚪生长发育成了小青蛙 D.胡萝卜根韧皮部细胞经组织培养发育成新植株 解析:细胞全能性指已分化的细胞发育成完整个体。壁虎尾巴重新长出,属于再生,不是细胞的全能性,A项错误。小鼠骨髓造血干细胞形成各种血细胞,不能体现细胞的全能性,B项错误。小蝌蚪属于青蛙的幼体,C项错误。胡萝卜根韧皮部细胞经组织培养发育成新植株,体现了细胞的全能性,D 项正确。 答案:D 2.下面为植物组织培养过程流程图解,下列相关叙述,不正确的是( ) A.上述过程中脱分化发生在b步骤,形成愈伤组织,在此过程中植物激素发挥了重要作用 B.再分化发生在d步骤,是愈伤组织重新分化成根或芽等器官的过程 C.从叶组织块到种苗形成的过程说明植物叶片细胞具有全能性 D.b过程进行诱变处理后培养,可筛选出抗逆性强的突变体 解析:从流程图可知,植物组织培养包括脱分化和再分化两个阶段,即b和c步骤,再分化发生在c 步骤。 答案:B 3.下图为植物组织培养过程。据图分析下列叙述正确的是( ) A.⑤植株根尖细胞的全能性比①植株根尖细胞的强 B.②试管的培养基中含有植物激素,不含有有机物 C.③试管中的细胞具有细胞质丰富、细胞核和液泡都大的特性 D.调节④培养基中植物激素的比例可诱导产生不同的植物器官 解析:由于⑤是由①的组织经培养成的个体,故二者的全能性应该相同,A项错误。由①到②的过程中植物细胞不能进行光合作用,因而②试管中含有有机物蔗糖等,B项错误。③试管中细胞为高度液泡化的细胞,C项错误。植物激素比例的不同,常诱导分化出不同的器官,D项正确。 答案:D 4.某同学在进行组织培养过程中,发现根的分化明显,而芽的分化不明显,可能原因是( ) A.未见阳光 B.培养时间不到 C.培养基营养过多 D.细胞分裂素和生长素配比不合适 解析:愈伤组织产生根或芽,取决于生长素和细胞分裂素的用量比例。当细胞分裂素与生长素的比值低时,诱导根的分化,两者比值适中时,愈伤组织只生长不分化;两者比值高时,诱导芽的形成。答案:D 5.在制备MS固体培养基的过程中,错误的是( )
【2019最新】高中生物专题3植物的组织培养技术课题1菊花 的组织培养练习1 课题1 菊花的组织培养 1．下列属于组织培养的是( ) A．花粉培养成单倍体植株 B．芽发育成枝条 C．根尖分生区发育成成熟区 D．受精卵发育成植株 解析：植物组织培养是指离体的植物器官、组织或细胞脱分化、再分化形成完整植物体的过程。花粉培育成单倍体植株，是在一定条件下离体完成的。芽发育成枝条、根尖分生区发育成成熟区，是植物体发育的一部分。受精卵发育成植株，也属于正常的发育过程。 答案：A 2．用高度分化的植物细胞、组织和器官进行组织培养可以形成愈伤组织，下列叙述错误的是( ) A．该愈伤组织是细胞经过脱分化和分裂形成的 B．该愈伤组织的细胞没有全能性 C．该愈伤组织是由排列疏松的薄壁细胞组成的 D．该愈伤组织可以形成具有生根发芽能力的胚状结构 解析：愈伤组织的细胞仍具有全能性，在一定条件下继续培养，细胞会发生再分化，生成芽和根，进而发育成完整植株。 答案：B 3．下列关于影响植物组织培养的因素，说法正确的是( ) A．不同植物组织培养的难易程度不同，同一种植物材料培养的难易程度相同 B．在植物组织培养中，培养基中必须添加植物激素 C．植物激素中生长素和细胞分裂素的作用是互相独立的 D．pH、温度、光照等条件对植物组织培养也特别重要 解析：不同植物组织培养的难易程度不同，同一种植物材料也会因年龄、保存时间的长短等导致实验结果不同，故A错误；在植物组织培养中，培养基中常常要添加植物激素，但不是都必须添加植物激素，故B错；各种植物激素的作用是相互联系的，而不是互相独立的，故C错。 答案：D 4．下列有关菊花的组织培养的说法，正确的是( )
课题1 菊花的组织培养
1．知道细胞分化、细胞的全能性、组织培养流程及影响组织培养的因素。(重点) 2．识记MS培养基的营养要素及功能。(重点) 3．尝试植物组织培养的实验操作过程。(难点)
1．植物组织培养的基本过程 (1)概念：指在人工培养基上，离体培养植物的器官、组织、细胞，并使其生长、增殖、分化以及再生植株的技术。 (2)原理：植物细胞的全能性。 (3)基本过程 离体细胞、组织、器官――→ A B――→ C 胚状体、丛芽等――→ 生长 新个体 ①B是愈伤组织，其特点是：细胞排列疏松而无规则，是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞。 ②A过程是脱分化，是指由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程，又叫去分化。 ③C过程是再分化，是指愈伤组织重新分化成根或芽等器官的过程。 2．植物细胞的全能性 (1)概念：生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能。 (2)原因：生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质。 (3)全能性大小：一般分化程度越低的细胞，全能性越高。特例：卵细胞的分化程度和全能性都比较高。 3．影响植物组织培养的因素 (1)内因 ①植物的种类、材料的年龄和保存时间的长短等都会影响实验结果。一般来
说，容易进行无性繁殖的植物容易进行组织培养。 ②菊花的组织培养，一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝作材料。选取生长旺盛嫩枝进行组织培养的原因是嫩枝生理状态好，容易诱导脱分化和再分化。 (2)外因 ?? ????? 营养??? 矿质元素(含大量元素：C 、H 、O 、N 、P 、K 、Ca 、 Mg 、S ；微量元素：B 、Mn 、Cu 、Zn 、 Fe 、Mo 、I 、Co ) 有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等调节剂：生长素、细胞分裂素 ??? 使用顺序不同→结果不同 两者用量比例不同→植物发 育方向不同环境因素：pH 、温度、光照等 [合作探讨] 探讨1：植物组织培养的基本过程是怎样的？ 提示：离体的植物 器官、组织或细胞外植体 ――→脱分化愈伤组织――→再分化 根、芽→完整 植株 探讨2：在生物体内，细胞并不表现出全能性，而是分化为不同的组织、器官的原因是什么？
[基础全练] 1．细胞具有全能性的根本原因是() A．生物体细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能 B．生物体的每一个细胞都含有个体发育的全部基因 C．生物体的每一个细胞都含有个体发育的部分基因 D．生物体的每一个细胞都具有分裂能力 解析：生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能，细胞的这种特性叫作细胞的全能性。细胞具有全能性的根本原因是已分化的细胞都有一整套个体发育的全部基因。 答案：B 2．下列现象属于植物细胞脱分化的是() A．将胡萝卜根薄片放在培养基上培养成愈伤组织 B．由愈伤组织形成植物芽的过程 C．受精卵形成种子的过程 D．由种子发育成植株 解析：脱分化是指高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程。由愈伤组织形成植物芽是再分化过程；受精卵形成种子和由种子发育成植株都是植物体内正常的发育过程，不属于脱分化。 答案：A 3．关于影响植物组织培养的因素，说法正确的是() A．不同植物组织培养的难易程度不同，同一种植物材料培养的难易程度相同B．在植物组织培养中，培养基中必须添加植物激素 C．植物激素中生长素和细胞分裂素的作用是互相独立的 D．pH、温度、光照条件等对植物组织培养特别重要 解析：不同植物组织培养的难易程度不同，同一种植物材料也会因年龄、保存时间的长短等导致实验结果不同；在植物组织培养中，培养基中常常要添加植物激
素，但不是都必须添加植物激素，如菊花茎段组织培养不必添加植物激素；各种植物激素的作用是相互联系的，而不是相互独立的。 答案：D 4．下列关于影响植物组织培养的因素的叙述，错误的是() A．幼嫩组织较成熟组织易培养成功 B．给外植体消毒用体积分数为70%的酒精 C．接种花药后一段时间内不需要光照，但幼小植株形成后需要光照 D．生长素与细胞分裂素含量之比较高时有利于芽的分化 解析：生长素与细胞分裂素含量之比较高时，有利于根的分化；较低时，有利于芽的分化；二者含量相当时，促进愈伤组织的形成。 答案：D 5．下列关于植物组织培养的说法，错误的是() A．一般来说，容易进行无性繁殖的植物，也容易进行组织培养 B．对菊花茎段进行组织培养，不加植物激素也能成功 C．接种后的锥形瓶放入无菌箱中，给予适宜的温度和光照即可 D．通过有丝分裂进行细胞增殖 解析：在植物组织培养过程中，分化程度越低的材料，越容易脱分化形成愈伤组织，接种后的锥形瓶放入无菌箱中，给予适宜的温度和光照进行培养，培养期间应定期消毒，防止细菌等微生物污染。 答案：C 6．下列有关植物组织培养所需营养的叙述，错误的是() A．MS培养基既含硝态氮又含铵态氮 B．维生素以辅酶的形式参与生物催化剂酶的活动 C．植物生长调节物质包括生长素、细胞分裂素及赤霉素等 D．植物组织培养过程中无需从外部供糖 解析：在植物组织培养进行异养的状况下，组织细胞不能进行光合作用，因此在培养基中必须添加糖，以作为细胞的碳素来源和能量来源。
专题3植物的组织培养技术 利用植物的一块组织，甚至一个细胞，就能培养出完整的植株，靠的就是植物组织培养技术。运用这种技术，可以实现优良品种的快速繁殖，保持遗传性状的一致；可以培育出大量不含病毒的幼苗，提高作物的产量；可以实现花卉的连续生产，不受开花季节的限制……然而这一技术从设想到成熟，却经历了半个世纪。这项富有挑战性的工作，不仅会使你学到新的技术，还会带给你丰富的体验，宝贵的启迪。 课题1 菊花的组织培养 课题背景 科学研究表明，当植物细胞脱离了原来所在植物体的器官或组织而处于离体状态时，在一定的营养物质、激素和其他外界条件的作用下，就可能表现出全能性，发育成完整的植株。科学家用植物组织培养的方法，已经把许多种植物的离体的组织或细胞，培养成了完整的植物体。在本课题中，我们将通过菊花组织培养的实验来学习这一技术。
基础知识 （一）植物组织培养的基本过程 在植物的个体发育过程中，细胞在形态、结构和生理功能上都会出现稳定性的差异，形成这些差异的过程叫做细胞分化。已经分化了的细胞在结构和功能上都比较专一，要在离体条件下发育成完整的植株，并不容易。 离体的植物组织或细胞，在培养了一段时间以后，会通过细胞分裂，形成愈伤组织（图3-1）。愈伤组织的细胞排列疏松而无规则，是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞。由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程，称为植物细胞的脱分化，或者叫做去分化。脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成根或芽等器官，这个过程叫做再分化。再分化形成的试管苗，移栽到地里，可以发育成完整的植物体。图3-1简要地归纳了植物组织培养的过程。在这个过程中，往往需要使用植物激素，人为地控制细胞的脱分化与再分化。 （二）影响植物组织培养的因素 不同的植物组织，培养的难易程度差别很大。例如，烟草和胡萝卜的组织培养较为容易，而枸杞愈伤组织的芽诱导就比较难。因此，植物材料的选择直接关系到实验的成败。对于同一种植物材料，材料的年龄、保存时间的长短等也会影响实验结果。菊花的组织培养，一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝（图3-2）。
高中生物《菊花的组织培养》2018.1 【第2课时】 B．实验操作流程：观看菊花的组织培养视频（7分钟左右） 1、阅读P34“制备MS固体培养基”，填空下列问题： （1）配制各种母液：将各种成分按配方比例配制成的浓缩液。使用时根据母液的倍数，计算用量，并加稀释。 (2)配制培养基：应加入的物质有琼脂、、大量元素、微量元素、有机物和植物激素的母液，并用定容到1000毫升。在菊花组织培养中，可以不添加，原因是菊花茎段组织培养比较容易。 (3)灭菌：采取的灭菌方法是灭菌。教师提醒注意：配制母液很复杂，请注意以下几点： 母液中含有大量元素、微量元素、激素（植物生物调节剂）和维生素等有机成分，母液浓度是实际溶液浓度的5～10倍。配制母液花费时间多，需要用到溶量瓶、移液管等精密仪器，无法由每位学生亲自操作，教师可带领部分学生在课外进行。母液的类型和配制顺序如下： 配制母液的注意事项：⑴自来水或河水中含有大量的矿质元素，勿用配制母液；⑵配制大量元素和微量元素母液时，应将每种化合物单独溶解后，再一一混合，同时还应用适量的蒸馏水清洗烧杯内壁，并将清洗后的蒸馏水倒入混合溶液中，这样可以保证每种元素的浓度，混合时要按照教材附表中的顺序进行，最后加入的是氯化钙溶液，这样可以避免发生沉淀；⑶配制好的母液要先倒入1 000 ml烧杯中，再由烧杯转入1 000 ml细口瓶中，不可由容量瓶直接倒入细口瓶中；⑷注意观察母液中是否有絮状物，出现絮状物表明离子之间发生反应，需要重新配制母液；⑸植物生长调节剂难溶于水，需要碱或酸助溶，一般生长素类物质用碱（0.1 mol/LNaOH1～3 ml）或酒精（75～95％的酒精1～3ml）助溶，细胞分裂素类物质一般用酸（0.1 mol/LHCL1～3 ml）助溶，加入蒸馏水定溶时要缓慢，也可用水浴法助溶；⑹用棕色细口瓶盛装有机物母液和植物生长调节剂母液，避免透射光损害母液中的有机成分； ⑺在瓶壁上贴好各种母液的标签（下图所示）；⑻将配制好的母液放入冰箱中或阴凉处保存。 小结并抄写：MS培养基。配制培养基的流程如下： 上述的培养基配制流程中，加入各种母液的时间是在琼脂溶化之后，这样既可避免加热使母液中的各种离子发生反应，又可避免有机物母液和植物生长调节剂因高温受到损害。将母液加入培养基的顺序是：先提取大量元素、微量元素、铁盐、有机物母液，后提取植物生长调节剂母液，切勿先提取植物生长调节剂母液，这是因为该溶液中含有酸或碱，容易与其他元素形成沉淀而失败。培养基通常采用高压蒸汽灭菌， 7 灭菌时间一般为15～20min，灭好菌的培养基不易保存过长时间，通常是现用现配。在对培养基灭菌的同时，也要对解剖刀、镊子、烧杯、锥形瓶、牛皮纸等必要的仪器设备进行灭菌。 2、阅读“外植体消毒”，填写下列流程图： 思考：在此消毒过程中，是不是强度越大越好，为什么？ 学生讨论回答——不是。对外植体进行表面消毒时，既要考虑到药剂的消毒效果，又要考