美国FDA分析方法验证指南
美国FDA分析方法验证指南
1. 绪论
本指南旨在为申请者提供建议，以帮助其提交分析方法，方法验证资料和样品用于支持原料药和制剂的认定，剂量，质量，纯度和效力方面的文件。
本指南旨在帮助申请者收集资料，递交样品并资料以支持分析方法。这些建议适用于NDA，这些原则同样适用于二类DMF所涉及的原料药和制剂。如果使用了其它方法，鼓励申请者事先和FDA药品评审中心的官员进行讨论，以免出现这种情况，那就是花了人力物力所准备起来的递交资料后来发现是不可用的。
本指南中所述的分析方法验证的原则适用于各种类型的分析方法。但是，本指南中特定的建议可能不适用于有些产品所用的特殊分析方法，如生物药，生物技术药，植物药或放射性药物等。
比如说，许多生物分析是建立在动物挑战模式，免疫原性评估或其它有着独特特性的免疫分析基础上的，在递交分析方法和分析方法验证资料时需考虑这些独特的性质。而且，许多原料药和制剂的界定和质量控制所需的生物和免疫化学检测并不在本指南的范围之内。
尽管本指南并不专门叙述原料，中间体，赋形剂，包装材料及原料药和制剂生产中所用的其它物料的分析方法及分析方法验证资料的递交，但是应该应用验证过的分析方法来分析检测这些物质。
对于本指南中未提及的关于分析方法验证和资料提交方面的问题，请向FDA相关的化学评审人员咨询。
本指南，一旦定稿，将取代FDA于1987年2月份发布的工业指南：分析方法验证所需提交的样品和分析资料。
II. 背景
每个NDA和ANDA都必需包括必要的分析方法以确保原料药和制剂的认定，剂量，质量，纯度和效力，还包括制剂的生物利用度(21 CFR 314.50(d)(1) 和314.94(a)(9)(i))。
FDA验证文件现场备查，可以不与DMF一起交。必须要有资料来论证所用的分析方法是符合一定的准确度和可靠性标准的。
分析方法验证是论证某一分析方法适用于其用途的过程。分析方法的验证过程是从申请者有计划地系统性收集验证资料以支持分析方法开始的。
审评化学家会对NDA或ANDA中的分析方法和验证资料进行评审。一旦FDA有要求，则NDA或ANDA的申请者必须提交制剂，原料药，非药典对照品和空白以使FDA实验室能对申请者所用分析方法进行评审(21 CFR 314.50(e) and 314.94(a)(10))。
FDA实验室的分析会论证该分析方法在实验室内是可以重现的。审评化学家和实验室分析家会从法规的角度确定该分析方法的适用性。
FDA检查官会对分析实验室进行检查确保用于放行和稳定性实验的分析方法符合现行的GMP（21CFR part 211)和GLP (21 CFR part 58)。每个BLA和PLA都必须要有详细的生产工艺描述，包括分析方法，以说明所生产的产品是符合规定睥安全，纯充和效力标准的(21 CFR 601.2(a) and 601.2(c)(1)(iv))。必须要有资料证明所用的分析方法是符合一定的准确度和可靠性要求的(21 CFR 81211.194(a)(2))。对于BLA，PLA及它们的补充，在所提交的许可证申请中应当要有分析方法和方法验证这部分的资料，审评委员会会对这部分资料进行评审。需提供代表性样品及该样品所代表批号的检测结果总结(21 CFR 601.2(a) and 601.2(c)(1)(vi))。评审委员会主席会要求CBER实验室的分析人员进行分析实验对申请者的分析方法进行评估，并确认其分析结果。
从验证的角度来看，所有的分析方法有着同样的重要性。一般来说，应当要应用已验证过的分析方法，而不论其是被用于过程控制，放行，合格或稳定性实验。高等每个定量分析方法时都应当要减少其分析误差。分析方法和验证资料应当摆在申请的分析方法和控制章节中提交。本指南的第III到IX章和XI章给出了所需提供资料方面的建议。向FDA实验室提供样品和递交NDA和ANDA中的分析方法验证资料的信息见第X章。
III分析方法的类型
A. 法定分析方法
法定分析方法是被用来评估原料药或制剂的特定性质的。USP/NF中的分析方法是法定的用于药典项目检测的分析方法。为了确认符合法规，需使用法定分析方法。
B. 替代分析方法
替代分析方法是申请者提出用于代替法定分析方法的分析方法。只有当一替代分析方法相当于或优于法定分析方法时，才可以应用验证过的替代分析方法。如果提交了替代分析方法，申请者还应当提供其理由，并标明其用途（如，放行，稳定性实验），验证资料及其与法定分析方法的对比资料。
C. 稳定性指示分析
稳定性指示分析是能检测出原料药或制剂的某些性质随着时间的延长而出现的变化的定量分析方法。
稳定性指示分析能不受降解产物，工艺杂质，赋形剂或其它潜在杂质的影响而准确测定其中的活性成分。
如果申请者递交了用于放行检测的非稳定性指示分析方法，则应当要有能定性和定量地监测杂质，包括降解产物，的分析方法对其进行补充。稳定性试验中所用的含量分析方法应当要有稳定性指示能力，除非有科学的理由能证明其合理性。
IV 标准品
A．标准品的类型
可以从USP/NF处或其它官方(比如说，CBER，21CFR 610.20)获得标准品(也就是一级对照品)。如果不能确定一标准品的来源是否会被FDA认为是官方来源，申请者应当要向适当的化学评审人员咨询。如果没有官方来源，则被用来作标准品的物质应当要有尽可能高的纯度，并得到充分界定。
工作对照品(也就是内部标准品或二级标准品)是根据一级对照品标定的，并用来代替一级对照品的。
B．分析报告单
对于非官方标准品，在申请的分析方法和控制章节中应当要提供该标准品的分析报告单。对于从官方获得的标准品，用户应当要确保标准品的适用性。应当正确储存标准品并在已确定的时间段内使用该标准品。
C．标准品的界定
从USP/NF及其它官方来源获得的标准品是不需要进一步界定的。非官方对照品要有尽可能高的纯度，并进行充分地界定以确保其结构，剂量，质量，纯度和效力。
用于界定标准品的定性和定量分析方法应当要不同于用于控制原料药或制剂的结构，剂量，质量，纯度和效力的分析方法，要比它们更深入。用于标准品界定的分析方法不应仅仅是和先前的指定标准品进行比较实验。一般来说，界定资料应当要包括：
标准品的简单工艺描述，如果其生产工艺是否于其相应的原料药的话。应当要叙述制备标准品时所用的补充精制过程。相关光谱图，色谱图，TLC照片及其它仪器输出的清晰复印件。建立纯度的资料。应当要应用适当的检测方法来获得这些资料，比如说TLC，GC，HPLC，相溶解分析，适当的热分析方法及其它必要的分析方法。适当的化学性质资料，比如结构式，经验式和分子量等。结构确证资料应当要包括适当的分析测试，比如元素分析，IR，UV,NMR 和MS，及适用的官能团分析。还应当要提供具体的结构解析资料。
物理性质的描述，包括颜色和物理形态。适当的物理常数，比如说熔程，沸程，折射率，离解常数(pK值)和旋光度。用于界定标准品的分析程序的详细叙述。
至于生物技术/生物产品的标准品，应当要考虑上述建议，可能可以应用。然而，其它确定物理化学性质，结构特性，生物活性和/或免疫化学活性的补充检测和/或其它检测将是非常重要的。
物理化学性质包括异构体，电泳和液相色谱行为及光谱性质等。结构界定可能包括氨基酸序列，氨基酸组成，缩氨酸图和碳水结构。确定生物和/或免疫化学活性的分析方法应当要和用来确定产品效力的分析方法一样。这些分析方法可以包括基于动物的，细胞培养的，生物化学的或配位体/接受体螯合的分析方法。如果这些检测需用于某些标准品的界定，生物和免疫化学检测的分析方法验证方面的特殊建议并不在本指南的范围之内。
V．IND中的分析方法验证
对于IND而言，每个阶段的研究都需要有足够的资料以确保合适的认定，质量，纯度，剂量和/或效力。所需的分析方法和方法验证方面的资料会随着研究的阶段变化而变化(21 CFR312.23(a)(7))。
关于在第1阶段研究所需提交的分析方法和方法验证资料方面的指南，发起人可以参考FDA 的指南：药品（包括结构确定的，有疗效的，生物技术产品）第1阶段研究的IND申请的内容和格式（1995年11月）。
第2和第3阶段研究所需提交的分析方法和方法验证资料方面的指南，发起人将可以参考FDA的指南：药品（包括结构确定的，有疗效的，生物技术产品）第1阶段研究的IND申请的CMC内容和格式（草案，1999年4月）。
在递交NDA，ANDA，BLA或PLA时，所有的分析方法都应当要开发出来，并得到验证。VI．NDA，ANDA，BLA和PLA中分析方法的内容和格式
NDA，ANDA，BLA和PLA中所提交的任一分析方法都应当要有详细的描述，以使合格的分析人员能重现出所需的实验条件并获得和申请者相当的实验结果。应当要叙述分析方法中需要特殊注意的地方。
如果所用的分析方法是USP/NF或其它FDA认可参考文献（如，<
分析方法描述中需要包括的典型内容如下所示：
A．基本方法
HPLC进行分离的，检测器为UV检测器。
B．取样
需要叙述的有：所选样品的数目（比如，瓶，片等），它们是如何使用的（也就是，单独的或是混合样品），每个样品分析的重复次数。
C．仪器和仪器参数
需要叙述的有：仪器列表（比如，仪器类型，检测器，柱子类型，尺寸等）和仪器参数（比如，流速，温度，运行时间和设定波长等）。如果必要的话，还要提供实验结构示意图（比如，阐述喷洒式分析方法的位置）。
D．试剂
需要叙述的有：试剂列表及其相应的规格（比如：USP/NF，美国化学社（ACS）分析试剂）。如果使用的是自制试剂或更改过的商业试剂，则应当要有其制备方法。对于不稳定的或有潜在危险的试剂，应标明其储存条件，安全使用说明和使用周期。
E．系统适应性实验
系统适应性实验参数和合格标准是建立基础是：仪器，电子元件，分析操作和待测样品是个不可分割的整体。系统适应性实验确保系统在样品分析的时候能很好地运行。在分析方法中应当要包括适当的系统适应性合格标准。所有的色谱分析方法都应当要有系统适应性实验及相应的合格标准。CDER评审官指南<<色谱分析方法的验证>>（1994年11月）对用于评估系统适应性的典型参数进行了定义和讨论。
建议系统适应性实验应成为所有分析方法的一部分，而不仅仅是色谱分析方法。无论是哪类分析方法，都要采用实验来证实该系统能不受环境条件的影响而正确地运行。比如说，滴定法一般来说需要进行空白实验。
F．标准品的制备
要有所有标准品溶液（比如，储备液，工作对照品溶液，内部对照品溶液）的配制方法。
G.操作过程
应当要按操作步骤对操作过程进行逐步叙述。叙述应当要适当包括如下信息：平衡时间，样品进样顺序和系统适应性或启动参数。需标明不常见的危险。
I．计算
应当要提供代表性计算公式，并要列表说明所有符号和数字系数，及计算降解产物和杂质的特殊使用说明。所有用于数据分析的数学转换或公式应详细描述。这些包括对数转换以获得指数数据的线性关系，或多元回归分析的使用。
J.结果报告
1．通则
应该规定关键计算步骤中的数字单位（例如，‘标签’标示量的百分比，W/W，W/L，ppm等）
2．杂质分析规程
在有关原料药和产品的杂质检测规程中，应当包括杂质的名称和检测位/标志（例如，保留时间RT，相对保留时间RRT），以及杂质的种类（比如工艺降解产物，赋形剂降解产物），如有可能，还应当指明检测限DL或定量限QL。也可以在原料药检测中设置DL和QL。
有机杂质的报告中，应当包括：1、有记载的已经过确认的杂质的名称；2、有记载但未经过确认杂质的（检测）位/标志；3、所有的没有记载的杂质，以及；4、总杂质。总有机杂质是指所有达到或超过其自身定量限度的杂质的总量。在这里可以参考FDA杂质指南文章中有关判定定量限度的内容（看后面的参考）。无机杂质和溶剂的残留，也应该被提到。对于产品以及原料药的工艺杂质也可以不包括在报告中，除非分析规程和控制环节中描叙了一个可以被接受的原则，那么，在产品制造和包装过程中（包括贴签）产生的杂质就要被提到。
并不是所有产品（比如，生物制剂、生物工艺制剂、植物制剂、放射制剂）的报告都必须严格按照以上谈到的内容来写，但是所有关键的工序以及产品相关的杂质都要有检测和报告。
VII．NDA，ANDA，BLA和PLA中的分析方法验证
A．非药典分析方法
在NDA，ANDA，BLA或PLA中，应当要递交资料以说明检测中所用的分析方法是满足适当的准确度和可靠性要求(21 CFR 211.194(a)92))。分析方法验证是个论述分析方法是适用于其拟定用途的过程。在递交资料，NDA，ANDA，BLA或PLA中应当要包含分析方法验证资料以支持分析方法的准确度。
ICH指导原则Q2A：分析方法验证（1995年3月）和Q2B：分析方法验证：方法学（1996年11月）给出了分析方法验证的建议。对于超出ICH指导原则范围的分析方法也是需要验证的。
1.验证项目
申请者应当要送交其所拟定分析方法的验证项目方面的信息（见ICH Q2A和ICH Q2B）。尽管不是对于所有类型的分析方法都需要进行所有的验证项目（见第VII.A.3章），但还是有典型的验证项目，如：
?Accuracy 准确度
?Precision (repeatability and intermediate precision) 精密度（重复性和中间精密度）
?Specificity 专属性
?Detection limit 检测限
?Quantitation limit 定量限
?Linearity 线性
?Range 范围
?Robustnes 耐用性
2.其它验证资料
分析方法验证资料还应当要包括：
说明所有分析制备样品在完成分析所需的时间内的稳定性的资料。
清晰可读的仪器代表性输出和记录资料（如色谱图）和原始资料输出（积分面积）。安慰剂，对照品和样品的仪器输出也都是需要提供的（见第VII.A.2.c章）。
代表性计算公式，以表明原料药中的杂质是如何计算的。(见VII.A.2.b章）。对于杂质分析方法，要标明杂质的名称和位置标识符（如，色谱中的相对保留时间RRT）。
对于原料药：
讨论可能会形成的异构体并讨论异构体的控制。
对每个有机杂质进行适当的标识和界定。不是所有的产品（如，植物药）都需要这些资料的。对于其它杂质（如无机杂质，残留溶剂），应当要进行说明并定量分析。
FDA的指导文件，如比ICH指导原则Q3A 新原料药中的杂质（1996年1月）。
已知杂质列表，包括工艺杂质，降解产物和可能的异构体。如果知道结构的话，也需提供。
对于制剂：
原料药在制剂中可能的降解途径。通过准确度实验论证的样品回收率资料。要有资料论证无论是新制的安慰剂还是分解了的安慰剂都不会影响活性成分的定量分析。ICH Q2A和ICH Q2B几乎对所有的验证参数都进行了论述。下面论述的是那些还需要更详细地进行论述的方面。
a.耐用性
ICH Q2A和ICH Q2B对耐用性是有论述的，它衡量的是分析方法在细微的变化下不受影响的能力。该实验应当是在分析方法开发过程中进行的，对实验结果进行讨论和/或递交。如果观察到有影响，需提供代表性仪器输出（如色谱图）。
b.强降解实验
FDA很多关于药品稳定性的指导原则都对强降解实验进行了论述。
在申请的稳定性一章中应当要提供的资料有：强降解实验设计和实验结果。而代表性仪器输出（如：色谱图）和/或其它资料（强降解实验中所得的降解信息）应当要提供在分析方法和控制一章中。
c.仪器输出/原始资料
i. 有机杂质
应当要提供代表性资料以支持有机杂质的评估。一般来说，是不需要残留溶剂的代表性资料的。仪器输出和原始数值（比如，峰面积）及合适的标记和标注（比如，色谱峰的保留时间，核磁共振的化学位移和耦合常数）都应当要提供。根据所提供的定量限和仪器输出对杂质情况进行评估。还应当要提供其它资料以确认杂质情况得到了充分地界定。比如说，比如说，代表性图谱选用的检测波长是205nm，则可以将拟定的运行时间延长至两倍以支持分析方法的专属性。
在定量分析时，原料药的响应因子可用于没有相应对照品的杂质。如果响应因子不接近的话，只要应用了较正因子或或者杂质实际上是被高估的话，这样做也是可行的。用于评估指定杂质或未指定杂质的合格标准和分析方法经常都是基于分析假设的（比如，相当的检测器响应）。应当要对这些假设进行讨论和合理性说明。
ii.原料药
ANDA和相关的递交，用于生物利用度研究的批次（biobatch）或者提交批次（submission batch）的相关资料应当要提供。所有的响应（比如，色谱峰）都应当要进行标注。所用的
分析方法应当要有能力区分先前批次和当前批次之间的变化，如果有这些变化的话。应当要说明定量限和有机杂质的类型（比如：降解物，工艺杂质）。还需提供分析方法编号，批号，生产日期和生产地点及分析日期。
iii.制剂
在制剂的分析方法和控制一章中，应要当提供的资料有：代表性批号在长期和加速稳定性实验条件下及强降解实验条件下的仪器输出（如，图谱）和原始资料（如峰面积）。对于ANDA 和相关递交，应当要提供生物利用度实验批次或递交批次的适当资料。在申请的稳定性章节中应当要引用原始资料（比如：图谱）。
至少，递交材料中应当要包括放行检测(Release testing)的仪器输出和原始资料. 需标注所有的响应信号（如色谱峰）。此外，还要提供，分析方法编号，制剂的批号，生产日期，分析日期，原料药的来源和批号，生产地点及容器/密闭系统信息。如在过往批次和现批次之间存在差异的话，所用的分析方法应当要有能力区分出来。应当要报告检测限和类型（如，降解物，包装时的漏出物）。
3.各类检测的推荐验证项目
表1概述了在不同分析方法的验证过程中所需要的验证项目。同一分析方法可用于多个用途。验证资料需要能支持该分析方法的拟定用途。比如说，如果拉曼光谱用于定量分析多晶型杂质，或手性HPLC用于分析异构体杂质，则要应用表1中杂质定量分析中所推荐的验证项目。然而，如果拉曼光谱或手性HPLC被用于鉴定或特征实验的话，则要应用表1中所推荐的这些类型的验证项目。
NOTE注：
- Signifies that this characteristic is not normally evaluated. 表示通常不需要验证的项目。+ Signifies that this characteristic is normally evaluated. 表示通常需验证的项目。
假如已经论证了重现性，可不需要再论证中间精密度。
如果一分析方法缺少专属性的话，则需要另一分析方法进行补偿。
3 有些情况下是需要的。
4. 有些情况下是不需要的。
5 缺少专属性数据时可用杂质测试的数据来补偿。
a. 鉴别
定性分析方法有：红外(IR)，差示热分析(DSC)，X-射线衍射(XRD)和HPLC保留时间。对于原料药，尽可能要有专属性强的鉴别实验，如果用的是专属性不强的定性分析方法，则通常来说运用两个独立的分析方法应当是足够的。对于其它的一些定性分析方法(如，手性HPLC的保留时间用于确认是否存在异构体，平衡离子的氯化物实验)，就一个检测也是可可行的。定性实验数目的概念既适用于原料药，也适用于制剂。
b. 杂质
表1中杂质定量分析项下所说的相应验证项目。如果同样的方法还用做定性检测的分析方法的话，则要对表1中杂质定性分析项下的验证项目进行验证。
c. 含量
含量分析包括活性成分的含量，所用到的防腐剂的含量，及溶出度和含量均匀度检测样品的含量测定。
d.特定实验
用于原料药，赋形剂或制剂控制的特定检测包括粒径分析，雾化状态，溶出度，旋光度和比如DSC，XRD及拉曼光谱等方法。不同的分析方法所需的验证项目是不尽相同的。比如说，对于凝胶渗透色谱(GPC)，需要考察其准确度，重复性，中间精密度和耐用性。
B．药典分析方法(21CFR 211.194(a)(2))。
在申请中应当要提供药典分析方法适用于该药品或原料药分析的论证资料。还应该要包括专属性，中间精密度，和样品溶液稳定性方面的资料。药典含量分析方法可能是没有稳定性指示能力的，因此在开发质量标准的过程中因当要考虑这个(见第III.C.章)。对于药典项目，可能需要补充方法，比如杂质或渗透度，来控制制剂或原料药的质量。这些补充方法也是需要验证的(见第VII.A.章)。
VIII. 统计分析
A．基本原则
(比如：线性回归分析，相对标准偏差)以说明方法的正确性。在开始分析方法验证之前，应当就要确定用于验证资料分析的统计方法。还应当要规定所要遵循的程序，包括所需采集的数据量和确定分析方法合适性的合格标准。
应当要在分析方法和控制章节中提供和讨论分析方法验证原始资料和所用的统计方法。所有用于数据分析的统计程序都应当是科学的，并适用于评估该数据群的。
B:对比研究
开展对比研究以评估中间精密度(如，不同设备，不同分析员，不同天等)。当一分析方法会在多个实验室应用时，或要比较和评估两个分析方法(比如，法定分析方法和替代分析方法)的精密度和准确度时，也会进行对比研究以评估实验室间的差异(也就是，重现性)。在进行对比研究时，应当要尽可能地使用同一批号的均匀样品。需对对比研究的结果进行统计分析和讨论，并对偏差进行解释。
C:统计
关于用于对比分析的统计技术资料，和用于分析数据处理和解析的其它基本资料，可参见相关的文献(见参考文献)。
IX．再验证
当发起人对分析方法，原料药(比如，合成路线)，或制剂(比如，组分)作了更改的话，则需要对分析方法进行重验证。进行重验证是为了确保该分析方法仍然保持其特性(比如，专属性)，并论证说明该分析方法仍然能确保原料药和制剂的同一性，浓度/剂量，质量，纯度和功效，及制剂的生物利用度。重验证的程序取决于该变更的性质。当使用了另一个法定分析程序的话(比如，用HPLC代替了滴定法)，则新的分析方法也需要验证(见第VII章)。
如果在每次使用时，都必须要对分析方法中所述的操作条件进行反复调整，才能使其符合系统适应性要求的话，则该分析方法需要适当进行重新评估，修正和重验证。
X．分析方法验证资料：内容和数据处理
FDA实验室的分析以论证说明某一分析方法是能被重现的。在这个过程中将会需要分析方法验证资料(见X.A)和样品(见X.B)。
A．分析方法验证资料
分析方法验证资料通常会包括申请中的相关章节。为了便于评审化学家进行评审，这些资料应当要和其在原来申请中一样，包括内容和形式(archival copy)和其它副本。对于仿制药申请和其相关的补充申请，需要提交一份分析方法验证资料的存档副本(archival copy)和另外两份副本。对于新药申请及其相关补充申请，需要提交一份分析方法验证资料的存档副本(archival copy)和另外三份副本。对于BLA和PLA，则不需要单独递交分析方法验证资料。类似的资料应当摆在BLA和PLA申请中。
分析方法验证资料应当要包括：
1．所需递交样品的列表清单
(化学名和结构式)，包装类型和大小，生产日期，样品量。
2．分析方法
FDA实验室分析人员根据这个描述进行操作。(见第VI章)
3．验证资料
(见第VII章)。
4．结果
应当要提供申请者对所提供样品所做分析的分析结果，或者提供其相应的分析报告单。需说明分析日期。
5．组分
需说明制剂的组分和组成。
6．质量标准
需提供原料药和制剂的质量标准。
7．安全数据表
申请者应当要提供所有样品，标准品和试剂的安全数据表(MSDS)(29CFR 1910.1200(g))。还要适当提供分析方法验证中所列各分析方法所有的其它物料的安全数据表(MSDS)。如果是毒性物料或危险性物料，则在外包装上要贴上MSDS，以便于安全处理。
B：样品的选择和运输
NDA或ANDA申请者必须要根据药品评审和研究中心(CDER)的要求递交制剂，原料药，非药典对照品和空白，以使FDA实验室可以评估申请者所用制剂和原料药分析方法的适用性。(21CFR 314.50(e) 和314.94(a)(10))。对于BLA和PLA，需提交产品的代表性样品，并提供所提交样品批次的检测结果。(21CFR601.2(a)和601.2(c)(1)(vi)).
对于CDER产品，FDA实验室会告诉申请者所需递交样品的量。一般来说，样品量应当是实验用量的两倍。除了递交原料药和制剂样品之外，申请者还应当要递交内部对照品，非美国药典对照品，杂质样品，降解物和非常用试剂。应当要向每个指定的实验室寄送一系列样品。
CBER咨询关于样品和支持资料的递交。
除非评审官另有说明，任一批次的样品，最好是较早批次，都可以用于新药申请及其补充申请。所递交的制剂样品必须是根据拟定的上市配方生产的。对于仿制药申请及其相关的补充，应当要提交用于支持申请批准的制剂批次的样品。如果样品是来自于一申请中未提及的批次的话，则在ANDA中还应当要补充一份批记录和分析报告单的复印件。对于不需要递交申
请和不需要审阅批记录及相关资料的补充，可递交任一商业批次的样品。对于生物制品，应当要提交连续几个生产批次的样品。应当要以其原包装提供制剂样品。而像原料药，杂质，赋形剂等，则应当要保存在不透明的惰性容器中。为了防止在运输过程中泄露，样品应当要装在耐用的容器中。如果是美国国外的样品，则应当要有适当的海关单据，以减少耽搁。
如果样品需要特殊的储存条件(比如，冷冻，惰性气体保护)，则要事先和验证实验室联系以安排直接递送。如果是毒性样品或危险性样品，则在容器的显著位置标明警示标志和预防措施。
C：各方职责
1.申请人
FDA可以向其发送提交样品的要求。如果没有提供这些信息的话，则会用NDA，ANDA，BLA或PLA申请中所写地址和联系人信息进行联系。
NDA或ANDA资料一起编写和递交。对于BLA和PLA，则不需要递交单独的分析方法验证资料。
一旦FDA实验室要求申请人提交样品的话，申请人应当要在10个工作日将样品提供给FDA 实验室。除了样品运送之外，所有关于在FDA实验室进行验证的交流工作都要当要让CDER 申请的化学评审官知道，如果是CBER申请，则要让BLA/PLA委员会主席知道。
2.化学评审官
化学评审官负责审核分析方法验证报告（包括鉴别，浓度/剂量，质量，纯度和功效。对申请进行评审后，如要对分析方法作必要修改的话，则需要重新递交分析方法验证资料。化学评审官会和相关的FDA实验室进行讨论，确定需要对哪个分析方法进行验证。化学评审官会将FDA实验室对所做研究的意见转给申请人。
3.FDA实验室
FDA实验室会和申请者联系，告知样品递交程序和注意事项及邮寄地址。FDA实验室会所递交的分析方法对样品进行检测，以确定该分析方法是否适用于质量控制，并符合法规要求。在完成研究之后，FDA实验室会将结果和意见转给化学评审官。
4.检查官
检查官会对进行放行检测和稳定性实验的分析实验室进行检查，以确保所做的分析检测能符合CGMP/GLP
XI．方法学
II章到第IX章提供了分析方法和分析方法验证资料方面的基本信息，包括验证项目。下文就一些具体的方法给出了说明：
A．高效液相色谱(HPLC)
HPLC分析方法的广泛应用及色谱柱和柱填充的众多来源都经常会给可比性评估带来很多
问题。如下这些要点中，很多都适用于其它色谱分析方法。
1.色谱柱
在定义某一色谱柱时，如下这些性质是很有用的，也应当要包括在分析方法描述中。如果分析方法开发表明只有某一商业来源的色谱柱是适用的，则在分析方法中应当要包括这些资料。如果有多种色谱柱都是适用的话，则应当要包括等效色谱柱列表。
a. Column Parameters 色谱柱参数
?Material: glass, stainless steel, plastic 材质：玻璃，不锈钢，塑料
?Dimensions: length, inner diameter 尺寸：长度，内径
?Frit size 熔封尺寸
?Filter type 过滤类型
?Precolumn and/or guard column type, if used 预柱和/或保护柱（如使用）
b. Packing Material 色谱柱填充物
?Particle type: size, shape, pore diameter 颗粒类型：尺寸，形状，孔径
?Surface modification (e.g., bonded surface type, surface coverage, percentcarbon, additional silylation) 表面修饰(如：键合表面类型，表面覆盖，碳比例，甲硅烷基化作用)
?Recommended pH range for column use 适用的柱pH范围
2.系统适应性研究
CDER的评审官指南：色谱方法的验证(1994年11月) 中对如下这些系统适应性实验进行了定义：
?Tailing factor 拖尾因子
?Relative retention 相对保留时间
?Resolution 分离度
?Relative standard deviation (RSD) 相对标准偏差
?Capacity factor 容量因子
?Number of theoretical plates 理论塔板数
一般来说，在仪器开始运行时，进行进样精密度实验，计算其相对标准偏差。然而，对于运行时间很长的分析，或申请者另有理由说明，则可以在运行的开始和结束时，或在运行的开始，中间和结束时进样，然后报告其平均值。
如果用到了内标物，则应当要标明内标物与活性成分(单个或多个)之间的分离度的最低可接受值。如果该分析方法是用于控制杂质水平的，则应当要说明活性成分和最邻近杂质组分，或每两相邻组分的分离度最小可接受值。
3.操作参数
应当要确定空白溶液，系统适应性实验用标准溶液，或其它标准溶液和样品溶液的进样顺序。应当要对流速，温度和梯度洗脱进行描述。
需详细说明流动相的配制，包括试剂的添加顺序，去气和过滤的方法。分析方法中应当要说明流动相组成的调整会对保留时间所产生的影响。如使用了预柱和/或保护住的话，则要进行说明并提供给出合理性解释。如有任何其它要求，如使用了惰性管(inert tubing)或进样阀(injection valve)，都应当要对此进行说明。
B．气相色谱(GC)
在GC分析方法描述中，至少要包括如下内容。如分析方法中用到了其它的一些参数，对此也应当要进行说明。如果分析方法开发表明只有某一商业来源的色谱柱是适用的，则在分析方法中应当要包括这些资料。如果有多种色谱柱都是适用的话，则应当要包括等效色谱柱列表。
1. Column 色谱柱
?Column dimensions: length, internal diameter, external diameter 色谱柱尺寸：柱长，内外径
?Stationary phase 固定相
?Column material (e.g., silica, glass, stainless steel) 柱填充料(比如：硅酸，玻璃，不锈钢)
?Column conditioning procedure 柱调节程序
2. Operating Parameters 操作参数
?Gases: purity, flow rate, pressure 载气：纯度，流速，压力
?Temperatures: column, injector, detector (including temperature program, if used) 温度：色谱柱，进样器，检测器(包括升温程序，如用到的话) ?Injection (e.g., split, splitless, on-column) 进样：(比如：分流，不分流，柱头进样(On-column injection)
?Detector 检测限
?Typical retention time and total run time 典型保留时间和总运行时间
3.系统适应性实验
在所有的分析方法中都应当要有适当的系统适应性要求。
如采用国内标准，则应满足内标和一个或多个组分的最小分离度要求。如果该分析方法是用于控制杂质水平的，则应当要说明活性成分和最邻近杂质组分，或每两相邻组分的分离度最小可接受值。
一般来说，在仪器开始运行时，进行进样精密度实验，计算其相对标准偏差。然而，对于运行时间很长的分析，或申请者另有理由说明，则可以在运行的开始和结束时，或在运行的开始，中间和结束时进样，然后报告其平均值。
C：分光光度法，光谱法和相关的物理方法
(IR)，近红外光谱(NIR)，紫外可见光谱(UV/Vis)，原子发射光谱/原子吸收光谱，核磁共振(NMR)，拉曼光谱，质谱(MS)和X-射线衍射(XRD)。
光谱分析方法可能没有稳定性指示能力。必要的话，可能通过与色谱方法的比较来评估光谱分析方法的偏差。如果用到了手动仪器的话，则分析方法描述中应当要有取样(sampling)和读数(reading)之间时间差的可接受标准。建议使用适当的系统适应性实验和/或校准实验。验证标准中应当要包括专属性(说明没有空白干扰)，线性，重复性，中间精密度和耐用性。
D：毛细管电泳(CE)
对于一个毛细管电泳分析方法，至少要指明下述参数。如分析方法需要的话，还要包括其它参数。若方法开发研究表明只有某一商业来源的毛细管是适用的话，则在分析方法描述中需包括该信息。如果有多种毛细管柱都是适用的，则要列表说明所有的等效毛细管柱。
1. Capillary 毛细管柱
?Capillary dimensions: length, length to detector, internal diameter, external diameter 毛细管尺寸：长度，至检测器长度，内径，外径
?Capillary material 毛细管材质
?Capillary internal coating (if any) 毛细管内部涂层(如果有的话)
2. Operating Parameters 操作参数
?Capillary preparation procedure: procedure to be followed before the first use, before the first run of the day, before each run (e.g., flush with 100 millimolar
sodium hydroxide, flush with running buffer) 毛细管制备过程：第一次使用前，第一次进样前，每次进样前（比如，用100mmol的氢氧化钠冲洗，或用电流缓冲液冲洗）
?Running buffer: composition, including a detailed preparation procedure with the order of addition of the components 电泳缓冲液：组成，包括详细的制备程序及各组分的添加次序。
?Injection: mode (e.g., electrokinetic, hydrodynamic), parameters (e.g.,voltage, pressure, time) 进样：形式（电动的，水力的），参数（比如，电压，压力，时
间等）
?Detector 检测器
?Typical migration time and total run time 典型的迁移时间和总运行时间
?Model of CE equipment used CE仪器型号
?Voltage (if constant voltage) 电压（如果是恒压的话）
?Current (if constant current) 电流（如果是恒流的话）
?Polarity (e.g., polarity of electrode by detector) 极性（比如，检测器电极的极性）3.系统适应性实验
每个分析方法都应当要有适当的系统适应性实验以确定该系统的关键参数。是否包括其它参数，这由申请者来决定。
如用到了内标物，则至少要指明内标物和一个或多个活性组分间分离度的最小可接受值。若该分析方法是用于控制杂质水平的话，则要说明活性组分的最接近流组分间的最小可接受分离度，或每两邻近组分间的最小可接受分离度。
E：旋光度
旋光度用于测定多糖类物质的纯度，通过单色光（钠光）的偏振，但事实上已扩展到使用任一波长的光源。
如不在钠光谱的波长测定的话，则要给出选择该波长的理由，并要对比在钠D和所选用波长下的旋光度。循环二色性图谱能达到这个目的。除了USP<781>中的规定之外，旋光度测定程序还应当要包括溶剂，浓度，及水溶液所要调节到的pH值。所用仪器和条件都要能适用于消旋物或光学异构体的结构确认。
光学异构体纯度可以用异构体过量(e.e.) 来表示，举例如下：
e.e. = 100% * {{M} - [m]}/{[M] + [m]}
式中：
药品微生物检验替代方法验证指导原则 本指导原则是为所采用的试验方法能否替代药典规定的方法用于药品微生物的检验提供指导。 随着微生物学的迅速发展，制药领域不断引入了一些新的微生物检验技术，大体可分为三类：（1)基于微生物生长信息的检验技术，如生物发光技术、电化学技术、比浊法等；(2)直接测定被测介质中活微生物的检验技术，如固相细胞技术法、流式细胞计数法等；（3)基于微生物细胞所含有特定组成成分的分析技术，如脂肪酸测定技术、核酸扩增技术、基因指纹分析技术等。这些方法与传统检查方法比较，或简便快速，或具有实时或近实时监控的潜力，使生产早期采取纠正措施及监控和指导优良生产成为可能，同时新技术的使用也促进了生产成本降低及检验水平的提高。 在控制药品微生物质量中，微生物实验室出于各种原因如成本、生产量、快速简便及提高药品质量等需要而采用非药典规定的检验方法（即替代方法）时，应进行替代方法的验证，确认其应用效果优于或等同于药典的方法。 微生物检验的类型及验证参数 药品微生物检验方法主要分两种类型：定性试验和定量试验。定性试验就是测定样品中是否存在活的微生物，如无菌检查及控制菌检査。定量试验就是测定样品中存在的微生物数量，如菌落计数试验。 由于生物试验的特殊性，如微生物检验方法中的抽样误差、稀释误差、操作误差、培养误差和计数误差都会对检验结果造成影响，因此，药品质量标准分析方法验证指导原则（附录XIX A)不完全适宜于微生物替代方法的验证。药品微生物检验替代方法的验证参数见表1。 表1 不同微生物检验类型验证参数 注： 尽管替代方法的验证参数与药品质量标准分析方法验证参数有相似之处，但是其具体的内容是依据微生物检验特点而设立的。替代方法验证的实验结果需进行统计分析，当替代方法属于定性检验时，一般采用非参数的统计技术；当替代方法属于定量检验时，需要采用参数统计技术。 进行微生物替代方法的验证时，若替代方法只是针对药典方法中的某一环节进行技术修改，此时，需要验证的对象仅是该项替代技术而不是整个检验方法。如无菌试验若改为使用含培养基的过滤器，然后通过适宜的技术确认活的微生物存在，那么，验证时仅需验证所用的微生物回收系统而不是整个无菌试验方法。 替代方法验证的一般要求 在开展替代方法对样品检验的适用性验证前，有必要对替代方法有一个全面的了解。首先，所选用的替代方法应具备必要的方法适用性证据，表明在不含样品的情况下，替代方法
1．目的：新产品研制成功后，通过生产证实新工艺的可靠性和重视性，并通过工艺验证以确定起始原料及成品的纯度，均一性，可靠性，为新药大规模生产提供依据。 2．范围：新产品、新技术。 3．职责：质量部、工程部、生产部、采供部、验证小组负责人、验证小组成员。 4．内容： 4.1公司只对获得新药证书和生产批准文号的新产品或者引进的新技术产品进行工艺验证。并对质量分析方法进行验证。 4.2新产品及新技术必须经生产车间中试，对产品工艺进行预验证合格后才能进行产品的工艺验证。 4.3新产品工艺验证步骤： 4.3.1依据国家药品监督管理局批准认可的质量标准，对其中“制法”部分进行审批，并起草工艺操作规程。
4.3.2依据工艺规程中工艺流程选择先进合格的制药设备。 4.3.3必要时可对工艺生产用设备的运行参数进行更改修正，以满足工艺要求的需要。 4.3.4对已确定的设备安装到位后，可编制设备验证方案，对设备进行预确认，安装确认，运行确认，性能确认，撰写验证报告，经QA经理审批通过，方可开始工艺验证。 4.3.5编制工艺验证方案（参照验证编制管理规程）经QA审核；验证委员会批准，验证办公室组织验证小组实施。 4.3.6进行工艺验证的人员必须是各部门有技术资质的人员胜任，并经过严格技术培训才可上岗。 4.3.7验证工艺经过三次试生产获得成功后，即可进一步完善工艺规程及标准操作规程（SOP）。 4.3.8验证工艺经过三次试生产，对不能达到原质量标准要求时，查明原因后即可更换设备，修正工艺规程或更换不称职的操作人员，直到完成验证工艺工作。 4.4 QA验证合格后，验证办公室即可发放验证合格证书。 4.5经验证符合可知的工艺规程通过公司所有技术人员认可，技术交底后，可进行正式生产。验证状态维持6-12个月后进行回顾性验证，以确定生产工艺的稳定性。 4.6验证工艺结束，验证工艺全部资料都应登记归档。
一. 方法建立的步骤 二．开始前应知道 1. 样品的性质 在开始方法建立之前，我们应该检查自己对样品的了解程度，并明确分离目标。 表 1 有关样品组分和性质的重要信息 所含化合物的数目 化合物的化学结构（官能团） 化合物的分子量 化合物的pKa值 化合物的UV光谱图 化合物在样品中的浓度范围 样品的溶解度 样品的化学成分能够为选择HPLC分离的最佳初始条件提供有价值的线索根据已知的样品信息，HPLC方法建立有两种不甚相同的模式。一种模式依据样品的“化学性质”选择最佳初始条件，色谱工作者需很大程度依赖于过去的经验（如类似结构化合物的分离）和/或用文献资料补充现有信息而另一种模式则直接开始色谱分离，而对样品的性质不大注意这两种HPLC的方法建立模式可分别称为理沦型与经验型初始分离一旦开始，可以根据类似的思路（理论的与经验的）选择进一步的实验。 2.分离的目的 HPLC分离的目的必须十分明确，下面的问题在建立方法之初就应确定：（1）主要目的是什么？定量或定性，还是定性、定量同时做？； （2）是否有必要解析出样品的所有成分？譬如可能有必要分离出产品中的所有降解物或杂质，以使含量测定结果更加可靠，但却没必要将它们彼此完全分开。（3）如要求定量分析，准确度与精密度需多大？样品主要成分的精密度通常能达到±1—2%，特别是不需样品预处理的情况。 （4）特殊化合物可能会以不同的样品形式出现（如：原料药，一种或多种形态，环保样品等）。是否需要一种以上的HPLC方法？单一方法分离不同形态样品是否理想？ （5）一次将分析多少样品？当必须同时处理大量样品时，运行时间将变得非常重要。 有时甚至为了缩短运行时间而以牺牲样品分离度作代价，如缩短柱长或加快流速。当一次分析的样品数目超过10个，运行时间一般应控制在20min以内。（6）将要使用该方法的实验室中，有哪些HPLC设备？色谱柱能否恒温系统能否做梯度洗脱？该方法是否可在不同设计与生产的设备上运行？ 方法建立实验开始之前，应明确对方法的这些要求。 三. 样品的预处理和检测 1. 预处理：样品来源形式不同，可能以如下形式出现：
无菌工艺模拟试验指南（无菌制剂） （征求意见稿） 国家食品药品监督管理总局 食品药品审核查验中心
二〇一六年十月 目录 1.目的 (1) 2.定义 (1) 3.范围 (1) 4.原则 (2) 5.无菌制剂生产工艺及模拟范围 (2) 6.模拟试验方案的设计及实施过程要求 (3) 6.1. 无菌工艺模拟试验的前提条件 (3) 6.2.基于风险的方案设计 (4) 6.3.模拟介质的选择与评价 (4) 6.4.灌装数量及模拟持续时间 (8) 6.5.容器装量 (9) 6.6. 模拟试验方法的选择 (9) 6.7. 最差条件的选择 (10) 6.8.干预 (12) 6.9.容器规格 (13) 6.10.培养与观察 (14) 6.11. 计数与数量平衡 (15) 6.12. 环境（包括人员）监控 (15) 6.13. 人员因素 (16) 6.14. 不同剂型应考虑的特殊因素 (16) 6.15. 方案的实施 (19) 7.可接受标准与结果评价 (20)
8.污染调查及纠正措施 (21) 9.模拟试验的周期与再验证 (21) 10.无菌工艺模拟试验的局限性 (212) 11.术语 (23) 12. 参考文献 (24)
无菌工艺模拟试验指南（无菌制剂） 1.目的 为指导和规范无菌制剂生产企业开展无菌工艺模拟试验，充分评价无菌制剂产品生产过程的无菌保障水平，确保无菌制剂的安全性，依据《药品生产质量管理规范》（2010版）及附录，制定本指南。 2.定义 本指南所述的无菌工艺模拟试验，是指采用适当的培养基或其他介质，模拟制剂生产中无菌操作的全过程，评价该工艺无菌保障水平的一系列活动。 3.范围 3.1.本指南涵盖了无菌工艺模拟试验的基本要求、不同工艺模式的相应要求、试验的基本流程等内容，适用于无菌制剂的无菌工艺验证。 3.2.本指南所述条款是在现有无菌工艺技术基础上提出的相 关要求，旨在规范企业开展无菌工艺模拟试验活动。在科学的基础上，鼓励新技术、新设备的引入，进一步提高无菌制剂的无菌保障水平。 4.原则 在对无菌生产工艺充分认知和生产经验累积的基础上，应结合工艺、设备、人员和环境等要素定期开展无菌工艺模拟试验，
工艺验证管理规程 一、目的：制定工艺验证制度，使工艺验证过程程序化、规范化。 二、适用范围：适用于公司制剂工艺验证的实施。 三、职责： 生产管理部：负责新工艺及工艺验证方案的起草。 生产车间：负责工艺验证方案的组织实施。 验证办公室：负责组织与协调验证的日常工作。 质量保证部QC：负责验证方案中检验方法的审核，准确及时完成相关的检验任务，作好记录，并对检验结果的准确性负责。 质量保证部长：负责验证方案及报告的审核。 验证负责人：负责验证方案及报告的批准。 四、内容： 4.1目的 通过工艺验证的有效实施，证实某一工艺过程确实能始终如一地生产出符合预定规格及质量标准的产品。为工艺规程的修订提供依据。 4.2验证小组成员： 生产技术部部长、车间主任、质量保证部部长、QA质监员、QC主管、QC质检员。 4.3验证的前提条件： 4.3.1检验方法及仪器已经验证 4.3.2设备及公用工程系统已经验证 4.3.3已起草工艺规程 4.3.4新产品、新工艺的验证，应至少完成一个批号的试生产，在试生产过程中没有出现过数据“漂移”现象。
4.4验证步骤 4.4.1制订验证计划 4.4.1.1由验证办公室起草验证计划。 4.4.2准备验证方案 4.4.2.1验证方案的内容原则上包括： ·概述：简要说明验证产品信息，如处方、工艺规程、生产历史等，同时应说明验证目的及验证方法。 ·产品涉及的生产质量管理文件 ·工艺流程图 ·主要原、辅料：包括主要原、辅料名称、规格、生产厂家及质量标准。 ·主要生产设备：包括设备名称、规格型号、生产厂家。 ·日常生产控制：依据工艺规程说明在正常生产过程中例行的控制。 ·验证内容确定：说明验证的内容，验证条件的设计（允许的最差条件）及确认的依据及原因。 4.4.3验证方法： 4.4.3.1验证项目：依据产品不同和工艺方法不同制定不同的验证项目及验证参数。 4.4.3.2目的：说明各项验证的目的。 4.4.3.3取样：详细说明验证过程中的取样方法、取样数量及样品名、必要是以图示表示，以便操作人员实施。 4.4.3.4检验方法：详细说明检验方法，必要时说明检验依据。 4.4.3.5接受标准：接受标准一般可采用两种方法确定： ·如果验证项目在日常生产工艺过程中有控制，并有标准，即以此标准为接受标准。 ·如果验证项目在日常生产过程中无控制标准，接受标准由生产车间依据经验及工艺过程要求自己确定，但必须合适。 4.5验证实施： 工艺验证过程依据已经批准的验证方案早先，原则上须在工艺过程、工艺参数等不变的条件下工艺验证连续进行三批欠。如果验证过程中出现偏差，执行《偏差处理制度》，由验证小组决定是否有效及是否需要增加验证批次等。 4.6验证报告：
I. INTRODUCTION This guidance provides recommendations to applicants on submitting analytical procedures, validation data, and samples to support the documentation of the identity, strength, quality, purity, and potency of drug substances and drug products. 1. 绪论 本指南旨在为申请者提供建议，以帮助其提交分析方法，方法验证资料和样品用于支持原料药和制剂的认定，剂量，质量，纯度和效力方面的文件。 This guidance is intended to assist applicants in assembling information, submitting samples, and presenting data to support analytical methodologies. The recommendations apply to drug substances and drug products covered in new drug applications (NDAs), abbreviated new drug applications (ANDAs), biologics license applications (BLAs), product license applications (PLAs), and supplements to these applications. 本指南旨在帮助申请者收集资料，递交样品并资料以支持分析方法。这些建议适用于NDA，ANDA，BLA，PLA及其它们的补充中所涉及的原料药和制剂。 The principles also apply to drug substances and drug products covered in Type II drug master files (DMFs). If a different approach is chosen, the applicant is encouraged to discuss the matter in advance with the center with product jurisdiction to prevent the expenditure of resources on preparing a submission that may later be determined to be unacceptable. 这些原则同样适用于二类DMF所涉及的原料药和制剂。如果使用了其它方法，鼓励申请者事先和FDA药品评审中心的官员进行讨论，以免出现这种情况，那就是花了人力物力所准备起来的递交资料后来发现是不可用的。 The principles of methods validation described in this guidance apply to all types of analytical procedures. However, the specific recommendations in this guidance may not be applicable to certain unique analytical procedures for products such as biological, biotechnological, botanical, or radiopharmaceutical drugs. 本指南中所述的分析方法验证的原则适用于各种类型的分析方法。但是，本指南中特定的建议可能不适用于有些产品所用的特殊分析方法，如生物药，生物技术药，植物药或放射性药物等。 For example, many bioassays are based on animal challenge models, 39 immunogenicity assessments, or other immunoassays that have unique features that should be considered when submitting analytical procedure and methods validation information. 比如说，许多生物分析是建立在动物挑战模式，免疫原性评估或其它有着独特特性的免疫分析基础上的，在递交分析方法和分析方法验证资料时需考虑这些独特的性质。Furthermore, specific recommendations for biological and immunochemical tests that may be necessary for characterization and quality control of many drug substances and drug products are beyond the scope of this guidance document. 而且，许多原料药和制剂的界定和质量控制所需的生物和免疫化学检测并不在本指南的范围之内。 Although this guidance does not specifically address the submission of analytical procedures and validation data for raw materials, intermediates, excipients, container closure components, and other materials used in the production of drug
工艺验证评审办法 1．主题内容与适用范围 1．1 本标准规定了工艺验证评审程序、评审内容及标准。 1．2 适用范围 本标准适用于在生产准备完成后所进行的工艺验证评审管理。 2．工艺验证评审程序 2．1 由技术部牵头，组织公司有关部门及人员进行评审 2．2 对评审不合格内容，组织人员立即整改，整改完成后，再次组织评审。所有评审项评审合格后，方可转入正常生产。 3．工艺验证评审的主要内容 3.1 工艺设计 工艺设计应经过工艺设计质量评审，且有相关记录。 3.2 产品工艺质量 3.2.1 产品经工艺调试，应符合产品图样要求及相关的技术标准。 3.2.2 调试的合格样件应经过全面的检测。且检测合格并保留有相关检测记录。 3．3 工艺文件的验收 3.3.1 工艺文件应正确、完整、统一、清晰。其编制、审批、更改等符合公司相关的文件管理规定。3.3.2 工艺文件内容完整，工艺参数及工艺方法明确。且经过调试后验证正确。 3.3.3 工艺文件经调试验证需进行修改的已修改完毕并已按规定下发。 3.3.4 现场工艺文件为现行有效版本，操作者易于得到。 3．4 设备与工艺装备的要求 3．4．1 工艺规定的设备与工装应配齐。
3．4．2 工艺规定的量具、检具等检测器具应配齐，且所有的检测器具均经过检测，为合格检测器具。3．4．3 设备与工装型号、规格符合工艺提出的要求，更改部分经过工艺认可。 3．4．4 设备与工装经过调试验证，其精度与技术状态能满足生产合格零件的需要。 3．4．5 设备与工装按工艺规定的节拍调试验证后，其生产能力能满足预定的生产纲领要求，且安全措施可靠。 3.5 对操作者要求 3．5．1 基本知识要求 ①必须经过岗位培训，并考核合格，获得上岗许可证，确保达到工序对操作者的技术要求。 ②熟记本岗位零件号、零件名称、设备工装技术参数等工艺内容，掌握相关工艺要求、操作要点、检测方法等。能清楚叙述工艺文件内容及质量要求 3．5．2 基本技能要求 ①能按照工艺文件要求进行生产操作，严格过程控制的有关要求，坚持按图纸、按工艺、按 标准生产。 ②能对设备进行维护、保养 ③能使用检具进行质量特性自检 ④能对工艺参数进行调整和监控 ⑤能使用各类管理工具，包括各种记录和自检标识 3．6 对材料、半成品、制成品的工艺要求 3．6．1 各种规格的原材料、辅料要符合工艺规定。 3．6．2 所使用原材料、半成品均经过检验，为合格品。 3．6．2 材料、半成品、制成品均应按规定摆放，标识正确、清楚，且有专门的工位器具及运输器具进行存放与转运。 3.7 对环境的要求 3.7.1 现场干静，整洁，符合产品特性要求 3.7.2 工作现场实行定置管理，物流合理、通畅
201507 FDA行业指南：分析方法验证（中英文）（下） VII. STATISTICAL ANALYSIS AND MODELS 统计学分析和模型 A. Statistics 统计学 Statistical analysis of validation data can be used to evaluate validation characteristics against predetermined acceptance criteria. All statistical procedures and parameters used in the analysis of the data should be based on sound principles and appropriate for the intended evaluation. Several statistical methods are useful for assessing validation characteristics, for example, an analysis of variance (ANOVA) to assess regression analysis R (correlation coefficient) and R squared (coefficient of determination) or linear regression to measure linearity. Many statistical methods used for assessing validation characteristics rely on population normality, and it is important to determine whether or not to reject this assumption. There are many techniques, such as histograms, normality tests, and probability plots that can be used to evaluate the observed distribution. It may be appropriate to transform the data to better fit the normal distribution or apply distribution-free (nonparametric) approaches when the observed data are
一、准确度 准确度系指采用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度，一般用回收率（％)表示。准确度应在规定的范围内测定。 1.化学药含量测定方法的准确度 原料药采用对照品进行测定，或用本法所得结果与已知准确度的另一个方法测定的结果进行比较。制剂可在处方量空白辅料中，加入已知量被测物对照品进行测定。如不能得到制剂辅料的全部组分，可向待测制剂中加人已知量的被测物对照品进行测定，或用所建立方法的测定结果与已知准确度的另一种方法测定结果进行比较。准确度也可由所测定的精密度、线性和专属性推算出来。 2.化学药杂质定量测定的准确度 可向原料药或制剂处方量空白辅料中加人已知量杂质进行测定。如不能得到杂质或降解产物对照品，可用所建立方法测定的结果与另一成熟的方法进行比较，如药典标准方法或经过验证的方法。在不能测得杂质或降解产物的校正因子或不能测得对主成分的相对校正因子的情况下，可用不加校正因子的主成分自身对照法计算杂质含量。应明确表明单个杂质和杂质总量相当于主成分的重量比（％) 或面积比（％ )。 3.中药化学成分测定方法的准确度 可用对照品进行加样回收率测定，即向已知被测成分含量的供试品中再精密加人一定量的被测成分对照品，依法测定。用实测值与供试品中含有量之差，除以加入对照品量计算回收率。在加样回收试验中须注意对照品的加人量与供试品中被测成分含有量之和必须在标准曲线线性范围之内；加入对照品的量要适当，过小则引起较大的相对误差，过大则干扰成分相对减少，真实性差。 回收率：％= (C - A ) /S X 100% 式中：A为供试品所含被测成分量；B 为加入对照品量； C 为实测值。 4.校正因子的准确度 对色谱方法而言，绝对（或定量）校正因子是指单位面积的色谱峰代表的待测物质的量。待测定物质与所选定的参照物质的绝对校正因子之比，即为相对校正因子。相对校正因子计算法常应用于化学药有关物质的测定、中药材及其复方制剂中多指标成分的测定。校正因子的表示方法很多，本指导原则中的校正因
验证文件 XXXXXX有限公司 2013年XX月6.验证报告起草、审核与批准 6.1验证报告起草 6.2 再验证报告审核 6.3 再验证报告批准
目录 1. 验证概述 2. 验证目的 3. 验证范围 4. 再验证依据标准 5. 机构与职责 5.1 验证机构 5.2 验证职责 6. 验证方式 7. 验证准备 7.1 设备设施准备7.2 仪器试剂准备
7.3 原辅物料准备 7.4 文件与培训 8. 验证时间与计划 9. 验证实施 9.1 产品的工艺流程图9.2产品的工艺验证： 9.2.1称量备料 9.2.1.1目的 9.2.1.2文件 9.2.1.3检查项目及结果9.2.2 配制 9.2.2.1 目的
9.2.2.2 文件 9.2.2.3 评估项目 9.2.2.4 评估方法 9.2.2.5 取样方法 9.2.2.6配制试验数据 9.2.3 灌装封尾 9.2.3.1 目的 9.2.3.2文件 9.2.3.3评估项目 9.2.3.4评估方法 9.2.3.5灌装封尾检查数据9.2.4 成品抽样检验
9.2.4.1 目的 9.2.4.2 文件 9.2.4.3 评估项目 9.2.4.4 评估方法 9.2.4.5产品检验报告复印件 10. 偏差与处理. 11. 结果与分析 11.1 验证数据汇总 11.2 存在问题与措施 11.3 风险与预防 12. 验证结论 12.1 验证结论
12.2 验证评价与建议 13. 验证周期 14. 附件 15.参考或引用文件 1.概述： 复方醋酸地塞米松乳膏为我司生产多年的乳膏剂品种，自2009GMP再认证以来，乳膏剂生产线生产所用关键设备、生产工艺及工艺参数没有改变，为了验证在正常的生产条件和GMP文件管理体系下能生产出符合预定的规格及质量标准的产品，根据验证管理文件的要求，我们对复方醋酸地塞米松乳膏的生产工艺进行再验证。 2.目的： 在现行的GMP文件管理体系下，生产三批复方醋酸地塞米松乳膏进行工艺再验证: （1）确认关键工序质量监控点是否符合质量要求； （2）确认该产品质量是否符合预定成品的标准。
工艺验证规程 1 适用范围 本标准适用于本公司所有产品工艺验证。 2 工艺验证的目的 通过工艺验证的有效实施，考察某一工艺过程是否能始终如一地生产出符合预定规格及质 量标准的产品。为工艺规程定稿提供依据。 3 职责 生产车间:负责工艺验证方案的起草及验证的组织实施。 综合部:负责协助新工艺验证方案的起草。 QA现场监控员:协助验证方案的组织实施。 质量部QC:负责按计划完成工艺验证方案中相关检验任务，确保检验结论正确可靠。 QA验证管理员:负责验证工作的管理，协助工艺验证方案的起草，组织协调验证工作， 并总结验证结果，起草验证报告。 质量部经理:负责工艺验证方案及报告的审核。 质量总监:负责工艺验证方案及报告的批准。 4 内容 4.1 验证小组成员 综合部工艺研究人员、生产部技术人员、QC主管、QC检验员、生产部技术管理人员、 QA验证管理员。
4.2 验证步骤 4.2.1 制订验证计划 4.2.1.1 由验证小组成员(通常是验证管理员)首先起草该项目的验证总计划，然后将 验证总计划交给验证小组讨论和审批后分发至各责任部门。 4.2.1.2 验证总计划包括: , 简介:简要说明验证对象信息、验证目的和拟采用的验证方法。 , 验证小组成员。 , 验证工作日程安排表(包括各验证项目的实施部门、责任人、实施日期及完成日期)。 4.2.2 准备验证方案: 4.2.2.1 验证方案的内容原则上包括: ——适用范围 , 概述:简要说明验证产品信息，如处方、工艺规程、生产历史等，同时说明验证目 的及验证方法。 , 产品及生产质量管理文件。 , 工艺流程图:依据工艺规程绘制简要工艺流程图，为制定验证内容提供依据。 , 主要原材料:包括主要原材料名称、规格、生产厂家及质量标准。 , 主要生产设备:包括设备名称、规格型号、生产厂家。 , 日常生产控制:依据工艺规程说明在正常生产过程中例行的控制。 , 验证内容确定:说明验证的内容，验证条件的设计(模拟实际生产状态和允许的最差条件)及确认的依据及原因。 4.2.2.2 验证方法:
美国FDA分析方法验证指南中英文对照 美国FDA分析方法验证指南中英文对 照 I. INTRODUCTION This guidance provides recommendations to applicants on submitting analytical procedures, validation data, and samples to support the documentation of the identity, strength, quality, purity, and potency of drug substances and drug products. 1. 绪论 本指南旨在为申请者提供建议，以帮助其提交分析方法，方法验证资料和样品用 于支持原料药和制剂的认定，剂量，质量，纯度和效力方面的文件。 This guidance is intended to assist applicants in assembling information, submitting samples, and presenting data to support analytical methodologies. The recommendations apply to drug substances and drug products covered in new drug applications (NDAs), abbreviated new drug applications (ANDAs), biologics license applications (BLAs), product license applications (PLAs), and supplements to these applications. 本指南旨在帮助申请者收集资料，递交样品并资料以支持分析方法。这些建议适 用于NDA，ANDA，BLA，PLA及其它们的补充中所涉及的原料药和制剂。 The principles also apply to drug substances and drug products covered in Type II drug master files (DMFs). If a different approach is chosen, the applicant is encouraged to discuss the matter in advance with
9012 生物样品定量分析方法验证指导原则
1. 范围
准确测定生物基质（如全血、血清、血浆、尿）中的药物浓度，对于药物和 制剂研发非常重要。这些数据可被用于支持药品的安全性和有效性，或根据毒动 学、药动学和生物等效性试验的结果做出关键性决定。因此，必须完整地验证和 记录应用的生物分析方法，以获得可靠的结果。
本指导原则提供生物分析方法验证的要求，也涉及非临床或临床试验样品实 际分析的基本要求，以及何时可以使用部分验证或交叉验证，来替代完整验证。
生物样品定量分析方法验证和试验样品分析应符合本指导原则的技术要求。 应该在相应的生物样品分析中遵守 GLP 原则或 GCP 原则。
2. 生物分析方法验证
2.1 分析方法的完整验证
分析方法验证的主要目的是，证明特定方法对于测定在某种生物基质中分析 物浓度的可靠性。此外，方法验证应采用与试验样品相同的抗凝剂。一般应对每 个物种和每种基质进行完整验证。当难于获得相同的基质时，可以采用适当基质 替代，但要说明理由。
一个生物分析方法的主要特征包括：选择性、定量下限、响应函数和校正范 围（标准曲线性能）、准确度、精密度、基质效应、分析物在生物基质以及溶液 中储存和处理全过程中的稳定性。
有时可能需要测定多个分析物。这可能涉及两种不同的药物，也可能涉及一 个母体药物及其代谢物，或一个药物的对映体或异构体。在这些情况下，验证和 分析的原则适用于所有涉及的分析物。
对照标准物质 在方法验证中，含有分析物对照标准物质的溶液将被加入到空白生物基质 中。此外，色谱方法通常使用适当的内标。 应该从可追溯的来源获得对照标准物质。应该科学论证对照标准物质的适用 性。分析证书应该确认对照标准物质的纯度，并提供储存条件、失效日期和批号。 对于内标，只要能证明其适用性即可，例如显示该物质本身或其相关的任何杂质 不产生干扰。 当在生物分析方法中使用质谱检测时，推荐尽可能使用稳定同位素标记的内 标。它们必须具有足够高的同位素纯度，并且不发生同位素交换反应，以避免结 果的偏差。
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l目的 规范新工艺和更改后的工艺对生产及产品质量的适应性、可靠性、稳定性 进行验证的步骤、方法、内容。 2范围 适用于本公司新工艺的实施以及工艺的变更、工艺条件变化时的工艺再验证。 3责任 技术部负责组织、监督本制度的实施。 4内容 4.1工艺验证的步骤 4.1.1 有质量监控部门、计量部门、设备部门的验证结果，即质量控制有效、计量准确可行、设备运行良好并达到设计或其它要求的书面报告。 4.1.2 根据工艺验证的内容，成立由相关人员组成的工艺验证小组，明确组长及成员。4.1.3 组长应由有丰富工艺验证经验、熟悉GMP及生产工艺的有关负责人担任，负责起草该工艺的验证方案。 4.1.4 工艺验证方案经公司验证总负责人批准实施。 4.2 工艺验证的方法、内容 4.2.1 根据需验证的目的，明确验证方法、内容。 第 2 页/共 2 页 4.2.2 要明确验证工作的具体验证人。 4.2.3 确定数据收集方法及验证记录表。 4.2.5 用已经验证的质量控制方法来评估验证的产品或试验品质量。 4.2.6 同一验证应不少于3次，结果应有较好的重现性。 4.3 验证报告
4.3.1 由工艺验证小组指定成员对工艺验证数据进行整理、起草工艺验证报告。 4.3.2 由组长作出工艺验证的结论报告。 4.4 再验证的条件 4.4.1 更改工艺、主要原材料变化、设备变动、控制方式改变、设备大修等均应进行工艺再验证。 4.4.2 经验证后虽无任何变化，但正常生产两年后（关键岗位一年后）也应进行工艺再验证。 4.4.3 法规要求改变，应进行工艺再验证。 4.5 验证报告的保存方式、保存期限。 工艺验证过程中所取得数据分析内容、验证方案等均由工艺验证小组负责整理成册，与验证报告一起交技术部存档，永久保存。
灭菌/无菌工艺验证指导原则（第二稿） 目录 1概述 (2) 2制剂湿热灭菌工艺 (3) 2.1湿热灭菌工艺的研究 (3) 2.1.1 湿热灭菌工艺的确定依据 (3) 2.1.2过度杀灭法的工艺研究 (5) 2.1.3残存概率法的工艺研究 (5) 2.2湿热灭菌工艺的验证 (7) 2.2.1物理确认 (7) 2.2.2 生物学确认 (9) 3制剂无菌生产工艺 (10) 3.1无菌生产工艺的研究 (10) 3.1.1无菌分装生产工艺的研究 (10) 3.1.2 过滤除菌生产工艺的研究 (11) 3.2 无菌生产工艺的验证 (12) 3.2.1培养基模拟灌装试验 (12) 3.2.2 除菌过滤系统的验证 (14) 4原料药无菌生产工艺 (17) 4.1 无菌原料药生产工艺特点 (18) 4.1.1 溶媒结晶工艺 (18) 4.1.2 冷冻干燥工艺 (19) 4.2 无菌原料药工艺验证 (19) 4.2.1 验证批量 (19) 4.2.2 最差条件 (19)
1概述 无菌药品是指法定药品标准中列有无菌检查项目的制剂和原料药，一般包括注射剂、无菌原料药及滴眼剂等。从严格意义上讲，无菌药品应完全不含有任何活的微生物，但由于目前检验手段的局限性，绝对无菌的概念不能适用于对整批产品的无菌性评价，因此目前所使用的“无菌”概念，是概率意义上的“无菌”。一批药品的无菌特性只能通过该批药品中活微生物存在的概率低至某个可接受的水平，即无菌保证水平（Sterility Assurance Level, SAL）来表征。而这种概率意义上的无菌保证取决于合理且经过验证的灭菌工艺过程、良好的无菌保证体系以及生产过程中严格的GMP管理。 无菌药品通常的灭菌方式可分为：1）湿热灭菌；2）干热灭菌；3）辐射灭菌；4）气体灭菌；5）除菌过滤。按工艺的不同分为最终灭菌工艺（sterilizing process）和无菌生产工艺（aseptic processing）。其中最终灭菌工艺系指将完成最终密封的产品进行适当灭菌的工艺，由此生产的无菌制剂称为最终灭菌无菌药品，湿热灭菌和辐射灭菌均属于此范畴。无菌生产工艺系指在无菌环境条件下，通过无菌操作来生产无菌药品的方法，除菌过滤和无菌生产均属于无菌生产工艺。部分或全部工序采用无菌生产工艺的药品称为非最终灭菌无菌药品。基于无菌药品灭菌/除菌生产工艺的现状，本指导原则主要对在注射剂与无菌原料药的生产中比较常用的湿热灭菌与无菌生产工艺进行讨论。本指导原则中的湿热灭菌工艺验证主要包括灭菌条件的筛选和研究，湿热灭菌的物理确认，生物指示剂确认等内容；无菌生产工艺验证主要包括无菌分装、除菌过滤、培养基模拟灌装、过滤系统的验证等验证内容。 最终灭菌工艺和无菌生产工艺实现产品无菌的方法有本质上的差异，从而决定了由这两类工艺生产的产品应该达到的最低无菌保证水平的巨大差异。最终灭菌无菌产品的无菌保证水平为残存微生物污染概率≤10-6，非最终灭菌无菌产品的无菌保证水平至少应达到95%置信限下的污染概率<0.1%。由此可见，非最终灭菌无菌产品存在微生物污染的概率远远高于最终灭菌无菌产品，为尽量减少非最终灭菌无菌产品污染微生物的概率，鼓励企业在生产中采用隔离舱等先进技术设备。 基于质量源于设计的药品研发与质量控制的理念，为保证无菌药品的无菌保证水平符合要求，研发者在产品的研发过程中应根据药品的特性选择合适的灭
工艺验证管理规定标准化管理处编码[BBX968T-XBB8968-NNJ668-MM9N]
工艺验证管理办法 1适用范围 本标准适用于本公司所有产品工艺验证。 2工艺验证的目的 通过工艺验证的有效实施，考察某一工艺过程是否能始终如一地生产出符合预定规格及质量标准的产品。为工艺规程定稿提供依据。 3职责 技术部：负责工艺验证方案的起草,并下发相关单位。 生产部：负责工艺验证方案的计划下达。 生产车间：负责工艺验证方案的组织实施。 质保部：负责按计划完成工艺验证方案中相关检验任务，确保检验结论正确可靠。并总结验证结果，向技术部提交验证产品的检测报告。 工艺员：负责工艺验证现场指导，解决验证现场问题,校对和调整、固化工艺文件。 技术负责人：负责审核工艺验证方案及报告。 技术副总：负责批准工艺验证方案及报告。 4内容
4.1验证小组成员 工艺员、生产部相关人员、检验员、质量员、生产车间相关人员。 4.2验证步骤 4.2.1制订验证计划 4.2.1.1由工艺员首先起草该工艺的验证计划，然后将验证计划交给验证小组讨论和 审批后分发至各责任部门。 4.2.1.2验证计划包括： 简介：简要说明验证对象信息、验证目的和拟采用的验证方法。 验证小组成员。 验证工作日程安排表（包括各验证项目的实施部门、责任人、实施日期及完成日期）。 4.2.2验证准备： 4.2.2.1负责验证现场的工装管理员提前半个工作日通知做好准备工作。 4.2.2.2工艺员负责提供现场验证的工艺文件。 4.2.2.3检验员负责准备好现场验证检测器具和质量文件。 4.2.2.4相关车间负责按验证计划准备好相应的工装设备、生产材料，并指派好验
1 II. 背景 (2) III. 分析方法的类型 (3) A. 法定分析方法 (3) B. 可选择分析方法 (3) 3 C. 稳定性指示分析 (3) IV. 对照品…………………………………………………………………………… 4 A. 对照品的类型 (4) B. 分析报告单 (4) C. 对照品的界定 (4) V. IND 中的分析方法验证 (6) VI. NDA, ANDA, BLA 和PLA 中分析方法验证的内容和格式 (6) A. 原则 (6) B. 取样 (7) C. 仪器和仪器参数 (7) D. 试剂 (7) E. 系统适应性实验 (7) F. 对照品的制备 (7) G. 样品的制备 (8) H. 分析方法 (8) L. 计算 (8) J. 结果报告 (8) VII. NDA，ANDA,BLA 和PLA 中的分析方法验证 (9) A．非法定分析方法 (9) 1．验证项目 (9) 2. 其它分析方法验证信息 (10) a. 耐用性 (11) b. 强降解实验 (11) c. 仪器输出/原始资料 (11) 3．各类检测的建议验证项目 (13) B．法定分析方法 (15) VIII. 统计分析………………………………………………………………………… 15 A. 总则 (15)
C. 统计 (16) IX. 再验证 (16) X. 分析方法验证技术包：内容和过程…………………………………………… 17 A. 分析方法验证技术包 (17) B. 样品的选择和运输 (18) C. 各方责任 (19) XI. 方法……………………………………………………………………………… 20 A. 高效液相色谱(HPLC) (20) B. 气相色谱(GC) (22) C. 分光光度法，光谱学，光谱法和相关的物理方法 (23) D. 毛细管电泳 (23) E. 旋光度 (24) F. 粒径相关的分析方法 (25) G. 溶出度 (26) H. 其它仪器分析方法 (27) 附件A：NDA，ANDA，BLA 和PLA 申请的内容 (28) 附件B：分析方法验证的问题和延误 (29) 参考文献…………………………………………………………………………………… 30 术语表……………………………………………………………………………………… 32 This guidance provides recommendations to applicants on submitting analytical procedures, validation data, and samples to support the documentation of the identity, strength, quality, purity, and potency of drug substances and drug products. 1. 绪论 本指南旨在为申请者提供建议，以帮助其提交分析方法，方法验证资料和样品用于支持 原料药和制剂的认定，剂量，质量，纯度和效力方面的文件。 This guidance is intended to assist applicants in assembling information, submitting samples, and presenting data to support analytical methodologies. The recommendations apply to drug substances and drug products covered in new drug applications (NDAs), abbreviated new drug applications (ANDAs), biologics license applications (BLAs), product license applications (PLAs), and supplements to these applications.