YG62-60L 使用说明书
目录
一、产品概述 (1)
?产品简介 (1)
?产品用途 (1)
二、主轴外形图 (2)
三、技术参数表 (3)
四、电机特性曲线 (4)
五、主轴安装说明 (5)
?测温传感器及其阻温特性对照表 (6)
?循环冷却系统说明 (8)
?换刀装置的控制 (8)
?空气密封及主轴吹尘的控制 (8)
?压缩空气气体质量要求 (9)
?跑合程序说明 (9)
?主轴驱动要求 (9)
?主轴安装要求 (10)
六、使用注意事项 (11)
?主轴装机过程注意事项 (11)
?启动注意事项 (11)
?维护和保养注意事项 (12)
一、产品概述
?产品简介
1.本主轴为电机内装式主轴，内置三相交流异步感应电机，有变频
器进行无级变速控制。由于本主轴具有结构紧凑、重量轻、惯性小、振动小、噪声低等特点所以可以实现高转速，高精度及高运转稳定性。
2.本主轴轴承采用油脂润滑陶瓷复合球轴承，可在轴承的使用寿命
周期内实现终生润滑
3.本主轴使用强制冷却的方式对电机、前后轴承进行冷却。冷却液
流经主轴机体合理布置的循环水道带走主轴高速旋转产生的热量，达到热平衡，使电主轴的温度恒定在一定值内。外置的冷却装置：保持冷却液的温度恒定。
4.本主轴内置PTC130测温传感器（其技术参数详见本说明书其
它章节），如需进行对电机做温度保护时可以读取。
5.刀具加紧方式：本主轴内置自动换刀装置，刀柄形式为直接换刀，
标配为ф6，可选配ф4，ф3.175.
?产品用途
本产品为基础主轴，主要用于雕铣机或加工中心进行有色金属、黑色金属、玻璃、石墨等材料的加工。
二、主轴外形图
三、技术参数表
四、电机特性曲线?功率、扭矩-转速曲线
?电压-频率曲线
五、主轴安装说明?测温传感器
技术参数
1.传感器类型：PTC(正温度系数)，常温阻值R25≤255Ω
2.开关特性：温控点Tk=130℃,Tk-5≤1650Ω,Tk+5≧4200Ω
https://www.doczj.com/doc/c612225073.html,偏差△T=±5℃, Tk重复性△T=±0.5℃
4.热动作时间：≤2S
5.最大工作电压30V(DC),绝缘强度2.5KW
6.最高允许存放温度180℃，最低允许存放温度-25℃
?循环冷却系统说明
◆水冷要求：推荐使用蒸馏水，同时推荐使用费诺克斯（Femox）保护剂F1(使用
配比1:200).冷却液的温度建议为24℃-28℃，当不能达到时，应该与环境温度
基本一致，进水管、回水管温差不超过5℃
◆通常在冷却系统的回水管中设置流量开关，以便控制冷却液的流量，确保主轴
冷却液的正常供给。
◆冷却水超温监控设定：建议监控温度设定在35℃。只要是确保主轴的冷却更充
分，所有监控手段均允许使用。
?换刀装置得控制
◆换刀只有主轴静止时才允许进行，使用驱动器中出来“速度0”的信号，确认主轴
是处于静止状态。从开环控制的变频器中得到“频率0”的指定后，附加1-2秒的
延迟，以确保主轴真正处于停止状态。建议将换刀装置与驱动器连锁，以防驱
动器出现错误时，产生误动作，因为有些驱动器出错时，不能提供正确的信号。
如果换刀装置在动作时，必须确保起动信号时被锁定的，此时主轴不能起动运
转。
◆在你第一次起动主轴之前，必须确认，转轴能转动自如，没有任何阻力，如果
发现有阻力，请再次检查松刀的管路。
◆换刀主轴的空气压力开关通常安装在过滤器中，设定点为0.55MPa.
?空气密封及主轴吹尘的控制
◆压缩空气与机床要同时启动，关闭机床后，压缩空气还必须保持接通一段时间，
直至确保没有水或污垢进入主轴。
◆空气密封所需压缩空气经减压阀后压力应温度为本说明书主轴技术参数表章节
的要求的压力值。
◆空气密封的空气压力开关通常安装在过滤器中，如果已经有一个不同的开关在
监控更高的压力，空气密封的空气压力开关就不再需要了。
?压缩空气气体质量要求
◆本主轴所用压缩空气必须经气水分离器处理过后并达到如下的质量要求才能使
用，气体质量要求如下：含油量：<0.01mg/m3,固体颗粒：< 5um,压力露点：
<7.5℃（0.7MPa）.
?跑合程序说明
◆当出现主轴安装，机台有移动、新的或者很长时间没有使用过的主轴等情况时，
主轴内部润滑油脂并不会在最佳化的状态，因此必须经过跑合程序以确保主轴
运转的顺畅度。
◆主轴的启动要求：只有在所有的监控发出无故障可操作的信号时，同时所有的
安全装置已经安装并工作正常时，才允许启动主轴，当主轴在运转时，ATC的
信号必须互锁。
1.当润滑油脂未在最佳状态时，主轴运转会有断续的异音，此为轴承保持
架的声音，经跑合后，此声音自然会消失。
2.跑合程序：
按最高转速的25%开始运行主轴，运转半小时，然后将转速增大到最高
转速的50%。运转15分钟，再将转速增大到最大值，运转10分钟，在
这个过程中，检查主轴的温度，主轴变热但是并不烫手，如果主轴变得
很热，停止转动并与我们的客服部联系。
?主轴驱动要求
◆推荐2.2KW变频器，使用75Ω（1000W）的刹车电阻。
?主轴安装要求
选配主轴抱夹外形图
siRNA细胞转染实验操作指南 siRNA产品的最佳工作浓度、转染后检测时间因不同的细胞类型和研究目的而异。一般推荐的siRNA工作浓度为50nM，检测时间为转染后24~72h。可以通过设置时间梯度和浓度梯度进行组合实验来选择最优的siRNA工作浓度和检测时间。由于siRNA过量会对细胞产生毒性，实验建议的siRNA 工作浓度优化的范围为5~100nM。 下面以Lipofectamine 2000转染24孔板的293T细胞为例，选取50nM的siRNA工作浓度，介绍siRNA转染细胞的操作步骤。若使用其他的转染试剂，请参照对应的产品说明书进行操作。 1.在转染前一天，按1×105~5×105个/孔的量将细胞接种于不含抗生素的完全培养基中，使次日转染时细胞融合度30-50%为宜。接种时尽量 保证每孔细胞的接种数量一致，使细胞均匀地平铺在生长表面。 注意:降低转染时的细胞密度可延长转染和收样的时间间隔，避免细胞过度生长对实验结果造成影响。可根据细胞特性和实验目的等，调整接种时的细胞密度。 2.每个待转染的细胞样品（每个培养孔），按以下体系配置转染所需的siRNA-Lipofectamine 2000复合物: （1）配制稀释液A:取25pmol siRNA于50ul Opti-MEM无血清培养基中稀释，轻轻混匀。（*siRNA的用量计算参照表1） （2）配制稀释液B:使用前先将Lipofectamine 2000轻轻混匀，取出1ul于50ul Opti-MEM无血清培养基中稀释，轻轻混匀，室温下孵育5分钟。注意孵育时间不能超过25min。 （3）孵育完成后，将稀释液A与B轻轻混匀得到siRNA-Lipofectamine 2000复合物，在室温下孵育20分钟。此时溶液可能会浑浊，属于正常现象。 表1 不同细胞培养板siRNA 转染用量参考表 3.将孵育好的siRNA-Lipofectamine 2000复合物分别加到对应的细胞孔中，轻轻混匀。 注意：转染前无需更换新鲜培养基，直接将复合物加到原细胞培养基中即可。如有需要，也可根据情况更换培养基优化该步骤。 4.如果需要进行其他特殊处理，如加药等，可在此时进行。 5.将细胞培养板置于37℃的CO2培养箱中培养24-72h。具体培养时间根据细胞生长特性、实验目的进行调整。 注意：加入siRNA-Lipofectamine 2000复合物后一般无需更换培养基，但若脂质体类转染试剂对细胞毒性较大，可根据细胞的状态，在转染4-6小时后更换培养基。 6.进行后续总RNA提取、蛋白提取、细胞活性分析等实验。
L i p o2000瞬时转染细胞步骤 Stealth?RNAiorsiRNATransfection 以24孔板为例，其余规格的转染见表1 1中板，细胞密度为30-50%适宜。 注意：根据转染后细胞检测时间长短决定细胞中板密度，如果转染后需要长时间后检测，则细胞中板密度适当降低，已避免细胞过度生长导致存活降低。 2第二天（24-36小时后）每个孔转染方式如下： A将20pmolsiRNA溶于50ulOpti-mem无血清培养基中。 B将1ullipo2000溶于50ulOpti-mem无血清培养基中，混匀室温放置5min。 C将AB两管混合，放置20min。 3转染期间，将24孔板培养基换成无血清培养基，每孔400ul。将C管mix加入24孔板对应孔中，4-6小时候换成有血清培养基。PlasmidDNATransfection DNA(ug):lipo2000(ul)=1:2-3 转染时细胞密度越高，转染效率，表达效率也越高，并且可以降低细胞毒性。1中板。 贴壁细胞：0.5-2X105cells/well，第二天待细胞密度达到70-80%时转染 悬浮细胞：4-8X105cells/well，中板后随即转染。 2转染。 A将0.8ugDNA溶于50ulOpti-mem无血清培养基中。 B将2ullipo2000溶于50ulOpti-mem无血清培养基中，混匀室温放置5min。 C将AB两管混合，放置20min。 转染期间，将24孔板培养基换成无血清培养基，每孔400ul。将C管mix加入24孔板对应孔中，4-6小时候换成有血清培养基。 Table1.CultureSharedreagentsDNAtransfectionRNAitransfection
中北大学 课程设计任务书 15/16 学年第一学期 学院：机械工程与自动化学院 专业：机械设计制造及其自动化 学生姓名：王前学号：1202014233 课程设计题目：《金属切削机床》课程设计 （车床主轴箱设计） 起迄日期：12 月21 日～12 月27 日课程设计地点：机械工程与自动化学院 指导教师：马维金讲师 系主任：王彪 下达任务书日期: 2012年12月21日
课程设计任务书
课程设计任务书
目录 1.机床总体设计 (5) 2. 主传动系统运动设计 (5) 2.1拟定结构式 (5) 2.2结构网或结构式各种方案的选择 (6) 2.2.1 传动副的极限传动比和传动组的极限变速范围 (6) 2.2.2 基本组和扩大组的排列顺序 (6) 2.3绘制转速图 (7)
2.5确定带轮直径 (8) 2.6验算主轴转速误差 (8) 2.7 绘制传动系统图 (8) 3．估算传动件参数确定其结构尺寸 (10) 3.1确定传动见件计算转速 (10) 3.2确定主轴支承轴颈尺寸 (10) 3.3估算传动轴直径 (10) 3.4估算传动齿轮模数 (10) 3.5普通V带的选择和计算 (11) 4．结构设计 (12) 4.1带轮设计 (12) 4.2齿轮块设计 (12) 4.3轴承的选择 (13) 4.4主轴主件 (13) 4.5操纵机构、滑系统设计、封装置设计 (13) 4.6主轴箱体设计 (13) 4.7主轴换向与制动结构设计 (13) 5.传动件验算 (14) 5.1齿轮的验算 (14) 5.2传动轴的验算 (16) 5.3花键键侧压溃应力验算 (19)
电吹风 ZD638产品使用手册 使用电吹风前，请先仔细阅读本用户使用手册，并请妥善保管以供日后参考。 安全说明 使用电吹风前请先仔细阅读如下安全说明。该安全说明能帮助您安全正确地使用电吹风，避免您伤害到自己或他人。 警告：如果不遵守下列说明，可能会造成火灾、烫伤、短路或者触电事故。 1. 不要在手湿的情况下使用电吹风。不要把电吹风放置或存放在靠近水槽、有水或其他盛有液体、高度潮 湿的地方。 警告：不要在盛水的浴缸、淋浴、洗脸盆或其他器皿附近使用本电吹风。 2. 电吹风必须使用标准的电源插座，并且检查插座的输出电压，同时要与其他电器分开使用。 3. 要确保所使用的电压与本机标明的额定电压相符合。 4. 绝对不能在电吹风启动的情况下离开。 5. 使用完毕或使用中遇到停电时，必须从插座上拔下插头。拔出插头时，必须捏住插头从插座上拔出。 6. 如果电吹风在运转时出现断断续续的情况，请立即停止使用。 7. 不要用力拉扯电源线，不要损坏或改装电源线。如果电源线或插头损坏或发烫，请立即停止使用。 8. 避免摔落电吹风或让电吹风受到强烈的撞击。 9. 不要在煤气或其他易燃品（如挥发剂、涂料稀释剂、喷雾剂等）附近使用电吹风。 10. 尽量避免在浴室使用电吹风。若要在浴室使用时，使用后请一定拔下插头，因为即使电 吹风断电后，接近水仍存在危险。为了增加保护以保障您的安全，建议您再给浴室供电的电气回路中安装一个额定漏电工作电流不超过30mA的漏电保护开关，为了确保安全, 请向合格电工咨询。 11. 不要使用稀释剂、苯和其他溶剂来清洗电吹风。 12. 在使用过程中请小心不要让头发卷入入风口，不要把外物插入出风口和入风口，否则会导致机器损坏或 触电。如在使用过程中入风口或出风口被堵塞时，可能导致机器不能工作。假如出现这种情况，请立即停止使用，切断电源开关并拔下插头，清除入风口或出 风口的堵塞物。让电吹风冷却几分钟后再使用。如再次连接电源时不能恢复正常工作时， 请联系专业维修中心维修。
产品以冻干粉的形式，常温运输。收到产品后，请于-20 C?-80 'C保存，冻干粉可以稳定保存一年。 使用前请瞬时离心，用RNase-freeH 2O或者灭菌ddH20，配制成20gM储存液，分装保存，避免反复冻 融（尽量不超过5次）。 表120 gM储存液的配置参考 使用前须知 为避免外界因素（包括酶，极端pH或者温度条件等）导致产品降解，所有操作请严格遵循RNA操作规则。 实验过程中，产品最好于冰上放置，使用完毕后请于-20 C~-80 C小心保存。 细胞实验方法 为了降低细胞密度、试剂用量，转染效率等因素导致的孔间差异，保证实验可靠性和可重复性，一般建议： a. 转染实验中每个转染样品至少设置3个以上复孔； b. 接种细胞时，每孔接种的细胞数量尽量保持一致，并且细胞在各孔的表面平均分布。 1. 转染浓度： siRNA产品最佳工作浓度因不同的细胞类型及研究目的而异。推荐初始转染浓度为50nM，转染后检测时 间为24?72h。最佳转染效率一般通过设置时间曲线和浓度梯度进行优化，优化的范围建议为5~100nM。 2. 转染步骤： 以Iipofectamine2000（简称Iipo2000）转染siRNA于24孔板，转染浓度为50nM为例，其他规格容器转染 请参考表2。 1）转染前一天，接种适当数量的细胞至细胞培养板中，每孔中加入不含抗生素的培养基，使转染时的细胞 密度能够达到30~50%（不同细胞生长速度不一样，因此，接种细胞的数量需要根据细胞培养的经验）。注意: 转染时，细胞密度是影响转染效率的关键因素之一，细胞生长过度会削弱细胞活力，降低细胞的转染效率。 2）对于每个转染样品，请按以下步骤准备siRNA-Iipo2000混合液： a. 稀释siRNA :用50 g 不含血清培养基Opti-MEM I （v1）稀释g I20 gM siRNA储存液，轻轻混匀，室温孵育5min ; b. 稀释Iipo2000 :用50 g不含血清培养基Opti-MEM I （v1）稀释1 g Ilipo2000，轻轻混匀并室温孵育5min ; c. 将a与b轻轻混匀，室温孵育20min（溶液可能会有浑浊，但不会影响转染）。 注意：稀释好的Iipo2000长时间放置可能导致转染试剂活性的降低，应尽量在25min之内与稀释好的siRNA 混合。另在混合试剂时，请勿剧烈吹打或振荡，手指轻弹管壁即可，过度用力可能会破坏脂质体的结构， 甚至影响siRNA-lipo2000 混合物的形成。 3）将siRNA-Iipo2000混合液加入含有细胞的400 gl培养基（v2）的培养孔中，轻轻混匀； 4）（可选）培养4?6h后，将孔中含siRNA-Iipo2000混合液的培养基移去，更换新鲜培养基； 5）（可选）进行其他必要的特殊处理（如加药处理）；
GDJ系列产品参数：
2、安装前首先用手转动电主轴轴头，应手感灵活，无阻滞现象。
3、用500V的摇表检查定子绝缘电阻不低于100MΩ。 4、将以上检验符合要求的电主轴装入机座内，电主轴外壳以机座安装孔的配合为滑动配合。电主轴严禁装夹在前、后轴承部位，以防轴承室变形，卡住轴承造成轴承提早损坏。夹紧力不宜过大，电主轴装入机座内不得松动。 二、正确使用 1、按要求连接电主轴进出水管接头，检查连接处是否漏水和通畅。水冷电主轴的冷却系统系统应于机床的总开关连接；开机后至停机的中间，冷却系统系统应连续工作；冷却液水量按2.5升/千瓦·分钟计算，冷却液流量按3～6升/分钟，小的电主轴取小值，大的电主轴取大值；冷却液要求使用单独水箱，冷却液要求每月定期更换；冷却液的温度应低于环境温度3～5℃为宜，最好控制在25℃左右。 2、选择变频器应与电主轴的电压、功率、频率相匹配来配套使用。设置变频器首先设置变频器的基准频率，变频器的基准频率按电主轴的最高频率设置。变频器的最高频率、转折频率和对应的电压按电主轴的频压曲线对应设置；变频器的电流按电主轴的额定电流设置；载波频率按电主轴的功率大小设置，小于10kw电主轴按8kHz设置，大于10kw电主轴按5kHz设置；增、减速时间按10s左右设置，如遇到起动电流超过额定电流而保护时应延长增、减速时间。增、减速时间过短易造成前螺母松动。 3、将变频器与电主轴三相电源连接，其中变频器的三相电源线应焊接在插头1(U1)、2(V1)、3(W1)脚上，4脚为地线。然后变频器与外接电源连接。接通电源后变频器点动，观察电主轴的旋转方向是否与电主轴指示方向一致，如旋转方向不一致应立即关机改正，电主轴严禁在错误的旋转方向上运转。电主轴与变频器连线不宜超过25m。 4、电主轴在安装刀具时，应清除干净轴头锥孔及弹簧夹头表面的污垢，以免降低精度。装夹、拆卸刀具时应使用专用工具。注意装夹、拆卸时禁止用力过猛。 5、由于精密角接触球轴承油脂润滑的极限转速的限制，电主轴不允许超速运行。超速运行会造成精密角接触球轴承烧坏。 6、电主轴正常工作时做好一听，二摸，三看三个环节。一听电主轴有无异常声出现，发现异常声应及时关机检查。二摸电主轴发热、振动是否稳定，若发热、振动加剧及时关机检查。三看被加工的表面质量是否稳定，如不稳定及时关机检查。 三、电主轴运行常出现的问题 正常工作时电主轴常遇到发热现象，水冷电主轴表面温度与环境温度超过15℃时可以认为发热。需关机检查，首先用温度计检查冷却水箱里的冷却液温度是否超过了环境温度，如超过应及时更换低于环境温度的冷却液。如果冷却水箱没有问题，
Neon TM 电转染一般流程 1． 电穿孔前一至两天，将细胞转移至装有新鲜培养基的培养皿中，保证实验当天细胞量达 到70-90%。 2． 加培养基（不含抗生素）到24孔板中，每孔500μl ，放于37℃培养箱预热。（注：使用 其他孔数培养板或者100μl 枪头时，加入培养基和质粒及细胞的数量见下表1） 3． 将培养细胞取出，悬浮细胞直接取部分培养的细胞计数，确定细胞密度；贴壁细胞用2ml 的PBS 冲洗细胞，吸出PBS ，加入约750μl 胰酶消化3min ，加入750μl 培养基，终止消化，取部分细胞悬液进行细胞计数，确定细胞密度。 4． 将悬浮细胞转到离心管，室温下100-400g 离心力离心5min ，倒掉上清。 5． 向细胞中加入2mlPBS 冲洗细胞，室温下100-400g 离心力离心5min 。 6． 吸出PBS,用重悬缓冲液R 重新悬浮细胞沉淀，最终使细胞密度为2.0×107个/ml 。轻轻 吹打细胞，使其形成单细胞悬液。（注：细胞悬液在室温时间不能超过15-30min ,否则将导致细胞活性和转染效率降低） 7． 将适量质粒加到1.5ml 离心管中，再加入细胞悬液，轻轻混匀。所用细胞浓度、DNA 和 接种体积见下表1）。 8． 将装有3ml 电解缓冲液E 的Neon TM 管插入移液器架中。 9． 在仪器上设置脉冲电压、脉冲宽度、脉冲数。 10．将枪头插入NeonTM 移液器中，用10μl 的枪头吸细胞混合液，枪头中必须无气泡。将带有样品的NeonTM 移液器垂直插入NeonTM 管中。 11．选择电穿孔方案，并按下触摸屏上的Start （开始）键。 12．电脉冲释放后，触摸屏上会显示完成，提示电穿孔完成。 13．将脉冲好的样品立即转移至准备好的装有预热培养基的培养板中。将培养板放到培养箱培养。 14．实验结束后，倒掉移液器中E 液，关闭电转仪。 注意：1．加R 液体积=四大格细胞总数/（4×104）×细胞液体积/（2.0×107）。 2．加入质粒体积=加入质粒的量/质粒浓度。 3．加入细胞悬液体积=需加细胞数量/细胞悬液浓度。 4．每个枪头最多只能用2次。 5．Neon TM 管装入的3ml 电解缓冲液E 可用10次电转化。 6．Neon TM 管中加入3ml 电解缓冲液，用10μl 枪头时加E 液,100μl 枪头时用E2液。 表1 NeonTM 枪头 平板培养基的体积 细胞数量（个） 规格 每孔表面积(cm2) DNA(μg) 10μl 100μl 96孔 0.3 0.2-0.3 √ 100μl 1-3×104 48孔 0.7 0.3-0.7 √ 250μl 5-7.5×104 24孔 2 0.5-1.5 √ 500μl 0.5-1.5×105 12孔 4 0.5-3.0 √ 1.0ml 1-3×105 6孔 10 2.0-4.0 √ √ 2.0ml 0.5-1×106 60mm 20 4.0-8.0 √ 5ml 2-4×106 10CM 60 8.0-16 √ 10ml 4-8×106
机床主轴箱设计说明书 一、机床的型号及用途 1、规格 选用型号 CA6140、规格 Φ320×1000 2、用途 CA6140型卧式车床万能性大，适用于加工各种轴类、套筒类、轮盘类零件上的回转表面。可车削外圆柱面、车削端面、切槽和切断、钻中心孔、钻孔、镗孔、铰孔、车削各种螺纹、车削外圆锥面、车削特型面、滚花和盘绕弹簧等。加工围广、结构复杂、自动化程度不高，所以一般用于单件、小批生产。 二、 机床的主参数和其他主要技术要求 1、主参数和基本参数 1) 主参数 机床主参数系列通常是等比数列。普通车床和升降台铣床的主参数均采用公比为1.41的数列，该系列符合国际ISO 标准中的优先系列。 普通车床的主参数D 的系列是：250、320、400、500、630、800、1000、1250mm 。 2) 基本参数 除主参数外，机床的基本是指与被加工工件主要尺寸有关的及与工、夹、量具标准有关的一些参数，这些主参数列入机床的参数标准，作为设计时依据。 3）普通车床的基本参数 普通车床的基本参数应符合《普通车床参数国家标准》见参考文献 【一】中表2的规定，有下列几项数； 刀架上最大工件回转直径1D （mm ） 由于刀架组件刚性一般较弱，为了提高生产效率，国外车床刀架溜板厚度有所增加，在不增加中心高时，1D 值减少的趋势。我国作为参数标准的1D 值，基本上取12D D >/,这样给设计留一定的余地，设计时，在刀架刚度允许的条件下能保证使用要求，可以取较大的1D 值。所以查参考文献【一】（表2）得1D =160mm 。 主轴通孔直径d ﹙mm ﹚
普通车床主轴通孔径主要用于棒料加工。在机床结构允许的条件下，通孔直径尽量取大些。参数标准规定了通孔直径d的最小值。所以由参考文献 【一】（表二）d=36mm。 主轴头号 普通车床采用短锥法兰式主轴头，这种形式的主轴头精度高，装卸方便。 主轴端部及其结构合面得型式和基本尺寸要符合《法兰式车床主轴端部尺寸部标注》的规定。根据机床主参数值大小采用不同号数的主轴头（4～15号），号值数等于法兰直径的1/25.4而取其整数值。所以由参考文献【一】（表2）可知主轴头号取4.5 装刀基面至主轴中心距离h(mm) 为了使用户，提高刀具的标准化程度，根据机械工业部工具研究所的刀 具杆标准，规定了h=22mm。 最大工件长度L （mm） 最大工件长度L是指尾座在床身处于最后位置，尾座顶尖套退入尾座孔时容纳的工件长度。为了有利组织生产，采用分段等差的长度数列。所以由参考文献【一】（表2）得L=1000mm。 2、主传动的设计 1）主轴极限的确定 由课程设计任务书中给出的条件可知： Z=40 r/min min Z=1800 r/min max 2）公比的确定 主轴极限转速的确定后，根据机床的使用性能和结构要求，选择主轴转速数列的公比值，因为中型通用机床，常用的公比为1.26或是1.41，再根据极限转速，按参考文献【一】中表2—1选出标准转速数列公比 =1.41。 3）主轴转速级数的确定 按任务书要求Z=12 按标准转速数列为40、56、80、115、160、225、315、445、625、880、1250、1800r/min 4）主传动电动机功率的确定 电动机的额定功率为： N =4kW 额
电吹风简单维修 电吹风构成部件: 电吹风一般由壳体、电动机、风叶、电热元件、手柄和开关等部件构成。电动机是电吹风的核心部件，电吹风的风叶大都安装在电动机的轴端上，位于电吹风的尾部。电吹风的电热元件一般采用电热丝绕制而成，装在电吹风的出风口附近。工作时，电动机带动扇叶旋转，由吸风口吸入冷风，然后由出风口吹出。 电吹风的开关的挠板式、推杆式和按钮式三种，一般有“热风”、“冷风”和“停”三挡。电动机旋转时，若开关置“冷风”位置，这时电热元件是断开的，出风口吹出的是冷风；若置“热风”位置，这时电热元件事接 通的，则吹出的是热风。 电吹风工作原理: 当电吹风接通电源后，电动机带动风叶旋转，将空气从进风口吸入，经过电热元件加热，把热风从出风口吹出。电吹风通过调节通电电热元件的多少来送出不同温度的热风，也有通过调节所加电源电压来调节送风温度与送风量。 （电机方面了解即可）电吹风用电动机，常用单相串激电动机和永磁直流电动机，也有用单相罩极异步电动。输入功率一般为6～30W，转速为2500～15000r/min。 多数电动机都采用单相220V供电，只是永磁直流电动机是单相220V经整流降压为直流电压6～12V后供给 的。电路图如下： SZJ—18型电吹风电路图 1. 0档:关断状态. 2. 1档:电源经温控器ST分成二路:一路经EH2(1530),桥式整流后给风扇电机M供电,再经VIY2流向电源另一端,电机慢转,另一路经EH1(62D),VD1流向电源另一端,故为低温,低速档.. 3. 2档:电源和1档一样分成二路,只是都未经过二极管,所以电机高速旋转;电热丝EH1发高温,为高温高速档.. 4. 档:由于开关未将EH1接通电源,不发热,而EH2发热很小,只有电机高速旋转,为冷风档.
siRNA使用说明（2009-08） 名称： 常规化学合成siRNA。 产品简介： 常规化学合成siRNA为21-25nt，带有2nt的3'端悬垂的双链小RNA（3'端悬垂通常为dTdT或者UU，也可以选择其他的碱基作为3'端悬垂）。 产品剂量经过严格测算，以摩尔数标明。产品剂型为冻干粉，即用型的siRNA已经经过去保护、退火、纯化等处理，只要用灭菌的ddH2O或者RNase-free water溶解并配制成20μM液体即可直接用于细胞转染及其他实验。 保存和使用： 保存： 液体剂型，siRNA的贮存浓度一般为20μM，-20℃或-70℃保存半年以上； 冻干粉剂型，-20℃或-70℃保存一年以上。开盖前，请先稍稍离心，将粉末收集管底，再用灭菌的ddH2O或者RNase-free water，配制成20μM的液体剂型。 例如：20nmolsiRNA冻干粉，需要加入1ml水溶解（其他剂量可以按照比例计算加水量）。 注意：（1）液体剂型产品，应避免反复冻融（尽量不要超过5次），建议溶解后的产品分装保存。（2）如果近期不做实验，产品需要长期放置，最好以冻干粉形式保存。 使用： 产品使用时（转染过程），siRNA最好冰上放置，使用完毕，请于-20℃或-70℃小心保存; 整个实验过程，要求无RNA酶环境，枪头、EP管都要经DEPC处理； 特别提示：荧光标记siRNA要求避光。 使用方法： 1. siRNA的转染浓度：推荐的siRNA转染浓度是50nM，客户可根据实验具体情况优化转染浓度，优化的范围可以是10～150nM。 （siRNA及转染试剂的建议用量，请参照“实验指导”）。 2. 使用lipofectamine2000（Invitrogen）转染siRNA的步骤（仅供参考）： (1) 转染前一天，接种适当数量的细胞至细胞培养板中，使转染时的细胞密度能够达到30～50％（不同细胞生长速度不一样， 因此，接种细胞的数量需要根据细胞培养的经验），请使用无抗生素的培养基。 注意：转染时，细胞密度是影响转染效率的关键因素之一，细胞生长过度会削弱细胞活力，从而降低细胞的转染效率。而细胞密度过低则可能达不到生长的要求，也会因此影响转染效率。 (2)对于每个转染样品，按如下步骤准备siRNA- lipo2000混和液（试剂的用量和体积，请参照“实验指导”）： a. 稀释转染试剂lipofectamine2000（以下称lipo2000）：使用前，将lipo2000转染试剂轻轻摇匀，然后取适量，用不含血清 的优化培养基（Opti- MEMⅠ）稀释，轻轻混和，室温孵育5min； b. 稀释siRNA：用不含血清的Opti -MEMⅠ稀释siRNA，轻轻混和； c. 稀释好的lipo2000经过5min的孵育后，将之与上述（b）稀释好的siRNA轻轻混和，室温培养20min以形成siRNA-lipo2000 混和物，溶液可能会有浑浊，不过不会影响转染。 注意：稀释好的lipo2000，如果长时间放置可能导致转染试剂活性的降低，应尽量在30min之内与稀释好的siRNA混和。 (3) 将siRNA-lipo2000混和液加入含有细胞以及培养液的细胞培养板中，轻轻摇晃，使之混和； (4)将培养板置于37 ℃的CO2培养箱中培养至检测时间（24～96h）。沉默效率的检测一般建议的时间为24～72h。 可选操作（并非必要的操作）：转染操作完成，经过37℃培养4～6h后，可以将孔里含有siRNA-lipo2000混合液的培养基移去，更换新鲜的生长培养基，这样也不会影响转染的效率。 注意：如果转染时使用的是不含血清的培养基（即血清饥饿的条件下进行转染），4～6h后必须换成完全培养基（含血清、含抗生素），以确保细胞生长。 3. mRNA 水平的检测：siRNA的作用机理在于其引起靶mRNA的降解，因此mRNA的降解水平是siRNA沉默效率的最直接指标。 一般在siRNA转染后24h即可以检测到靶mRNA水平的降低。检测方法一般采用RT-PCR（半定量）或Real-time PCR（定量）。 4. 蛋白水平的检测：蛋白水平的检测一般需要借助抗体（针对靶基因蛋白质的抗体或针对融合蛋白的抗体）或报告基因系统检 测，检测手段一般有Western-blot、免疫组化等。一般说来，检测时间受细胞内蛋白质表达量、蛋白质本身的半衰期等因素的影响，一般从48h开始检测，在36、48、72、96h，甚至更长时间之后多点采样。
Assembly Instructions Grinding spindle Model E13811B Article number 000.633.533 Serial number ______________ Date of delivery ______________ Original Assembly Instructions - German All other languages are a translation of the original. Franz Kessler GmbH Franz-Kessler-Strasse 2 ? 88 422 Bad Buchau Telephone: +49 (0)7582 / 809-0 ? Fax: +49 (0)7582 / 809-170 e-mail: franz-kessler@franz-kessler.de ? web: http://www.franz-kessler.de OI 000.654.990_EN Created: 10/2010
Contents Declaration of incorporation (5) 1. About these assembly instructions (6) Scope of delivery (6) 2. For your safety (7) General (7) Designated use (7) Non-authorised usage (7) Product identification (7) Important operating instructions (7) Operator's responsibility (8) Qualified technical staff (9) Work on the electrical system (9) Work on the hydraulic system (9) Personal protective equipment (9) Information about warning notices (10) Warning symbols (10) Warning levels (10) Damage to property (11) Other symbols used (11) Safety instructions (12) Danger due to electrical voltage (12) Danger due to hydraulic fluid (12) Danger due to compressed air (13) Danger of environmental pollution (13) 3. Transport (14) 4. Storage (15) 5. Assembly (16) General informations (16) Installation position (16) Standard assembly information (16) Sequence for assembly (16) Electrical system: (17) Connection with plug (17) Possible plug connections (18) Frequency converter (20) Torque motor drive (21) Operating mode (21) Connection sensor system (22) Temperature sensor for motor coil (22) Motor shut-down temperature (22)
THE RNAi COMPANY RNAi 产品使用手册 上海吉玛制药技术有限公司 Shanghai GenePharma Co.,Ltd.
Ⅰ. RNAi 简介 1 A. RNAi 实验原理 B. RNAi 实验流程 C. RNAi 实验所需试剂 D. 上海吉玛 RNAi 相关产品 Ⅱ. siRNA设计7 A. 哺乳动物siRNA设计 B. 上海吉玛 siRNA 产品特性 C. siRNA oligo 技术数据 Ⅲ. siRNA 对照9 A. 普通阴性对照 B. 荧光标记的阴性对照 C. siRNA阳性对照 D. 转染试剂对照 E. 避免off-target对照 Ⅳ. siRNA 转染10 A.siRNA 转染的方法 B.Lipofectamin2000 转染试剂 C.Lipofectamin2000适用的细胞类型 D.转染前细胞培养 E.Lipofectamin：siRNA/DNA比例 F.贴壁细胞转染程序 G.悬浮细胞siRNA转染程序 H.DNA和siRNA共转染细胞程序 I. 体内siRNA导入方法 J. siRNA转染常见问题与建议 Ⅴ. mRNA水平RNAi效果监测15 A. siRNA细胞转染条件优化 B. Real-Time PCR RNAi 效果检测 C. Real-Time PCR 结果分析 Ⅵ. 蛋白质水平RNAi效果监测20 A. western-blot原理 B.western-blot操作步骤 w C.estern-blot上样液的制备 D.western-blot常用试剂的配制 Ⅶ. RNAi实验常见问题解答22
Ⅰ. RNAi 简介 A. RNAi实验原理 RNA干扰（RNA interfering，RNAi）现象是由与靶基因序列同源的双链RNA（double-stranded RNA，dsRNA）引发的广泛存在于生物体内的序列特异性基因转录后的沉默过程。细胞中的核糖核酸酶III家族成员之一的，dsRNA特异性的核酸酶Dicer将dsRNA裂解成由21-25个核苷酸组成的小干扰RNA (small interfering RNA，siRNA)，随后siRNA作为介导子引起特异性地降解相同序列的mRNA，从而阻断相应基因表达的转录后基因沉默机制。
电主轴使用说明 电主轴是一种高速高刚度精密的电动机，其由精密滚动轴承支承，油脂润滑，外循环水冷却，雕刻(铣)主轴一般为立式使用，使用的方法正确与否将直接影响雕刻和雕铣质量，以及主轴的工作寿命。 1、避免撞击 强烈撞击，特别是主轴端部及前端盖部位绝不许撞击，否则会损坏精密轴承及主轴精度，造成主轴回转精度的丧失。 2、正确安装和夹紧 安装前应确认主轴电机状态正常，主要指外观无损伤，主轴转动轻匀。用500V摇表查定子之对地绝缘电阻在100мΩ以上。主轴电机套筒外径与夹持座孔间的配合公差必须保证主轴电机之套筒能顺利滑入座孔，在任何情况下都不能使用锤子或其他工具来使主轴定位，夹紧力不宜过大，否则会造成精密轴承的钢球滚道变形，使主轴精度及寿命受到影响。夹持后要检查主轴前端锥孔定心面的跳动应不大于0.005MM，主轴回转轻匀。 3、筒夹（ER型）压帽和刀具的安装 刀具的安装必须保证回转精度,否则会产生剧烈振动，影响雕刻(铣)质量和效率及轴承寿命。 必须十分小心的地擦净筒夹，压帽和刀具以及主轴前端之锥孔，装拆刀具应避免用力过猛。 组装后要查看刀具根部跳动﹤0.015MM若超差要通过反复放松和拧紧并调整变换刀具柄接触面来纠正，若无改善要检查各接触面是否处于正常状态，切忌乱敲打。 4、启动前必须 1）确认主轴套筒所须的循环冷却水已开通，冷却水的温度一般不要超过35°ｃ，但也不宜过低，不宜直接接用自来水，因水温过低会造成主轴电机内部热空气遇冷而形成凝水影响绝缘和轴承生锈，冷却水流量一般可在3-5L/MIN，冷却水应干净无杂屑以防堵塞通道。冷却水箱中水量约50L—100L，建议水泵用AB-25或AB-50。进出水口不能相距太近，必须使水在箱内有一冷却过程，力求使进出口水温差能达到2—3°ｃ，要避免造成热水循环而达不到冷却效果。 2）确认电源电压，频率与主轴匹配关系正确，按主轴名牌数据或产品检测报告中提供的电压与频率对应关系设置变频器的U/F 曲线，主轴插头座的1号芯接地，2.3.4号芯接变频器的U V W。启动时应先点动，查看主轴方向。（从轴伸端看主轴应逆时针旋转）若反转应即关车，切断电源，将三根进线中的任意两根对调即可。 对新启用的主轴电机宜先进行低速运行，建议先半速运行0.5-1.0小时，然后再进入高速。一般用调频调压方式启动主轴电机，应尽力避免突加满压启动。启动时间约10秒左右完成。 5、运行 按U/F曲线，调节变频器频率可以得到各种转速。此时变频器电压会自动跟踪调整至所需之值。在低速运行时，为适当提高转矩可将电压略为提高，一般可控制在标定值上浮20%左右以工作电流值接近额定值（安培）为宜。雕刻铣电主轴不许超速运行。在一定的输出频率范围内，可能会遇到负载装置（雕铣主轴）的机械共振点，引起噪音和振动加大，此时应避开此频率工作，噪音和振动即可改善。 正常运行时应做到一听，二摸，三查，并尽量避免突然刹车，刀具卡死时要及时关车。 一听----听主轴电机运转声有无干磨擦和怪叫，发现异常要及时关车检查。 二摸----摸前盖或套筒发热及振动情况是否稳定，若发热和振动加剧应及时关车检查。（轴承能承受的温度< 90°c,定子绕组<130°c） 三查----查被加工的零件的质量是否稳定，如变化大应及时关车检查。 每天工作结束后应先关断电源待主轴停转以后，再关水泵停止供水，并将主轴电机擦干净。 6、维修保养 在正常使用情况下，一般运转一年左右，应将主轴电机拆洗重新装配使用，这样可保证轴承精度和延长使用寿命。为了保证主轴电机能正常良好地工作，其拆卸装配必须由有经验的专业操作人员，在清洁干净的环境中，以及使用
C6136型机床主轴箱课程设计说明书系别：交通和机械工程学院 专业：机械设计制造及其自动化 班级：机械10-4班 姓名：富连宇 学号：1008470434 吗 指导老师：赵民 目录 一、设计目的 (1) 二、机床主要技术要求 (1) 三、确定结构方案 (1) 四、运动设计 (1) 4.1确定极限转速 (1) 4.2拟订结构式 (1) 4.3绘制转速图 (2) 4.4 确定齿轮齿数 (2) 4.5 验算主轴转速误差： (3) 4.6 绘制传动系统图 (3) 五、动力设计 (3) 5.1 V带的传动计算 (3) 5.2各传动轴的估算 (4) 5.3齿轮模数确定和结构设计： (5) 5.4摩擦离合器的选择和计算： (6) 5.5结构设计 (7) 六、齿轮强度校核 (8) 6.1、各齿轮的计算转速 (8) 6.2、齿轮校核 (9) 七、主轴刚度校核 (9) 八、主轴最佳跨度确定 (10) 8.1计算最佳跨度 (10) 8.2校核主轴挠度 (10) 8.2主轴图：（略）见附图2 (10) 九、各传动轴支持处轴承选用 (10) 十、键的选择和校核 (10) 1）、轴IV的传递最大转矩 (10) 十一、润滑和密封 (11) 十二、总结 (11) 十三、参考文献 (11) 十四、附 (12)
一、设计目的 通过机床主运动机械变速传动系统得结构设计，在拟定传动和变速的结构方案过程中，得到设计构思、方案分析、结构工艺性、机械制图、零件计算、编写技术文件和查阅技术资料等方面的综合训练，树立正确的设计思想，掌握基本的设计方法，并具有初步的结构分析、结构设计和计算能力。可使我们学会理论联系实际的工作方法，培养独立工作的能力；学会基本的设计的方法；熟悉手册、标准、资料的运用；加强机械制图、零件计算、编写技术文件的能力，学会设计说明书的编写。为接下去的毕业设计、毕业论文积累经验。 二、机床主要技术要求 [1]车床类型为C6136型车床主轴变速箱（采用机械传动结构）。 [2]加工工件最大直径：360mm [3]加工工件最大长度：1500mm [4] 主轴通孔直径：40-50mm [5]主轴前锥孔：莫式5号 [6]主轴采用三相异步电机 [7]主电动机功率为n电额：4kw [8]转速nmin：33.5r/min mmax：1700 r/min n额：1000r/min [9]主轴变速系统实现正传12级变速，反转6级变速（采用摩擦离合器） 三、确定结构方案 [1] 主轴传动系统采用V带、齿轮传动； [2]传动形式采用集中式传动； [3]主轴换向制动采用双向片式摩擦离合器和带式制动器； [4]变速系统采用多联滑移齿轮变速。 四、传动方案 4.1确定极限转速 转速n min：33.5r/min n max：1700 r/min n额：1000r/min 4.2拟订结构式 1）确定变速组传动副数目： 传动副中由于结构的限制以2或3为合适，即变速级数Z应为2和3的因子，为实现12级主轴转速变化的传动系统可以以下多种传动副组合： ①12=3x2x2 ②12=2x2x3 ③12=2ⅹ3ⅹ2等 18级转速传动系统的传动组，选择传动组安排方式时，考虑到机床主轴箱的具体结构、装置性能，主轴上的传动副数主轴对加工精度、表面粗糙度的影响很大，因此主轴上的齿轮少些为好。按照1 符合变速级数、级比规律 2 传动件前多后少3 结构网前密后疏4 第二扩大组变速范围r=8满足变速范围要求
Polyplus-transfection S.A. - Bioparc - 850 Bd S. Brant - 67400 Illkirch - France - Phone: +33 3 90 40 61 80 - Fax: +33 3 90 40 61 81 Polyplus-transfection Inc. - 1251 Ave of the Americas - 34th fl. - New-York - NY 10020 - USA https://www.doczj.com/doc/c612225073.html, jetPRIME? in vitro DNA & siRNA transfection reagent PROTOCOL DESCRIPTION jetPRIME? is a novel powerful molecule based on a polymer formulation manufactured at Polyplus-transfection?. jetPRIME? ensures effective and reproducible DNA and siRNA transfection into mammalian cells. jetPRIME? is extremely efficient on a wide variety of cell lines. This powerful reagent only requires low amounts of nucleic acid per transfection, hence resulting in very low cytotoxicity . 1 Transient DNA transfection protocol (2) 1.1 Cell seeding .......................................................................................................................................... 2 1.2 DNA transfection protocol ................................................................................................................... 2 1.3 Virus production in adherent cells ....................................................................................................... 5 1.4 Optimization guidelines (5) 2 siRNA transfection protocol (6) 2.1 Cell seeding .......................................................................................................................................... 6 2.2 siRNA transfection protocol .. (7) 3 DNA & siRNA cotransfection protocol (7) 3.1 Cell seeding .......................................................................................................................................... 7 3.2 DNA & siRNA cotransfection protocol . (8) 4 Transfection of CRISPR/Cas9 ..................................................................................... 9 5 Stable DNA transfection ............................................................................................. 9 6 Troubleshooting ....................................................................................................... 10 7 Product information (11)