石斛中总生物碱的含量测定方法研究
徐宁(安徽省安庆卫生学校*246003)
关键词石斛总生物碱含量UV
石斛*别名吊兰花~黄草*为兰科植物环草石斛
Dendlobzum loddzgeszz Rolfe.~马鞭石斛
Dendlobzum fzmblzatum~ook.var.oCulatum~ook
.~铁皮石斛Dendlobzum Condzdum Wall.ex
Lindl.~黄草石斛Dendlobzum Chl}santhum Wall.~
金钗石斛Dendlobzum nobzle Lindl.的新鲜或干燥
茎O成分:金钗石斛茎含生物碱*主要为石斛碱
(dendrobine)*石斛次碱(nobilonine)*6-羟基石斛碱等O选用酸性染料分光光度法*在p~4.5缓冲液中*石斛碱盐的阳离子与溴甲酚绿阴离子结合成离子对并定量被氯仿提取*再加碱碱化*根据定量释放出的溴甲酚绿在一定波长处测定吸收度O
1实验材料和试剂~仪器
1.1石斛药材样品由本校生药标本室提供并鉴定1.2p~4.5缓冲溶液:0.2M邻苯二甲酸氢钾(p~4.0)*用0.2M氢氧化纳调至p~4.5;0.04%溴甲酚绿溶液:称取溴甲酚绿40.0mg*加100 mlp~4.5缓冲溶液溶解*滤过即得;0.01N氢氧化钠无水乙醇溶液*氯仿*无水乙醇(以上均为国产分析试剂)O
1.3721型分光光度计*上海第三分析仪器厂O
2标准曲线
精密称取石斛碱1.00mg置100ml容量瓶中加氯仿至刻度O精密量取1.0~2.0~3.0~4.0~5.0ml 分别置分液漏斗中*用氯仿准确稀释至10.0ml加入p~4.5缓冲液5.0m l和0.04%溴甲酚绿溶液1. 0ml*剧烈振摇3min*静置30min*氯仿层经氯仿浸泡处理并干燥后的药棉滤过*取续滤液6.0ml加0.01N氢氧化钠无水乙醇液1.0ml摇匀O以氯仿10.0ml同样操作*做空白对照O于波长620nm处分别测得吸收度见表1O
表1石斛碱浓度与溴甲酚绿吸收度的关系
石斛碱量(pg/10ml)1020304050吸收度0.0790.1760.2530.3430.415以石斛碱量为横坐标*吸收度纵坐标*石斛碱量在1*5pg/10ml范围内符合比尔定律*见图1O
图1石斛碱吸收标准曲线图
3显色稳定性
按样品测定项上操作*于氯仿提液加碱释放
染料后*间隔5~30~60~110~170min测其吸收度结果如表2O
表2放置时间(min)对溴甲酚绿吸收度的影响
石斛碱量(pg/10ml)即测53060110170 100.0770.0770.0760.0710.0460.036
200.1610.1640.1610.1550.1220.114
300.2460.2440.2370.2330.2080.206加碱后30min以内基本稳定*故应及时测定O
4样品测定
精密称取石斛粉(60目)0.500g*用适量氨水浸湿密塞放置30min*精密加入氯仿1000ml称重*置水溶回流加热2h*冷后称重;补充氯仿达原重量*过滤*精密吸取续滤液1.0ml*置10ml容量瓶中*加氯仿至刻度摇匀*从中吸取2.0ml置25ml 容量瓶中*加氯仿稀释至刻度*摇匀*为样品试液O 精密吸取样品试液10.0ml*同法加入缓冲溶液及溴甲酚绿试液*显色后*于620mm处测吸收度*并以石斛碱标准溶液(25mg ml-1)2.0ml置25ml容量瓶中*加氯仿稀释至刻度*再准确吸收10 ml同法显色*测吸收度*按标准品对照法计算总生物碱含量(以石斛碱计算)计算公式如下:
总生物碱含量%=A
样品
A标准品
>
C标准品
样品量>100%
5讨论与小结
D石斛碱量在一定浓度范围内符合朗伯比尔定律*故应控制样品的浓度O@加碱释放染料后在30min内基本稳定*故应及时测定O
(2000-10-26收稿)
42基层中药杂志2001年第15卷第3期
= ======================= Primary]ournal of Chinese
Materia Medica
石斛中总生物碱的含量测定方法研究
作者：徐宁
作者单位：安徽省安庆卫生学校
刊名：
基层中药杂志
英文刊名：PRIMARY JOURNAL OF CHINESE MATERIA MEDICA
年，卷(期)：2001,15(3)
被引用次数：12次
引证文献(12条)
1.汪曙.魏凤娟.蔡永萍.林毅霍山石斛杂交种与亲本有效成分积累规律的研究[期刊论文]-安徽农业科学
2010(7)
2.陈蕤.崔盛.陶宗娅三种川产石斛有效成分的测定及其分布规律研究[期刊论文]-西南农业学报 2010(3)
3.刘宁.孙志蓉.廖晓康.袁明贵.李兴玉.张宏桂不同采收期金钗石斛总生物碱及多糖质量分数的变化[期刊论文] -吉林大学学报（理学版） 2010(3)
4.黄琦.李菲.吴芹.石京山金钗石斛总生物碱对四氧嘧啶所致糖尿病大鼠的保护作用[期刊论文]-遵义医学院学报 2009(5)
5.叶磊.陈建真.罗小敏石斛属药用植物质量控制研究进展[期刊论文]-江西中医药 2007(6)
6.宋锡全.王素英.李海红滇产金钗石斛植株与细胞培养产生总生物碱含量分析[期刊论文]-贵州师范大学学报（自然科学版） 2007(2)
7.陈晓梅.肖盛元.郭顺星铁皮石斛与金钗石斛化学成分的比较[期刊论文]-中国医学科学院学报 2006(4)
8.陈晓梅.郭顺星4种内生真菌对金钗石斛无菌苗生长及其多糖和总生物碱含量的影响[期刊论文]-中国中药杂志 2005(4)
9.唐金刚金钗石斛快速繁殖及其生物碱累积的研究[学位论文]硕士 2005
10.陈晓梅真菌诱导子对铁皮石斛原球茎生长及次生代谢产物的影响[学位论文]博士 2004
11.陈晓梅真菌诱导子对铁皮石斛原球茎生长及次生代谢产物的影响[学位论文]博士 2004
12.陈晓梅真菌诱导子对铁皮石斛原球茎生长及次生代谢产物的影响[学位论文]博士 2004
本文链接：https://www.doczj.com/doc/bf17420975.html,/Periodical_jczyzz200103013.aspx