阳离子的鉴定
一、铵离子的鉴定
铵离子的鉴定之一
[原理] 铵盐跟碱反应，生成氨气，这是铵盐的共性
NH4++OH—==NH3↑+ H2O
[用品] 表面皿、铵盐溶液、6mol/L氢氧化钠溶液、红色石蕊试纸
[操作]
在表面皿的中央滴几滴铵盐溶液，再滴加6mol/L氢氧化钠溶液到碱性。混均匀后用沾有红色湿润石蕊试纸的表面皿覆盖，放在水浴中微热，石蕊试纸变成蓝色，说明原溶液里有NH4+。
铵离子的鉴定之二
[原理] NH3与奈斯勒试剂(K2HgI4)反应，生成橙黄或红棕色（依NH3含量多少）沉淀，NH4+在强碱条件下，能生成NH3。
[用品] 滤纸、毛细吸管、滴管、奈斯勒试剂、10%NaOH溶液
[操作]
在滤纸片上滴一滴10%NaOH溶液，待液滴渗入滤纸中后，再加一滴试液，使其发生沉淀并等待液滴渗入滤纸中。用毛细吸管沾少量水垂直放在斑点中心，将NH4+扩散到周围，在外围的水渍区上加K2HgI4溶液一滴，黄橙或红棕色斑点证明NH4+的存在。
[备注] 本法可检出μg（微克）的NH4+。
二、钠离子的鉴定
钠离子的鉴定之一
[原理] 钠离子的焰色反应为黄色
[用品] 试管或点滴盘、铂丝环、煤气灯或酒精灯、1∶1盐酸、蒸馏水
[操作] 取试液1滴于试管中，加1∶1盐酸2滴，用约1mL水稀释，以铂丝环沾取进行焰色反应，浓烈的黄色火焰表示Na+存在。
[备注]
此反应的灵敏度很大，μg（微克）的Na+就会使火焰呈浅黄色，因此盐酸、蒸馏水及其它试剂中的微量Na+都有反应，必须做空白试验，并火焰的黄色要浓烈，才能确定Na+的存在。
钠离子的鉴定之二
[原理] 锑酸根离子[Sb(OH)6]—和Na+作用，会有白色晶状的锑酸钠沉淀出现Na[Sb(OH)6]。
Na++[Sb(OH)6]—=Na[Sb(OH)6]↓
利用这种性质可以检验Na+的存在。
[用品] 试管、试管架、滴管、玻璃棒、·L—1NaCl溶液、·L—1K[Sb(OH)6]
溶液。
[操作]
1、在试管中加入·L—1NaCl溶液。
2、往此试管中滴加·L—1K[Sb(OH)6]溶液，观察实验现象。生成白色晶状沉淀。
如果没有沉淀产生，可以用玻璃棒摩擦试管内壁，放置十分钟，可再进行观察。
[备注]
检验钠离子时，溶液应保持弱减性。因为在酸性条件下，会产生白色无定形的锑酸沉淀。
H++[Sb(OH)6]—=H[Sb(OH)6]↓
这样会干扰对Na[Sb(OH)6]的判断。所以，只有得到结晶状沉淀时，才能肯定有Na+离子的存在。
锑酸钠Na[Sb(OH)6]沉淀的特征是，有颗粒状晶体，较重，能很快沉到试管底部，或在试管壁上结晶。
也可以与H[Sb(OH)6]沉淀对比，判断其沉淀是不是Na[Sb(OH)6]。为此，可在试管中加几滴饱和K[Sb(OH)6]溶液和12mol·L— 1盐酸，即有白色胶状
H[Sb(OH)6]沉淀出现。把它与Na[Sb(OH)6]沉淀相比较，就可以掌握Na[Sb(OH)6]沉淀的特征。
钠离子的鉴定之三
[原理] 在中性或醋酸溶液中，Na+与醋酸双氧铀锌生成黄绿色晶体。
Na++Zn2++3UO22++9Ac—+9H2O
=NaAc·Zn(Ac)2·3UO2(Ac)2·9H2O↓(黄绿)
[用品] 试管或点滴盘、滴管、玻璃棒、醋酸双氧铀锌、醋酸
[操作] 1滴未知试剂加4滴醋酸双氧铀锌试剂，用玻璃摩擦管壁，观察沉淀产生。
[备注] 该晶体的溶解度较大，且易形成过饱和溶液，可加入适量的乙醇，降低它的溶解度，用玻璃棒摩擦壁的目的是破坏它的过饱和状态，促进晶体快速生成。
三、钾离子的鉴定
钾离子的鉴定之一
[原理] 在中性或弱酸性条件下，K+与Na3[Co(NO2)6]试剂生成亚硝酸钴钠二钾黄色沉淀
2K++Na++Co(NO2)63—K2Na[Co(NO2)6]↓(黄)
[用品] 试管、试管架、点滴盘、滴管、亚硝酸钴钠试剂
[操作] 向试管中加入1滴未知溶液，再加几滴亚硝酸钴钠试剂，出现黄色沉淀，确定含K+。
[备注] NH4+与Na3[Co(NO2)6]试剂生成类似的黄色沉淀，干扰K+的鉴定，因此鉴定K+时必须先除去NH4+。
钾离子的鉴定之二
[原理] 亚硝酸铜铅钠（以醋酸铜、醋酸铅和亚硝酸钾的混合溶液）与K+反应生成K2PbCu(NO2)6黑色立方晶体
[用品] 表面皿、滴管、亚硝酸铜铅钠试剂、显微镜
[操作] 滴取少量未知液在表面皿上，用微火烘干、冷却，滴加Na2PbCu(NO2)6试剂1滴，在显微镜下观察，黑色立方晶体表示K+的存在。
[备注] NH4+、Cs+、Rb+都有类似的晶体生成，以K+的晶体最大。
四、钠离子和钾离子的鉴定
[原理]
当钠和钾（或它们的化合物）在高温火焰中灼烧时，其原子中的电子被激发，由于接受了能量，从较低的能级跃迁到较高的能级。但被激发到较高能级的电子不稳定，随即又从较高能级回到较低能级，这时便会发出一定波长的光来，使火焰呈现特征的颜色，原子结构不同，发出光的波长就不同，焰色也各异。钠的焰色反应为黄色，钾的焰色反应为紫色。
[用品] 酒精灯、铂丝（或镍丝）、蓝色钴玻璃、玻璃棒、KCl溶液、NaCl溶液、KCl固体、NaCl固体、浓盐酸、蒸馏水
[操作]
1、把铂丝（或镍丝）的一端熔入玻璃棒中，另一端弯成小圈。
2、用浓盐酸浸渍铂丝，再用蒸馏水冲净，在酒精灯的氧化焰中灼烧，如火焰接近无色，即可进行焰色反应。否则应继续用盐酸浸渍，灼烧，直到接近无色为止。
3、用洁净的铂丝分别蘸取KCl、NaCl溶液，放在酒精灯的氧化焰中灼烧，观察它们的焰色有何不同。
4、再用洁净的铂丝蘸水后，粘上KCl、NaCl小颗粒放在酒精灯的氧化焰中灼烧，观察它们的焰色。
[备注] 观察钾的焰色，要隔着蓝色的钴玻璃去观察。因蓝色钴玻璃可以滤去灯焰本身和钠杂质所产生的黄光。
五、镁离子的鉴定
镁离子的鉴定之一
[原理] 把Mg2+转化成Mg(OH)2，而Mg(OH)2能溶于浓NH4Cl溶液。
[用品] MgCl2溶液、2mol·L—1NaOH溶液，滴管、试管、饱和NH4Cl溶液
[操作] 在试管中盛1mLMgCl2溶液，滴入NaOH溶液，产生白色沉淀，再加入少量饱和NH4Cl溶液，沉淀即溶解。
镁离子的鉴定之二
[原理] 把Mg2+转化成MgNH4PO4白色晶粒状沉淀。
Mg2++NH4++PO43—=MgNH4PO4↓
[用品] 试管、滴管、MgCl2溶液、2mol·L—1盐酸、·L—1Na2HPO4溶液、
2mol·L—1氨水
[操作] 在试管中加入1mLMgCl2溶液，再加几滴盐酸和1mLNa2HPO4溶液，再滴入氨水。振荡试管，有白色晶粒沉淀出现。
镁离子的鉴定之三
[原理] 把Mg2+转化成Mg(OH)2，而Mg(OH)2遇镁试剂沉淀由白色转成天蓝色。
[用品] MgCl2溶液、2mol·L—1NaOH溶液，镁试剂、试管、滴管
[操作] 在试管中加1mLMgCl2溶液，滴入NaOH溶液至明显有白色沉淀生成，再滴加镁试剂后，沉淀转变为天蓝色。
[备注] 镁试剂的配制方法：
0.001g对硝基苯偶氮间苯二酚染料溶于100mL1mol·L—1NaOH溶液中。
六、钙离子的鉴定
钙离子的鉴定之一
[原理] 在弱酸性条件下，Ca2+和草酸铵(NH4)2C2O4试剂生成白色沉淀
Ca2++C2O42—=CaC2O4↓(白)
[用品] 试管、试管架、滴管、3%(NH4)2C2O4溶液、稀醋酸
[操作] 中性试液用稀醋酸酸化，加入3%(NH4)2C2O4溶液生成白色沉淀
[备注] 由于Ba2+、Sr2+也有草酸盐沉淀，应再做焰色反应进一步证实，将所得沉淀过滤，弃去溶液，在沉淀上加6mol·L—1HCl
1滴，用铂丝环沾取灼烧，砖红色火焰证明Ca2+存在。
钙离子鉴定法之二
[原理] 氯宗代C[1-(6-氯-3-吲唑偶氮)-2-羟基荼-3-羧酸]配成氨水，乙醇溶液，与Ca2+形成红紫色络合物。
[用品] 试管或点滴盘、滴管、氯宗代C试剂、乙醚、浓氨水
[操作] 在1~2滴试液中加入浓氨水1滴，氯宗代C试剂1滴，乙醚1滴，摇匀，出现红紫色（放置后呈絮状沉淀），证实有Ca2+存在。
[备注] 该法非常灵敏，可检出μg(微克)的Ca2+，最低浓度~。
[用品] 试管或点滴盘、滴管、氯宗代C试剂、乙醚、浓氨水
[操作] 在1~2滴试液中加入浓氨水1滴，氯宗代C试剂1滴，乙醚1滴，摇匀，出现红紫色（放置后呈絮状沉淀），证实有Ca2+存在。
[备注] 该法非常灵敏，可检出(微克)的Ca2+，最低浓度~。
钙离子的鉴定之三
[原理] Ca2+的焰色反应为砖红色
[用品] 烧杯、铂丝环、1∶1盐酸、蒸馏水
[操作]
1、把铂丝先放在稀盐酸里洗净后，在无色火焰上灼烧，再在蒸馏水中洗净，又在火焰上灼烧，直到铂丝火焰上灼烧时呈无色。
2、用清洁的铂丝蘸取含有Ca2+的盐溶液，放在酒精灯无色火焰上灼烧，火焰呈橙红色，证明溶液里有Ca2+。
[备注] 如果不用铂丝，把脱脂棉绕在玻棒上，蘸取Ca2+的盐溶液，在酒精灯火焰上灼烧，焰色反应能持续较长时间，效果更好。
七、钡离子的鉴定
[原理] Ba2+与K2CrO4试剂反应生成黄色BaCrO4沉淀
Ba2++ CrO42—=BaCrO4↓
[用品] 试管、试管架、滴管、铂丝环、酒精灯、10%K2CrO4溶液、6mol·L—1盐酸
[操作] 取中性试液加入10%K2CrO4溶液，生成黄色沉淀
[备注]
1、为了与其它黄色铬酸盐沉淀区别开，应做焰色反应证实。将铬酸钡沉淀过滤出，弃出滤液，在沉淀里加上6mol·L—1HCl1滴，用铂丝环沾取灼烧，黄绿色火焰出现证明Ba2+的存在。
2、也可以用稀H2SO4或Na2SO4溶液作试剂与Ba2+生成不溶于稀HCl的白色沉淀。
八、钙离子、锶离子、钡离子的鉴定
钙离子、锶离子、钡离子的鉴定之一
[原理] 钙、锶、钡及其挥发性化合物在受热时会发出各自特定波长的可见光，钙为砖红色；锶为洋红色，钡为黄绿色。
[用品] 铂丝（如无铂丝可用无锈铁丝或曲别针代替）、直角玻璃管（一端为Ф2mm 的尖嘴）、酒精灯、CaCl2晶体、Sr(NO3)2晶体、BaCl2晶体。
[操作]
酒精灯焰因受空气的影响而跳动不定，且氧化焰（即火焰顶部）总呈黄色，使得焰色反应不够准确。如果有一根直角玻璃管，一端为内径约2mm的尖嘴，使尖嘴沿水平方向靠近酒精灯火焰底部约2cm处，用嘴经过导管吹气，可以获得淡蓝色接近酒精灯的火焰（如图）。
用沾过水的铂丝分别蘸取CaCl2、Sr(NO3)2、BaCl2的晶体粉末并放在上述酒精灯淡蓝色火焰上灼烧。用铂丝蘸取另一种晶体粉末，必须把铂丝用蒸馏水、稀盐酸预先洗净。当把洗后的铂丝放在火焰中灼烧时，只见铂丝红热而无任何焰色反应，则表示铂丝已经洗净。
如果使用无锈铁丝或拉直的曲别针代替铂丝，则铁丝最好是一次性使用，以确保焰色反应的准确性。
钙离子、锶离子、钡离子的鉴定之二
[原理]同之一
[用品]酒精喷灯、胡椒粉瓶三个（分别盛细粉状CaCl2、Sr(NO3)2、BaCl2）
[操作]
点燃酒精灯，分别把胡椒粉瓶中的CaCl2、Sr(NO3)2、BaCl2晶体粉末轻轻撒在喷灯火焰上，则可看到CaCl2为砖红色；Sr(NO3)2为洋红色；BaCl2为淡绿色。
九、铝离子的鉴定
铝离子的鉴定之一
[原理]氢氧化铝吸附铝试剂（三羧基金红酸的铵盐(NH4)3C19H11O2(COO)3、商品称阿罗明拿）后，可变成红色沉淀，以此能鉴别铝离子的存在。反应过程为：
[用品]蒸馏水、3mol·L—1氯化铝溶液、6mol·L—1氨水、%铝试剂（商品称阿罗明拿）
烧杯
[操作]取500mL烧杯加入23mL的蒸馏水，和13mL3mol·L—1的氯化铝溶液，再慢慢加入6mol·L—1的氨水，产生白色沉淀氢氧化铝。加入的铝试剂，氢氧化铝吸附了铝试剂，使溶液中的沉淀变为玫瑰色。
[备注]
铝的检验试验，如有Cr3+、Fe3+、Cu2+、Ca2+存在时，会使检验受到干扰，因此溶液中如有上述离子时，用氨水可除去Cr3+、Cu2+，用(NH4)2CO3可除去钙离子。
铝离子的鉴定之二
[原理]利用Al(OH)3的两性鉴别Al3+，在过量强碱溶液中先生成氢氧化铝沉淀，继而沉淀溶解，溶液酸化后又重新生成氢氧化铝沉淀。
Al3++3OH—=Al(OH)3↓（白）
Al(OH)3+OH-=AlO2-+2H2O
AlO2—+H++H2O=Al(OH)3↓（白）
[用品]试管、滴管、1∶1HCl、10%NaOH溶液
[操作]向试液中滴加10%NaOH溶液，先出现白色沉淀，继而沉淀溶解，再向溶液中滴加1∶1盐酸，又重新出现沉淀。
[备注]Zn2+、Pb2+、Sn(Ⅱ)、Sn（Ⅳ）等离子也具有类似的性质，所以鉴别Al3+时，这些离子不能共存。
铝离子的鉴定之三
沉淀色料，在3ppm的含Al3+的溶液中可检出μg(微克)的铝。
[用品]滤纸、滴管、酒精灯、茜素红的酒精饱和溶液、浓氨水。
[操作]试液1滴滴到滤纸上，在浓氨水瓶口上方（不要沾污瓶口）熏一分钟，滴加1滴茜素红的酒精饱和溶液，用小火将纸片烘干，红色斑点表示铝的存在，注意试液遇氨显紫色，烤干后紫色即消失。
十、铅离子的鉴定
PbCrO4能溶于稀碱溶液中，酸化后又析出黄色沉淀
[用品]试管、滴管、1∶1HCl、10%NaOH溶液、10%K2CrO4溶液、稀醋酸
[操作]取试样少许，用稀醋酸调到中性或弱酸性，滴加10%K2CrO4溶液几滴，产生黄色沉淀，证明有Pb2+存在。
[备注]如有Ba2+存在，也能生成BaCrO4黄色沉淀，但BaCrO4不溶于稀碱溶液，可用于鉴别Ba2+和Pb2+。
十一、铜离子的鉴定
铜离子的鉴定之一
[原理]Cu2+与亚铁氰化钾（K4[Fe(CN)6]）反应生成红棕色亚铁氰化铜沉淀。
沉淀不溶于稀酸，但溶于氨水，生成深蓝色四氨合铜络离子，进一步确证Cu2+的存在。
[用品]试管、滴管、6mol·L—1HCl、10%K4Fe(CN)6溶液
[操作]向试液中滴2～3滴6mol·L—1HCl，再滴加10%K4Fe(CN)6溶液，出现红棕色沉淀证明Cu2+的存在。
[备注]如有Fe3+共存时，因Fe3+与亚铁氰化钾试剂生成深蓝色化合物而干扰Cu2+的鉴定，应预先分离或掩蔽Fe3+。
铜离子的鉴定之二
[用品]试管1∶1氨水
[操作]在试液中滴加2～3滴1∶1氨水，先生成浅蓝色沉淀，氨水
铜离子的鉴定之三
[原理]CuCl2+H2S=CuS↓+2HCl
[用品]氯化铜溶液，H2S发生装置。
[操作]在氯化铜溶液里通入H2S，生成硫化铜黑色沉淀。
[备注]硫化铜的溶解度很小，在酸性溶液和碱性溶液里都能沉淀出来。
十二、银离子的鉴定
银离子的鉴定之一
[原理]Ag+与稀盐酸反应，生成白色的AgCl沉淀，沉淀溶于氨水中，用稀硝酸酸化后，AgCl沉淀再次出现。
Ag++Cl─=AgCl↓（白）
[用品]滴管、试管或点滴盘、过滤器、滤纸、1∶1HCl、1∶3HNO3、浓氨水。
[操作]取试液2滴加1∶1盐酸酸化，析出无定形白色沉淀，取部分悬浊液用日光照射，沉淀感光变为蓝紫或蓝黑色的银。另一部分悬浊液过滤，弃去滤液，
于沉淀上加浓氨水，沉淀溶解，再加入1∶3HNO3，白色沉淀重新出现，证明Ag+存在。
Hg2Cl2或PbCl2都不溶于氨水。
2．中学阶段Ag+的鉴定只要求生成的AgCl不溶稀硝酸即可。
银离子的鉴定之二
[用品]试管或点滴盘、滴管、10%K2CrO4溶液、稀氨水
[操作]取近中性的试液1滴，加入10%K2CrO4溶液1滴，出现砖红色沉淀，证明有Ag+存在。
扰Ag+的鉴定。可加入稀氨水，使Ag2CrO4沉淀溶解，BaCrO4、PbCrO4不溶而分离。
十三、锌离子的鉴定
锌离子的鉴定之一
[原理]许多金属的硫化物是黑色沉淀，而ZnS是白色沉淀。可利用此性质来鉴定Zn2+。
Zn2++H2S=ZnS↓（白）+2H+
[用品]试管、硫化氢发生器或氢硫酸（新配）、1∶1氨水
[操作]向试液中滴加2～3滴氨水，在向此溶液中通入H2S气体，有白色沉淀产生，证明有Zn2+存在。
[备注]试液不能有生成硫化物或氢氧化物沉淀的金属离子共存。
锌离子的鉴定之二
[原理]利用氢氧化锌的两性进行Zn2+的鉴定，在过量的强碱溶液中，
氧化锌沉淀，氢氧化锌沉淀溶解于氨水。
Zn2++2OH—=Zn(OH)2↓（白）
[用品]试管、滴管、1∶1HCl、10%NaOH、浓氨水
[操作]向试液中滴加10%NaOH溶液，先出现白色沉淀而沉淀溶解，再向溶液中滴加1∶1HCl，又重新出现沉淀，向沉淀中加入浓氨水，沉淀又溶解。
[备注]Al3+、Pb2+、Sn(Ⅱ)、Sn(Ⅳ)等离子也具有类似的性质，但
十四、汞（II）离子的鉴定
汞（Ⅱ）离子的鉴定之一
[原理]在汞盐溶液中通以H2S，最终是生成黑色HgS沉淀。
在此反应过程中，首先形成是一种白色沉淀，这种沉淀是由两分子硫化汞和一分子汞盐所形成的复合物(HgCl2·2HgS)。
3HgCl2+2H2S===HgCl2·2HgS+4HCl
继续通入H2S，此种复合物将由白色变成棕色，最后变为黑色。因此时已转变为硫化物。
HgCl2·2HgS + H2S === 3HgS + 2HCl
[用品]HgCl2溶液、H2S发生器、试管
[操作]在试管中注入少量待检验溶液，然后逐步通入硫化氢，有黑色沉淀生成（沉淀由白色→棕色→黑色）。证明溶液中含有汞（Ⅱ）离子。
汞（Ⅱ）离子的鉴定之二
[原理]
在汞盐溶液中加入氯化亚锡溶液，则汞离子被还原为亚汞离子。
在溶液中若有Cl—离子存在，则立即有白色Hg2Cl2沉淀发生。
Hg22++2Cl—===Hg2Cl2↓
若将过量亚锡离子加到溶液中，则有金属汞析出，结果白色沉淀变成灰黑色汞。
Hg2Cl2 + Sn2+ === 2Hg + Sn4+ + 2Cl-
[用品]HgCl2溶液、SnCl2溶液、试管、滴管。
[操作]在试管中注入少量待检验溶液，然后逐滴滴入SnCl2溶液，有白色HgCl2沉淀产生。当滴加过量SnCl2溶液，则白色沉淀转变成灰黑色金属汞。证明溶液中含有汞（Ⅱ）离子。
十五、铁（III）离子的鉴定
铁（Ⅲ）离子的鉴定之一
[原理]Fe3+与亚铁氰化钾反应生成深蓝色沉淀，俗称普鲁士蓝
4Fe3++3[Fe(CN)6]4—=Fe4[Fe(N)6]3↓（深蓝色）
[用品]试管、滴管、2mol·L—1HCl、10%K4Fe(CN)6溶液
[操作]取少许试液滴加几滴2mol·L—1盐酸酸化，加入10%K4Fe(CN)6溶液几滴，出现深蓝色沉淀，证明Fe3+存在。
铁（Ⅲ）离子的鉴定之二
[原理]Fe3+与SCN—反应生成红色可溶性络合物[Fe(SCN)]2+、[Fe(SCN)2]+、Fe(SCN)3、[Fe(SCN)4]—、[Fe(SCN)5]2—等。随着试剂的浓度增加，溶液颜色逐渐变深，反应的灵敏度也增加。
[用品]试管、滴管、2mol·L—1HCl、10%KSCN溶液
[操作]向试液中加少许2mol·L—1盐酸酸化，再加10%KSCN溶液，出现红色证明Fe3+存在。
十六、铁（II）离子的鉴定
铁（Ⅱ）离子的鉴定之一
滕布尔蓝。
3Fe2++2[Fe(CN)6]3—=Fe3[Fe(CN)6]2↓（深蓝色）
[用品]试管、滴管、2mol·L—1盐酸、10%K3Fe(CN)6溶液，FeCl2溶液。
[操作]取少许滴加几滴2mol·L-1盐酸酸化，再滴加10%K3[Fe(CN)6]溶液几滴，发现深蓝色沉淀，证明有Fe2+存在。
铁（Ⅱ）离子的鉴定之二
[原理]碱金属氢氧化物与亚铁盐溶液反应，生成白色胶状氢氧化亚铁沉淀。
Fe2++2OH—=Fe(OH)2↓
（白）
白色沉淀会立即变为绿色，最后为红褐色，这是由于被空气中的氧气氧化所致。
4Fe(OH)2+O2+2H2O=4Fe(OH)3
（红褐色）
[用品]FeCl2溶液、NaOH溶液、试管、滴管。
[操作]在一支试管里注入少量待检验溶液，用滴管吸取NaOH溶液，将滴管端插入试管里溶液液面之下，再逐滴滴入氢氧化钠溶液。
可以看到，开始的时候析出一种白色的絮状沉淀，这就是氢氧化亚铁。但它会迅速变成灰绿色，最后变成红褐色。这是因为氢氧化亚铁在空气里氧化成了氢氧化铁。证明溶液中含Fe2+。
十七、钴（II）离子的鉴定
钴（Ⅱ）离子的鉴定之一
[原理]碱金属氢氧化物与二价钴盐溶液生成蓝色碱式盐的沉淀
CoCl2+NaOH===Co(OH)Cl↓+NaCl
（蓝色）
这种沉淀和过量的碱金属氢氧化物反应，即转变为粉红色氢氧化钴。
Co(OH)Cl+NaOH Co(OH)2+NaCl
（粉红色）
[用品]试管、滴管、酒精灯、试管夹、CoCl2溶液、NaOH溶液
[操作]在试管中注入少量待检验溶液，再逐滴加入NaOH溶液，可观察到有蓝色沉淀生成。继续加入NaOH溶液，并加热，观察到蓝色沉淀转变为粉红色。
证明试液中含钴（Ⅱ）离子。
钴（Ⅱ）离子的鉴定之二
[原理]将二价钴盐溶液与亚硝基R盐(Nitroso-R-salt)反应，溶液呈红褐色。
[用品]试管、滴管、CoCl2溶液、NH4Ac溶液、亚硝基R盐。
[操作]在试管中注入少量试液。再滴入NH4Ac溶液，然后加入亚硝基R盐，观察到溶液呈红褐色。证明试液中含有Co2+
[备注]亚硝基R盐的结构式为：
十八、镍离子的鉴定
[原理]丁二酮肟（二乙酰二肟）在二价镍盐的氨性溶液中（或醋酸钠溶液中）生成玫瑰红色的结晶沉淀。
[用品]试管、滴管、NiSO4溶液、NH4Ac溶液、丁二酮肟酒精溶液
[操作]在试管中加入少量试液和NH4Ac溶液，混合后，再加入丁二酮肟的酒精溶液。观察到有玫瑰红色的结晶沉淀生成。表示有Ni2+离子存在。
锰(Ⅱ)离子的鉴定
[原理]Mn2+离子在强酸性溶液(HNO3或H2SO4)中被NaBiO3氧化成MnO4—，溶液出现深紫红色。
2MnSO4+5NaBiO3+16HNO3===
2HMnO4+5Bi(NO3)3+NaNO3+2Na2SO4+7H2O
[用品]试管、滴管、MnSO4溶液、HNO3、BaBiO3固体。
[操作]在试管中加入少量试液，滴入几滴HNO3，再加入固体NaBiO3，观察到溶液呈现深紫红色。证明试液中含有Mn2+
[备注]如果溶液为棕色的NaBiO3所掩蔽而不易察见，可放置两分钟，待停止起泡后，分离，再进行观察。若溶液颜色过于深浓，可加水稀释，紫红色会自显。
酵母菌的分离筛选方法 酵母菌多数为腐生，一般生长在含糖较高，偏酸的环境中，在通气条 件下，液体培养比霉菌快。菌落与细菌相似，较大而厚，多数不透明， 菌落光滑湿润粘稠，乳白色，少数干皱，边缘整齐，呈红色或粉红色， 圆形椭圆卵形，液体培养基生长会生成沉淀或菌膜。 含高糖浓度（45%），分离蜂蜜酵母，球拟酵母属等嗜高渗透压的酵母。 1.培养基： 葡萄糖 50g/L 尿素1g/L （NH4）2SO41g/L L L MgSO41g/L FeSO4 L 酵母膏 L 孟加拉红 L （富集用） ★乳酸-马铃薯-葡萄糖培养基：马铃薯200g/L 葡萄糖（霉菌用蔗 糖）20g/L 乳酸5ml马铃薯去皮切片200g，加水煮沸30min，纱布 过滤，补足蒸馏水1L，PH自然。（去掉乳酸可用于酵母菌和霉菌培养 用）（富集用） ★麦芽汁培养基：1：4水60-65℃水浴3-4小时，4-6层纱布过 滤，可加一个蛋清加水20mL调均生泡沫，倒入糖化液中，煮沸过滤， 10-15波林，氯霉素L 121℃ 20min （分离保存 用） 灭菌后加入300u/ml硫酸链霉素（集菌用） ★虎红（孟加拉红）培养基：蛋白胨L 葡萄糖10g/L L L 孟加拉红L 氯霉素L 琼脂15g/L PH自然 （分离纯化用）
★豆芽汁培养基：黄豆芽100g/L 葡萄糖50g/L PH自然。100g黄豆芽，加水煮沸30min，纱布过滤，补足蒸馏水1L 察氏培养基：主要培养霉菌观察形态用 蔗糖30g/L 硝酸钠3g/L 磷酸氢二钾1g/L 氯化钾L 硫酸镁 L 硫酸亚铁L 琼脂15-20g/L 121℃ 20min PH自然 一般分离黄酒酵母酒精酵母使用曲汁培养基，啤酒酵母用酒花麦汁培养基，葡萄酒酵母用葡萄汁培养基。 2.集菌：研究酵母菌生态和某种基物或样品中的酵母菌区系，一般不进行集菌，以免改变其中不同种类数量间的对比，将样品制成菌悬液按常规法分离。若从样品中分离特定种类时先集菌。集菌发酵力强菌株，加酸性含糖的培养基，酸性豆汁，必要时注入高浓度的酒精（13-17%），霉菌在液体中形成菌丝体，酵母不形成菌丝，25-28℃2-3d，遇到菌丝体用接种环挑去烧掉，去掉上清液，取沉淀酵母一至两环移植另一液体培养基中，集菌连续两至三次才能完成，要配合镜检。 实例：将待分离的样品10g（ml）放入90ml无菌水或生理盐水/150ml 三角瓶（玻璃珠），摇床振荡20-30min，取上清液接种于酸性培养液（乳酸-马铃薯-葡萄糖培养基酸性麦芽汁或酸性豆芽汁）25-28℃2-3d，培养过程中若出现菌丝体跳出烧掉，集菌连续两至三次，培养液变成混浊，产生菌膜和沉淀物。镜检：美兰染液染色，活菌可还原美兰染液，菌体无色。 3.筛选：
传统酸面团中细菌与酵母菌的分离与鉴定 刘同杰1，李云1，吴诗榕1，金乐天1，2，张国华1，杨浣漪1，何国庆1 （1.浙江大学生物系统工程与食品科学学院，浙江省食品微生物技术重点实验室，浙江大学馥莉食品研究院，浙江杭州 310058）（2.朝鲜韩德秀平壤轻工业大学，朝鲜平壤） 摘要：为进一步描述我国传统面食发酵剂的理化性质和菌落组成，收集了北方地区6份发酵剂样品，测定了其酸度和菌落总数，并对分离、纯化、初筛后得到的75株细菌和60株酵母菌进行了测序鉴定。结果显示，样品pH值范围为3.73~5.46，总滴定酸度为8.3~19.8 mL；乳酸菌和酵母菌的计数结果分别为8.35±0.07~9.75±0.12 Log cfu/g，6.31±0.22~8.68±0.04 Log cfu/g。鉴定出包括短乳杆菌 （Lactobacillus brevis）、植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）和旧金山乳杆菌（Lactobacillus sanfranciscensis）在内的乳酸菌8种；酵母菌4种，其中优势菌为酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）；其他细菌6种，主要为解淀粉芽孢杆菌（B. amyloliquefaciens）、地衣芽孢杆菌（B. licheniformis）和醋杆菌。结果表明，我国传统面食发酵剂菌相复杂，以酵母菌和乳酸菌为主，还包括芽孢杆菌、醋酸杆菌在内的多种其他细菌，甚至可能含有致病菌。通过比较细菌和酵母在不同酸面团样品中的分布，发现不同来源样品的微生物种类组成存在差异。 关键词：酸面团；菌相分析；16S/26S rDNA测序；生物多样性；系统发育树 文章篇号：1673-9078(2014)9-114-120 DOI: 10.13982/j.mfst.1673-9078.2014.09.020 Isolation and Identification of Bacteria and Yeast from Chinese T raditional Sourdough LIU T ong-jie1, LI Yun1, WU Shi-rong1, JIN Le-tian1,2, ZHANG Guo-hua1, YANG Huan-yi1, HE Guo-qing1 (1.College of Biosystems Engineering and Food Science of Zhejiang University, Zhejiang provincial key laboratory of Food Microbiology, Fuli Institute of Food Science of Zhejiang University, Hangzhou 310058, China) (2.DPRK Han Dexiu Pyongyang University of light industry, Pyongyang, DPRK) Abstract: In this study, the physicochemical properties and microbial profile of traditionally fermented sourdough for Chinese steamed bread were examined. Six samples of sourdough were collected from northern China. Acidity and colony counts were measured. After isolation, purification, and preliminary screening, 75 strains of bacteria and 60 strains of yeasts were obtained and identified by DNA sequencing. The pH was between 3.73 and 5.46 and total titratable acid (TTA) values ranged from 8.3 to 19.8 mL. In all the samples, the number oflactic acid bacteria (LAB) and yeasts ranged from 8.35±0.07 to 9.75±0.12 Log cfu/g and 6.31±0.22 to 8.68±0.04 Log cfu/g, respectively. Eight LAB species, including Lactobacillus brevis, L. plantarum, and L. sanfranciscensis, and six other bacterial species, including Bacillusamyloliquefaciens, Bacilluslicheniformis, and three species of Acetobacter, were identified. Among the four identified yeasts, the dominant species was Saccharomyces cerevisiae. The results indicate that Chinese traditional starter cultures for flour-based food are complex bacterial floras dominated by LAB and yeast, in addition to several other microorganisms, including Bacillus spp., Acetobacter spp., and even pathogenic bacteria. Differences in microbial species compositions among LAB and yeasts in samples from different areas were identified by comparing species distributions in different sourdough samples. Key words: sourdough; elucidation of microbial flora structure; 16S/26S rDNA sequencing; biodiversity; phylogenetic tree 我国传统的面食发酵剂类似于西方发酵面包用的酸面团，在我国一般被称为“老面”、“酵子”、“面收稿日期：2014-04-17 基金项目：国家自然科学基金资助项目（31371826） 作者简介：刘同杰（1989-），男，在读博士，研究方向：传统发酵食品通讯作者：何国庆（1957-），男，博士，教授，研究方向：食品生物技术及发酵工程肥”等[1]，具有悠久的使用历史。上世纪80年代，即发活性干酵母被引入我国，因其使用便捷，传统面食发酵剂逐渐被取代，但直到现在仍有很多地区尤其农村地区，仍然使用其制备馒头等主食，因使用传统面食发酵剂制备的馒头品质更优。究其原因，活性干酵母为单一菌种发酵，与传统发酵剂的混菌体系发酵相比，发酵的馒头风味平淡、香气不佳，总体的感官品 114
实验05 常见阴离子的分离与鉴定 一、教学要求 1、使学生掌握常见阴离子的分离和鉴定方法； 2、离子检出的基本操作。 二、注意事项 利用物质性质的不同特点，根据溶液中离子共存情况，应先通过初步试验或进行分组试验，以排除不可能存在的离子，然后鉴定可能存在的离子。 初步性质检验一般包括：（一）、试液的酸碱性试验；（二）、是否产生气体的试验；（三）、氧化性阴离子的试验；（四）、还原性阴离子的试验；（五）、难溶盐阴离子试验； 经过初步试验后，可以对试液中可能存在的阴离子作出判断，然后根据阴离子特性反应作出鉴定。 三、实验仪器药品 离心机、点滴盘、试管、试管夹、酒精灯、蒸发皿、 浓HNO3、6mol.L－1HNO3、浓HCl、2mol.L－1HCl、浓H2SO4、2mol.L－1 H2SO4、浓H3PO4、6mol.L－1HAc、2 M NaOH、6mol.L－1NaOH、NH3 (6mol.L－1)、pH试纸、碘化钾试纸、醋酸铅试纸、对氨基苯磺酸，a-萘胺，K4[Fe（CN）6]、ZnSO4,AgNO3,Na2[Fe(CN)5NO]、澄清Ba（OH）2, CdCl2（或Cd（NO3）2）(NH4)2MoO4 Na2CO3、NaCl、KBr、KI、Na3PO4、BaCl2、NaSO4, NaSO3 NaS2O3 NaNO3, NaNO2Na2S C12水、I2水、CC14、0.1mol.L－1 KMnO4、
四、实验现象及有关化学反应式 （一）、常见阴离子的鉴定 1．CO32-的鉴定 向Na2CO3溶液中加酸，观察现象。 将沾有饱和Ba(OH)2溶液的玻璃棒伸入上述试管，置于溶液上方，观察实验现象。 2.NO3-的鉴定 取1小粒硫酸亚铁铵晶体于点滴盘上，加1滴NO3-，2滴浓硫酸，观察实验现象 3Fe2+ + NO3- + 4H+ === 3Fe3+ + NO + 2H2O [Fe2+(H2O)6]2+ + NO === [Fe2+(NO)(H2O)5]2+ (棕色) + H2O 3.NO2-的鉴定 取2滴NO2-试液于点滴板上，加1滴2mol·L-1HAc溶液酸化，再加1滴对氨基苯磺酸和1滴α-荼胺。如有玫瑰红色出现，示有NO2-存在。 4. SO42-的鉴定 SO42- + Ba2+ === BaSO4↓（白色），示有SO42-存在。 5. SO32-的鉴定 SO32-溶液酸化后滴加1滴高锰酸钾溶液，观察实验现象 6. S2O32-的鉴定 向硝酸银溶液中滴加1滴硫代硫酸钠溶液，观察实验现象 7. PO43-的鉴定 磷酸钠溶液酸化后加入(NH4)2MoO4,微热，观察实验现象 PO43- + 3NH4+ + 12 MoO42- + 24H+ === (NH4)3 PO4?12 MoO3?6H2O↓+6H2O 8. S2-的鉴定 取1滴S2-试液于离心试管中，加1滴2 mol·L-1NaOH溶液碱化，再加1滴亚硝酰铁氰化钠试剂，如溶液变成紫色，示有S2-存在。 4Na+ +S2- + [Fe(CN)5NO]2-== Na4[Fe(CN)5NOS] 9. Cl-的鉴定 氯化钠溶液中滴加硝酸银，产生沉淀后离心分离，用6 M氨水溶解，最后重新用HNO3酸化观察实验现象。 10. I-的鉴定 取1滴碘离子溶液用1滴酸酸化，加几滴CCl4溶液，然后逐滴滴加氯水，用力震荡，每滴加1滴氯水注意观察有机层颜色变化。 11. Br-的鉴定 取1滴溴离子溶液用1滴酸酸化，加几滴CCl4溶液，然后逐滴滴加氯水，用力震荡，每滴加1滴氯水注意观察有机层颜色变化。
※实验六酵母RNA的分离及组分鉴定 【实验目的】 了解核酸的组分，并掌握鉴定核酸组分的方法。 【实验原理】 酵母核酸种RNA含量较多。RNA可溶于碱性溶液，在碱提取液中加入酸性乙醇溶液可以使解聚的核糖核酸沉淀。由此即得到RNA的粗制品。 核糖核酸含有核糖、嘌呤碱、嘧啶碱和磷酸各组分。加硫酸煮沸可使其水解，从水解液中可以测出上述组分的存在。 鉴定依据：磷酸与定磷试剂反应产生蓝色物质。核糖与苔黑酚作用产生绿色物质。嘌呤碱与硝酸银能产生白色的嘌呤碱银化合物沉淀。 【实验器材】 150 ml锥形瓶、水浴、量筒、漏斗及抽虑瓶、吸管7、滴管8、试管及试管架9、烧杯、离心机、漏斗 【试剂和材料】 1、0.04 mol/L氢氧化钠溶液； 2、酸性乙醇溶液：将0.3毫升浓盐酸加入30毫升乙醇中； 3、95%乙醇； 4、乙醚； 5、1.5 mol/L硫酸溶液； 6、浓氨水； 7、0.1 mol/L硝酸银溶液； 8、三氯化铁浓盐酸溶液：将2 ml 10% 三氯化铁溶液（用FeCl3·6H2O配制）加入到400 ml浓盐酸中； 9、苔黑酚（地衣酚）乙醇溶液：溶解6 g苔黑酚于100 ml 95% 乙醇中（可在冰箱中保存一个月）； 10、定磷试剂：（1）17% 硫酸溶液：将19 ml浓硫酸（比重1.84）缓缓加入到83 ml 水中（2）2.5% 钼酸铵溶液：将2.5 g钼酸铵溶于100 ml水中（3）10% 抗坏血酸溶液：10 g抗坏血酸溶于100 ml水中，贮棕色瓶保存（溶液呈淡黄色时可用，如呈深黄或棕色则失败，需纯化抗坏血酸）。临用时将上述3种溶液与水按如下比例混合。17% 硫酸溶液：2.5%
实验二十五常见阳离子的分离与鉴定 一、实验目的： 1、巩固和进一步掌握一些金属元素及其化合物的性质； 2、了解常见阳离子混合液的分离和检出方法。 二、实验内容： （一）、碱金属和碱土金属离子的鉴定 1、Na+的鉴定 Na++Sb（OH）6-====NaSb(OH)6 2、K+的鉴定 K++HC4H4O6-====KHC4H4O6 3、Mg2+的鉴定 Mg2+与对硝基苯偶氮间苯二酚（镁试剂Ⅰ）在碱性介质中反应生成蓝色螯合物沉淀。除碱金属外，其余阳离子都不应存在。 4、Ca2+的鉴定 Ca2++C2O42-=====CaC2O4↓（白色沉淀不溶于6MHAC而溶于2MHCl）5、Ba2+的鉴定 Ba2++CrO42-====BaCrO4↓（黄色）(pH==4) （二）、p区和ds区部分金属离子的鉴定 1、Al3+的鉴定： Al3+与铝试剂（Ⅰ）在pH6---7介质中反应，生成红色絮状螯合物沉淀。 2、Sn2+的鉴定 SnCl2+2HgCl2+2HCl====Hg2Cl2↓（白色）+H2SnCl6 Hg2Cl2+SnCl2+2HCl====2Hg↓（黑色）+H2SnCl6 3、Pb2+的鉴定 2PbCrO4+2H+====2Pb2++Cr2O72-+2H2O PbCrO4+4OH-====[Pb(OH)4]2-+CrO42-
PbCrO4沉淀溶于NaOH（与Ag+、Ba2+、Bi3+不同）及浓HNO3，难溶于稀HNO3，不溶于氨水（与Ag+、Cu2+不同），难溶于稀HAC。 4、Sb3+的鉴定 Sb3++4H++6Cl-+2NO2-====[SbCl6]-+2NO+2H2O [SbCl6]-与罗丹明B反应形成难溶于水的离子缔合物。 5、Bi3+的鉴定 硫脲CS(NH2)2与Bi3+在0.4---1.2MHNO3介质中反应形成鲜黄色络合物， 6、Cu2+的鉴定 K4[Fe（CN）6]与Cu2+在中性或酸性介质中反应，生成红棕色Cu2[Fe(CN)6]沉淀。此沉淀难溶于稀HCl、HAC及稀NH3水，但易溶于浓氨水: Cu2++[Fe(CN)6]4-====Cu2[Fe(CN)6] ↓（红棕色） 7、Ag+的鉴定 [Ag(NH3)2]Cl+2H+====AgCl+2NH4+ 8、Zn2+的鉴定 Zn2++[Hg(SCN)4]2-====Zn[Hg(SCN)4]↓ Zn2+的HAC性试液与(NH4)2[Hg(SCN)4]反应，在稀溶液中生成无色尖劈状和X 形晶体，在浓溶液中形成多枝的羊齿植物形Zn[Hg(SCN)4]晶体。 9、Cd2+的鉴定 Cd2++S2-====CdS↓（黄色） 10、Hg2+ （三）、部分混合离子的分离和鉴定
阳离子的鉴定方法
或 NH 4++OH -=NH 3+H 2O NH 4+浓度低时，没有沉淀产生，但溶液呈黄色或棕色 [HgI 4]2-分解析出HgS↓。大量I -存在使反应向左进行，沉淀溶解 Mg 2+ 1.取2滴Mg 2+试液，加2滴2mol·L -1NaOH 溶液，1滴 镁试剂（Ⅰ），沉淀呈天蓝色，示有Mg 2+ 。对硝基苯偶氮苯二酚 俗称镁试剂（Ⅰ）,在碱性环境下呈红色或红紫色，被Mg(OH)2吸附后则呈天蓝色。 1. 反应必须在碱性溶液中进行，如[NH 4+]过大，由于它降低了[OH -]。因而妨碍Mg 2+的捡出，故在鉴定前需加碱煮沸，以除去大量的NH 4+ 2. Ag +、Hg 22+、Hg 2+、Cu 2+、Co 2+、Ni 2+、Mn 2+、Cr 3+、Fe 3+及大量Ca 2+干扰反应， 应预先除去 0.5μg 10μg·g －1 (10ppm) 2.取4滴Mg 2+试液，加2滴6mol·L -1氨水，2滴2mol·L -1 （NH 4）2HPO 4溶液，摩擦试管内壁，生成白色晶形 MgNH 4PO 4·6H 2O 沉淀，示有Mg 2+ ： Mg 2++HPO 42-+NH 3·H 2O+ 5H 2O=MgNH 4PO 4·6H 2O↓ 1. 反应需在氨缓冲溶液中进行， 要有高浓度的PO 43-和足够量的NH 4 + 2. 反应的选择性较差，除本组外，其他组很多离子都可能产生干扰 30μg 10μg·g －1 (10ppm) Ca 2+ 1.取2滴Ca 2+试液，滴加饱和（NH 4）2C 2O 4溶液，有白色的CaC 2O 4沉淀形成，示有Ca 2+ 1. 反应在HAc 酸性、中性、碱性中进行 2. Mg 2+、Sr 2+、Ba 2+有干扰，但MgC 2O 4溶于醋酸，CaC 2O 4不溶，Sr 2+、Ba 2+在鉴定前应除去 1μg 40μg·g －1 (40ppm) 2.取1～2滴Ca 2+试液于一滤纸片上，加1滴6mol·L -1NaOH ，1滴GBHA 。若有Ca 2+存在时，有红色斑点产生，加2滴Na 2CO 3溶液不褪，示有Ca 2+ 乙 二醛双缩[2-羟基苯胺]简称GBHA ，与Ca 2+在PH=12～12.6的溶液中生成红色螯合物沉淀 ： 1. Ba 2+、Sr 2+在相同条件下生成 橙色、红色沉淀，但加入Na 2CO 3后，形成碳酸盐沉淀，螯合物颜色变浅，而钙的螯合物颜色基本不变 2. Cu 2+、Cd 2+、Co 2+、Ni 2+、Mn 2+、UO 22+等也与试剂生成有色螯合物而干扰，当用氯仿萃取时，只有Cd 2+的产物和Ca 2+的产物一起被萃取 0.05μg 1μg·g －1 (1ppm)
阳离子的鉴定方法与介绍 什么是阳离子 又称正离子，是指失去外层的电子以达到相对稳定结构的离子形式。常见的阳离子有：Na+、K+、NH4+、Mg2+、Ca2+、Ba2+、Al3+、Fe2+、Fe3+、Zn2+、Cu2+、Ag2+等。 阳离子基本简介 离子是指原子由于自身或外界的作用而失去或得到一个或几个电子使其达到最外层电子数为8个或2个的稳定结构。这一过程称为电离。电离过程所需或放出的能量称为电离能。与分子、原子一样，离子也是构成物质的基本粒子。 原子失去或获得电子后所形成的带电粒子叫离子,例如钠离子Na+。带电的原子团亦称离子,如硫酸根离子。某些分子在特殊情况下，亦可形成离子。 一般说来,原子核最外层电子数小于4的通常形成阳离子(就是带正号的),大于4的通常形成阴离子(也就是带负号的),还有一个规律,原子核最外层电子数也就决定了该元素的化合价,就是正号或者负号前的数. 阳离子是指原子由于外界作用失去一个或几个电子，使其最外层电子数达到8个或2个电子的稳定结构。原子半径越大的原子
其失电子能力越强，金属性也就越强。属性最强的金属元素是钫(Fr)。 带一个或多个正电荷的离子称为正离子，亦称阳离子。 (放)电子的功能 而原子的半径愈大，原子的失电子能力较强，金属性也就较强;相反，原子的半径愈小，原子的失电子能力愈弱，因此金属性也较弱。而原子的半径相同，最外层电子数目愈少，失电子能力较强;相反，最外层电子数目愈多，失电子能力较弱。 金属性最强的元素是钫(Fr)，也是失(放)电子的能力最强的金属。 阳离子是带正电荷的离子，核电荷数=质子数核外电子数，所带正电荷数等于原子失去的电子数。 阳离子的书写方法就是在该离子的元素或原子团负号右上角表上所带电荷数与+ 号，如钠离子：Na+、三价铁离子：Fe3+、铵根NH4+、银铵配离子：[Ag(NH3)2]+等 阳离子的鉴定方法 Na 鉴定方法：
知识要点： 1. 除杂题： 解答除杂质一类的题目时，要注意三原则；三要领；五种常用的方法。 三原则：①不引入新杂质；②不减少被提纯物质的质量；③杂质便于分离。 三要领：①根据物理性质或化学性质的差异；②确定除杂质方法；③选择适宜试剂。 除杂质思路分析方法： （1）沉淀法：加入一种试剂将被除去的杂质变为沉淀，再用过滤法除去。 （2）化气法：加热或加入一种试剂将杂质变为气体逸出。 （3）置换法：利用置换反应的原理将杂质除去。 （4）转纯法：将被除去的杂质变为提纯的物质。 （5）吸收法：常用于气体的提纯。 在掌握了以上除杂质的原则、要领、方法后，解答题目时要审清题目要求，分析理顺思路且与题目要求吻合，才能准确解题。 2. 混合物的分离： （1）可溶性与难溶性物质的混合物——常用溶解、过滤、蒸发三步操作加以分离，分别得到纯净物。如：粗盐的提纯；BaSO4和Na2SO4的混合物。 （2）两种物质均溶于水，但两种物质的溶解度一种随温度变化大，另一种变化不大时，可考虑——结晶法。即冷却热饱和溶液的方法加以分离。如：NaCl和KNO3的混合物。 （3）两种物质均溶于水时，可考虑用化学方法分离。如BaCl2和NaCl的混合物。可将混合物先溶于水，加入适量Na2CO3溶液，得到BaCO3和NaCl溶液。BaCl2+ Na2CO3=BaCO3↓+2NaCl。将沉淀过滤出，洗净后在沉淀中加入适量盐酸溶液，又得到BaCl2溶液，CO2逸出。BaCO3+2HCl =BaCl2+H2O+CO2↑。最后分别将NaCl溶液和BaCl2溶液蒸发，分别得到纯净的NaCl固体和] BaCl2固体。
注意：用化学方法或用物理方法进行混合物分离时，要区别除杂质与分离物质的不同点是：除杂质时只要求把杂质除掉、保留原物质即可；而混合物分离是几种物质用一定的方法分开，原混合物中各成分都必须保留。 3. 物质的鉴别： 鉴别是通过化学实验将几种不同特性的物质区别开来。如鉴别两瓶无色溶液哪瓶是NaCl或KNO3。我们只要把NaCl溶液中的Cl-检验出来，即可认定NaCl溶液，另一瓶则溶液.（1）常见离子鉴别的特效试剂 H+和OH-：紫色石蕊试液或pH试纸。 OH-：无色酚酞试液（可鉴别碱性溶液）——变红。 Cl-：AgNO3溶液和稀HNO3——有白色沉淀。 SO42-：BaCl2溶液和稀HNO3——有白色沉淀。 CO32-：稀HCl和石灰水——有CO2↑。 NH4+：强碱溶液（NaOH）——有NH3↑。使湿润红色石蕊试纸变蓝。 （2）特征离子关系图 （3）物质鉴别的原则 ①操作简便：能用物理方法鉴别的不用化学方法。能用一种试剂鉴别的不用多种试剂。 ②现象明显：使待检物质的现象对比度较大。 ③防止干扰：鉴别Cl－和SO42－时，只能用BaCl2溶液不能用AgNO3溶液。 （4）物质鉴别的思路和方法 ①气体鉴别：一看颜色，二用试纸，三用火点，四加试剂。 ②固体、液体鉴别：一看颜色，二看气体，三辨沉淀。 ③一种试剂的鉴别： A. 几种溶液含不同阳离子时，常选用Ba（OH）2溶液或NaOH溶液做鉴别试剂。 B. 几种溶液含不同阴离子时，常选用强酸做鉴别试剂。 C. 几种溶液酸碱性不同时，常选用紫色石蕊做鉴别试剂。 D. 几种物质是金属或金属氧化物时，常选用稀强酸做鉴别试剂。 E. 一种试剂与四种溶液反应时，应是现象对比度大。多数是有沉淀、有气体，既有沉淀又有气体、沉淀颜色不同，无明显现象。 F. 当给定的一种试剂不能鉴别出被检物时，可从已鉴别出的物质中找出一种试剂再鉴别。 ④不同试剂的鉴别： A. 观察法：根据物理性质中颜色、气味、状态、溶解性等进行鉴别。 B. 热分解法：根据不同物质的热稳定性，利用产物的不同性质特征进行鉴别。 C. 相互作用法：根据两两混合后的不同现象进行鉴别。 4. 物质的鉴定： 鉴定是根据待检物质的特性，通过不同的实验将物质的各组分逐一检验出来，从而确定某物质。鉴定与“用实验方法确定或证明”等用语意义相同。如：用化学方法证明某白色固体是硫酸铵。在鉴定时不但要用化学实验检验白色固体是否是铵盐（含NH4+），还要检验它
酵母菌的分离与纯化 小组组员: 一、实验目的 1.学习分离纯化酵母菌的技术与方法 2.了解培养基的配置与灭菌技术 3.增强无菌操作技术的意识 二、基本原理 从混杂的微生物群体获得只含某一种某一株微生物的过程叫做微生物分离与纯化，酵母菌常见于含糖份比较高的环境中，如果园土、菜园土及果皮等的表面。多数酵母菌喜欢偏酸条件，最适pH为4.5-6.0.酵母菌生长迅速，容易分离培养。马丁氏培养基是一种用来分离真菌的选择性培养基。此培养基是由葡萄糖、蛋白胨、KH2PO4、MgSO4·7H2O、孟加拉红(玫瑰红，Rose Bengal)和链霉素等组成。其中葡萄糖主要作为碳源，蛋白胨主要作为氮源，KH2PO4和MgSO4·7H2O作为无机盐，为微生物提供钾、磷和镁离子。而孟加拉红和链霉素主要是细菌和放线菌的抑制剂，对真菌无抑制作用，因而真菌在这种培养基上可以得到优势生长，从而达到分离真菌的目的。 三、实验材料及用具 1.用品：苹果、葡萄糖、琼脂、水、1%孟加拉红水溶液、马铃薯 2.设备与器材：1ml的无菌吸管、无菌培养皿等. 四、实验步骤 1、马铃薯培养基的配置 培养基成分:马铃薯 40克、蔗糖（葡萄糖） 4克、琼脂 4克、水 200毫升、 pH 自然。配置方法: （1）配制20%马铃薯浸汁：取去皮马钓薯40g，切成小块，加水200ml.加热煮游30 min ，用纱布过滤，然后补足失水互所需体积。121Pa灭菌30min.即成20%马铃馨漫汁，贮存备用。 （2）配制时，按每100ml 马铃薯浸汁加入2g蔗糖，加热煮沸后加入4克琼脂，继续加热融化并补足失水。 （3）分装、加塞，包扎。 （4）高压蒸汽灭菌：121Pa灭菌30min
常见离子的定性鉴定方 法 Document serial number【NL89WT-NY98YT-NC8CB-NNUUT-NUT108】
阳离子的鉴定方法 Na+1．取2滴Na+试液，加8滴醋酸铀酰试剂： UO2(Ac)2+Zn(Ac)2+HAc,放置数分钟，用玻璃棒摩擦器壁，淡黄色的晶状沉淀出现，示有Na+：3UO22++Zn2++Na++9Ac－ +9H2O=3UO2(Ac)2·Zn(Ac)2·NaAc·9H2O 1.在中性或醋酸酸性溶液中进行，强酸 强碱均能使试剂分解。需加入大量试 剂，用玻璃棒摩擦器壁 2.大量K+存在 时，可能生成KAc·UO2(Ac)2的针状结 晶。如试液中有大量K+时用水冲稀3倍 后试验。 Ag+、Hg2+、Sb3+有干扰， PO43 －、AsO 4 3－能使试剂分解，应预先除去 μg250μg·g－1 (250ppm) +试液与等体积的·L-1KSb(OH) 6试液混合，用玻璃棒摩擦器壁，放置后产生白色晶形沉淀示有Na+： Na++Sb(OH)6－= NaSb(OH)6↓ Na+浓度大时，立即有沉淀生成，浓度小时因生成过饱和溶液，很久以后（几小时，甚至过夜）才有结晶附在器壁1. 在中性或弱碱性溶液中进行，因酸能分解试剂 2. 低温进行，因沉淀的溶解度随温度的升高而加剧 3. 除碱金属以外的金属离子也能与试剂形成沉淀，需预先除去 K+ 1.取2滴K+试液，加3滴六硝基合钴酸钠(Na3[Co(NO2)6])溶液，放置片刻，黄色的K2Na[Co(NO2)6]沉淀析出，示有K+： 2K++Na++[Co(NO2)6]3－=K2Na[Co(NO2)6]↓1. 中性微酸性溶液中进行，因酸碱都能 分解试剂中的[Co(NO2)6]3- 2. NH4+与试 剂生成橙色沉淀(NH4)2Na[Co(NO2)6]而干 扰，但在沸水中加热1～2分钟后 (NH4)2Na[Co(NO2)6]完全分解， K2Na[Co(NO2)6]无变化，故可在NH4+浓度 大于K+浓度100倍时，鉴定K+ 4μg80μg·g－1 (80ppm) 2.取2滴K+试液，加2～3滴·L-1四苯硼酸钠Na[B(C6H5)4]溶液，生成白色沉淀示有K+：K++[B(C6H5)4]- = K[B(C6H5)4]↓1. 在碱性中性或稀酸溶液中进行 2. NH4+有类似的反应而干扰，Ag+、Hg2+的影 响可加NaCN消除，当PH=5，若有EDTA 存在时，其他阳离子不干扰。 μg 10μg·g－1 (10ppm) NH4+ 1. 气室法：用干燥、洁净的表面皿两块（一大、一小），在大的一块表面皿中心放3滴NH4+试液，再加3滴6mol·L-1 NaOH溶液,混合均匀。在小的一块表面皿中心黏附一小条潮湿的酚酞试纸，盖在大的表面皿上做成气室。将此气室放在水浴上微热2min，酚酞试 纸变红，示有NH4+这是NH4+的特征反应μg1μg·g－1 (1ppm) 2.取1滴NH4+试液，放在白滴板的圆孔中，加2滴奈氏试剂（K2HgI4的NaOH溶液），生成红棕色沉淀，示有NH4+： 或?NH4++OH- =NH3+H2O ??NH4+浓度低时，没有沉淀产生，但溶液呈黄色或棕色1 Fe3+、Co2+、Ni2+、Ag+、Cr3+等存在时， 与试剂中的NaOH生成有色沉淀而干扰， 必须预先除去 2.大量S2-的存在，使 [HgI4]2-分解析出HgS↓。大量I-存在使 反应向左进行，沉淀溶解 μg 1μg·g－1 (1ppm) Mg2+ 1.取2滴Mg2+试液，加2滴2mol·L-1NaOH溶液，1滴镁试剂（Ⅰ），沉淀呈天蓝色，示有Mg2+。对硝基苯偶氮苯二酚1. 反应必须在碱性溶液中进行，如 [NH4+]过大，由于它降低了[OH-]。因而 妨碍Mg2+的捡出，故在鉴定前需加碱煮 沸，以除去大量的NH4+ 2. Ag+、Hg22+、 Hg2+、Cu2+、Co2+、Ni2+、Mn2+、Cr3+、Fe3+及 大量Ca2+干扰反应，应预先除去 μg10μg·g－1 (10ppm)
阳离子的分离与鉴定 一. 实验目的 1. 掌握用两酸三碱系统分析法对常见阳离子进行分组分离的原理和方法。 2. 掌握分离、鉴定的基本操作与实验技能。 二. 实验原理 阳离子的种类较多，常见的有二十多种，个别检出时，容易发生相互干扰，所以一般阳离子分析都是利用阳离子某些共同特性，先分成几组，然后再根据阳离子的个别特性加以检出。凡能使一组阳离子在适当的反应条件下生成沉淀而与其它组阳离子分离的试剂称为组试剂，利用不同的组试剂把阳离子逐组分离再进行检出的方法叫做阳离子的系统分析。在阳离子系统分离中利用不同的组试剂，有很多不同的分组方案。如硫化氢分组法，两酸、两碱系统分组法。下面介绍一种以氢氧化物酸碱性与形成配合物性质不同为基础，以HCl、H2SO4、NH3 H2O、NaOH、(NH4)2S为组试剂的两酸三碱分组方法。本方法将常见的二十多种阳离子分为六组。 第一组：盐酸组Ag+，Hg22+，Pb2+ 第二组：硫酸组Ba2+，Ca2+，Pb2+ 第三组：氨合物组Cu2+，Cd2+，Zn2+，Co2+，Ni2+ 第四组：易溶组Na+，NH4+，Mg2+，K+ 第五组：两性组Al3+，Cr3+，Sb III、V，Sn II、IV 第六组：氢氧化物组Fe2+，Fe3+， Bi3+，Mn2+，Hg2+ 用系统分析法分析阳离子时，要按照一定的顺序加入组试剂，将离子一组一组沉淀下来，具体分离方法如下表。 表阳离子分组步骤 试液(用个别检出法鉴定NH4+、Fe2+、Fe3+) ( Hg ) (两性组) (氢氧化物组) (第三组硫化物) (第四组易溶组)AlO2?、Cr O42?Fe(OH)3、 K+、Na+、Mg2+、NH4+SbO43?、SnO32?MnO(OH)2、 NaBiO3、HgNH2Cl
酵母菌的分离鉴定、固定化及酒精发酵 吴英玲 10197020 10生物创新班 摘要：酵母菌喜欢酸性环境，可利用乳酸豆芽葡萄糖培养基富集培养酵母菌，然后在YPG培养基上用划线法分离纯化出酵母菌。将分离的酵母菌转接于YPG斜面培养基上培养，待长好后置于冰箱内 4 ℃下保存。用TTC显色剂及杜氏小管观察法筛选出发酵能力高的酵母菌。并通过菌落形态、细胞形态、生化分析及分子生物学手段进行微生物鉴定。采用PVA-海藻酸钠固定化技术固定酵母细胞进行酒精发酵。 关键词：酵母菌分离鉴定固定化酒精发酵 Abstract: Yeast like acid environment, the use of lactic acid glucose medium enrichment culture yeast, bean sprouts and purification by marking method on the YPG culture medium of yeast will transfer separation of the yeast in the YPG cant medium cultivation, staying long placed in the refrigerator after use the TTC chromogenic agent, save and duchenne tubular observation screen high fermentation ability by colony morphology of yeast cell morphological and biochemical analysis and molecular biology means to identify the microorganisms using PVA - sodium alginate immobilized technology fixed yeast cells for ethanol fermentation。 前言 酵母菌（yeast）是一类单细胞真菌。一般呈圆形、卵圆形、圆柱形，其菌落呈乳白色或红色，表面湿润、粘稠，易被挑起。酵母菌多数为腐生，专性或兼性好氧，广泛生长在偏酸性的潮湿的含糖环境中，例如水果、蔬菜、蜜饯的内部和表面以及在果园土壤中最为常见。酵母菌在有氧环境下将葡萄糖转化为水和二氧化碳，主要用于馒头、面包等食品发酵；在工业上，酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）将葡萄糖、果糖、甘露糖等单糖吸
阳离子的鉴定 一、铵离子的鉴定 铵离子的鉴定之一 [原理] 铵盐跟碱反应，生成氨气，这是铵盐的共性 NH4++OH—==NH3↑+ H2O [用品] 表面皿、铵盐溶液、6mol/L氢氧化钠溶液、红色石蕊试纸 [操作] 在表面皿的中央滴几滴铵盐溶液，再滴加6mol/L氢氧化钠溶液到碱性。混均匀后用沾有红色湿润石蕊试纸的表面皿覆盖，放在水浴中微热，石蕊试纸变成蓝色，说明原溶液里有NH4+。 铵离子的鉴定之二 [原理] NH3与奈斯勒试剂(K2HgI4)反应，生成橙黄或红棕色（依NH3含量多少）沉淀，NH4+在强碱条件下，能生成NH3。 [用品] 滤纸、毛细吸管、滴管、奈斯勒试剂、10%NaOH溶液 [操作] 在滤纸片上滴一滴10%NaOH溶液，待液滴渗入滤纸中后，再加一滴试液，使其发生沉淀并等待液滴渗入滤纸中。用毛细吸管沾少量水垂直放在斑点中心，将NH4+扩散到周围，在外围的水渍区上加K2HgI4溶液一滴，黄橙或红棕色斑点证明NH4+的存在。 [备注] 本法可检出μg（微克）的NH4+。
二、钠离子的鉴定 钠离子的鉴定之一 [原理] 钠离子的焰色反应为黄色 [用品] 试管或点滴盘、铂丝环、煤气灯或酒精灯、1∶1盐酸、蒸馏水 [操作] 取试液1滴于试管中，加1∶1盐酸2滴，用约1mL水稀释，以铂丝环沾取进行焰色反应，浓烈的黄色火焰表示Na+存在。 [备注] 此反应的灵敏度很大，μg（微克）的Na+就会使火焰呈浅黄色，因此盐酸、蒸馏水及其它试剂中的微量Na+都有反应，必须做空白试验，并火焰的黄色要浓烈，才能确定Na+的存在。 钠离子的鉴定之二 [原理] 锑酸根离子[Sb(OH)6]—和Na+作用，会有白色晶状的锑酸钠沉淀出现Na[Sb(OH)6]。 Na++[Sb(OH)6]—=Na[Sb(OH)6]↓ 利用这种性质可以检验Na+的存在。 [用品] 试管、试管架、滴管、玻璃棒、·L—1NaCl溶液、·L—1K[Sb(OH)6] 溶液。 [操作] 1、在试管中加入·L—1NaCl溶液。
一、常见阴离子的检验 1 ．阴离子的初步检验 ①与稀H2SO4 作用，试液中加入稀H2SO4 并加热，有气泡产生，可能有CO32- 、SO32- 、S2- 、NO2- 或CN- 存在，再根据气体的特性不同，再进行判断。 ②与BaCl2 的作用。 试液中加入BaCl2 溶液，生成白色沉淀，可能有SO42- 、SO32- 、PO43- 、S2O32- 根据沉淀性质不同进行检验。 ③与AgNO3+HNO3 作用。 试液中加入AgNO3 再加入稀HNO3 若为白色沉淀为Cl- 黄色沉淀可能有 I- 、Br- 和CN- 存在，若有黄色沉淀很快变橙、褐色，最后变为黑色，表示有S2O32- 存在，Ag2S 为黑色沉淀。 ④氧化性阴离子的检验 试液用H2SO4 酸化后，加入KI 溶液和淀粉指示剂，若溶液变蓝，说明有 NO2- 存在。 ⑤还原性阴离子检验 a 、强还原性阴离子与I2 的试验，试液用H2SO4 酸化后，加含0.1%KI 的I2- 淀粉溶液，若其蓝色褪去，可能有SO32- 、C2O42- 、S2O32- 、S2- 和CN- 等离子存在。 b、还原性阴离子与KMnO4 的试验，试液用H2SO4 酸化后，加入 0.03%KMnO4 溶液，若能褪色，可能有SO32- 、S2O32- 、S2- 、C2O42- 、Br- 、I- 、NO2- 等离子。 2 ．个别鉴定反应 ⑴SO42- 加入BaCl2 溶液生成BaSO4 白色沉淀，该沉淀不溶于稀HCl 或稀HNO3
Ba2++SO42- === BaSO4 ↓ ⑵SO32- a 、加入BaCl2 溶液生成BaSO3 白色沉淀，加入稀HCl ，沉淀溶解并放出有刺激性气味的气体SO2 Ba2++SO32- === BaSO3 ↓ BaSO3+2H+ === Ba2++H2O+SO2 ↑ b 、加入少量I2- 淀粉溶液，蓝色褪去 SO32-+I2+H 2O === SO42-+2I-+2H + ⑶Cl- 加入AgNO3 生成AgCl 白色沉淀，该沉淀不溶于稀HNO3 或稀 HCl ，但溶于浓NH3 · H2O AgCl+2NH3 · H2O === [Ag(NH3)2]++Cl -+2H2O ⑷Br- a 、加入AgNO3 生成淡黄色AgBr 沉淀，该沉淀不溶于HCl 或HNO3 中，微溶于浓NH3 · H2O 。 Ag++Br- === AgBr ↓ b 、加入新制氯水，振荡后再加入CCl4 ，继续振荡，无色CCl4 层变为红棕色。 Cl2+2Br- === 2Cl-+Br2 ⑸I- a 、加入AgNO3 生成AgI 黄色沉淀，该沉淀不溶于稀HNO3 和浓 NH3 · H2O 。
第四节第三组阳离子的分析 一、本组离子的分析特性 本组包括由7种元素形成的8种离子：Al3+、Cr3+、Fe3+、Fe2+、Mn2+、Zn2+、Co2+、Ni2+，称为铁组，它们的氯化物溶于水，在·L-1HCl溶液中不形成硫化物沉淀，只能在NH3-NH4Cl(pH≈9)溶液中与(NH4)2S或硫代乙酰胺反应生成硫化物或氢氧化物沉淀，按分组顺序称为第三组，按所用试剂称为硫化铵组。 1.离子的颜色——预测某些有色离子是否存在 常见阳离子中带有颜色的，除Cu2+以外，其余都集中到本组，而本组中只有Al3+和Zn2+无色。 作用：此性质可用作未知离子的预测。
应注意的问题： （1）当含量少时，即使溶液无色，也不能排除有少量有色离子的存在。 （2）当不同的颜色发生互补现象时，溶液虽然无色也不能排除有色离子的存在。 如Co2+:Ni2+=1:3 互补规律：（对角线互补为无色） 2.离子的价态 本组除Al3+与Zn2+外，都有两种以上的价态，如Fe(2,3)，Mn(2,3,4,5,6,7)，Cr(2,3,6),Co(2,3)，Ni(2,3)等。可应用于分离和鉴定反应之中。正因为这样，本组许多离子的分析反应都与其价态的变化有关，有的还有重要的分析意义。
氧化还原反应在分析中的应用 (1)分离离子：掩蔽或沉淀 以NaOH沉淀Co(OH)2时，因它的溶解度较大，且容易被过量的NaOH部分溶解为HCoO2-，所以沉淀不完全。为使沉淀完全，一般都将Co(OH)2氧化为Co(OH)3。Co(OH)2很容易被氧化，甚至放置在空气中都可逐渐转变为Co(OH)3。在实验条件下，通常是加Na2O2作为氧化剂： 2Co(OH)2+Na2O2+2H2O＝2Co(OH)3↓+2Na++2OH- (2)鉴定离子 Mn2+在稀溶液中接近无色，而MnO4-却有鲜明的紫红色。利用这一性质，可将Mn2+氧化为MnO4-而加以鉴定，灵敏度很高（m=1μg，c=16ppm）。 又如，Cr3+的鉴定方法之一，是先在碱性溶液中将它氧化为黄色的CrO42-（不够灵敏、受有色离子的干扰），然后再在酸性溶液中进一步氧化为蓝色的过氧化铬CrO5。这是铬比较特效的方法。