大蒜根尖染色体实验报告
一、实验目的与实验要求
1、掌握洋葱培养的方法，掌握利用秋水仙素诱导植物多倍体的方法。
2、掌握洋葱根尖制片的方法，复习染色、压片的基本操作。
3、通过对于有丝分裂相的观察，统计洋葱染色体数目，加深对于细胞有丝
分裂过程的理解。
4、对比进行多倍体诱导前后的洋葱根尖，理解四倍体与二倍体的区别，认
识微核和植物细胞分裂期的各形态特征。
5、体验开放式实验教学，培养生物实验意识，提高学习的主动性、获取实
验知识的能力和撰写实验报告水平。
二、实验方案
1、实验仪器
显微镜、载玻片、盖玻片、试管、烧杯、小塑料管、滤纸、刀片、解剖
针、滤纸等
2、实验药品
新鲜、健康的洋葱鳞茎一个；0.02%秋水仙素、1mol/L HCl、醋酸洋红染
液、卡诺氏固定液，碱性品红、乙酸，乙醇等。
3、实验原理
(1)洋葱的根尖
洋葱根尖的整体结构如右图，其中只有分生区的初生分生组织由于细胞始终处于持久而强烈的有丝分裂之中而作为我们的观察对象，
其余部分在制片时都应当尽量剔除来保证观察效果。
(2)多倍体的诱导
多倍体的诱导使用秋水仙素，秋水仙素可以阻止微管蛋白的聚合，从而使有丝分裂中期纺锤体不能正常形成，但是姐妹染色单体照常想
成，只是没有被拉向两级，于是染色体数目加倍。
各步骤的作用：固定液可以迅速杀死细胞，保持细胞形态在有丝分裂相。解离可以破坏细胞的胞间层（果胶），使细胞之间的联系变
松散，有利于压片和染色。漂洗可以洗去过量的盐酸，防止解离过度
破坏细胞结构或影响染色效果（盐酸是酸性，而醋酸洋红是碱性染料）。
(3)有丝分裂
完整的有丝分裂相包括G1期（合成前期）、S期（合成期）、G2期（合成后期）和M期（分裂期），其中G1期、S期和G2期合称间
期，细胞完成DNA的复制以及有丝分裂的准备，而M期又可以分为
前期、中期、后期和末期，为了形态观察的方便，本实验采用后一种
分法。如表一。
表一植物有丝分裂各时期特点
4、实验步骤
(1)将大蒜剥皮后放进垫了滤纸的培养基中，加入清水，放进25℃恒温
培养箱中2~3天，催化大蒜生根。
(2)选择根长0.5~1cm且不定根生长情况差不多的大蒜分为10组。
(3)在大蒜生根之后，先选取一些根尖放进卡诺式固定液中固定3个小时，
用Schiff氏试剂染色，镜检，观察染色体是否能染上色以及染色效果。
若染色效果不行，则重新配制Schiff氏试剂，直至染色效果良好，然
后将其贮存于4℃冰箱中准备使用。
(4)将分好组的大蒜分别用清水、50mg/L Gr6+、100mg/L Gr6+、150mg/L
Gr6+、30 mg/L 1,2,4-三氯苯、40 mg/L 1,2,4-三氯苯、50 mg/L 1,2,4-三
氯苯、浓度分别为50mg/L Gr6+和30 mg/L 1,2,4-三氯苯的混合液、
100mg/L Gr6+和40 mg/L 1,2,4-三氯苯的混合液、150mg/L Gr6+和50
mg/L 1,2,4-三氯苯的混合液培养24小时。清水组为对照组。
(5)在早上有丝分裂旺盛的时候，将处理过的大蒜根尖剪下，分别放入青
霉素小瓶中，加入卡诺氏固定液固定3个小时，然后放入4℃冰箱内
保存，以备使用。
(6)取出部分经过固定的根尖先用酒精和清水洗涤，加入1mol/L HCL覆
盖根尖，放入60摄氏度水浴锅内水浴加热7~10分钟，取出用清水洗
涤3次，每次5分钟。
(7)取出解离后的根尖，放在载玻片上，用刀片切下根尖乳白色的分生区
部分，滴加1滴Schiff氏试剂染色10分钟，然后盖上盖玻片，吸干
染液，并用镊子钝的一端在盖玻片上轻轻敲击，将细胞打散。
(8)将制备好的根尖放在显微镜下观察，统计微核数目、以及有丝分裂间
期、前期、中期、后期、末期细胞数目并计算有丝分裂指数以及微核
率。每组浓度细胞计数400个。
三、实验结果与数据处理
1、制片观察情况
图1 前期图2 后期
图3 末期图4 核崩解
图5 微核图6 双核
2、数据记录情况
表2 试验结果统计
前期数目中期数目后期数目末期数目微核数多核分裂数分组组别细胞总
数
50mg/L Cr6+ 1 384 2 0 1 2 6 9 5
2 398
3 0 2 1
4 12 6
1 379 8 0 6 6 0 1 20
50mg/L Cr6++
秋水仙素
2 395 5 0 4 4 2 2 1
3 100mg/L Cr6+ 1 401 0 0 0 0 0 5 5
2 396 0 0 0 0 0 2 2
100mg/L Cr6++
1 390 0 0 0 1 3 11 15
秋水仙素
2 389 0 0 0 0 0 8 0
清水 1 421 3 0 1 2 0 0 6
2 402 2 0 0 0 0 0 2
3、数据处理结果
表3 实验计算结果
分组30号% 前期中期后期末期微核多核分裂数
50mg/L Cr6+0.52±０．２８0±０0.26±０．１２0.52±０．２３ 1.56±０．１５ 2.34±０．５３ 1.30±０．５７50mg/L Cr6++秋
2.11±０．３３0±０ 1.58±０．２２ 1.58±０．４９0±０0.26±０．１２ 5.28±０．０１水仙素
100mg/L Cr6+0±０0±０0±０0±０0±０ 1.25±０．０５ 1.24±０．３８100mg/L Cr6++秋
0±０0±０0±０0.25±０．４３0.77±０．１０ 2.82±０．０９ 3.85±０．０７水仙素
清水0.71±０．０３0±０0.2４±０．１８0.47±０．１６0±０．０８0±０ 1.43±０．５３
图1 分裂期及比例图
四、实验结论
1、数据评价
a.由上面图表可以看出50mg/L C r6+与50mg/L C r6++秋水仙素相比，后者
分裂期的数目增多，微核数和多核数没有太大的变化。而100mg/L
的相比之下有所增加。
b.同是没有加秋水仙素的50与100mg的相比较，浓度增大微核和多核
数有增加。
2、原因分析
a.只有两个浓度，实验数据可比性不高。
b.压片不够熟练，导致计数不全面。
c.观察计数时存在计数误差。
五、实验心得体会
1．培养洋葱根尖时，水不可放多，待根尖长出后，使根尖分生区接触到水面即可；水至少一天一换，若有浑浊，立即更换。
2．剪下洋葱根尖时注意时间，正午时分最合适，因为此时洋葱根尖分生区有丝分裂最为活跃，此时固定，可以观察到最多的分裂相。
解离时间要控制好，时间太短，效果不够；时间太长，解离过度破坏细
胞。
3．漂洗不能少，染色时间要足够，否则染色不够深影响观察，但染色时间过长则细胞质也会部分被染色，影响观察效果
4．压片对于最终效果来说十分关键，需要尽力并用上多种手段，但是切记只可纵向压，不可横向搓。
5．这个实验关键在于压片，我们第一次压片不太好，力度没有足够会把细胞重叠在一起，不能计数，如果力度过大，细胞就会给压碎，细胞核
会被压出胞外，计数不准确，所以要多加练习。
植物染色体制片与观察实验报告（洋葱组） 姓名：蔡梦雅 1230170010 同组成员：曹鉴云陈锦容刘艳马彦霞 一、中文摘要：染色体（Chromosome），是细胞内具有遗传性质的物体，易被碱性染料染成深色，又叫染色质。其本质是脱氧核甘酸，是细胞核内由核蛋白组成、能用碱性染料染色、有结构的线状体，是遗传物质基因的载体。这里我们用洋葱染色体作为代表使用压片法制片并且进行观察。 二、关键词：染色体洋葱压片法 三、引言：洋葱（onion）是百合科（Liliaceae）葱属中以肉质鳞片和鳞芽构成鳞芽的2年生草本植物，其学名为Allium cepa L，染色体数为2n=2x=16。由表1和图1可见,洋葱的8对染色体中,有7对(第1~7对)染色体,臂比在1·01~1·70之间,为中部着丝点染色体,1对(第8对),臂比为4·74,为近端部着丝点且带随体的染色体;依据STEB-BINS[4]的核型分类标准,洋葱的染色体核型在遗传进化上属较古老的2A型。100多年来有关染色体与染色体组结构功能的研究一直是生命科学最活跃的研究领域之一，现今人们完成基因组测序后回到对染色体上进行基因定位和作图，因此有关染色体的研究在基因组合功能基因组时代都有重要意义，陈瑞阳教授历时25年的研究完成的《中国主要植物染色体研究》对我国2834种植物染色体数目进行了报道，完成了1045种植物的核型分析，积累了宝贵的染色体基础数据创建了我国植物染色体研究信息平台。研究染色体进化与生物进化的有不可分割的关系,国际对染色体的化学成分,DNA含量,碱基组成和以染色体数目、形态、结构、大小等为特征的核型进化与物种形成和演化关系的研究,为揭示生物进化趋势提供染色体方面的科学资料，总的来说对染色体的研究在各类学科领域内都有着重要的意义。国内外对洋葱的研究主要在其成分和药用方面，在细胞遗传上张自力和陈瑞阳等对洋葱的C带显示法进行过研究，田秋元等对洋葱的核型分析及有关制片方法进行了探讨。植物根尖的分生细胞的有丝分裂，每天都有分裂高峰时间，此时把根尖固定，经过染色和压片，再置放在显微镜下观察，可以看到大量处于有丝分裂各时期的细胞核染色体。我们设计了不同的实验方案探究如何制作优良的植物染色体玻片，掌握染色体技术。 四、材料与方法： 1.取材 洋葱（Aillum cepa）的鳞茎 2.实验器具和药品 2.1器具 a.载玻片 b.盖玻片 c.烧杯 d.量筒 e.培养皿 f.滤纸 g.玻璃棒 h.镊子i.手术刀 2.2药品 a.0.1mol/L醋酸钠溶液 b.0.25%秋水仙素 c.冰醋酸 d.无水乙醇 e.1mol/LHcl f.纤维素酶 g.果胶酶 h.卡宝品红 2.3试剂配制 卡诺固定液：用3份无水酒精，加入1份冰醋酸（现配现用）。 酸解液：一份无水乙醇与一份1mol/L 盐酸1:1进行配制。 酶解液：用0.4g的纤维素酶和0.15g的果胶酶溶解在20ml蒸馏水里。
遗传学实验小论文 题目：染发剂对大蒜根尖产生微核的浓度研究班级：10生本班 学号：2010061107 姓名：郑兴艳 指导老师：高坚强 日期：2012-10-20
染发剂对大蒜根尖产生微核的浓度研究 摘要： 大蒜根尖细胞微核技术是一种以染色体损伤及纺锤丝毒性等为测试终点的植物体细胞检测方法,因具有材料方便,培养简单、技术容易掌握、准确、快速、有明显剂量-效应等优点。测定大蒜根尖细胞中出现的微核率,以此分析染发剂的诱变性,从而判断其对遗传物质是否有毒性效应。我们用不同浓度的染发剂处理大蒜根尖细胞，统计微核千分率（微核细胞率）。对统计结果进行单因素分析得：染发剂对大蒜染色体是有显著影响的。 关键词：染发剂;大蒜根尖;微核; 正文: 微核是真核细胞中的一种异常结构，是由落后染色体形成的核形小块，游离于主核外，大小是主核的1/3以下[1]，它的折光率及细胞化学反应性质与主核一样，也具有合成DNA的能力[2]，已经证实，微核率的大小是和用药剂量或辐射累积效应呈正相关，所以微核测可用于化学物质的遗传毒性研究[3]。 随着人们生活水平的不断提高，美发护发已普遍为广大公众所接受，目前作为美发的主要产品之一的染发剂使用相当普及，使用范围几乎包括男女老少，主要以青年以上各年龄段为消费主体。为了了解其潜在的危害性并评价其安全性，我们按1999年卫生部卫生法制与监督司制定的《化妆品卫生规范》的要求进行[4]。选用了市场上常见的染发剂，以大蒜为材料，探索染发剂对大蒜根尖细胞微核的诱变效应。 微核的形成机理 据陈宝伟的研究分析[8]，微核的形成主要有三种方式：一是化学毒性物质导致，包括染色体断裂剂和非整倍体剂。前者可诱发染色体发生断裂的遗传毒性物质，后者可以使染色体和纺锤体联结发生障碍或纺锤体功能受损；二是核体出芽，即间期的细胞核向外形成瘤状突起，形成芽体最后脱离主核形成微核；三是放射线导致，放射线可以引起DNA损伤，产生错误修复的双链断裂，导致微核出现。 材料与方法
【实验题目】 染色体组型分析 【实验目的】 1. 掌握染色体组型分析的各种数据指标。 2. 学习染色体组型分析的基本方法。 3．对照标准图型，学习识别人体各对染色体的带型特征。 4．初步掌握人体染色体组型带型分析方法。 5．了解染色体组型与带型分析的意义。 【实验材料与用品】 1.器材：直尺、剪刀、胶水、计算器、白纸 2.材料：人体细胞染色体放大图 【实验原理】 染色体组型又称核型，是指将动物、植物、真菌等的某一个体或某一分类群（亚种、种、属等）的体细胞内的整套染色体，按它们相对恒定的特征排列起来的图像。核型模式图是指将一个染色体组的全部染色体逐个按其特征绘制下来，再按长短、形态等特征排列起来的图像。 （一）描述染色体的四个参数： 1．相对长度= 每条染色体长度 单倍常染色体之和+X 2．臂指数= 长臂的长度 q 短臂的长度 p 为了更准确地区别亚中部和亚端部着丝粒染色体，1964年Levan 提出了划分标准： ① 1.0-1.7之间，为中部着丝粒染色体（M ） ② 1.7-3.0之间，为亚中部着丝粒染色体（SM ） ③ 3.0-7.0之间，为压端部着丝粒染色体（ST ） ④ 7.0以上，为端部着丝粒染色体（T ） ×100 （相对长度可以用来表示每条染色体的长度） ×100 （臂指数可以用来确定臂的长度）
3．着丝粒指数 = 短臂的长度 p ×100 （着丝粒指数可以决定着丝粒的相对位置）染色体全长 p+q 按Levan划分标准: ① 50.0-37.5之间为M ② 37.5-25.0之间为SM ③ 25.0-12.5之间为ST ④ 12.5-0.0之间为T 4．染色体臂数（NF）：根据着丝粒的位置来确定。 a．端着丝粒染色体（T），NF=1； b．中部、亚中部、亚端部着丝粒染色体（M，SM，ST），NF=2。 （二）人类体细胞染色体的分类标准及其主要特征 染色体组型及分群依据：主要根据染色体的相对长度，着丝粒的位置，其次是臂的长短，以及次级缢痕或随体的有无等方面。 分组排队原则：着丝粒类型相同，相对长度相近的分一组；同一组的按染色体长短顺序配对 排列；各指数相同的染色体配为一对；可根据随体的有无进行配对；将染色体按长短排队， 短臂向上。 染色体组型图的应用
洋葱根尖染色体有丝分裂观察与多倍体诱导 一、实验目的 1、掌握洋葱培养的方法，掌握利用秋水仙素诱导植物多倍体的方法。 2、掌握洋葱根尖制片的方法，复习染色、压片的基本操作。 3、通过对于有丝分裂相的观察，统计洋葱染色体数目，加深对于细胞有丝分裂过程的理解。 4、对比进行多倍体诱导前后的洋葱根尖，理解四倍体与二倍体的区别。 二、实验原理 （一）有丝分裂 完整的有丝分裂相包括G1期（合成前期）、S期（合成期）、G2期（合成后期）和M期（分裂期），其中G1期、S期和G2期合称间期，细胞完成DNA的复制以及有丝分裂的准备，而M期又可以分为前期、中期、后期和末期，为了形态 观察的方便，本实验采用后一种分法。 观察有丝分裂，重点在于观察 染色体的形态。在细胞分裂前期，细 胞核解体，染色质凝聚显现出染色体 的形态；在前中期，染色体散乱地分 布于细胞的中部；在中期，纺锤体形 成，染色体受到微管的牵引，着丝粒 成行排列于赤道板上；在后期，染色 体受到动粒微管的牵引，向细胞两级 运动；在末期，染色体重新解螺旋， 细胞核重新形成。 （二）洋葱的根尖 洋葱根尖的整体结构如右图，其中只有分生区的初生分生组织由于细胞始终处于持久而强烈的有丝分裂之中而作为我们的观察对象，其余部分在制片时都应当尽量剔除来保证观察效果。 （三）多倍体的诱导 多倍体的诱导使用秋水仙素，秋水仙素可以阻止微管蛋白的聚合，从而使有丝分裂中期纺锤体不能正常形成，但是姐妹染色单体照常想成，只是没有被拉向两级，于是染色体数目加倍。 （四）各步骤的作用 1.固定液可以迅速杀死细胞，保持细胞形态在有丝分裂相。 2.解离可以破坏细胞的胞间层（果胶），使细胞之间的联系变 松散，有利于压片和染色。
大蒜根尖微核试验 摘要 微核简称(MCN)，是真核生物细胞中的一种异常结构，往往是细胞经辐射或化学药物的作用而产生。本实验我们用生活中和实验室里的多种诱变剂来处理大蒜根尖细胞，通过压片镜检来观察统计大蒜分生区细胞内微核的数目，检测不同诱变剂的诱变强度。 前言 微核简称(MCN)，是真核生物细胞中的一种异常结构，往往是细胞经辐射或化学药物的作用而产生。在细胞间期微核呈圆形或椭圆形，游离于主核之外、大小应在主核1／3以下。微核的折光率及细胞化学反应性质和主核一样。一般认为微核是由有丝分裂后期丧失着丝粒的断片产生的，但有些实验也证明整条的染色体或多条染色体也能形成微核。这些断片或染色体在细胞分裂末期被两个子细胞核所排斥便形成了第三个核块。已经证实微核率的大小是和用药的剂量或辐射累积效应呈正相关，这一点和染色体畸变的情况一样。所以可用简易的间期微核计数来代替繁杂的中期畸变染色体计数。由于大量新的化合物的合成，原子能应用，各种各样工业废物的排出，使人们很需要有一套高度灵敏，技术简单的测试系统来监视环境的变化。只有真核的测试系统更能直接推测诱变物质对人类或其它高等生物的遗传危害，在这方面，微核测试是一种比较理想的方法。且有研究显示以植物进行微核测试与以动物进行的一致率可达99%以上。目前微核测试已经广泛应用于辐射损伤、辐射防护、化学诱变剂、新药试验、染色体遗传疾病及癌症前期诊断等各方面。 材料与方法 材料 1实验器具：显微镜、解剖针、盖玻片、载玻片、培养皿 2实验试剂：改良苯酚品红染液、浓盐酸、叠氮化钠、清水、2%迪彩防干枯洗发液、2%驱蚊剂、0.2%NaNO2、1%氧氟沙星 3实验材料：大蒜根尖 方法 1将大蒜浸水催根 将剥皮的大蒜放入培养皿中，倒入清水使大蒜根部没入水中，置于25℃下培养24小时，待初生根长出1-2cm左右，根毛发育良好，即可用来检测。 2处理 将培养皿中的清水倒出，将事先准备好的4种诱变剂及阴性（清水）、阳性（叠氮化钠）对照倒入培养皿中，注意标记准确，使各种诱变剂完全浸泡根尖。大蒜根尖处理24h后，将诱变剂及阴性、阳性对照换成清水后恢复培养24h。 3固定根尖细胞 将恢复后的大蒜从根尖顶端切下1cm长的幼根放入离心管中，以卡纳氏固定液进行固定2-24h后，保存于70%乙醇溶液中。 4压片 将离心管中的液体倒出，加入足够的浓盐酸解离3-5min，再用蒸馏水洗涤3次（每次1-2min）。从根尖处切下约0.5mm置于载玻片上，滴加苯酚品红染色15min后，盖上盖玻片，包两层滤纸，用镊子钝部按压至根尖散成云雾状。 5镜检
大蒜根尖染色体实验报告 一、 实验目的与实验要求 1、掌握洋葱培养的方法，掌握利用秋水仙素诱导植物多倍体的方法。 2、掌握洋葱根尖制片的方法，复习染色、压片的基本操作。 3、通过对于有丝分裂相的观察，统计洋葱染色体数目，加深对于细胞有丝分裂过程的理解。 4、对比进行多倍体诱导前后的洋葱根尖，理解四倍体与二倍体的区别，认识微核和植物细胞分裂期的各形态特征。 5、体验开放式实验教学，培养生物实验意识，提高学习的主动性、获取实验知识的能力和撰写实验报告水平。 二、 实验方案 1、实验仪器 显微镜、载玻片、盖玻片、试管、烧杯、小塑料管、滤纸、刀片、解剖针、滤纸等 2、实验药品 新鲜、健康的洋葱鳞茎一个；0.02%秋水仙素、1mol/L HCl、醋酸洋红染液、卡诺氏固定液，碱性品红、乙酸，乙醇等。 3、实验原理 (1 洋葱的根尖 洋葱根尖的整体结构如右图，其中只有分生区的初生分生组织由于细胞始终处于持久而强烈的有丝分裂之中而作为我们的观察对象，其余部分在制片时都应当尽量剔除来保证观察效果。 (2 多倍体的诱导
多倍体的诱导使用秋水仙素，秋水仙素可以阻止微管蛋白的聚合，从而使有丝分裂中期纺锤体不能正常形成，但是姐妹染色单体照常想成，只是没有被拉向两级，于是染色体数目加倍。 各步骤的作用：固定液可以迅速杀死细胞，保持细胞形态在有丝分裂相。解离可以破坏细胞的胞间层（果胶），使细胞之间的联系变松散，有利于压片和染色。漂洗可以洗去过量的盐酸，防止解离过度 破坏细胞结构或影响染色效果（盐酸是酸性，而醋酸洋红是碱性染料）。 (3 有丝分裂 完整的有丝分裂相包括G1期（合成前期）、S 期（合成期）、G2期（合成后期）和M 期（分裂期），其中G1期、S 期和G2期合称间期，细胞完成DNA 的复制以及有丝分裂的准备，而M 期又可以分为前期、中期、后期和末期，为了形态观察的方便，本实验采用后一种分法。如表一。 表一植物有丝分裂各时期特点 4、实验步骤 (1 将大蒜剥皮后放进垫了滤纸的培养基中，加入清水，放进25℃恒温
植物染色体结构变异的诱导及鉴定 10农生一班第一组卢** 摘要用物理因素（X射线，γ射线和快中子等）和化学药剂等处理植物材料，染色体的断裂频率会大大增加。在染色体移向两极时无着丝粒染色体由于没有着色粒而不受纺锤丝的牵引而随机地停留在细胞的各个部位，称为染色体断片。细胞分裂末期或二分体时期或四分体时期，染色体断片形成核状的结构，称为微核或拟核。 关键词物理因素、化学因素、染色体、微核 引言本文利用植物根尖作为材料，用不同的诱导剂经行处理，利用细胞生物学方法观察其微、核率来表示动植物受遗传损伤程度的一种方法.微核的形成是细胞受诱变剂作用后的一种遗传学终点。此实验可以应用于寻找最佳诱变剂,和环境敏感型植物,最终用来指导实际生活中的环保工作,其中包括预测实际环境可能引起污染的因素,进行环境监测的科学方法,可用于环境监测的敏感型植物.从而让科学研究真正服务于人类事业. 1材料及方法 1.1验材料及器具 1.1.1验材料洋葱和大蒜根尖 1.1.2验器具恒温培养箱、显微镜、计数器、镊子、载玻片、盖玻片、烧杯、白瓷盘、紫外灯(长为365nm 10W) 、吸水纸 1.1.3验试剂 CuSO4浓度(0、0.1、0.2、0.5、1.0、5.0和10.0 mg/L) ；实验室常用XX 牌子的洗手液，分别稀释25，50，75，100，200倍，并用稀盐酸调节酸碱度，使pH为7-8；卡诺固定液(95%酒精:冰醋酸3:l), 70%乙醇, 1mol/LHCl, 95%酒精和浓盐酸,卡宝品红染色液 1.2 步骤 1.2.1发根： 选取大小均匀，无病害的大蒜鳞茎，洋葱鳞茎，置于铺好含充分的纱布的培养皿中，并将培养皿放进25℃的恒温箱中2~3d。在此过程中要不断加水，保证植物生根所需水分。在根长至2cm时，即根细胞分裂高峰期取出。 1.2.2诱变处理 重金属处理：取出若干个处理组大蒜，每组至少需要15个植株,分别用硫酸铜溶液浓度(0、0.1、0.2、0.5、1.0、5.0和10.0 mg/L)，每个浓度梯度下分别处理其根尖24小时。诱变处理后，用清水冲洗根表面的溶液，用蒸馏水继续培养24h。 紫外线处理：取出6个处理组大蒜，洋葱，每组至少需要15个植株，在细胞分裂高峰期，用10 W紫外灯距离分别，26cm照射，分别照射0min,20 min,25 min,30 min,35 min。并在照射后的3d分别取根尖制片观察微核数，处理时的水温，气温均为24。C，空气相对湿度80%.
染色体标本的制作及组型 观察 Revised by Jack on December 14,2020
染色体标本的制备及组型观察 【实验目的】 1.掌握染色体标本制作的基本方法； 2.认识不同生物的染色体的状态，学会做染色体组型图。 【制作染色体标本的意义】 了解染色体的特征（形态、大小、数目）——绘制染色体组型图 【染色体组型图的应用】 ①生物学方面：根据染色体特征鉴别生物及种类：兔44条；小鼠40条；大 鼠42条；鸡78条；猫38条；狗78条；人46条；马64条 ②临床医学方面：主要用于遗传性疾病的诊断和研究： 21三体综合症：是21对常染色体多一条，此种人“先天愚型”，或称“伸舌样白痴” 卵巢退化症：45 XO，外貌表现为女性，卵巢发育不全或无，米以下，不能生育。 睾丸退化症：47 XXY ，外貌为男性，比一般男性高，睾丸发育不全，有女性样乳房，智力低下或超常，不能生育，发声尖高。 因此，染色组型实验广泛应用于胎儿遗传性疾病早期诊断中（抽羊水做组型） 【染色体标本制作的原理】 施加药物使细胞分裂：PHA
设法得到大量的分裂中期细胞：秋水仙素 1.PHA：促进细胞分裂，使淋巴细胞返幼，变成淋巴母细胞。 2.秋水仙素：破坏微管装配，使纺锤体不能形成，使大量细胞停在分裂中期。 3.空气干燥：使细胞与染色体展开。 4.低渗作用：水进入细胞内，细胞内容空间变大，染色体间的距离变大，易于染色体分散开。 5.固定：用Camoy’s solution,作用使蛋白变性，对染色体内的组蛋白讲，变形后硬度增加，保 持了染色体的“即时形态”对细胞膜蛋白讲，变性使细胞膜硬度增强，形成屏障作用，防止了细胞内物质外溢和丢失。 【实验用品】 1.实验器材：显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、手术剪、解剖盘、胶头滴管、 离心管、离心机、小烧杯、冰箱、酒精灯、小烧杯 2.实验药品：蒸馏水、% NaCl溶液、% KCl溶液，固定液（甲醇：冰醋酸 =3:1）、秋水仙素 3.实验材料：小鼠 【实验步骤】 1.取雄性小鼠，以每克体重4微克注射秋水仙素（约1mL），14-16h后，用断头法处死小鼠，取 出睾丸用生理盐水（% NaCl溶液）洗去血污，置于解剖盘中。 2.将睾丸放入装有1mL % KCl溶液的小烧杯中剪碎（液体呈乳白色）。 3.用铜网过滤到刻度离心管中，再加% KCl溶液至4mL。 4.37℃静置30mins，进行低渗处理。 5.以800-1000r/min离心8分钟。 6.弃上清液，加入2mL甲醇·冰醋酸固定液。用吸管至管底吹气，轻轻打散细胞，固定8mins。 7.再以800-1000r/min离心8分钟。 8.弃上清液，加入1mL甲醇·冰醋酸固定液，再制成细胞悬液，固定5mins。 9.取去洁净的低温预冷载片，距载片10-15cm的高度滴下2-3滴细胞悬液，从载片一边向另一边轻 轻吹气，并同时轻轻敲打载片，以使细胞均匀分布和促使染色体展开。 10.用滤纸擦去载片上的多余液体，空气干燥或文火干燥。 11.用染液染色20——30分钟，细水冲洗玻片背面，去除多余染液，气干。 12.镜检：低倍镜下寻找分散良好，染色适中的分裂相，高倍镜或油镜下观察染色体形态并计数。【实验结果】 精子头部 精子鞭毛分裂中期的染色体未破碎的细胞
大蒜根尖多倍体诱导与染色体观察 实验目的： 1、了解利用秋水仙素诱导植物多倍体的方法。 2、掌握大蒜根尖制片的方法。 3、通过对玻片的观察，统计染色体数目。 4、对比不同的大蒜根尖染色体数目，理解二倍体和四倍体的区别。 实验原理： 1.有丝分裂 完整的有丝分裂相包括G1期（合成前期）、S期（合成期）、G2期（合成后期）和M期（分裂期），其中G1期、S期和G2期合称间期，细胞完成DNA的复制以及有丝分裂的准备，而M期又可以分为前期、中期、后期和末期，为了形态观察的方便，本实验采用后一种分法。观察有丝分裂，重点在于观察染色体的形态。在细胞分裂前期，细胞核解体，染色质凝聚显现出染色体的形态；在前中期，染色体散乱地分布于细胞的中部；在中期，纺锤体形成，染色体受到微管的牵引，着丝粒成行排列于赤道板上；在后期，染色体受到动粒微管的牵引，向细胞两级运动；在末期，染色体重新解螺旋，细胞核重新形成。细胞染色体过程示意图见图1. 图1：细胞有丝分裂过程示意图 2.大蒜的根尖 大蒜根尖的整体结构如图2，其中只有分生区的初生分生组织由于细胞始终
处于持久而强烈的有丝分裂之中而作为我们的观察对象，其余部分在制片时都应当尽量剔除来保证观察效果。
图2：大蒜根尖结构示意图 3.多倍体诱导 秋水仙素易溶于冷水、不易溶于热水、有毒、针状结晶或淡黄色粉末，是诱导多倍体的一种常用试剂，其是从百合科植物秋水仙的鳞茎和种子中提取出来的一种生物碱。它的作用机理是与微管蛋白单体结合，抑制微管的形成，进一步抑制纺锤体的形成，使染色单体分离受阻，形成同源多倍体。因此，秋水仙素作用于正在分裂的细胞，如生长点才能产生作用，诱导多倍体的形成。秋水仙素诱导多倍体在蔬菜和观赏植物的应用非常广泛，但是在大蒜方面的报道却很少。 图3：秋水仙素的化学结构式 实验器材： 实验材料：经秋水仙素处理过的大蒜根。（秋水仙素溶液配制取秋水仙素1g（先用少量95%乙醇助溶），溶于250～500ml蒸馏水中，配成浓度为0.2～0.4%的溶液，冰箱中保存。将大蒜架在盛水的烧杯中进行水培。待根尖长到1cm时，将大蒜盛在0.4%秋水仙素溶液的瓶盖或小烧杯上，避光处理24小时，然后再水培24小时加倍后根尖很肥大。）
微核试验 一、研究的目的与意义： 1：知道微核产生的原理。 2：学会识别微核以及计算微核率。 3：学用微核试验来评价药物、放射线、有毒物质等对人体细胞或体外培养细胞遗传学损伤。 4：了解不同化学试剂对细胞各个分裂期的影响。 由于大量新的化合物的合成，原子能应用，各种各样工业废物的排出，使人们很需要有一套高度灵敏，技术简单的测试系统来监视环境的变化。真核测试系统能直接推测诱变物质对人类或其它高等生物的遗传危害。利用微核实验这种遗传毒性试验方法可以检测检测染色体或者有丝分裂器损伤，计数细胞的微核率。检测已存在或潜在的危害。 二、研究内容与技术路线 2.1 研究内容： 通过观察不同浓度的1,2,4-三氯苯和铬以及它们的交互作用对大蒜根尖细胞微核率以及不同分裂期细胞的比例的影响，来判断其遗传毒性。 2.2 技术路线：冷冻保存 24h 孚尔根染液配制 三、实验方法 3.1实验材料
大蒜、甲醇、冰乙酸、碱性品红、偏重亚硫酸钠、比重 1.18 的浓盐酸、蒸馏水、酒精、重铬酸钾、氯苯、丙酮、显微镜、载玻片、盖玻片、定性滤纸、烧杯、100毫升容量瓶、200 毫升容量瓶、镊子、刀片、纱布、青霉素小瓶、移液管、试管 3.2试剂准备： 1、1mol/LHCl ：用10mL 移液管量取8.69mL 浓盐酸加入100mL 容量瓶，用在蒸馏水定容至100mL 。 2、50mg/L、100mg/L、：称取170mg重铬酸钾，加水溶解，在200mL容量瓶中定容，配制300mg/L的Gr 6+母液，然后稀释到50mg/L、100mg/L。 3、卡诺式固定液：将甲醇：冰乙酸按3:1 比例混合配制 5、Schiff 氏试剂：称取0.5g 碱性品红加入到100mL 煮沸的蒸馏水中，时时振荡，继续煮5min，使碱性品红充分溶解。冷却致50C，用滤纸过滤，滤液中加入 10ml1mol/LHCI，冷却致25C，加入1.5g偏重亚硫酸钠，充分振荡，塞紧瓶塞，在室温暗处静置至少24h ，用粗滤纸过滤于棕色瓶中，封瓶塞，外包黑纸。贮存于冷暗处（4C冰箱中）备用。 3.3实验过程： 3.3.1、材料准备： 将大蒜剥皮后放进垫了滤纸的培养基中，加入清水，放进25°C恒温培养箱中 2~3天，催化大蒜生根。 选择根长0.5~1cm 且不定根生长情况差不多的大蒜分为10 组 3.3.2、Schiff 氏试剂检验：
实验七染色体核型分析
【实验项目】染色体核型分析 实验室名称显微分析实验室实验室地 点 学时2 实验 类型 验证每组 人数 2-4 选做 或必 做 必做 实验目的通过几种生物染色体标本的观察，掌握染色体核型分析的方法 内容提要生物染色体标本的观察；染色体核型的分析 重点难点染色体核型的分析方法 主要 仪器 及耗 材 显微镜、尺子、剪刀 实验七：染色体核型分析 〖实验目的和要求〗 观察分析细胞有丝分裂中期染色体的长短、臂比和随体等形态特征；学习染色体组型分析的基本方法和技能。 〖实验原理〗 染色体组型分析是细胞遗传学研究的基本方法，是研究物种演化、分类以及染色体结构、型态与功能之间的关系所不可缺少的重要手段。染色体组是指二倍体生物配子中所含的染色体总称，常以“Ｘ”表示。同一物种的同一染色体组内各染色体的形态、结构和连锁群是彼此不同的，但它们却相互协调，共同决定生物性状的发育。 研究染色体组型的方法，一是靠有丝分裂时染色体的形态特征，另一是靠减数分裂时染色体的形态和
特征。本实验着重介绍有丝分裂的染色体组型分析。 细胞有丝分裂中期是识别染色体个性特征的最佳时期，而染色体组型分析就是进行染色体特征的鉴别和描述，其形态的鉴别主要依据染色体的长度、着丝粒位置、付缢痕的有无和位置、随体的有无、形状和大小等资料进行分析。现分别介绍如下： 1.染色体长度，同一染色体组内各染色体的长度是不 一致的，其绝对长度可在显微镜上测量，或用放大照片测量后换算。由于染色体制片过程中使用的药剂及方法不同，另外供观察的细胞分裂不可能保证同一时期，故染色体的收缩有差异而导致绝对长度在同一物种或个体不同细胞间发生差异，针对这种情况，在分析中常用染色体的相对长度来表示。 在染色体长度测量中，对染色体的两条臂要分别测量，一般随体不计入染色体长度内。 2.着丝粒的位置：每条染色体都有一着丝粒，其位 置可因不同染色体而异。由于着丝粒把染色体分为两个染色体臂：长臂和短臂，它们的比率（即臂比）便可确定着丝粒的位置。 3.付缢痕的有无和位置：有些染色体上除着丝粒， 还另有一不着色或缢缩变细的区域称符缢痕。 4.随体的有无、形状和大小：有些染色体在短臂的 末端有一棒状小体称为随体，随体和染色体臂之间常以付缢痕相隔，具随体的染色体称SAT染色体。 〖材料和方法〗 细胞有丝分裂永久制片或其中期染色体图象的放大照
微核试验 摘要：利用大蒜根尖细胞微核染色与计数技术测定不同浓度6价铬和1.2,4-三氯苯以及它们的不同浓度混合液对大蒜根尖分生区细胞微核率和细胞分裂各期的影响。以蒸馏水为对照组，设置的实验组为3组不同浓度的6价铬和三氯苯以及它们的混合液。用孚尔根染液法对不同试剂及各浓度的处理的根尖进行染色。在显微镜下观察各试剂各浓度处理下的微核率以及不同分裂期细胞的比例。 关键字：孚尔根染色法、微核、微核率、分裂期细胞 Abstract:Use of garlic root tip cell micronucleus dyeing and counting technology . Different concentrations of chromium 6 and 1,2, 4 - t hree hlorobenzene as well as their different concentration mixture to garlic root tip meristematic cells in the areas of micronucleus rate and the influence of each stage of cell division.With distilled water as control group, the group set up for the three groups of different concentrations of chromium 6 and 3 chlorobenzene and their https://www.doczj.com/doc/5413266951.html,efu's root dye solution for different reagent and the concentration of the treatment of root tip for dyeing. Under the microscope to observe the reagent concentration under the treatment of micronucleus rate and different proportion of split phase cells Key Words：Fu's root staining method、micronucleus、Micronucleus rate、Split phase cells 一、研究的目的与意义： 1：知道微核产生的原理。 2：学会识别微核以及计算微核率。 3：学用微核试验来评价药物、放射线、有毒物质等对人体细胞或体外培养细胞遗传学损伤。 4：了解不同化学试剂对细胞各个分裂期的影响。 由于大量新的化合物的合成，原子能应用，各种各样工业废物的排出，使人们很需要有一套高度灵敏，技术简单的测试系统来监视环境的变化。真核测试系统能直接推测诱变物质对人类或其它高等生物的遗传危害。利用微核实验这种遗传毒性试验方法可以检测检测染色体或者有丝分裂器损伤，计数细胞的微核率。检测已存在或潜在的危害。 二、研究进展 微核( micronucleus, 简称MCN) , 是真核生物细胞中的一种异常结构, 是染色体畸变在间期细胞中的一种表现形式。一般认为, 微核是由有丝分裂后期丧失着丝粒的染色体片断产生的。在细胞有丝分裂时, 受到有害理化因子的损伤, 染 色体发生断裂, 在下一次分裂后期, 丧失着丝粒的染色体片断行动滞后, 不能进
实验：“制作和观察洋葱鳞片叶表皮细胞临时装片”教学设计 一、教学设计思路： 结合教材的特点和学生实际,引导学生通过观察,操作，实践等活动,让学生自主获取制作临时装片的知识,并通过用显微镜观察细胞结构掌握显微镜的使用方法。通过本节实验课培养学生的动手和观察能力。 二、教材分析： 《观察植物细胞》是义务教育课程标准实验教材《生物学》七年级上册第二单元第一章第二节的内容。 本节课则是继上节课《练习使用显微镜》之后，让学生通过独立自主的制作临时装片的方法来感知细胞的形态和结构，从而使学生对细胞达到一定的认识，为以后的教学作下铺垫。所以，制作临时装片是这一节课的重点和难点。制作临时装片的成功，对提高学生的生物学兴趣和生物科学素养都起着重要的作用。 三、教学目标： 1. 通过观察认识洋葱表皮细胞的形态和结构 2.学会制作洋葱表皮细胞临时装片，学会观察 3.培养动手能力，养成实事求是的科学态度，感受合作交流的乐趣 四、教学重点和难点： 制作洋葱表皮细胞临时装片 五、教学对象分析： 学生通过上一节课《练习使用显微镜》的学习，基本掌握显微镜的正确操作方法和步骤，对于利用显微镜进一步观察生物的材料有着强烈的愿望。但在使用显微镜的过程中还要教师认真指导，纠正不足。 六、教学策略： 1、本节课以情景导入的方式复习旧知识，引入新课程的学习。 2、通过观察，指导和实验等方法，激发学生学习热情 3、采用直观手段，让学生通过合作探究，自主探究，协助指导，自我评价等一系列的活动逐渐获得制作临时装片并观察植物细胞形态和结构的能力，实现认知迁移。 4、学生通过观察、讨论、分析等方法，逐渐获得自主学习和自主探究的习惯和能力，并通过课上反复的自主动手实验，体验知识获得的过程，掌握科学探究的方法，感受探究成功的喜悦。 七、课前准备： 学生：预习。 教师：洋葱鳞片叶，叶子，清水，碘酒溶液，镊子，滴管，纱布，吸水纸，载玻片，盖玻片，显微镜。 八、教学方法：讲解法，演示法，实验探究法
大蒜根尖染色体实验报告 一、实验目的与实验要求 1、掌握洋葱培养的方法，掌握利用秋水仙素诱导植物多倍体的方法。 2、掌握洋葱根尖制片的方法，复习染色、压片的基本操作。 3、通过对于有丝分裂相的观察，统计洋葱染色体数目，加深对于细胞有丝 分裂过程的理解。 4、对比进行多倍体诱导前后的洋葱根尖，理解四倍体与二倍体的区别，认 识微核和植物细胞分裂期的各形态特征。 5、体验开放式实验教学，培养生物实验意识，提高学习的主动性、获取实 验知识的能力和撰写实验报告水平。 二、实验方案 1、实验仪器 显微镜、载玻片、盖玻片、试管、烧杯、小塑料管、滤纸、刀片、解剖 针、滤纸等 2、实验药品 新鲜、健康的洋葱鳞茎一个；0.02%秋水仙素、1mol/L HCl、醋酸洋红染 液、卡诺氏固定液，碱性品红、乙酸，乙醇等。 3、实验原理 (1)洋葱的根尖 洋葱根尖的整体结构如右图，其中只有分生区的初生分生组织由于细胞始终处于持久而强烈的有丝分裂之中而作为我们的观察对象， 其余部分在制片时都应当尽量剔除来保证观察效果。 (2)多倍体的诱导 多倍体的诱导使用秋水仙素，秋水仙素可以阻止微管蛋白的聚合，从而使有丝分裂中期纺锤体不能正常形成，但是姐妹染色单体照常想 成，只是没有被拉向两级，于是染色体数目加倍。 各步骤的作用：固定液可以迅速杀死细胞，保持细胞形态在有丝分裂相。解离可以破坏细胞的胞间层（果胶），使细胞之间的联系变 松散，有利于压片和染色。漂洗可以洗去过量的盐酸，防止解离过度
破坏细胞结构或影响染色效果（盐酸是酸性，而醋酸洋红是碱性染料）。 (3)有丝分裂 完整的有丝分裂相包括G1期（合成前期）、S期（合成期）、G2期（合成后期）和M期（分裂期），其中G1期、S期和G2期合称间 期，细胞完成DNA的复制以及有丝分裂的准备，而M期又可以分为 前期、中期、后期和末期，为了形态观察的方便，本实验采用后一种 分法。如表一。 表一植物有丝分裂各时期特点 4、实验步骤 (1)将大蒜剥皮后放进垫了滤纸的培养基中，加入清水，放进25℃恒温 培养箱中2~3天，催化大蒜生根。 (2)选择根长0.5~1cm且不定根生长情况差不多的大蒜分为10组。 (3)在大蒜生根之后，先选取一些根尖放进卡诺式固定液中固定3个小时， 用Schiff氏试剂染色，镜检，观察染色体是否能染上色以及染色效果。 若染色效果不行，则重新配制Schiff氏试剂，直至染色效果良好，然 后将其贮存于4℃冰箱中准备使用。 (4)将分好组的大蒜分别用清水、50mg/L Gr6+、100mg/L Gr6+、150mg/L Gr6+、30 mg/L 1,2,4-三氯苯、40 mg/L 1,2,4-三氯苯、50 mg/L 1,2,4-三 氯苯、浓度分别为50mg/L Gr6+和30 mg/L 1,2,4-三氯苯的混合液、 100mg/L Gr6+和40 mg/L 1,2,4-三氯苯的混合液、150mg/L Gr6+和50 mg/L 1,2,4-三氯苯的混合液培养24小时。清水组为对照组。
细胞生物学实验报告 题目：染色体组型分析 姓名：余振洋 学号：200900140156 系年级：09级生科三班 时间：2011/4/28 一、【实验目的】 1．掌握染色体组型分析的各种数据指标； 2．学习染色体组型分析的基本方法； 3. 对照标准图型，学习识别人体各对染色体的带型特征； 4. 初步掌握人体染色体组型-带型分析方法； 5.了解染色体组型与带型分析的意义。 二、【实验材料】 1．毫米尺、剪刀、胶水、计算器、白纸 2．人染色体放大照片 三、【实验原理】 定义：染色体组型又称核型，是指将动物、植物、真菌等的某一个体或某一分类群（亚种、种、属等）的体细胞内的整套染色体，按它们相对恒定的特征排列起来的图像。 核型模式图是指将一个染色体组的全部染色体逐个按其特征绘制下来，再按长短、形态等特征排列起来的图像。 描述染色体的四个参数： 1． 相对长度= ×100 （相对长度可以用来表示每条染色体的长度） 2． 臂指数= （臂指数可以用来确定臂的长度） 为了更准确地区别亚中部和亚端部着丝粒染色体，1964年Levan 提出划分标准： 1.0—1.7之间，为中部着丝粒染色体（M ） 1.7—3.0之间，为亚中部着丝粒染色体（5M ） 臂指数在 3.0—7.0之间，为亚端部着丝粒染色体（ST ） 7.0以上，为端部着丝粒染色体（T ） 3．着丝粒指数= ×100 （着丝粒指数可以决定着丝粒的相对位置） 每条染色体长度 单倍常染色体之和+x 染色体 长臂的长度（q ） 断臂的长度（p ） 断臂长度（p ） 染色体全长（p+q ）
按Levan划分标准，着丝粒指数在： 50.0—37.5之间，为中部着丝粒染色体（M） 37.5—25.0之间，为亚中部着丝粒染色体（5M） 臂指数在 25.0—12.5之间，为亚端部着丝粒染色体（ST） 12.5—0.00之间，为端部着丝粒染色体（T） 4．染色体臂数（NF），根据着丝粒的位置来确定。 a．端着丝粒染色体（T），NF=1； b．中部、亚中部、亚端部着丝粒染色体（M，SM，ST），NF=2。 人类细胞染色体群： A群：1.2.3对，大，M，2的着丝粒略偏中央。 B群：4.5对，大，SM，彼此不易区分。 C群：6—12对和x，中，SM，第六对着丝粒近中央。X大小介于6和7对中间，9长臂上有次缢痕，11断臂较长，12断臂较短。 D群：13.14.15对，中，ST，有随体，彼此不易区分。 E群：16.17.18对，中，16是M，长臂上有次缢痕，17.18是SM，18断臂较短。F群：19.20对，小，M，彼此不易区分。 G群：21.22对和Y，21.22对小，是ST，有随体。长臂常呈分叉状，彼此不易区分。Y染色体较21.22对略大，也有近端着丝粒，无随体，长臂常常彼此 平行。
实验目的 1、初步掌握染色体G带标本的制备技术。 2、了解人类染色体的G显带的带型特征。 实验用品 1、材料：常规方法制备的中期人类染色体标本（标本片龄不超过30天为宜）。 2、器材：显微镜、恒温培养箱、烤箱、恒温水浴箱、冰箱、染色缸、小镊子、玻片架、香柏油、二甲苯、擦镜纸、吸水纸。 3、试剂：％胰蛋白酶溶液、％EDTA溶液、胰蛋白酶一EDTA混合液、％生理盐水、蒸馏水、Giemsa原液、Giemsa稀释液、1／15mol ／L磷酸缓冲液。 实验原理 人们将用各种不同的方法，以及用不同的染料处理染色体标本后，使每条染色体上出现明暗相间，或深浅不同带纹的技术称为显带技术（banding technique）。本世纪70年代以来，显带技术得到了很大发展，且在众多的显带技术中（Q带、G带、C带、R带、T带），G带是目前被广泛应用的一种带型。因为它主要是被Giemsa染料染色后而显带，故称之为G显带技术，其所显示的带纹分布在整个染色体上。 研究发现，人染色体标本经胰蛋白酶、Na0H、柠檬酸盐或尿素等试剂处理后，再用Giemsa 染色，可使每条染色体上显示出深浅交替的横纹，这就是染色体的G带。每条染色体都有其较为恒定的带纹特征，所以G显带后，可以较为准确的识别每条染色体，并可发现染色体上较细微的结构畸变。关于G显带的机理目前有多种说法，例如，Lee等（1973）认为染色体上与DNA结合疏松的组蛋白易被胰蛋白酶分解掉，染色后这些区段成为浅带，而那些组蛋白和DNA结合牢固的区段可被染成深带。有人认为，染色体显带现象是染色体本身存在着带的结构。比如用相差显微镜观察未染色的染色体时，就能直接观察到带的存在。用特殊方法处理后，再用染料染色，则带更加清楚，随显带方法不同，显出来的带特点也不一样，说明带的出现又与染料特异结合有关。一般认为，易着色的阳性带为含有AT多的染色体节段，相反，含GC多的染色体段则不易着色。总的来说，G显带的机理还未搞清。 内容与方法 一、人类染色体G显带标本制备 1、胰蛋白酶法 ①将常规制备的人染色体玻片标本（未染色的白片）置70℃烤箱中处理2小时，然后转入37℃培养箱中备用，一般在第3～7天进行显带。 ②取％的胰蛋白酶原液加生理盐水至50ml，配成％的工作液并用NaHCO3调pH值至7左右。 ③将配好的胰蛋白酶工作液放入37℃水浴箱中预热。 ④将玻片标本浸入胰蛋白酶中，不断摆动使胰蛋白酶的作用均匀，处理1～2分钟（精确的时间自行摸索）。 ⑤立即取出玻片，放入生理盐水中漂洗两次。 ⑥染色。将标本浸入37℃预温的Giemsa染液（1:10的Giemsa原液和的磷酸缓冲液）中染色10分钟左右。
洋葱根尖染色体观察
大蒜根尖多倍体诱导与染色体观察 实验目的： 1、了解利用秋水仙素诱导植物多倍体的方法。 2、掌握大蒜根尖制片的方法。 3、通过对玻片的观察，统计染色体数目。 4、对比不同的大蒜根尖染色体数目，理解二倍体和四倍体的区别。 实验原理： 1.有丝分裂 完整的有丝分裂相包括G1期（合成前期）、S期（合成期）、G2期（合成后期）和M期（分裂期），其中G1期、S期和G2期合称间期，细胞完成DNA 的复制以及有丝分裂的准备，而M期又可以分为前期、中期、后期和末期，为了形态观察的方便，本实验采用后一种分法。观察有丝分裂，重点在于观察染色体的形态。在细胞分裂前期，细胞核解体，染色质凝聚显现出染色体的形态；在前中期，染色体散乱地分布于细胞的中部；在中期，纺锤体形成，染色体受到微管的牵引，着丝粒成行排列于赤道板上；在后期，染色体受到动粒微管的牵引，向细胞两级运动；在末期，染色体重新解螺旋，细胞核重新形成。细胞染色体过程示意图见图1. 仅供学习与交流，如有侵权请联系网站删除谢谢2
图1：细胞有丝分裂过程示意图 2.大蒜的根尖 大蒜根尖的整体结构如图2，其中只有分生区的初生分生组织由于细胞始终处于持久而强烈的有丝分裂之中而作为我们的观察对象，其余部分在制片时都应当尽量剔除来保证观察效果。 仅供学习与交流，如有侵权请联系网站删除谢谢3
图2：大蒜根尖结构示意图 3.多倍体诱导 秋水仙素易溶于冷水、不易溶于热水、有毒、针状结晶或淡黄色粉末，是诱导多倍体的一种常用试剂，其是从百合科植物秋水仙的鳞茎和种子中提取出来的一种生物碱。它的作用机理是与微管蛋白单体结合，抑制微管的形成，进一步抑制纺锤体的形成，使染色单体分离受阻，形成同源多倍体。因此，秋水仙素作用于正在分裂的细胞，如生长点才能产生作用，诱导多倍体的形成。秋水仙素诱导多倍体在蔬菜和观赏植物的应用非常广泛，但是在大蒜方面的报道却很 少。 图3：秋水仙素的化学结构式 实验器材： 实验材料：经秋水仙素处理过的大蒜根。（秋水仙素溶液配制取秋水仙素1g （先用少量95%乙醇助溶），溶于250～500ml蒸馏水中，配成浓度为0.2～0.4%的溶液，冰箱中保存。将大蒜架在盛水的烧杯中进行水培。待根尖长到 1cm时，将大蒜盛在0.4%秋水仙素溶液的瓶盖或小烧杯上，避光处理24小时，然后再水培24小时加倍后根尖很肥大。） 实验试剂：1mol/L的HCl溶液，改良苯酚品红溶液。 实验器材：刀片，镊子，双目显微镜，载玻片，盖玻片，烧杯，滤纸。 实验步骤： 1、取材：取大蒜发根至0.5-1cm，然后转入盛有0.15%秋水仙素水溶 液的培养皿中继续培养24小时到30小时，待观察到根部有膨大时 取出固定。（一般植物细胞周期17-18小时） 2、固定：在卡诺固定液中固定24小时，移至70%乙醇中保存或者备 用。 仅供学习与交流，如有侵权请联系网站删除谢谢4