洋葱根尖染色体观察
大蒜根尖多倍体诱导与染色体观察
实验目的：
1、了解利用秋水仙素诱导植物多倍体的方法。
2、掌握大蒜根尖制片的方法。
3、通过对玻片的观察，统计染色体数目。
4、对比不同的大蒜根尖染色体数目，理解二倍体和四倍体的区别。
实验原理：
1.有丝分裂
完整的有丝分裂相包括G1期（合成前期）、S期（合成期）、G2期（合成后期）和M期（分裂期），其中G1期、S期和G2期合称间期，细胞完成DNA 的复制以及有丝分裂的准备，而M期又可以分为前期、中期、后期和末期，为了形态观察的方便，本实验采用后一种分法。观察有丝分裂，重点在于观察染色体的形态。在细胞分裂前期，细胞核解体，染色质凝聚显现出染色体的形态；在前中期，染色体散乱地分布于细胞的中部；在中期，纺锤体形成，染色体受到微管的牵引，着丝粒成行排列于赤道板上；在后期，染色体受到动粒微管的牵引，向细胞两级运动；在末期，染色体重新解螺旋，细胞核重新形成。细胞染色体过程示意图见图1.
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图1：细胞有丝分裂过程示意图
2.大蒜的根尖
大蒜根尖的整体结构如图2，其中只有分生区的初生分生组织由于细胞始终处于持久而强烈的有丝分裂之中而作为我们的观察对象，其余部分在制片时都应当尽量剔除来保证观察效果。
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图2：大蒜根尖结构示意图
3.多倍体诱导
秋水仙素易溶于冷水、不易溶于热水、有毒、针状结晶或淡黄色粉末，是诱导多倍体的一种常用试剂，其是从百合科植物秋水仙的鳞茎和种子中提取出来的一种生物碱。它的作用机理是与微管蛋白单体结合，抑制微管的形成，进一步抑制纺锤体的形成，使染色单体分离受阻，形成同源多倍体。因此，秋水仙素作用于正在分裂的细胞，如生长点才能产生作用，诱导多倍体的形成。秋水仙素诱导多倍体在蔬菜和观赏植物的应用非常广泛，但是在大蒜方面的报道却很
少。
图3：秋水仙素的化学结构式
实验器材：
实验材料：经秋水仙素处理过的大蒜根。（秋水仙素溶液配制取秋水仙素1g （先用少量95%乙醇助溶），溶于250～500ml蒸馏水中，配成浓度为0.2～0.4%的溶液，冰箱中保存。将大蒜架在盛水的烧杯中进行水培。待根尖长到
1cm时，将大蒜盛在0.4%秋水仙素溶液的瓶盖或小烧杯上，避光处理24小时，然后再水培24小时加倍后根尖很肥大。）
实验试剂：1mol/L的HCl溶液，改良苯酚品红溶液。
实验器材：刀片，镊子，双目显微镜，载玻片，盖玻片，烧杯，滤纸。
实验步骤：
1、取材：取大蒜发根至0.5-1cm，然后转入盛有0.15%秋水仙素水溶
液的培养皿中继续培养24小时到30小时，待观察到根部有膨大时
取出固定。（一般植物细胞周期17-18小时）
2、固定：在卡诺固定液中固定24小时，移至70%乙醇中保存或者备
用。
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