实验六洋葱根尖有丝分裂染色体标本制备及观察
一、实验目的
通过对植物根尖的制片和观察，要求学生初步学会对植物组织、细胞的固定、离析和压片方法，了解有丝分裂的全过程及其染色体的动态变化情况，掌握有丝分裂各时期的特征。
二、实验原理
有丝分裂是细胞均等增殖的过程，是体细胞分裂的主要方式。在有丝分裂过程中，细胞内每条染色体都能复制一份，然后分配到子细胞中，因此两个子细胞与母细胞所含的染色体在数目、形态和性质上均是相同的，在各种生长旺盛的植物组织中均存在着有丝分裂。
三、实验材料
洋葱根尖
四、实验用具
显微镜，载玻片，盖玻片，玻璃皿，剪刀，镊子
15%HCl（质量分数）和95％酒精（体积分数）的混合液（1：1）、0.01g／mL龙胆紫溶液
五、实验内容
1、洋葱根尖的培养
在实验课前3～4天，取洋葱一个，放在广口瓶上。瓶内装满清水，让洋葱的底部接触到瓶内的水面。把这个装置放在温暖的地方，注意经常换水，使洋葱的底部总是接触到水。待根长5 cm时，可取生长健壮的根尖制片观察。
2、装片的制作
(1)解离下午2时是洋葱有丝分裂的高峰期，可在此时剪取洋葱的根尖2 mm～3 mm，立
即放入含15%HCl和95％酒精的混合液（1：1）的玻璃皿中，在室温下解离3 min～5 min后取出根尖。
(2)漂洗待根尖酥软后，用镊子取出，放入盛有清水的玻璃皿中漂洗约10 min.
(3)染色把洋葱根尖放进盛有0.01g／mL龙胆紫溶液的玻璃皿中，染色3 min～5 min。
(4)制片用镊子将这段洋葱根取出来，放在载玻片上，加一滴清水，并且用镊子尖把洋葱
根尖弄碎，盖上盖玻片，用拇指垂直轻压盖波片，以使细胞分散开。
3、洋葱根尖细胞有丝分裂的观察
(1)低倍镜观察：把制作成的洋葱根尖装片先放在低倍镜下观察，慢慢移动装片，要求找
到分生巨细胞，它的特点是：细胞呈正方形，排列紧密，有的细胞正在分裂。
(2)高倍镜观察：找到分生区细胞后，把低倍镜移走，换上高倍镜，用微调螺旋和反光镜
把视野调整清晰，直到看清细胞物像为止。
(3)仔细观察，可先找出处于细胞分裂期中期的细胞，然后再找出前期、后期、末期的细
胞。注意观察各个时期细胞内染色体变化的特点。
(4)在一个视野里，往往不容易找全有丝分裂过程中各个时期的细胞。如果是这样，可以
慢慢地移动装片，从邻近的分生区细胞中寻找。
六、实验要求
绘出所观察到的有丝分裂图像，并注明时期。
实验七鱼的形态及解剖结构
一、实验目的
通过鲤鱼的形态及结构的观察，了解鱼类的结构特征。
二、实验材料
新鲜鲤鱼
三、实验用具
显微镜、解剖盘、解剖工具
四、实验内容
1、外形观察
鲤鱼体呈纺垂形，略为侧扁。头的最前端为口，口两侧各有一对口须，口上有一对鼻孔。头后两例有宽扁的鳃盖，鳃即位于其内。背鳍一个，最前端有一硬刺。尾鳍两叶相等为正形尾。臀鳍的前端亦有一硬刺，腹鳍已向前移位于胸鳍之后。躯干两侧有侧线，位于皮肤下。肛门开口于臀鳍的基部，泄殖孔紧接其后。
2、皮肤及鳞片的观察
用手抚摸鲤鱼的体表，是否光滑？鲤鱼的体表被以一层上皮组织，并由其分泌大量粘液，在游泳时可以减少鱼身和水的摩擦。在表皮之下覆盖着一层鳞片，鳞片彼此呈整齐覆瓦状排列。取一鳞片置显微镜下面观察，可见它大致呈圆形，中间有很多同心圆的环纹（露于体表之部分上有很多色素）。环纹可用作鉴定年龄的依据，这种鳞片叫圆鳞。再取
一被侧线穿过的侧线鳞置于显微镜下观察，即可见有一管道由其中穿过。
3、内脏器官观察
取一条鲤鱼放在解剖盘里，用解剖剪由肛门向前沿腹中线至胸鳍纵形剪开，使鱼体右侧向下，再从肛门向背方剪到脊柱，沿脊柱向前至鳃盖后缘剪去一例的体壁，使内脏全部露出（注意揭开左侧体壁前先将体腔膜与体壁分开，以使内脏器官与体壁分开时不致被损坏）。
用棉花拭净器官周围的血迹及组织液，置于盛水的解剖盘内观察。
(1)原位观察
?在胸腹腔前方、最后1对鳃弓的腹方，有一小腔，为围心腔，它借横隔与腹腔分开。?心脏位于围心腔内，心脏背上方有头肾。
?在胸腹腔里，脊柱腹方是白色囊状的鳔，覆盖在前、后鳔室之间的三角形暗红色组织，为肾脏的一部分。
?鳔的腹方是长形的生殖腺，在成熟个体，雄性为乳白色的精巢，雌性为黄色的卵巢。?胸腹腔腹侧盘曲的管道为肠管，
?在肠管之间的肠系膜上，有暗红色、散漫状分布的肝胰脏，体积较大。
?在肠管和肝胰脏之间一细长红褐色器官为脾脏。
(2)生殖系统由生殖腺和生殖导管组成
●生殖腺
?生殖腺外包有极薄的膜。
?雄性有精巢1对，性未成熟时往往呈淡红色，性成熟时纯白色，呈扁长囊状；
?雌性有卵巢1对，性未成熟时为淡橙黄色，呈长带状，性成熟时呈微黄红色，呈长囊形，几乎充满整个腹腔，内有许多小型卵粒。
●生殖导管
?生殖腺表面的膜向后延伸的短管，即输精管或输卵管。
?左右输精管或输卵管在后端汇合后通入泄殖窦，泄殖窦以泄殖孔开口于体外。
?观察毕，移去左侧生殖腺，以便观察消化器官。
(3)消化系统包括口腔、咽、食管、肠和肛门组成的消化管及肝胰脏和胆囊等消化腺体。
此处主要观察食管、肠、肛门和胆囊。
●食管
?肠管最前端接于食管，
?食管很短，其背面有鳔管通入，并以此为食管和肠的分界点。
●肠
?用圆头镊头将盘曲的肠管展开。
?肠为体长的2—3倍（肠的长度与食性有何相关性？）
?肠的前2/3段为小肠，后部为大肠，最后一部分为直肠，直肠以肛门开口于臀鳍基部前方。
?肠的各部外形区别不甚明显。
●胆囊
?为一暗绿色的椭圆形囊，位于肠管前部右侧，大部分埋在肝胰脏内。
?掀动肝脏，从胆囊的基部观察胆管如何通入肠前部。
?观察完毕，移去消化管肝胰脏，以便观察其它器官。
(4)鳔为位于腹腔消化管背方的银白色胶质囊。
?从头后一直伸展到腹腔后端，分前后2室。
?后室前端腹面发出一细长的鳔管，通入食管背壁。（鳔有哪些功能？）
?观察毕，移去鳔，以便观察排泄器官。
(5)排泄系统包括肾脏、输尿管和膀胱。
●肾脏
?紧贴于腹腔背壁正中线两侧，1对，为红褐色狭长形器官，
?在鳔的前、后室相接处，肾脏扩大使此处的宽度最大。
?每肾的前端体积增大，向左右扩展，进入围心腔，位于心脏的背方，为头肾，是拟淋巴腺。
●输尿管
?每肾最宽处各通出1细管，即输尿管，
?沿腹腔背壁后行，在近末端处2管汇合通入膀胱。
●膀胱
?两输尿管后端汇合后稍扩大形成的囊即为膀胱，其末端开口于泄殖窦。
?用镊子分别从臀鳍前的2个孔插入，观察它们进入直肠或泄殖窦的情况，由此可在体外判断肛门和泄殖孔的开口。
(6)循环系统主要观察心脏，血管系统从略。
心脏位于2胸鳍之间的围心腔内，由1心室、1心房和静脉窦等组成。
●心室淡红色，其前端有一白色壁厚的圆锥形小球体，为动脉球，自动脉球向前发
出1条较粗大的血管，为腹大动脉。
●心房位于心室的背侧，暗红色，薄囊状。
●静脉窦位于心房背侧面，暗红色，壁很薄，不易观察。
(7)口腔与咽
将剪刀伸入口腔，剪开口角，除掉鳃盖，以暴露口腔和鳃。
●口腔
?口腔由上、下颌包围而成，颌无齿，口腔背壁由厚的肌肉组成，表面有粘膜，腔底后半部有一不能活动的三角形舌。
●咽
?口腔之后为咽部，其左右两侧有5对鳃裂，相邻鳃裂间生有鳃弓，共5对。
?第5对鳃弓特化成咽骨，其内侧着生咽齿。齿式为1.1.3/3.1.1（鲫鱼的咽齿仅1列，齿式为4/4）。
?在下面观察鳃步骤完成后，将外侧的4对鳃除去，暴露第5对鳃弓，可见咽齿与咽背面的基枕骨腹面角质垫相对，能夹碎食物。
(8)鳃
鳃是鱼类的呼吸器官。鲤鱼的鳃由鳃弓、鳃耙、鳃片组成，鳃隔退化。
●鳃弓
?位于鳃盖之内，咽的两侧，共5对。
?每鳃弓内缘凹面生有鳃耙。
?第1—4对鳃弓外缘并排长有2列鳃片，第5对鳃弓没有鳃片。
●鳃耙
?为鳃弓内缘凹面上成行的三角形突起。
?第1—4对鳃弓各有2行鳃耙，左右互生，第1对鳃弓的外侧鳃耙较长。第5对鳃弓只有1行鳃耙。（鳃耙有何功能？）
●鳃片
?薄片状，鲜活时呈红色。
?每个鳃片称半鳃，长在同一鳃弓上的2个半鳃合称全鳃。
?剪下1个全鳃，放在有少量水的培养皿内，置显微镜下观察。可见每1鳃片由许多鳃丝组成，每1鳃丝两侧又有许多突起状的鳃小片，鳃小片上分布着丰富的毛细血管，是气体交换的场所。横切鳃弓，可见2个鳃片之间退化的鳃隔。
(9)脑
从眼眶下剪，沿体长轴方向剪开头部背面骨骼，再在两纵切口的两端间横剪，小心地移去头部背面骨骼，用棉球吸去银色发亮的脊液，脑便显露出来，从脑背面观察。
●端脑
?由嗅脑和大脑组成。
?大脑分左右2个半球，呈小球状，位于脑的前端，其顶端各伸出1条棒状的嗅柄，嗅柄末端为椭圆形的嗅球，嗅柄和嗅球构成嗅脑。
●中脑
?位于端脑之后，较大，受小脑瓣所挤而偏向两侧，各成半月形突起，又称视叶。
?用镊子轻轻托起端脑，向后掀起整个脑，可见在中脑位置的颅骨有1个陷窝，其内有一白色近圆形小颗粒，为内分泌腺脑垂体。
?用小镊子揭开陷窝上的薄膜，可取出脑垂体，用于其他研究。
●小脑
?位于中脑后方，为一圆球形体，表面光滑，前方伸出小脑瓣突入中脑。
●延脑
?是脑的最后部分，由1个面叶和1对迷走叶组成，面叶居中，其前部被小脑遮蔽，只能见到其后部，迷走叶较大，左右成对，在小脑的后两侧。
?延脑后部变窄，连接脊髓。
（鲤鱼脑的各组成部分有何机能？哪部分较发达，它与鱼类的生活有何联系？）
注意事项：注意解剖细节，动作要规范，避免损坏尚未观察的结构。
五、实验要求
根据原位观察，绘鲤鱼的内部解剖图，注明各器官名称。
实验八 ABO血型检测
一、实验目的
学习鉴别血型的方法，观察红细胞凝集现象，掌握ABO血型鉴定的原理。
二、实验原理
两个人的血液混合时，有时可能出现红细胞凝集成团，然后溶解。其原因是人类血液中的红细胞内含有两种凝聚原（凝聚原A、凝聚原B）；血清内还有两种凝集素（抗A凝集素、抗B凝集素）。如果凝集原A与抗A凝集素相遇、凝聚原B与抗B凝集素相遇，就会出现红细胞的凝集反应。根据红细胞中所含凝集原的不同，ABO血型系统可分成A、B、AB、O四种血型（见表1）。
表1ABO血型系统中的抗原和抗体
三、实验材料
标准A型血清（抗B）、标准B型血清（抗A）
四、实验用具
消毒采血针、玻片、牙签、显微镜，75％酒精棉球、干棉球、记号笔。
五、实验内容
1. 在玻璃片两端标记A、B（后简称A端、B端）。
2. 取标准A型血清一滴，滴在玻璃片的A端，取标准B型血清一滴，滴在玻璃片的B 端。
3. 用75%酒精棉球对受试者的手指尖或耳垂、采血针及实验人员的手进行消毒。然后，用采血针刺手指尖或耳垂取血（刺的速度要快，深度为2-3mm）。
4. 用消毒牙签的一端取血（只需在血滴上蘸一下即可），置于A端的标准血清中，并稍加搅动；用另一端取血，同样置于B端的标准血清中，并稍加搅动。放置3-5分钟中后进行观察。
血型的判断
根据下列情况判断血型。
（1）在A端发生血细胞凝集现象，而B端不发生凝集现象的，受试者的血型为“B”型。（2）在B端发生血细胞凝集现象，而A端不发生凝集现象的，受试者的血型为“A”型。（3）在A、B端发生血细胞凝集现象，受试者的血型为“AB”型。
（4）在A、B端不发生血细胞凝集现象，受试者的血型为“O”型。
4．注意事项：
（1）严防两种血清接触。
（2）牙签沾取血液切勿过多，以防止在血清中形成团块，影响判断结果。
（3）分清牙签，不要用同一牙签一端同时在A血清和B血清中搅拌。
五、实验报告
根据实验结果，判定受试者的血型并讨论该受试者在临床输血时能给何型病人输血？能接受何型给血者的血液？为什么？
实验九大型海藻的分类与识别
一、实验目的
学习大型海藻的采集方法，观察青岛沿海主要大型海藻的形态特征，掌握大型海藻的主要分类依据，了解其栖息地的环境状况。
二、实验材料
青岛沿海主要大型海藻
三、实验用具
吸水纸、玻片、显微镜、水桶、剪刀
四、实验内容
1. 沿石老人海岸，采集主要大型海藻，观察其形态特征，了解其栖息地状况。
2. 将收集的海藻置于吸水纸上吸干，剪取典型部位放在载玻片上，置于显微镜下观察，可制作横切、纵切切片观察细胞内部结构。
3. 完成所采集海藻的分类。
五、实验报告
以组为单位绘出各自采集海藻的形态图并写出分类表。
植物染色体制片与观察实验报告（洋葱组） 姓名：蔡梦雅 1230170010 同组成员：曹鉴云陈锦容刘艳马彦霞 一、中文摘要：染色体（Chromosome），是细胞内具有遗传性质的物体，易被碱性染料染成深色，又叫染色质。其本质是脱氧核甘酸，是细胞核内由核蛋白组成、能用碱性染料染色、有结构的线状体，是遗传物质基因的载体。这里我们用洋葱染色体作为代表使用压片法制片并且进行观察。 二、关键词：染色体洋葱压片法 三、引言：洋葱（onion）是百合科（Liliaceae）葱属中以肉质鳞片和鳞芽构成鳞芽的2年生草本植物，其学名为Allium cepa L，染色体数为2n=2x=16。由表1和图1可见,洋葱的8对染色体中,有7对(第1~7对)染色体,臂比在1·01~1·70之间,为中部着丝点染色体,1对(第8对),臂比为4·74,为近端部着丝点且带随体的染色体;依据STEB-BINS[4]的核型分类标准,洋葱的染色体核型在遗传进化上属较古老的2A型。100多年来有关染色体与染色体组结构功能的研究一直是生命科学最活跃的研究领域之一，现今人们完成基因组测序后回到对染色体上进行基因定位和作图，因此有关染色体的研究在基因组合功能基因组时代都有重要意义，陈瑞阳教授历时25年的研究完成的《中国主要植物染色体研究》对我国2834种植物染色体数目进行了报道，完成了1045种植物的核型分析，积累了宝贵的染色体基础数据创建了我国植物染色体研究信息平台。研究染色体进化与生物进化的有不可分割的关系,国际对染色体的化学成分,DNA含量,碱基组成和以染色体数目、形态、结构、大小等为特征的核型进化与物种形成和演化关系的研究,为揭示生物进化趋势提供染色体方面的科学资料，总的来说对染色体的研究在各类学科领域内都有着重要的意义。国内外对洋葱的研究主要在其成分和药用方面，在细胞遗传上张自力和陈瑞阳等对洋葱的C带显示法进行过研究，田秋元等对洋葱的核型分析及有关制片方法进行了探讨。植物根尖的分生细胞的有丝分裂，每天都有分裂高峰时间，此时把根尖固定，经过染色和压片，再置放在显微镜下观察，可以看到大量处于有丝分裂各时期的细胞核染色体。我们设计了不同的实验方案探究如何制作优良的植物染色体玻片，掌握染色体技术。 四、材料与方法： 1.取材 洋葱（Aillum cepa）的鳞茎 2.实验器具和药品 2.1器具 a.载玻片 b.盖玻片 c.烧杯 d.量筒 e.培养皿 f.滤纸 g.玻璃棒 h.镊子i.手术刀 2.2药品 a.0.1mol/L醋酸钠溶液 b.0.25%秋水仙素 c.冰醋酸 d.无水乙醇 e.1mol/LHcl f.纤维素酶 g.果胶酶 h.卡宝品红 2.3试剂配制 卡诺固定液：用3份无水酒精，加入1份冰醋酸（现配现用）。 酸解液：一份无水乙醇与一份1mol/L 盐酸1:1进行配制。 酶解液：用0.4g的纤维素酶和0.15g的果胶酶溶解在20ml蒸馏水里。
实验十人类染色体G显带技术及G带核型分析 实验目的 1、初步掌握染色体G带标本的制备技术。 2、了解人类染色体的G显带的带型特征。 实验用品 1、材料：常规方法制备的中期人类染色体标本（标本片龄不超过30天为宜）。 2、器材：显微镜、恒温培养箱、烤箱、恒温水浴箱、冰箱、染色缸、小镊子、玻片架、香柏油、二甲苯、擦镜纸、吸水纸。 3、试剂：％胰蛋白酶溶液、％EDTA溶液、胰蛋白酶一EDTA混合液、％生理盐水、蒸馏水、Giemsa原液、Giemsa稀释液、1／15mol ／L磷酸缓冲液。 实验原理 人们将用各种不同的方法，以及用不同的染料处理染色体标本后，使每条染色体上出现明暗相间，或深浅不同带纹的技术称为显带技术（banding technique）。本世纪70年代以来，显带技术得到了很大发展，且在众多的显带技术中（Q带、G带、C带、R带、T带），G带是目前被广泛应用的一种带型。因为它主要是被Giemsa染料染色后而显带，故称之为G显带技术，其所显示的带纹分布在整个染色体上。 研究发现，人染色体标本经胰蛋白酶、Na0H、柠檬酸盐或尿素等试剂处理后，再用Giemsa 染色，可使每条染色体上显示出深浅交替的横纹，这就是染色体的G带。每条染色体都有其较为恒定的带纹特征，所以G显带后，可以较为准确的识别每条染色体，并可发现染色体上较细微的结构畸变。关于G显带的机理目前有多种说法，例如，Lee等（1973）认为染色体上与DNA结合疏松的组蛋白易被胰蛋白酶分解掉，染色后这些区段成为浅带，而那些组蛋白和DNA结合牢固的区段可被染成深带。有人认为，染色体显带现象是染色体本身存在着带的结构。比如用相差显微镜观察未染色的染色体时，就能直接观察到带的存在。用特殊方法处理后，再用染料染色，则带更加清楚，随显带方法不同，显出来的带特点也不一样，说明带的出现又与染料特异结合有关。一般认为，易着色的阳性带为含有AT多的染色体节段，相反，含GC多的染色体段则不易着色。总的来说，G显带的机理还未搞清。 内容与方法 一、人类染色体G显带标本制备 1、胰蛋白酶法 ①将常规制备的人染色体玻片标本（未染色的白片）置70℃烤箱中处理2小时，然后转入37℃培养箱中备用，一般在第3～7天进行显带。 ②取％的胰蛋白酶原液加生理盐水至50ml，配成％的工作液并用NaHCO3调pH值至7左右。 ③将配好的胰蛋白酶工作液放入37℃水浴箱中预热。 ④将玻片标本浸入胰蛋白酶中，不断摆动使胰蛋白酶的作用均匀，处理1～2分钟（精确的时间自行摸索）。 ⑤立即取出玻片，放入生理盐水中漂洗两次。 ⑥染色。将标本浸入37℃预温的Giemsa染液（1:10的Giemsa原液和的磷酸缓冲液）
洋葱根尖染色体有丝分裂观察与多倍体诱导 一、实验目的 1、掌握洋葱培养的方法，掌握利用秋水仙素诱导植物多倍体的方法。 2、掌握洋葱根尖制片的方法，复习染色、压片的基本操作。 3、通过对于有丝分裂相的观察，统计洋葱染色体数目，加深对于细胞有丝分裂过程的理解。 4、对比进行多倍体诱导前后的洋葱根尖，理解四倍体与二倍体的区别。 二、实验原理 （一）有丝分裂 完整的有丝分裂相包括G1期（合成前期）、S期（合成期）、G2期（合成后期）和M期（分裂期），其中G1期、S期和G2期合称间期，细胞完成DNA的复制以及有丝分裂的准备，而M期又可以分为前期、中期、后期和末期，为了形态 观察的方便，本实验采用后一种分法。 观察有丝分裂，重点在于观察 染色体的形态。在细胞分裂前期，细 胞核解体，染色质凝聚显现出染色体 的形态；在前中期，染色体散乱地分 布于细胞的中部；在中期，纺锤体形 成，染色体受到微管的牵引，着丝粒 成行排列于赤道板上；在后期，染色 体受到动粒微管的牵引，向细胞两级 运动；在末期，染色体重新解螺旋， 细胞核重新形成。 （二）洋葱的根尖 洋葱根尖的整体结构如右图，其中只有分生区的初生分生组织由于细胞始终处于持久而强烈的有丝分裂之中而作为我们的观察对象，其余部分在制片时都应当尽量剔除来保证观察效果。 （三）多倍体的诱导 多倍体的诱导使用秋水仙素，秋水仙素可以阻止微管蛋白的聚合，从而使有丝分裂中期纺锤体不能正常形成，但是姐妹染色单体照常想成，只是没有被拉向两级，于是染色体数目加倍。 （四）各步骤的作用 1.固定液可以迅速杀死细胞，保持细胞形态在有丝分裂相。 2.解离可以破坏细胞的胞间层（果胶），使细胞之间的联系变 松散，有利于压片和染色。
染色体标本的制备及组型观察 【实验目的】 1. 掌握染色体标本制作的基本方法； 2. 认识不同生物的染色体的状态，学会做染色体组型图。 【制作染色体标本的意义】 了解染色体的特征（形态、大小、数目）一一绘制染色体组型图 【染色体组型图的应用】 ①生物学方面：根据染色体特征鉴别生物及种类：兔44条；小鼠40条；大鼠42条; 鸡78条；猫38条；狗78条；人46条；马64条 ②临床医学方面：主要用于遗传性疾病的诊断和研究： 十21三体综合症：是21对常染色体多一条，此种人“先天愚型”，或称“伸舌样白痴” J卵巢退化症：45 XO,外貌表现为女性，卵巢发育不全或无， 1.5米以下，不能生育。 .睾丸退化症：47 XXY，外貌为男性，比一般男性高，睾丸发育不全，有女性样乳房， 智力低下或超常，不能生育，发声尖高。 因此，染色组型实验广泛应用于胎儿遗传性疾病早期诊断中（抽羊水做组型） 【染色体标本制作的原理】 ------------------ 选择活跃的组织：胸腺，骨髓，睾丸，小肠“ 细胞具有旺盛尸 _________________ 的分裂能力卞 制作染色体标彳J施加药物使细胞分裂：PHA 本的先决条件 设法得到大量的分裂中期细胞：秋水仙素 1. PHA促进细胞分裂，使淋巴细胞返幼，变成淋巴母细胞。 2. 秋水仙素：破坏微管装配，使纺锤体不能形成，使大量细胞停在分裂中期。 3. 空气干燥：使细胞与染色体展开。 4. 低渗作用：水进入细胞内，细胞内容空间变大，染色体间的距离变大，易于染色体分散开。 5. 固定：用Camoy s solution,作用使蛋白变性，对染色体内的组蛋白讲，变形后硬度增力口，保持了染 色体的“即时形态”对细胞膜蛋白讲，变性使细胞膜硬度增强，形成屏障作用，防止了细胞内物质外溢 和丢失。 【实验用品】
染色体标本的制作及组型 观察 Revised by Jack on December 14,2020
染色体标本的制备及组型观察 【实验目的】 1.掌握染色体标本制作的基本方法； 2.认识不同生物的染色体的状态，学会做染色体组型图。 【制作染色体标本的意义】 了解染色体的特征（形态、大小、数目）——绘制染色体组型图 【染色体组型图的应用】 ①生物学方面：根据染色体特征鉴别生物及种类：兔44条；小鼠40条；大 鼠42条；鸡78条；猫38条；狗78条；人46条；马64条 ②临床医学方面：主要用于遗传性疾病的诊断和研究： 21三体综合症：是21对常染色体多一条，此种人“先天愚型”，或称“伸舌样白痴” 卵巢退化症：45 XO，外貌表现为女性，卵巢发育不全或无，米以下，不能生育。 睾丸退化症：47 XXY ，外貌为男性，比一般男性高，睾丸发育不全，有女性样乳房，智力低下或超常，不能生育，发声尖高。 因此，染色组型实验广泛应用于胎儿遗传性疾病早期诊断中（抽羊水做组型） 【染色体标本制作的原理】 施加药物使细胞分裂：PHA
设法得到大量的分裂中期细胞：秋水仙素 1.PHA：促进细胞分裂，使淋巴细胞返幼，变成淋巴母细胞。 2.秋水仙素：破坏微管装配，使纺锤体不能形成，使大量细胞停在分裂中期。 3.空气干燥：使细胞与染色体展开。 4.低渗作用：水进入细胞内，细胞内容空间变大，染色体间的距离变大，易于染色体分散开。 5.固定：用Camoy’s solution,作用使蛋白变性，对染色体内的组蛋白讲，变形后硬度增加，保 持了染色体的“即时形态”对细胞膜蛋白讲，变性使细胞膜硬度增强，形成屏障作用，防止了细胞内物质外溢和丢失。 【实验用品】 1.实验器材：显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、手术剪、解剖盘、胶头滴管、 离心管、离心机、小烧杯、冰箱、酒精灯、小烧杯 2.实验药品：蒸馏水、% NaCl溶液、% KCl溶液，固定液（甲醇：冰醋酸 =3:1）、秋水仙素 3.实验材料：小鼠 【实验步骤】 1.取雄性小鼠，以每克体重4微克注射秋水仙素（约1mL），14-16h后，用断头法处死小鼠，取 出睾丸用生理盐水（% NaCl溶液）洗去血污，置于解剖盘中。 2.将睾丸放入装有1mL % KCl溶液的小烧杯中剪碎（液体呈乳白色）。 3.用铜网过滤到刻度离心管中，再加% KCl溶液至4mL。 4.37℃静置30mins，进行低渗处理。 5.以800-1000r/min离心8分钟。 6.弃上清液，加入2mL甲醇·冰醋酸固定液。用吸管至管底吹气，轻轻打散细胞，固定8mins。 7.再以800-1000r/min离心8分钟。 8.弃上清液，加入1mL甲醇·冰醋酸固定液，再制成细胞悬液，固定5mins。 9.取去洁净的低温预冷载片，距载片10-15cm的高度滴下2-3滴细胞悬液，从载片一边向另一边轻 轻吹气，并同时轻轻敲打载片，以使细胞均匀分布和促使染色体展开。 10.用滤纸擦去载片上的多余液体，空气干燥或文火干燥。 11.用染液染色20——30分钟，细水冲洗玻片背面，去除多余染液，气干。 12.镜检：低倍镜下寻找分散良好，染色适中的分裂相，高倍镜或油镜下观察染色体形态并计数。【实验结果】 精子头部 精子鞭毛分裂中期的染色体未破碎的细胞
大蒜根尖染色体实验报告 一、 实验目的与实验要求 1、掌握洋葱培养的方法，掌握利用秋水仙素诱导植物多倍体的方法。 2、掌握洋葱根尖制片的方法，复习染色、压片的基本操作。 3、通过对于有丝分裂相的观察，统计洋葱染色体数目，加深对于细胞有丝分裂过程的理解。 4、对比进行多倍体诱导前后的洋葱根尖，理解四倍体与二倍体的区别，认识微核和植物细胞分裂期的各形态特征。 5、体验开放式实验教学，培养生物实验意识，提高学习的主动性、获取实验知识的能力和撰写实验报告水平。 二、 实验方案 1、实验仪器 显微镜、载玻片、盖玻片、试管、烧杯、小塑料管、滤纸、刀片、解剖针、滤纸等 2、实验药品 新鲜、健康的洋葱鳞茎一个；0.02%秋水仙素、1mol/L HCl、醋酸洋红染液、卡诺氏固定液，碱性品红、乙酸，乙醇等。 3、实验原理 (1 洋葱的根尖 洋葱根尖的整体结构如右图，其中只有分生区的初生分生组织由于细胞始终处于持久而强烈的有丝分裂之中而作为我们的观察对象，其余部分在制片时都应当尽量剔除来保证观察效果。 (2 多倍体的诱导
多倍体的诱导使用秋水仙素，秋水仙素可以阻止微管蛋白的聚合，从而使有丝分裂中期纺锤体不能正常形成，但是姐妹染色单体照常想成，只是没有被拉向两级，于是染色体数目加倍。 各步骤的作用：固定液可以迅速杀死细胞，保持细胞形态在有丝分裂相。解离可以破坏细胞的胞间层（果胶），使细胞之间的联系变松散，有利于压片和染色。漂洗可以洗去过量的盐酸，防止解离过度 破坏细胞结构或影响染色效果（盐酸是酸性，而醋酸洋红是碱性染料）。 (3 有丝分裂 完整的有丝分裂相包括G1期（合成前期）、S 期（合成期）、G2期（合成后期）和M 期（分裂期），其中G1期、S 期和G2期合称间期，细胞完成DNA 的复制以及有丝分裂的准备，而M 期又可以分为前期、中期、后期和末期，为了形态观察的方便，本实验采用后一种分法。如表一。 表一植物有丝分裂各时期特点 4、实验步骤 (1 将大蒜剥皮后放进垫了滤纸的培养基中，加入清水，放进25℃恒温
实验十一：观察根尖分生组织细胞的有丝分裂 一、实验目的： 1、制作洋葱根尖细胞有丝分裂装片。 2、观察植物细胞有丝分裂的过程，识别有丝分裂的不同时期，比较细胞周期不同时期的时间长短。 3、绘制植物细胞有丝分裂简图。 二、实验原理： 1、高等植物的分生组织有丝分裂较旺盛。 2、有丝分裂各个时期细胞内染色体的形态和行为变化不同，可用高倍显微镜根据各个时期内染色体的变化情况，识别该细胞处于那个时期。 3、细胞核内的染色体易被碱性染料（如龙胆紫）染成深色。 三、程序设计思路 1、洋葱根尖的培养在上实验课之前的3-4天，取洋葱一个，放在广口瓶上。瓶内装满清水，让洋葱的底部接触到瓶内的水面。把这个装置放在温暖的地方培养。待根长约5cm，取生长健壮的根尖制成临时装片观察。 2、装片的制作 制作流程为：解离—漂洗—染色—制片 解离上午10时至下午2时，剪去洋葱根尖2-3mm，立即放入盛入有盐酸和酒精混合液（1：1）的玻璃皿中，在温室下解离。 3-5min 用药液使组织中的细胞相互分离开来 漂洗待根尖酥软后，用镊子取出，放入盛入清水的玻璃皿中漂洗。约10min 洗去药液，防止解离过度 染色把根尖放进盛有质量浓度为ml或ml的龙胆紫溶液（或醋酸洋红液）的玻璃皿中染色。3-5min 染料能使染色体着色。 制片用镊子将这段根尖取出来，放在载玻片上，加一滴清水，并用镊子尖把根尖能碎，盖上盖玻片，在盖玻片上再加一片载玻片。然后，用拇指轻轻的按压载玻片。使细胞分散开来，有利于观察 3、观察 a低倍镜观察：找到分生区细胞，其特点是细胞呈正方形，排列紧密，有的细胞正在分裂b高倍镜观察：在低倍镜观察的基础上换高倍镜，直到看清细胞的物象为止 c仔细观察：先到中期，再找其余各期，注意染色体的特点 d移动观察：慢慢移动装片，完整地观察各个时期（如果自制装片效果不太理想，可以观察洋葱根尖固定装片） 4、绘图 5、记录 四、分析 1、取材分析 （1）取材及用具：a，取材：洋葱（可用葱.蒜代替），质量分数为15%的盐酸，体积分数为95%的酒精，质量浓度为ml或ml的龙胆紫溶液（将龙胆紫溶解在质量分数2%的醋酸溶液中配制而成）或醋酸洋红液，洋葱根尖细胞有丝分裂固定装片。 b、实验用具：显微镜，载玻片，盖玻片，玻璃皿，剪子，镊子，滴管。 c、取材分析：取材应为洋葱根尖分生区细胞根尖2-3mm，而且洋葱的根必须有活性。 (2)药品用法用量分析：解离液应为质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精按照1:1比例混合，而且解离时间要控制在3min-5min （3）过程分析：实验核心内容必须严格按照解离——漂洗——染色——制片四步进行
大蒜根尖多倍体诱导与染色体观察 实验目的： 1、了解利用秋水仙素诱导植物多倍体的方法。 2、掌握大蒜根尖制片的方法。 3、通过对玻片的观察，统计染色体数目。 4、对比不同的大蒜根尖染色体数目，理解二倍体和四倍体的区别。 实验原理： 1.有丝分裂 完整的有丝分裂相包括G1期（合成前期）、S期（合成期）、G2期（合成后期）和M期（分裂期），其中G1期、S期和G2期合称间期，细胞完成DNA的复制以及有丝分裂的准备，而M期又可以分为前期、中期、后期和末期，为了形态观察的方便，本实验采用后一种分法。观察有丝分裂，重点在于观察染色体的形态。在细胞分裂前期，细胞核解体，染色质凝聚显现出染色体的形态；在前中期，染色体散乱地分布于细胞的中部；在中期，纺锤体形成，染色体受到微管的牵引，着丝粒成行排列于赤道板上；在后期，染色体受到动粒微管的牵引，向细胞两级运动；在末期，染色体重新解螺旋，细胞核重新形成。细胞染色体过程示意图见图1. 图1：细胞有丝分裂过程示意图 2.大蒜的根尖 大蒜根尖的整体结构如图2，其中只有分生区的初生分生组织由于细胞始终
处于持久而强烈的有丝分裂之中而作为我们的观察对象，其余部分在制片时都应当尽量剔除来保证观察效果。
图2：大蒜根尖结构示意图 3.多倍体诱导 秋水仙素易溶于冷水、不易溶于热水、有毒、针状结晶或淡黄色粉末，是诱导多倍体的一种常用试剂，其是从百合科植物秋水仙的鳞茎和种子中提取出来的一种生物碱。它的作用机理是与微管蛋白单体结合，抑制微管的形成，进一步抑制纺锤体的形成，使染色单体分离受阻，形成同源多倍体。因此，秋水仙素作用于正在分裂的细胞，如生长点才能产生作用，诱导多倍体的形成。秋水仙素诱导多倍体在蔬菜和观赏植物的应用非常广泛，但是在大蒜方面的报道却很少。 图3：秋水仙素的化学结构式 实验器材： 实验材料：经秋水仙素处理过的大蒜根。（秋水仙素溶液配制取秋水仙素1g（先用少量95%乙醇助溶），溶于250～500ml蒸馏水中，配成浓度为0.2～0.4%的溶液，冰箱中保存。将大蒜架在盛水的烧杯中进行水培。待根尖长到1cm时，将大蒜盛在0.4%秋水仙素溶液的瓶盖或小烧杯上，避光处理24小时，然后再水培24小时加倍后根尖很肥大。）
实验五人类染色体标本制备 【目的要求】 1．熟悉人外周血淋巴细胞培养的原理。 2 3 【实验原理】 人类间期细胞核中的遗传物质染色质，在细胞进入分裂期时，经逐级螺旋形成染色体。 在分裂期的中期，染色体达到最大程度的凝集，表现为短而粗的典型结构。人外周血的有形 成分中，只有白细胞有核，而白细胞中只有淋巴细胞(主要是小淋巴细胞)具有潜在的细胞分 裂能力。 培养液中加入有丝分裂刺激剂植物血凝素(PHA)可使处于G0期、具有潜在分裂能力的淋 巴细胞转化为具有分裂能力的淋巴母细胞，并进入旺盛的有丝分裂周期；加入纺锤体抑制剂 秋水仙素可使处于分裂过程的淋巴细胞停滞在分裂中期，在收获细胞时，用低渗剂0.075 mol/L KCl对细胞进行低渗处理，可使胞膜胀破，染色体均匀分散；经离心、固定、制片等 过程，最终可获得便于观察分析的染色体标本。 制备的染色体标本片，不经特殊处理，直接染色，在显微镜下观察识别，并进行核型分 析的过程称为染色体非显带核型分析。 【实验用品】 (一) 材料：人外周静脉血。 (二) 器材：吸管、刻度离心管、量筒、5ml注射器、6号针头、台式离心机、试管架、 冷藏载玻片（一端磨砂）、铅笔、酒精灯、超净工作台、恒温水浴箱、载玻片、止血带、酒 精棉球、显微镜、废液缸。 (三)试剂 1. RPMI1640培养液 (1) RPMI1640：RPMI1640固体培养基10.4 g,溶于1000 ml双蒸水中，抽滤除菌。 (2) RPMI1640培养液：每100 ml RPMI1640培养液中含RPMI 1640 80 ml、灭活的小牛血 清20 ml、PHA 50 mg、青霉素(终浓度100 U/ml)、链霉素10000 μg (终浓度100 μg /ml)， 15磅、20min高压灭菌的NaHCO3调pH至7.2～7.4，分装20小瓶，每瓶5 ml。 (3) 配制方法 配制过程所需的玻璃器具先用浅水洗刷干净，烘干，放入清洁液中浸泡2 d，取出后用自来水冲洗15次，蒸馏水冲洗3次，双蒸水冲洗1次，烤干后包装，15磅20 min高压灭菌。 新瓶塞等橡胶类制品用水洗刷后，用0.5mol/L NaOH煮沸20min，自来水冲洗；用0.5mol/L HCl煮沸20 min，自来水冲洗，蒸馏水冲洗，在双蒸水中浸泡24h；浸泡后取出晾干，包装后高
实验原理 在植物体中，有丝分裂常见于根尖、茎尖等分生区细胞。高等植物细胞有丝分裂的过程，分为分裂问期和有丝分裂期的前期、中期、后期、末期。可以用高倍镜观察植物细胞有丝分裂的过程，根据各个时期细胞内染色体或染色质）的变化情况，识别该细胞处于有丝分裂的哪个时期。细胞核内的染色体容易被碱性染料（如龙胆紫、醋酸洋红）溶液着色。 目的要求 1．观察植物细胞有丝分裂的过程，识别有丝分裂的不同时期。 2．学会制作洋葱根尖有丝分裂装片的生物技术。 3．学会使用高倍镜和绘生物图的方法。 材料 洋葱（可以用蒜、葱代替）。 用具 显微镜，载玻片，盖玻片，玻璃皿3个，、剪刀，镊子，滴管。 药品 质量分数为15％的盐酸，酒精的体积分数为95％的溶液，龙胆紫的质量浓度为0．01 g ／mL的或0．02 g／mL的溶液（或醋酸洋红液）。 方法步骤 一、洋葱根尖的培养 在上实验课之前的3d～4d，取洋葱一个，放在广口瓶上。瓶内装满清水，让洋葱的底部接触到瓶内的水面。把这个装置放在温暖的地方，注意经常换水，使洋葱的底部总是接触到水。待根长5 cm时，可取生长健壮的根尖制片观察。 二、装片的制作 1．解离下午2时是洋葱有丝分裂的高峰期，可在此时剪取洋葱的根尖 2 mm～ 3 mm，立即放入盛有氯化氢的质量分数为匕％的溶液和酒精的体积分数为95％溶液的混合液（1：1）的玻璃皿中，在室温下解离3 min～5 min后取出根尖。 2．漂洗待根尖酥软后，用镊子取出，放入盛有清水的玻璃皿中漂洗约10 min. 3．染色把洋葱根尖放进盛有龙胆紫的质量浓度为0．01g／mL 或0．02 g/mL的溶液（或醋酸洋红液）的玻璃皿中，染色3 min～5 min。 4．制片用镊子将这段洋葱根采取出来，放在载玻片上，加一滴清水，并且用镊子尖把洋葱根尖弄碎，盖上盖玻片，在盖玻片上再加一片载玻片。然后，用拇指轻轻地压盖玻片，这样可以使细胞分散开来。 三、洋葱根尖细胞有丝分裂的观察 1．低倍镜观察 把制作成的洋葱根尖装片先放在低倍镜下观察，慢慢移动装片，要求找到分生巨细胞，它的特点是：细胞呈正方形，排列紧密，有的细胞正在分裂。 2．高倍镜观察 找到分生区细胞后，把低倍镜移走，换上高倍镜，用细准焦螺旋和反光镜把视野调整清晰，直到看清细胞物像为止。 3．仔细观察，可先找出处于细胞分裂期中期的细胞，然后再找出前期、后期、末期的细胞。注意观察各个时期细胞内染色体变化的特点。 4．在一个视野里，往往不容易找全有丝分裂过程中各个时期的细胞。如果是这样，可以慢慢地移动装片，从邻近的分生区细胞中寻找。 5．如果自制装片效果不太理想，可以观察教师演示的洋葱根尖细胞有丝分裂的固定装片。
小白鼠染色体标本的制作、染色与观察 姓名：学号：实验时间： 1.实验目的 （1）初步掌握小鼠睾丸细胞染色体标本的基本制作过程和Giemsa染色法，了解各操作步骤的原理。（2）了解常用实验动物染色体的数目及特点。 （3）认识不同生物染色体的特征。 2.实验原理 凡处于活跃增殖状态或者经过各种处理，任何动物组织的细胞都可进入分裂时期，均可用于染色体分析。在正常动物体内，精巢和骨髓均为是活跃分裂的组织。给动物注射一定剂量的秋水仙素，即可使许多处于分裂的细胞停滞于中期，然后采用常规空气干燥法制备染色体，即可得到大量可分析的染色体标本。本方法简便、可靠，不需要经体外培养和无菌操作，易于推广。骨髓细胞是用于动物细胞遗传学研究很好的材料。但在取材方面，精巢又比骨髓要简易一些，故本实验选用小鼠的精巢为实验材料。 对于小鼠精巢染色体标本的制作，一般包括以下几个要点：①用一定剂量的秋水仙素破坏纺锤丝的形成，使细胞分裂停滞在中期, 使中期染色体停留在赤道面处；②用低渗法使细胞膨胀, 以至于在滴片时细胞胀破, 使细胞的染色体铺展到载玻片上；③空气干燥法可使细胞的染色体在载片上展平,经Giemsa染色后便可观察到染色体的显微图象。 Giemsa染色是最常用的染色方法之一，适用于多种细胞和染色体染色。主要用Giemsa染液可以将细胞核染成紫红色或蓝紫色，胞浆染成粉红色，在光镜下呈现出清晰的细胞及染色体图像。3.实验材料和用品 （1）材料：小白鼠 （2）试剂：秋水仙素、生理盐水（0.9%的NaCl溶液）、0.3%KCl低渗溶液、固定液（甲醇：冰醋酸=3：1）、Giemsa染液 （3）器材：解剖盘、解剖镊、解剖剪、小烧杯（×2）、吸管、玻璃刻度离心管、恒温水浴锅、离心机、铜网、预冷载玻片、记号笔、普通光学显微镜、玻璃等 4.实验步骤 （1）小白鼠染色体标本制作 ①取雄性小鼠以每克体重4μｇ注射秋水仙素，经14～16小时后，断头法杀死小鼠，取出睾丸用生理盐水（0.9%的NaCl）洗去血污。 ②放入装有1ml 0.3%KCl液的小烧杯中剪碎至呈乳白色。 ③用铜网过滤到刻度离心管中，再加0.3%KCl液至4ml。 ④37℃静置30分钟，进行低渗处理。 ⑤以800～1000转/分离心8分钟。 ⑥弃上清液，加入2ml甲醇·冰醋酸固定液（3：1），并用吸管至管底吹气，轻轻打散细胞，固定8分钟。 ⑦再以800～1000转/分离心8分钟。 ⑧弃上清液，加1ml固定液，再制成细胞悬液，固定5分钟。 ⑨取洁净的低温预冷载片，距载片10～15cm高度滴下2～3滴细胞悬液，从载片一边向另一边轻轻吹气，并同时轻轻敲打载片，以使细胞均匀分布和促使染色体展开。
实验方案 实验外周血淋巴细胞培养及染色体标本制备，染色体组型分析 一、实验目的 1、了解动物细胞培养的方法。掌握人体外周血淋巴细胞培养与染色体标本制备。 2、初步掌握人类染色体G－带的显示方法及人类染色体G－带在染色体识别中的意义。 3、熟悉人类染色体的镜下检查和核型分析方法。初步掌握人类染色体G带的特征及其 识别。 二、实验原理 所谓外周血培养即是将外周血接种在适当的培培养物中加入适量的秋水仙素，使纺锤体微管解聚，这样细胞停留在中期，可以获得大量的分裂细胞。用低渗盐溶液（一般是0.075mol/L的KCl）处理，使其中的红细胞及分裂相细胞膜和一部分细胞质除去，最后以气干法制片，可获得较好的染色体养基中进行培养。人类外周血细胞本来是终末分化细胞，一般没有分裂能力，但经PHA（植物血球凝集素）或ConA等药物刺激后，转变成可分裂的转化细胞。 染色体显带是将染色体标本经过一定程序处理，并用特定染料染色，使染色体沿其长轴显现明暗或深浅相间的横行带纹――染色体带，这种技术，称为染色体显带技术。通过显带，人们可以准确地识别每一条染色体及染色体上的各个区段，并可发现染色体上较细微的结构变化。 在所有的显带技术中，G显带（G banding）是最常见的显带技术，它是将染色体标本用碱、胰蛋白酶或其它盐溶液处理后，再用Giemsa染液染色，在普通显微镜下，可见深浅相间的带纹，称G带（G band）。G显带方法简便，带纹清晰，染色体标本可以长期保存，因此被广泛用于染色体病的诊断和研究。 正常人类染色体的数目为46条(23对)，1960年的Denver会议和1963年的London会议制定了统一的人类染色体命名体制：按照染色体的相对长度、臂比和着丝粒指数，将常染色体（22对）按大小用阿拉伯数字标记，顺次排列为1～22号，性染色体用X和Y标记；并按染色体大小和着丝粒位置，把人类染色体分为七个组，用大写字母A～G表示。 染色体经显带处理后，每条染色体都显示出其特定的带纹特征（见下表）。根据这些特征，可以准确地识别每条染色体，检出染色体数目或结构畸变。 表1 人染色体组型及其特征
观察植物细胞有丝分裂 实验报告 Document number：WTWYT-WYWY-BTGTT-YTTYU-2018GT
《观察植物细胞有丝分裂》实验报告 组员：肖石连、周小燕、汪小康、邹苗 执笔人：汪小康 一、实验原理 1.观察部位：植物体的根尖、茎尖等分生区的细胞。 2.分裂过程：高等植物细胞有丝分裂分为间期和分裂期的前期、中期、后期和末期，不同时期细胞染色体的行为变化有各自的特点.。 3.观察过程：先用低倍镜找到根尖生长点的细胞（正方形、排列紧密、有的正在分裂），再用高倍镜辨别各时期的染色体(染色质)变化，并判断该细胞处于有丝分裂的哪个时期。 4.染色过程：细胞核内的染色体容易被碱性染料（龙胆紫或醋酸洋红等）着色。 二、实验器材 大蒜、显微镜、载玻片、盖玻片、培养皿、刀片、镊子、烧杯等 15%的盐酸、95%的酒精、龙胆紫溶液等 三、实验步骤 1.前期培养：取大蒜若干放在装满清水的100ML烧杯上，让它的底部接触瓶内水面，把烧杯放在温暖地方培养。 2．解离：实验前一天，取大蒜根尖，使用卡诺氏固定液（乙醇：冰醋酸=3:1）进行24H固定，之后用蒸馏水冲洗，放入70%酒精中，在4℃冰箱中保存。待到实验时即可进行解离处理。取经过和未经过固定液处理的根尖各1-3个，剪根尖2CM，放入盛
有15%盐酸和95%酒精1:1混合液的培养皿中并盖好（以防盐酸挥发），解离3~5min,此时根尖变得酥软透明。 3.漂洗：用镊子夹住伸长区一端，从培养皿中取出根尖，放到盛有清水的培养皿中漂洗2~3min，可用镊子或玻棒轻轻搅动。 4．染色：用镊子夹住伸长区一端，从培养皿中取出根尖，放到干净的载玻片中央，用刀片切去根尖大概0.5mm，紧贴刚刚切的位置切下针尖大小的根尖，此处即为根尖分生区。利用准备好的染液进行染色，时间为3~5min。 5.压片：将被染上色的根尖盖上盖玻片（防止气泡产生），然后在盖玻片上放一层吸水纸，水平放在实验台上，用拇指稍用力对其按压，使根尖细胞呈云雾状散开，此时再把盖玻片周围染液吸拭干净即可。 6.观察：先用低倍镜观察，找到分生区细胞（体积小、排列紧密、整齐、近似正方形，有的细胞正在分裂）。找到视野后用高倍镜观察。 四、实验结果及讨论 从所做实验观察结果看来，处于间期的细胞最多，处于分裂时期的细胞较少。原因是细胞间期在细胞有丝分裂周期中占的比重大。此次实验观察到了有丝分裂各时期形态。比较成功
微核试验 摘要：利用大蒜根尖细胞微核染色与计数技术测定不同浓度6价铬和1.2,4-三氯苯以及它们的不同浓度混合液对大蒜根尖分生区细胞微核率和细胞分裂各期的影响。以蒸馏水为对照组，设置的实验组为3组不同浓度的6价铬和三氯苯以及它们的混合液。用孚尔根染液法对不同试剂及各浓度的处理的根尖进行染色。在显微镜下观察各试剂各浓度处理下的微核率以及不同分裂期细胞的比例。 关键字：孚尔根染色法、微核、微核率、分裂期细胞 Abstract:Use of garlic root tip cell micronucleus dyeing and counting technology . Different concentrations of chromium 6 and 1,2, 4 - t hree hlorobenzene as well as their different concentration mixture to garlic root tip meristematic cells in the areas of micronucleus rate and the influence of each stage of cell division.With distilled water as control group, the group set up for the three groups of different concentrations of chromium 6 and 3 chlorobenzene and their https://www.doczj.com/doc/8817306789.html,efu's root dye solution for different reagent and the concentration of the treatment of root tip for dyeing. Under the microscope to observe the reagent concentration under the treatment of micronucleus rate and different proportion of split phase cells Key Words：Fu's root staining method、micronucleus、Micronucleus rate、Split phase cells 一、研究的目的与意义： 1：知道微核产生的原理。 2：学会识别微核以及计算微核率。 3：学用微核试验来评价药物、放射线、有毒物质等对人体细胞或体外培养细胞遗传学损伤。 4：了解不同化学试剂对细胞各个分裂期的影响。 由于大量新的化合物的合成，原子能应用，各种各样工业废物的排出，使人们很需要有一套高度灵敏，技术简单的测试系统来监视环境的变化。真核测试系统能直接推测诱变物质对人类或其它高等生物的遗传危害。利用微核实验这种遗传毒性试验方法可以检测检测染色体或者有丝分裂器损伤，计数细胞的微核率。检测已存在或潜在的危害。 二、研究进展 微核( micronucleus, 简称MCN) , 是真核生物细胞中的一种异常结构, 是染色体畸变在间期细胞中的一种表现形式。一般认为, 微核是由有丝分裂后期丧失着丝粒的染色体片断产生的。在细胞有丝分裂时, 受到有害理化因子的损伤, 染 色体发生断裂, 在下一次分裂后期, 丧失着丝粒的染色体片断行动滞后, 不能进
实验八 植物染色体标本的制备与观察 一、实验目的 1、掌握常规压片法制备植物染色体标本。 2、了解中期染色体的形态和结构以及染色体的生物学意义。 二、实验原理 染色体是细胞分裂时期遗传物质存在的特定形式，是染色质紧密包装的结果，对染色体的观察在研究生物进化、发育、遗传和异变中有十分重要的作用。 植物染色体标本的制备，常用分生组织如根尖、茎尖和嫩叶做材料。常规压片法仍是当今观察植物染色体常见的方法，其程序包括取材、预处理、固定、解离、染色和压片等步骤，简单易操作，但是染色体易变形、难分散开。 三、实验仪器、材料和试剂 （一）仪器、用具：显微镜、剪刀、镊子、刀片、培养皿、滤纸、吸水纸、青霉素瓶、染色缸、载玻片、盖玻片、玻璃板、酒精灯。 （二）材料：蚕豆(Vicia faba , 2n=2x=12)、黑麦(Secale cereale , 2n=2x=14)、大麦(Hordeum sativum, 2n=2x=14)、普通小麦(Triticum aestivum , 2n=2x=42)、玉米(Zea mays , 2n=2x=20)、豌豆(Pisum sativum , 2n=2x=14)、洋葱（Aillum cepa ，2n ＝16）等根尖。 （三）试剂 1、 Carnoy 固定液、1%秋水仙素(或对二氯苯)。 2、苯酚品红染色液。 四、实验方法与步骤压片法制备染色体标本： (1) 取材：把蚕豆种子预先浸泡12h ，然后转入垫有湿润滤纸的培养皿中上面蒙上湿纱布，置25℃温箱中暗培养发根，经过48h 后幼根长至1—2cm 左右，于上午9—11时剪下根尖。 (2) 预处理：将剪下的根尖置于对二氯苯饱和水溶液或0.1％秋水仙素溶液中，浸泡处理2-4 h 。 (3) 固定：用水洗净处理过的根尖，经Carnoy 固定液中固定2-4h ，转入70％乙醇中，4℃保存备用。 (4) 解离：取出根尖，用蒸馏水洗净，放入l M HCl 中60℃解离8－10min ，再用蒸馏水洗净。 (5) 染色：改良苯酚品红 染色5—10min 。 (6) 压片：把根尖放在载玻片上、切取分生区部分、加一滴45 %醋酸，盖上盖玻片，用力垂直猛压，盖玻片上放上一滤纸，用铅笔上的橡皮头轻轻敲打盖片，使细胞和染色体分散。 （7）镜检 五、实验结果
物種的傳宗接代－ 洋蔥根尖細胞之觀察 一、背景介紹 「有絲分裂」是真核細胞繁殖時最主要的方式。稱為有絲分裂的原因是，因為在細胞分裂過程中會出現紡綞絲和染色體等一系列變化，然後才出現細胞的真正分裂為二。有絲分裂是一連續的複雜動態過程，為敘述方便，根據形態學上的變化，按這些過程的先後順序分為分裂間期（即不分裂的階段）和分裂期（即正在進行分裂的階段）。分裂期又分為： 1. 前期：細胞核中的染色質開始凝聚，核仁消失。 2. 中期：紡錘絲將染色體排列在細胞核中央。 3. 後期：成對染色體分離，向細胞的兩端移動。 4. 末期：各染色分體抵達細胞的兩極，子細胞形成新的核膜。 洋蔥根尖是觀察細胞分裂的良好材料，細胞大且容易染色觀察。本實驗便以洋蔥根尖為材料，經過酸化處裡、壓散細胞後，以特殊染料將染色質及染色體染上顏色後製成玻片標本，做為本次實驗觀察之材料。 二、實驗器材 1. 光學顯微鏡 2. 洋蔥根尖染色玻片標本 三、實驗步驟 1. 將玻片標本放置於顯微鏡鏡臺上。 2. 分別以100 倍、200 倍、400 倍，等三個放大倍率來觀察。 3. 詳細紀錄觀察結果，並依據觀察的結果回答以下之問題。 四、結果紀錄與問題 1. 請分別畫出標本玻片於顯微鏡400 倍視野下，所觀察到分裂期前期、中期、 後期、末期的細胞形態。 前期中期
2. 依據實際操作顯微鏡觀察的結果，寫出 A 、B 、C 三張圖之顯微鏡使用的解 析倍率? 3. 下圖二框內，A 細胞為處於正常狀態之細胞，請問B 細胞正在進行什麼樣 的活動? 4. 請列出「本次實驗」你使用顯微鏡可觀察到的所有細胞、組織或生物的名稱? 後期末期
精选范文:生物实验报告《观察植物细胞的有丝分裂》(共2篇)一、实验目的1.观察植 物细胞有丝分裂的过程，识别有丝分裂的不同时期。2.初步掌握制作洋葱根尖有丝分裂装片 的技能。3.初步掌握绘制生物图的方法。二、实验原理在植物体中，有丝分裂常见于根尖、 茎尖等分生区细胞，高等植物细胞有丝分裂的过程，分为分裂间期和分裂期的前期、中期、 后期、末期。可以用高倍显微镜观察植物细胞的有丝分裂的过程，根据各个时期细胞内染色 体（或染色质）的变化情况，识别该细胞处于有丝分裂的哪个时期，细胞核内的染色体容易 被碱性染料着色。三、材料用具洋葱根尖、显微镜、载玻片、盖玻片、滴管、镊子、培养皿、 铅笔、质量分数为15%的盐酸、体积分数为95%的酒精、质量分数为0.01g/ml的龙胆紫（或 紫药水）四、实验过程（见书ｐ39） 1．洋葱根尖的培养（提前3—4天） 2．解离：5min 3．漂 洗: 10min 4．染色: 5min 5．制片 6．镜检五、注意 1．解离充分是实验成功的必备条件。 解离充分，组织才能分散，细胞也不会重叠。 2 ．漂洗时间一定要足够，否则细胞染不上色。 3 ．染色时，染液的浓度和染色时间必须掌握好。特别是染色不能过深，否则镜下一片紫色， 无法观察。六、讨论1．制作好洋葱根尖有丝分裂装片的关键是什么？谈谈你自己的体会。 物理实验报告·化学实验报告·生物实验报告·实验报告格式·实验报告模板2．在观 察清楚有丝分裂各个时期的细胞以后，绘出洋葱根尖细胞有丝分裂的简图，并标明时期。 [生物实验报告《观察植物细胞的有丝分裂》(共2篇)]篇一：生物实验报告观察植物细胞的 有丝分裂实验报告 生物实验报告《观察植物细胞的有丝分 裂》_实验报告 [生物实验报告《观察植物细胞的有丝分裂》(共2篇)] 一、实验目的 1.观察植物细胞有丝分裂的过程，识别有丝分裂的不同时期。2.初步掌握制作 洋葱根尖有丝分裂装片的技能。3.初步掌握绘制生物图的方法。 二、实验原理在植 物体中，有丝分裂常见于根尖、茎尖等分生区细胞，高等植物细胞有丝分裂的过程，分为分 一、实验目的 1.观察植物细胞有 丝分裂的过程，识别有丝分裂的不同时期。 2.初步掌握制作洋 葱根尖有丝分裂装片的技能。 3.初步掌握绘制生 物图的方法。 二、实验原理 在植物体中，有丝分 裂常见于根尖、茎尖等分生区细胞，高等植物细胞有丝分裂的过 程，分为分裂间期和 分裂期的前期、中期、后期、末期。可以用高倍显微镜观察植物细胞的 有丝分裂的过程，根 据各个时期细胞内染色体（或染色质）的变化情况，识别该细胞处于有 丝分裂的哪个时期， 细胞核内的染色体容易被碱性染料着色。 三、材料用具 洋葱根尖、显微镜、 载玻片、盖玻片、滴管、镊子、培养皿、铅笔、质量分数为15%的盐酸、 体积分数为95%的
【实验题目】 染色体标本制作与观察 【实验目的】 1、掌握小鼠睾丸细胞染色体标本的基本制作过程和Giemsa染色法，了解各操作步骤的原理。 2、了解常用实验动物染色体的数目及特点。 3、认识不同生物染色体的特征，学会做染色体组型图。 【实验材料与用品】 1.器材：显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、手术剪、解剖盘、胶头滴管、离心管、离心机、 小烧杯、冰箱、酒精灯、小烧杯等 2.材料：小鼠 3. 试剂：蒸馏水、0.9%NaCl溶液、0.3%KCl溶液，固定液（甲醇：冰醋酸=3:1）、 秋水仙素 【实验原理】 一、制作染色体标本的先决条件 ①细胞具有旺盛的分裂能力：选择活跃的组织，如胸腺、骨髓、睾丸、小肠；或施加药物使 细胞分裂（PHA） ②设法得到大量的分裂中期细胞：利用秋水仙素 二、染色体 染色体是基因的载体。真核细胞染色体的数目和结构是重要的遗传特性之一。制备染色体标本是细胞学最基本的技术之一，优良的染色体制片是进行染色体显带、组型分析、原位杂交等的先决条件。
染色体的制备在原则上可以从所有发生有丝分裂的组织和细胞悬浮液中得到。最常用的途径是从骨髓细胞、血淋巴细胞、、和组织培养的细胞中制备染色体。本实验采用的方法是从小鼠的睾丸细胞中获取。 染色体的形态结构在细胞增殖周期中是不断的运动变化的，一般在有丝分裂中期，染色体形态最典型、最易辨认和区分。因此，制备染色体标本获取的是中期细胞。 染色体特征：数目、长度（绝对长度、相对长度）、着丝粒位置（M/SM/ST/T)、随体与次缢痕的数目大小和位置、带型分析 描述染色体的四个参数： ①相对长度=（每条染色体的长度）/（单倍常染色体之和+X染色体）*100，相对长度可以 用来表示每条染色体的长度。 ②臂指数=（长臂的长度）/(短臂的长度)，臂指数可以用来确定臂的长度。 ③着丝粒指数=（断臂长度）/（染色体全长）*100，着丝粒指数可以决定着丝粒的相对位 置。 ④染色体臂数（NF），根据着丝粒的位置来确定。 三、操作原理 小型动物的染色体制片最好最有效的材料就是骨髓组织（由于分裂活动旺盛，睾丸也可）利用睾丸细胞的制片技术虽然需要离心以及细致的操作，但基本程序并不复杂。在小鼠睾丸中，细胞有丝分裂和减数分裂比较旺盛，因此不需要体外培养就可以直接得到分裂中期细胞。通过小鼠睾丸得到染色体比较简便，一般不需要无菌操作。用秋水仙素作为有丝分裂的抑制剂，将其注入到小鼠腹腔中，可以阻止分裂细胞纺锤体的形成。 由于小鼠睾丸细胞分裂活动旺盛，具有高度的分裂能力，本次实验通过前处理、低渗、固定、制片染色等步骤制得染色体标本，可观察到许多处于分裂中期的染色体，可以进行染色体组型分析。