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人免疫反应性生长激素(irGH)elisa试剂盒使用说明书

人免疫反应性生长激素(irGH)elisa试剂盒使用说明书
人免疫反应性生长激素(irGH)elisa试剂盒使用说明书

人免疫反应性生长激素(irGH)elisa试剂盒使用说明书

Elisa kit规格:48孔配置/96孔配置

标准品稀释液:1.5ml×1瓶

酶标试剂:3 ml×1瓶(48)/6 ml×1瓶(96)

【人免疫反应性生长激素(irGH)试剂盒】本试剂仅供研究使用

计算:

以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。

试剂盒组成:

封板膜:2片(48)/2片(96)

说明书:1份

密封袋:1个

标准品:2700ng/L 0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存

酶标包被板: 1×48 1×96 2-8℃保存

样品稀释液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存

显色剂A液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存

显色剂B液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存

终止液: 3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存

浓缩洗涤液:(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存

实验原理:

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人免疫反应性生长激素(irGH)水平。用纯化的人免疫反应性生长激素(irGH)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入免疫反应性生长激素(irGH),再与HRP标记的免疫反应性生长激素(irGH)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的免疫反应性生长激素(irGH)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人免疫反应性生长激素(irGH)浓度。

目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中免疫反应性生长激素(irGH)的含量。服务承诺:

供货期:款到发货。

工作时间内免费的技术咨询和指导。请来电咨询

为客户提供来样检测服务,最大限度实验结果的有效性(免费代测)。

保存条件及有效期:

试剂盒保存:2-8℃| 有效期:6个月

【人免疫反应性生长激素(irGH)试剂盒】样本处理及要求:

1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上

清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。

2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心

20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。

3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程

中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/

分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备

用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。

6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上

进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.

7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作步骤

1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在第一、第二孔中分别加标

准品100μl,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为1800ng/L,1200ng/L ,600ng/L,300ng/L,150ng/L)。

2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样

品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。

5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此

重复5次,拍干。

6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7.温育:操作同3。

8.洗涤:操作同5。

9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色

15分钟.

10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止

液后15分钟以内进行。

【人免疫反应性生长激素(irGH)试剂盒】注意事项:

1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好

控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。

5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.底物请避光保存。

7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9.本试剂不同批号组分不得混用。

10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。

试剂盒性能:

1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。

2.批内与批见应分别小于9%和11%

检测范围:

0.2IU/L - 6IU/L

小鼠髓过氧化物酶(MPO)酶联免疫试剂盒(ELISA试剂盒)

仅供科研使用,不得用于临床检验。 小鼠髓过氧化物酶(MPO)酶联免疫试剂盒(ELISA试剂盒)说明书 黄石市艾恩斯生物科技有限公司 【产品名称】 通用名称:小鼠髓过氧化物酶(MPO)酶联免疫试剂盒(ELISA试剂盒) 英文名称:Mouse Myeloperoxidase(MPO)ELISA KIT 【包装规格】 48人份/盒,96人份/盒 【预期用途】 仅供科研使用,定量检测血清、血浆、细胞培养上清液中小鼠髓过氧化物酶(MPO)的浓度。【检验原理】 本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)。在预包被抗小鼠髓过氧化物酶(MPO)抗体(固相抗体)的微孔酶标板中,加入小鼠髓过氧化物酶(MPO)校准品和待测样本,再加入另一株HRP标记的抗小鼠髓过氧化物酶(MPO)抗体(酶标抗体),经过温育与充分洗涤,去除未结合的组分,在微孔板固相表面形成固相抗体-抗原-酶标抗体的夹心复合物。加底物A和B,底物在HRP催化下,产生蓝色产物,在终止液(2M 硫酸)作用下,最终转化为黄色,在酶标仪上测定吸光度(OD值),吸光度(OD值)与待测样品中小鼠髓过氧化物酶(MPO)的浓度正相关。拟合校准品曲线,可以计算出样本中小鼠髓过氧化物酶(MPO)的浓度。 【主要组成成分】 主要成分

校准品检测范围:0.156-10ng/ml。校准品已经通过测试,结果表明HBs抗原阴性,HIV1、HIV2和HCV抗体阴性,由于不存在一种试验方法能够完全保证没有这些物质,本品必须按照具有潜在的感染性进行处理,处理过程应当遵循通用的安全措施。 需要但未提供的材料及耗材 1、酶标仪 2、精密移液器及一次性吸头 3、蒸馏水 4、洗瓶或者自动洗板机 5、37℃水浴锅或恒温箱 6、500ml量筒 7、无粉一次性乳胶手套 【储存条件及有效期】 1、2-8℃保存,切勿冷冻,有效期6个月。 2、开封使用后,包被微孔板放入带有干燥剂的自封袋中,密闭自封袋,并将全部试剂放回2-8℃冰箱。 3、开封后,按照建议的条件保存,校准品、包被微孔板和HRP标记抗体,有效期为14天,其他成分在标签标明的有效期内是稳定的。 【适用仪器】 半自动的酶标仪,如Thermo MK3,或者国产酶标仪。 【样本要求】 样本类型和采集 以下只是列出样品采集的一般指南。所有样本采集过程中,不得使用叠氮钠做为防腐剂。 1、细胞培养上清:4000rpm条件下离心20min,去除细胞颗粒和聚合物,上清液保存在- 20℃以下,避免反复冻融。 2、血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,4000rpm条件下离心20min,小心地分离出血清,保存在- 20℃以下,避免反复冻融。 3、血浆:肝素,EDTA,或柠檬酸钠作为抗凝剂。在4000rpm条件下,离心20分钟取上清,血浆保存在-20℃以下,避免反复冻融。

重组人生长激素治疗特发性矮小症的临床疗效及安全性分析

重组人生长激素治疗特发性矮小症的临床疗效及安全性分析 发表时间:2016-12-15T15:56:19.200Z 来源:《中国医学人文》(学术版)2016年9月第17期作者:金兰[导读] 重组人生长激素对特发性矮小症具有促生长作用且临床安全性高。 云南省红河州第一人民医院儿科 661199 【摘要】目的:考察重组人生长激素对儿童特发性矮小症的临床治疗效果和安全性。方法:我院2012年4月至2014年4月诊治的64名特发性矮小症儿童参与本次研究,根据治疗方式的不同分为对照组和治疗组。比较两组患儿治疗前后的各生长指标和临床安全性。结果:重组人生长激素能显著增加患儿GV、减小HtSDSBA和HtSDSCA,但对BA无影响;临床治疗过程中无明显不良反应,安全性好。结论:重组人生长激素对特发性矮小症具有促生长作用且临床安全性高。 【关键词】特发性矮小症;重组人生长激素 特发性矮小症(ISS)患儿与正常儿童相比没有什么异常——其分娩时正常、婴儿期无第血糖史,饮食正常、身体比例正常、四肢及脊柱正常,无慢性器质性疾病、无心理疾病或严重的情感紊乱,而且生长激素激发试验也在正常范围,唯一不同的是身材矮小。与同种族、同年龄和同性别小孩的人群身高平均值相比,ISS患儿的身高要低2个标准差以上[1],如不进行有效干预,患儿都不能达到正常人的身高,因此,会对患者成年后的身心健康、生活及工作等造成严重的影响。2003年7月FDA批准重组人生长激素(rhGH)用于ISS治疗。本文旨在考察rhGH对ISS的治疗效果及其临床用药安全性,具体情况如下: 1.资料与方法 1.1一般资料 选择2012年4月至2014年4月在我院诊治的64名ISS患儿作为研究对象,征得患者监护人知情同意后,随机分为对照组和治疗组(每组各32名患者)。对照组:女童14例,男童18例,年龄4.5-14.4岁,平均年龄(9.8±1.9)岁,骨龄(6.7±2.3)岁;治疗组:女童15例,男童17例,年龄4.0-15.0岁,平均年龄(10.1±2.1)岁,骨龄(6.6±2.5)岁。所有患儿均符合ISS临床诊断标准,排除有遗传病、糖尿病家族史的患儿,患其它系统器质性疾病的患儿和对rhGH不耐受、有禁忌症或发生严重不良反应的患儿。两组患儿临床一般资料对比分析无差异(P>0.05),具有可比性。 1.2治疗方法 对照组治疗方法:加强营养支持,保证蛋白质和钙质的摄入,指导患儿养成良好的作息习惯并加强体育锻炼。治疗组治疗方法:在以上营养和运动干预的基础上注射rhGH治疗(注射用重组人生长激素,国药准字S2*******,生产商:上海和塞尔生物工程有限公司),采用皮下注射方式(肚脐周围、上臂或大腿外侧)给药,给药剂量:0.15 U/kg/d,每晚睡前一小时注射,1次/周,连续用药1-2年。 1.3临床观察指标 治疗前、治疗6个月和12月时分别测量两组患儿的身高、体重、骨龄(BA),计算生长速度(GV)、骨龄对应的身高标准差分值(HtSDSBA)和年龄对应的身高标准差分值(HtSDSCA)。治疗过程中对患儿定期进行血常规、尿常规、甲状腺功能和心肝肾功能检查,观察注射部位反应情况。观察并详细记录治疗过程中治疗组患儿发生的各种不良反应情况。 1.4统计学分析方法 统计数据用SPSS 19.0统计学软件进行分析,计量资料均用?x±s表示,采用t检验,以P<0.05作为统计学差异显著的标准。 2.结果 2.1两组患儿治疗前后各生长指标的变化情况 如表1所示,治疗0.5、1和1.5年后,对照组和治疗组患儿GV、HtSDSBA和HtSDSCA差异显著(P<0.05),有统计学意义;但是两组患儿治疗前后BA无差异(P>0.05)。 2.2治疗组不良反应发生情况 治疗过程中,3例患儿注射部位出现局部皮肤水肿,停药后自行消失,患儿血常规、尿常规、甲状腺功能和心肝肾功能检查未见异常。 3.结论 ISS发病机制尚不明确,有研究指出生长激素不敏感是其发病的主要原因[2],从而影响配体和受体的正常结合,导致细胞表面受体数量减少,降低了受体功能。外源性重组生长激素的提供可弥补内源性生长激素分泌不足,促进生长,有效改善特发性矮小症患儿的身高。 生长激素是一种由垂体前叶分泌的蛋白质激素,能促进机体合成蛋白质、吸收各种微量元素,抑制糖类代谢、加速脂肪分解,对促进人体器官和组织的生长发育起着重要作用[3]。rhGH是由191个氨基酸残疾组成的蛋白质,具有与生长激素相同的作用,其问世已有近30年的历史,临床不良反应报道很少,安全性高。rhGH治疗ISS的疗效存在个体差异,可能与遗传等因素相关;此外,有研究认为rhGH对ISS 的疗效与患儿开始接受治疗的时间密切相关,治疗越早临床疗效越显著。本研究利用rhGH治疗ISS发现其对患儿BA无明显影响,但是能显著增加患儿GV、减小HtSDSBA和HtSDSCA;临床治疗过程中不良反应均可耐受,具有较高的安全性。

赛增水剂说明书

赛增 重组人生长激素注射液说明书 请仔细阅读说明书并在医生指导下使用 *骨骺已完全闭合后禁用于促生长治疗。 *严重全身性感染等危重病人在机体急性休克期内禁用。 [药品名称] *通用名称:(重组人生长激素注射液) *商品名称: 金赛(Jintropin) *英文名称: Recombinant Human Growth Hormone Injection *汉语拼音: Chongzu Ren Shengzhangjisu zhusheye [成分] *主要组成成分: 重组人生长激素注射液及保护剂。 *分子式:C990 H1528 N262 S7, 为( 191 )个氨基酸组成的蛋白质。 *分子量: ( 22152D ) *活性成份来源: 本品是通过基因重组大肠杆菌分泌型表达技术生产的重组人生长激素(rhGH) 。其前体是在一种含有人生长激素基因的大肠菌株(Escherichia coli)中合成, 经信号肽牵引分泌到壁膜间隙。信号肽被切除, 多肽分子正确折叠成有活性的生长激素分子。本品含有191个氨基酸残基, 分子量为22125道尔顿, 其氨基酸含量, 空间构象及序列与人生长激素完全相同。 [性状] *本品为无色,透明液体。 [适应症] *用于因内源性生长激素缺乏所引起的儿童生长缓慢; *用于重度烧伤治疗; *用于已明确的下丘脑-垂体疾病所致的生长激素缺乏症和经两种不同的生长激素刺激试验确诊的生长激素显著缺乏。 [规格] *15IU/5mg/3ml/瓶 *30IU/10mg/3ml/瓶 [用法用量] *用于促儿童生长的剂量因人而异, 推荐计量( 0.1-0.15 iu ), 每日一次,皮下注射,疗程为3个月至3年, 或遵医嘱。 *用于重度烧伤治疗推荐剂量为( 0.2-0.4 iu ), 每日一次,皮下注射。疗程一般2周左右。*用于成人替代疗法的剂量必须因人调整. 通常推荐从低剂量开始, 如每日0.5单位(0.17毫克)或最大0.02单位/公斤体重/日, 等于0.007毫克/公斤体重/日; 经过一,二个月治疗的结果, 可将剂量逐步调整至0.04单位/公斤体重/日, 等于0.013毫克/公斤体重/日, 血清中胰岛素样

人C反应蛋白CRP酶联免疫分析试剂盒使用方法

人C-反应蛋白(CRP)酶联免疫分析试剂盒使用方法 检测范围:96T 30μg/L -800μg/L 使用目的: 本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中C-反应蛋白(CRP)含量。 实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人C-反应蛋白(CRP)水平。用纯化的人C-反应蛋白(CRP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入C-反应蛋白(CRP),再与HRP标记的C-反应蛋白(CRP)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的C-反应蛋白(CRP)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中C-反应蛋白(CRP)浓度。 试剂盒组成 标本要求 1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融 2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。 操作步骤 1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀 待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。 3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。 4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用 5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此 重复5次,拍干。 6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。 7.温育:操作同3。 8.洗涤:操作同5。 9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色

大鼠皮质醇(Cortisol)ELISA试剂盒说明书

大鼠皮质醇(Cortisol)酶联免疫分析试剂盒 使用说明书 厦门慧嘉生物科技有限公司 本试剂盒仅供体外研究使用! 预期应用 ELISA法定量测定大鼠血清、血浆或其它相关生物液体中皮质醇(Cortisol)含量。 实验原理 用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗皮质醇(Cortisol)抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗皮质醇(Cortisol)抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的皮质醇(Cortisol)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。ELISA法 试剂盒组成及试剂配制 1. 酶联板:一块(96孔) 2. 标准品(冻干品):2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上, 然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为180 ng/ml,做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释)后,分别稀释成180 ng/ml,90 ng/ml,45 ng/ml,22.5 ng/ml,11.25 ng/ml, 5.63 ng/ml,2.82 ng/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 ng/ml,临用前15分钟内配制。 如配制90 ng/ml标准品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 180 ng/ml的上述标准品加入含有 0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。 3. 样品稀释液:1×20ml。 4. 检测稀释液A:1×10ml。 5. 检测稀释液B:1×10ml。 6. 检测溶液A:1×120μl(1:100)临用前以检测稀释液A 1:100稀释,稀释前根据预先计算 好的每次实验所需的总量配制(100μl/孔),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl检测溶液A加990μl检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。 7. 检测溶液B:1×120μl/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B 1:100稀释。稀释方法同检测溶 液A。 8. 底物溶液:1×10ml/瓶。 9. 浓洗涤液:1×30ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。 10. 终止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。 11. 覆膜:5张 12. 使用说明书:1份 自备物品 1. 酶标仪(建议参考仪器使用说明提前预热) 2. 微量加液器及吸头,EP管 3. 蒸馏水或去离子水,全新滤纸

重组人生长激素在矮小儿童中的治疗效果观察

重组人生长激素在矮小儿童中的治疗效果观察 目的:探讨重组人生长激素治疗矮小儿童的临床效果。方法:选择矮小儿童30例,均为生长激素缺乏症患儿,身高均低于同性别、同龄儿童的第三百分位以下,生长速度每年小于5 cm,且均处于青春发育期。本组矮小患儿睡前30 min 皮下注射重组人生长激素,剂量为每天0.1 U/kg,连续应用6个月。测定患儿治疗前和治疗后身高、生长速度、体重、骨龄。结果:治疗后患儿身高、生长速度、体重和骨龄分别显著高于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:重组人生长激素能够显著改善矮小儿童生长发育、提高生长速度、使患儿身高体重增加,疗效显著。 标签:矮小儿童;重组生长激素;转氨酶 中图分类号R72 文献标识码 B 文章编号1674-6805(2012)21-0108-01 儿童身材矮小、生长发育较正常儿童迟缓,主要与生长激素水平低下有关系。本文探讨重组人生长激素在矮小儿童中的临床治疗效果,现报告如下。 1资料与方法 1.1一般资料 选择笔者所在医院2009年3月-2011年3月矮小儿童共30例,均为生长激素缺乏症患儿。身高均低于同性别、同龄儿童的第三百分位以下,生长速度每年小于5 cm,均处于青春发育期,试验前未用过生长激素、性激素等对生长发育有影响的药物。排除非生长激素低下所致矮小患儿。所选患儿中男17例,女13例,平均年龄(10.4±3.4)岁。 1.2方法 本组矮小患儿睡前30 min皮下注射重组人生长激素,剂量为每天0.1 U/kg,连续应用6个月。 1.3观察指标 测定患儿治疗前和治疗后身高、生长速度、体重、骨龄。 1.4统计学处理 采用统计学软件SPSS 14.0进行统计学分析,治疗前和治疗后均数比较采用配对t检验,P<0.05为差异有统计学意义。 2结果 治疗后患儿身高、生长速度、体重和骨龄分别显著高于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05),见表1。 3讨论 生长激素是腺垂体细胞分泌的蛋白质,是一种肽类激素。生长激素呈脉冲式分泌,其分泌受下丘脑产生的生长激素释放素的调节,还受性别、年龄和昼夜节律的影响,睡眠状态下分泌明显增加。生长激素的主要生理功能是促进神经组织以外的所有其他组织生长;促进机体代谢和蛋白质合成;促进脂肪分解;对胰岛素有拮抗作用;抑制葡萄糖利用而使血糖升高等作用。生长激素能通过促进肝脏产生生长激素。生长激素在介质间接促进生长期的骨骺软骨形成,促进骨及软骨的生长,从而使躯体增高。生长激素对中间代谢及能量代谢也有影响,可促进蛋白质合成,增强对钠、钾、钙、磷、硫等重要元素的摄取与利用,同时通过抑制糖的消耗,加速脂肪分解,使能量来源由糖代谢转向脂肪代谢。在儿童时期,如

金赛增说明书

金赛增 一周一次,轻松成长,金赛增 全球首支上市的PEG化长效rhGH 显著提高治疗依从性,是矮身材儿童治疗领域发展的必然趋势 周用药量低于短效rhGH,显著促进矮身材儿童身高增长 与短效rhGH相比,不良反应谱一致,不良反应发生率相当 是矮身材儿童更优化的治疗方案 【药品名称】通用名称:聚乙二醇重组人生长激素注射液 商品名称:金赛增 【成分】主要成分:聚乙二醇重组人生长激素。 辅料:枸橼酸钠、苯酚、泊洛沙姆188、氯化钠 【性状】本品为无色、澄明液体。 【适应证】用于内源性生长激素缺乏所引起的儿童生长缓慢。 【规格】54IU/9.0mg/1.0ml/瓶 【用法用量】用于促儿童生长的剂量因人而异,推荐剂量为0.2mg/kg/次,每周给药1 次,皮下注射(上臂、大腿或腹部脐周)。 【不良反应】常见药物不良反应为:一过性外周水肿现象、亚临床甲状腺功能低下、注射部位反应、一过性关节肿痛和一过性胰岛素升高,一般不需处理,可自行缓解;建议定期进行甲状腺功能的检查,以便及时发现是否出现亚临床甲状腺功能低下,必要时给予甲状腺素的补充,及时进行亚临床甲状腺功能低下纠正,以避免影响生长激素的疗效。 【禁忌】禁用于急性增生性或严重的非增生性糖尿病视网膜病变。 骨骺已完全闭合后禁用于促生长治疗。 严重全身性感染等危重病人在机体急性休克期内禁用。 本品不得用于有任何进展迹象的潜在性肿瘤患者及已确诊的肿瘤患者。【贮藏】避光保存于2~8℃冷藏条件下,谨防冻结。 【有效期】24个月 【批准文号】国药准字S2******* 【生产企业】企业名称:长春金赛药业有限责任公司 生产地址:吉林省长春市高新技术开发区天河街72号 邮政编码:130012 电话号码:800-820-0469 400-820-0469 86-431-85100402 传真号码:86-431-85150049

人(Human)瘦素(LEP)ELISA试剂盒说明书

本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断人(Human)瘦素(LEP)ELISA检测试剂盒 使用说明书 检测原理 试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被瘦素(LEP)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的瘦素(LEP)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。 样品收集、处理及保存方法 1.血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 2.血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。 3.细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。 4.组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。 5.保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。自备物品 1.酶标仪(450nm) 2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL 3.37℃恒温箱 操作注意事项 1.试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。 2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。 3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实际浓度。 4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。 5.所有液体组分使用前充分摇匀。

高灵敏小鼠白细胞介素-6(IL-6)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书

高灵敏小鼠白细胞介素-6(IL-6)酶联免疫分析(ELISA) 试剂盒使用说明书 金益柏试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清,血浆样本中白细胞介素-6(IL-6)含量。 实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠白细胞介素6(IL-6)水平。用纯化的小鼠白细胞介素6(IL-6)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素6(IL-6),再与HRP标记的白细胞介素6(IL-6)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的白细胞介素6(IL-6)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠白细胞介素6(IL-6)浓度。 试剂盒组成: 样本处理及要求: 1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/ 分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。

2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA、者柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合 10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。 3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上 清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS (PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。 仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。 5.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速 冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS (PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。 6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。 若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融. 7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。 操作步骤 1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在第一、 第二孔中分别加标准品100μl,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液 50μl,混匀;然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第 四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中, 再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加 标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为90 pg/mL,60 pg/mL ,30 pg/mL,15 pg/mL,7.5 pg/mL)。 2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各 步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释 液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。 3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

人免疫反应性生长激素(irGH)elisa试剂盒使用说明书

人免疫反应性生长激素(irGH)elisa试剂盒使用说明书 Elisa kit规格:48孔配置/96孔配置 标准品稀释液:1.5ml×1瓶 酶标试剂:3 ml×1瓶(48)/6 ml×1瓶(96) 【人免疫反应性生长激素(irGH)试剂盒】本试剂仅供研究使用 计算: 以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。 试剂盒组成: 封板膜:2片(48)/2片(96) 说明书:1份 密封袋:1个 标准品:2700ng/L 0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存 酶标包被板: 1×48 1×96 2-8℃保存 样品稀释液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存 显色剂A液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存 显色剂B液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存 终止液: 3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存 浓缩洗涤液:(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存 实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人免疫反应性生长激素(irGH)水平。用纯化的人免疫反应性生长激素(irGH)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入免疫反应性生长激素(irGH),再与HRP标记的免疫反应性生长激素(irGH)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的免疫反应性生长激素(irGH)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人免疫反应性生长激素(irGH)浓度。 目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中免疫反应性生长激素(irGH)的含量。服务承诺: 供货期:款到发货。 工作时间内免费的技术咨询和指导。请来电咨询 为客户提供来样检测服务,最大限度实验结果的有效性(免费代测)。 保存条件及有效期: 试剂盒保存:2-8℃| 有效期:6个月 【人免疫反应性生长激素(irGH)试剂盒】样本处理及要求: 1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上 清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。 2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心 20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。

酶联免疫法检测试剂注册技术审查指导原则

附件1 酶联免疫法检测试剂注册技术审查指导原则 一、前言 本指导原则主要针对酶联免疫类检测试剂的主要原材料、生产工艺及反应体系、产品质量控制等环节提出指导性技术要求。 本指导原则系对酶联免疫法检测试剂的一般要求,申请人应依据产品特性确定其中的具体内容是否适用,若不适用,需详细阐述其理由及相应的科学依据。 本指导原则是对申请人和审查人员的指导性文件,但不包括注册审批所涉及的行政事项,亦不作为法规强制执行,如果有能够满足相关法规要求的其他方法,也可以采用,但是需要提供详细的研究资料和验证资料。应在遵循相关法规的前提下使用本指导原则。 本指导原则是在现行法规和标准体系以及当前认知水平下制订的,随着法规和标准的不断完善、科学技术的不断发展,其相关内容也将进行适时的调整。 二、适用范围 本指导原则适用于有关病原微生物检测的第三类体外诊断试剂的注册技术审查。其他酶联免疫法检测试剂(如作为二类管理的体外诊断试剂)可参考本指导原则执行。 三、基本要求 (一)基本原则 1.研制、生产用的各种原料、辅料等应制定其相应的质量标准,并应符合有关法规的要求。 2.试剂生产企业应具备相应的专业技术人员、仪器设备以及适宜的生产环境,获得《医疗器械生产许可证》;同时,应按照《体外诊断试剂

生产实施细则(试行)》的要求建立相应的质量管理体系,形成文件和记录,加以实施并保持有效运行;还应通过《体外诊断试剂生产企业质量管理体系考核评定标准(试行)》的考核。企业应对试剂的使用范围做出明确规定,并经国家药品监督管理部门批准。 3.诊断试剂的研制应当按照科学、规范的原则,各反应条件的选择和确定应符合基本的科学原理。 4.试剂在研制、生产过程中所用的各种材料及工艺,应充分考虑可能涉及的安全性方面的事宜。 5.生产和质量控制的总体目标:保证试剂使用安全、质量稳定、工艺可控、检测有效。 (二)原材料质量控制 1.主要生物原料 与产品质量最密切相关的生物原料主要包括各种天然抗原、重组抗原、单克隆抗体、多克隆抗体以及多肽类、激素类等生物原科。这类原料可用于包被酶标反应板、标记相关酶(如辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶等)、中和反应用抗原或抗体、制备校准品(标准品)等。使用前应按照工艺要求对这类生物原料进行质量检验,以保证其达到规定的质量标准。主要生物原料若为企业自己生产,其工艺必须相对稳定;若购买,其供应商要求相对固定,不能随意变更供应商,如果主要原料(包括工艺)或其供应商有变更,应依据国家相关法规的要求进行变更申请。 主要生物原料的常规检验项目一般包括: (1)外观 肉眼观察,大部分生物原料为澄清均一的液体,不含异物、浑浊或摇不散的沉淀或颗粒;或者为白色粉末,不含其他颜色的杂质;特殊生物原料应具备相应外观标准。 (2)纯度和分子量

鸡马立克氏病病毒(MDV)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书

鸡马立克氏病病毒(MDV)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒 使用说明书 本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于检测鸡血清,血浆及相关液体样本中马立克氏病病毒(MDV)水平。 实验原理: 本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫法(ELISA)测定标本中鸡马立克氏病病毒(MDV)。用纯化的鸡马立克氏病病毒(MDV)抗体包被微孔板,制成固相抗体,可与样品中马立克氏病病毒(MDV)相结合,经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后再与HRP标记的马立克氏病病毒(MDV)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),与CUTOFF 值相比较,从而判定标本中鸡马立克氏病病毒(MDV)的存在与否。 试剂盒组成:

样本处理及要求: 1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。 2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。 3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。 5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。 6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融. 7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

克伦特罗酶联免疫定量检测试剂盒I

克伦特罗酶联免疫定量检测试剂盒(I) 使用说明书 概述: 克伦特罗(Clenbuterol)属于一类β-兴奋剂,具有改进脂肪型动物体内肉与脂肪的比例的作用,亦可促进动物生长。但同时,此药物还会使非横纹肌松弛,人体摄入后可引起心跳、心率不正常等副反应,甚至可导致心脏病。因此在我国,克伦特罗在畜牧业上的使用是被严格禁止的。 本试剂盒利用竞争酶联免疫法对生物样品中的克伦特罗进行定量分析。适用于动物尿液、血清、内脏等物质中克伦特罗的快速检测。由于ELISA法的高通量与简便快速,适合大量样本的定量筛查,自样本加入至结果读出,不超过60分钟,检测灵敏度为0.1ppb。 一、简要原理 试剂盒所提供的微孔板上包被有抗体,然后将校准品或样本中的克伦特罗与酶标记的克伦特罗加入微孔中后,两者可竞争结合克伦特罗抗体,洗去未结合的酶标记克伦特罗。加入底物后,在酶作用下,底物溶液会显蓝色,加入终止剂后,溶液由蓝转为金黄色。在450nm波长光下测吸光度,吸光度高低与校准品或样品中克伦特罗的含量呈反比,根据校准品的读数作出校准曲线,并利用校准曲线计算出样品中克伦特罗的含量。 二、试剂盒组成 1.酶标反应板: 96孔易折板,抗体已包被 2.克伦特罗校准品: 1ml/瓶×6瓶浓度:0ppb、0.1ppb、0.3ppb、0.9ppb、2.7ppb、8.1ppb 3.11×酶标记克伦特罗浓缩液: 1.2ml/瓶×1瓶(稀释11倍使用) 4.底物液: 11ml/瓶×1瓶 5.酶标稀释液: 20ml/瓶×1瓶 6.50×浓缩洗涤液: 20ml/瓶×1瓶(稀释50倍使用) 7.终止剂: 11ml/瓶×1瓶 8.其他:说明书×1份自封袋×1个 2-8℃贮存,有效期一年 三、实验需要但试剂盒不提供的试剂和仪器 1.试剂 ――――――10mM盐酸溶液 ――――――氯化钠 ――――――50mM PH7.0 PBS (配制:9g NaCl;4.65g Na2HPO4·12H2O;0.56g NaH2PO4·2H2O 溶解于1000ml蒸馏水中) ――――――异丙醇 ――――――乙酸乙酯 2 .仪器 ――――――微孔板酶标仪 ――――――涡旋振荡器或超声波粉碎仪 ――――――离心机

人封闭抗体(BA)酶联免疫分析试剂盒使用说明书

人封闭抗体(BA)酶联免疫分析试剂盒使用说明书 本试剂盒仅供研究使用 特异性:本试剂盒可检测人封闭抗体(BA),且与其他相关抗体无交叉反应。 有效期:6个月 预期应用:ELISA法定量测定人血清、血浆或其它相关生物液体中封闭抗体(BA)含量。 说明 1.试剂盒保存:-20℃(较长时间不用时);2-8℃(频繁使用时)。 2.浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。 3.中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。 4.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。 试剂盒组成及试剂配制 1.酶联板(Assay plate):一块(96孔)。 2.酶结合物(Conjugate):2×6ml/瓶。 3.样品稀释液(Sample Diluent):2×6ml/瓶。 4.阳性对照(Positive Control):1×0.5ml/瓶。 5.阴性对照(Negative Control):1×0.5ml/瓶。 6.底物溶液A(Substrate A):1×7ml/瓶。 7.底物溶液B(Substrate B):1×7ml/瓶。 8.浓洗涤液(Wash Buffer):1×15ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释20倍。 9.终止液(Stop Solution):1×7ml/瓶。 需要而未提供的试剂和器材 1.标准规格酶标仪 2.高速离心机 3.电热恒温培养箱 4.干净的试管和Eppendof管 5.系列可调节移液器及吸头,一次检测样品较多时,最好用多通道移液器 6.蒸馏水,容量瓶等 标本的采集及保存 1.血清:全血标本请于室温放置2小时或室温过夜后于1000x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。 2.血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2-8°C1000x g离心15分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。 操作步骤 实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。 1.加样:分别设空白孔,不加任何溶液;设阴性对照孔2孔,加阴性对照100μl;设阳性对照孔2孔,加阳性对照100μl;余孔加100μl样本稀释液,然后直接加待测样本5μl。注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃放置30分钟。 2.弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,200μl/每孔,甩干。 3.每孔加酶结合物100μl(空白孔除外),充分混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃放置20分钟。 4.弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,200μl/每孔,甩干。 5.依序每孔加底物溶液A和B各50μl,37℃避光显色10分钟。 6.依序每孔加终止溶液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加

小鼠Ⅰ型胶原 (Col I)-ELISA试剂盒说明书

小鼠Ⅰ型胶原 (Col I)酶联免疫吸附测定试剂盒 使用说明书 产品编号:E-EL-M0314 (本试剂盒仅供体外研究使用、不用于临床诊断!) 声明:尊敬的客户,感谢您选用本公司的产品。本产品选用世界著名生产厂家的原料,采用专业ELISA kit生产技术制造。适用于体外定量检测小鼠血清、血浆、组织匀浆或细胞培养上清液中天然和重组Col I浓度。使用前请仔细阅读说明书并检查试剂组分!如有疑问,请及时联系伊莱瑞特生物科技有限公司。 *: [96T/48T](打开包装后请及时检查所有物品是否齐全完整)

检测原理: 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗小鼠Col I抗体包被于酶标板上,实验时标本或标准品中的Col I会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗小鼠Col I抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗小鼠Col I抗体与结合在包被抗体上的小鼠Col I结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下现蓝色,加终止液后变黄。用酶标仪在450nm波长处测OD值,Col I浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线求出标本中Col I的浓度。 标本收集: 1.血清:全血标本于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟,取上清即可检测,收集 血液的试管应为一次性的无热原,无内毒素试管。 2.血浆:抗凝剂推荐使用EDTA.Na2,标本采集后30分钟内于1000×g离心15分钟,取上清即可 检测。避免使用溶血,高血脂标本。 3.组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,以去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞 会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样本对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g 离心5~10分钟,取上清检测。 4.细胞培养上清:取细胞培养上清于1000×g离心20分钟,除去杂质及细胞碎片。取上清检测。 5.其它生物标本:1000×g离心20分钟,取上清即可检测 (具体处理方法可参考:https://www.doczj.com/doc/3212898820.html,/news2.asp?tid=477 ) 6.标本应清澈透明,悬浮物应离心去除。 7.标本收集后若不及时检测,请按一次使用量分装,冻存于-20℃/-80℃冰箱内,避免反复冻融, 1-6月内检测,4℃保存的应在1周内进行检测。 8.如果您的样本中检测物浓度高于标准品最高值,请根据实际情况,做适当倍数稀释(建议先做 预实验,以确定稀释倍数)。 试验所需自备物品: 1.酶标仪(450nm波长滤光片) 2.高精度移液器,EP管及一次性吸头:0.5-10μL, 2-20μL, 20-200μL, 200-1000μL 3.37℃恒温箱, 双蒸水或去离子水 4.吸水纸

关于生长激素副作用

关爱身材矮小的小朋友――关于生长激素副作用 1.生长激素的副作用有哪些? 答:生长激素说明书所标注的副作用如下: [不良反应]生长激素可引起一过性高血糖现象,通常随用药时间延长或停药后恢复正常。 临床试验中约有1%的身材矮小儿童有副作用,常见注射部位局部一过性反应(疼痛、发麻、红肿等)和体液潴留的症状(外周水肿、关节痛或肌痛),这些副作用发生较早,但发生率随用药时间而降低,罕见影响日常活动。 长期注射重组人生长激素在少数病人体内引起抗体产生,抗体结合力低,无确切临床意义。但如果预期的生长效果未能达到,则可能有抗体产生,抗体结合力超过2mg/L,则可能会影响疗效。 也就是说生长激素治疗,副作用比较轻微,如注射部位红肿、皮疹等(和产品的纯度有关)在临床治疗中未发现不可逆转的副作用。 生长激素在治疗剂量下是比较安全的。 2.生长素治疗最严重的副作用是什么? 答:生长激素没有严重的副作用,少数的孩子产生水肿、局部注射部位疼痛等,一般会自然消失。 3.生长激素是“激素”,会对孩身体有危害吧? 答:我们通常所说的“激素”一般指糖皮质激素,长期使用会使患儿体重增加。但生长激素无论在生理作用方面还是在分泌、调控方面,和糖皮质激素截然不同。在儿童,生长激素的作用主要是促进骨骼的线性生长,使身体长高。此外,还可以促进蛋白质合成,加速脂肪分解。 在医生指导下使用生长激素进行治疗,是十分安全的。 4.用生长激素会不会使孩子长胖,能不能影响孩子生育? 答:生长激素促进脂肪分解,不会导致发胖,不影响生育。 5.打生长激素影响孩子智力吗? 答:对智力没有影响。 6.生长激素治疗会导致肿瘤吗? 答:国外做过大量的医学研究,医学文献资料提示生长激素治疗后肿瘤发生率十万分之二到三,和正常人群的发病率基本相当,无明显差异,说明生长激素治疗不会导致肿瘤。 7.生长激素治疗会是否会引起性早熟? 使青春期提前来临? 答:生长激素治疗不会引起早熟,生长激素的作用机理是促进骨骺线性增长,只有性激素才是促进性发育的。生长激素治疗不会使青春期提前。 8.生长激素是否会导致糖尿病? 答:生长激素不会导致糖尿病。但生长激素可以引起一过性的血糖升高,有家族性的糖尿病家族史的病人需要高度谨慎,治疗前需要先给孩子做血糖检查,如果使用生长激素的话,需要定期做好血糖的检测。 9.打生长激素会抑制孩子本身的分泌功能吗? 答:不会影响。生长激素的分泌与下丘脑-垂体生长轴有关,生长激素替代治疗不会影响自身下丘脑-垂体生长轴功能。

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