考马斯亮蓝法测蛋白质含量(1)

实验报告学院：第二临床医学院专业：临床医学年级：2013级班级：1班姓名：学号：日期：2014,3,8 得分：实验课程：生物化学实验实验名称：蛋白质的定量测定（五）——考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度【实验目的】掌握考马斯亮蓝G-250测定蛋白质含量的原理和方法。【实验原理】考马斯亮蓝G-250（Coomassie G-250）是一种甲基取代的三苯基甲烷，分子中磺

考马斯亮蓝法测定可溶性蛋白质含量原理：考马斯亮蓝G-250(Coomassie brilliant blue G-250)测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。该染料在游离状态下呈红色，在稀酸溶液中当它与蛋白质的疏水区结合后变为青色，前者最大光吸收在465nm，后者在595nm在一定蛋白质浓度范围内（1-1000µg），蛋白质与色素结合物在595nm波长下的吸

考马斯亮蓝法测蛋白质含量一、原理考马斯亮蓝G-250（Coomassie G-250）是一种甲基取代的三苯基甲烷，分子中磺酸基的蓝色染料，在465nm处有最大吸收值。考马斯亮蓝G-250能与蛋白质通过范得华相互作用形成蛋白质—考马斯亮蓝复合物蓝色溶液，引起该染料的最大吸收λmax的位置发生红移，在595nm处有最大吸收值。由于蛋白质—考马斯亮蓝复合物在595

蛋白质含量测定法——考马斯亮蓝法[实验目的]学习、掌握考马斯亮蓝法（Bradford 法）测定蛋白质含量的方法[实验原理]（蓝色）变为氨基酸芳香族碱性染料考马斯亮蓝磷酸nm G 595250max λ−−→−+-[器材与试剂]器材722型可见光分光光度计、漩涡混合器、试管16支 试剂1.标准蛋白质溶液，用牛血清清蛋白（BSA ），配制成1.00mg/ml 。

考马斯亮蓝法测蛋白质含量一、原理考马斯亮蓝G-25(Coomassie G-250是一种甲基取代的三苯基甲烷，分子中磺酸基的蓝色染料，在 465nm 处有最大吸收值。考马斯亮蓝 G-250能与蛋白质通过范得华相互作用形成蛋白质一考马斯亮蓝复合物蓝色溶液，引起该染料的最大吸收入max的位置发生红移，在595nm 处有最大吸收值。由于蛋白质—考马斯亮蓝复合物在

标准曲线制作—考马斯亮蓝法测蛋白质含量一、标准曲线一般用分光光度法测物质的含量，先要制作标准曲线，然后根据标准曲线查出所测物质的含量。因此，制作标准曲线是生物检测分析的一项基本技术。二、蛋白质含量测定方法1、凯氏定氮法2、双缩脲法3、Folin-酚试剂法4、紫外吸收法5、考马斯亮蓝法三、考马斯亮蓝法测定蛋白质含量—标准曲线制作（一）、试剂：1、考马斯亮蓝试剂

实验七考马斯亮蓝G250法测定的蛋白质含量一、试验目的1. 学习分光光度计的原理及操作2.学习利用染色方法提高蛋白质消光系数，以提高分光光度法检测灵敏度二、基本原理1. 根据物质的吸收光谱进行定性或定量分析的方法称为吸收光谱法或分光光度法。该法所用的仪器称为分光光度计或吸收光谱仪。该法所使用的光谱范围包括可见光和紫外光，即包括波长在200 - 800 nm之

分光光度计的分类红外分光光度计: 测定波长范围为 大于760 nm的 红外光区可见光分光光度计:测定波长范围为 400~ 760 nm的 可见光区测定波长范围为 200～400 n

值得注意的是，这后四种方法并不能在任何条件下适用于任何形式的蛋白质，因为 一种蛋白质溶液用这四种方法测定，有可 能得出四种不同的结果。每种测定法都不 是完美无缺的，都有其优缺点。

考马斯亮蓝G-250标准曲线法测定蛋白含量实验目的：学习和掌握考马斯亮蓝G-250 测定蛋白质含量的原理和方法。实验原理：考马斯亮蓝G-250（Coomassie brilliant blue G-250）测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。考马斯亮蓝G-250 在游离状态下呈红色，最大光吸收在488nm；当它与蛋白质结合后变为青色，蛋白质-色素结合物在59

考马斯亮蓝染色法测定蛋白质含量一、实验目的掌握考马斯亮蓝法测定蛋白质含量的原理和方法。学习分光光度计的原理及使用方法。二、实验原理三、实验步骤试剂试管编号0 1 2 3 4 5 6 7标准蛋白质溶液/ml 0.00 0.02 0.04 0.06 0.08 0.1 样品0.1 样品0.1相当于蛋白质含量/微克0.00 20 40 60 80 100 未知未知蒸

考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量专业班级：制药工程3班小组成员：李梦娴李敏林晓丝一、实验目的1、了解考马斯亮蓝法测定蛋白质的原理2、掌握考马斯亮蓝法测定蛋白质含量的操作步骤二、实验原理1、根据蛋白质的理化性质，有多种蛋白质定量方法。考马斯亮蓝G-250是比色法和色素法相结合的复合方法。考马斯亮蓝G-250是一种染料，在游离状态下呈棕红色，当和蛋白质结合后

标准曲线制作—考马斯亮蓝法测蛋白质含量一、标准曲线一般用分光光度法测物质的含量，先要制作标准曲线，然后根据标准曲线查出所测物质的含量。因此，制作标准曲线是生物检测分析的一项基本技术。二、蛋白质含量测定方法1、凯氏定氮法2、双缩脲法3、Folin-酚试剂法4、紫外吸收法5、考马斯亮蓝法三、考马斯亮蓝法测定蛋白质含量—标准曲线制作（一）、试剂：1、考马斯亮蓝试剂

蛋白质浓度测定——考马斯亮蓝染色法（实验报告）实验日期：2015年4月28日实验温度：室温实验地点：生物化学与遗传学实验室指导老师：***班级：2013级生物技术1班姓名：** 学号：********I. 实验目的1.学习考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度的原理和方法；2.熟悉蛋白质含量测定的影响因素。II. 实验原理考马斯亮蓝是根据蛋白质与染料相结合的原理设计的，

作业指导书标题：考马斯亮蓝法测定蛋白质含量的检验方法修改记录1．目的1.学习一种蛋白质染色测定的方法2.掌握考马斯亮蓝法测定蛋白质含量的基本原理和方法2．适用范围组织中的蛋白质测定。3．职责3.1 检测人员按照本作业指导书进行该项试验，作好试验记录。3.2 审核人员负责试验的审核，保证试验的准确性和科学性。3.3 科室负责人负责监督试验指导书的执行。4．正文

实验7考马斯亮蓝考 G-250染色法测定蛋白质含量一、目的1、学习一种蛋白质染色测定的方法2、掌握考马斯亮蓝法测定蛋白质含量的基本原理和方法二、原理蛋白质的存在影响酸碱滴定中所用某些指示剂的颜色变化，从而改变这些染料的光吸收。在些基础上发展了蛋白质染色测定方法。涉及的指示剂有甲基橙、考马斯亮蓝、溴甲酚绿和溴甲酚紫。目前广泛使用的染料是考马斯亮蓝。考马斯亮蓝

实验五考马斯亮蓝法测定蛋白质含量一、实验目的1.掌握考马斯亮蓝染色法定量测定蛋白质含量的原理与方法2.熟练分光光度计的使用和操作方法。二、实验原理考马斯亮蓝G250测定蛋白质含量属于染料结合法的一种，它与蛋白质的疏水微区相结合，这种结合具有高敏感性。它在酸性溶液中呈棕红色，最大光吸收峰在465nm，当它与蛋白质结合形成复合物时，其最大吸收峰改变为595nm。

756型紫外/可见光分光光度计紫外/可见光分光光度计PE5808红外光分光光度计➢ 考马斯亮蓝G-250染色法测定蛋白源自文库含量，属于染料结合法的一种➢ 考马斯亮蓝G-250在游

1 0.8 0.6 0.4 0.2 0 -0.2 0 100 200 300 400 500 600y = 0.0018 x - 0.0125 R 2 = 0.9954A238蛋白