正交试验优化橘皮中橙皮苷提取工艺

安徽农业科学，Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ａｎｈｕｉ　Ａ　．Ｓｃｉ．２０１２。４０（２１）：１　１０４８—１　１０４９　责任编辑李菲菲责任校对卢瑶　

正交试验优化橘皮中橙皮苷提取工艺　

张凤，黄芳，李健　（南京晓庄学院生物化工与环境工程学院，江苏南京２１１１７１）　

摘要［目的］对乙醇为提取剂提取橘皮中橙皮苷的工艺条件进行优化。［方法］采用　（３　）正交试验设计，考察了乙醇体积分数、液料　

比、提取温度和提取时间对橙皮苷得率的影响。［结果］提取橙皮苷的最佳工艺条件为：以体积分数为７０％的乙醇为提取剂，液料￣ｇ１５：Ｉ　

ｍｌ／ｇ。７０　ｑＣ下回流提取２．５　ｈ，在此条件下橙皮苷得率为４．３８％。加样回收试验表明，方法平均回收率为１００．９０％。［结论］该方法操作　

简便、稳定可靠，可用于工业生产。　

关键词橙皮苷；正交试验；提取工艺　中图分类号Ｓ１３１　．３　文献标识码Ａ　文章编号０５１７—６６１１（２０１２）２１—１１０４８—０２　

Ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　Ｔｅｃｌｍｏｌｏｇｙ　ｆｏｒ　Ｈｅｓｐｅｒｉｄｉｎ　ｆｒｏｍ　Ｃｉｔｒｕｓ　Ｐｅｅｌｓ　ｂｙ　Ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　Ｔｅｓｔ　ＺＨＡＮＧ　Ｆｅｎｇ　ｅｔ　ａｌ　（Ｓｃｈｏｏｌ　ｏｆ　Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ　ａｎｄ　Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ　Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｎａｎｊｉｎ　Ｘｉａｏｚｈｕａｎｇ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｊｉｎｇ，Ｊｉａｎｇｓｕ　２１　ｌ１７１）　Ａｂｓｔｒａｃｔ　ｆ０ｂｊｅｃｔｉｖｅ１　Ｔｏ　ｏｐｔｉｍｉｚｅ　ｔｈｅ　ｅｔｈａｎｏｌ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ｈｅｓｐｅｒｉｄｉｎ　ｆｒｏｍ　Ｃｉｔｒｕｓ　ｐｅｅｌｓ．［Ｍｅｔｈｏｄ］Ａ　Ｌ９（３　）ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ｅｘｐｅｒｔ—　

ｍｅｎｔ　ｗａｓ　ｄｅｓｉｇｎｅｄ　ｔｏ　ｏｂｓｅｒｖｅ　ｔｈｅ　ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ　ｏｆ　ｅｔｈａｎｏｌ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ，ｌｉｑｕｉｄ—ｓｏｌｉｄ　ｒａｔｉｏ，ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ａｎｄ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｔｉｍｅ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｙｉｅｌｄ　

０ｆ　ｈｅｓｐｅｒｉｄｉｎ．［Ｒｅｓｕｌｔ］Ｔｈｅ　ｂｅｓｔ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ｗｅｒｅ　７０％ｅｔｈａｎｏｌ，１５：１　ｍＶｇ　ｌｉｑｕｉｄ—ｓｏｌｉｄ　ｒａｔｉｏ，７０℃ｏｆｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ａｎｄ　２．５　ｈ　ｄｕｒａ—　ｔｉｏｎ．ｕｎｄｅｒ　ｔｈｅ　ｃｏｎｄｉｔｉ０ｎｓ，ｔｈｅ　ｙｉｅｌｄ　ｏｆ　ｈｅｓｐｅｒｉｄｉｎ　ｗａｓ　４．３８％，ａｎｄ　ｔｈｅ　ａｖｅｒａｇｅ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｏｆ　ｔｈｉｓ　ｍｅｔｈｏｄ　ｗａｓ　１００．Ｏ９％．［Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ］Ｔｈｅ　

ｍｅｔｈｏｄ　ｉＳ　ｓｉｍｐｌｅ．ｓｔａｂｌｅ　ａｎｄ　ｒｅｌｉａｂｌｅ．ｔｈｕｓ　ｉｔ　ｃａｎ　ｂｅ　ｕｓｅｄ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌｉｚｅｄ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｈｅｓｐｅｒｉｄｉｎ．　

Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ　Ｈｅｓｐｅｒｉｄｉｎ：Ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ｔｅｓｔ；Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　

橙皮苷是陈皮中含量较高的一种双氢黄酮类糖苷，是构　

成维生素Ｐ的成分，具有增强毛细血管壁作用。现代研究表　

明，其具有降低血压、抗过敏、降低低密度胆固醇、影响血压、　

改变体内酶活性、改善微循环、抗菌、抗肝炎、抗氧化、抗肿　

瘤、抗癌等生理功能，是治疗心血管病药物的重要原料　。　

橙皮苷广泛存在于柑橘类水果中，尤其是在柑、橘、甜橙和柠　

檬等的果皮中含量较多。因此它的提取是一种变废为宝的　

综合利用方法。橙皮苷的药理作用很明显，若是制成保健产　

品，更具延年益寿，防衰老等作用，因此从橘皮中提取橙皮苷　

有一定的经济效益和现实意义　。橙皮苷常用的提取方法　

有溶剂提取法　、碱提酸析法　、超声波提取法　、微波提取　

法　等，其中溶剂提取法简单易操作。笔者采用乙醇为溶　

剂，通过正交试验确定了橘皮中橙皮苷提取的最佳工艺条　

件，为橘皮的综合利用提供了一定的理论依据。　

１材料与方法　

１．１材料橘皮，市售，于４０℃烘箱中烘干，粉碎，过６ｏ目　

筛，装瓶备用。主要试剂：９９．５％甲醇；硝酸铝９９％；无水乙　

醇；橙皮苷标准品：购于中国药品生物制品检定所。以上试　

剂均为分析纯，试验用水均为二次蒸馏水。主要仪器：电子　

天平，岛津－ＡＵＹ１２０；７２２Ｎ型分光光度计，上海第三分析仪器　

厂；水浴锅，金坛市精达仪器制造厂；１０１Ａ－２型电热鼓风干燥　

箱，上海实验仪器厂有限公司；ＨＨ－－４数显恒温水浴锅，江苏　

省金坛市荣华仪器制造有限公司。　

１．２试验方法　

１．２．１标准曲线的绘制。准确称取橙皮苷标准品５　ｍｇ，甲　

醇充分溶解并定容于５０　ｒＩｌｌ容量瓶中，得到橙皮苷标准储备　

基金项目　２００９年江苏省高等教育教改立项研究课题（２ｏｏ９ＪｓＪＧ１３７）；　南京晓庄学院校级课题资助（２０１０ＫＹＺＢ０３）。　

作者简介张凤（１９６４一），女，四川会理人，实验师，从事化学实验的教　学与研究，Ｅ－ｍａｉｎ：ｚｈｍｒ００７＠１６３．ｃｏｒｎ。　收稿日期２０１２￣３．２０　液。分别准确吸取橙皮苷储备液０．５０、１。００、１．５０、２。００、　

２．０５、３．ｏ０、３．５０、４．００　ｒｎｌ置于１０　ｍｌ容量瓶中，加入１．００　ｍｌ　

５％的Ａ１（ＮＯ　）　溶液，于８０　ｃｃ水浴中加热１５　ｍｉｎ后，冷却后　

定容至刻度。橙皮苷与Ａ１（ＮＯ　），能形成黄色络合物，其最　

大吸收波长为３９０　ｎｍ，见图１。以试剂作空白，依次测定各　

溶液的吸光度，可得吸光度Ａ与橙皮苷浓度ｃ（　ｇ／ｍ１）的标　

准曲线回归方程为：Ａ＝０．００３Ｃ＋０．００８，相关系数ｒ　＝　

０．９９９　０，见图１。试验表明，橙皮苷在５～４｜Ｄ　的浓度范　

围内有良好的线性关系。　

１．２．２供试品溶液的制备和测定。将新鲜橘皮烘干、粉碎，　

过６０目筛。称取５　ｇ橘皮粉末，加入一定浓度的乙醇，回流　

提取，得提取液。提取液过滤冷却，置２５０　ｍｌ容量瓶中，定容　

至刻度，摇匀得橘皮提取液。精密移取一定体积提取液，置　

于ｌ０　ｒｎｌ容量瓶中，加入１．００　ｍｌ　５％的ＡＩ（ＮＯ　）　溶液，于８Ｏ　

℃水浴中加热１５　ｍｉｎ后，定容至刻度，待测。根据所得吸光　

度代入标准曲线，计算橙皮苷浓度，并计算得率。　

Ｃ　坞／ｍｌ　

图１橙皮苷的标准曲线　

２结果与分析　

２．１正交试验设计根据影响橙皮苷的提取因素，在预试　

验的基础上，选择乙醇体积分数（Ａ）、液料比（Ｂ）、提取时间　

（ｃ）、

提取温度（Ｄ）作为考察因素，每个影响因素设计３个水　４Ｏ卷２１期　张凤等正交试验优化橘皮中橙皮苷提取工艺　１１０４９　

平，以橙皮苷得率为考察指标，选用４因素３水平实验表　

ｋ（３４）进行正交试验。因素水平表设计见表１，正交试验结　

果见表２。　

表１正交试验因素水平　

４．１９　３．９８　２．５３　

１．６６　３．７０　

３．４５　３．５４　

Ｏ．２５　３．４０　３．８１　３．４８　

０．４１　３．１０　３．８６　

３．７３　Ｏ．７６　

采用正交设计助手ⅡＶ３．１分析软件，对试验结果进行直　

观分析可知，各因素对橙皮苷得率的影响程度依次为：Ａ（乙　

醇体积分数）＞Ｄ（提取温度）＞ｃ（提取时间）＞Ｂ（液料比），　

最优组合方案为Ａ　Ｂ　ｃ　Ｄ　，即以７０％乙醇为提取溶剂，采用　

液料比为１５：１　ｍｌ／ｇ，在７０℃下提取２．５　ｈ。由表２正交试验　

结果的方差分析可知，上所选取的４个因素中，乙醇体积分　

数对橙皮苷得率的影响最显著。所以采用乙醇提取橘皮中　

橙皮苷时，应控制好乙醇体积分数。　

２．２提取工艺的验证分别称取橘皮３份，每份５　ｇ，在优　

化组合Ａ。Ｂ　Ｃ：Ｄ　的工艺条件下进行３次平行验证试验，计算　

（上接第１０９８６页）　

（３）对卫星云图的分析可以直观地监测到此次冰雹云的　

发生发展过程，预测冰雹发生的时间范围，可以提前２　ｈ预测　

冰雹天气的发生。　

（４）分析尽早时次的天气图，可以从天气系统的机理方　

面分析天气的发生原因，并能尽早地发出天气预警；利用数　

值预报产品分析冰雹特征气象要素场，可以更进一步地分析　

并精确地预测冰雹发生的概率、时间以及范围；而红外卫星　

云图对于对流旺盛的冰雹云的监测更准确，特征更明显，可　

以更直观地预测冰雹天气的发生。　

参考文献　

［１］赵先丽，李丽光，贾庆字．１９８８～２ｏｏ７年辽宁主要农业气象灾害分析　［Ｊ］．气象与环境学报，２ＯＯ９，２５（２）：３３．　橙皮苷的得率，以验证最优工艺的可行性和合理性。结果得　

出，在最佳工艺条件下进行提取，橙皮苷的平均得率达　

４．３８％，ＲＳＤ值为１．５３％，表明该方法重现性较好，利用正交　

试验优化橙皮苷的提取工艺是可行的。　、　

２．３加样回收试验精密称取已测得含量的同一批橘皮样　

品３份，分别精密加入不同浓度橙皮苷标准品，按供试品制　

备，测其吸光度，计算回收率。由表３可知，在最佳提取工艺　

条件下，重复性较好，橙皮苷得率较高，说明该工艺条件合理　

可靠　

表３橙皮苷加标回收试验　

３结论　

该试验以橙皮苷得率为考察指标，通过正交试验设计，　

对橘皮中橙皮苷的提取工艺条件进行了优化。结果表明，以　

７０％乙醇为提取溶剂，液料比１５：１　ｍｌ／ｇ，在７Ｏ℃下提取２．５　

ｈ，橙皮苷得率可达到４．３８％。通过验证试验表明，该试验获　

得的提取工艺操作简便、稳定可靠。　

参考文献　

［１］吴縻青，叶莹，张俊．ＨＰＬＣ测定不同产地陈皮橙皮苷的含量［Ｊ］．中国　现代中药，２００８，１０（８）：２０—２２，　［２］朱玉昌，周大寨，王成．甜橙皮中橙皮苷提取工艺［Ｊ］．食品科学，２０１０，　

３１（２２）：２６４—２６７．　［３］朱思明，于淑娟，杨连生．功能性橙皮苷的提取与化学改性研究进展　［Ｊ］．中国食品添加剂，２００５（４）：１—４．　［４］梁开玉，罗启波，喻梅．从陈皮中提取橙皮苷工艺研究［Ｊ］．重庆工商大　学学报：自然科学版，２ＯＯ４，２１（１）：１９—２２．　［５］周建国，邵青，陈柳榕．陈皮提取工艺的优化选择［Ｊ］．中国现代应用药　学杂志，１９９８，１５（２）：１７—１８．　［６］耿敬章，钱英，张志健，等．超声波辅助提取橘皮中橙皮苷［Ｊｊ．中国食　品添加剂，２００９，１２（７）：６３—６８．　［７］孙秀利，张力，秦培勇，等．微波法提取陈皮中橙皮苷［Ｊ］．中药材，２００７，　３０（６）：７１２—７１４．　

１　２　１　ＣＨＥＮ　Ｊ，ＨＡＮ　ＪＣ，ＹＡＮ　Ｆ，ｅｔ　ａ１．Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ　０ｆ　ｈａｉｌｓｔｏｎｅ　ｄｉｓａｓｔｅｒ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｒｉｓｋ　ｚｏｎｉｎｇ　ｉｎ　ｓｈｉｊｉａｚｈｕａｎｇ［Ｊ］．Ｍｅｔｅｏｒｏｌｏｇｉｃａｌ　ａｎｄ　Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ　Ｒｅ－　

ｓｅａｒｃｈ，２０１０，１（１１）：８０—８４．　［３］ＲＡＯ　Ｔ　Ｈ，ＣＨＥＮ　Ｈ　Ｂ，ＺＨＡＮＧ　Ｃ　Ｊ．Ａｎａｌｙｓｉｓ　Ｏｉｌ　ｔｈｅ　ｃｌｉｍａｔｉｃ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓ—　ｔｉｃｓ　ｏｆ　ｈａｉｌ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｓｏｕｔｈ　ｍｏｕｎｔａｉｎ　ａｒｅａ　ｏｆ　Ｎｉｎｇｘｉａ［Ｊ］．Ｍｅｔｅｏｒｏｌｏｇｉｃａｌ　ａｎｄ　Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ，２０１１，２（２）：３３—３５，３９．　［４］李红斌，孙鸦雁，程相坤，等．大连地区冰雹气候特征及防雹天气预警　概念模型［Ｊ］．高原气象，２０１０，２９（６）：１５６５—１５７０．　［５］刘英杰，曹兴锋，赵海军，等．一次罕见的初春冰雹过程分析［Ｊ］．安徽　农业科学，２０１０，３８（２３）：１２４２０—１２４２３．　［６］曾华，曾伟，毛力达，等塔额盆地一次强对流天气过程分析［Ｊ］．安徽