葛根素

葛根素的临床应用及不良反映【关键词】葛根素；,,,临床应用；,,,不良反映中药葛根来源于豆科野葛或甘葛的干燥根，具有辛凉解表的作用。

葛根素是从中药葛根中提掏出来的中药单体成份。

其化学名是4，7二羟基8βD葡萄糖异黄酮。

临床上普遍应用于心血管方面的疾病，其疗效取得了充分确信。

最近几年来对葛根素的临床应用及不良反映的报导比较多，现对其进行归纳总结，以供参考。

1 临床应用冠心病心绞痛张氏等［1］对98例符合国际命名标准的冠心病心绞痛患者随机分两组。

医治组50例，男性29例，女性21例；年龄39～75岁；病程＜1年者15例，1～5年者20例，6～10年者1例，10年以上者3例。

对照组48例，男性27例，女性21例；年龄40～76岁；病程＜1年者16例，1～5年者18例，6～10年者10例，10以上者4例。

两组均口服肠溶阿斯匹林50 mg，1次/d；消心痛l0 mg，3次/d。

医治组在此基础上另予葛根素注射液 g加入5%葡萄糖注射液250 ml静脉滴注，1次/d。

两组均医治14 d。

对两组患者用药前后心绞痛发作次数、程度、持续时刻及心电图、血压、血液粘度的转变进行观看。

结果医治组50例，显效16例，有效27例，无效7例，总有效率86%；对照组48例，显效10例，有效23例，无效15例，总有效率%。

梁氏［2］亦对60例冠心病心绞痛病人随机分组进行医治观看。

两组均予硝酸甘油10 mg加入5%葡萄糖注射液250 ml静脉滴注，1次/d，消心痛10 mg，辅酶Q1020 mg，3次/d，口服。

医治组另用葛根素30 mg加入5%葡萄糖注射液250 ml静脉滴注，1次/d，两组均医治15 d。

结果医治组显效%，有效%，无效%，总有效率%，对照组显效%，有效%，无效%，总有效率%。

急性脑梗死魏氏等［3］对79例急性脑梗死病人随机分为两组，医治组42例，男性23例，女性19例；年龄46～75岁。

对照组37例，男性20例，女性17例；年龄52～76岁。

葛根素注射液说明书[性状]本品为无色至微黄色的澄明液体。

系为50%丙二醇配制的溶液，性微粘稠。

【适应症】用于辅助治疗冠心病、心绞痛、心肌梗塞、视网膜动、静脉阻塞，突发性耳聋。

【规格】2ML：100MG【用法用量】静脉滴注。

每次200MG—400MG，加入5%葡萄糖注射液500ML中静脉滴注，每日一次，10天—20天为一疗程，可连续使用2—3个疗程。

超过65岁的老年人连续使用总剂量不超过5克。

【不良反应】1.个别病人在用药开始时出现暂时性腹胀、恶心等消化道反应，继续用药自行消失。

2.少数病人会出现皮疹、过敏性哮喘、过敏性休克、发热等过敏反应，极少数病人出现溶血反应。

一旦出现上述不良反应，应立即停药并对症治疗。

3.偶见急性血管内溶血：寒战、发热、黄疸、腰痛、尿色加深等。

【禁忌】1.严重肝、肾功能不全，心力衰竭及其它严重器质性疾病患者禁用。

2.对本品过敏者禁用。

3.对本品过敏或过敏体质者禁用。

【注意事项】1.有出血倾向者慎用。

2.本品长期低温（10℃以下）存放下可能析出结晶，此时可将安瓿置温水中，待结晶溶解后仍可使用。

3.血容量不足者应在短期内补足血容量后使用本品。

4.合并粮尿病患者，应用生理盐水稀释本品后静滴。

5.使用本品者应定期测胆红素、网织红细胞、血红蛋白及尿常规。

6.出现寒战、发热、黄疸、腰痛、尿色加深等症状者，需立即停药，及时治疗。

【孕妇及哺乳期妇女用药】在尚未通过验证葛根素对胎儿是否有毒性的情况下，孕妇慎用。

由于葛根素在组织分布广，在尚未清楚葛根素是否可以通过母乳排出的情况下，不建议在哺乳期使用。

【儿童用药】葛根素虽然具有体内吸收快、分布快、消除快的特点，但考虑到儿童的生理特点，在剂量减少的情况下，慎用。

【老年用药】对肝、肾功能正常的患者，本品适用老年患者使用，但超过65岁的老年人连续使用总剂量不超过5克，考虑到老年患者肾功能下降，应在医生的监护下使用。

【药物相互作用】本品为含酚羟基的化合物，遇碱溶液变黄，与金属离子形成络合物等。

液相色谱测定葛根素注射液中葛根素的含量液相色谱常见问题解决方法葛根是一种常用中药，具有解肌退热、生津、透疹、升阳止泻之功效，葛根素是葛根中的紧要活性成分之一、呈白色针状结晶，能溶于水，但溶解度小，其水溶液为无色或微黄色。

具有改善心脑血管循环、降低心肌耗氧量，降低血糖，防止高血压及动脉硬化，提高机体免疫力，抗菌，抗病毒等多种药理作用。

葛根素因毒性小，安全范围广，疗效好而临床应用价值。

目前市场上葛根素有多种剂型，但是其剂型和标准各不相同，本文比较了两种葛根素注射液的外观质量和内在质量，并用HPLC测定了其紧要有效成分葛根素的含量，具有便利、精准，便于掌控产品的质量等优点。

仪器准备仪器简介LC—600A智能全控液相色谱系统由P600高压恒流泵与UV600紫外检测器直接构成等度分析系统。

使用WS600工作站可以同时掌控数台P600高压恒流泵、UV600紫外检测器及恒温柱箱等，实行多元高压洗脱、波长扫描等功能。

应用领域化合物检测、法医毒物分析、蛋白质组学食品检测、药物分析、环境分析、聚合物分析色谱条件：色谱柱SymmetryC18柱（3.9mm150mm，5m）流动相甲醇—水（体积比为35:65）检测波长250nm进样量10L流速1.0ml/min谱图分析：进样阀在进样过程中，必需是特别清洁的，否则得不到较好的结果。

进样阀切换到进样位置（Inject）后，要在此位置保持一段时间，使流动相充分冲洗样品定量管，这样可以保证有较高的精准明确度，而且不用另外再冲洗样品定量管。

这种由色谱仪器掌控的冲洗明显要比手动冲洗更好些。

注意：冲洗需要的流动相体积至少为所进样品体积的10倍。

例如，假如取20μL样品至100μL样品定量管中，而流动相此时的流速为1mL/min，则需要在进样位置至少保持12s，即：20μL×10/1000μL·min—1=0.2min=12s。

当样品定量管经过充分的冲洗后，可以将旋柄转回取样位置（Load），也可以连续保持在进样位置，到下次取样前才切换回取样位置。

药物名称：葛根素药物别名：麦普宁、天保康英文名称：Puerarin 说明：本药为无色或淡黄色的澄明液体。

注射剂：100mg/2mL。

功用作用：用于冠心病，急性心绞痛，心肌梗塞，视膜动，静脉阻塞，突发性耳聋等症状的治疗。

用法用量：使用前用5％葡萄糖注射液或氯化钠注射液溶解，稀释：静脉注射，一次100—200mg，一日两次；静脉滴注，一次200—400mg，一日一次；15天为一疗程。

用药须知：本药遇碱变黄，勿在稀释时加入碱性药物。

注意事项：个别病例开始时有暂时性消化道反应如腹胀、恶心，继续用药可自行消失。

个别病例连续用药10天后，偶有原因不明的发热现象（男性为主），建议采用以1周为一疗程的间歇给药疗法。

1.有出血倾向者慎用。

2.血容量不足者应在短期内补足血容量后使用本品。

严重肝、肾功能不全，心力衰竭及其它严重器质性、疾病患者禁用。

对本品过敏者禁用。

实验 3 胶束电动毛细管色谱法测定葛根中葛根素的含量一、实验目的1.掌握胶束电动毛细管色谱法的基本原理。

2.学会用甲醇作溶剂超声提取葛根中葛根素的方法。

3.掌握毛细管电泳法测定葛根中葛根素含量的实验方法。

二、实验原理胶束电动毛细管色谱（MEKC）是在电泳缓冲溶液中加入离子型表面活性剂，常用的是十二烷基硫酸钠（SDS）,当其浓度超过临界胶束浓度时，就形成一疏水内核、外部带负电的胶束，在电场作用下，带负电的胶束以较低速度向阴极移动（准固定相）。

样品各组分因其疏水性不同，则在水相和胶束相之间的分配系数不同，依据各组分之间淌度和在两相中分配系数的差异实现分离。

该法既能分离中性化合物也能分离带电物质。

中药葛根为豆科植物野葛的干燥根，其主要活性成分葛根素具有改善血液循环、抗血小板聚集、降低心脑血管疾病发生、提高人体免疫力、抑制癌细胞和治疗突发性耳聋等作用，测定葛根中葛根素的含量有重要意义。

葛根素易溶于甲醇，略溶于乙醇，微溶于水，不溶于氯仿或乙醚。

三、仪器与试剂仪器：美国Beckman P/ACE TM MDQ 型高效毛细管电泳仪（压力进样，二极管阵列检测器）；未涂层石英毛细管（60cn^ 75 um有效长度50cm）; pHS-3C型pH 计；数控超声波快速清洗器；电子天平；电热恒温鼓风干燥箱。

试剂：葛根素标准品；野葛根（用植物粉碎机粉碎，过60目筛，于烘箱中60C 干燥5h后置于干燥器中冷却备用）；色谱纯甲醇；优级纯硼砂；优级纯硼酸。

实验用水为石英亚沸蒸馏水。

四、实验步骤1.检查冷却液在黑线以上，接通电源，打开主机电源开关预热30min 以上，打开仪器操作软件，设置冲洗方法和分离方法。

3.将0.1mmol/LNaOH、水、缓冲溶液、标准工作液和样品溶液，经0.45 的微孔滤膜过滤后注入小试剂瓶中，盖好瓶盖，脱气，放入仪器内托盘的适当位置上，记录好瓶子的位置。

4.按照冲洗条件，对毛细管进行实验前的冲洗。

石英毛细管柱每天使用前依次用O.1mmol/L氢氧化钠、水、缓冲溶液分别冲洗10min、2min、10min。

保健食品中葛根素的测定1范围本文件描述了保健食品中葛根素的液相色谱测定方法。

本文件适用于以葛根素作为主要原料的软胶囊、硬胶囊、片剂、粉剂、颗粒剂、液体、糖果、丸剂等类型的保健食品中葛根素的测定。

2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。

其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。

4原理根据葛根素溶于甲醇、水等极性溶剂的特性，试样采用50%甲醇溶液进行超声提取，经HLB固相萃取柱净化后利用高效液相色谱仪分离，二极管阵列（或紫外）检测器检测，以保留时间定性，外标法定量。

5试剂和材料除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。

5.1试剂5.1.1甲醇（CH3OH）：色谱纯。

5.1.2乙腈（CH3CN）：色谱纯。

5.1.3磷酸（H3O4P）：优级纯。

5.1.4石油醚（C n H2n+2）。

5.2试剂配制5.2.10.1%磷酸水溶液：吸取1.0mL磷酸（5.1.3），加水稀释并定容至1000mL，混匀。

5.2.250%甲醇水溶液：量取50mL的甲醇（5.1.1），加水稀释并定容至100mL，混匀。

5.2.315%甲醇水溶液：量取15mL的甲醇（5.1.1），加水稀释并定容至100mL，混匀。

5.2.470%甲醇水溶液：量取70mL的甲醇（5.1.1），加水稀释并定容至100mL，混匀。

5.3标准品葛根素标准品（C21H20O9，CAS号：3681-99-0）：纯度≥95%，或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。

5.4标准溶液配制5.4.1葛根素标准储备溶液（2.00mg/mL）：准确称取0.02g葛根素标准品（精确至0.0001g），用70%甲醇（5.2.4）溶解并定容至10mL，混匀，2℃~8℃条件下保存。

葛根素药理作用机制探讨及临床应用一、本文概述葛根素，作为一种来源于传统中药材葛根的有效成分，近年来在医药领域引起了广泛的关注。

其独特的药理作用机制和广泛的临床应用前景，使得葛根素成为了医药研究的热点之一。

本文旨在深入探讨葛根素的药理作用机制，以及其在临床实践中的应用情况。

我们将从葛根素的化学结构出发，解析其分子特征，为进一步理解其药理作用奠定基础。

随后，我们将重点分析葛根素在抗炎、抗氧化、抗肿瘤等方面的药理作用，以及这些作用背后的分子生物学机制。

我们还将对葛根素在心血管系统、神经系统等领域的保护作用进行综述，以期全面展现葛根素的药理作用全貌。

在临床应用方面，我们将详细介绍葛根素在中医药领域的应用情况，包括其在治疗感冒、咳嗽、肺炎等呼吸系统疾病，以及高血压、冠心病等心血管疾病中的疗效。

我们还将关注葛根素在现代医学领域的应用进展，尤其是在抗肿瘤、抗氧化应激等方面的研究成果。

通过本文的综述，我们期望能够为读者提供一个全面、深入的葛根素药理作用机制及临床应用的认识，为其在未来的医药研究和临床实践中提供有益的参考。

二、葛根素的药理作用机制葛根素，作为一种天然活性成分，广泛存在于葛根等植物中，近年来在医学界引起了广泛关注。

其药理作用机制涉及多个方面，具有广泛的应用前景。

葛根素在心血管系统方面表现出显著的保护作用。

它可以扩张冠状动脉，增加冠脉血流量，改善心肌缺血；同时，葛根素还能降低血压，减少心肌耗氧量，从而有效缓解心绞痛、心肌梗死等心血管疾病。

其机制可能与葛根素抑制血小板聚集、降低血液粘度、改善微循环有关。

葛根素具有明显的抗氧化和抗炎作用。

它可以清除体内的自由基，抑制脂质过氧化反应，从而保护细胞免受氧化损伤；葛根素还能抑制炎症因子的释放，减轻炎症反应，对多种炎症性疾病如肺炎、关节炎等具有一定的治疗效果。

葛根素还具有神经保护作用。

研究表明，葛根素可以穿过血脑屏障，进入脑组织，对神经细胞具有保护作用。

它可以减轻脑缺血再灌注损伤，改善脑功能，对治疗脑血管疾病如脑卒中、老年痴呆等具有一定的潜力。

葛根素通过一系列的提取方式，可以将葛根中的葛根素提取出来，大量提取生产葛根素，是由于葛根素的功效和作用对人体有着很大的帮助。

葛根素不仅可以用于心肌梗等心脏疾病，还可以用于突发性耳聋、视神经萎缩等疾病。

关于葛根素的更多知识，详见如下内容。

★一、葛根素简介葛根素是由葛根提取制成，主要剂型有片剂、注射剂等，主要化学成份为黄酮类化合物葛根黄酮，具有提高免疫，增强心肌收缩力，保护心肌细胞，降低血压，抗血小板聚集等作用。

本品为处方药，请遵医嘱。

★二、葛根素的提取方法原料葛根清杂粉碎→水煎煮→水浸膏→乙醇沉淀→醇浸膏→聚酰胺柱层析→水洗脱→浓缩→放置析晶→粗品→精制→干燥→葛根素精品。

经此方法提取的葛根素精品含量达97-100%，收率达1%以上，工艺简单、成本降低，便于扩大生产。

葛根的提取方法有多种，要根据葛根品种的不同来采用不同的方法，常用的方法有超声波提取法，有醇提法。

固得威薯业根据葛粉加工中葛根素的存在情况开发出的磨浆法出入境取葛根素，效果较好，它是采用葛根粉加工过程中废水来提取的，达到综合利用的效果。

★三、药理药效1.含有皂苷类化合物，对肝组织免疫损害具有保护作用。

2.可有效逆转化学诱导的肝纤维化。

3.增强心肌收缩力，保护心肌细胞作用。

4.能扩张血管、降低血压、改善微循环。

5.保护红细胞的变形能力，增强造血系统功能。

6.具有抗血小板聚集，增加纤溶活性，降低血粘度作用。

7.对肾炎、肾病肾衰模型均有保护作用。

8.对非特异性免疫、体液免疫、细胞免疫有明显的调节作用。

9.可促进正常人和肿瘤病人的淋巴细胞转化率，增强自然素作用。

10.对干扰系统有明显的刺激和诱生作用。

葛根素检测
葛根素（Puerarin或Daidzeine），又称为葛根黄素、葛根黄酮，是从中药葛根中分离的具
有扩冠作用的异黄酮类衍生物，存在于豆科植物葛及野葛的根。具有退热、镇静和使冠状动
脉血流量增加的作用，对垂体后叶素引起的急性心肌出血有保护作用。临床上用于冠心病心
绞痛、高血压。

迪信泰检测平台采用高效液相色谱(HPLC)法，结合蒸发光散射检测器(ELSD)或DAD检测
器，可高效、精准的检测样本中葛根素的含量变化。此外，迪信泰检测平台还提供其他多种
植物黄酮检测服务，以满足您的不同需求。

HPLC测定葛根素样本要求：
1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL。

周期：2~3周
项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告，报告包括：
1. 实验步骤（中英文）
2. 相关质谱参数（中英文）
3. 质谱图片
4. 原始数据
5. 葛根素含量信息

葛根素的抗炎作用及其对神经系统疾病影响的研究进展吴国庆1,李志刚1,杨佳一1,汪子栋1,张 洋2,林禹宏2摘要 目前研究表明炎症作用与神经系统疾病的产生密不可分,且通过调节炎性因子治疗神经系统疾病的文献报道逐年增加,葛根素是传统中药葛根的提取物,属于异黄酮类活性成分,其药理作用十分广泛,具有抗炎㊁抗氧化㊁抗凋亡㊁调节胰岛细胞㊁调节骨细胞㊁改善神经功能等作用,在神经系统疾病㊁心血管疾病㊁糖尿病㊁骨质疏松等疾病当中表现出独特的优势㊂本研究主要从葛根素的抗炎作用及其对神经系统疾病的治疗方面进行综述,以期为实验和临床用药提供新的思路和方法㊂关键词 神经系统疾病;阿尔茨海默病;葛根;葛根素;抗炎作用;神经保护d o i :10.12102/j.i s s n .1672-1349.2023.10.013 葛根(radix pueraria )是豆科植物葛属野葛的干燥根,首见于‘神农本草经“,记载其具有主消渴,身大热,呕吐,诸痹,起阴气,解诸毒,主下利的作用,中医药学经过千百年的发展,古代医家对葛根的认识远不止于此,历代文献中记载的葛根功效主要包括凉血止血㊁清热止呕㊁解酒毒醒酒㊁降逆平喘㊁清热解毒㊁解郁除烦㊁生肌敛疮㊁活血化瘀㊁通行经络㊁缓解腰痛和颈肩痛等㊂葛根素(puerarin ,PR )是葛根的重要提取物之一,是‘中华人民共和国药典“评价中药葛根饮片质量的重要指标,也是葛根发挥其有效作用的重要成分,近年来葛根素的作用备受关注,已经有大量研究表明其具有抗炎及神经系统保护作用㊂1 葛根素的抗炎作用铁死亡是一种新型的程序性细胞死亡,在脓毒症引起的肺损伤中起重要作用,有研究建立了脂多糖(LPS )诱导人肺泡上皮细胞A549形成脓毒症肺损伤模型,并检测到模型细胞中肿瘤坏死因子-α(TNF -α)㊁白细胞介素(IL )-8㊁IL -1β浓度显著增加,研究人员应用酶联免疫吸附实验(ELISA )法测定葛根素对LPS 诱导的A549细胞炎性细胞因子TNF -α㊁IL -8㊁IL -1β的影响,发现随着葛根素应用浓度的增加,TNF -α㊁IL -8㊁IL -1β的表达水平显著降低[1]㊂葛根素通过调节肾素-血管紧张素系统和核因子-κB (NF -κB )信号通路在火药烟雾诱导的大鼠急性肺损伤中发挥抗炎作用,有效降低肺损伤中IL -6㊁IL -1β㊁IL -17A 和TNF -α的水平[2]㊂ 心肌梗死(myocardialinfarction ,MI )是由于冠状基金项目 国家自然科学基金面上项目(No.81973938);国家级大学生创新创业训练计划一般项目(No.202210228054);黑龙江中医药大学大学生创新创业训练计划项目(No.X202110228003)作者单位 1.北京中医药大学(北京100029);2.黑龙江中医药大学通讯作者 李志刚,E -mail :*****************引用信息 吴国庆,李志刚,杨佳一,等.葛根素的抗炎作用及其对神经系统疾病影响的研究进展[J ].中西医结合心脑血管病杂志,2023,21(10):1807-1810.动脉阻塞,心肌细胞持续缺氧缺血,导致心肌细胞坏死的严重危害生命健康的疾病[3]㊂心肌梗死的病理状态中存在炎性细胞浸润[4],有研究表明,葛根素联合丹参酮ⅡA 阻断炎性细胞释放,调节炎性细胞因子[IL -1β㊁IL -6㊁IL -10和诱导型一氧化氮合酶(iNOS )]的表达,抑制炎症早期M1巨噬细胞的表达,增加心肌缺血小鼠M2巨噬细胞的表达㊂此外,丹参酮ⅡA 和葛根素联合使用可通过降低Toll 样受体4(TLR4)蛋白表达和促进CCAAT/增强剂结合蛋白-β蛋白表达来抑制炎症,以改善心肌梗死的炎症病理[5-6]㊂Liu 等[7]将40只健康成年Wistar 大鼠随机分为4组:假烧伤组㊁烧伤组㊁烧伤+葛根素组㊁葛根素组,来探究葛根素对烧伤心肌的保护作用,发现烧伤组血清IL -1β㊁TNF -α和IL -6水平明显高于假烧伤组,而烧伤+葛根素组的炎性因子明显低于烧伤组㊂单侧输尿管梗阻(UUO )介导的肾损伤在组织纤维化发展过程中出现持续的细胞死亡和炎性细胞浸润,葛根素能够通过调节NF -κB p65/信号转导和转录激活因子3(STAT3)通路显著抑制UUO 小鼠肾脏炎性因子IL -1β㊁单核细胞趋化蛋白-1(MCP -1)和IL -6的表达水平,有效抑制UUO 小鼠的炎性因子募集[8]㊂炎症在急性肝损伤的发病中起重要作用,研究人员为探究葛根素通过抑制炎症反应缓解肝损伤的作用,使用LPS (0.01μg/mL ,0.10μg/mL ,1.00μg/mL ,10.00μg/mL ,24h )在L -02细胞中建立了肝损伤模型,结果显示,LPS 可增强IL -1β㊁TNF -α和IL -6水平,而葛根素可降低IL -1β㊁TNF -α和IL -6水平,发挥护肝作用[9-10]㊂Yang 等[11]给骨关节炎(OA )小鼠模型喂食葛根素以评价葛根素在体内对骨关节炎的治疗作用,结果表明,葛根素能够抑制IL -1β处理软骨细胞诱导的炎症介质,还可以抑制IL -1β处理的软骨细胞中的细胞外基质(ECM )降解㊂髋膝关节的人工关节置换在骨科领域取得了成功,但问题也随之而来,植入材料的表面会产生磨损颗粒,这些磨损颗粒会激活免疫系统和炎症反应,这些反应导致了破骨细胞的募集和功能的增强,打破了成骨细胞和破骨细胞的平衡,出现骨溶解,从而导致人工关节固定不牢,发生松动的情况,而葛根素能够抑制破骨细胞的生成,促进成骨细胞产生,还可以抑制炎症反应减轻骨溶解[11]㊂葛根素在由炎症参与或导致的多系统疾病中发挥抗炎作用,能够对TNF-α㊁IL-8㊁IL-1β㊁IL-6㊁IL-17A㊁IL-10㊁iNOS和MCP-1等炎性因子起抑制作用,但葛根素的优势不仅仅在于抗炎,而是通过直接或者间接的抗炎参与系统组织损伤的恢复,作用位点十分广泛㊂2葛根素对神经系统疾病的影响有研究表明葛根素具有抗炎㊁抗氧化㊁抗肿瘤㊁保肝的作用,对阿尔茨海默病(AD)㊁帕金森病㊁脑缺血等神经系统疾病具有良好的治疗效果[12]㊂2.1AD郭珂一等[13]将Aβarc果蝇随机分为正常对照组㊁模型组㊁葛根素干预组(0.10mmol/L㊁0.20mmol/L㊁0.24mmol/L),对果蝇爬管能力及果蝇寿命㊁果蝇脑组织中淀粉样蛋白β(Aβ)蛋白表达(ELISA法)及果蝇脑组织中Aβ斑块面积(免疫荧光法)进行检测,发现0.20 mmol/L葛根素处理组果蝇爬管能力最佳,0.20mmol/L 葛根素干预组果蝇的中位生存期显著高于AD模型造成寿命缩短的果蝇组,0.20mmol/L葛根素干预组果蝇脑组织中Aβ表达水平显著低于模型组,且脑组织中Aβ斑块面积占比显著低于模型组(P<0.05)㊂马冬雪等[14]关于淫羊藿㊁黄芪㊁葛根有效组分复方铁调素调控淀粉样蛋白前体蛋白(APP)水解关键酶增进AD学习记忆的机制研究发现,通过上调肝脏铁调素基因(HAMP)的表达,促进APP水解关键酶解聚素样金属蛋白酶10(ADAM10)和解聚素样金属蛋白酶17 (ADAM17)的表达,抑制APPβ-位点裂解酶-1(BACE1)的表达,从而减少Aβ的生成,能够治疗AD㊂庞广福等[15]将80只6月龄SD大鼠采用D-半乳糖联合亚硝酸钠造模的AD大鼠随机分为对照组㊁模型组㊁葛根素治疗组和葛根素+乌圆补血口服液治疗组,通过测定血清及脑匀浆相关指标[超氧阴离子自由基㊁丙二醛(MDA)㊁谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)㊁超氧化物歧化酶(SOD)㊁乙酰胆碱酯酶(AChE)]发现,与对照组相比,治疗组血清和脑匀浆中GSH-Px和SOD活力明显升高㊁O2-浓度降低,脑匀浆的AChE活力和MDA含量明显降低(P<0.01),而且病理改变得到很好的改善,得出了小剂量的葛根素联合乌圆补血口服液对阿尔茨海默病的治疗有效㊂Liu等[16]通过计算机方法筛选葛根素对AD的潜在治疗作用,并通过Aβ-肽诱导的AD大鼠模型证实,葛根素具有穿透血脑屏障的潜力,在与AChE㊁环氧合酶2(COX-2)和Caspase-3的分子对接和动力学模拟中葛根素的作用效果具有高稳定性㊂体内实验表明,葛根素能够抑制AChE活性,使抗氧化防御物质活性恢复至正常水平,降低脑内炎性因子和凋亡基因的表达,尤其是下调COX-2和Caspase-3的表达[16]㊂硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)的表达在AD神经元的发育过程中增加,且TXNIP与TXNIP-硫氧还蛋白复合物分离,TXNIP-NOD样受体蛋白3(NLRP3)复合物组装ASC和pro-Caspase-1形成NLRP3炎性体,从而引发AD炎症和细胞凋亡的研究采用CB-dock分子对接探索21种天然类黄酮和酚类是否靶向TXNIP,结果显示,葛根素等药物能够有效抑制TXNIP,从而减轻AD中枢炎症,抑制细胞凋亡[17]㊂然而葛根素改善AD的作用途径不止于此,有研究使用氯化铝(AlCl3)破坏健康雄性Wistar大鼠神经系统,使其产生学习和记忆障碍(这种处理方法被广泛应用于AD等认知障碍性疾病的实验造模),结果显示,黄酮类药物处理组大鼠相比于AlCl3毒性组在Morris水迷宫实验目标象限的游泳时间和穿越平台的频率增加(P<0.05);经AlCl3处理后大鼠海马神经元大量凋亡,而经过黄酮类药物作用之后观察染色的组织切片发现其几乎没有凋亡的神经元,有效证明了葛根素等黄酮类药物能有效改善大脑海马区神经元凋亡的病理情况;葛根素组显著降低了大鼠海马凋亡相关基因mRNA㊁大鼠海马凋亡相关蛋白(Bcl-2蛋白)和自噬相关蛋白(Bax蛋白)的表达[18]㊂以上研究表明葛根素在治疗AD中表现出了独特的作用效果,为其成为一种治疗AD的新药物提供了理论和实验基础㊂同为黄酮类物质的芦丁㊁水飞蓟素也表现出治疗AD的疗效,说明挖掘中草药中黄酮类活性成分对治疗AD具有重要意义㊂2.2帕金森病神经系统疾病是目前全球疾病导致残疾的主要原因之一,而帕金森病又是神经系统疾病中增长最快的,受人口老龄化的影响,预计到2040年,将达到1200万例以上,如果加上其他致病因素,帕金森病病人将达到1700万例以上,虽然帕金森病不具有传染性,但是其大流行趋势还是引起了科研人员和临床医生的担忧[19]㊂那么寻找有效的方法治疗现存的病人以及阻止帕金森病大流行具有重要意义㊂有研究评估了葛根素在体外和体内对帕金森病模型的多巴胺(DA)细胞的增殖和分化作用,在体外,不同浓度葛根素处理1周后,β-微管蛋白(TUJ1)㊁酪氨酸羟化酶(TH)和多巴胺转运体(DAT)蛋白及mRNA表达和多巴胺释放显著增加㊂在体内,使用细胞替代治疗方法,移植葛根素处理的多巴胺产生细胞后,移植后第2周帕金森病症状明显改善;更多的移植细胞存活并沿注射线迁移到更广泛的区域;更多的移植细胞增殖并分化为Th细胞;在6周的观察期间,纹状体中检测到更多的多巴胺,而帕金森病多是由多巴胺缺乏所导致的,研究证明葛根素可促进多巴胺神经元存活㊁增殖和分化,有效缓解帕金森病[20]㊂Singh等[21]发现葛根素能够激活磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)通路,防止1-甲基-4-苯基碘化吡啶诱导的帕金森病模型中多巴胺神经元死亡,阻断p53的积累以及通过p53介导的Puma㊁Bax和Caspase-3依赖性细胞凋亡防止1-甲基-4-苯基吡啶离子诱导的细胞死亡㊂2.3缺血性脑卒中缺血性脑卒中已经成为全球第二大死亡原因[22],对大脑神经元的损害是不可逆转的,近年来,关于葛根素治疗脑缺血性神经损伤的报道逐渐增多,葛根素的多种作用(抗氧化应激㊁抗炎㊁抗神经细胞凋亡㊁调控自噬等)可从多途径改善脑缺血导致的认知障碍和神经细胞损伤[23]㊂有研究从PI3K/Akt1/糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)信号通路探索葛根素对脑缺血模型大鼠的运动和认知缺陷以及海马神经元损伤的减轻作用,使用开放和封闭场测试以及Morris水迷宫实验对大鼠进行行为学检测,结果表明葛根素减弱了缺血的影响,从而改善了运动活动和认知行为的缺陷,通过观察染色后的脑组织切片发现葛根素预处理组的皮质和海马组织中的死亡神经元细胞数量显著减少,且葛根素预处理显著增强了Akt1(Ser473)㊁GSK-3β磷酸化,髓样细胞白血病-1(MCL-1)积累增加,阻断凋亡蛋白Caspase-3的活化[24]㊂黄亚光等[25]将40只雄性SD大鼠随机分为假手术组㊁模型组㊁50mg/kg葛根素组㊁100mg/kg葛根素组4组,线栓法制备大鼠大脑中动脉栓塞模型,缺血1.5h再灌注24h后进行神经功能评估和腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)-苏氨酸蛋白激酶-失调51样激酶1(Ulk1)信号通路相关蛋白检测,结果表明葛根素能有效调控AMPK-mTOR-Ulk1信号通路抑制自噬的过度发生,从而减轻脑缺血再灌注损伤的发生㊂2.4其他神经系统损伤非动脉炎性前部缺血性视神经病变(NAION)是老年人中最常见的急性视神经病变形式,NAION是以急性㊁无痛㊁视力丧失㊁视盘肿胀导致视盘萎缩为主要临床症状[26],然而对于NAION 并没有十分有效的治疗方法,因诸多研究表明葛根具有抗炎和神经保护作用,所以研究人员使用前部缺血性视神经病变(rAION)大鼠模型,观察葛根素对rAION 大鼠的作用,为NAION的治疗寻找有效的治疗方法,研究结果显示,葛根素可减少rAION急性期的视乳头水肿,葛根素抑制了巨噬细胞到视神经组织中浸润,此外降低了促炎细胞因子的表达并诱导了抗炎细胞因子的表达,以及在rAION模型中维持Akt1活化并诱导转录因子CCAAT增强子结合蛋白β(C/EBPβ)表达[27]㊂有研究使用高脂饮食(HFD)慢性不可预见性温和应激(CUMS)诱导的抑郁样大鼠模型探讨葛根素抗抑郁的作用机制,与HFD/CUMS组相比,辛伐他汀+氟西汀或葛根素治疗拮抗了海马组织和血浆中IL-6㊁TNF-α和IL-10的异常蛋白表达(P<0.05),与HFD/CUMS 组相比,接受氟西汀㊁辛伐他汀㊁辛伐他汀+氟西汀或葛根素(30mg/kg㊁60mg/kg和120mg/kg)治疗的大鼠TLR4阳性细胞数减少至70.35%㊁37.78%㊁30.36%㊁65.20%㊁29.64%和17.02%(P<0.01)㊂且辛伐他汀㊁辛伐他汀+氟西汀或葛根素(30mg/kg㊁60mg/kg和120 mg/kg)组大鼠海马区的TLR4水平显著降低(P< 0.05),葛根素还可以改善海马组织中的异常脂质代谢,说明葛根可通过修复TLR4诱导的炎症损伤和磷脂代谢紊乱来缓解高脂饮食和慢性不可预测的轻度压力引起的抑郁样行为[28]㊂蛛网膜下腔出血导致许多脑功能障碍,研究团队基于以往葛根素保护神经系统的相关研究试图探索葛根素对蛛网膜下腔出血神经损伤的恢复作用,葛根素可有效缓解脑水肿,减轻了小鼠的神经功能缺损,减少了血脑屏障(BBB)的破坏;蛋白免疫印迹测定发现葛根素可逆转Bcl-2/Bax表达比例并保护SOD2活性,减轻蛛网膜下腔出血小鼠的神经功能缺损[29]㊂3小结随着研究的不断深入,葛根素的药理作用逐渐被了解,葛根素作用于多系统疾病发挥抗炎作用从而改善其因TNF㊁IL等增加所导致的炎症反应介导的相关损伤㊂在神经系统疾病中葛根素既能够治疗中枢神经系统疾病又能够治疗外周神经系统疾病[30],表现出抑制神经系统炎症反应㊁调控多个神经损伤通路㊁减轻凋亡因子表达㊁调节相关蛋白的表达等功效㊂值得注意的是,同样作为黄酮类的中草药成分芦丁㊁水飞蓟素,以及同属多酚类物质的黄芩素㊁白藜芦醇㊁木犀草素㊁姜黄素等都具有神经系统保护作用,这为拓宽中药的功效以及将中药主要有效成分作为疾病治疗的潜在药物提供了研究基础和思路㊂参考文献:[1]XU B Y,WANG H D,CHEN Z.Puerarin inhibits ferroptosis andinflammation of lung injury caused by sepsis in LPS induced lungepithelial cells[J].Frontiers in Pediatrics,2021,9:706327.[2]ZHANG F,W ANG Y,LIU P P,et al.Puerarin exhibits antiinflammatoryproperties in gunpowder smog-induced acute lung injury in ratsvia regulation of the renin-angiotensin system and the NF-κBsignaling pathway[J].Experimental and Therapeutic 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[5]ZHOU Y X,ZHANG H,PENG C.Effects of puerarin on theprevention and treatment of cardiovascular diseases[J].Frontiers in Pharmacology,2021,12:771793.[6]WANG J Y,GE S K,WANG Y Q,et al.Puerarin alleviates UUO-induced inflammation and fibrosis by regulating the NF-κB P65/STAT3and TGFβ1/smads signaling pathways[J].Drug Design,Development and Therapy,2021,15:3697-3708.[7]LIU J L,LIU J Y,BAI M M,et al.Protective effect of puerarinagainst burn induced heart injury in rats[J].Experimental andTherapeutic Medicine,2020,20(1):275-282.[8]GAO S,LI L Y,LI L,et al.Effects of the combination of tanshinoneⅡA and puerarin on cardiac function and inflammatory responsein myocardial ischemia mice[J].Journal of Molecular andCellular Cardiology,2019,137:59-70.[9]YANG J F,WU M M,FANG H,et al.Puerarin prevents acute liverinjury via inhibiting inflammatory responses and ZEB2expression[J].Frontiers in Pharmacology,2021,12:727916. 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【药物名称】葛根素Puerarin【药物类别】抗心绞痛药【药物别名】麦普宁、天保康Tapocon【分子式成分】葛根素的化学名为4，7-二羟基8-b-D葡萄糖异黄酮。

【制剂规格】本药为无色或淡黄色的澄明液体。

注射剂：100mg/2mL。

【药理毒理】葛根素为血管扩张药，对冠状动脉和脑血管有扩张作用。

可降低心肌耗氧量，并有活血化瘀、改善微循环的作用。

葛根素对心血管疾病的作用与其抗氧化、钙离子拮抗剂和β受体阻滞剂有关。

【适应证】用于冠心病，急性心绞痛，心肌梗塞，视网膜动，静脉阻塞，突发性耳聋等症状的治疗。

葛根素能改善糖尿者視力糖尿病人由於視網膜內微血管病變和合併輕微血栓，加上血漿粘度升高，使視網膜微血管循環發生障礙，故嚴重的病人會視力模糊、視力下降，甚至失明。

中國遼寧省遼寧中醫學院附屬醫院的最新研究顯示，中藥葛根素對糖尿病人的早期視網膜病變具有療效，可改善視網膜的微血管血液循環，能幫助病人改進視力。

研究結果顯示，葛根素治療能改變視網膜的血液流動，因此對改善視力較有幫助，惟對病人眼底出血的吸收無明顯改善。

據中藥典中寄載葛根，能活血化瘀，降低血液高凝狀態，是以對糖尿病人的早期視網膜病變具有療效。

【不良反应】个别病例开始时有暂时性消化道反应如腹胀、恶心，继续用药可自行消失。

个别病例连续用药10天后，偶有原因不明的发热现象（男性为主），建议采用以1周为一疗程的间歇给药疗法。

对肝肾功能有一定损害。

【用法用量】使用前用5％葡萄糖注射液或氯化钠注射液溶解，稀释：静脉注射，一次100—200mg，一日两次；静脉滴注，一次200—400mg，一日一次；15天为一疗程。

用药须知：本药遇碱变黄，勿在稀释时加入碱性药物。

【注意事项】1．有出血倾向者慎用。

2．血容量不足者应在短期内补足血容量后使用本品。

严重肝、肾功能不全，心力衰竭及其它严重器质性、疾病患者禁用。

对本品过敏者禁用。

【生产单位】北京协和药厂浙江康恩贝集团制药有限公司。

葛根素注射剂的功能主治1. 什么是葛根素注射剂？葛根素注射剂是一种由葛根素为主要成分的中成药，通过静脉注射的方式给予患者治疗。

葛根素是从葛根中提取的一种有效成分，具有多种药理活性，被广泛应用于临床治疗。

2. 葛根素注射剂的功能特点•葛根素注射剂具有活血化瘀、抗凝和抗炎等药理作用；•可以改善微循环，提高氧气供应，并增强组织修复能力；•对心脑血管疾病有辅助治疗的作用；•对于肝功能异常、胆道疾病等方面也有一定的疗效。

3. 葛根素注射剂的主要功能主治葛根素注射剂以其独特的药理作用，在多个领域有着广泛的应用和疗效。

以下是葛根素注射剂的主要功能主治：3.1 心脑血管疾病•改善心肌缺血；•降低心脏负荷，增加心脏排血量；•保护血管内皮细胞，维持血管弹性；•预防和减轻动脉粥样硬化；•降低血压；•防治血栓形成。

3.2 肝病•保护肝细胞，促进肝细胞再生；•减轻和预防肝纤维化；•改善肝功能异常；•辅助治疗肝硬化。

3.3 胆道疾病•解除胆囊、胆管痉挛；•促进胆汁分泌；•预防和缓解胆结石。

3.4 神经系统疾病•保护神经细胞，促进神经再生；•缓解中风后的脑功能障碍；•辅助治疗帕金森病。

3.5 免疫调节•增强机体免疫力；•抑制过度免疫反应。

4. 葛根素注射剂的用法用量葛根素注射剂的用法用量因个体差异而异，一般根据患者的具体病情以及医生的建议来确定。

常见的用法用量如下：4.1 心脑血管疾病•静脉缓慢注射：每日1次，每次10毫升，连续使用1-2周。

4.2 肝病和胆道疾病•静脉缓慢注射：每日1次，每次10毫升，连续使用2-4周。

4.3 神经系统疾病•静脉缓慢注射：每日1次，每次10毫升，连续使用1-2周。

4.4 免疫调节•静脉缓慢注射：每日1次，每次10毫升，连续使用1-2周。

视病情需要可酌情调整用量。

5. 注意事项•本品需由医生指导使用，严禁自行调整用量或停药；•对本品过敏者禁用；•在使用过程中如出现不良反应，请及时告知医生；•孕妇、哺乳期妇女、老年人和幼儿应在医生指导下使用。

实验81 葛根素制剂中葛根素的含量测定一、实验背景葛根是纯天然植物，又名鹿霍、黄斤、鸡齐。

含有丰富的营养、药理及生理活性成份，其可利用成份为淀粉、异黄酮等。

葛根淀粉（葛粉）内含有人体需要的十多种氨基酸和十多种微量元素，所含的富“硒”元素，具有一定的防癌抗癌之功效。

葛粉是一种纯天然保健食品，也是食品开发的重要优质原料，对口腔溃疡、急慢性口腔炎、胃炎、长期低烧、脑动脉硬化、冠心病等患者能有效地发挥食疗和辅助防治的效果。

葛根还含有异黄酮，如葛根素、大豆甙元、葛根甙类（A、B、C3）等，其中以葛根素为主要成分。

由于葛根中提取的葛根素在降血脂、血压、血糖方面有较好疗效，是治疗心绞痛、心脑血管疾病，防止脑血栓，延缓衰老等药品和保健食品的重要原料，可用以生产针剂、片剂、胶囊等药品，所以，葛根是重要的医药原料。

葛花具有解酒、止渴的作用。

1998年3月，葛根被国家卫生部认定为药、食两用植物，我国古代药物学专著《神农本草经》、《本草纲目》对葛根的功用均有记载。

此外，利用高新生物技术，葛根还可生产系列食品：葛根低聚糖、营养葛奶、葛根黄酮茶等。

葛根集药用、食用、生态、绿化等功能于一体，市场前景美好，开发潜力巨大。

二、实验目的与要求1．查阅相关文献，选择一种可行的化学或仪器分析方法测定葛根素制剂中葛根素（如葛根素注射液、冠心通脉灵片、肠胃宁片、麝香心脑通胶囊、感冒清热颗粒等）的含量，并设计详细实验方案（包括样品的预处理、实验步骤、结果处理等）。

2．根据实验方案进行实验。

3．了解葛根素制剂中测定葛根素含量可采用的仪器及方法原理。

4．对所得实验数据进行分析。

5．写出实验报告。

（熊小莉）。

葛根化学成分葛根是一种常见的中药材，具有广泛的应用价值。

葛根的化学成分十分丰富，包括多种生物活性物质，具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种功效。

葛根中含有葛根素，是葛根的主要活性成分之一。

葛根素是一种黄酮类化合物，具有很强的抗氧化作用，可以清除体内的自由基，减轻氧化应激引起的损伤。

此外，葛根素还具有降血压、降血糖、抗血栓等作用，对心血管疾病有一定的预防和治疗作用。

葛根中还含有葛根甙。

葛根甙是一种异黄酮类化合物，具有抗炎作用。

它可以抑制炎症因子的释放，减轻炎症反应，对风湿性关节炎、类风湿性关节炎等炎症性疾病有一定的缓解作用。

此外，葛根甙还可以促进血管扩张，改善血液循环，对心脑血管疾病有一定的保护作用。

葛根中还含有多糖类物质。

多糖是一类高分子化合物，具有免疫调节、抗肿瘤等多种生物活性。

葛根中的多糖可以增强机体的免疫功能，提高机体对疾病的抵抗力。

同时，多糖还能够直接抑制肿瘤细胞的生长和扩散，对肿瘤具有一定的抑制作用。

葛根中还含有纤维素、挥发油、氨基酸等多种成分。

纤维素是一种不可消化的食物成分，可以促进肠道蠕动，预防便秘。

挥发油具有抗菌、驱虫等作用，对呼吸道感染、寄生虫感染等有一定的辅助治疗作用。

氨基酸是构成蛋白质的基本单元，对机体生长发育和修复有重要作用。

葛根的化学成分非常丰富多样，包括葛根素、葛根甙、多糖、纤维素、挥发油、氨基酸等多种活性成分。

这些成分赋予了葛根抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种功效，使其在中药领域有着重要的地位。

在临床应用中，葛根可以用于治疗高血压、糖尿病、心脑血管疾病等疾病，同时也可以作为保健品使用，帮助人们提高免疫力，预防疾病的发生。

但是需要注意的是，葛根虽然有很多好处，但也有一些禁忌症，如孕妇、哺乳期妇女、肝功能不全患者等应慎用。

因此，在使用葛根时，应该遵循医嘱，避免不必要的风险。

山东省药品检验所250012葛根素注射液为新型血管扩张药，用于冠心病、心肌梗塞、心绞痛的治疗，其主成分葛根素为豆科植物野葛Pueraria lobata(Willd.)Ohwi 的干燥根中提取、分离得到的以葛根素为主的异黄酮苷类，其含量测定方法，卫生部药品标准(试行)［1］为紫外分光光度法。

在生产和检验过程中发现，按100 %投料，紫外法测定其含量可达标示量的103 %左右，经薄层检查，其原料葛根素含杂质，易导致注射液测定含量偏高。

本文采用高效液相色谱法，使葛根素与杂质得到良好分离后，测定葛根素的含量，其方法准确，结果可靠。

1 仪器与试药TSP高效液相色谱仪(包括P 2000泵，AS 3000自动进样器，UV 2000检测器，IBM 350—450 DX2数据站)。

葛根素对照品(中国药品生物制品检定所提供)；对-羟基苯甲醛内标物(山东省药物研究所精制，色谱纯)。

乙醇(优级纯)，重蒸馏水，丙二醇(分析纯)，葛根素注射液(烟台中策药业有限公司提供)。

2 色谱条件色谱柱：Turner C18H37，5 μm 4.6 mm×150 mm；流动相：乙醇—水(43∶207)；流速：1 mL/min；柱温：30 ℃；检测波长：250 nm；理论板数按葛根素计，不低于3000，与内标峰分离度大于5。

3 线性关系试验取对-羟基苯甲醛适量，加流动相制成0.5 mg/mL的内标溶液。

取105 ℃干燥至恒重的葛根素对照品适量，精密称定，用流动相溶解，制成0.3 mg/mL的溶液，精密取该溶液1、3、5、10、20 mL，分别精密加入内标溶液10 mL，摇匀，取各溶液10 μL进样，记录色谱图(见图1)。

以葛根素峰面积和内标峰面积之比Y与浓度X(mg/mL)做线性回归，得回归方程为：Y＝11.98X+5.673×10-3r=0.9991即葛根素在0.027～0.2 mg/mL浓度范围内线性关系良好。

图1 色谱图1.葛根素2.内标3～6.杂质4 校正因子的测定取在105 ℃干燥至恒重的葛根素对照品约20 mg，精密称定，置100 mL 量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，精密取该溶液与内标溶液各10 mL 混匀，取10 μL进样，记录色谱图，按对照品与内标的峰面积比计算校正因子。