微生物室菌种管理及应急程序

实验室生物安全管理办法（试行）第一章总则第一条为加强我校实验室生物安全管理，保护师生的健康与安全，根据国家和教育主管部门关于实验室生物安全法律法规，结合学校实际，制定本办法。

第二条本办法适用于我校涉及生物安全的所有实验室及其相关实验活动的管理。

第三条我校生物安全管理按照学校实验室安全管理责任体系，实行学校、学院（科研平台，以下简称平台）及实验室三级管理，坚持“谁主管、谁负责，谁使用、谁负责”的原则。

实验室负责人为实验室生物安全的第一责任人。

第二章生物实验室的安全运行和管理第四条凡从事以下实验活动的实验室必须建立生物安全实验室：（1）从事的教学、科研实验活动中涉及的病原微生物、实验动物等符合《人间传染的病原微生物名录》相关规定的；（2）从事的教学、科研实验项目中所使用的重组DNA 技术涉及基因重组、基因敲除或缺失动物等的；（3）从事的教学、科研实验项目中需从医学病原体体液、器官或组织中取样、检测等的。

第五条生物实验室的新建、改建、扩建由学院（平台）向学校提交报告，报告内容应包括实验目的、拟从事的实验活动和所用到的微生物或动物种类、与之配套的实验室结构与设施、人员队伍、人员安全防护措施与防护设备、安全风险评估说明、废弃物处理方式等。

经学校批准后，根据国家对不同级别生物实验室的审批备案标准，报相关主管部门备案或审批。

第六条各生物安全实验室应每年定期对从事生物实验活动的教职人员及相关学生进行培训，保证其掌握实验技术规范、操作规程、病原微生物安全防护知识和实际操作技能，并进行考核，经考核合格方可上岗。

第七条生物安全实验室的公共区域应张贴生物安全标志、实验室操作规程、应急处置预案、废弃物管理制度、实验人员行为规范等规章制度以及实验室负责人姓名、联系电话等。

实验室操作区域应张贴生物危险标识、化学危险品标识、生物废弃物标识等。

第八条生物安全实验室须建立实验档案，包括实验室安全记录、工作日志、实验原始记录、菌种转移和保藏记录、设备条件监控及检测记录、消毒记录、事故（暴露）记录、人员培训记录、人员健康档案等。

微生物实验室自查引言概述：微生物实验室是进行微生物研究和实验的场所，为确保实验室的安全性和合规性，自查是必不可少的环节。

本文将从五个方面详细介绍微生物实验室自查的内容和要点。

一、实验室设施和装备的检查1.1 实验室环境：检查实验室的通风、温度、湿度等环境参数是否符合要求，确保实验室内的微生物无菌。

1.2 安全设施：检查实验室内的安全设施是否齐全，如消防设备、紧急出口、安全标识等，以应对紧急情况。

1.3 实验设备：检查实验室内的微生物培养箱、显微镜、离心机等设备是否正常运行和维护，确保实验的准确性和可靠性。

二、实验室操作规范的检查2.1 操作程序：检查实验室是否有规范的操作程序，包括样品接收、处理、保存、处置等，以确保实验操作的一致性和可追溯性。

2.2 个人防护措施：检查实验室内人员是否佩戴适当的个人防护装备，如实验服、手套、口罩等，以保护实验人员的安全。

2.3 废弃物管理：检查实验室的废弃物管理制度是否健全，废弃物的分类、存储和处置是否符合相关规定，以减少环境污染和交叉感染的风险。

三、实验室文档和记录的检查3.1 实验记录：检查实验室内的实验记录是否规范、完整和准确，包括实验过程、结果、分析和结论等，以确保实验数据的可靠性和可复现性。

3.2 校准和验证记录：检查实验室的设备校准和验证记录是否及时更新和有效，以保证实验设备的准确性和稳定性。

3.3 培训和培训记录：检查实验室内人员的培训情况和培训记录，确保实验人员具备必要的知识和技能，能够正确操作实验设备和遵守操作规范。

四、实验室微生物品种和数量的检查4.1 微生物菌种库管理：检查实验室的微生物菌种库管理制度是否健全，包括菌种的存储、标识、更新和处置等，以确保菌种的质量和可追溯性。

4.2 微生物菌液的保存和使用：检查实验室内微生物菌液的保存和使用情况，包括保存条件、使用频率和使用记录等，以保证菌液的活力和纯度。

4.3 微生物实验室内微生物的数量控制：检查实验室内微生物数量的控制措施，如污染控制、消毒灭菌等，以减少微生物传播和交叉感染的风险。

中国国境卫生检疫杂志 ２００６ 年 ８ 月第 ２９ 卷第 ４ 期 Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｆｒｏｎｔｉｅｒ Ｈｅａｌｔｈ Ｑｕａｒａｎｔｉｎｅ Ａｕｇ．２００６，Ｖｏｌ ２９，Ｎｏ．４
菌(毒)种保存及复苏技术
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马洪波 冯子力 谭 华 （ 珠海出入境检验检疫局， 珠海 ５１９０１０）
摘要 微生物是重要的 生 物 资 源 ， 保 存 微 生 物 的 目 的 ， 不 仅 使 微 生 物 菌 株 保 持 着 原 有 的 生 命 力 、优 良 生 产 性 能 、 形态特征， 并使其遗传性状从分离时或从实验开始就一直保持不变， 为后人能更好地应用先进技术开发和运用微生 物， 为人类造福。为此， 对菌（ 毒） 种保存的原理以及复苏技术， 包括冷冻干燥保存法、超低温冰箱保存法、液氮保存法、 传代培养保存法、载体保存法等技术的操作步骤进行介绍， 为同行作为参考。
病 毒 是 非 细 胞 形 成 的 生 命 体 ， 仅 有 ＲＮＡ 或 ＤＮＡ 一 类 简 单 分 子 ， 有 时 甚 至 仅 有 基 因 片 段 ， 包 含 一种或多种蛋白质。一般来说， ＤＮＡ 病毒比 ＲＮＡ 病 毒更稳定， 但 ２ 种病毒都能较稳定地保存。许多病毒 可在 ４℃保存 １ 个月， 而在较低的温度下可保存 １ 年 以上而无需要特别的冷冻技术， 因病毒结构简单， 体 积小， 不含水分。
中国国境卫生检疫杂志 ２００６ 年 ８ 月第 ２９ 卷第 ４ 期 Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｆｒｏｎｔｉｅｒ Ｈｅａｌｔｈ Ｑｕａｒａｎｔｉｎｅ Ａｕｇ．２００６，Ｖｏｌ ２９，Ｎｏ．４
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煮沸 ２～３ 次， 每次 １０～３０ｍｉｎ， 备用。 ２．３．３ 微生物保存物的准备 在最适宜的培养条件 下将细胞培养至静止期或成熟期， 进行纯度检查后 （ 参见科技部自然科技资源平台联合管理办公室文 件《微生物菌种纯度检测技术规程》） ， 与保护剂混合 均匀， 分装。微生物培养物浓度以细胞或孢子不少于 １０８～１０１０ 个／ｍｌ 为宜。

引言：正文：一、微生物室的设备和设施要求1.1实验室的建设和布局1.1.1根据实验需求确定微生物室的面积和位置。

1.1.2确保实验室空间具备足够的通风条件和灭菌设备。

1.1.3根据实验室安全性要求，设置进口门和出口门，以及相应的安全措施。

1.2微生物室的设施和设备1.2.1确保微生物室内设备和设施的正常运行和灭菌。

1.2.2定期维护并记录微生物室内仪器设备的维修情况。

1.2.3确保实验室内有足够的实验材料和培养基。

1.3微生物室的清洁和消毒1.3.1制定定期的清洁计划和消毒程序。

1.3.2使用适当的消毒剂对微生物室内表面进行清洁和消毒。

二、微生物室的操作流程2.1进入微生物室的准备工作2.1.1穿戴适当的实验服和防护用品。

2.1.2检查实验室门窗是否关闭严实。

2.1.3检查个人内外物品是否符合实验室要求。

2.2微生物样本的准备和处理2.2.1准备所需的培养基和培养物。

2.2.2从培养物中取样进行聚类。

2.2.3根据实验要求进行鉴定和分离。

2.3微生物实验的操作步骤2.3.1根据实验要求准备好必要的实验试剂和设备。

2.3.2遵循标准实验流程进行微生物实验。

2.3.3对实验进行必要的控制和实验组设置。

2.4实验数据的记录和保存2.4.1使用规定的数据记录表格和方法进行数据记录。

2.4.2将实验数据进行整理和归档，确保数据的完整性和可信度。

2.4.3根据实验需求制定数据保存的规定和办法。

2.5微生物实验的结束和清理2.5.1清理实验台面和设备，保持微生物室的整洁。

2.5.2妥善处置实验产生的废弃物和污染物。

2.5.3关闭实验室门窗，并进行必要的安全检查。

三、微生物室中的样本处理3.1微生物样本的采集和保存3.1.1确定采集样本的合适时间和方法。

3.1.2使用合适的容器和介质进行样本采集和保存。

3.1.3进行样本标识和记录，确保样本的追溯性。

3.2微生物样本的预处理3.2.1根据实验要求和样本特点，进行样本的预处理。