【CN109757379A】一种以杉木子叶为外植体的高效再生方法【专利】
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(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 (43)申请公布日
(21)申请号 201910209086.1
(22)申请日 2019.03.19
(71)申请人 福建农林大学地址 350002 福建省福州市仓山区上下店路15号
(72)发明人 丁文沙 叶善汶 刘爱琴 马祥庆 朱强
(74)专利代理机构 福州元创专利商标代理有限公司 35100代理人 蔡学俊
(51)Int.Cl.A01H 4/00(2006.01)
(54)发明名称一种以杉木子叶为外植体的高效再生方法(57)摘要本发明公开了一种以杉木子叶为外植体的高效再生方法,其包括播种、消毒、诱导培养、增殖培养、生根培养及炼苗的步骤,其具体是利用含有不同激素配比的培养基提供外植体在生根壮苗期间所需的因子,以提供良好的生根条件,促进苗健康茁壮,获得杉木的再生苗。其培养方法取材方便,成本低、操作简单,并具有扩繁速度快、繁殖系数高的特点,可为杉木遗传转化体系
提供高效再生体系。
权利要求书1页 说明书4页 附图1页CN 109757379 A2019.05.17
CN 109757379
A1.一种以杉木子叶为外植体的高效再生方法,其特征在于:包括如下步骤:
1)播种:选取成熟饱满的种子,用自来水浸泡24 h后于室温下播种于基质中;
2)消毒:种子萌发20天后,选取生长健壮的幼苗,用自来水清洗干净,去根后依次用
75vol%酒精浸泡30-60s、0.1vol%升汞溶液浸泡5-7 min、无菌水冲洗5次;
3)诱导培养:将消毒后的幼苗取子叶切段作为外植体,接种到诱导培养基上培养30天,
获得不定芽;
4)增殖培养:将步骤3)培养得到的不定芽经切割后转接到增殖培养基上培养35天,获
得继代苗;
5)生根培养:将步骤4)培养得到的继代苗接种到生根培养基上培养15天,获得生根苗;
6)炼苗:将步骤5)培养得到的生根苗转到炼苗室进行炼苗。
2.根据权利要求1所述的以杉木子叶为外植体的高效再生方法,其特征在于:所述再生
方法还包括生根苗的移栽,其具体是在炼苗10天后,待根系由白色转变成灰白色时,将生根
苗先于清水中漂洗去除根部的培养基,然后晾干根系的表面水分,再将生根苗于基质中进
行培养。
3.根据权利要求1或2所述的以杉木子叶为外植体的高效再生方法,其特征在于:所用
基质是将营养土、蛭石和珍珠岩按体积比2:2:1混合制得。
4. 根据权利要求1所述的以杉木子叶为外植体的高效再生方法,其特征在于:步骤3)
中所述诱导培养基的配方为:DCR+NAA 0.2 mg/L+TDZ 0.005 mg/L+6-BA 1.0mg/L。
5. 根据权利要求1所述的以杉木子叶为外植体的高效再生方法,其特征在于:步骤4)
中所述增殖培养基的配方为:MS+ 6-BA 3.0mg/L+NAA 0.3 mg/L+TDZ 0.06 mg/L。
6. 根据权利要求1所述的以杉木子叶为外植体的高效再生方法,其特征在于:步骤5)
中所述生根培养基的配方为:MS+NAA 1 mg/L+IBA 1 mg/L。
7. 根据权利要求1所述的以杉木子叶为外植体的高效再生方法,其特征在于:诱导培
养、增殖培养及生根培养时的培养条件均为:光照速率80 μmol·m-2·s-1,光照时间16 h/
d,培养温度25±
2℃。权 利 要 求 书1/1页
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