烟草植物组织培养 (1)

烟草叶片愈伤组织诱导摘要用不同成分培养基，附加0.8%琼脂，3%蔗糖，调pH5.8—6.0，取烟草叶片作为外植体进行愈伤组织诱导培养，计算污染率、诱导率以及诱导情况，观察愈伤组织的发生情况。

实验表明，养分较高的培养基，外植体生长情况较好。

当细胞分裂素高于生长素的浓度时，有利于分化出芽；细胞分裂素低于生长素的浓度时，有利于分化出根；当细胞分裂素及生长素的浓度适合时，愈伤组织不分化，但是生长旺盛。

关键词：烟草叶片愈伤组织诱导前言烟草（Nicotiana tabacum）又名草烟，属茄科烟草属的一年生草本植物，本属约有60种，原产于美洲和大洋洲[1]。

烟草是重要的经济作物和工业原料作物，其体内所含的烟碱等生物碱是非常宝贵的医药及化工原料[2]。

有报道烟草细胞悬浮培养物获得细胞分裂素类物质，因此很有必要对烟草的组培快繁进行研究，以获得更有效的方法提高产率和产量。

柯善强综述植物细胞的遗传全能性与组织培养形态发生控制[3]，戴冕进行了烟草叶肉原生质体再生植株的研究[4] ,徐瑞娟等通过烟草花序苞叶的离体培养分化出花芽[5],战淑敏用烟草叶组织培养直接获得再生植株[6]。

本实验以烟草叶片组织为外植体进行组织培养，诱导愈伤组织，观察愈伤组织诱导情况。

1.材料与方法1.1 配置培养基母液，每2人为一个小组，配置以下培养基，并分装，灭菌，然后室温下放置一周。

1.2 取烟草叶片取烟草的嫩叶片作外植体。

先用自来水冲洗干净，再用蒸馏水洗2次后，置于超净台上，于无菌条件下先用75%的酒精浸泡30秒，然后置于无菌瓶中用10%次氯酸钠溶液浸泡20分钟至30分钟，再用无菌水冲洗4次，最后在无菌培养皿中将嫩叶片切成1cm见方小块，接种在培养基中。

1.3.1 观察污染情况：观察是否有细菌性污染（菌斑呈粘液状,接种后1-2天出现）和真菌性污染（出现不同颜色霉菌,接种后3-10天出现），并计数。

计算污染率。

污染率(%)=污染的材料数/总接种材料数×100%[7]1.3.2 观察各培养基中的外植体产生愈伤组织的情况，愈伤组织出现时间和愈伤组织形态特征（颜色和质地等），计数形成愈伤组织的材料数，并计算诱导率。

浙江省杭州市2024-2025学年高三上学期教学质量检测生物试题一、单选题1．五水共治是指“治污水、防洪水、排涝水、保供水、抓节水”。

下列做法与“五水共治”行动不相符的是（）A．工业用水封闭化B．适时清理河道C．及时拧紧水龙头D．污水直排河道2．莲藕内部含有管状小孔构成的通气组织，有助于其在水生环境中进行良好的气体交换。

莲藕内部管状小孔形成的原因是（）A．细胞分化B．细胞衰老C．细胞坏死D．细胞凋亡3．肺炎支原体是一种能够引起人类肺部炎症的原核生物，其特征包括细胞膜中胆固醇含量较高以及无细胞壁等。

下列叙述正确的是（）A．肺炎支原体具有完整的细胞核结构B．肺炎支原体的蛋白质在核糖体中合成C．胆固醇构成了肺炎支原体细胞膜的基本骨架D．抑制细胞壁合成的抗生素可用于治疗支原体肺炎4．野生型金黄色葡萄球菌对青霉素敏感，在长期滥用青霉素的环境中，最终产生能在高浓度青霉素下生长的菌群。

下列叙述正确的是（）A．抗青霉素金黄色葡萄球菌群体的产生是长期人工选择的结果B．抗青霉素金黄色葡萄球菌个体的产生是长期自然选择的结果C．接触青霉素之前金黄色葡萄球菌种群中已有抗青霉素的个体D．抗青霉素金黄色葡萄球菌的产生是染色体畸变引起的5．有学者认为，人类祖先（2n=48）在进化过程中，两条近端着丝粒染色体短臂末端DNA 相互连接，形成现代人类的2号染色体，该染色体目前仅含一个有功能的着丝粒。

下列叙述错误的是（）A．人类2号染色体形成时仅发生染色体结构变异B．短臂末端DNA的连接伴随磷酸二酯键的形成C．融合形成的2号染色体中必有一个着丝粒失活D．可通过显微镜观察判断两条染色体是否相互连接6．小蓬草是一种入侵植物，其自身抗逆性较强，容易形成单优势种群落。

研究发现裸露的荒地被小蓬草入侵程度比成熟乔木林的严重。

下列叙述正确的是（）A．小蓬草与入侵地所有植物共同构成了生物群落B．小蓬草与入侵地各种植物的生态位完全重叠C．小蓬草入侵的程度可能与入侵地物种丰富度有关D．小蓬草入侵不改变当地群落演替的速度和方向7．现有编号为1、2、3的三个试管，加入等量的双链DNA后，分别加入破坏糖和磷酸、糖和碱基之间的连接键以及氢键的试剂进行充分反应。

第2章第1节一[基础达标]题组一细胞的全能性1．下列最容易表达出细胞的全能性的是()A．人的口腔上皮细胞B．葡萄枝韧皮部细胞C．兔的肝脏细胞D．鼠的神经细胞【答案】B【解析】人的口腔上皮细胞、兔的肝脏细胞和鼠的神经细胞都是动物细胞，而葡萄枝韧皮部细胞为植物细胞。

植物细胞的全能性比动物细胞的全能性高，容易表达出全能性。

综上所述，B正确，A、C、D错误。

2．下列实例中，能够体现细胞全能性的是()A．小鼠腺细胞的自我复制B．克隆羊“多莉”的获得C．壁虎断尾后重新长出尾部D．胡萝卜韧皮部细胞经植物组织培养产生完整植株【答案】D【解析】小鼠腺细胞的自我复制的结果是细胞数量的增多，不是完整生物体(或分化成其他各种细胞)，不能体现细胞的全能性，A错误；克隆羊“多莉”的诞生说明已分化的动物体细胞的细胞核是具有全能性的，B错误；壁虎断尾后重新长出尾部属于器官的再生，是细胞的分裂和分化能力，并没有体现细胞的全能性，C错误；胡萝卜韧皮部细胞培育出植株属于植物组织培养过程，体现了植物细胞的全能性，D正确。

3．植物组织培养过程中，可通过诱导菊花幼叶发育为完整植株，其根本原因是菊花幼叶细胞()A．具有菊花植株全套的遗传信息B．具有其他细胞不具备的蛋白质C．还未被植物病毒感染D．分化程度低分裂能力强【答案】A【解析】植物组织培养过程中，可通过诱导菊花幼叶发育为完整植株，其根本原因是菊花幼叶细胞具有菊花植株全套的遗传信息。

题组二植物组织培养4．影响植物组织培养的因素包括()①培养基的配制②外植体的选取③激素的运用④消毒⑤温度、pH、光照A．①②③④⑤B．①②③C．①②③④D．①②③⑤【答案】A【解析】离体的植物组织和细胞，对营养、环境条件要求相对特殊，需要配制适宜的培养基，①正确；不同植物组织培养的难易程度差别很大，即使是同一种植物材料，因器官来源及其生理状况、材料的年龄、保存时间的长短等不同也会影响实验结果，②正确；植物激素中，生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素，③正确；植物组织培养需要在无菌条件下进行，因此要对外植体进行消毒，④正确；植物组织培养需要适宜的温度、pH，还需要适时的光照(脱分化避光，再分化需要光)，⑤正确，故A正确。

烟草叶片愈伤组织诱导分化实验1. 实验目的（1）通过诱导植物（烟草叶片、水稻种子）愈伤组织和器官发生，分析生长素和细胞分裂素对烟草叶片离体培养的作用。

（2）了解植物组织在离体培养条件下脱分化和再分化的特点。

2. 实验原理外植体形成愈伤组织大致要经历三个时期：启动期、分裂期和形成期。

启动期主要通过激素以及环境因素的诱导使外植体细胞代谢增强，大量蛋白质与核酸形成为细胞分裂做准备；分裂期时外植体细胞在激素诱导下脱分化并不断增殖，形成结构疏松的组织块；形成期时，由于不同植物生长激素的诱导使愈伤组织形成根、芽等形态分化。

烟草为常见模式植物之一，常用于植物组织培养，是研究细胞脱分化和再分化的理想材料。

在愈伤组织诱导及分化过程中，光照条件起到的作用是促使愈伤组织进行光合作用生成糖类，促使代谢活动进行。

6-BA、NAA均为植物生长调节剂，6-BA属于细胞分裂素，可诱导愈伤组织发生并促进牙的形成；NAA属于细胞分裂素，能促进细胞分裂与扩大，诱导形成不定根。

根据Skoog和Miller提出的生长素和细胞分裂素相对浓度调节器管分化的概念，相对高的生长素有利于细胞增殖和不定根的分化，而相对高的细胞分裂素浓度有利于不定芽的分化。

通过改变激素的种类和浓度，有效地调节培养组织的器官分化，已经在许多植物的组织培养中得到证实，甚至在一些低等植物中也得到了证实。

3. 实验材料与操作方法3.1 实验材料3.1.1 材料选择：烟草By-2，滤纸片，枪头3.1.2 实验试剂：（1）植物生长调节剂（超净台过滤灭菌，1.5 mLEP管分装后-20℃贮存）6-BA 0.5mg/mL（1mol/L NaOH溶解再用蒸馏水定容）NAA 0.5mg/mL（1 mol/L NaOH溶解再用蒸馏水定容）（2）抗生素（超净台过滤灭菌，1.5 mLEP管分装后-20℃贮存）卡那霉素50 mg/mL（蒸馏水定容）利福平15 mg/mL（无水乙醇溶解再用蒸馏水定容）链霉素30 mg/mL（蒸馏水定容）羧苄青霉素100 mg/mL（蒸馏水定容）（3）实验用培养基MS大量元素储存母液（50×，蒸馏水定容）：1650mg/L NH4NO3+1900mg/L KNO3+370mg/L MgSO4·7H2O+170mg/L KH2PO4+440mg/LCaCl2·2H2O（CaCl2·2H2O在配制过程中不易溶解，可单独配成储液存放）MS微量元素储存母液（100×，蒸馏水定容）：0.83mg/L KI+6.2mg/L H3BO3+22.3mg/L MnSO4·4H2O+8.6mg/L ZnSO4·7H2O+ 0.25mg/L Na2MoO4·2H2O+0.025mg/L CuSO4·5H2O+0.025mg/L CoCl2·6H2O +27.8mg/LFeSO4·7H2O +37.3 mg/L Na2-EDTA·2H2O（FeSO4·7H2O 和Na2-EDTA·2H2O两个试剂配制成100×溶液4℃冰箱避光储存）MS有机成分储存母液（100×，蒸馏水定容）：3mg/L甘氨酸+0.5mg/L烟酸（维生素B5）+0.5mg/L盐酸吡哆醇（维生素B6）+0.1mg/L盐酸硫胺素（维生素B1）+100mg/L肌醇（肌醇难溶解，一般独自配成浓缩液储存）MS培养基（NaOH调节至pH 5.8，蒸馏水定容）：1×大量元素+1×微量元素+1×有机成分+30g/L蔗糖+0.8%琼脂+不同比例生长素（6-BA+IAA）3.1.3 实验仪器：超净工作台，烧杯，锥形瓶，培养皿，枪形镊子，眼科剪，移液枪，酒精灯，光照培养室，3.2 操作方法取幼嫩烟草叶片约5片（选择幼年的外植体较好，如分生组织、维管束、形成层组织、静止的薄壁组织），用自来水清洗晾干。

一、基本过程−−−→−−−→→脱分化再分化外植体（离体的组织、器官或细胞）愈伤组织根、芽或胚状体完整植株1.外植体由活植物体上切取下来以进行培养的那部分组织或器官叫做外植体。

一般取植物幼嫩部位（如茎 尖）或花药等。

2.愈伤组织原指植物体的局部受到创伤刺激后，在伤口表面新生的组织。

它由活的薄壁细胞组成，可起源于植物体任何器官内各种组织的活细胞。

其特点是：排列疏松、无规则、高度液泡化、呈无定形状态的薄壁细胞，具有未分化特性。

知识点睛第10讲 植物组织培养技术愈伤组织形成过程中，没有叶绿素和叶绿体的形成，所以愈伤组织形成初期不需要充足的光照。

通常使用细胞分裂素和生长素比例在1:l来诱导植物材料愈伤组织的形成。

3.胚状体胚状体是在离体植物细胞、组织或器官培养过程中，由一个或一些体细胞，经过胚的发生和发育过程，形成与合子胚相类似的结构。

一般专指在组织培养条件下产生的非合子胚。

诱导胚状体需要的条件，因植物种类、部位和培养时组织细胞所处状况的不同而异。

胚状体的诱导与外植体所处生理状况，内源激素的变化及遗传性、倍性等都有密切关系。

①胚状体的产生不需要任何激素，如烟草、曼陀罗和水稻等的花药培养。

②培养中需要生长激素或细胞分裂素或二者的组合，如檀香和石刁柏的愈伤组织培养。

③需先在有激素的培养基上诱导，然后转入低浓度激素或无激素的培养基中，如胡萝卜在诱导愈伤组织时需2,4-D，但由愈伤组织诱导出胚状体时，则需在没有2,4-D的培养基培养。

④某些天然产物，如椰乳，西瓜汁，酵母提取物，酪朊水解物或腺嘌呤等都有利于胚状体的发生。

二、理论基础：植物细胞的全能性1. 细胞全能性的定义：指已经分化的细胞，仍然具有发育成完整个体的潜能。

2. 在生物的生长发育过程中，细胞并不表现出全能性，而是分化成各种组织和器官。

3. 细胞具有全能性的原因：含有该种生物全部遗传信息。

4. 细胞的全能性高低比较：①一般，细胞分化程度越高，全能性越低②受精卵>生殖细胞>体细胞③植物体细胞>动物体细胞三、条件1.离体2.无菌3.一定的营养物质：水、无机盐、蔗糖（提供碳源和调节渗透压）、维生素等4.植物激素在配制好的培养基中，常常需要添加植物激素。

第1章复习测试卷二、填空题1．根据外植体的不同，一般可以将植物组织培养分为：植株培养、胚胎培养、器官培养、组织培养、细胞培养和原生质体培养。

2．在植物组织培养中，外植体脱分化后，再分化形成完整植株的途径有两条：一是器官发生途径，二是胚状体途径。

3．通过器官发生再生植株的方式有三种：第一种最普遍的方式是先分化芽，再分化根；第二种是先分化根，再分化芽，这种方式中芽的分化难度比较大；第三种是在愈伤组织块的不同部位上分化出根或芽，再通过维管组织的联系形成完整植株。

4．体细胞胚发生的途径可分为间接途径和直接途径。

5．植物组织培养的整个历史可以追溯到19世纪末和20世纪初。

一个多世纪来，植物组织培养的发展大致可以分为探索、奠基和迅速发展三个阶段。

6．在Schleiden和Schwann所发展起来的细胞学说推动下，1902年德国植物生理学家G．Haberlandt提出了细胞全能性的设想，并成为用人工培养基对分离的植物细胞进行培养的第一人。

7．White、Gautheret和Nobecourt在1939年确立的植物组织培养的基本方法，成为以后各种植物组织培养的技术基础，他们三人被誉为植物组织培养的奠基人。

8．1958年英国人Steward等将胡萝卜髓细胞培养成为一个完整植株，首次通过实验证明了植物细胞的全能性，成为植物组织培养研究历史中的一个里程碑。

9．1960年Cocking等人用酶分离原生质体获得成功，开创了植物原生质体培养和体细胞杂交工作。

同年Morel培养兰花的茎尖，获得了快速繁殖的脱毒兰花。

其后，国际上相继把组织培养技术应用到兰花的快速繁殖上，建立了“兰花工业”。

10．花药培养在20世纪70年代得到了迅速发展，获得成功的物种数目不断增加，其中包括很多种重要的栽培物种。

烟草、水稻和小麦等的花培育种在我国取得了一系列举世瞩目的成就。

三、是非题（×）1．从理论上说，所有的植物细胞与组织材料都能培养成功，其培养的难易程度基本相同。

高2022级生物学一、选择题：共30个小题，每小题2分，共60分。

每小题只有一个选项符合题目要求。

1．下列有关生物多样性的叙述，正确的是（）A．对生物多样性最好的保护是最大程度的利用B．生物多样性是经过漫长的协同进化实现的C．生物多样性的直接价值明显大于它的间接价值D．生物多样性的形成过程即新物种的形成过程2．为认真践行“人民城市”重要理念，持续打好垃圾分类攻坚战和持久战，不断提高人民群众的满意度和获得感，某地执行垃圾分类回收政策，对于垃圾中的有机废弃物将按照“无废化生态社区”模式进行处理。

“无废化生态社区”中对有机废弃物进行处理的相关方案如图所示。

下列叙述错误的是（）A．有机废弃物发酵得到的有机肥料能为农作物提供营养物质B．“无废化生态社区”遵循循环、整体等生态工程原理C．从资源化、无害化角度分析，垃圾处理途径②③优于④D．“无废化生态社区”模式能提高物质循环速率和能量传递效率3．生态足迹指在现有技术条件下，维持某一人口单位生存所需的生产资源和吸纳废物的土地及水域的面积。

下列活动不利于降低生态足迹的是（）A．国家实施“三北”和长江中下游地区重点防护林建设、退耕还林还草B．在日常饮食中，减少植物性食物的比例，多摄入肉类食物C．减少石油、天然气的使用，大力发展太阳能、风能等新能源D．减少私家车出行，提倡自行车或步行等绿色出行方式4．我国早在9000年前就可以运用发酵技术获得产品，为生活增添丰富的色彩。

下列说法正确的是（）A．腐乳鲜美的味道主要由曲霉分解蛋白质产生的小分子肽和氨基酸引起B．利用酵母菌酒精发酵进行传统酿酒的过程中，需一直保持无氧的条件C．泡菜坛装八成满可以防止发酵过程中酵母菌、乳酸菌等产生的CO2使发酵液溢出D．制作果酒时，可通过控制发酵的温度、发酵液的pH等措施降低乳酸菌使果酒变质的概率5．下列关于果酒和果醋的制作原理、发酵过程的叙述中，错误的是（）A．果酒和果醋的发酵菌种不同，但代谢类型相同B．葡萄汁装入发酵瓶时，要留有大约1/3的空间C．当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸D．果酒和果醋的制作可用同一装置，但需控制不同的发酵条件6．在用传统发酵技术制作发酵食品过程中，控制发酵条件至关重要。

植物组织培养技术植物组织培养（Plant tissue culture）是指在无菌条件下，将离体的植物器官（根、茎、叶、花等）、组织（如形成层、花药组织、胚乳、皮层等）、细胞（体细胞和生殖细胞），以及原生质体，培养在人工配制的培养基上，给予适当的培养条件，使其长成完整的植株，统称为植物组织培养。

植物组织培养的过程可概括为：外植体脱分化或完整植株胚状体茎尖、胚及子房等器官做外植体可不经脱分化直接形成试管苗。

植物组织培养技术是生物技术的重要组成部分，在生产实践及基因工程、遗传转化等研究中有重要应用前景。

植物脱毒及离体快繁，花药培养与单倍体育种、幼胚培养与试管受精，抗性突变体的筛选与体细胞无性系变异，植物产品的工厂化生产等方面的研究和应用，均必须借助植物组织培养技术的基本程序和方法。

通过本实验，要求同学掌握植物组织培养操作技术；了解外植体脱分化及再生的过程；理解植物细胞全能性。

一、试材与用具1．植物材料：花生、烟草、苹果、大白菜、玉米等。

2．实验室：准备室、接种室、培养室等。

3．仪器设备：高压灭菌锅（器）、光照培养箱、振荡培养箱、天秤、酸度计、超净工作台等。

4．器械及用具：镊子、手术刀、接种针、细菌过滤器、记号笔等。

5．玻动器皿：三角瓶、培养瓶、培养皿、量筒、容量瓶等。

二、方法步骤（一）培养基的制备1．母液的配制在植物组织培养中，不同的植物，不同的器官和组织，不同的研究目的，使用不同的培养基，培养基尽管千差万别，按其性质和含量来分主要由以下几部分组成：①无机营养，包括大量元素和微量元素；②有机物质；③铁盐；④碳水化合物；⑤天然复合物；⑥激素；⑦琼脂（固体培养基）；⑧其他添加物。

在培养基的配制中，对各组分的成分，常先要按其需用量扩大一定倍数，配制成母液（表2－1）。

配制母液时应注意以下两个方面：（1）配制大量元素母液时，为了避免产生沉淀，各种化学物质必须充分溶解后才能混合，同时混合时要注意先后顺序，把钙离子（Ca2+）、锰离子（Mn2+）、钡离子（Ba2+）和硫酸根（SO42-）、磷酸根（PO43-）错开，以免形成硫酸钙、磷酸钙等沉淀，并且各种成分要慢慢混合，边混合边搅拌。

仅供参考植物组织培养复习题一、名词解释1植物细胞全能性：任何具有完整细胞核的植物细胞，都拥有形成一个完整植珠所必须的全部遗传信息和发育成完整植株的能力。

2初代培养：芽、茎段、叶片、花器等外植体从植物体上分离下来的第一次培养的过程。

3继代培养：初代培养后，将组织转移到新的培养基上进行培养的都称为继代培养。

4体细胞胚：植物组织培养过程中能够产生与正常合子胚相似的结构，由体细胞发育而成，也称为胚状体。

5胚的培养：在无菌条件下将胚从胚珠或种子中分离出来，置于培养基上进行离体培养的方法。

6外植体：从植物体上分离下来的用于离体培养的材料。

7驯化现象：植物组织经长期继代培养，要加入生长调节物质，其后加入少量或不加入生长调节物质就可以生长，这种现象称为“驯化”现象。

8玻璃化苗：当植物材料不断地进行离体繁殖时，有些试管苗的嫩茎、叶片往往会呈半透明水迹状，这种现象通常称为玻璃化，这种出现玻璃化现象的试管苗成为玻璃化苗。

9愈伤组织：在人工培养基上由外植体组织的增生细胞产生的一团无定形的疏松排列的薄壁细胞，类似分生组织。

10脱分化：已分化好的细胞在人工诱导条件下，恢复分生能力，回复到分生组织状态的过程。

11再分化：脱分化后具有分生能力的细胞再经过与原来相同的分化过程，重新形成各类组织和器官的过程。

12人工种子：人工种子是指植物离体培养中产生的胚状体或不定芽包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中所形成的能发芽出苗的颗粒体。

13褐化现象：褐化是指在接种后，外植体表面开始褐化，释放出褐色物质，有时甚至会使整个培养基褐化的现象。

14器官培养：以植物器官作为外植体进行离体培养，包括离体的根、茎、叶、花器和果实的培养。

15原生质体培养：用酶及物理方法除去细胞壁，对所得到的原生质体进行培养的方法。

16基本培养基：人工配制的仅能满足外植体最基本生长需要的培养基，如MS、MT、White培养基。

17完全培养基：在基本培养基的基础上添加各种各样的附加物（激素、有机物质等），具备可使其最大限度地生长和繁殖的条件，含有满足各种营养要求的培养基二、填空、选择、判断、简答、问答1植物组织培养的定义、特点、发展简史（1）定义：把无菌操作分离植物体的一部分，接种到培养基上，在人工控制的条件下（包括营养、激素、温度、光照、湿度）进行培养，使其产生完整植株的过程。

第一章测试1.有利于启动植物细胞分化和形成胚性细胞团。

A:2，4-DB:细胞分裂素C:赤霉素D: 脱落酸答案:A2.下列关于在组织培养的发展史上事件描述不正确的是（）。

A:1960年Cooking报道了诱导鸡红细胞与酵母细胞融合培养。

B:1958年Steward报道了胡萝卜细胞悬浮培养C:1978年Melchers报道了马铃薯和番茄的融合培养D:1962年Murashinge和Skoog在烟草的培养中筛选出N6培养基。

答案:D3.植物细胞怎样才能表现出全能性（）。

A:导入其他植物细胞的基因B:将成熟筛管细胞核移植到去核的卵细胞内C:脱离母体后给予适宜营养和外界条件D:给予适宜的营养和外界条件答案:C4.优良的愈伤组织具备以下哪几个特点（）。

A:高度的胚性或再分化能力B:旺盛的自我增殖能力C:经过长期继代保存而不丧失胚性D:不容易散碎答案:ABC5.植物激素中的生长素和细胞分裂素，是启动细胞脱分化、分裂和再分化的关键性激素。

A:对B:错答案:A6.一般单子叶植物比双子叶植物及裸子植物容易脱分化。

A:错B:对答案:A7.胚胎培养的目的是克服败育和三倍体育种。

A:错B:对答案:B8.实现细胞全能性的条件是组织或器官解离和给予所需的营养物质。

A:错B:对答案:B9.支撑植物组织培养作为一门技术的两个重要模式是培养基模式和激素调控模式。

A:对B:错答案:A10.将植物体的任何部分都可以进行离体培养，使之发育形成完整植物体。

A:错B:对答案:B第二章测试1.调整培养基pH所用到的仪器是（）。

A:离心机B:酸度计C:显微镜D:电子天平答案:B2.电线着火时，下列措施正确的是（）。

A:可用泡沫灭火器灭火B:先灭火再切断电源C:用沙或二氧化碳灭火器灭火D:可用水灭火答案:C3.下列哪个不是培养室的设备（）。

A:培养箱B:紫外光源C:高压灭菌锅D:培养架答案:C4.清洗玻璃器皿用的洗涤剂主要有（）。

A:肥皂B:铬酸洗涤液C:洗衣粉D:洗洁精答案:ABCD5.下列关于培养室的说法正确的是（）。

植物组织培养复习题一、填空题：1.植物脱病毒一般采用茎尖培养脱毒和热处理两种方法。

2.最典型的培养基是1962年发表的的一种适合于烟草愈伤组织快速生长的改良培养基，该培养基后来被称为MS培养基，现已广泛用于植物组织培养。

3.胚状体发育顺次经过原胚期、球形胚期、心形胚期、鱼雷形胚期和子叶期。

4.具有防止褐变作用的维生素是Vc。

5.植物组织培养按培养对象分为愈伤组织培养、器官培养、胚培养、细胞和原生质体培养等几种类型。

6.在通过微茎尖培养脱毒时，外植体的大小应以成苗率和脱毒率综合确定，一般以0.3～0.5mm、带1～3个叶原基为好。

7.对植物组织培养的培养基灭菌时，一般情况采用的条件是121温度，保持时间是15～20分钟。

8.在幼胚培养基中，蔗糖的主要作用是维持渗透压、提供碳源和能源和防止幼胚早熟萌发。

9.植物组织培养中，微量元素铁的用量较大，由于在较高pH下，易形成Fe(OH)3沉淀，难以被吸收，所以多用硫酸亚铁（FeSO4·7H20）和乙二胺四乙酸（Na2-EDTA）形成的螯合物，并且单独配制。

10.种质保存大致分为原地保存和异地保寸两种方式。

11.外植体选择的原则是：选择优良的种质、选择健壮的植株、选择最适时期、选取适宜的大小。

12.细胞悬浮培养的方法有成批培养和连续培养等。

13.植物原生质体分离的方法有酶解法和机械法。

14.植板率是指已形成细胞团的单细胞与接种总细胞数的百分数。

15.花粉分离的方法有挤压法、磁搅拌法、漂浮释放法。

16.植物组织培养发展可分为三个时期：萌芽阶段、奠基阶段、快速发展和应用阶段。

17.一个年产4-20万株苗的商业性组织培养实验室，其总面积不应少于60平方米，可划分为准备室、缓冲室、无菌操作室和培养室。

18.盐酸硫胺素VB1是脱羧酶辅酶，吡哆醛VB6是转氨酶辅酶。

19.愈伤组织形成大致经历三个时期，即：诱导期、分裂期、分化期。

20.茎尖培养根据培养目的和取材大小可分为茎尖分生组织组织培养和普通茎尖培养两种类型。