不同附主铁皮石斛鲜品多糖含量的差异

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• 72 •药学研究• Journal of Pharmaceutical Research 2017 Vol.36,No.2不同附主铁皮石斛鲜品多糖含量的差异张宁南1,徐兰芳2,吕莎2,徐大平1,杨曾奖1,黄松2,3(1.中国林业科学院热带林业研究所,广东广州510520;2.广州中医药大学,广东广州510006;3.东莞广州中医药大学中医药数理工程研究院,广东东莞523808)

摘要:目的以花盆基质栽培、水泥桩、竹片及4种不同活树附生栽培的铁皮石斛为试验材料,揭示不同附主 对铁皮石斛质量的影响。方法采用苯酚硫酸法测定其多糖含量。结果附生在檀香、降香黄檀和马占相思上的 铁皮石斛多糖含量较高,达5.0%以上,花盆次之为4.16%,附生在水泥桩和竹片上的含量相等,均为3.10%,龙眼树 最低仅2.87%。结论檀香、降香黄檀和马占相思等珍贵或速生阔叶树作附主材料能较大提高铁皮石斛的质量。

关键词:铁皮石斛;附主材料;多糖;鮮品中图分类号:S759.8文献标识码:A文章编号:2095-5375(2017)02-0072-003 doi:10.13506/j.cnki .jpr.2017.02.003

The main differences of polysaccharide content in freshepiphytic Dendrobium officinaleattached to different materialsZHANG Ningnan1 ,XU Lanfang2 ,LYU Sha2 ,XU Daping1 ,YANG Zengjiang1 ,HUANG Song2'3

(l.Research Institute of Tropical Forestry ,CAF, Guangzhou 510520, China\2.Guangzhou University of Chinese Medicine'Guangzhou 510006'China-,3.Dongguan Institution for Mathematics and Theoretical

Engineering Research'Guangzhou University of Chinese Medicine'Dongguan 523808'China)

Abstract: Objective To determine the suitable support materials for growing Dendrobium officinal' substrate cultivation poles' concrete poles and bamboo strips and trunks of four different trees were used as experimental materials. Methods Polysaccharide content "was determined by a phenol-sulfuric acid method. Results It showed polysaccharide content in the Dendrobium plants attached on the trunks of Santalum album' Dalbergia odorifera and Acacia mangium trunks all exceeded 5.0%'followed by that grwon in flower pots at 4.16%.The Dendrobium plants attached to concrete poles and bamboo strips had equal polysaccharide content of 3.10% while the lowest content of 2.87% was obtained for the Dendrobi­um plants fixed to Dimocarpus longan. Conclusion These results demonstrated that using the trunks of S. album' D. odorifera and A. mangium as epiphytic support materials could greatly increase the polysaccharide content in this Dendrobium officinale species.Key words :

Dendrobium officinale; Support material; Polysaccharide; Fresh product

铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura etMig。)是名贵中药材,其主要有效成分为石斛类多 糖和生物碱等[1],大量药理实验显示,铁皮石斛有 增强免疫力、抗氧化、抗疲劳、降血糖、护肝等作 用[2-7]。铁皮石斛对生存环境条件要求苛刻,自然 环境下种子萌发率极低;加上无序采挖和生态环境 的破坏,造成其野生资源几近灭绝。为加速资源恢复和发展,20世纪70年代我国开始了铁皮石斛繁 殖技术研究。近年来很多中药材主要来自于集约化 的人工大面积种植,如利用人工建造的大棚种植铁 皮石斛等[8]。大棚式的集约栽培解决了中药材短 缺的问题,但栽培过度致密的生长环境导致病虫害 频繁发生,势必通过大量的农药和化学物质控制,导 致农药和有毒残留超标问题的发生。

基金项目:国家林业公益性行业专项(No.201304402-4);广东省林业科技创新专项(No.2012KJCX015-03);中央级公益性科研院所专项(No. RITFYWZX201301)

作者简介:张宁南,男,博士研究生,副研究员,研究方向:热带珍贵树种培育,E-mail:iiiiigiiaiizhaiig@126.com药学研究• Journal of Pharmaceutical Research 2017 Vol.36,No.2• 73 •

人工林尤其珍贵树种人工林,因投入大且经营 周期长,需要解决其中短期经济效益以弥补经费不 足难以持续经营的难题。实践证明,复合经营是解 决此问题之有效途径[9]。种植珍贵树种的同时,利 用林下种植南药植物,发展林下经济可增加林分经 营的短期收入。经过探索,已开发出许多栽培模式 如设施基质栽培、盆栽及活树附生等。为探索成本 低、效果好的栽培模式,本文选取花盆栽培、水泥粧 和竹片栽培和4种活树附生栽培的试验,以石斛类 多糖为指标进行测定,以期选出成本低,栽培效果好 的经营模式。1试验材料与样品制备

1.1样品来源由阳江市百盛园实业有限公司提 供,经广州中医药大学黄松研究员鉴定为兰科石斛 属的铁皮石斛Kimurn et Mi-。1.2主要试剂无水葡萄糖(批号:110833-9501,中国药品生物制品检定所),其纯度>98%;苯酚、硫 酸、乙醇等均为分析纯。1.3试验样品1.3.1对照品溶液称取在105 °C干燥至恒重的 葡萄糖对照品约10 mg,精密称定,置100 mL量瓶 中,加适量水使溶解并用水稀释至刻度,摇匀,即得。 1.3.2供试品溶液取铁皮石斛样品适量加水200 mL,加热回流2 h,滤过,残渣加热水洗涤,合并滤液 及洗涤液,定容至250 mL,摇匀,精密量取6.0 mL, 置15 mL离心管中,精密加入无水乙醇30 mL,摇 勻,冷藏1 h,取出离心(4 000 rpm)20 min,弃去上清 液,沉淀加80%乙醇洗涤2次,每次16 mL,离心,弃 去上清液,沉淀加热水溶解,转移至25 mL量瓶中, 放冷,加水至刻度,摇匀即得。2试验方法

2.1测定波长的确定取葡萄糖对照品溶液按苯 酚-硫酸法处理后,在200〜800 nm波长范围内扫 描,可见在325 nm和488 nm有吸收峰。参见《中国 药典》2010年版规定,测定波长为488 nm,本次光谱 扫描结果与《中国药典》规定基本相符,故选择488 nm为本试验测定波长,结果见图1。2.2线性关系试验精密量取对照品溶液0.1、 0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL,分别置 10 mL 具塞试管中, 各加水补至1.0 mL,精密加入5%苯酚溶液1 mL (临用配制),摇匀,再精密加硫酸5 mL摇匀,置沸 水浴中加热20 min,取出,置冰浴中冷却5 min,以相 应试剂为空白,照紫外-可见分光光度法(附录V

坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲线,得到回归方程 F =72.051 0Z+0.026 8^ = 0.999 2,说明多糖在 1.43 〜14.3 mg • mL-1,吸光度与浓度呈良好线性关系。2.3精密度试验精密吸取显色后的试品溶液,在 488 nm测定吸光度,重复测定6次,结果KSD = 0.44%(几=6)。2.4稳定性试验精密吸取显色后的试品溶液,分 别于 0、30、60、90、120、150、180 min 在 488 nm 测定 吸光度,结果及= 2.82%( n = 6),结果表明显色后 的试品溶液在180 min内稳定,但其吸光度不断下 降,因此试品溶液显色后要在180 min以内测定完 毕,以保证测定结果的准确性。2.5重复性试验取同一药材(附生在降香黄檀上 的铁皮石斛),按“1.3.2”方法平行制备试品溶液6 份,按“2.2”项下条件进行显色,在488 nm测定吸光 度,结果兄SD = 2.24%(n = 6)。2.6加样回收率精密称取已知多糖含量的样品 (附生在降香黄檀上的铁皮石斛)6份,加入相同量 的无水葡萄糖,按“1.3.2”的方法,制备试品溶液,依 法测定,结果见表1,平均回收率为98.81%,及SD = 2.64%。表1加样回收率试验结果序号取样量多糖量加入量测出量回收率平均回RSD

/g/mg/mg/mg/%收率/%/%

10.996 352.325 240.241 784.156 496.5020.859 045.057 141.547685.298 796.86

30.855 044.938 0

43.761 889.621 7102.11

98.812.6440.874 645.920 842.152487.569 898.81

50.801 142.079 141.653782.363 596.7160.858 445.116742.258 688.174 4101.89