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柑橘酒具有酒精度低、酒质温和爽口的特点，基本保留柑橘原有风味和功效，并且具有防衰抗老、润肺、补肝、安神等保健作用[1]。
柑橘酒中存在多种功能性成分，如类胡萝卜素、黄酮类化合物和类柠檬苦素等。
柑橘中的类黄酮是一种具有C6-C3-C6苯并呲喃酮结构的多酚类化合物，具有抗肿瘤、抗病菌、抗炎、降低毛细血管脆性、抗过敏、抑制血小板凝集等多方面的药理作用[2-3]。
因此，柑橘酒中的黄酮含量可作为评价其营养保健价值的一个重要指标。
类柠檬苦素是一类高度氧化的四环三萜类化合物，常以苷元和配糖体存在，具有抗氧化性、抗肿瘤、抗心血管疾病、抗炎镇痛、抑菌抗病毒等多种生物活性[4-6]。
据报道，现已分离出类柠檬苦素苷元36种，类柠檬苦素糖苷17种，其中柠檬苦素（limonin）和诺米林（nomilin）最具代表性[7]。
果汁中的-环内酯能在酸性条件下被柠檬苦素-环内脂水解酶催化形成柠檬苦素，产生果汁加工“后苦”的现象[8]，尤其在冰冻、机械损害这类非正常条件下的水果组织破坏，可增加果肉酸度和提高酶活，促使柠檬苦素生成量增加[9]。
在柑橘果汁加工中，通常认为柠檬苦素和诺米林为代表的苦味物质阈值为6mg/L，超过该质量浓度则太苦而不宜用于饮料加工[10-11]。
由此可知，柠檬苦素类似物虽具有多种生物活性，但它们带来的苦涩味严重影响了柑橘酒的口感，制约着柑橘酒的发展[12-13]。
因此，了解柠檬苦素类似物在柑橘酒酿造过程中的变化规律显得尤为重要。
目前，有关柑橘酒的研究主要针对于产品品质和风味的提高，而其发酵过程中功能性成分的变化方面尚未见报道。
基于此，本研究以实验室自酿的柑橘酒为试验材料，柑橘酒发酵过程中总黄酮、柠檬苦素和诺米林含量变化曾竟蓝1，马胤鹏1，秦丹1，2，曾璐3*，陈长松4（1.湖南农业大学食品科学技术学院，湖南长沙410128；2.湖南农业大学食品科学与生物技术湖南省重点实验室，湖南长沙410128；3.湖南农业大学湖南省作物种质创新与资源利用重点实验室，湖南长沙410128；4.天下果业开发有限公司，湖南湘西自治州416000）摘要：以实验室酿制的柑橘酒为试验材料，采用分光光度法对柑橘酒发酵过程中的总黄酮含量进行检测；利用高效液相色谱（HPLC）法对柑橘酒发酵过程中苦味物质（柠檬苦素和诺米林）的含量进行检测。
存档编号赣南师范学院学士学位论文从脐橙渣中提取类柠檬苦素的工艺研究教学学院化学与生命科学学院届别 2011专业生物科学学号 070907029姓名孙禹晗指导老师吴笑臣完成日期 2010-5-13目录摘要 (2)关键词 (2)Abstract (2)Keywords (3)1前言 (4)1.1 研究的背景与意义 (4)1.2 脐橙中的柠檬苦素类化合物 (4)1.3柠檬苦素类似物提取方法研究进展 (5)1.4选题意义、目的和研究内容 (6)2实验部分 (7)2.1材料与试剂 (7)2.2实验方法 (7)3结果分析 (10)3.1Plackett-Burman实验 (10)3.2最陡爬坡实验 (12)3.3响应面优化实验 (12)3.4柠檬苦素类似物提取最佳条件的确定与验证 (19)4结论 (19)参考文献 (20)致谢 (22)从脐橙渣中提取类柠檬苦素的工艺研究摘要：以赣南脐橙渣为原料，以乙醇为提取溶剂。
利用Design Expert软件、采用Plackett-Burman(PB)实验设计和响应面分析法，对脐橙渣中柠檬苦素类似物的提取条件进行了优化研究，选取乙醇浓度、超声时间、浸提温度为响应变量，以柠檬苦素类似物得率为响应值，利用Box-Behnken试验设计方案和响应面分析法，建立了柠檬苦素类似物得率与响应变量的回归方程，并确定最佳提取条件为乙醇浓度82%、超声时间18min、浸提温度60℃此条件下柠檬苦素类似物得率为1.630‰，与预测值1.651‰较为一致。
关键词：脐橙渣柠檬苦素类化合物提取响应面分析法优化Study on Extraction of Limonoids from NavelOrange ResidueAbstract:Navel orange residue was used to extract limonoids with ethanol.The extraction parameters including ethanol concentration , time of ultrasonic and temperature of lixiviate were optimized using Box-Behnken design and response surface methodology based on Plackett - Burman (PB) design of experiment for achieving maximum yield of limonoids. A regression equation reflecting the relationship between the yield of limonoids and the above extraction parameters was set up.The optimal extraction parameters were found as follows: ethanol concentration82%; time ofultrasonic 18min; temperature of lixiviate 60℃.Under the optimized conditions, the actual yield of limonoids was1.630‰, close to the predicted value of 1.651‰.Keywords: navel orangeresidue; limonoids; extraction; response surface methodology; optimization1前言1.1研究的背景与意义脐橙是赣南地方经济发展的重要支柱产业，也是果农的主要经济来源，得到了国家、省、市各级政府的大力支持。
浙江柑橘2018年第35卷第4期DOI DOI：：1010..1390613906/ki.zjgj./ki.zjgj.10091009--05840584..20182018..0404..820瓯柑籽油中柠檬苦素类化合物的脱除工艺研究曹雪丹方修贵王天玉赵凯（浙江省柑橘研究所台州318026）瓯柑(Citrus suavisima Hort.ex Tanaka)Tanaka)是芸香科柑橘属的一个栽培变种是芸香科柑橘属的一个栽培变种[1]，因其主要分布在我省浙南瓯江沿岸而得名其主要分布在我省浙南瓯江沿岸而得名，，在民国前史料《浪迹叙谈浪迹叙谈》》中既有“永嘉之柑永嘉之柑，，俗谓之瓯柑……瓯柑……””的记述[2]。
瓯柑虽然存在皮厚而粗瓯柑虽然存在皮厚而粗、、蒂高多籽蒂高多籽、、可食率低等缺点可食率低等缺点，，但是其果汁但是其果汁、、果皮中都含有黄酮等具有抗氧化能力的生物活性成分，一般认为瓯柑果实中主要的苦味成分是新橙皮苷和柚皮苷[3]。
除此之外除此之外，，瓯柑籽中也含有大量活性物质如柠檬苦素类化合物等有大量活性物质如柠檬苦素类化合物等。
但是目前国内相关研究主要关注于瓯柑果肉目前国内相关研究主要关注于瓯柑果肉、、果汁和果皮的黄酮类化合物分离和果皮的黄酮类化合物分离、、鉴定及其生物活性评价方面[4,5]，针对瓯柑籽的研究较少针对瓯柑籽的研究较少，，仅高文霞等[6]从瓯柑籽中成功分离出柠檬苦素（C 26H 30O 8），杨小凤等[7]检测出瓯柑籽中含有的微量元素明显高于果肉量元素明显高于果肉、、果汁果汁，，如Ca Ca约为约为33倍，Fe 约为8倍，Mg 约为2.4倍，Mn 约为1.8倍，Zn 约为5.3倍。
说明瓯柑籽作为瓯柑果肉说明瓯柑籽作为瓯柑果肉、、果汁加工产业的废弃物仍具有重要的综合利用价值工产业的废弃物仍具有重要的综合利用价值，，亟待开发亟待开发。
柑橘籽中通常含有丰富的油脂（3838..8686%%～4242..5959%%）[8]，它们不同于用柑橘皮所制取的精油所制取的精油，，其主要成分是脂肪酸其主要成分是脂肪酸，，包括油酸、亚油酸及亚麻酸等大量不饱和脂肪酸亚油酸及亚麻酸等大量不饱和脂肪酸，，可考虑供人食用考虑供人食用。
即对ＬＤＬ的氧化修饰具有抑制作用，此作用对防治心脑血管疾病具有尤其重要的意义。
参考文献：［１］朱向明， 赵振东， 黄志力， 等． 茶多酚预防鹌鹑高脂血症的实验研究［Ｊ］． 中国中西医结合杂志， １９９６， １６（９）： ５４９－５５１．［２］贾之慎． 儿茶素对生物自由基的清除作用［Ｊ］． 中国茶叶， １９８４（３）： １７－１９．［３］ＨＡＶＥＬ Ｒ Ｊ， ＥＤＥＲ Ｈ Ａ， ＢＲＡＧＤＯＮ Ｊ Ｈ． Ｔｈｅ ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｈｅｍｉ－ｃａｌ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ ｏｆ ｕｌｔｒａｃｅｎｔｒｉｆｕｇａｌｌｙ ｓｅｐａｒａｔｅｄ ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎｓ ｉｎ ｈｕｍａｎｓｅｒｕｍ［Ｊ］． Ｊ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ， １９５５， ５１： １４８６－１４９４．［４］ＭＡＲＫＷＥＬＬ Ｍ Ａ， ＨＡＡＳ Ｓ Ｍ， ＢＩＥＢＥＲ Ｌ Ｌ， ｅｔ ａｌ． Ａ ｍｏｄｉｆｉｃａ－ｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ Ｌｏｗｒｙ ｐｒｏｃｅｄｕｒｅ ｔｏ ｓｉｍｐｌｉｆｙ ｐｒｏｔｅｉｎ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｉｎｍｅｍｂｒａｎｅ ａｎｄ ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ ｓａｍｐｌｅｓ［Ｊ］． Ａｎａｌ Ｂｉｏｃｈｅｍ， １９７８， ８７：２０６－２１０．［５］ＥＳＴＥＲＢＡＵＥＲ Ｈ， ＳＴＲＩＥＧＬ Ｇ， ＰＵＨＬ Ｈ， ｅｔ ａｌ． Ｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓ ｍｏｎｉｔｏｒ－ｉｎｇ ｏｆ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｏｘｉｄａｔｉｏｎ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｌｏｗ－ｄｅｎｓｉｔｙ ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎｓ［Ｊ］． ＦｒｅｅＲａｄｉｃａｌ Ｒｅｓ Ｃｏｍｍｕｎ， １９８９（６）： ６７－７５．［６］ＢＯＮＮＥＦＯＮＴ－ＲＯＵＳＳＥＬＯＴ Ｄ， ＴＨＥＲＯＮＤ Ｐ， ＢＥＡＵＤＥＵＸ ＪＬ， ｅｔ ａｌ． Ｈｉｇｈ ｄｅｎｓｉｔｙ ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ （ＨＤＬ） ａｎｄ ｔｈｅ ｏｘｉｄａｔｉｖｅ ｈｙ－ｐｏｔｈｅｓｉｓ ｏｆ ａｔｈｅｒｏｓｃｋｅｒｏｓｉｓ［Ｊ］． Ｃｌｉｎ Ｃｈｅｍ Ｌａｂ Ｍｅｄ， １９９９， ３７：９３９－９４８．［７］ＬＹＯＮＳ Ｔ Ｊ． Ｇｌｙｃａｔｉｏｎ ａｎｄ ｏｘｉｄａｔｉｏｎ： ａ ｒｏｌｅ ｉｎ ｔｈｅ ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ ｏｆａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ［Ｊ］． Ａｍ Ｊ Ｃａｒｄｉｏｌ， １９９３， ７１： ２６－３１．［８］ＬＯＵ Ｍ， ＫＡＮＮＡＲ Ｋ， ＷＡＨＬＱＶＩＳＴ Ｍ Ｌ， ｅｔ ａｌ． Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆＬＤＬ ｏｘｉｄａｔｉｏｎ ｂｙ ｇｒｅｅｎ ｔｅａ ｅｘｔｒａｃｔ［Ｊ］． Ｌａｎｃｅｔ， １９９７， ３４９： ３６０－３６１．收稿日期：２００６－０９－１４基金项目：广东省自然科学基金项目（０４００２０７２）作者简介：温靖（１９７８－），女，实习研究员，硕士，主要从事农产品加工及其比较医学研究。
高效液相色谱法测定柑橘皮中柠檬苦素徐旭耀;黄秋儿;黄惠玲【摘要】HPLC was applied to the determination of limonin in citrus peels. The sample was ultrasonically extracted with （φ） 70% ethanol solution at 50℃ for 75 min. Sinochrom ODS-BP （250 min×4. 6 mm, 10 μm） column was used as stationary phase, a mixture of acetonitrile and water mixed in the ratio of 45 to 55 （by volume） was used as mobile phase; UV detection at 210 nm was used in the determination. Linear relationship between values of peak area and mass concentration of limonin was obtained in the range of 12. 0-384 mg·L^-1 Values of average recovery and RSD （n=5） found were 99.9% and 1.8% respectively.%提出了高效液相色谱法测定柑橘皮中柠檬苦素含量的方法。
样品用体积分数为70％乙醇溶液于50C超声提取75min。
以Sinochrom ODS-BP（250min×4．6mm，10μm）为分离柱，以乙腈-水（45＋55）溶液作为流动相，用紫外检测器在波长210nm处进行测定。
柠檬苦素的质量浓度在12．0-384mg·L^-1范围内与其峰面积呈线性关系，方法的平均回收率为99．9％，相对标准偏差（n=5）为1．8％。
柑橘酒发酵过程中总黄酮、柠檬苦素和诺米林含量变化曾竟蓝;马胤鹏;秦丹;曾璐;陈长松【摘要】Using citrus wine brewed in laboratory as experimental material, the content of total flavonoids in citrus wine during fermentation was determined by spectrophotometry. The content of bitterness compounds limonin and nomilin in citrus wine fermentation were determined by HPLC. The results showed that the total flavonoids content in the citrus juice was 1 747 mg/kg during the brewing process. After the main fermentation, it decreased to 566.3 mg/kg, and then its change tended to be stable. The content of limonin in the citrus juice was 2.21 mg/L, and the nomilin was not detected. During the fermentation period, the contents of limonin and nomilin increased to 15.65 mg/L and 3.37 mg/L, respectively. After the main fermentation, the contents decreased to 10.87 mg/L and 2.20 mg/L, respectively, and then the changes tended to be stable.%以实验室酿制的柑橘酒为试验材料,采用分光光度法对柑橘酒发酵过程中的总黄酮含量进行检测;利用高效液相色谱(HPLC)法对柑橘酒发酵过程中苦味物质(柠檬苦素和诺米林)的含量进行检测.结果表明,柑橘酒在酿造过程中,柑橘原汁中总黄酮含量为1 747 mg/kg,主发酵结束后下降到566.3 mg/kg,之后变化趋于稳定.柑橘原汁中柠檬苦素含量为2.21 mg/L,诺米林未检出;在起酵时期,柠檬苦素和诺米林含量分别上升为15.65 mg/L和3.37 mg/L,主发酵结束后分别降至10.87 mg/L和2.20 mg/L,之后变化趋于稳定.【期刊名称】《中国酿造》【年(卷),期】2019(038)004【总页数】4页(P80-83)【关键词】柑橘酒;总黄酮;苦味物质;柠檬苦素;诺米林;含量变化【作者】曾竟蓝;马胤鹏;秦丹;曾璐;陈长松【作者单位】湖南农业大学食品科学技术学院,湖南长沙 410128;湖南农业大学食品科学技术学院,湖南长沙 410128;湖南农业大学食品科学技术学院,湖南长沙410128;湖南农业大学食品科学与生物技术湖南省重点实验室,湖南长沙 410128;湖南农业大学湖南省作物种质创新与资源利用重点实验室,湖南长沙 410128;天下果业开发有限公司,湖南湘西自治州 416000【正文语种】中文【中图分类】TS262.7柑橘酒具有酒精度低、酒质温和爽口的特点，基本保留柑橘原有风味和功效，并且具有防衰抗老、润肺、补肝、安神等保健作用[1]。
浙江柑橘2022年第39卷第1期DOI DOI：：1010..1390613906/ki.zjgj./ki.zjgj.10091009--05840584..20222022..0101..001柑橘果实中酚酸类化合物研究进展媚徐程楠王天玉姚周麟张伟清冯先橘林*（浙江省柑橘研究所台州318026）收稿日期收稿日期：：20222022--0101--27通讯作者通讯作者：：林媚林媚，，女，高级实验师高级实验师，，从事农产品品质营养与安全研究从事农产品品质营养与安全研究,E-mail:hylm ,E-mail:hylm8471200284712002@ .com。
柑橘是世界上种植最多的水果之一，广泛地分布于热带、亚热带和温带区域，主要包括甜橙类、宽皮柑橘类、葡萄柚和柚类、柠檬类、杂柑类和金柑类等[1]。
我国是世界柑橘生产大国，2019年柑橘种植面积为2.61×106hm 2，产量高达4.58×107万t [2]。
我国柑橘类水果消费以鲜食为主，部分以罐头、果汁形式进行加工。
柑橘果实中富含对人体健康有益的活性成分和抗氧化物质如维生素、矿物质、酚类、萜类等[3]。
酚酸类化合物是其中普遍存在的次生代谢产物，是酚类物质其中一类，其在植物体内主要由糖酵解及磷酸戊糖途径生成的中间体经莽草酸途径和苯丙烷类代谢途径合成[4,5]。
大量研究表明酚酸类化合物对人体具有抗氧化、抗癌、抗菌等功效。
因此，明确柑橘果实中酚酸类化合物的组成、分布、生物活性以及提取检测方法，以期实现柑橘果实的针对性开发利用，提高其附加值，同时，为合理利用柑橘资源、丰富柑橘营养与保健研究提供参考依据。
1柑橘果实中酚酸类化合物组成与分布酚酸类化合物[6]是指同一苯环上含有若干酚羟基的一类化合物，其在柑橘组织中主要以有机酸、糖类以及各种酯类形式存在，极少部分为游离态。
按其碳骨架结构主要可分为苯甲酸型（C 6-C 1型）和肉桂酸型（或苯乙烯型，C 6-C 3），但也有如绿原酸和香草醛等少部分酚酸结构不属于上述两类衍生物[7]。
㊀Ｇｕｉｈａｉａ㊀Ｍａｙ２０２０ꎬ４０(５):７４４－７５０ｈｔｔｐ://ｗｗｗ.ｇｕｉｈａｉａ－ｊｏｕｒｎａｌ.ｃｏｍＤＯＩ:１０.１１９３１/ｇｕｉｈａｉａ.ｇｘｚｗ２０１９０１０２０涂勋良ꎬ张利ꎬ秦帆ꎬ等.ＨＰＬＣ法测定不同产地和品种柠檬果皮中柠檬苦素和诺米林含量[Ｊ].广西植物ꎬ２０２０ꎬ４０(５):７４４－７５０.ＴＵＸＬꎬＺＨＡＮＧＬꎬＱＩＮＦꎬｅｔａｌ.ＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｌｉｍｏｍｉｎａｎｄｎｏｍｉｌｉｎｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｖａｒｉｅｔｉｅｓｏｆｌｅｍｏｎｐｅｅｌｆｒｏｍｄｉｆｆｅｒｅｎｔａｒｅａｓｂｙＨＰＬＣ[Ｊ].Ｇｕｉｈａｉａꎬ２０２０ꎬ４０(５):７４４－７５０.ＨＰＬＣ法测定不同产地和品种柠檬果皮中柠檬苦素和诺米林含量涂勋良１ꎬ张㊀利３ꎬ秦㊀帆１ꎬ万㊀斌１ꎬ吕秀兰２∗(１.四川省农业科学院园艺研究所ꎬ成都６１００６６ꎻ２.四川农业大学园艺学院ꎬ成都６１１１３０ꎻ３.四川农业大学理学院ꎬ四川雅安６２５０１４)摘㊀要:该研究建立了同时测定檬苦素和诺米林含量的高效液相色谱法ꎬ并采用该方法对８种不同柠檬样品中柠檬苦素和诺米林含量进行了测定ꎮ色谱条件如下:安捷伦ＥｃｌｉｐｓｅＸＤＢ￣Ｃ１８(２５０ｍｍˑ４.６ｍｍꎬ５μｍ)色谱柱ꎬ流动相为０.１％磷酸水溶液(Ａ)－乙腈(Ｂ)ꎬ梯度洗脱ꎬ流速为１.０ｍＬ ｍｉｎ￣１ꎬ柱温为３０ħꎬ波长为２１０ｎｍꎮ结果表明:３个产地尤力克果皮中柠檬苦素含量依次为云南瑞丽(ＥＵＲ＿Ｄ)㊁四川安岳(ＥＵＲ＿Ｃ)和广东河源(ＥＵＲ＿Ｙ)ꎬ诺米林含量依次为ＥＵＲ＿Ｄ㊁ＥＵＲ＿Ｃ和ＥＵＲ＿Ｙꎻ不同品种柠檬果皮中柠檬苦素含量依次为北京柠檬(Ｍ＿ＮＭ)㊁粗柠檬(Ｒ＿ＮＭ)㊁无核柠檬(Ｓ＿ＮＭ)㊁热那亚(ＲＮＹ)㊁里斯本(ＬＳＢ)ꎬ诺米林含量依次为Ｓ＿ＮＭ㊁Ｒ＿ＮＭ㊁ＬＳＢ㊁ＲＮＹ和Ｍ＿ＮＭꎮ综上结果表明ꎬ不同产地和品种柠檬果皮中柠檬苦素和诺米林含量均存在不同程度差异ꎬ该ＨＰＬＣ法可为不同产地和不同品种柠檬果实质量鉴别㊁资源评价及深度开发提供理论依据ꎮ关键词:柠檬ꎬ柠檬苦素ꎬ诺米林ꎬ高效液相色谱法(ＨＰＬＣ)中图分类号:Ｑ９４６㊀㊀文献标识码:Ａ文章编号:１０００￣３１４２(２０２０)０５￣０７４４￣０７开放科学(资源服务)标识码(ＯＳＩＤ):ＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｌｉｍｏｍｉｎａｎｄｎｏｍｉｌｉｎｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｖａｒｉｅｔｉｅｓｏｆｌｅｍｏｎｐｅｅｌｆｒｏｍｄｉｆｆｅｒｅｎｔａｒｅａｓｂｙＨＰＬＣＴＵＸｕｎｌｉａｎｇ１ꎬＺＨＡＮＧＬｉ３ꎬＱＩＮＦａｎ１ꎬＷＡＮＢｉｎ１ꎬＬÜＸｉｕｌａｎ２∗(１.ＨｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒｅＲｅｓｅａｒｃｈＩｎｓｔｉｔｕｔｅꎬＳｉｃｈｕａｎＡｃａｄｅｍｙｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓꎬＣｈｅｎｇｄｕ６１００６６ꎬＣｈｉｎａꎻ２.ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＨｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒｅꎬＳｉｃｈｕａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬＣｈｅｎｇｄｕ６１１１３０ꎬＣｈｉｎａꎻ３.ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＳｃｉｅｎｃｅｓꎬＳｉｃｈｕａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬＹａ ａｎ６２５０１４ꎬＳｉｃｈｕａｎꎬＣｈｉｎａ)Ａｂｓｔｒａｃｔ:Ｔｈｉｓｓｔｕｄｙｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄａｎｈｉｇｈ￣ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ(ＨＰＬＣ)ｍｅｔｈｏｄｆｏｒｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｄｅｔｅｒｍｉ￣ｎａｔｉｏｎｏｆｌｉｍｏｎｉｎａｎｄｎｏｍｉｌｉｎｉｎＣｉｔｒｕｓｌｉｍｏｎꎬａｎｄｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆｌｉｍｏｎｉｎａｎｄｎｏｍｉｌｉｎｉｎｅｉｇｈｔｄｉｆｆｅｒｅｎｔｌｅｍｏｎｓａｍｐｌｅｓ收稿日期:２０１９－０３－０４基金项目:国家现代农业产业技术体系四川创新团队专项项目ꎻ四川省科技支撑计划项目(２０１３ＦＺ００３６)[ＳｕｐｐｏｒｔｅｄｂｙＧｒａｎｔｓｆｒｏｍＳｐｅｃｉａｌＦｕｎｄｏｆｔｈｅＮａｔｉｏｎａｌＭｏｄｅｒｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＩｎｄｕｓｔｒｙＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙＳｙｓｔｅｍｏｆＳｉｃｈｕａｎＩｎｎｏｖａｔｉｏｎＴｅａｍꎻＫｅｙＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙＲｅｓｅａｒｃｈａｎｄＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔＰｒｏｇｒａｍｏｆｔｈｅＳｃｉｅｎｃｅ＆ＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＳｉｃｈｕａｎＰｒｏｖｉｎｃｅ(２０１３ＦＺ００３６)]ꎮ作者简介:涂勋良(１９８７－)ꎬ男ꎬ重庆綦江人ꎬ博士ꎬ助理研究员ꎬ研究方向为观赏植物繁育与栽培ꎬ(Ｅ￣ｍａｉｌ)ｔｘｌ０１０３＠１６３.ｃｏｍꎮ∗通信作者:吕秀兰ꎬ博士ꎬ教授ꎬ研究方向为果树学ꎬ(Ｅ￣ｍａｉｌ)ｘｌｌｖｊｊ＠１６３.ｃｏｍꎮｗａｓｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙｔｈｉｓｍｅｔｈｏｄ.ＴｈｅｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃｃｏｎｄｉｔｉｏｎｗａｓｐｅｒｆｏｒｍｅｄｏｎａｎＡｇｉｌｅｎｔＥｃｌｉｐｓｅＸＤＢ￣Ｃ１８(２５０ｍｍˑ４.６ｍｍꎬ５μｍ)ｃｏｌｕｍｎ.Ｔｈｅｍｏｂｉｌｅｐｈａｓｅｃｏｎｓｉｓｔｅｄｏｆ０.１％ａｑｕｅｏｕｓｐｈｏｓｐｈｏｒｉｃａｃｉｄ(Ａ)ａｎｄａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ(Ｂ)ｗａｓｉｎｖｏｋｅｄａｓｇｒａｄｉｅｎｔｅｌｕｔｉｏｎｗｉｔｈｔｈｅｆｌｏｗｒａｔｅａｔ１.０ｍＬ ｍｉｎ￣１.Ｔｈｅｃｏｌｕｍｎｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｗａｓｓｅｔａｔ３０ħａｎｄｔｈｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｗａｖｅｌｅｎｇｔｈｗａｓｓｅｔａｔ２１０ｎｍ.Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｗｅｒｅａｓｆｏｌｌｏｗｓ:ＴｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｌｉｍｏｎｉｎｉｎｔｈｅｌｅｍｏｎｐｅｅｌｏｆｔｈｒｅｅｐｒｏｄｕｃｉｎｇａｒｅａｓｗａｓＲｕｉｌｉꎬＹｕｎｎａｎ(ＥＵＲ＿Ｄ)ꎬＡｎｙｕｅꎬＳｉｃｈｕａｎ(ＥＵＲ＿Ｃ)ａｎｄＨｅｙｕａｎꎬＧｕａｎｇｄｏｎｇ(ＥＵＲ＿Ｙ)ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙꎬｗｈｉｌｅｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｎｏｍｉｌｉｎｗａｓＥＵＲ＿ＤꎬＥＵＲ＿ＣａｎｄＥＵＲ＿ＹꎻＴｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｌｉｍｏｎｉｎｉｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｖａｒｉｅ￣ｔｉｅｓｏｆｌｅｍｏｎｐｅｅｌｗａｓＭｅｙｅｒｌｅｍｏｎ(Ｍ＿ＮＭ)ꎬＲｏｕｇｈｌｅｍｏｎ(Ｒ＿ＮＭ)ꎬＳｅｅｄｌｅｓｓｌｅｍｏｎ(Ｓ＿ＮＭ)ꎬＧｅｎｏａ(ＲＮＹ)ａｎｄＬｉｓｂｏｎ(ＬＳＢ)ꎬｗｈｉｌｅｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｎｏｍｉｌｉｎｗｅｒｅＳ＿ＮＭꎬＲ＿ＮＭꎬＬＳＢꎬＲＮＹａｎｄＭ＿ＮＭ.Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｄｉｓｐｌａｙｅｄｔｈａｔｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｌｉｍｏｎｉｎａｎｄｎｏｍｉｌｉｎｉｎｌｅｍｏｎｐｅｅｌｆｒｏｍｄｉｆｆｅｒｅｎｔａｒｅａｓａｎｄｖａｒｉｅｔｉｅｓｗａｓｄｉｆｆｅｒｅｎｔ.ＴｈｅＨＰＬＣｍｅｔｈｏｄｃａｎｐｒｏ￣ｖｉｄｅａｔｈｅｏｒｅｔｉｃａｌｂａｓｉｓｆｏｒｔｈｅｑｕａｌｉｔｙｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎꎬｒｅｓｏｕｒｃｅｅｖａｌｕａｔｉｏｎａｎｄｉｎ￣ｄｅｐｔｈｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆｌｅｍｏｎｆｒｕｉｔｓｆｒｏｍｄｉｆｆｅｒｅｎｔａｒｅａｓａｎｄｖａｒｉｅｔｉｅｓ.Ｋｅｙｗｏｒｄｓ:Ｃｉｔｒｕｓｌｉｍｏｎꎬｌｉｍｏｍｉｎꎬｎｏｍｉｌｉｎꎬｈｉｇｈ￣ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ(ＨＰＬＣ)㊀㊀柠檬苦素类似物(ｌｉｍｏｎｏｉｄｓ)是存在于芸香科(Ｒｕｔａｃｅａｅ)和楝科(Ｍｅｌｉａｃｅａｅ)植物中的一类具有呋喃环并且高度氧化的三萜类次生代谢产物(Ｍａｉｅｒｅｔａｌ.ꎬ１９７７)ꎮ在柑橘属中主要有苷元和糖苷两大类(潘利华等ꎬ２００７)ꎬ它们是引起柑橘属果汁泛苦的主要原因之一ꎮ迄今已从柑橘属中分离出３８种类似物和２１种配糖体(Ｍａｎｎｅｒｓꎬ２００７)ꎬ常见的有柠檬苦素(ｌｉｍｏｍｉｎ)㊁诺米林(ｎｏ￣ｍｉｌｉｎ)㊁奥巴叩酮(ｏｂａｃｕｎｏｎｅ)㊁诺米林酸(ｎｏｍｉｌｉｎｉｃａｃｉｄ)和脱乙酰诺米林(ｄｅａｃｅｔｙｌｎｏｍｉｌｉｎ)等ꎮ诺米林在植物茎韧皮部合成并转移至其他组织(Ｍｏｒｉｇｕｃｈｉｅｔａｌ.ꎬ２００３)ꎬ在酶的作用下ꎬ通过不同生物合成途径合成柠檬苦素㊁醋酸柠檬苦酯㊁宜昌根辛和卡拉敏等类似物(蔡护华和桥永文男ꎬ１９９６)ꎮ柠檬苦素类似物具有抗癌(Ｔａｎａｋａｅｔａｌ.ꎬ２０００ꎻＭｉｌｌｅｒｅｔａｌ.ꎬ２００４)㊁抗氧化(Ｓｕｎｅｔａｌ.ꎬ２００５ꎻＺｏｕｅｔａｌ.ꎬ２０１６)㊁抑菌(罗水忠等ꎬ２００６ꎻ李彪等ꎬ２０１２ｂ)㊁抗炎镇痛(温靖等ꎬ２００７)㊁除虫杀虫(李彪等ꎬ２０１２ａ)㊁抑制ＨＩＶ病毒复制(Ｂａｔｔｉｎｅｌｌｉｅｔａｌ.ꎬ２００３ꎻＹｕｅｔａｌ.ꎬ２０１５)㊁降低胆固醇等多种生物活性ꎮ目前ꎬ柠檬苦素类似物主要测定方法有分光光度法(田庆国和丁霄霖ꎬ１９９９)㊁放射免疫测定法(Ｍｃｉｎｔｏｓｈꎬ２０００)㊁薄层色谱法(Ｏｈｔａｅｔａｌ.ꎬ１９９３)㊁毛细管胶束电色谱方法(Ｒａｙｎｏｒｅｔａｌ.ꎬ２０１５)㊁快速色谱法(ｆｌａｓｈｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ)(Ｒａｍａｎｅｔａｌ.ꎬ２００５)㊁高效液相色谱法(Ｂｉｌａｌｅｔａｌ.ꎬ２０１３ꎻＢｒｅｋｓａｅｔａｌ.ꎬ２０１５ꎻＭａｎｎｅｒｓｅｔａｌ.ꎬ２０１５)㊁ＬＣ/ＭＳ(Ｍａｎｎｅｒｓｅｔａｌ.ꎬ２００４ꎻＷｏｏｅｔａｌ.ꎬ２００６)㊁ＬＣ￣ＴｏＦ/ＭＳ(Ｙｕｅｔａｌ.ꎬ１９９３)ꎮＢｉｌａｌｅｔａｌ.(２０１３)采用ＨＰＬＣ法测得血橙中柠檬苦素为４７９.７７μｇ ｍＬ￣１ꎬ粗柠檬中诺米林为５４.２３μｇ ｍＬ￣１ꎬ甜橙 ｓｕｃｃａｒｉ 中诺米林仅为０.３７μｇ ｍＬ￣１ꎮ孟鹏和郑宝东(２０１２)采用ＵＰＬＣ法测得柠檬苦素含量依次为琯溪蜜柚>脐橙>尤溪金柑>柑橘ꎬ诺米林含量依次为脐橙>琯溪蜜柚>柑橘>尤溪金柑ꎮ彭腾等(２０１２)采用ＲＰ￣ＨＰＬＣ法测得柠檬苦素含量依次为沙糖桔(金堂)>蜜橘(广元)>蜜橘(龙泉)>椪柑(新津)>椪柑(金堂)>广柑(青白江)>蜜橘(蒲江)ꎮ为了提高柠檬副产物的高效利用率ꎬ促进柠檬产业蓬勃发展ꎬ本研究选取了３个不同产地和５个不同品种柠檬为供试材料ꎬ采用ＨＰＬＣ法对柠檬苦素和诺米林含量进行定性和定量分析ꎬ发现不同柠檬果品间的含量差异ꎬ为柠檬品种鉴定㊁资源开发利用提供理论依据ꎬ从而提高柠檬果品的综合利用价值ꎮ１㊀材料与方法１.１材料、仪器和试剂样品为相同成熟度的成熟柠檬果实ꎬ柠檬样品信息详见表１ꎮ将果肉与果皮分离ꎬ果皮样品经冷冻干燥ң粉碎后备用ꎮＢＴ１２４Ｓ电子天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司)ꎻＦＷ￣８０高速万能粉碎机(天津泰斯特仪器有限公司)ꎻＬＣ￣２０ＡＢ型高效液相色谱仪(日本５４７５期涂勋良等:ＨＰＬＣ法测定不同产地和品种柠檬果皮中柠檬苦素和诺米林含量表１㊀柠檬样品信息表Ｔａｂｌｅ１㊀Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｏｆｌｅｍｏｎｓａｍｐｌｅｓ产地Ｐｒｏｄｕｃｉｎｇａｒｅａ品种Ｖａｒｉｅｔｙ编码Ｃｏｄｅ采收期Ｈａｒｖｅｓｔｔｉｍｅ四川安岳ＡｎｙｕｅꎬＳｉｃｈｕａｎ尤力克ＥｕｒｅｋａＥＵＲ＿Ｃ２０１５－１０－２２云南瑞丽ＲｕｉｌｉꎬＹｕｎｎａｎ尤力克ＥｕｒｅｋａＥＵＲ＿Ｄ２０１５－０８－３１广东河源ＨｅｙｕａｎꎬＧｕａｎｇｄｏｎｇ尤力克ＥｕｒｅｋａＥＵＲ＿Ｙ２０１５－０９－１８广东连南ＬｉａｎｎａｎꎬＧｕａｎｇｄｏｎｇ无核柠檬ＳｅｅｄｌｅｓｓｌｅｍｏｎＳ＿ＮＭ２０１５－０９－２１四川安岳ＡｎｙｕｅꎬＳｉｃｈｕａｎ热那亚ＧｅｎｏａＲＮＹ２０１５－１０－２２重庆北碚ＢｅｉｂｅｉꎬＣｈｏｎｇｑｉｎｇ里斯本ＬｉｓｂｏｎＬＳＢ２０１５－１０－３０重庆北碚ＢｅｉｂｅｉꎬＣｈｏｎｇｑｉｎｇ北京柠檬ＭｅｙｅｒｌｅｍｏｎＭ＿ＮＭ２０１５－１０－３０重庆北碚ＢｅｉｂｅｉꎬＣｈｏｎｇｑｉｎｇ粗柠檬ＲｏｕｇｈｌｅｍｏｎＲ＿ＮＭ２０１５－１０－３０图１㊀柠檬苦素和诺米林的化学结构式Ｆｉｇ.１㊀ＣｈｅｍｉｃａｌｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓｏｆｌｉｍｏｎｉｎａｎｄｎｏｍｉｌｉｎＳｈｉｍａｄｚｕ公司)ꎻＬＧＪ￣１２冷冻干燥机(北京松源华兴科技发展有限公司)ꎻＳＢ￣６００ＤＴＤ超声波清洗机(宁波新芝生物科技股份有限公司)ꎻＵＰＨ￣Ⅱ￣２０Ｔ超纯水机(四川沃特尔水处理设备有限公司)ꎻ索氏提取器ꎮ对照品柠檬苦素(批号ＭＵＳＴ￣１３０２１６０６)㊁诺米林(批号ＭＵＳＴ￣１２０７２１０１)购自成都曼思特生物科技有限公司ꎬ化学结构式如图１所示ꎬ各标准品纯度均满足定量检测需求ꎻ乙腈(色谱纯ꎬ美国Ｆｉｓｈｅｒ公司)ꎻ磷酸㊁丙酮和石油醚(６０~９０ħ)(均为分析纯)购自成都科龙化工试剂厂ꎻ自制超纯水ꎮ１.２方法１.２.１色谱条件㊀色谱柱:ＡｇｉｌｅｎｔＥｃｌｉｐｓｅＸＤＢ￣Ｃ１８(２５０ｍｍˑ４.６ｍｍꎬ５μｍ)ꎻ流动相:０.１％磷酸水溶液(Ａ)－乙腈(Ｂ)ꎻ梯度洗脱:１０％~５０％Ｂ(０~１０ｍｉｎ)ꎬ５０％~６０％Ｂ(１０~２０ｍｉｎ)ꎬ６０％~９０％Ｂ(２０~２５ｍｉｎ)ꎬ９０％~１０％Ｂ(２５~３５ｍｉｎꎬ１０％Ｂ(３５~４０ｍｉｎ)ꎻ流速:１.０ｍＬ ｍｉｎ￣１ꎻ检测波长:２１０ｎｍꎻ柱温:３０ħꎻ进样体积:１０μＬꎮ１.２.２对照品溶液制备㊀精确称量对照品柠檬苦素２.８３ｍｇ㊁诺米林２.５４ｍｇꎬ分别用８０％丙酮溶解到１０ｍＬ容量瓶中ꎬ超声使其充分溶解ꎬ定容ꎬ配成２８３ｍｇ Ｌ￣１柠檬苦素和２５４ｍｇ Ｌ￣１对照品储备液ꎮ吸取适量对照品储备液采用梯度稀释法配制了系列质量浓度的混合标准溶液ꎮ１.２.３供试品溶液制备㊀用定量滤纸包好冷冻干燥后的果皮样品ꎬ用石油醚(６０~９０ħ)在索氏提取器内彻底脱脂２４ｈꎬ将脱脂样品置于干燥器中ꎬ待石油醚(６０~９０ħ)完全挥发ꎬ样品干燥后取出备用ꎮ称取０.５ｇ上述粉末ꎬ置具塞锥形瓶中ꎬ加入８０％丙酮溶液１０ｍＬꎬ称重ꎬ超声(８０Ｗꎬ４０ｋＨｚꎬ５０ħ)１.５ｈꎬ冷却后用８０％丙酮补重ꎮ０.２２μｍ微孔滤膜过滤ꎬ收集滤液备用ꎮ２㊀结果与分析２.１ＨＰＬＣ色谱结果混合对照品与ＥＵＲ＿Ｃ供试品溶液的ＨＰＬＣ色谱图详见图２ꎮ在１.２.１条件下ꎬ柠檬苦素和诺米林分离度均大于１.８ꎬ分离效果极佳ꎬ目标峰对称性好ꎮ２.２标准曲线的建立在１.２.１条件下ꎬ平行测定各质量浓度按１.２.２制备的混合对照品溶液３次ꎬ取其峰面积平均值ꎬ以对照品质量浓度为Ｘ坐标ꎬ平均峰面积为Ｙ坐标ꎬ绘制标准曲线ꎮ结果显示柠檬苦素和诺米林在一定质量浓度范围内与相应峰面积之间线性关系良好(表２)ꎮ２.３方法学考察２.３.１精密度试验㊀在１.２.１条件下ꎬ重复测定６次按１.２.２制备的混合对照品储备液ꎬ结果显示柠檬苦素和诺米林平均峰面积的ＲＳＤ分别为０.８８％㊁６４７广㊀西㊀植㊀物４０卷１.柠檬苦素ꎻ２.诺米林ꎮ１.Ｌｉｍｏｎｉｎꎻ２.Ｎｏｍｉｌｉｎ.图２㊀对照品混标(Ａ)与ＥＵＲ＿Ｃ(Ｂ)的ＨＰＬＣ色谱图Ｆｉｇ.２㊀ＨＰＬＣｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｓｏｆｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ(Ａ)ａｎｄｌｉｍｏｎｏｉｄｓｅｘｔｒａｃｔｅｄｆｒｏｍＥＵＲ＿Ｃ(Ｂ)表２㊀柠檬苦素和诺米林的线性回归关系、检出限和定量限Ｔａｂｌｅ２㊀ＬｉｎｅａｒｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐꎬＬＯＤａｎｄＬＯＱｏｆｌｉｍｏｎｉｎａｎｄｎｏｍｉｌｉｎ柠檬苦素类似物Ｌｉｍｏｎｏｉｄｓ回归方程Ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎｅｑｕａｔｉｏｎ相关系数Ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔ(Ｒ２)线性范围Ｌｉｎｅａｒｒａｎｇｅ(μｇ ｍＬ￣１)检出限ＬＯＤ(μｇ ｍＬ￣１)定量限ＬＯＱ(μｇ ｍＬ￣１)柠檬苦素ＬｉｍｏｎｉｎＹ＝４２６３０.９８Ｘ－４８３９.５０５１.０００００.０３~５.６６０.０７０.２４诺米林ＮｏｍｉｌｉｎＹ＝５７１５３.９２Ｘ－４９０３.００５１.０００００.０３~５.０８０.０９０.２９０.９５％ꎬ说明仪器精密度良好ꎮ２.３.２稳定性试验㊀在１.２.１条件下ꎬ取按１.２.２制备的ＥＵＲ＿Ｃ供试溶液ꎬ分别于０㊁２㊁４㊁６㊁８㊁１２和２４ｈ后进行ＨＰＬＣ分析ꎬ结果显示柠檬苦素和诺米林平均峰面积的ＲＳＤ分别为０.７６％㊁１.０２％ꎬ说明供试品溶液在２４ｈ内稳定ꎮ２.３.３重现性试验㊀在１.２.１条件下ꎬ重复测定６次按１.２.２制备的ＥＵＲ＿Ｃ供试溶液ꎬ结果显示柠檬苦素和诺米林平均峰面积的ＲＳＤ分别为０.６３％㊁０.７８％ꎬ说明该方法重现性较好ꎮ２.３.４加标回收率试验㊀在１.２.１条件下ꎬ在ＥＵＲ＿Ｃ供试溶液中加入定量的对照品储备液ꎬ重复测定６次ꎬ由表３可以看出ꎬ柠檬苦素和诺米林的加标回收率分别为１００.３６％㊁９９.７９％ꎻＲＳＤ分别为１.０７％㊁１.１２％ꎬ说明该方法准确度较高ꎮ２.４不同产地柠檬果皮中柠檬苦素和诺米林含量测定结果在１.２.１条件下ꎬ参照１.２.２制备供试品溶液ꎬ对不同产地尤力克柠檬果皮中柠檬苦素和诺米林进行定量和差异性分析ꎬ结果见表４ꎮ由表４可知ꎬ不同产地尤力克果皮中柠檬苦素和诺米林含量存在不同程度的差异ꎮ云南瑞丽和四川安岳两地的尤力克柠檬果皮中柠檬苦素的含量没有差异ꎬ含量分别为０.４２１和０.４１８ｍｇ ｇ￣１ꎬ广东河源的尤力克柠檬果皮中柠檬苦素的含量为０.３３７ｍｇ ｇ￣１ꎬ与云南瑞丽和四川安岳两地的含量呈显著差异ꎻ不同产地对尤力克柠檬果皮中诺米林含量的影响较大ꎬ其中云南瑞丽的含量最高ꎬ为０.２６９ｍｇ ｇ￣１ꎬ其余两地依次是四川安岳(０.２１９ｍｇ ｇ￣１)和广东河源(０.０７０ｍｇ ｇ￣１)ꎬ云南瑞丽与四川安岳两地的含量呈显著差异ꎬ且均与广东河源产地的含量呈极显著差异ꎮ２.５不同品种柠檬果皮中柠檬苦素和诺米林含量测定结果在１.２.１条件下ꎬ参照１.２.２制备样品溶液ꎬ对不同品种柠檬果皮中柠檬苦素和诺米林进行定量７４７５期涂勋良等:ＨＰＬＣ法测定不同产地和品种柠檬果皮中柠檬苦素和诺米林含量表３㊀柠檬苦素和诺米林加标回收率试验结果Ｔａｂｌｅ３㊀Ｒｅｃｏｖｅｒｙｒａｔｅｓｔｅｓｔｓｆｏｒｌｉｍｏｎｉｎａｎｄｎｏｍｉｌｉｎ柠檬苦素类似物Ｌｉｍｏｎｏｉｄｓ样品含量Ｃｏｎｔｅｎｔｏｆｓａｍｐｌｅ(ｍｇ ｇ￣１)添加量Ａｄｄｅｄｃｏｎｔｅｎｔ(ｍｇ ｇ￣１)测得量Ｆｏｕｎｄｅｄｃｏｎｔｅｎｔ(ｍｇ ｇ￣１)回收率Ｒｅｃｏｖｅｒｙｒａｔｅ(％)ＲＳＤ(％)柠檬苦素Ｌｉｍｏｎｉｎ０.２７８０.２８３０.５６３１００.３６１.０７诺米林Ｎｏｍｉｌｉｎ０.２１９０.２５４０.４７２９９.７９１.１２表４㊀不同产地尤力克柠檬果皮中柠檬苦素和诺米林含量Ｔａｂｌｅ４㊀Ｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆｌｉｍｏｎｉｎａｎｄｎｏｍｉｌｉｎｏｆｌｅｍｏｎｐｅｅｌｆｒｏｍｄｉｆｆｅｒｅｎｔａｒｅａｓ产地Ａｒｅａ编码Ｃｏｄｅ含量Ｃｏｎｔｅｎｔ(ｍｇ ｇ￣１)柠檬苦素Ｌｉｍｏｎｉｎ诺米林Ｎｏｍｉｌｉｎ四川安岳ＡｎｙｕｅꎬＳｉｃｈｕａｎＥＵＲ＿Ｃ０.４１８ʃ０.０４Ａａ０.２１９ʃ０.０２Ａｂ云南瑞丽ＲｕｉｌｉꎬＹｕｎｎａｎＥＵＲ＿Ｄ０.４２１ʃ０.０４Ａａ０.２６９ʃ０.０３Ａａ广东河源ＨｅｙｕａｎꎬＧｕａｎｇｄｏｎｇＥＵＲ＿Ｙ０.３３７ʃ０.０３Ａｂ０.０７０ʃ０.０１Ｂｃ㊀注:同一列数值后大写字母表示差异极显著(Ｐ<０.０１)ꎻ同一列数值后小写字母表示差异显著(Ｐ<０.０５)ꎮ下同ꎮ㊀Ｎｏｔｅ:Ｃａｐｉｔａｌｌｅｔｔｅｒｓｉｎｔｈｅｓａｍｅｃｏｌｕｍｎｍｅａｎｅｘｔｒｅｍｅｌｙｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ(Ｐ<０.０１)ꎻＬｏｗｅｒｃａｓｅｌｅｔｔｅｒｓｉｎｔｈｅｓａｍｅｃｏｌｕｍｎｍｅａｎｓｉｇ￣ｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ(Ｐ<０.０５).Ｔｈｅｓａｍｅｂｅｌｏｗ.和差异性分析ꎬ结果见表５ꎮ由表５可知ꎬ不同品种柠檬果皮中柠檬苦素和诺米林含量差异显著ꎮ北京柠檬中柠檬苦素的含量与其他４个品种存在极显著差异ꎬ达到０.５８９ｍｇ ｇ￣１ꎬ其余依次为粗柠檬(０.４６４ｍｇ ｇ￣１)㊁无核柠檬(０.３９３ｍｇ ｇ￣１)㊁热那亚(０.３３４ｍｇ ｇ￣１)㊁里斯本(０.３２６ｍｇ ｇ￣１)ꎬ且粗柠檬与无核柠檬㊁热那亚㊁里斯本也存在极显著差异ꎬ而后三者之间无差异ꎮ里斯本㊁热那亚和北京柠檬的诺米林含量存在显著差异ꎬ含量分别为０.２０３㊁０.１３０㊁０.０５０ｍｇ ｇ￣１ꎬ而无核柠檬和粗柠檬与前三者含量之间的差异极显著ꎬ且两者之间差异极显著ꎬ含量分别为０.６８８㊁０.３８６ｍｇ ｇ￣１ꎮ３㊀讨论与结论高效液相色谱法(ＨＰＬＣ)是测定柠檬苦素类似物最常用的方法之一ꎮＭａｎｎｅｒｓｅｔａｌ.(２０１５)建立了同时测定不同柑橘种子中１７种柠檬苦素类似物含量的高效液相色谱法ꎻ刘亮等(２００７)建立了同时测定柑橘中柠檬苦素和诺米林含量的高效液相色谱法ꎮ本研究建立了同时测定不同柠檬果品中柠檬苦素和诺米林含量的高效液相色谱法ꎬ采用常规的乙腈－磷酸缓冲体系可在２０ｍｉｎ内完成柠檬苦素和诺米林的同时测定ꎮ该方法操作简单ꎬ具有较好的精密度㊁重现性㊁稳定性及高回收率等特点ꎬ可作为测定柠檬果品中柠檬苦素和诺米林含量的常规分析方法ꎬ为柠檬果实质量评价提供理论依据和手段ꎮ柠檬苦素类似物研究主要集中在不同类型柑橘比较ꎬ少有不同产地与不同品种间的比较ꎮ本研究对供试样品中柠檬苦素和诺米林的检测结果表明成熟柠檬果品中柠檬苦素含量明显高于诺米林含量ꎬ无核柠檬(柠檬苦素:０.３９３ｍｇ ｇ￣１ꎬ诺米林:０.６８８ｍｇ ｇ￣１)除外ꎮ这是因为诺米林是柠檬苦素类似物生物合成途径的原始前体ꎬ柠檬苦素生物合成途径是柑橘类水果中柠檬苦素类似物的主要代谢途径(蔡护华和桥永文男ꎬ１９９６)ꎬ诺米林含量的降低意味着柠檬苦素含量的升高ꎬ形成 此消彼长 的趋势ꎬ该研究结果与此相同ꎮ８４７广㊀西㊀植㊀物４０卷表５ 不同品种柠檬果皮中柠檬苦素和诺米林含量Ｔａｂｌｅ５㊀Ｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆｌｉｍｏｎｉｎａｎｄｎｏｍｉｌｉｎｏｆｌｅｍｏｎｐｅｅｌｓｉｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｖａｒｉｅｔｉｅｓ品种Ｖａｒｉｅｔｙ编码Ｃｏｄｅ含量Ｃｏｎｔｅｎｔ(ｍｇ ｇ￣１)柠檬苦素Ｌｉｍｏｎｉｎ诺米林Ｎｏｍｉｌｉｎ里斯本ＬｉｓｂｏｎＬＳＢ０.３２６ʃ０.０３Ｃｃ０.２０３ʃ０.０２Ｃｃ北京柠檬ＭｅｙｅｒｌｅｍｏｎＭ＿ＮＭ０.５８９ʃ０.０６Ａａ０.０５０ʃ０.０１Ｄｅ粗柠檬ＲｏｕｇｈｌｅｍｏｎＲ＿ＮＭ０.４６４ʃ０.０４Ｂｂ０.３８６ʃ０.０４Ｂｂ无核柠檬ＳｅｅｄｌｅｓｓｌｅｍｏｎＳ＿ＮＭ０.３９３ʃ０.０４ＢＣｂｃ０.６８８ʃ０.０７Ａａ热那亚ＧｅｎｏａＲＮＹ０.３３４ʃ０.０３Ｃｃ０.１３０ʃ０.０１ＣＤｄ㊀㊀从本研究结果可以看出ꎬ３个产地的尤力克果品中柠檬苦素和诺米林含量存在显著差异ꎬ这与３个产地的气候条件㊁水分和土壤等条件息息相关ꎮ柠檬树体生长和果实发育的适宜年均气温为１７~１９ħꎬ四川安岳的年均气温为１８.５ħꎬ年均降水量为９２４.９ｍｍꎬ正是柠檬生长的最佳适宜条件ꎬ安岳年产柠檬鲜果７０万ｔꎬ占全国总产量的８０％ꎬ排全世界第８位ꎬ综合上述因素ꎬ安岳被称为 中国柠檬之乡 ꎮ从５个不同品种柠檬的比较实验结果可得出柠檬苦素含量依次为北京柠檬>粗柠檬>无核柠檬>热那亚>里斯本ꎬ诺米林含量依次为无核柠檬>粗柠檬>里斯本>热那亚>北京柠檬ꎮ８个柠檬果品中柠檬苦素和诺米林的含量差异显著ꎬ其累积规律与不同产地的生态气候条件㊁不同品种㊁不同部位㊁不同生长发育阶段㊁不同采收期及采后储运等诸多因素密不可分ꎮ随着柠檬多元化的功能性产品开发ꎬ有待进一步对柠檬种植资源进行综合的品质评价ꎬ建立完善的质量评价体系ꎮ依据不同品种活性成分含量的差异ꎬ培育并栽培推广专用型的柠檬品种ꎬ具有广泛的市场前景ꎮ参考文献:ＢＡＴＴＩＮＥＬＬＩＬꎬＭＥＮＧＯＮＩＦꎬＬＩＣＨＴＮＥＲＭꎬｅｔａｌ.ꎬ２００３.ＥｆｆｅｃｔｏｆｌｉｍｏｎｉｎａｎｄｎｏｍｉｌｉｎｏｎＨＩＶ￣１ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｎｉｎｆｅｃｔｅｄｈｕｍａｎｍｏｎｏｎｕｃｌｅａｒｃｅｌｌｓ[Ｊ].ＰｌａｎｔＭｅｄꎬ６９(１０):９１０－９１３.ＢＩＬＡＬＨꎬＡＫＲＡＭＷꎬＨＡＳＳＡＮＳＡꎬｅｔａｌ.ꎬ２０１３.Ｄｅｔｅｒｍｉｎａ￣ｔｉｏｎｏｆｌｉｍｏｎｉｎａｎｄｎｏｍｉｌｉｎｃｏｎｔｅｎｔｓｉｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔＣｉｔｒｕｓｃｕｌｔｉ￣ｖａｒｓｕｓｉｎｇｈｉｇｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ[Ｊ].ＰａｋＪＳｃｉＩｎｄＲｅｓꎬ５６(１):３６－４０.ＢＲＥＫＳＡＡＰꎬＫＩＮＧＤＥꎬＶＩＬＣＨＥＳＡＭꎬ２０１５.ＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＣｉｔｒｕｓｌｉｍｏｎｏｉｄｇｌｕｃｏｓｉｄｅｓｂｙｈｉｇｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｃｏｕｐｌｅｄｔｏｐｏｓｔ￣ｃｏｌｕｍｎｒｅａｃｔｉｏｎｗｉｔｈＥｈｒｌｉｃｈ ｓｒｅａｇｅｎｔ[Ｊ].Ｂｅｖｅｒａｇｅｓꎬ１(２):７０－８１.ＣＡＩＨＨꎬＨＡＳＨＩＮＡＧＡＦꎬ１９９６.ＴｈｅｐｒｏｓｐｒｅｃｔａｎｄｃｕｒｒｅｎｔｓｔｕｄｉｅｓｏｎｔｈｅｌｉｍｏｎｏｉｄｓｉｎＣｉｔｒｕｓ[Ｊ].ＡｃｔａＢｏｔＳｉｎꎬ３８(４):３２８－３３６.[蔡护华ꎬ桥永文男ꎬ１９９６.柑桔果实中柠檬苦素类化合物的研究现状与展望[Ｊ].植物学报(英文版)ꎬ３８(４):３２８－３３６.]ＬＩＢꎬＳＨＩＲꎬＸＩＯＮＧＺꎬｅｔａｌ.ꎬ２０１２ａ.Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎａｎｄｉｎｓｅｃｔｉ￣ｃｉｄａｌａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆｌｉｍｏｎｉｎｉｎｐｅｅｌｏｆＣｉｔｒｕｓｍａｘｉｍａ[Ｊ].ＣｈｉｎＡｇｒｉｃＳｃｉＢｕｌｌꎬ２８(１):２８４－２８８.[李彪ꎬ施蕊ꎬ熊智ꎬ等ꎬ２０１２ａ.柚皮柠檬苦素的提取及其杀虫活性研究[Ｊ].中国农学通报ꎬ２８(１):２８４－２８８.]ＬＩＢꎬＳＨＩＲꎬＸＩＯＮＧＺꎬｅｔａｌ.ꎬ２０１２ｂ.ＳｔｕｄｙｏｎｅｘｔｒａｃｔｉｏｎａｎｄａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆｌｉｍｏｎｉｎｉｎｐｅｅｌｏｆＣｉｔｒｕｓｍａｘｉｍａ[Ｊ].ＳｃｉＴｅｃｈｎｏｌＦｏｏｄＩｎｄꎬ３３(５):１９８－２００.[李彪ꎬ施蕊ꎬ熊智ꎬ等ꎬ２０１２ｂ.柚子皮中柠檬苦素提取工艺及其抑菌活性研究[Ｊ].食品工业科技ꎬ３３(５):１９８－２００.]ＬＩＵＬꎬＱＩＸＹꎬＤＯＮＧＸＹꎬｅｔａｌ.ꎬ２００７.Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｌｉ￣ｍｏｎｏｉｄｓｉｎＣｉｔｒｕｓｂｙｈｉｇｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ[Ｊ].ＦｏｏｄＦｅｒｍｅｎｔＩｎｄꎬ３３(４):１３０－１３３.[刘亮ꎬ戚向阳ꎬ董绪燕ꎬ等ꎬ２００７.高效液相色谱法测定柑橘中的柠檬苦素类似物[Ｊ].食品与发酵工业ꎬ３３(４):１３０－１３３.]ＬＵＯＳＺꎬＰＡＮＬＨꎬＨＥＪＪꎬｅｔａｌ.ꎬ２００６.Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎａｎｄａｎｔｉ￣ｂｉｏｔｉｃｓｏｆｌｉｍｏｎｉｎｉｎＣｉｔｒｕｓｓｅｅｄｓ[Ｊ].ＡｃａｄＰｅｒｉｏｄＦａｒｍＰｒｏｄＰｒｏｃꎬ(１０):１０５－１０７.[罗水忠ꎬ潘利华ꎬ何建军ꎬ等ꎬ２００６.柑橘籽中柠檬苦素的提取与抑菌性研究[Ｊ].农产品加工 学刊ꎬ(１０):１０５－１０７.]ＭＡＩＥＲＶＰꎬＢＥＮＮＥＴＴＲＤꎬＨＡＳＥＧＡＷＡＳꎬ１９７７.Ｌｉｍｏｎｉｎａｎｄｏｔｈｅｒｌｉｍｏｎｏｉｄｓ[Ｊ].ＣｉｔｒｕｓＳｃｉＴｅｃｈｎｏｌꎬ１:３５５－３９６.ＭＡＮＮＥＲＳＧＤꎬ２００７.Ｃｉｔｒｕｓｌｉｍｏｎｏｉｄｓ:Ａｎａｌｙｓｉｓꎬｂｉｏａｃｔｉｖｉｔｙꎬａｎｄｂｉｏｍｅｄｉｃａｌｐｒｏｓｐｅｃｔｓ[Ｊ].ＪＡｇｒｉｃＦｏｏｄＣｈｅｍꎬ５５(２１):８２８５－８２９４.ＭＡＮＮＥＲＳＧＤꎬＢＲＥＫＳＡＡＰＩꎬ２００４.ＩｄｅｎｔｉｆｙｉｎｇＣｉｔｒｕｓｌｉｍｏｎｏｉｄａｇｌｙｃｏｎｅｓｂｙＨＰＬＣ￣ＥＩ/ＭＳａｎｄＨＰＬＣ￣ＡＰＣＩ/ＭＳ９４７５期涂勋良等:ＨＰＬＣ法测定不同产地和品种柠檬果皮中柠檬苦素和诺米林含量ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ[Ｊ].ＰｈｙｔｏｃｈｅｍＡｎａｌꎬ１５(６):３７２－３８１.ＭＡＮＮＥＲＳＧＳꎬ２０１５.Ａｎｅｗｎｏｒｍａｌｐｈａｓｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏ￣ｇｒａｐｈｉｃｍｅｔｈｏｄｆｏｒｔｈｅａｎａｌｙｓｉｓｏｆｌｉｍｏｎｏｉｄｓｉｎＣｉｔｒｕｓ[Ｊ].ＰｈｙｔｏｃｈｅｍＡｎａｌꎬ１０(２):７６－８１.ＭＣＩＮＴＯＳＨＣＡꎬ２０００.Ｑｕａｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｌｉｍｏｎｉｎａｎｄｌｉｍｏｎｏａｔｅａ￣ｒｉｎｇｍｏｎｏｌａｃｔｏｎｅｄｕｒｉｎｇｇｒｏｗｔｈａｎｄｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆＣｉｔｒｕｓｆｒｕｉｔａｎｄｖｅｇｅｔａｔｉｖｅｔｉｓｓｕｅｓｂｙｒａｄｉｏｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ[Ｊ].ＡＣＳＳｙｍｐＳｅｒꎬ７５８:７３－９５.ＭＥＮＧＰꎬＺＨＥＮＧＢＤꎬ２０１３.Ｓｔｕｄｙｏｎｒａｐｉｄｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｄｅ￣ｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｌｉｍｏｎｉｎａｎｄｎｏｍｉｌｉｎｉｎｋｕｍｑｕａｔｕｓｉｎｇｕｌｔｒａ￣ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ[Ｊ].ＪＣｈｉｎＩｎｓｔＦｏｏｄＳｃｉＴｅｃｈｎｏｌꎬ１３(２):１７７－１８１.[孟鹏ꎬ郑宝东ꎬ２０１３.超高效液相色谱法快速并同时检测金柑中柠檬苦素和诺米林[Ｊ].中国食品学报ꎬ１３(２):１７７－１８１.]ＭＩＬＬＥＲＥＧꎬＰＯＲＴＥＲＪＬꎬＢＩＮＮＩＥＷＨꎬｅｔａｌ.ꎬ２００４.ＦｕｒｔｈｅｒｓｔｕｄｉｅｓｏｎｔｈｅａｎｔｉｃａｎｃｅｒａｃｔｉｖｉｔｙｏｆＣｉｔｒｕｓｌｉｍｏｎｏｉｄｓ[Ｊ].ＪＡｇｒｉｃＦｏｏｄＣｈｅｍꎬ５２(１５):４９０８－４９１２.ＭＯＲＩＧＵＣＨＩＴꎬＫＩＴＡＭꎬＨＡＳＥＧＡＷＡＳꎬｅｔａｌ.ꎬ２００３.Ｍｏ￣ｌｅｃｕｌａｒａｐｐｒｏａｃｈｔｏＣｉｔｒｕｓｆｌａｖｏｎｏｉｄａｎｄｌｉｍｏｎｏｉｄｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ[Ｊ].ＪＦｏｏｄＡｇｒｉｃＥｎｖｉｒｏｎꎬ１(１):２２－２５.ＯＨＴＡＨꎬＣＨＩＨＦꎬＢＥＲＨＯＷＭꎬｅｔａｌ.ꎬ１９９３.Ｔｈｉｎ￣ｌａｙｅｒａｎｄｈｉｇｈ￣ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃａｎａｌｙｓｅｓｏｆｌｉｍｏｎｏｉｄｓａｎｄｌｉｍｏｎｏｉｄｇｌｕｃｏｓｉｄｅｓｉｎＣｉｔｒｕｓｓｅｅｄｓ[Ｊ].ＪＣｈｒｏｍａｔｏｇｒＡꎬ６３９(２):２９５－３０２.ＰＡＮＬＨꎬＸＵＤꎬＢＵＷＪꎬ２００６.Ａｄｖａｎｃｅｓｉｎｄｅｂｉｔｔｅｒｉｎｇｔｅｃｈ￣ｎｏｌｏｇｉｅｓｆｏｒＣｉｔｒｕｓｊｕｉｃｅｓ[Ｊ].ＢｅｖｅｒａｇＩｎｄｕｓｔꎬ９(２):６－９.[潘利华ꎬ徐迪ꎬ布文婕ꎬ２００６.柑橘类果汁脱苦的研究进展[Ｊ].饮料工业ꎬ９(２):６－９.]ＰＥＮＧＴꎬＱＩＵＪＰꎬＬＩＨＸꎬｅｔａｌ.ꎬ２０１２.Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｌｉ￣ｍｏｎｏｉｄｓｉｎｖａｒｉｅｔｉｅｓｏｆｍａｔｕｒｅＣｉｔｒｕｓｐｅｅｌｉｎＳｉｃｈｕａｎｂｙＨＰＬＣ[Ｊ].ＪＣｈｅｎｇｄｕＵｎｉｖＴｒａｄＣｈｉｎＭｅｄꎬ３３(４):６９－７１.[彭腾ꎬ邱建平ꎬ李鸿翔ꎬ等ꎬ２０１２.川产柑橘属不同品种成熟果皮中柠檬苦素的含量测定[Ｊ].成都中医药大学学报ꎬ３３(４):６９－７１.]ＲＡＭＡＮＧꎬＣＨＯＭꎬＢＲＯＤＢＥＬＴＪＳꎬｅｔａｌ.ꎬ２００５.ＩｓｏｌａｔｉｏｎａｎｄｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｃｌｏｓｅｌｙｒｅｌａｔｅｄＣｉｔｒｕｓｌｉｍｏｎｏｉｄｇｌｕｃｏｓｉｄｅｓｂｙｆｌａｓｈｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ[Ｊ].ＰｈｙｔｏｃｈｅｍＡｎａｌꎬ１６(３):１５５－１６０.ＲＡＹＮＯＲＭＷꎬＲＯＢＥＲＴＳＳＬꎬＭＵＬＨＯＬＬＡＮＤＤＡꎬ２０１５.Ｃａｐｉｌｌａｒｙｓｕｐｅｒｃｒｉｔｉｃａｌｆｌｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｏｆｌｉｍｏｎｏｉｄｓ[Ｊ].ＪＳｅｐＳｃｉꎬ１６(８):４６９－４７２.ＳＵＮＣＤꎬＣＨＥＮＫＳꎬＣＨＥＮＹꎬｅｔａｌ.ꎬ２００５.Ｃｏｎｔｅｎｔｓａｎｄａｎ￣ｔｉｏｘｉｄａｎｔｃａｐａｃｉｔｙｏｆｌｉｍｏｎｉｎａｎｄｎｏｍｉｌｉｎｉｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｔｉｓｓｕｅｓｏｆＣｉｔｒｕｓｆｒｕｉｔｏｆｆｏｕｒｃｕｌｔｉｖａｒｓｄｕｒｉｎｇｆｒｕｉｔｇｒｏｗｔｈａｎｄｍａｔｕ￣ｒａｔｉｏｎ[Ｊ].ＦｏｏｄＣｈｅｍꎬ９３(４):５９９－６０５.ＴＡＮＡＫＡＴꎬＫＯＨＮＯＨꎬＴＳＵＫＩＯＹꎬｅｔａｌ.ꎬ２０００.Ｃｉｔｒｕｓｌｉ￣ｍｏｎｏｉｄｓｏｂａｃｕｎｏｎｅａｎｄｌｉｍｏｎｉｎｉｎｈｉｂｉｔａｚｏｘｙｍｅｔｈａｎｅ￣ｉｎｄｕｃｅｄｃｏｌｏｎｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓｉｎｒａｔｓ[Ｊ].Ｂｉｏｆａｃｔｏｒｓꎬ１３(１－４):２１３－２１８.ＴＩＡＮＱＧꎬＤＩＮＧＸＬꎬ１９９９.ＳｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｉｃｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｔｏｔａｌｌｉｍｏｎｏｉｄｓｉｎＣｉｔｒｕｓｓｅｅｄｓ[Ｊ].ＪＩｎｓｔｒｕｍＡｎａｌꎬ１８(５):４５－４７.[田庆国ꎬ丁霄霖ꎬ１９９９.测定橘核中柠檬苦素类似物的分光光度法[Ｊ].分析测试学报ꎬ１８(５):４５－４７.]ＷＥＮＪꎬＳＨＩＹꎬＸＵＹＪꎬｅｔａｌ.ꎬ２００７.Ａｎｔｉ￣ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎａｎｄａｎａｌｇｅｓｉｃｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｓｔｕｄｙｏｎＣｉｔｒｕｓｆｒｕｉｔｓｌｉｍｏｎｏｉｄｓ[Ｊ].ＦｏｏｄＳｃｉꎬ２８(１１):５１５－５１８.[温靖ꎬ施英ꎬ徐玉娟ꎬ等ꎬ２００７.柑桔果实中柠檬苦素抗炎镇痛作用的研究[Ｊ].食品科学ꎬ２８(１１):５１５－５１８.]ＷＯＯＫＬꎬＫＩＭＫＭＣꎬＣＨＡＮＧＤＫꎬ２００６.Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｆｌａｖｏｎｏｉｄａｎｄｌｉｍｏｎｏｉｄｃｏｍｐｏｕｎｄｓｉｎｃｉｔｒｏｎ(ＣｉｔｒｕｓｊｕｎｏｓＳｉｅｂ.ｅｔＴａｎａｋａ)ｓｅｅｄｓｂｙＨＰＬＣａｎｄＨＰＬＣ/ＭＳ[Ｊ].ＪＫｏ￣ｒｅａｎＳｏｃＦｏｏｄＳｃｉＮｕｔｒꎬ３５(３):３５３－３５８.ＹＵＨꎬＷＡＮＧＣꎬＤＥＮＧＳꎬｅｔａｌ.ꎬ２０１７.Ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎｏｆｕｌｔｒａ￣ｓｏｎｉｃ￣ａｓｓｉｓｔｅｄｅｘｔｒａｃｔｉｏｎａｎｄＵＰＬＣ￣ＴＯＦ/ＭＳａｎａｌｙｓｉｓｏｆｌｉ￣ｍｏｎｏｉｄｓｆｒｏｍｌｅｍｏｎｓｅｅｄ[Ｊ].ＬＷＴ￣ＦｏｏｄＳｃｉＴｅｃｈｎｏｌꎬ８４:１３５－１４２.ＹＵＪＨꎬＷＡＮＧＧＣꎬＨＡＮＹＳꎬｅｔａｌ.ꎬ２０１５.Ｌｉｍｏｎｏｉｄｓｗｉｔｈａｎｔｉ￣ＨＩＶａｃｔｉｖｉｔｙｆｒｏｍＣｉｐａｄｅｓｓａｃｉｎｅｒａｓｃｅｎｓ[Ｊ].ＪＮａｔＰｒｏｄꎬ７８(６):１２４３－１２５２.ＺＯＵＺꎬＸＩＷꎬＨＵＹꎬｅｔａｌ.ꎬ２０１６.ＡｎｔｉｏｘｉｄａｎｔａｃｔｉｖｉｔｙｏｆＣｉｔ￣ｒｕｓｆｒｕｉｔｓ[Ｊ].ＦｏｏｄＣｈｅｍꎬ１９６:８８５－８９６.(责任编辑㊀周翠鸣)０５７广㊀西㊀植㊀物４０卷。
柑橘果酒中的类柠檬苦素及其脱除方法综述胡小琴; 刘伟; 许弯; 胡梓妍; 张菊华【期刊名称】《《湖南农业科学》》【年(卷),期】2019(000)008【总页数】5页(P128-132)【关键词】柑橘果酒; 柠檬苦素类化合物; 脱苦; 综述【作者】胡小琴; 刘伟; 许弯; 胡梓妍; 张菊华【作者单位】湖南大学研究生院隆平分院湖南长沙 410125; 湖南省农产品加工研究所湖南长沙 410125【正文语种】中文【中图分类】TS262.7柑橘（Citrus）是世界第一大水果，我国是柑橘的主要原产国。
2017 年，我国柑橘种植面积为262.3万hm2，产量达3 931 万t，均排世界第一，目前栽种的品种主要有金橘、温州蜜橘、椪柑、砂糖橘、脐橙等。
柑橘的采收时期集中，经常会出现鲜果滞销、柑橘卖难等情况，从而造成一定的经济损失[1]。
为了解决鲜果供过于求的问题，人们通常会将柑橘加工成食品，如柑橘罐头、柑橘酒等。
柑橘果酒（Citrus Fruit Wine）是以柑橘为原料经酵母发酵产生酒精和相关风味物质的一种饮料酒。
柑橘果酒具有典型性香气，富含VA、VC 和黄酮等活性成分，有利于人体的健康。
目前柑橘果酒产业化加工较少，主要原因是柑橘加工后会产生苦味。
这类苦味物质严重影响了柑橘果酒的口感，给消费者带来不愉快的体验[2]。
柑橘中的苦味物质主要有2 种，黄烷酮糖苷类化合物（Flavanone glycoside compounds，如柚皮苷、新橙皮苷、枸杞苷等）和柠檬苦素类化合物（Limonoids，如柠檬苦素、诺米林等）。
柚皮苷苦味阈值较高，水溶液中阈值为20 mg/L，主要存在于葡萄柚和苦橙中。
柠檬苦素苦味阈值很低，水溶液中阈值为1.0 mg/L，果汁中苦味阈值3.4 mg/L，约为柚皮苷苦味阈值的20 倍，因此柑橘果汁及果酒的“后苦”现象，主要是由柠檬苦素引起的[3-4]。
该文主要概述近年来国内外有关柑橘果酒脱除类柠檬苦素苦味的最新研究进展，指出其存在的主要问题，并对其发展动态进行展望，以期为解决柑橘果酒加工苦味的瓶颈难题提供新思路，为我国果酒加工相关研究提供参考。
柠檬苦素的抗氧化与抑菌效果研究章斌;侯小桢;邓其海;丁心;陈晓芸;秦轶;张海鑫【摘要】Limonins from Eureka lemon peel and lemon seed was extracted by organic solvent method and its content was determined, meanwhile, antioxidant and antibacterial activities of limonins in vitro were explored in this paper. Results showed that lemon seeds contain more limonins than lemon peel, the concentratin of the citrate contained in lemon seeds reached 2.7664×10-1 mg/mL;limonoids from lemon peel and seeds had no sig-nificant scavenging effects on DPPH free radical, the highest clearance rate under experimental conditions reached only 14.58%, far lower than that of the same concentration of TBHQ. Meanwhile, limonins extracted from lemon peel and lemon seeds had a certain delaying effect on storage period of lard under dosage of 2 mg/mL. Antibacterial activity test results indicated that Limonins extracted from lemon peel and lemon seed exhibited certain antibacterial effects on Escherichia coli, Rhizopus, Bacillus subtilis and Staphylococcus aureus and both showed a best efficiency for Bacillus subtilis with MIC and MBC were 0.5 mg/mL and 0.75 mg/mL respectively.%采用有机溶剂法提取尤力克柠檬果皮和果籽中的柠檬苦素并测定其含量,并对其抗氧化与抑菌活性进行研究.试验结果表明:柠檬籽较柠檬皮含更多苦素类化合物,且籽提取液中所含柠檬苦素的浓度为2.7664×10-1 mg/mL;柠檬皮提苦素物和柠檬籽提苦素物对DPPH自由基的清除作用不明显,试验条件下的抑制率最高仅为14.58%,远低于同浓度特丁基对苯二酚(tert-Butylhydroquinone,TBHQ);2 mg/mL用量的提取液对猪油贮藏期有一定延缓效果.抑菌活性试验结果表明从柠檬皮和柠檬籽中提取的苦素物质对大肠杆菌、根霉、枯草芽胞杆菌和金黄色葡萄球菌均有一定的抑菌作用,两者均对枯草芽胞杆菌的抑菌效果最好,且皮提苦素物和籽提苦素物对枯草芽胞杆菌的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)和最小杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,MBC)分别均为0.5mg/mL和0.75 mg/mL.【期刊名称】《食品研究与开发》【年(卷),期】2017(038)022【总页数】5页(P1-5)【关键词】柠檬;柠檬苦素;抗氧化;抑菌【作者】章斌;侯小桢;邓其海;丁心;陈晓芸;秦轶;张海鑫【作者单位】韩山师范学院食品工程与生物科技学院,广东潮州521041;韩山师范学院食品工程与生物科技学院,广东潮州521041;广东中兴绿丰发展有限公司,广东河源517000;广东中兴绿丰发展有限公司,广东河源517000;韩山师范学院食品工程与生物科技学院,广东潮州521041;广东中兴绿丰发展有限公司,广东河源517000;韩山师范学院食品工程与生物科技学院,广东潮州521041【正文语种】中文柠檬苦素是广泛存在于柠檬等柑橘属水果皮和籽中的一类功能性化合物，具有抗肿瘤[1]、抗病毒[2]、抑菌[3]、镇痛抗炎[4]等多种生物活性，是生产药物、功能性食品的主要原料或配料成分之一。
编号食品导论（综述）题目：柑橘类果汁脱苦技术综述食品学院食品科学与工程专业学号 1010314315学生姓名岳翠益指导教师王海鸥教授佟婷婷助教二〇一四年十二月柑橘类果汁脱苦技术综述摘要：果汁及果汁饮料已成为人们膳食结构中越来越重要的一个组成部分。
柚皮苷和类柠檬苦素是柑橘类果汁的主要苦味物质，其存在明显影响了柑橘类果汁的品质[1]。
本文对柑橘类果汁致苦原因和脱苦方法进行综述。
关键词：柑橘类果汁；柚皮苷；类柠檬苦素；脱苦1 前言柑橘类水果包括橘、柑、柚、柠檬、橙等。
柑橘是世界性大宗水果，约占世界水果总产量的15％。
近年来，中国柑橘发展迅速．种植规模不断扩大，总产量稳步提升，2008年达2331万t，首次超过巴两成为世界第一大柑橘生产国111。
但是，我国柑橘加工产业还不发达，加工柑橘比例还不到总产量的5％tn。
大量的柑橘只能以鲜果形式消费。
因而柑橘类水果鳞销压力较大。
开展柑橘类水果深加工，一方面可以缓解鲜销的压力，另一方面可延长产业链．增加产品的附加值。
然而，许多柑橘果实及其产品的苦味、加热变味等问题严重限制着柑檑加工幢的发展。
许多柑橘类果汁在长期贮藏和热处理过程中会产生令人难以接受的苦味，而鲜食或取汁后及时饮用就没有这种苦味。
这种经加工后呈现强烈苦味的现象就是人们通常所说的“后苦味”或“延迟苦味”(Delayed Bitterness)现象闭。
“后苦味”大大降低了柑橘类果汁的口感，增大了加工生产的难度 [1]。
果汁中苦味的保持是产品特有风味必不可少的，但苦味过强就会影响产品的品质和销售，因此对柑橘果汁进行脱苦是必要的，脱苦方法的研究也成为柑橘加工研究者们的重要课题[2]。
2 果汁中的苦味物质引起苦味的物质主要来自两大类不同的植物化学家族：类黄酮（以柚皮苷为主）和类柠檬苦素（以柠檬苦素为主）[3]。
柚皮苷（结构如下图1）是一种黄酮类化合物，带有强烈的苦味，在水中的苦味阀值为20mg/kg。
它的溶解度随糖含量的增加而升高，又随PH 的升高而降低。
