免疫学07细胞因子.ppt

信号转导
信号转导概述
信号转导是免疫细胞间相互作用的机制，通过信号转导，免疫细胞 能够感知外界刺激并作出反应。
信号转导途径
信号转导途径包括配体-受体相互作用、G蛋白偶联受体、酪氨酸激 酶受体等，这些途径在免疫细胞信号转导中发挥重要作用。
信号转导与免疫功能
信号转导对免疫细胞的分化、增殖、活化等过程具有调控作用，影响 免疫细胞的应答和功能。
粒细胞
功能
粒细胞主要负责消灭入侵的病原 体，包括细菌和真菌。它们通过 释放抗菌肽和酶来杀死这些微生 物。
作用
在感染发生时，粒细胞会迅速到 达感染部位，通过吞噬作用或释 放化学物质来消灭病原体。
血小板
功能
血小板不仅参与血液凝固，止血和损伤修复，还具有一些免 疫相关功能。它们能够释放出生长因子等化学物质，促进受 损血管的修复。
02
淋巴细胞
T淋巴细胞
01
02
03
功能
识别外来抗原，激活其他 免疫细胞，清除被感染的 细胞和癌细胞。
种类
包括CD4+辅助T细胞、 CD8+细胞毒T细胞和调节 T细胞。
生命周期
平均存活时间约为一周， 但在某些情况下可以存活 数月或更长时间。
B淋巴细胞
功能
产生抗体，识别并清除外来抗原。
种类
根据其产生的抗体类型，可分为IgM、IgG、IgA、 IgE等。
生命周期
在抗原刺激后，B细胞可以存活数月或更长时间。
NK细胞
功能
无需抗原预先致敏，即可 直接杀伤某些肿瘤细胞和 被感染的细胞。
特点
具有自然杀伤活性，无需 抗原特异性结合即可杀死 靶细胞。
作用机制
通过释放穿孔素和颗粒酶 等介质，诱导靶细胞凋亡。

一、细胞因子测定的临床应用原则
（一）应用多种方法测定 （二）测定标本的选择适当 不同标本；多次采集 （三）同时测定几种细胞因子
二、细胞因子测定作为特定疾病诊断的辅 助指标 三、评估机体的免疫状态，判断治疗效 果及预后
HIV—TNF有助于了解免疫状态 慢性乙肝—IFN、IL-6、IL-8，且与严重 程度相关
细胞因子与细胞黏附因子 的检测及应用
细胞因子
细胞因子(Cytokine, CK)由机体 免疫细胞和某些基质细胞合成和分 泌的具有生物活性多肽或蛋白质， 通过结合细胞表面的相应受体发挥 生物学效应。具有介导和调节免疫 应答及炎症反应的作用。
一、细胞因子分类
按产生CK的细胞分类 按CK作用的靶细胞类型分类 按CK的主要功能分类 按CK的结构和主要功能分类
(1) 一种CK可作用于多种不同类型的靶细胞, 而多种细胞因子也可作用于同一种靶细胞 (2) 同一种CK对不同靶细胞显示不同效应,如 TNF-α对L929,T24等是细胞毒作用,而对某些 纤维母细胞系则可促进分裂及增生
(3)不同细胞因子具有某些共同的生物学效应 :如IL-2,4,9均可维持和促进T细胞的增生 (4) 作用的时相性:一种CK的某些效应可同时 出现,另一些效应则在不同时相出现 (5) 生物学作用的双相性:适量具有生理调节 作用, 过量则可能损伤机体，如TNF
(四)
CK的产生、生物学作用、受体表达、 相互调节具有网络特点
CK主要生物学作用



参与非特异性免疫应答 介导和调节特异性免疫应答 诱导细胞凋亡(apoptosis) 刺激造血功能
测定方法分为：
1. 生物学测定方法 2. 免疫学测定法 3. 分子生物学测定法 三种方法之间相互联系，互为 补充，但不能完全替代。

方法特点
1. 单细胞水平计数 简单、快捷、 2. 简单、快捷、灵敏 3. 实验结果客观
实验过程
取淋巴细胞，刺激剂作用， ℃孵育1小时 取淋巴细胞，刺激剂作用，37℃孵育 小时 加入BFA继续培养 小时，用PBS洗涤。 继续培养5小时 洗涤。 加入 继续培养 小时， 洗涤 4%多聚甲醛室温固定 分钟后，PBS洗涤。 多聚甲醛室温固定8分钟后， 洗涤。 多聚甲醛室温固定 分钟后 洗涤
荧光染料的特性
•激发波长(EXCITING) •发射波长(EMISSION)
激发光源与荧光标记物
前向角散射光信号
Laser
FALS Sensor
侧向角散射光信号
Laser
FALS Sensor
90LS Sensor
FALS Sensor
Freq
Fluorescence
Fluorescence detector ( FL1,FL2,FL3,FL4)
检测信号
双参数点图
标本制备
标本来源:外周血、骨髓、培养细胞、组织(经尼龙网300 目过滤) 制成单细胞悬液 标本浓度：106/ml-外周血白细胞计数，白血病人血标 10 /ml-外周血白细胞计数， 本需PBS PBS稀释 本需PBS稀释 抗凝剂：EDTA、肝素-若抗凝不佳，有凝块，则不可检 测。 溶血剂：保持细胞形态、红细胞裂解完全。 反应温度：26~27ºC，室温避光。 室温避光。
流式细胞仪（FLOW CYTOMETER，FCM） ， ）
对于处在流动状态的细胞或生物颗粒进 行多参数的快速的定量和分析的技术。
检测仪器：流 检测仪器 流 式 细 胞 记 数 仪
FCM结构组成部分
液流系统; 液流系统;
–

细胞因子 适应证
IL-2
癌症、免疫缺陷、疫苗佐剂
IFN-α 白血病、Kaposi 肉瘤、乙肝、恶性肿瘤、AIDS
IFN-β 多发性硬化症
IFN-γ 慢性肉芽肿、生殖器疣、过敏性皮炎、类风湿性关节炎
G-CSF 自体骨髓移植、化疗导致的粒细胞减少症、再障
EPO
慢性肾衰竭导致的贫血、癌症或癌症化疗导致的贫血、失血后贫血
作用 ⑤ 具有多效性、重叠性、拮抗性或协同性
第二节 细胞因子的分类
集落刺激因子 Colony-stimulating factor, CSF
B
白细胞介素 A
Interleukine, IL （IL-1~IL-35) 见附录一
细胞因子分类
C
干扰素
Interferon, IFN
Type I & II
生长因子
第二节 粘附分子
整合素家族 Integrin family
• 主要介导细胞间以及细胞与细胞外基质的粘附
• 由α，β两条链经非共价键连接组成的异二聚体
血细胞在分化成熟为不同谱系、分化不同阶段及细胞 活化过程中，出现或消失的细胞表面标记。
2. CD——国际白细胞分化抗原的统一命名系统
应用以单克隆抗体鉴定为主的方法，将来自不同实 验 室 的 单 克 隆 抗 体 所 识 别 的 同 一 分 化 抗 原 称 为 CD (cluster of differentiation)。
第一节 免疫细胞表面功能分子和人类白细胞分化抗原
主要生物学作用：
▪ 表面标志：代表不同谱系、不同分化阶段、活化阶段 ▪ 参与机体重要的生理、病理过程
第二节 粘附分子
❖ 细胞粘附分子（cell adhesion molecule, CAM) 介导细胞间或细胞与细胞外基质间相互接触和结合