当精子和卵子在输卵管结合成为受精卵后
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当精子和卵子在输卵管结合成为受精卵后,大约要经过4天时间才能到达子宫腔内,再经过2~3天,孕卵就在子宫着床。着床后的孕卵在发育过程中分泌人绒毛膜促性腺激素(HCG),HCG随孕妇的尿液排出。用早早孕测试板协助诊断早期妊娠,就是利用这一临床机理,根据免疫学中的斑点免疫渗滤法的原理结合显色反应来完成测试的。尿中HCG抗原与板上包被的特异性抗体结合,形成抗原抗体复合物随尿液渗滤到显色区域,就会显示出结果。以28天为一月经周期来计算,如果在排卵期同房并受孕后,最早可在月经第26天就能从早早孕测试板上得到怀孕的信息了。
斑点免疫渗滤试验的基本原理是:以硝酸纤维素膜为载体,利用微孔滤膜的可滤过性,使抗原抗体反应和洗涤在一特殊的渗滤装置上以液体渗滤过膜的方式迅速完成。斑点免疫渗滤试验最初是从斑点ELISA基础上发展起来建立的,应用的结合物是酶标记的,称为斑点酶免疫渗滤试验。90年代初发展了以胶体金为标记物的斑点免疫渗滤试验(dotymmunogoldfiltrationassay,DIGFA),又名滴金免疫测定法(简称滴金法)。在滴金法中不需酶对底物的反应,更加简便、快速,在临床检验中应用日渐广泛医学|教育网搜集整理。
原理
以双抗体夹心法为例。在硝酸纤维素膜的膜片中央滴加纯化的抗体,为膜所吸附。当滴加在膜上的标本液体渗滤过膜时,标本中含抗原被膜上抗体捕获,其余无关蛋白等没滤出膜片。其后加入的胶体金标记也在渗滤中与已结合在膜上的抗原相结合。因胶体金本身呈红色,阳性反应即在膜中央显示红色斑点。