低浓度HBsAg

一、乙肝五项定量检测指标1、乙肝表面抗原（HBsAg）定量检测：1）参考值：mL2）临床意义：（1）可作为HBV携带者乙肝病毒复制的参考指标（2）评价拉美呋定的治疗效果（3）监测应用alpha-干扰素治疗病人的乙肝病毒复制（4）确定肝移植病人免疫球蛋白的使用剂量2、乙肝表面抗体（抗-HBs）定量测定：是HBsAg刺激机体产生的特异性抗体，是一种保护性抗体，能中和HBV。

（1）抗-HBs含量在0-10mIU/ml，表示不具有保护性，需要注射乙肝疫苗（3针：0-1-6方案）。

（2）抗-HBs含量在10-100mIU/ml，表示具有保护性，但较弱，需要乙肝疫苗强化注射（1针）。

（3）抗-HBs含量大于100mIU/ml，表示具有很强的保护性，不需要注射乙肝疫苗。

3、乙肝病毒e抗原（HBeAg）HBeAg增高说明病毒复制，具有很强的传染性。

4、乙肝病毒e抗体（抗-HBe）抗-HBe阳性说明病毒复制减少，传染性弱，但并非没有传染性。

抗HBe不是保护性抗体。

5、乙肝病毒核心抗体（抗-HBc）抗-HBc：不是中和抗体，有IgG和IgM两种形式。

IgM在早期出现，而IgG在恢复期出现，可持续多年或终身存在。

二、乙肝五项定量检测的优点由于乙肝病毒容易发生变异，再加上乙肝定性检测方法的局限性，会出现假阴性结果，导致不能及时发现乙肝的感染，也就不能得到及时的治疗，对医护人员和其他患者也存在着被感染的威胁。

乙肝五项定量应用目前最先进的化学发光法检测，避免了假阴性和漏检的问题，而且准确，尤其对乙肝病人的疗效观察提供了依据，这是检验发展的趋势。

乙肝五项定量检测及意义血清乙肝标志物(俗称两对半定性测定)始于20世纪80年代中期，对乙肝疾病的诊断，病情监测，疗效观察起到了一定的作用。

随着临床医学的发展，定性检测已经远远不能满足临床及患者的要求。

随着检验医学的发展，乙肝两对半定量测定成为可行，大大弥补了酶标(ELISA)定性检测的不足；同时乙肝两对半的定量检测可与血清HBV DNA荧光测定相互补充，综合评价患者病情与药物疗效。

时间分辨荧光免疫分析技术（TRFIA）在乙肝两对半定量检测的临床意义一、极大地提高了检测灵敏度TRFIA检测HBsAg灵敏度可达到0.2ng/ml，而酶标（ELISA）检测HBsAg灵敏度是2ng/ml，也就是说血清中的HBsAg达到2ng/ml酶标才会呈阳性。

1、缩短急性乙肝HBsAg检测"窗口期"。

2、如病毒发生变异后，表达量较低，常规ELISA检测不出抗原，而TRFIA定量具有极高的灵敏度，可发现并极有可能检测出HBsAg和HBsAb。

3、可发现低浓度的HBsAg携带者。

特别是一些群体，如医护工作者、病人家属等，由于长期密切接触，但又非直接经血传播感染成急性乙肝，而是长期少量感染，并刺激机体产生一定的免疫力，可能呈低浓度感染，特别应当引起人们的足够重视，密切关注并采取措施防止发展成乙肝或慢性携带者。

二、动态观察疗效和病情监疾病的发生、发展、疗效、预后是一个动态的变化过程，TRFIA定量检测乙肝"两对半"各标志物的浓度变化可对乙肝的病程、治疗、预后起一个全程动态检测的作用，能够为医生对病情疗效作出合理的解释提供依据，指导治疗。

1、定量分析HBsAg和HBsAb的浓度变化，可以预见急性乙肝是否处于恢复期。

如HBsAg浓度降低，HBsAb的浓度逐渐升高，可说明病情正在往恢复期发展。

反之，HBsAg 浓度处于较高水平或上升趋势，而HBsAb一直处于较低水平，则容易发展为慢性乙肝或携带者。

2、定量分析HBeAg和HBsAb的浓度变化，可以反映病情变化和治疗效果。

明确检测HBeAg向HBsAb转换的时期，即表现为HBeAg浓度下降和HBsAb浓度的升高的过程。

高浓度的HBeAg还可间接提示病毒处于高复制状态，具有较高的传染性。

高浓度的HBsAb 一方面提示病情的好转，而在某些时候（如肝功能指标很差）可能与肝坏死、肝硬化、肝癌有关。

3、HBsAb浓度的高低可以反映病毒感染的状态。

200
127
42 21
0
0.00 0.01 0.02 0.03 0.04 0.05 0.06 0.07 0.08 0.09 0.10
2.“假阳性”原因
• 内源性干扰因素：类风湿因子、补体、治疗性抗体、 溶菌酶、合并其他病毒感染、自身免疫性疾病、血 液透析等。
• 外源性干扰因素：溶血、细菌污染、凝固不全、操 作失误（如临近孔污染、加错样）等。
3.灰区
◆“灰区”的概念 在定性ELISA测定中，处于阳性判定 值（CO值）附近、临床意义可疑的一部分结果。CO值的确 定要使测定结果的假阳性和假阴性发生率最低。如果试剂 盒CO值上移或下移，可导致假阴性或假阳性结果。
• 线性范围宽（0.03-2500IU/mL） 宽広线い性レ范ン围ジ
• 一次测定即可得到最终结果
全方位提升实验室的检测质量和效率
CMIA
★ 化学发光微粒子免疫分析技术(CMIA)(Abbot，Architect HBsAg QT)
过 程 示 意 图
★ 电化学发光免疫分析(ECLI)(Roche，Elecsys HBsAg II)
◆1963年澳大利亚科学家Blumberg首次 发现，当时称澳大利亚抗原(后简称澳 抗)。后来研究表明，澳抗即HBV表面膜 （Blumberg,1925.7.28-2011.4.25） 颗粒，改称HBV表面抗原。与盖杜谢克 共获1976年诺贝尔生理学及医学奖。 ◆2013.7在北京举办了“HBsAg发现50 周年学术研讨会”。主要针对发现、检 测、病理及治疗转归等进行了讨论。
☆HBV-DNA（基因诊断）
新型HBV感染的生物学标志
欧洲肝脏病学会（EASL）发布了2017版《慢性HBV感 染管理临床实践指南》，该指南新增了HBV感染的3种 新型生物学标志物。 ◆ cccDNA：HBV持续感染的关键所在，对评估HBV感 染是否治愈至关重要。检测需肝活检，方法尚待标准 化，限制了在临床的广泛应用。

乙肝病毒感染免疫应答及常用血清标志物临床意义乙型肝炎病毒(HBV)属嗜肝病毒科,具有明显的种属及嗜肝特性(尽管其亦可感染肝以外的组织、器官或细胞,如脾、辜丸、人外周血单个核细胞等),可致持续性病毒感染。

我国在世界上属于乙型肝炎病毒感染的高发区,乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的携带者己超过10%,通常判断mv感染及其状况的指标为HBV的血清学标志物,如HBsAg、抗HBs、HBeAg、抗HBe、抗mc(即所谓的"两对半")、抗HBc IgM和HBV DNA等,了解这些指标在什么情况下出现及其临床意义,对于我们检验工作者来说,亦具有重要意义。

1. 机体对HBV感染的免疫应答机体感染HBV后,HBV的包膜和核壳抗原作为外来抗原物质可激发机体产生针对其的细胞和体液免疫应答。

细胞免疫应答通过T细胞膜上抗原受体复合体的α自异二聚体识别经抗原提呈细胞处理的与HLA分子结合的病毒抗原短肤进行,而体液免疫应答是基于B细胞表面的免疫球蛋白受体特异识别原始的未经处理的分泌型或结构型病毒抗原,且根据在抗原结合中是否需要T细胞辅助,又分为T细胞依赖性和T细胞非依赖性两种方式。

1.1.细胞免疫应答机体对HBV感染的细胞免疫应答包括HLKII和I类限制性T细胞应答。

HBV的包膜抗原和核壳抗原均可激发机体的川一个或多个表位的HLA一II类限制性CD4+和I类限制性CD8+T 细胞应答。

机体感染HBV后,最早出现的对HBV的T细胞免疫应答针对的是HBV的核壳抗原(HBcAg),且反应强烈,相对来说,针对mv包膜抗原(HBsAg等)的T细胞应答则要弱得多。

一般认为,对HBV核壳抗原的这种强烈的HLA-II类限制性T细胞应答与病毒的清除有重要关系。

其机制主要是通过诱导病毒特异的细胞毒T淋巴细胞(CTL)作用及通过旁路机制辅助HBV 包膜特异性的B细胞产生抗ms中和抗体。

后者在急性乙型肝炎的抗HBs的产生中具有重要作用,因为在急性乙肝时,针对msAg的HLA一II类限制性T细胞应答很弱。