第十八章经典液相色谱法_without password

+
+
B
+
+ + R + A B
离子交换平衡常数:
K B/A
[B ] r [A ] = + + [A ] r [B ]
+
+
[A+]r 、[B+]r 分别表示树脂中A、B离子的浓度; [A+] 、[B+] 分别表示水液中A、B离子的浓度 若 KB/A > 1 , 说明B+ 较牢地结合在树脂上 KB/A < 1 , 说明A+ 较牢地结合在树脂上 所以KB/A说明了树脂对A+、 B+两种离子选择性 交换的能力,故也称之为选择性系数。
Cs X s Vs K C m X m Vm
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分配系数小的组分，移动速度快，先流出色谱 柱；分配系数大的组分，移动速度慢，后流出色谱 柱。 二、载体 载体（担体）起支撑与分散固定液的作用 要求：化学惰性，不吸附被分离组分，纯 净，颗粒大小均匀。 常用的载体有硅胶、纤维素、硅藻土等 三、 固定液与流动相的选择
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固定相
常用的凝胶有葡聚糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶 和.聚苯乙烯凝胶等。 流动相 要选择对样品的溶解好，又能润湿凝胶，粘度 要低的溶剂，否则，会限制分子扩散而影响分离 效果。一般水溶性试样选水溶液，非水溶性试样 选四氢呋喃、氯仿、甲苯和二甲基甲酰胺等有机 溶剂。
第5节
薄层色谱法（TLC）
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将固定相均匀地涂铺在具有光洁表面的玻璃、 塑料或金属板上形成薄层，在此薄层上进行色谱分 离分析的方法称为薄层色谱法（TLC）。 铺有固定相的板子称为薄层板简称薄板。在薄层 色谱法中使用的流动相又称为展开剂。 按分离机制薄层色谱法可分为吸附、离子交 换、分配和分子排阻色谱法等。按薄层板的分离 效率不同，又可分为经典薄层色谱法(TLC)及高 效薄层色谱法(HPTLC)。本节主要讨论应用最 为广泛的吸附薄层色谱法。 操作过程：

2.HPLC:分离和分析 HPLC:分离和分析
柱内径2 mm,固定相粒径<10m(球形,匀浆装柱) 柱内径2~6mm,固定相粒径<10m(球形,匀浆装柱) 高压输送流动相 柱效高(H↓,n↑) 柱效高(H↓,n↑) 分析时间大大缩短 可以在线检测
二,HPLC与GC差别 HPLC与GC差别
相同:兼具分离和分析功能, 相同:兼具分离和分析功能,均可以在线检测 主要差别:分析对象的差别和流动相的差别
η
C = Cm + Cs = Cg + Cl = Cl
df 2 Cl ∝ Dl
DL ∝ T
η
续前
2. HPLC:H = A + C u
QB = 2γ Dm
η 柱温 ↓ 低,流动相 ↑ 大 B相忽略 T η
Dm ∝
T
讨论: 讨论: 1)流动相流速对HPLC板高的影响(与GC对比)next )流动相流速对HPLC板高的影响(与GC对比)next
三,化学键合相色谱法(BPC) 化学键合相色谱法(BPC)
(一)化学键合相 (二)反相键合相色谱 (三)正相键合相色谱 (四)离子对色谱和离子抑制色谱
(一)化学键合相
利用化学反应将固定液的官能团键合在载体表面 1.分离机制:分配 + 吸附(以LLC为基础) 吸附( LLC为基础) 2.特点: 1)不易流失 2)热稳定性好 3)化学性能好 4)载样量大 5)适于梯度洗脱
"三高" "一快" "一广" 三高" 一快" 一广" 高柱效——n=10 高柱效——n=104片/米,柱效高(远高于一般LC) 柱效高(远高于一般LC) 高灵敏度 高选择性 分析速度快 应用范围广泛(可分析80%有机化合物) 应用范围广泛(可分析80%有机化合物)

36、自己的鞋子，自己知道紧在哪里。——西班牙
37、我们唯一不会改正的缺点是软弱。——拉罗什福科
xiexie! 38、我这个人走得很慢，但是我从不后退。——亚伯拉罕·林肯
39、勿问成功的秘诀为何，且尽全力做你。——孔子
13、遵守纪律的风气的培养，只有领 导者本 身在这 方面以 身作则 才能收 到成效 。—— 马卡连 柯 14、劳动者的组织性、纪律性、坚毅 精神以 及同全 世界劳 动者的 团结一 致，是 取得最 后胜利 的保证 。—— 列宁 摘自名言网
15、机会是不守纪律的。——雨果
谢谢！
经典液相色谱法
11、战争满足了，或曾经满足过人的 好斗的 本能， 但它同 时还满 足了人 对掠夺 ，破坏 以及残 酷的纪 律和专 制力的 欲望。 ——查·埃利奥 特 12、不应把纪律仅仅看成教育的手段 。纪律 是教育 过程的 结果， 首先是 学生集 体表现 在一切 生活领 域—— 生产、 日常生 活、学 校、文 化等领 域中努 力的结 果。— —马卡 连柯(名 言网)

①非极性键合相：主要用于反相色谱
在硅胶的表面键合上非极性的烃基，如碳十八 （ （CC118）,O、D苯S,基最等常制用得）。、辛烷基（C8）、甲基 烷基的链长度对溶质的保留、选择性和载样量 有很大的影响，链长度增加，稳定性好， k 增 大，载样量增大，分离选择性提高。
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胶束色谱法－MC micellarchromatography
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101-5
二、化学键合相色谱法
（一）化学键合相（bonded phase , BP）
1. 定义：经化学反应将官能团键合在载体表面得到 的固定相。
2. 种类：非极性、弱极性、极性
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101-7
硅胶键合相种类示意图
其他
手性层
C H2
H2 C
C H2
H2 C
Si O
Si
H2 C
C
H2 C
C
O Si
H2N
H2 H2 O
Si
H2C
H2C O
H2C
CH2
H2C CH OH
OH
HO O Si O
Si
O Si O CH2
H2C CH2
通过键合反应制备：主要为硅氧烷型键合相，是 通过硅胶和氯硅烷进行烷基化反应制得，如ODS 的键合反应如下：
R为氯时，可进一步通过硅氧烷键键合烷基
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101-9
4. 性质和特点 （1）化学键合相的性质
含碳量：代表键合量，以含碳百分数表示。