急性白血病流式细胞术免疫分型的特点及临床意义

流式白血病诊断标准白血病是一种严重的血液疾病，它由骨髓中白细胞的恶性增殖引起。

白血病可以分为急性和慢性两种类型，根据病变的细胞类型又可分为淋巴细胞白血病和髓细胞白血病。

由于白血病的早期症状通常不明显，因此诊断时常常需要结合多种方法，流式细胞术是其中重要的一种。

下面我将针对流式细胞术在白血病诊断中的应用，制作一份2000字的中文文档。

一、流式细胞术概述流式细胞术是利用细胞表面特异性抗原的单克隆抗体通过细胞表面标记的荧光素标记，然后利用流式细胞仪对荧光素标记的细胞进行检测和分析的一种生物学技术。

这种技术主要应用于白血病的诊断和分类、溶血性疾病、免疫反应细胞数量的统计等。

在白血病的诊断和分类中，流式细胞术可通过检测不同免疫分型的表面抗原，帮助医生确定病变细胞的类型，进而指导治疗方案的制定。

二、流式细胞术在白血病诊断中的应用1. 急性白血病的诊断在临床上，对于急性白血病的诊断，流式细胞术是非常重要的辅助方法。

通过检测患者骨髓或外周血中异常增生的白细胞，可以根据其表面标记来区分不同的白血病亚型。

急性淋巴细胞白血病常表示为T细胞或B细胞的异常增生，而急性髓系白血病则表现为髓系幼稚细胞的异常增生。

流式细胞术通过检测表面抗原CD10、CD19、CD20等，可以辅助医生对急性白血病的类型进行准确诊断。

2. 慢性白血病的诊断对于慢性白血病的诊断，流式细胞术同样发挥着重要的作用。

典型的慢性淋巴性白血病常表现为B细胞的异常增生，而慢性髓细胞白血病则以成熟淋巴细胞或髓系细胞的异常增生为特征。

利用流式细胞术检测CD5、CD23、CD38等表面抗原，可以协助医生对慢性白血病的类型进行明确诊断。

三、流式细胞术在白血病治疗监测中的应用除了白血病的诊断和分类，流式细胞术还可以在治疗过程中进行监测。

通过检测患者骨髓或外周血中的病变细胞，可以评估治疗的疗效和病情的变化。

在白血病治疗过程中，流式细胞术可以帮助医生判断复发情况、指导随访治疗，并且可以在线粒体或溶酶体表面标识物的发生、发展以及功能改变等进行深入研究，这对于指导治疗和预后评估是非常有益的。

·论著·成人急性淋巴细胞白血病免疫表型的特点分析王晓雪，王萍萍，梁颖，李艳，颜晓菁（中国医科大学附属第一医院血液科，沈阳110001）摘要目的探讨成人急性淋巴细胞白血病（ALL）免疫表型的特点和临床意义。

方法应用流式细胞术检测57例初诊成人ALL患者的免疫表型，分析其临床特点和意义。

结果B细胞急性淋巴细胞白血病（B⁃ALL）患者中CD19、CD22表达阳性率明显高于CD10和CD20（P<0.05）。

T细胞急性淋巴细胞白血病（T⁃ALL）中CD7和cCD3表达阳性率高。

早期抗原CD34、CD38在各种分型ALL中均高表达。

HLA⁃DR仅在B⁃ALL中呈较高的阳性表达率。

My+⁃ALL和My-⁃ALL患者比较，基本资料、完全缓解率和复发率均无统计学差异（P>0.05），但My+⁃ALL患者早期抗原CD34和HLA⁃DR抗原阳性表达率明显高于My-⁃ALL患者（P<0.05）。

细胞遗传学分析提示，核型异常组患者复发率高。

高危核型组患者较标危核型组CD20和CD13表达强（P< 0.05）。

结论成人ALL患者免疫分型及染色体核型有着明显的异质化特点，染色体核型异常患者复发率高，可以为临床医生对ALL进行分层诊断和个体化治疗提供依据。

关键词急性淋巴细胞白血病；免疫分型；流式细胞术；细胞遗传学中图分类号R733.7文献标志码A文章编号0258-4646（2015）10-0904-05网络出版地址Immunophenotype Analysis of Adult Patients with Acute Lymphoblastic LeukemiaWANG Xiao⁃xue，WANG Ping⁃ping，LIANG Ying，LI Yan，YAN Xiao⁃jing（Department of Hematology，The First Hospital，China Medical University，Shenyang110001，China）Abstract Objective To study the immunophenotype and chromosome karyotype of57adult patients with newly⁃diagnostic acute lymphoblastic leukemia（ALL）.Methods The immunophenotype and chromosome karyotype of57adult patients with newly⁃diagnostic ALL were determined by using flow cytometer and karyotyping，and then the clinical characteristics and significance were analyzed.Results In patients with B cell acute lymphoblastic leukemia（B⁃ALL），the expression of CD19and CD22were significantly higher than CD10and CD20（P<0.05）.The expression of CD7and CD3were much higher in patients with T cell acute lymphoblastic leukemia（T⁃ALL）.As for the early antigen，patients of all subtypes of ALL showed high expression rate of CD34and CD38.In addition，the HLA⁃DR was only detected in B⁃ALL.There was no difference in comparison with clinical characteristics，total rate of CR and rate of relapse between ALL with and without myeloid antigen expression.The expression rate of CD34and HLA⁃DR was higher in My+⁃ALL（P<0.05）.The relapse rate was much higher in these patients with abnormal karyotype than other pa⁃tients（P<0.05）.Patients with high⁃risk karyotype showed higher expression rates of CD20and CD3than those with standard⁃risk.Conclusion The immunophenotypes and chromosome karyotypes show obviously heterogeneous features，and the patients with abnormal karyotypes have higher relapse rate.These above mentioned methods are applicable for the diagnosis and individualized treatment of ALL patients.Key words acute lymphoblastic leukemia；immunophenotype；flow cytometry；chromosome karyotype急性淋巴细胞白血病（acute lymphoblastic leu⁃kemia，ALL）是血液系统的恶性肿瘤，成人与儿童相比疾病恶性程度高，患者预后较差，生存期短［1］。

流式白血病检测是一种常用的实验室检测方法，可用于诊断和监测白血病。

以下是一些常见的流式白血病检测指标：
1. 免疫表型：通过检测细胞表面的特定抗原或标记物，确定白血病细胞类型。

例如，在急性淋巴细胞白血病（ALL）中，常见的免疫表型指标包括CD10、CD19和CD20等。

2. DNA细胞倍体性：通过测量细胞中DNA含量的变化，判断细胞是否存在异常的染色体数量或结构。

这对于诊断和分型白血病具有重要意义。

3. 克隆性分析：利用多参数流式细胞术，检测白血病细胞中的克隆性异常。

这可以帮助确定异常细胞的来源和进展情况。

4. 红细胞内吞作用：通过检测红细胞内部存在的白血病细胞或细胞碎片，了解疾病的程度和进展。

5. 骨髓细胞形态学分析：通过观察和评估骨髓细胞的形态学特征，包括细胞形状、大小、核与胞浆比例等，判断是否存在白血病细胞。

这些指标通常结合使用，以获得更准确的白血病诊断和监测结果。

具体的指标选择和解读还需要根据医生的建议和实际情况进行。

1。

【参考范围】CD34+细胞在正常外周血中占有核细胞的0.00001～0.0001(0.001％～0.01%），骨髓0.005～0.015(0.5％～1.5%)，脐血0.005～0.035(0.5%～3.5%）。

【影响因素】骨髓或外周血白细胞要用PBS稀释至1×10^6/ml后进行免疫标记，并注意设立相应的同型对照。

【临床意义】1．外周血造血干细胞（PBSC）采集前CD34阳性细胞动员有效性的监测可以指导临床制定采集计划。

一般来说，外周静脉血有核细胞中CD34+细胞达到0.001(0.10%）以上时，可以考虑行PBSC单采术。

否则，应继续动员。

2．各种造血干细胞移植物的CD34+细胞剂量控制BMT、PBSCT的CD34+细胞剂量＞2×10^6/kg，脐血干细胞移植时，CD34+细胞剂量可少至BMT成PBSC的1/10，即2×10^5/kg。

3．化疗强弱的掌握化疗后血象的恢复快慢取决于对造血干／祖细胞损伤的强度。

CD34+细胞的测定可以判断化疗的强度。

要求化疗强度控制在杀伤一定比例而非所有CD34+细胞为度。

4．贫血的鉴别（如再障、缺铁性贫血）如果再障的原因属于细胞受累，则CD34+细胞可以明显降低（<0.01)，缺铁性贫血时，CD34+细胞数量应在正常范围之内。

5．基因治疗CD34+的HSC作为缺陷基因的靶细胞有它独特的优点，因为HSC具有自我更新的能力，因此，缺陷基因导入此类细胞后能维持终身，从而彻底治愈疾病。

显然，CD34+HSC 的精确测定显得非常重要。

【参考范围】CD19+:0.10～0.15(10%～15%）。

【影响因素】1．标本最好用EDTA抗凝，其次用肝素。

2．标本要新鲜采集，不能发生凝血。

3．制备细胞悬液时，使用标准溶血剂以使红细胞充分溶解。

4．血液采集后，应尽快进行免疫荧光染色和固定，最迟不能超过6h。

5．标记后的细胞应尽快上机检测，最迟不能超过72h。

急性白血病MICM分型：白血病MICM分型，是指形态学（morphology）、免疫学（immunology）、细胞遗传学（cytogenetics）、分子特征（molecular）分型形态学分型（FAB）分型1.急性非淋巴细胞性白血病（ANLL）或急性髓系白血病（AML）：Ｍ１型：急性原粒细胞性白血病未分化型，骨髓中原粒细胞≥90％，POX染色阳性率＞3％。

Ｍ２型：急性原粒细胞性白血病部分分化型，以原幼粒细胞为主，早幼粒细胞＞3％，中、晚幼及成熟粒细胞＞10％为Ｍ２a型。

Ｍ３型：急怀多颗粒早幼粒细胞性白血病，以颗粒增多的异常早幼粒细胞为主，＞30％。

其又分为粗颗粒型（Ｍ３a）和细颗粒型（Ｍ３b）。

Ｍ4型：急性粒－单核细胞性白病，粒系及单核细胞均增生。

Ｍ５型：急性单核细胞性白血病，Ｍ5a为原单核细胞型，原单核＞80％；Ｍ5b为部分分化型，以幼单核细胞为主，原单核＜80％。

Ｍ6型：急性红白血病，原幼红细胞≥50％，非红系细胞中原始细胞＞30％。

Ｍ7型：急性巨核细胞性白血病，原巨核细胞＞30％，并经电镜、血小板过氧化物酶检查、血小板免疫标志物或血小板膜糖蛋白Ⅱb／Ⅲa检查等证实。

Ｍ0型：近年确定，为髓系最早阶段的白血病，形态学上极少髓系分化，不能鉴别，必须用免疫标志物确定。

2.急性淋巴细胞性白血病(ALL)：L1：以小原淋巴细胞为主，大小较一致。

L2：以大原淋巴细胞为主，大小不一致。

L3：以大原淋巴细胞为主，胞质内含大量空泡。

3.急性白血病的主要化学染色特点：免疫学分型－基本免疫表型1.急性非淋巴细胞白血病（ANLL）FAB分型与免疫标志：2.急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)FAB分型与免疫学标志：3.急性非T淋巴细胞白血病(non-T-ALL)FAB分型与免疫学标志：4. 混合细胞性白血病：有极少部分病人白血病细胞为淋巴系和髓系细胞双克隆或同一细胞系免疫标志双表型，即混合细胞性白血病。

此型白血病用形态方法极难诊断，必须结合多参数流式细胞术分析才能确诊。