红酵母培养基

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146种常见培养基的配方

146种常用培养基配方THE COMPOSITION OF MEDIA培养基及成分1. Acetobacter Medium (醋酸菌培养基)Glucose (葡萄糖) 100g Yeasst extract (酵母膏) 10gCaCO3 20g Agar (琼脂) 15gDistilled water (蒸馏水) 1000ml Adjust (调) pH to 6.8适用范围：恶臭醋酸杆菌混浊变种2. Nutrient Agar (营养肉汁琼脂)Pepton (蛋白胨) 5g Beef extract (牛肉膏) 30gNaCl 5g Agar (琼脂) 15gDistilled water (蒸馏水) Adjust (调) pH to 7.0-7.2[Note]：When cultivation of Bacillus，5mg of to MnSO4.H2O may be added . It is favorable to promote spore formation .适用范围：产气气杆菌、粪产碱杆菌、蜡状芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌蕈状变种、地衣形芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌、尘埃芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、嗜热脂肪芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌深黑变种、苏云金芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌蜡螟亚种（青虫菌）、苏云金芽孢杆菌戈尔斯德变种、苏云金芽孢杆菌猝倒亚种、产氨短杆菌、黄色短杆菌、谷氨酸棒状杆菌、北京棒杆菌、大肠埃希氏菌（大肠杆菌）、铜绿假单胞菌（绿脓杆菌）、凸形假单胞杆菌、荧光假单胞菌、弯曲假单胞菌、恶臭假单胞菌、假单胞杆菌、藤黄八叠球菌、亚黄八叠球菌、尿素八叠球菌、金黄色葡萄球菌、运动发酵单孢菌3. Azotobacter Medium (固氮菌培养基)KH2PO4 0.2g K2HPO4 0.8gMgSO4.7H2O 0.2g CaSO4.2H2O 0.1gNa2MoO4.2H2O Trace(微量) Yeast axtract(酵母膏) 0.5gMannitol(甘露醇) 20g FeCl3 Tract(微量)Distilled water (蒸馏水) 1000ml Agar (琼脂) 15gAdjust (调) pH to 7.2适用范围：固氮菌、胶质芽孢杆菌4. Corn Meal Medium (玉米粉培养基)Maize flour (玉米粉) 5g Peptone (蛋白胨) 0.1gGlucose (葡萄糖) 1g Tap water (自来水) 1000ml[Note]:Boil the mixture in autoclave at 121℃ for 1 hr. distribute the medium into 18ⅹ18 mm tubes , each contains 10 ml of the liquid , then autoclave at 121℃ for 1 hr . again (15磅蒸煮1小时,分装入18ⅹ18毫米试管,每管深度达6厘米。

紫外诱变筛选海洋红酵母S8的尿嘧啶缺陷型菌株

T h e Sel ec t io n o fU r a c ilA u o t r o p hSt r a i nof b U V- i nd u c edM u t a t i on
W a ng Yu gu a ng 1 LeiLu a ng 1 Su n J i a nbo
1 100l菌液待梯度照射完毕将所取的经梯度紫外照射的菌液涂布于固体完全培养基上28的活菌进行计数实验进行3次重复次重复的平均数作为每个照射剂量的活菌数以0h的菌液菌数为基准计算各个uv梯度对s8的致死率并绘制不同uv照射时间对红酵母菌株s8的致死率曲线抑制实验分别取2mls8菌液o16加到5瓶100ml的完全培养基中同时添加不同浓度的5foa分别mgml010mgml020mgml05mgml和10mgml每瓶各取05ml菌液样品测定其600值再把这些三角瓶置于28摇床中进行振荡培养每10h取05养40h绘制在5种浓度的5foa作用下s860016的s8菌液1ml收集菌体用10ml柠檬酸盐缓冲液洗涤2次用无菌水稀释10紫外灯30照射完毕取500l涂布在含有10mgml5fo和10mgl尿嘧啶的选择培养基上28避光培养4d观察其生长情况突变株的回复突变检测将选择培养基平板上长出的单菌落分别同时接种到基本培养基和选择培养基上28培养观察其在两种培养基上的生长情况重复3次试验筛选出只在选择培养基上生长而不在基本培养基上生长的突变株为了进一步确定突变株的稳定性分别将筛选得到的突变株用液体基本培养基于28振荡培d观察其能否生长重复3次试验突变株产胡萝卜素性能的测定将红酵母突变菌株接种在1l的发酵培养基中于28250rmin培养72h将培养好的菌液5000rmin离心10min去上清用蒸馏水洗涤菌体沉淀3下干燥至恒重检测细胞生物产量称重后用3momin后于沸水中放置5min迅速冷却再离心洗涤沉淀除去上清液得到细胞碎片在此碎片中加入适量的丙酮溶液搅拌振荡后离心上清液即为色素浸提液此色素浸提液在波长47nm下测得其吸光度按下列公式计算胡萝卜素的含量

酵母菌的分离与纯化

酵母菌的分离与纯化酵母菌的分离与纯化小组组员: 一、实验目的1.学习分离纯化酵母菌的技术与方法2.了解培养基的配置与灭菌技术3.增强无菌操作技术的意识二、基本原理从混杂的微生物群体获得只含某一种某一株微生物的过程叫做微生物分离与纯化，酵母菌常见于含糖份比较高的环境中，如果园土、菜园土及果皮等的表面。

多数酵母菌喜欢偏酸条件，最适pH为4.5-6.0.酵母菌生长迅速，容易分离培养。

马丁氏培养基是一种用来分离真菌的选择性培养基。

此培养基是由葡萄糖、蛋白胨、KH2PO4、MgSO4·7H2O、孟加拉红(玫瑰红，Rose Bengal)和链霉素等组成。

其中葡萄糖主要作为碳源，蛋白胨主要作为氮源，KH2PO4和MgSO4·7H2O作为无机盐，为微生物提供钾、磷和镁离子。

而孟加拉红和链霉素主要是细菌和放线菌的抑制剂，对真菌无抑制作用，因而真菌在这种培养基上可以得到优势生长，从而达到分离真菌的目的。

三、实验材料及用具1.用品：苹果、葡萄糖、琼脂、水、1%孟加拉红水溶液、马铃薯2.设备与器材：1ml的无菌吸管、无菌培养皿等.四、实验步骤1、马铃薯培养基的配置培养基成分:马铃薯40克、蔗糖（葡萄糖）4克、琼脂4克、水200毫升、 pH 自然。

配置方法:（1）配制20%马铃薯浸汁：取去皮马钓薯40g，切成小块，加水200ml.加热煮游30 min ，用纱布过滤，然后补足失水互所需体积。

121Pa灭菌30min.即成20%马铃馨漫汁，贮存备用。

（2）配制时，按每100ml 马铃薯浸汁加入2g蔗糖，加热煮沸后加入4克琼脂，继续加热融化并补足失水。

（3）分装、加塞，包扎。

（4）高压蒸汽灭菌：121Pa灭菌30min（5）将灭菌培养基放入37C°的温室中培养24-48小时，观察是否有菌落生成，以检查灭菌是否彻底。

2、倒平板：将马铃薯培养基加热融化，冷却至55--50C°时，倒平板，倒三皿3、制备苹果悬液（1）首先将1g苹果在研钵中磨细，放入装有10ml生理盐水和玻璃珠的100ml三角瓶中去。

酵母菌的培养与观察

酵母菌的培养与观察一、实验目的1. 学会选择酵母菌在土壤中采样点并合理取样；2. 掌握PDA培养基的配制方法；3. 学习分离纯化酵母菌的基本操作技术，掌握微生物培养方法以及接种技术。

4. 学会使用高压蒸汽灭菌锅、显微成像系统等实验仪器设备；5. 培养并学习微生物实验的一般思维及方法；6. 了解酵母菌的生长特性、种类；7. 观察并对比土壤，水果及酒曲中酵母菌的形态及种类。

二、实验原理酵母菌是单细胞真核微生物。

酵母菌细胞的形态通常有球形、卵圆形、腊肠形、椭圆形、柠檬形或藕节形等。

比细菌的单细胞个体要大得多，一般为1~5微米′5~30微米。

酵母菌无鞭毛，不能游动。

酵母菌在自然界分布广泛，目前已知有1000多种酵母，根据酵母菌产生孢子(子囊孢子和担孢子)的能力，可将酵母分成三类：形成孢子的株系属于子囊菌和担子菌。

不形成孢子但主要通过芽殖来繁殖的称为不完全真菌，或者叫“假酵母”。

目前已知大部分酵母被分类到子囊菌门。

大多数酵母菌为腐生，其生活最适pH为4.5—6，常见于含糖份较高的环境，如果园土，菜地图及果皮等职务表面。

酵母菌生长迅速，易于分离培养，在液体培养集中，酵母菌比霉菌生长的快。

利用酵母菌喜欢酸性环境的特点，常用酸性液体培养基获得酵母菌的培养液（这样做可抑制细菌生长），然后再固体培养基上划线分离。

三、实验器材1.培养基配方PDA培养基：马铃薯（去皮）100g，蔗糖与葡萄糖分别10g，水500g，琼脂10g.PDA乳酸液态培养基：马铃薯（去皮）40g，蔗糖与葡萄糖分别4g，水200g，乳酸1ml 2. 仪器及其它用品小铲，500mL三角锥形瓶，500mL及300mL烧杯，药勺，无菌培养皿，剩9mL无菌水试管8支，无菌玻璃珠，接种环，酒精灯，称量纸，高压蒸汽灭菌器，超净工作台，移液器，分析天平，恒温培养箱，微波炉显微成像系统。

四、培养基制作方法1.PDA培养基的制作把马铃薯去皮，切成小块状，称量100克，放进500mL的水中用电热炉加热，边用玻璃棒搅拌，以免糊底，煮沸至马铃薯成糊状便停止加热。

红酵母中β-胡萝卜素提取工艺研究

拉霉，但它有显著的优势，利用麦麸、废糖蜜等
陈昌福等ｎ。在饵料中添加红酵母具有提高日
农副产品和工业废料进行培养，成本较低，周期本对虾幼虾的成活率、促进生长和增加对环境因短，发酵易控制，・利于工业化生产，菌体无毒子耐受力的效果。张超等经过研究提出了其作素，并含有丰富的蛋白质和维生素，可不提取色为珍稀水产品饲料及其添加剂的潜力。谢爱娣
。 ¨ Ｊ：
的含量以及Ｂ一胡萝卜素提取方法，以此得知以量的氯仿进行溶解，再用石油醚定容至１００ｍＬ红酵母作为饲料添加剂的理论添加量。
容量瓶中，分别准确称取２、４、８、１６、２０ｍＬ
中图分类号￥８１６．７３文献标识码Ｂ文章编号１６７２ — ９６９２（２０１３）１２ — ００５５ — ０６
【摘
要】本文对从红酵母中提取类胡萝卜素的生产方法进行了初步研究，比较了不同破壁方法
果蔬中提取胡萝卜素存在着成本高、价格贵、工厂，饲料中的天然色素源为玉米中的玉米黄质，
艺复杂及着色力差等不足之处闭。本文以红酵母其着色效果仅有５～６级，但鸡、鸭蛋出口规
为原料，通过细胞培养、细胞破碎及色素提取等定：蛋黄色泽达到８度方符合国际标准【 ” ｑ。化
畜牧兽医
ｌ试验综ｉｄｉ
红酵母中ｐ一胡萝卜素提取工艺研究

各种培养基成分

1．营养肉汤成分：蛋白胨10g，牛肉膏3g，氯化钠5g，蒸馏水1000mL，pH7.4。

制法：按上述成分混合，溶解后校正pH，121℃高压灭菌15min。

2．营养琼脂培养基成分：蛋白胨10g，牛肉膏3g，氯化钠5g，琼脂17g，蒸馏水1000mL，pH7.2。

制法：将除琼脂外的各成分溶解于蒸馏水中，校正pH，加入琼脂，分装于烧瓶内，121℃，15min高压灭菌备用。

3．MRS培养基成分：蛋白胨10g，牛肉膏10g，酵母粉5g，K2HPO4 2g，柠檬酸二铵2g，乙酸钠5g，葡萄（琼脂15~20g），蒸馏水1000mL。

糖20g，吐温80 1mL，MgSO4 .7H2O 0.58g，MnSO4 4H2O 0.25g，制法：将以上成分加入到蒸馏水中，加热使完全溶解，调pH至6.2~6.4，分装于三角瓶中，121℃,灭菌15min。

4．脱脂乳培养基成分：牛奶，蒸馏水。

制法：将适量的牛奶加热煮沸20~30min，过夜冷却，脂肪即可上浮。

除去上层乳脂即得脱脂乳。

将脱脂乳盛在试管及三角瓶中，封口后置于灭菌锅中在108℃条件下蒸汽灭菌10~15min，即得脱脂乳培养基。

5．培养基A成分：蛋白胨10.0g，酵母提取物1.0g，葡萄糖10.0g，NaCL5.0g，琼脂15.0g，水1000mL。

制法：将以上成分加入到蒸馏水中，加热使完全溶解，调pH至7.0~7.2，分装于三角瓶中，121℃，灭菌15min。

6．PTYG培养基成分：胰胨Tryptone（Oxoid）5g，大豆蛋白胨5g，酵母粉（Oxoid）10g，葡萄糖10g，吐温80 0 1mL，琼脂15~20g，L-半胱氨酸盐酸盐0.05g，盐溶液4mL。

制法：将以上成分加入到蒸馏水中，加热使完全溶解，调pH至6.8~7.0，分装于三角瓶中，115℃灭菌30min。

盐溶液制备：无水氯化钙0.2g，K2HPO4 1.0g，KH2PO4 1.0g，MgSO4 。

7H2O 0.48g，NaCO310g，NaCL 2g，蒸馏水1000mL，溶解后备用。

各种培养基的配方

各种培养基的配方在微生物学中，培养基是为微生物提供营养和生长所必需的营养物质的混合物，可以根据微生物的特性和需求来设计不同成分的培养基。

不同种类的微生物需要不同的培养基来生长和繁殖，为了获得最佳的生长效果，需根据微生物的特性制备相应的培养基。

下面介绍几种常用的培养基及其配方。

1. 加尔沙基培养基（Luria-Bertani，LB培养基）LB培养基是一种常用的细菌培养基，适用于大多数细菌的培养。

其成分包括牛肉浸出物、酵母提取物和氯化钠，PH为7.0。

配方：- 水：1000ml-氯化钠：10g-酵母提取物：5g-牛肉浸出物：10gLB培养基的主要特点是富含氨基酸和碳源，适合于细菌的快速生长。

2. PDA培养基（Potato Dextrose Agar）PDA培养基是一种适合真菌和霉菌生长的培养基，成分简单易得。

它主要包括马铃薯提取物、葡萄糖和琼脂。

PDA培养基是一种半固体培养基，适合于真菌的产孢。

配方：-马铃薯提取物：200g-葡萄糖：20g-琼脂：20g-静置180s后，灭菌PDA培养基适合于真菌和霉菌的生长，常用于菌落计数和生长的研究中。

3.营养琼脂培养基营养琼脂培养基是一种通用的培养基，适用于多种微生物的培养。

它主要包括蛋白水解物、酵母提取物、氯化钠和琼脂。

配方：-蛋白水解物：5g-酵母提取物：1g-氯化钠：5g-琼脂：15g- 水：1000ml-蒸馏后灭菌营养琼脂培养基适合于大多数微生物的生长，是最常用的培养基之一4. 马尼特尔-梅尔特培养基（Mannitol-Salt Agar，MSA）MSA培养基是一种选择性培养基，主要用于金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）的分离和鉴定。

它的成分包括马尼托尔、氯化钠、酵母提取物和琼脂。

配方：-马尼托尔：5g-氯化钠：75g-酵母提取物：1g-琼脂：15g- 水：1000ml-蒸馏后灭菌MSA培养基在金黄色葡萄球菌的生长过程中，可以通过红色菌落的形成来进行识别。

发酵工程实验方案

发酵⼯程实验⽅案⽣物发酵⼯程实验实验⼀................................ 利⽤酵母富集培养基分离酵母菌实验⼆... ......................... 分离纯化酵母菌实验三... ......................... 酵母菌的保藏实验四............................... ⼤肠杆菌⽣长曲线测定及pH对⽣长曲线的影响实验五.............................. 发酵罐的构造及操作实验六.............................. 发酵罐实灌灭菌操作实验七.............................. 利⽤7L发酵罐对地⾐芽孢杆菌进⾏补料分批发酵培养实验⼋..............................淀粉酶⽣成曲线的测定实验⼀、利⽤酵母富集培养基分离酵母菌⼀实验⽬的1、通过本实验加深理解酵母富集培养基的原理和应⽤；2、掌握涂布分离技术；3、熟悉从⾃然样品⼟壤中分离酵母菌的具体操作⽅法⼆实验原理酵母菌主要分布于含糖⾼和酸度较⾼的⾃然环境中，在果园表⼟和浆果、蔬菜、花蜜和蜜饯等的表⾯很容易找到它们。

在⼟壤中，由于各种微⽣物混杂在⼀起且酵母菌的数量相对⽐较少，故可以利⽤酵母菌富集培养基进⾏富集培养，该培养基含有较⾼的葡萄糖（5%）和较酸（pH为4.5）的环境，以及能抑制多种杂菌（许多细菌、放线菌和快速⽣长霉菌）的孟加拉红（玫瑰红），故⼗分有利于酵母菌的增值。

三实验材料⼟壤（标注采集地点）培养基：酵母富集培养基（5%葡萄糖、0.1%尿素、0.1%硫化铵、0.25%磷酸⼆氢钾、0.05%磷酸氢⼆钠、0.1%七⽔合硫酸镁、0.01%七⽔合硫酸铁、0.05%酵母膏、0.003%孟加拉红、1.9%琼脂 pH4.5）移液枪、培养⽫、天平、涂布棒、棉绳、250ml三⾓瓶、75%酒精棉花、摇床等四实验步骤1、采集⼟样：采集葡萄园或其他果园、菜地等的⼟壤若⼲（要求：先铲去2~3cm 的表⼟，再采集⼟样）适当研碎。

酿酒酵母培养基及发酵条件的优化研究

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3.27 3.72 4.47 3.50
3.82 3.73 3.63 4.07
4.32 3.95 3.30 3.83
1.05 0.23 1.17 0.57
活菌数（亿 cfu/ml）
活菌数（亿 cfu/ml）
2015 年第 36 卷第 14 期总第 491 期
3.3 氮源及添加量对发酵的影响分别以无机氮源（氯化铵、磷酸氢二铵、硫酸铵、
柠檬酸铵和尿素）和有机氮（蛋白胨和酵母粉）为唯一氮源的发酵结果显示（图 3A），蛋白胨和酵母粉有利于酿酒酵母的生长及增殖，活菌数较高；而无机氮源不利于酿酒酵母的生长及增殖，活菌数较低。蛋白胨添加量为 4.0%时，发酵活菌数高于其它添加量（见图 3B）。
改良马丁氏培养基：葡萄糖 1%、蛋白胨 0.5%、 K2HPO4 0.1%、MgSO4 0.05%，pH 值 6.0。检测培养基为种子培养基中加 1.5%琼脂粉。
基础发酵培养基：葡萄糖 5% 、蛋白胨 2% 、 KH2PO4 0.1%、K2HPO4 1.0%、MgSO4·7H2O 0.1%、NaCl 0.1%。 2 方法 2.1 酿酒酵母生长曲线的绘制
酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)是单细胞微生物，属于真菌类，耐酸性强[4]。活性干酵母、酵母培养物、酵母提取物、酵母细胞壁等都是我国农业部

红发夫酵母产虾青素研究进展

红发夫酵母产虾青素研究进展朱明军林炜铁吴海珍吴振强梁世中(华南理工大学食品与生物工程学院,广州,510640)摘要虾青素是一种极具潜力的色素和抗氧化剂,在水产养殖、饲料、食品和医药工业具有应用前景。

本文对虾青素的生物来源,产虾青素红发夫酵母菌株的筛选,培养基的优化以及虾青素的提取等进行了论述。

关键词虾青素红发夫酵母类胡萝卜素虾青素,3,3 二羟基 4,4 二酮基 , 胡萝卜素,是一种非维生素A原的类胡萝卜素,在动物体内不能转变为维生素A,但它有极强的抗氧化性能。

动物试验表明它有抑制肿瘤发生,增强免疫功能等多方面的生物学功能,因此在功能食品和医药方面有广泛的应用前景[1]。

同时虾青素又是一种良好的着色剂,是鲑鱼等鱼类的主要色素,而动物缺乏合成类胡萝卜素的能力,因此虾青素在水产养殖方面具有重要价值,有1亿美元市场[16]。

虾青素的主要生物来源是甲壳类动物和提取液、水球藻和红发夫酵母(Pha ffia rhodo zyma)。

甲壳类动物虾青素含量低,不适合作为虾青素的大规模来源;水球藻虾青素含量高,达到0.2%~2%,但水球藻自养培养周期长,需破壁释放虾青素,因此进行大规模生产也比较困难;红发夫酵母具有作为色素生物来源的一些必要的特征:快速异养代谢,培养时间短,能够在发酵罐中实现高密度培养等。

但是野生型红发夫酵母虾青素含量还不够高,只有200~300 g/g干细胞,与工业生产还有一定的差距。

因此,这3种生物来源目前均缺乏与合成添加剂竞争的能力[17]。

在上面3种生物来源中,红发夫酵母具有生长速度快,发酵周期短,以及色素提取后菌体单细胞蛋白可作为饵料、饲料添加剂等优点而成为目前研究的重点。

红发夫酵母属于担子菌纲(Basid iomycetes)的红发夫酵母属。

这种酵母菌最早由Phaff等人在美国阿拉斯加的高山上和日本国采集到,后经Miller鉴定并命名为新属红发夫酵母属种,1976年Andrews等发现其产生虾青素[2]。

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一、红酵母培养基（中国热带农科院生物研究所）
分离培养基：
葡萄糖10 g/L，蛋白胨2 g/L，酵母提取物1 g/L，谷氨酸钠1 mg/L；海水60%，去离子水40%；
发酵培养基：
葡萄糖2%、蛋白胨2%、酵母提取物0.3%、核黄素2×10-6 mol/L
二、海洋红酵母菌数的最优培养条件是（天津农学院）:
蔗糖1.5 %, 蛋白胨1.0 %, 酵母膏0.5 %, 磷酸二氢钾0.15 %, 硫酸镁0.01 %, 氯化钠1.0 %,初始pH 值5.0, 接种量8 %, 摇瓶装量为80 mL/500 mL
三角瓶发酵参数设置：
发酵温度为28 ℃, 摇床200 r/min
在此优化的培养条件下, 海洋红酵母的菌数可达9.7 个/mL, 比优化前发酵培养基菌数( 5.6 亿个/mL) 提高了73.2 %,比单因素试验结果( 8.1 亿个/mL) 提高了19.8 %。

发酵罐参数设置：
采用常规微生物发酵工艺, 以10 %的接种量接入100 L 全自动发酵罐中。

发酵起始pH 控制在4.8 左右,搅拌速率180 r/min, 通气量180 m3/h, 温度28 ℃, 罐压0.05 MPa。

每隔0.5 h 采样进行糖含量、pH 值及菌数的检测。