脂肪间充质干细胞复合多孔壳聚糖微球修复大鼠肝损伤
黄坤;刘承利;韩公海;刘锐;陈伟伟;丁晓;汤贺;彭江
【摘 要】背景:随着干细胞治疗及组织工程的发展,利用生物相容性好的生物高分子材料结合脂肪间充质干细胞构建肝脏组织工程微单元成为治疗肝脏疾病的新策略.目的:探讨脂肪间充质干细胞复合多孔壳聚糖微球对急性肝损伤的修复能力.方法:将SD乳鼠脂肪间充质干细胞与多孔壳聚糖微球在体外复合培养,分别在培养第1,3,5天观察细胞在微球上增殖情况.取36只SD大鼠(北京市维通利华实验技术有限公司提供),随机分为3组(n=12):空白对照组,腹腔注射生理盐水;急性肝损伤组,腹腔注射10％四氯化碳-橄榄油;脂肪间充质干细胞-多孔壳聚糖微球组,腹腔注射10％四氯化碳-橄榄油,于注射后第1天通过手术将脂肪间充质干细胞-多孔壳聚糖微球平铺于肝脏表面.分别于注射后第1,2,3,7天进行大体、血清学及组织学评价.结果与结论:①脂肪间充质干细胞与多孔壳聚糖微球复合后第1,3,5天,经过活/死染色观察到细胞可在微球上正常生长(死细胞数量远远少于活细胞数量),且细胞在不断增殖;②注射后第1,2,3,7天,脂肪间充质干细胞-多孔壳聚糖微球组的大体形态、肝功能及组织学评价均优于急性肝损伤组,从第3天开始脂肪间充质干细胞-多孔壳聚糖微球组与空白对照组已无明显差异;③结果表明,将脂肪间充质干细胞-多孔壳聚糖微球移植入肝脏表面可加速肝损伤的修复.
【期刊名称】《中国组织工程研究》
【年(卷),期】2019(023)005
【总页数】7页(P716-722)
【关键词】肝损伤;脂肪间充质干细胞;壳聚糖;四氯化碳;肝功能;肝脏修复 【作 者】黄坤;刘承利;韩公海;刘锐;陈伟伟;丁晓;汤贺;彭江
【作者单位】安徽医科大学空军临床学院,安徽省合肥市230032;中国人民解放军空军总医院,北京市100142;中国人民解放军总医院全军骨科研究所,北京市100853;安徽医科大学空军临床学院,安徽省合肥市230032;中国人民解放军空军总医院,北京市100142;中国人民解放军总医院全军骨科研究所,北京市100853;昆明医科大学,云南省昆明市650500;安徽医科大学空军临床学院,安徽省合肥市230032;中国人民解放军空军总医院,北京市100142;安徽医科大学空军临床学院,安徽省合肥市230032;中国人民解放军空军总医院,北京市100142;中国人民解放军总医院全军骨科研究所,北京市100853;中国人民解放军总医院全军骨科研究所,北京市100853;中国人民解放军总医院全军骨科研究所,北京市100853
中国药物与Ｉ晦床２０１０年７月第１０卷第７期Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｒｅｍｅｄｉｅｓ＆Ｃｌｉｎｉｃｓ，Ｊｕｌｙ ２０１０，Ｖｏ１．１０，Ｎ ｏ７
骨髓间充质干细胞对急性肝衰竭
大鼠肠源性内毒素血症的保护作用
郝彦琴赵龙凤 贾因棠陈杰 ・７５９・
【摘要】 目的探讨骨髓间充质干细胞（ＢＭＳＣｓ）对硫代乙酰胺（ｒＩ’ＡＡ）所致急性肝衰竭大鼠肠源性内毒素 血症（ＩＥＴＭ）的保护作用。方法取雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠的骨髓贴壁培养获得ＢＭＳＣｓ，取３０只雌性Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分 为正常组、ＴＡＡ模型组和ＢＭＳＣｓ治疗组，每组１０只。ＴＡＡ ３００ ｍｇ／ｋｇ灌胃建立急性肝衰竭模型，２４ ｈ后重复灌胃， 正常组给予磷酸盐缓冲液（ＰＢＳ）２ ｍｌ灌胃，第２次灌胃后将ＢＭＳＣｓ经尾静脉注射到ＢＭＳＣｓ治疗组中．正常组和 ｒｒＡＡ模型组给予等量ＰＢＳ注射。ＢＭＳＣｓ治疗７２ ｈ后处死。腹主动脉采血，检测血清中丙氨酸转氨酶（ＡＬＴ）、天冬氨 酸转氨酶（ＡＳＴ）Ｉ）２及血浆内毒素含量，取部分肝组织及回肠作常规病理切片检查。结果与正常组比较，ＴＡＡ模型 组大鼠血清ＡＬＴ，ＡＳＴ活性以及血浆内毒素水平均显著上升（尸＜０．０５），ＢＭＳＣｓ治疗组大鼠血清Ａ ，ＡＳＴ活性以及 血浆内毒素水平与模型组相比均显著降低（Ｐ＜０．０５）。肝脏病理切片显示ＢＭＳＣｓ能够明显减轻ＴＡＡ对肝组织的炎 症性破坏。结论ＢＭＳＣｓ尾静脉移植对ｒｒＡＡ引起的急性肝衰竭大鼠ＩＥＴＭ有一定的保护作用。 【关键词】间质干细胞；肝衰竭，急性；肠源性内毒素血症
Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ ｏｆ ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｐｒｏｔｅｃｔ ａｇａｉｎｓｔ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｅｎｄｏｔｏｘｅｍｉａ ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ ａ－ ｃｕｔｅ ｌｉｖｅｒ ｆａｉｌｕｒｅ ｉｎ ｒａｔｓ ＨＡ０ Ｙａｎ－ｑｉｎ，ｚＨＡ０ Ｌｏｎｇ－ｆｅｎｇ，ＪＩＡ Ｙｉｎ－ｔａｎｇ，ＣＨＥＮ ｊ ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆＩｎｆｅｃｔｉｏｕｓ Ｄｉｓ— ｅａｓｅｓ．Ｆｉｒｓｔ ＣＺ ｎ Ｏ１ Ｍｅｄｉｃ Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｓｈａｎｘ Ｍｅｄｉｃ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｔａｉｙｕａｎ ０３０００１，Ｃｈｉｎａ 【Ａｂｓｔｒａｃｔ】０ｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｅｘｐｌｏｒｅ ｔｈｅ ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ（ＢＭＳＣｓ）ｔｒａｎｓ— ｐｌａｎｔａｔｉｏｎ ａｇａｉｎｓｔ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｅｎｄｏｔｏｘｅｍｉａ ｆＩＥＴＭ１ ｆｒｏｍ ｔｈｉｏａｃｅｔａｍｉｄｅ—ｉｎｄｕｃｅｄ ｆｒＩ１ＡＡ）ａｃｕｔｅ ｌｉｖｅｒ ｆａｉｌｕｒｅ ｉｎ ｒａｔｓ．Ｍｅｔｈ－ ｏｄｓ Ｔｈｅ ＢＭＳＣｓ ｗｅｒｅ ｐｕｒｉｆｉｅｄ ａｎｄ ａｍｐｌｉｆｉｅｄ ｂｙ ａｄｈｅｒｅｎｔ ｃｕｌｔｕｒｉｎｇ ｎ ｖｉｔｒｏ ｆｒｏｍ ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ ｏｆ ｍａｌｅ Ｗｉｓｔａｒ ｒａｔｓ． Ｔｈｉｒｔｙ ｆｅｍａｌｅ Ｗｉｓｔａｒ ｒａｔｓ ｗｅｒｅ ｒａｎｄｏｍｌｙ ａｓｓｉｇｎｅｄ ｔｏ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ．ｔｈｉｏａｃｅｔａｍｉｄｅ ｍｏｄｅｌ ｇｒｏｕｐ ａｎｄ ＢＭＳＣ ｔｒｅａｔｅｄ ｇｒｏｕｐ ｆｎ＝ｌ ｏ１．Ｔｈｅ ｒａｔ ｍｏｄｅｌｓ ｏｆ ａｃｕｔｅ ｌｉｖｅｒ ｆａｉｌｕｒｅ ｗｅｒｅ ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ ｇａｖａｇｅ ｏｆ ３００ ｍｇ／ｋｇ ＴＡＡ ｉｎ ｔｗｏ ｃｏｎｓｅｃｕｔｉｖｅ ｄａｙｓ，ｗｈｉｌｅ ｔｈｅ ｎｏｒｍａｌ ｇｒｏｕｐ ｒｅｃｅｉｖｅｄ ｇａｖａｇｅ ｏｆ ２ ｍｌ ＰＢＳ ａｔ ｔｈｅ ｓａｍｅ ｔｉｍｅ．Ａｆｔｅｒ ｔｈｅ ｓｅｃｏｎｄ ｇａｖａｇｅ．ｔｈｅ ＢＭＳＣ ｔｒｅａｔｅｄ ｇｒｏｕｐ ｗａｓ ｇｉｖｅｎ ｃａｕｄａｌ ｉｎｉｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ＢＭＳＣｓ ｗｈｉｌｅ ｔｈｅ ｎｏｒｍａｌ ａｎｄ ＴＡＡ ｇｒｏｕｐｓ ｗｅｒｅ ｉｎｊｅｃｔｅｄ ｗｉｔｈ ｓａｍｅ ｖｏｌｕｍｅ ｏｆ ＰＢＳ． Ａ１１ ｒａｔｓ ｗｅｒｅ ｓａｃｒｉｆｉｃｅｄ ａｔ ７２ ｈｏｕｒｓ ａｆｔｅｒ ＢＭＳＣｓ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ．Ｔｈｅ ｓｅｒｕｍ ＡＬＴ ａｎｄ ＡＳＴ，ａｎｄ ｐｌａｓｍａ ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ ｆＥ ｌｅｖｅｌｓ ｗｅｒｅ ｍｅａｓｕｒｅｄ．Ｔｈｅ ｌｉｖｅｒ ａｎｄ ｉｌｅｕｍ ｔｉｓｓｕｅｓ ｗｅｒｅ ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ ａｎｄ ｅｘａｍｉｎｅｄ ｆｏｒ ｒｏｕｔｉｎｅ ｐａｔｈｏｈｉｓｔｏｌｏｇｙ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ｌｅｖ— ｅｌｓ ｏｆ Ａ ． ＡＳＴ ａｎｄ ＥＴ ｗｅｒｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ＴＡＡ ｍｏｄｅｌ ｇｒｏｕｐ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｎｏｒｍａｌ ｇｒｏｕｐ ｆＰ＜ ０．０５），ａｎｄ ｉｎ ｔｈｅ ＢＭＳＣｓ ｇｒｏｕｐ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ＴＡＡ ｍｏｄｅｌ ｇｒｏｕｐ（尸＜０．０５）．Ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｓｔｕｄｙ ｓｈｏｗｅｄ ｎｏｔａｂｌｙ ｌｅｓｓ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｄａｍａｇｅ ｉｎ ｒａｔ ｌｉｖｅｒ ｔｉｓｓｕｅｓ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ＢＭＳＣ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｃａｕｄａｌ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ ｏｆ ＢＭＳＣ ａｐｐｅａｒｅｄ ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ａｇａｉｎｓｔ ＩＥＴＭ ｉｎ ｒａｔｓ ｗｉｔｈ ＴＡＡ—ｉｎｄｕｃｅｄ ａｃｕｔｅ ｌｉｖｅｒ ｆａｉｌｕｒｅ． 【Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ】 Ｍｅｓｅｎ ｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ；Ｌｉｖｅｒ ｆａｉｌｕｒｅ，ａｃｕｔｅ；Ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ Ｅｎｄｏｔｏｘｅｍｉａ
第３５卷第１期 ２０１４年１月 中山大学学报（医学科学版） ＪＯＵＲＮＡＬ ＯＦ ＳＵＮ ＹＡＴ－ＳＥＮ ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ（ＭＥＤＩＣＡＬ ＳＣＩＥＮＣＥＳ） Ｖｏ１．３５ Ｎｏ．１ Ｊａｎ．２０１４
人脐带问充质干细胞移植治疗小鼠慢性输卵管炎
李 田Ｈ，李小毛 ，张琪 ，何丹 ，潘藜捷 （中山大学附属第三医院１．妇产科；２．肝移植中心；３．病理科；４．疫苗研究所，广东广州５１０６３０）
摘要：【目的】观察人脐带间充质干细胞（ｈＵＣ—ＭＳＣ）移植对小鼠慢性输卵管炎的治疗作用，为慢性输卵管炎的临床治 疗提供新策略。【方法】从脐带中分离培养人脐带间充质干细胞，流式细胞术鉴定其免疫表型，并诱导成脂、成骨分化验证其 多向分化潜能。通过阴道内接种沙眼衣原体建立小鼠输卵管炎模型，感染后４周随机分成ｈＵＣ—ＭＳＣ移植组及对照组。ｈＵＣ— ＭＳＣ移植组小鼠阴道内接种人脐带间充质干细胞，对照组小鼠阴道内注射等体积ＰＢＳ。感染后８周，观察小鼠输卵管有无阻 塞、积水等慢性输卵管炎表现，病理切片观察组织形态学改变。【结果】分离培养的人脐带间充质干细胞符合间充质干细胞 的一般生物学特性。感染后８周，对照组小鼠均出现输卵管阻塞、积水等慢性输卵管炎表现，而ｈＵＣ—ＭＳＣ移植组仅２例出现 输卵管阻塞及积水，对照组小鼠慢性输卵管炎的发生率明显高于ｈＵＣ—ＭＳＣ移植组，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０１）。ｈＵＣ—ＭＳＣ 移植组输卵管病理切片显示，输卵管周围炎症细胞浸润较少。【结论】ｈＵＣ—ＭＳＣ移植可明显减少小鼠慢性输卵管炎的发生 和减轻其炎症程度，有可能为输卵管性不孕的临床治疗提供新的途径。 关键词：间充质干细胞；脐带；输卵管炎。 中图分类号：Ｒ７１１．３ 文献标志码：Ａ 文章编号：１６７２—３５５４（２０１４）０１—００２５—０７
Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｗｉｔｈ Ｈｕｍａｎ Ｕｍｂｉｌｉｃａｌ Ｃｏｒｄ Ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ
・ ３１８ ・ 中国康复理论与实践２０１０年４月第１６卷第４期Ｃｈｉｎ Ｊ Ｒｅｈａｂｉｌ Ｔｈｅｏｒｙ Ｐｒａｃｔ，Ａｐｒ．２０１０，Ｖｏ１．１６，Ｎｏ．４
・专题・
人羊膜间充质细胞的神经生物学特性及其治疗帕金森模型小鼠的实验研究
蔡哲 ，周忠蜀 ，向青 ，胡景伟 ，潘琳 ，张岚 ，舒峻 ，徐波
梁妍 ，左萍萍。，贺春 ，徐杨 ，高艳 ，崔晓慧
［摘要］ 目的评价人羊膜组织来源问充质细胞（ｈＡＭＣｓ）的神经生物学特性及其脑移植对帕金森病（ＰＤ）小鼠的治疗观察。 方法应用免疫细胞化学染色，通过问充质１：细胞、神经干细胞、多巴胺能神经元和神经发生相关标记物Ｖｉｍｅｎｔｉｎ、ＳＴＲＯ一１、ｎｅｓｔｉｎ、 ＣＤ 、８一ｔｕｂｕｌｉｎ、ＴＨ、ＤＡＴ、Ｎｇｎ２和ｍａｓｈ一１抗体，鉴定在ｈＡＭＣｓ中的表达；ＲＴ—ＰＣＲ检测神经ｆ细胞标记物Ｖｉｍｅｎｔｉｎ及ｎｅｓｔｉｎ ｍＲＮＡ在ｈＡＭＣｓ的表达。Ｃ５７ＢＬ／６小鼠ＭＰＴＰ（ｉ．Ｐ．）建立ＰＤ模型，将ｈＡＭＣｓ移植到右侧纹状体内。通过自发运动和转杆实验 以及抗人线粒体和ＴＨ抗体在脑纹状体免疫组织化学形态学，评价ｈＡＭＣｓ对ＰＤ小鼠的治疗作用。结果经神经细胞培养基诱导 培养后的ｈＡＭＣｓ表达问充质干细胞、神经干细胞、多巴胺能神经元和上述所有与神经发生相关的特异性标记物。ｈＡＭＣｓ移植后 的ＰＤ小鼠自发运动次数增加（Ｐ＜０．０５），转杆时间延长（Ｐ＜０．０５）。结论ｈＡＭＣｓ经体外诱导培养后具有神经细胞特性，移植到 ＰＤ模型小鼠纹状体内能够改善ＭＰＴＰ所致的运动功能损伤。 ［关键词］人羊膜间充质细胞；脑移植；帕金森病；多巴胺
Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ ｏｆ Ｈｕｍａｎ Ｈｉｓｔｏ－ａｍｎｉｏｔｉｅ Ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ａｎｄ ｉｔｓ Ｅｆｆｅｃｔ ｔｏ Ｔｒｅａｔ Ｐａｒｋｉｎｓｏｎ ｓ Ｄｉｓｅａｓｅ Ｍｏｄｌｅ Ｍｉｃｅ ＣＡＩ Ｚｈｅ，ＺＨ０ＵＺｈｏｎｇ—ｓｈｕ，ＸＩＡＮＧ Ｑｉｎｇ，ｅｔ ａ１．Ｃｈｉｎａ－Ｊａｐａｎ Ｆｒｉｅｎｄｓｈｉｐ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｂｅｉｊｉｎｇ １０００２９，Ｃｈｉｎａ Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｅｖａｌｕａｔｅ ｔｈｅ ｎｅｕｒｏｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｈｉｓｔｉｏ ａｍｎｉｏｔｉｃ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ（ｈＡＭＣｓ）ａｎｄ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｈＡＭＣｓ ｔｒａｎｓ．ｐｌａｎｔａｔｉｏｎ ｉｎｔｏ ｔｈｅ ｂｒａｉｎ ｔｏ ｔｒｅａｔ Ｐａｒｋｉｎｓｏｎ＇ｓ ｄｉｓｅａｓｅ（ＰＤ）ｍｏｄｌｅ ｍｉｃｅ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓ ｏｆ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ
