分子植物育种，２０１３年，第１１卷，第４期，第６００—６０４页 Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｌａｎｔ Ｂｒｅｅｄｉｎｇ，２０１３，Ｖｏ１．１ １，Ｎｏ．４，６００—６０４
技术主题
Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｆｅａｔｕｒｅ
杂交油菜宁杂１ １号种子纯度ＳＳＲ标记快速检测方法
陈锋 张洁夫陈松浦惠明戚存扣
农业部长江下游棉花与油菜重点实验室（南京），江苏省农业科学院经济作物研究所，南京，２１００１４
通讯作者．ｍｉｎｉｓｔｅｒｌ １９＠１２６．ｃｏｍ
摘要本研究以杂交油菜新品种宁杂１１号为研究对象，利用ＳＳＲ分子标记技术，筛选出共显性标记引物
Ｎａｌ０一Ｅ０２，建立了一套油菜杂交种纯度的快速分子检测方法：种子利用夜间萌发，碱裂解法快速提取ＤＮＡ，
ＰＣＲ反应２ ｈ，电泳１．５ ｈ，简化的银染法染色１０ ｍｉｎ，从获取样品种子到出检测结果只需要不到一天的时间，
一个熟练科技人员每个工作日至少可以完成６ｘ９６＝５７６粒种子的检测量。利用这套技术对生产中大面积制
种的９个样品纯度检测结果与田间种植鉴定的实际纯度结果极显著正相关，相关系数达到０．９８４（Ｐ＜Ｏ．０１），
表明这套技术可以用于宁杂１１号杂种纯度的快速准确鉴定。
关键词 甘蓝型油菜，杂交种，宁杂１ １号，ＳＳＲ标记，纯度鉴定
Ｒａｐｉｄ Ｐｕｒｉｔｙ Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ Ｈｙｂｒｉｄ Ｒａｐｅｓｅｅｄ Ｎｉｎｇｚａ Ｎｏ．１ １ ｂｙ Ｕｓｉｎｇ ＳＳＲ
Ｍａｒｋｅｒｓ
Ｃｈｅｎ Ｆｅｎｇ Ｚｈａｎｇ Ｊｉｅｆｕ Ｃｈｅｎ Ｓｏｎｇ Ｐｕ Ｈｕｉｍｉｎ Ｑｉ Ｃｕｎｋｏｕ
Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｃｏｔｔｏｎ ａｎｄ Ｒａｐｅｓｅｅｄ（Ｎａｎｊｉｎｇ），Ｍｉｎｉｓｔｒｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ，Ｐ．Ｒ．Ｃｈｉｎａ，Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ Ｃｒｏｐｓ，Ｊｉａｎｇｓｕ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ
油菜品种DNA提取方法优化
高飞;张田;宋玉英;史桂琴
【摘 要】根据种子纯度检验的行业特点,改进了油菜幼苗的研磨方法,发现在液氮预冷的离心管中使用玻璃棒掏碎的方法更适合油菜品种的样品粉碎.该方法既显著提高了油菜幼苗的研磨效率,又保证了DNA提取的量,能有效地避免传统研磨方法提取DNA为空管的现象,同时具有安全、无污染的特点,从而提高了检测的准确性和工作效率.
【期刊名称】《种子》
【年(卷),期】2010(029)001
【总页数】4页(P27-30)
【关键词】油菜;研磨方法;DNA提取
【作 者】高飞;张田;宋玉英;史桂琴
【作者单位】陕西省种子管理站,西安,710021;陕西省种子管理站,西安,710021;陕西省种子管理站,西安,710021;陕西省种子管理站,西安,710021
【正文语种】中 文
【中图分类】S565.4
油菜(Brassica campestris L.)为十字花科，芸苔属，一年生草本，是我国最主要的油料作物。杂交油菜在我国种植面积已达85%以上，为确保种子销售之前得到正确的鉴定结果，避免不合格种子流入市场，必须加强对杂交种的质量控制。目前纯度鉴定主要采取异地种植鉴定［1］和室内蛋白质电泳检测［2］，长期以来品种真实性和纯度的检测仍以传统的大田小区种植为主，但此法所需周期长、成本高，而且易受环境因素和检测人员水平的影响，只能进行后控检测［3］。蛋白质电泳检测多态性相对较低以及易受电泳条件影响，所以蛋白检测在指纹图谱中应用受到一定限制［4，5］。分子标记具有信息含量丰富，检测不受季节、环境的影响等优点［6］，是目前最先进的遗传标记系统。油菜进行发芽鉴定一般5～6 d，这时幼苗较小，DNA提取如果用传统的研钵研磨，样品损失较大、提取效率也低，还容易出现空管现象，不利于该方法在检测行业中的推广。虽然DNA提取方法已经被很多人优化及简化，但是人们往往把精力集中到了如何优化及简化DNA提取的步骤［7～10］，而很少有关于DNA研磨方法改善的报道。而本研究就是通过改善研磨方式，极大地提高了工作效率，更利于分子检测方法在实际工作中的应用。
利用SSR标记鉴定玉米杂交种纯度技术规程
李汝玉;李群;谭振馨;颜廷进;张文兰;宋国安;段乃彬
【期刊名称】《种子》
【年(卷),期】2005(24)9
【摘 要】在对玉米籽粒DNA提取和SSR扩增片段检测方法等研究的基础上,建立了一套利用SSR标记进行玉米杂交种纯度鉴定的技术规程.该规程主要特点为从粉碎干种子提取DNA和利用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离SSR扩增片段,便于对大量种子样品进行分析,对仪器设备要求较低,简单快速,易于推广.
【总页数】3页(P54-56)
【作 者】李汝玉;李群;谭振馨;颜廷进;张文兰;宋国安;段乃彬
【作者单位】农业部农作物种质监督检验测试中心,山东济南250100
【正文语种】中 文
【中图分类】S3
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5.利用SSR分子标记鉴定玉米杂交种‘吉祥1号’纯度 [J], 车卓;常宏;张伟
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利用同工酶鉴定杂交油菜种子纯度程序化方法
张亚兵;孔令传
【期刊名称】《安徽农业科学》
【年(卷),期】1997(025)001
【摘 要】叙述了多年摸索出的一套用同工酶鉴定杂交油菜种子纯度电泳技术方法。该技术方法（包括酶的提取，凝胶配制，电泳酶显控制等）能很好地提高用同工酶鉴定杂交油菜（秦油２号和皖油９号）种子纯度的工作时效。因而在种子检验上具显著的实际价值。
【总页数】2页(P22,84)
【作 者】张亚兵;孔令传
【作者单位】国家农业部瓜菜种子质监中心;国家农业部瓜菜种子质监中心
【正文语种】中 文
【中图分类】S565.4
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