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森林根际土壤细菌的分离、鉴定及生物活性筛选冯路遥;赵江源;施竹凤;莫艳芳;杨童雨;申云鑫;何飞飞;李铭刚;杨佩文【期刊名称】《生物技术通报》【年(卷),期】2024(40)1【摘要】【目的】从无量山国家级自然保护区森林根际土壤发掘具有多种生物活性的功能菌株,探究其开发应用潜力。
【方法】采集无量山地区25个区域植物的根际土壤,采用选择培养基,分离鉴定磷酸盐溶解、固氮、溶锌和拮抗等活性菌株,进一步测定菌株分泌铁载体、ACC脱氨酶和吲哚乙酸等生物活性,并验证促番茄种子发芽和生长效果。
【结果】分离鉴定得到解磷菌70株,固氮菌27株,解钾菌8株,拮抗镰刀菌的菌株51株。
其中,YIM B08401和YIM B08402形态学结合生理生化特性和16S rDNA序列测序,鉴定为白色伯克霍尔德氏菌(Burkholderia alba)和青岛假单胞菌(Pseudomonas qingdaonensis),两个菌株均具有磷酸盐溶解、固氮、溶锌和分泌铁载体的活性,最大可溶性磷含量为(455.63±59.65)mg/L和(878.95±64.78)mg/L;两株菌的促种子发2芽试验结果接近,施加稀释10倍、10倍和310倍的发酵上清液后,发芽率都维持在82%-93%,明显高于对照组的56%和49%,施加菌株发酵液的处理组相较于空白对照组的长度都有显著增加。
盆栽实验证明,两株菌株促生效果最明显的处理组在地上部长度、鲜重、干重、茎粗、根长、根鲜重、根干重方面的数据都显著优于对照组,YIM B08401的上述指标相对于对照组分别显著增加了89%、495%、268%、62%、53%、385%和469%,YIMB08402的上述指标相对于对照组分别显著增加了118%、528%、477%、55%、37%、413%和747%。
此外,菌株YIM B08401还具有拮抗病原菌和分泌ACC脱氨酶活性,YIM B08402则还具有分泌吲哚乙酸的活性。
一株高效解钾菌的筛选鉴定及其对烟草吸收钾磷的影响钾是植物生长发育过程中必需的微量元素之一，对于植物的生长和发育具有重要的作用。
土壤中有效的钾资源有限，且大多存在于难以被植物吸收的形态，因此需要通过钾肥的施用来满足植物对钾的需求。
钾肥的施用不仅增加了农业生产的成本，还造成了环境污染和资源浪费。
寻找一株高效解钾的细菌，并利用该菌株来促进烟草吸收钾磷是非常有意义的研究方向。
高效解钾菌的筛选与鉴定是一个关键的步骤。
可以从钾贫瘠土壤中采集土样，然后通过稀释平板法、固体培养基筛选法和液体培养基筛选法等方法进行菌株的筛选。
对于菌株的鉴定，可以通过形态特征观察、生理生化特性检测和分子生物学方法等手段来进行。
形态特征观察包括菌落形态、形状、颜色等方面的观察；生理生化特性检测包括对碳源、氮源和抗生素的利用情况等的检测；分子生物学方法主要是利用16S rDNA序列分析来确定菌株的分类地位。
高效解钾菌可通过多种机制促进植物对钾的吸收。
菌株可以分泌有机酸、酶和可溶性物质，降低土壤pH值，溶解土壤中难溶性的矿物质，使其中的钾离子释放出来，增加了植物根系对钾的吸收。
菌株还可以合成植物生长激素，如吲哚-3-乙酸、赤霉素等，促进植物生长和根系发育，进一步增强了植物对钾的吸收。
菌株还能够形成菌根共生关系，与植物根系形成共生菌根，在菌根附近形成一个较低的氧浓度区域，促进根系吸收的效果。
对于烟草来说，高效解钾菌的应用可以提高其吸收钾磷的效果。
烟草是一种常见的经济作物，对钾的需求较大。
通过施用高效解钾菌，可以提高土壤中钾的有效性，增加烟草根系对钾的吸收。
高效解钾菌能够促进烟草生长，增加其产量和品质。
烟草在吸收钾的对磷的吸收也有促进作用。
研究表明，高效解钾菌能够分解土壤中的有机磷，将其转化为可供植物吸收的无机磷，提高磷素的利用效率。
高效解钾菌的筛选鉴定以及其对烟草吸收钾磷的影响具有重要的研究价值。
通过寻找高效解钾菌并应用于农业生产中可以提高植物对钾的吸收效果，减少钾肥的施用量，降低环境污染，达到可持续发展的目标。
根际土壤细菌分离纯化及鉴定实验方案一、方法：稀释涂布分离法二、培养基：1、GPM 培养基(Glucose Peptone Meat extract Agar)2、牛肉膏蛋白胨培养基（NB ）3、金氏培养基B （King ）4、CSEA 培养基(Cold extracted soil extract agar)5、YG6、NA7、无氮培养基8、分解纤维素菌筛选培养基9、TSA 培养基 三、实验流程梯度稀释 涂板分离挑取不同的单菌落于斜面培养 液体培养及液体保种 提取DNAPCR 扩增 酶切带型分型确定操作单元连接转化 克隆子挑选及PCR 鉴定 测序 序列拼接 建树 采集根际土壤样品四、具体实验方案1、采集根际土壤样品：将植株根系及附着的根际土壤一同装入无菌袋带回实验室。
2、土壤样品稀释及选择合适浓度梯度进行涂板分离：梯度稀释土壤样品，取10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6六个梯度涂板，每个浓度梯度涂3个平行，过后放于37℃培养箱中培养1-2d观察菌落生长情况。
选择合适的浓度平板，根据形态、大小、颜色，挑取不同菌株的典型单个菌落，达到分离纯化的目的。
3、挑取不同单菌落于斜面保种：通过上述的分离纯化步骤，可筛选得到不同的菌株，对筛选到的菌株接种于斜面放于37℃培养箱中培养。
最后斜面放于4℃冰箱保存，备用。
4、液体培养及保种：从斜面上挑取菌苔于相应的液体培养基中放摇床上震荡（转速160r/min，37℃）培养。
过后吸取菌液与灭过菌的甘油按7:3的比例于1.5ml灭过菌的EP管中放于-20℃保种。
剩下的菌液用于以下实验。
5、提取DNA（CTAB法）：（1）取1.5ml菌液于1.5ml离心管中，12000r/min离心2min，弃上清。
（2）向沉淀物中加入350ul双蒸水，重新悬浮沉淀。
（3）加入20ul10%SDS和3ul的蛋白酶K（20mg/ml），混匀，于55℃温育1h。
（4）加入50ul 5mol/L NaCl溶液，充分混匀，再加入50ul CTAB/NaCl溶液，混合后再65℃温育30min。
花生根际产IAA菌的筛选鉴定及其效应研究张东艳;刘晔;吴越;王国文;万兵兵;姜瑛【摘要】植物根际产IAA菌能够分泌吲哚乙酸(IAA)促进生长,提高作物产量.为从砂质潮土中的花生根际筛选高产IAA的根际促生菌,本研究首先从长势较好的花生根际筛选出单株菌落,对其分泌IAA能力进行定性和定量分析,并通过16S rDNA基因序列配合生理生化特征鉴定所筛选的高产IAA菌株,然后设置单因素试验,探究适宜菌株生长和发酵的条件,最后通过花生盆栽试验验证其促生能力.结果表明,共筛选出5株产IAA的促生菌菌株,其中菌株HS10的IAA产量最高,被鉴定为特基拉芽孢杆菌.单因素试验表明,HS10最适培养条件是培养温度30℃,时间20 h,初始pH 8,装液量25 mL/250 mL,碳源为果糖,氮源为硝酸钾.盆栽试验表明,接菌花生植株长势明显优于对照,HS10对花生具有良好的促生效应.【期刊名称】《中国油料作物学报》【年(卷),期】2016(038)001【总页数】7页(P104-110)【关键词】花生;根际产IAA菌;吲哚乙酸;砂质潮土;盆栽试验;特基拉芽孢杆菌【作者】张东艳;刘晔;吴越;王国文;万兵兵;姜瑛【作者单位】河南农业大学资源与环境学院,河南郑州,450002;西南大学资源环境学院,重庆,400715;河南农业大学资源与环境学院,河南郑州,450002;山东省土壤肥料总站,山东济南,250100;河南农业大学资源与环境学院,河南郑州,450002;河南农业大学资源与环境学院,河南郑州,450002;河南农业大学资源与环境学院,河南郑州,450002【正文语种】中文【中图分类】S154.39现代农业大量使用农药和化肥来提高农作物产量，不仅增加了成本，也对环境造成了极大的危害，这促使了更多的科学工作者积极探索应用微生物来替代或部分替代农药和化肥的增产效应。
植物根际促生菌[1](plant growth-promoting rhizobacteria，PGPR)具有固氮、溶磷、溶铁、产生植物激素，以及提高植物抗逆性等多种促生效应。
2021人参根际土壤拮抗性放线菌的筛选、分离和鉴定范文 人参为五加科人参属多年生宿根性植物，是我国传统名贵中草药，有“百草之王”的美誉。
人参主要分布于东三省，其中，吉林省长白山区是人参的主产区，产量达全国总产量的70%-80%。
人参病害是影响人参产量与质量的一个重要因素。
目前，在人参中发现的侵染性和非侵染性病害有 50 余种，我国已报道的有 30 余种。
其中，立枯病、黑斑病、锈腐病、根腐病、疫病、菌核病及灰霉病是人参 7种主要真菌性病害。
常年发病率在 10%-30%，严重时达到 60%-70%，甚至绝收。
目前，对人参病害防控主要依靠化学农药。
化学农药防治人参病害虽然是很有效的方法，但是，长期使用化学农药不仅导致农药残留和环境污染，并且易诱导病原微生物产生抗药性。
开发环境友好的生防制剂成为替代化学农药的重要措施。
生物防治是以生态学原理为基础，利用生物物种间的相互作用，以一种或一类生物抑制另一种或另一类生物。
生物防治最大的优点是不污染环境，无农药残留，这是化学农药等非生物防治措施无法比拟的。
利用拮抗微生物防治病原微生物是生物防治技术的重要组成部分。
放线菌因其来源广泛，代谢产物活性较高等引起广泛关注，其拮抗机制和作用主要有抗生作用、竞争作用和重寄生作用。
放线菌能够产生抗生素、有机酸、甾体化合物及酶的抑制剂等多种生物活性物质，对植物病害产生抑制或杀灭作用。
目前，在人参生产中，使用的放线菌生防制剂还较少，而且均来源于农作物，无人参专用生防制剂。
为此，本研究对人参进行根际土壤拮抗性放线菌的筛选、分离和鉴定研究，旨在为开发人参专用放线菌制剂提供科学依据。
1、材料与方法 1.1材料 1.1.1供试病原菌引起人参的根腐病、锈腐病、疫病、菌核病、灰霉病、黑斑病和立枯病的主要病原真菌，分别是腐皮镰孢菌（Fusarium solani）、毁灭柱孢菌（Cylindrocarpon destructans）、恶疫霉菌（Phytophthora cactorum）、人参核盘菌（Sclerotiniaginseng）、灰葡萄孢菌（Botrytis cinerea）人参链格孢菌（Alternaria panax）、立枯丝核菌（Rhizoctoniasolani），均由吉林农业大学农学院植物病理教研室提供。
巨菌草根部促生菌的筛选及其促生效应作者：邓振山陈凯凯李静刘显春张宝宝张宝成来源：《广西植物》2020年第09期摘要：为进一步开发植物促生菌，该研究以巨菌草根部为主要材料进行巨菌草促生菌的筛选，采用解磷、固氮和产IAA等筛选标准对初筛菌株分别进行多项促生能力的测定。
通过形态观察、生理生化特性和 16S rDNA序列同源性分析对促生效果最好的菌株YB-07进行分类和鉴定，分别测定其促生能力后从中筛选出促生效应强的11个菌株进行盆栽试验，并通过对这些菌株单独回接和多菌混接的小麦盆栽试验测定其对小麦的促生效应。
结果表明：从巨菌草根部分离得到了101株促生菌株，分类鉴定结果显示菌株YB-07归属于根瘤菌属（Rhizobium），其溶磷量为20.1 mg·L-1、产IAA量为23.7 mg·L-1，同时具有产氨能力。
盆栽试验测定结果显示，多菌混合接种对小麦的促生效应在株高、干重、鲜重和叶绿素含量上，分别较对照组增加了24.49%、31.84%、28.06%和34.14%。
单菌接种对小麦的促生表现在株高、干重、鲜重和叶绿素含量上，分别较对照组增加了13.54%、20.45%、16.84%和35.19%。
所筛选到的菌株具有良好的促生长作用，能为进一步构建巨菌草促生菌菌群提供良好的种质资源。
关键词：巨菌草，促生菌，筛选，促生效应，盆栽试验中图分类号：Q939.95文献标识码：A文章编号：1000-3142（2020）09-1323-09Abstract：In this study，the root of the Pennisetum sinese was used as the main research material，screening of growth-promoting strains from P. sinese，and explore the growth-promoting effects of growth-promoting strains. We used the following screening criteria for the determination of multiple growth-promoting capacities of primary strains：the ability to solubilize phosphorus，the ability to fix nitrogen，the ability to produce IAA. The strain YB-07 with the best growth-promoting effect was classified and identified through physiological and biochemical characteristics and 16S rDNA sequence homology analysis. Eleven strains with better overall performance were screened out and used for a pot experiment with a single inoculation and multi-microbe mixed inoculation to determine its growth-promoting effect. A total of 101 strains were isolated from the roots of the P. sinese，and the growth-promoting ability was measured. Among them，the strain with excellent overall performance was YB-07，which had a phosphorus content of 20.1 mg·L-1，an IAA yield of 23.7mg·L-1，and an ability to produce ammonia at the same time. The results of pot experiment showed that the effect of multi-microbe mixed inoculation on wheat growth increased by 24.49%，31.84%，28.06% and 34.14% in the height，dry weight，fresh weight and chlorophyll content，respectively. Single bacterium inoculation increased the plant height，dry weight，fresh weight，and chlorophyll content by 13.54%，20.45%，16.84% and 35.19%，respectively，compared with the control group. The selected strain has good growth-promoting effect，can provide a good seed resources for the further construction of the P. sinese flora promoting bacteria.Key words：Pennisetum sinese，promoting bacteria，screening，growth-promoting effect，pot experiment巨菌草（Pennisetum sinese）隸属于禾本科狼尾草属，多年生，适宜在热带、亚热带、温带生长和人工栽培。
为TIR 区的自由能绝对值每增加114kcal/ m ol , 基因的翻译起始率即会下降10 %6 。
但是TIR 的范围尚无明确定义, G anoz a 认为应包括起始密码子上下游70 个核苷酸的范围7, 考虑到本研究中起始密码子上游的序列为载体序列, 已经过优化, 我们将重点放在ATG 下游的序列, 并将调整范围延长到60 (即20 个氨基酸) 个核苷酸。
同时我们也考虑到密码子的偏好性, 大肠杆菌稀有密码子的存在会造成很多严重后果: mRNA 的半衰期降低, 翻译提前终止, 和移框突变等8 。
综上所述, 我们在降低G C 含量的同时, 尽量采用大肠杆菌偏好的密码子。
本研究中菌株N o16 的自由能与原始序列相同且较前5 种序列为低, 但表达量在所有序列中位居第二, 与计算机的预测结果并不完全一致, 可能是由于TIR 内部的碱基有因可能与外部的碱基发生配对, 形成更大范围的二级结构, 超出了计算机的分析范围,此人为地适当延长TIR 范围可以增加预测的可靠性。
参考文献1 Rex G , S urin B , Besse G , et al1 J Biol Chem , 1994 , 269 (27) : 8118～812712 Fujita M S , N om ura K C , H ong K G , et al1 Biochem Biophys Res C ommun , 1993 , 197 (3) : 1340～134713 刘北域, 官孝群, 宋后燕1 上海医科大学学报, 1999 , 26 (6) : 401～40414 张淑梅, 张云湖, 赵晓祥, 等1 中国生物化学与分子生物学报, 1999 , 15 (6) : 912～91515 Barrick D , V illanueba K , Childs J , et al1 Nucleic Acids Research , 1994 , 22 (7) : 1287～129516 de Smit M H ,van Duin J 1 Pr oc N atl A cad Sci , 1990 , 87 (19) : 7668～767217 G anoz a M C , K of o id E C , Marliere P ,et al1 Nucleic A cids Res , 1987 , 15 (1) : 345～3601Andersson S G , K urland C G1 Micr obiol Rev , 1990 , 54 (2) : 198～21018从豆科植物的根瘤中直接提取根瘤菌D N A 的方法3强1 ,2张小平1 3 3李登煜1陈文新2K1Lindstrm3 Z1Terefework3陈( 四川农业大学农学院微生物学系雅安625000) 1( 中国农业大学生物学院微生物学系北京100094) 2( Department of Applied Chemistry and Microbiology , University o f Helsinki , Finland 00014) 3摘要: 豆科植物的新鲜根瘤经表面灭菌、破碎后直接加入200μL 4m ol/ L 异硫氰酸胍( G UTC)裂解液混匀, 离心去掉根瘤残留物, 再加入适量R NA 酶, 37 ℃温育30min 后, 加入20μL 硅藻土吸附液, 室温处理15min 离心去掉上清, 沉淀经G UTC 裂解液二次处理, 再分别用洗涤液、70 %酒精洗涤。
人参根际拮抗细菌RS—3的鉴定及其对人参常见病原菌的抑制作用从吉林健康人参根中筛选到一株广谱根际菌RS-3。
经形态学特征及16SrDNA 序列同源性分析，鉴定该菌株为解淀粉芽孢杆菌。
平板对峙实验及带毒平板法鉴定，该菌株对常见的5种人参病原菌有一定的拮抗作用，对灰霉病菌的抑菌率达54.4%。
说明根际细菌RS-3可作为人参常见病害的潜在广谱生防菌进一步开发利用。
标签：人参；根际细菌；抑菌活性[Abstract] A rhizobacteria strain named RS-3 exhibited inhibitory activity against all five Panax ginseng pathogens was isolated from the root of P. ginseng. This strain was identified as Bacillus amyloliquefaciens based on its morphological character and 16S rDNA sequence. Antagonistic activity experiments indicated that the strain could strongly suppress Botrytis cinerea Pers with an inhibitory rate of 54.4%，suggesting the potentialities of biocontrol agent against diseases that frequently happen on ginseng.[Key words] Panax ginseng；rhizobacteria；antibacterial activitydoi：10.4268/cjcmm20162413人参Panax ginseng C. A. Mey为五加科人参属多年生草本植物，主要分布于东北吉林、辽宁、黑龙江等地区。
54卷香蕉枯萎病拮抗菌的筛选鉴定及其防病效果测定杨迪1，杜婵娟1，张晋1，潘连富1，叶云峰2*，付岗1*（1广西农业科学院植物保护研究所/农业农村部华南果蔬绿色防控重点实验室/广西作物病虫害生物学重点实验室，广西南宁530007；2广西农业科学院园艺研究所，广西南宁530007）摘要：【目的】从不同作物的根围土壤中分离筛选香蕉枯萎病菌拮抗菌，对拮抗菌进行鉴定并测定其防病效果，以期为香蕉枯萎病的生物防治提供新的菌种资源。
【方法】以尖孢镰刀菌古巴专化型4号生理小种（Fusarium oxysporum f.sp.cubense 4，Foc4）Foc 1402菌株为对象，采用稀释涂布法对不同作物根围土壤中的细菌进行分离，并使用平板对峙法和牛津杯法筛选其中的香蕉枯萎病拮抗菌。
根据细菌菌落形态、生理生化特征结合16S rDNA 序列分析对拮抗菌进行分类鉴定。
使用威廉斯B6香蕉杯苗测定拮抗菌对香蕉枯萎病的盆栽防治效果。
【结果】从不同作物根围分离获得345株细菌，从中筛选获得7株对香蕉枯萎病菌具有较强拮抗活性的菌株，抑菌率最高可达72.65%。
依据形态学观察、生理生化反应和16S rDNA 序列分析结果，菌株Ba02、Ba310、Ba48、Ba62和Ba63被鉴定为解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens ），菌株Bc11被鉴定为洋葱伯克霍尔德氏菌（Burkholderia cepacia ），菌株Pt05被鉴定为土地类芽孢杆菌（Paenibacillus terrae ）。
盆栽试验结果显示，7株拮抗细菌对香蕉枯萎病的防治效果在20.00%~68.89%，其中以菌株Bc11的防治效果最好，为68.89%。
【结论】从不同作物的根围土壤中筛选获得7株对Foc 具有较强拮抗活性的细菌，其中，土地类芽孢杆菌为香蕉枯萎病生防菌家族的新成员。
筛选获得的不同种类拮抗菌可作为研制香蕉枯萎病生防菌剂的候选菌株资源，在后续开发抗病复合菌剂方面具有良好的应用前景。
第51卷第1期2022年1月福建农林大学学报(自然科学版)Journal of Fujian Agriculture and Forestry University ( Natural Science Edition )一株拮抗性多粘类芽抱杆菌的鉴定及其对小麦赤霉病的田间防效邓云(福建省南平市农业科学研究所，福建南平354200)摘要：采用平板对峙法从长期开展小麦赤霉病抗性鉴定的鉴定圃土壤中分离筛选出一株具有广谱抗真菌活性的微生物菌 株DY04.结合菌落形态观察和16S rDNA 基因序列分析，将其鉴定为多粘类芽抱杆菌.通过灌根、穗部喷洒原菌液和穗部喷 洒发酵液等3种施药方法研究多粘类芽抱杆菌菌株DY04对小麦赤霉病的防效和小麦产量的变化.结果表明：将该菌株灌 根处理可有效防治小麦赤霉病，防治率达58.43% ；同时，小麦籽粒千粒重比对照增加&83%,理论产量增加45.21%.关键词：多粘类芽抱杆菌DY04；小麦赤霉病；生物防治中图分类号：S482； S481.9文献标识码：A文章编号：1671-5470( 2022) 01-0021-06DOI ：10.13323/ki.j.fafu( nat.sci.) .2022.01.003开放科学(资源服务)标识码(OS1D )Identification of Paenibacillus polymyxa as antagonist to Fusarium head blightof wheat and its field control efficacyDENG Yun(Nanping Institute of Agricultural Sciences , Nanping , Fujian 354200, China )Abstract : A microbial strain DY04 with broad-spectrum antifungal activity was isolated and screened using plate confrontation meth od from nursery soil where long-term study on the resistance of Fusarium, head blight ( FHB) of wheat was carried out. The strain was identified as Paenibacillus polymyxa by colony morphology analysis and 16S rDNA gene sequencing. Three field application methods , namely root irrigation , spraying with viable bacteria on panicle and spraying with fermented liquid on panicle , were used to assess the control effect of DY04 on FHB and wheat yield. The results showed that root irrigation can effectively control FHB, resulting in a maximum control rate at 58.43% ； thousand-grain weight of wheat was 8.83% higher in root irrigation group than that of the con trol, leading to 45.21% increase in the theoretical yield.Key words : Paenibacillus polymyxa DY04 ； Fusarium head blight ； biocontrol小麦赤霉病是世界性病害［|-2］,广泛分布于我国温暖潮湿或半潮湿地区,多发于长江上、中、下游及黄 淮南片区，对小麦生产的危害甚大.该病不仅会造成小麦严重减产，而且其产生的脱氧雪腐镰刀菌烯醇毒 性强,食用后会引起眩晕、发烧、恶心、呕吐、腹泻等急性中毒症状,同时会降低免疫能力和生育能力等,危 害人畜健康.目前，施用化学杀菌剂是农业生产上控制真菌性病害的主要方法⑶,但是化学农药容易导致 农药残留、环境污染、植物病菌产生抗药性等问题.因此，迫切需要更加安全环保的新型生物农药代替传统 的化学杀菌剂［4-6］.多粘类芽抱杆菌(Paenibacillus polymyxa )为芽抱杆菌科(Bacillaceae )类芽抱杆菌属，是一类重要的根 际有益菌⑺少它的代谢产物中含有多种可利用的生物活性物质，如多糖、多肽、蛋白质、糖蛋白、核苷类似 物、毗嗪类、醇醛酸等,在农业、食品和环境等方面具有潜在应用价值•多粘类芽抱杆菌可通过产生的抗菌 物质和位点竞争的作用方式杀死和控制病原菌［宀⑸，且该菌是非致病性细菌，被广泛应用于微生物制剂 的研制•此外，该菌具有活性高、环境污染小以及不易产生抗药性等特点，具有巨大的生防价值［16一17］.收稿日期：2021-05-17 修回日期：2021-06-28基金项目：国家重点研发计划项目(2017YFD0101000).作者简介：邓云(1981-)，女，高级农艺师•研究方向：植物保护与抗病育种.Email ：25362663@ .-22-福建农林大学学报(自然科学版)第51卷目前,有关广谱抑制真菌的多粘类芽抱杆菌的报道不多，市面上可用于防治小麦赤霉病的多粘类芽抱杆菌的微生物农药菌种资源也不够丰富;有关多粘类芽抱杆菌的主要研究方向为其生物特性和对土壤及作物的作用机理[18-23].本研究从常年开展小麦赤霉病抗性鉴定的鉴定圃土壤中分离出一株具有广谱抑菌效果的多粘类芽抱杆菌DY04,研究其不同施用方法对防治小麦赤霉病和小麦产量的影响，以期为小麦赤霉病的生物防治提供种质资源,并为该生防菌的实际应用提供理论依据.1材料与方法1.1材料1.1.1生防菌菌株菌株DY04分离自福建省南平市建阳区童游街道南平市农业科学研究所试验基地的小麦赤霉病抗性鉴定圃土壤.1.1.2病原真菌菌株禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)A稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)由本课题组分离；玉米平脐蠕抱(Bipolaris sp.)、茶拟盘多毛抱(Pestalotiopsis theae)、玉米茎点霉属(Phoma sp.)、番茄尖抱镰刀菌(F.oxysporum)、香蕉枯萎病尖抱镰刀菌(F.oxysporum f.sp.)、黄萎病镰刀菌(F.verticillium)、灰霉病菌(Botrytis cinerea)等由福建农林大学植物保护学院鲁国东教授提供;玉米纹枯病菌(Rhizoctonia solani)由福建省农业科学院植物保护研究所陈福如教授、杜宜兴副研究员提供.1.1.3供试小麦品种供田间试验的小麦品种扬辐麦4号由扬州里下河农业科学研究所提供.1.1.4培养基红糖豆粉培养基(发酵液)[20]:红糖23.3g-L-',CaC034.9g-L\豆粉11.1g-L'1, KNO38g•L_i,KH2P040.5g-L_l,K2HP041.2g•L_l,MgS04-7H205g-L_l,NaCl3g-L_I.PDA培养基：马铃薯180~250g,葡萄糖15~25g,琼脂15~20g,水1000mL.1.1.5微生物菌液助剂添加剂配方为分散剂PVA(聚乙烯醇)7.2%、湿润剂D425(烷基磺酸缩聚物) 4.8%、稳定剂CMC-Na(羧甲基纤维素钠)2.0%、保护剂FWA(荧光增白剂)0.1%[24].1.2室内测定方法1.2.1染菌大麦粒诱导分离拮抗菌株DY04将蒸过或煮过的大麦粒装入培养瓶高温灭菌后冷却至室温，向装有大麦粒的瓶中接种禾谷镰刀菌菌块，并在25~26弋条件下培养5~6d,其间摇动培养瓶2~3次，使大麦粒充分长满禾谷镰刀菌.使用若干块无菌纱布分别包裹数颗已长满禾谷镰刀菌的大麦粒，并逐份扎口、系好标签，将其掩埋在鉴定圃土壤10~20cm的深度诱导拮抗菌附着在染菌大麦粒上,20d后取出，并分别装入灭菌后的玻璃瓶内,做好标记待用.取出大麦粒洗净消毒后，置于PDA平板培养基上培养3 ~5d,观察染菌大麦粒菌丝发展情况.挑取没有明显菌丝扩张的培养皿内的拮抗菌,进行分离纯化培养,得到拮抗菌株DY04[25].1.2.2拮抗菌株DY04对病原真菌的防效测定采用平板对峙法[26]进行测定.将蒸过或煮过的大麦粒装入培养瓶高温灭菌后冷却至室温，向装有大麦粒的瓶中接种拮抗菌DY04菌块，并在28弋条件下培养1~ 2d,让拮抗菌侵染全部大麦粒.将病原真菌的菌丝块接到PDA培养基(9cm培养皿)的中央，在距离中央2.5cm的左右两侧各嵌入一粒携带拮抗菌株DY04的大麦粒，以中央只接种真菌菌块的PDA平板为对照,所有培养皿封口后于28弋下培养5~7d,观察生长情况.每个处理3次重复，当对照菌丝长满整个培养皿时，测定每个培养皿真菌菌落直径，计算抑制率.抑制率/%=(对照菌落直径-处理菌落直径)/对照菌落直径X100.1.2.3菌落形态特征鉴定挑取菌株DY04培养24h,用100咽无菌水制成菌悬液[20]，然后划线于PDA 平板上,28T恒温培养48h,观察菌落的形态特征.1.2.416SrDNA序列同源性测定提取拮抗菌株DY04的DNA,由生工生物工程(上海)股份有限公司提取并测序,琼脂糖凝胶电泳检测DNA完整性,PCR所用的引物融合了Miseq测序平台的V3-V4通用引物341F(上游引物5，-CCCTACACGACGCTCTTCCGATCTG-3，,下游引物5，-CCTACGGGNGGCWGCAG-3，)和805R(上游引物5，-GACTGGAGTTCCTTGGCACCCGAGAATTCCA-3,,下游引物5，-GACTACHVGGG-TATCTAATCC-3，).PCR反应体系：2xTaq master Mix15fiL,Bar-PCR primer F(10pimol•L-1)1»L,Primer R(10pmol-L-1)1pL,Genomic DNA10~20ng,H20加至30pL.PCR扩增程序:94T预变性5min；94弋第1期邓云:一株拮抗性多粘类芽抱杆菌的鉴定及其对小麦赤霉病的田间防效・23・变性30s,55°C退火20s,72°C延伸30s,共设置25次循环，最后72°C延伸5min.16S rDNA序列在核糖体数据库（/index.jsp）中进行BLAST比对.1.2.5拮抗菌株DY04发酵液的抑菌效果测定挑取DY04菌株在红糖豆粉培养基发酵液中培养2d后,在12000r・min-1条件下离心10min,两次收集上清，上清液过0.22^m无菌滤膜后分别稀释至2、4、8、16,32倍，取20^L发酵液采用牛津杯对峙法[26]观察抑菌效果.1.3田间试验方法1.3.1小麦播种试验于2020年11月16日一2021年4月15日在福建省南平市农业科学研究所试验基地进行.该基地为全国冬小麦国家区试赤霉病自然抗性鉴定点,赤霉病每年自然稳定发生,无需接种赤霉病菌.冬小麦于11月16日采用条播法播种,行距为26cm,畦宽1m,畦长20m，沟深30cm,基肥施用小麦专用复合肥900kg・hm-2、钙镁磷肥600kg・hm-2,播种后覆土并灌跑马水增加土壤湿度,保证小麦整齐出芽.灌水后立即施用丁草胺除草剂封闭除草，12月10日分蘖盛期施用二甲四氯钠防治双子叶杂草，12月25日人工培土除杂草，次年2月2日施用拔节肥.1.3.2试验设计共设置5个处理：（1）灌根，在小麦始穗期用拮抗菌株DY04的原液灌根处理一次；（2）穗部喷洒原液，分别在小麦始穗期、始花期和盛花期在穗部喷洒拮抗菌株DY04的原液（含助剂）各一次;（3）穗部喷洒发酵液，分别在小麦始穗期、始花期和盛花期在穗部喷洒拮抗菌株DY04的发酵液（含助剂）各一次；（4）农药对照，分别在小麦始穗期、始花期和盛花期在穗部喷洒60%戊唑多菌灵水分散粒剂（河北冠龙农化有限公司）各一次;（5）空白对照（CK）,分别在小麦始穗期、始花期和盛花期在穗部喷洒清水各一次.每个处理3次重复，共15个小区，每个小区20m2.穗部喷洒的拮抗菌原液（NB培养液培养）和发酵液（红糖豆粉培养液培养）有效成分含量为150000亿个・hm-2，灌根处理的有效成分含量为300000亿个・hm-2.1.3.3调查方法于小麦黄熟期病害稳定时采用5点取样法调查赤霉病发病情况.每点调查40穗，每小区调查200穗，记录小麦的病穗数和病小穗数，计算病穗率、病小穗率和防效，防效/%二（空白对照小区的病小穗率-处理小区的病小穗率）/空白对照小区的病小穗率x100[27].同时，于收获期调查有效穗数、每穗实粒数，测千粒重，计算理论产量和增产率.单位面积理论产量/（kg・hm-2）二平均每穗实粒数x千粒重（g）x每公顷有效穗数x10-3.1.4数据处理运用IBM SPSS Statistics19软件选择单因素方差分析处理数据.2结果与分析2.1菌落形态多粘类芽抱杆菌是一种革兰氏阳性菌,好氧或兼性厌氧生活⑻.显微镜（凤凰光学PH100-3A41L-EP）下观察到DY04菌体呈杆状，菌体大小为（0.5〜1.0）^mx（2.0〜8.0）^m,在PDA固体培养基上菌落呈白色透明、圆形,边缘整齐,表面湿润、光滑、微隆起（图1）.形态特征与多粘类芽抱杆菌相吻合.图1菌株DY04菌落(左)及菌体形态(右)(x1000)Fig.l Colony(left)and cell morphology(right)of strain DY04(x1000)・24・福建农林大学学报（自然科学版）第51卷2.216S rDNA序列比对结果菌株DY04的16S rDNA的序列长度为1490bp.经同源性鉴定，该菌株为类芽抱杆菌属（Paenibacil-lus）.由系统发育树（图2）可以看出，菌株DY04与Paenibacillus polymyxa（多粘类芽抱杆菌）聚为一个分支.结合形态特征,将其鉴定为多粘类芽抱杆菌.2.3菌株DY04的抑菌效果通过平板对峙法测定了菌株DY04对10种真菌的抑菌活性，结果（图3、表1）表明，该菌株对10种病原真菌均有不同程度的拮抗作用，表现出广谱抗病原真菌的特性.其中:对禾谷镰刀菌和稻瘟病菌的抑制率都达到80%以上;对茶拟盘多毛抱、番茄尖抱镰刀菌、灰霉病菌和玉米纹枯病菌的抑菌活性也较强，抑制率达到60%以上;对玉米平脐蠕抱的抑制率最低，为46.27%.94%]-----------------------------------------------------------------------Paenibacillusphoenicis NR108292.196%-----------Paenibacilluspolymyxa NR117732.2--------DY040.01图2菌株DY04的系统发育树图3菌株DY04对禾谷镰刀菌的抑制效果Fig.2Phylogenetic tree of strain DY04Fig.3Inhibitory effect of strain DY04on F.graminearum表1菌株DY04及其发酵液的拮抗谱i）Table1Antagonistic spectrum of strain DY04and its fermentation broth不同稀释倍数发酵液的抑菌效果病原真菌抑制率/%----------------------------------------------------2 4 81632禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)玉米平脐蠕抱(Bipolaris sp.)茶拟盘多毛抱(Pestalotiopsis theae)玉米茎点霉属(Phoma sp.)番茄尖抱镰刀菌(Fusarium oxysporum)香蕉枯萎病尖抱镰刀菌(Fusarium oxysporum f.sp.)黄萎病镰刀菌(Fusarium verticillium)灰霉病菌(Botrytis cinerea)玉米纹枯病菌(Rhizoctonia solani)稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)81.50±1.30a+46.27±2.92f+64.44±1.01bc+58.83±3.32de+63.83±2.52bcd+55.66±1.76e+57.44±1.57e+66.78±1.84b+60.11±1.26cde+81.55±1.83a+++++--++-++++++++-++-++-++-1）数据为各处理3个重复的平均值±标准差，数据后附不同字母者表示在0.05水平上差异显著，附相同字母者表示差异不显著•+表示有抑菌效果,-表示无抑菌效果.2.4菌株DY04发酵液的抑菌效果采用牛津杯对峙法测定了菌株DY04发酵液对10种真菌的抑菌活性，结果（表1）表明：菌株DY04发酵液稀释至4倍时对10种真菌都有抑制作用;稀释至16倍时仅对禾谷镰刀菌、玉米茎点霉属、番茄尖抱镰刀菌和稻瘟病菌等4种真菌具有抑制效果.2.5施药方法对菌株DY04防治小麦赤霉病的影响表2显示,戊唑多菌灵对小麦赤霉病的防效最高，达到83.46%.多粘类芽抱杆菌菌株DY04的3种表2菌株DY04对小麦赤霉病的田间防治效果】）Table2Field control effect of strain DY04on head blight of wheat%处理病穗率病小穗率防效灌根92.5±2.04b12.22±4.82b58.43±4.63b穗部喷洒原液100.0±0.00c15.40±1.54b47.63±5.23c穗部喷洒发酵液97.5±2.88bc12.42±0.63b57.76±2.15b戊唑多菌灵57.5±5.40a 4.86±0.84a83.46±1.81a清水对照100.0±0.00c29.39±7.74c】）数据为各处理3个重复的平均值±标准差，数据后附不同字母者表示在0.05水平上差异显著，附相同字母者表示差异不显著.第1期邓云:一株拮抗性多粘类芽抱杆菌的鉴定及其对小麦赤霉病的田间防效-25-施药方法中:灌根处理的防效最高，达到58.43%；穗部喷洒发酵液的防效次之，为57.76%；穗部喷洒原液的防效为47.63%.2.6菌株DY04施用方法对小麦产量的影响表3显示,小麦经3种方法施用多粘类芽抱杆菌菌株DY04后，穗实粒率、穗实粒数、千粒重与对照相比均有显著增加.灌根处理、穗部喷洒原液和穗部喷洒发酵液处理的千粒重分别比对照增加&83%、5.93%和7.21%；理论产量增产率分别为45.21%、25.29%和29.10%.表3菌株DY04施用方法对小麦产量的影响“Table3Effect of strain DY04application method on wheat yield处理有效穗数穗实粒率/%穗实粒数/粒千粒重/g理论产量kg•hm-2万个•hm-2灌根329.55±6.15a90.30±0.46b36.81±0.10b39.69±0.35ab4814.85穗部喷洒原液326.25±11.70a83.23±0.92d32.95±0.37c38.63±0.12c4154.25穗部喷洒发酵液324.90±6.30a85.87±0.45c33.69±0.56c39.10±0.36bc4280.55戊唑多菌灵326.10±3.75a95.70±0.83a40.03±0.33a40.00±0.37a5220.60清水对照326.55±9.75a71.27±0.96e27.85±0.59d36.47±0.61d3315.75 l)数据为各处理3个重复的平均值士标准差,数据后附不同字母者表示在0.05水平上差异显著，附相同字母者表示差异不显著.3讨论多数研究者认为,多粘类芽抱杆菌为土壤中的活跃菌,容易在土壤中定殖和繁殖，在土壤的物资和能量循环中发挥重要作用，其代谢产物能够有效抑制病害；同时，该菌具有溶磷和固氮作用，能够增加土壤肥力和调节土壤微生态，促进植物生长,进而增强植物抵抗力[28-33].本试验中的多粘类芽抱杆菌DY04为土壤中筛选出的微生物菌.本研究表明,与穗部喷洒原液(防效为47.63%)或发酵液(防效为57.76%)相比,田间采用灌根方式施用多粘类芽抱杆菌DY04,对小麦赤霉病的防效较好，达58.43%.虽然在穗部施用时添加了保护剂等抗紫外线的助剂，且设置了连续施药3次的处理，但是防效持续性仍不够强，原菌及其代谢产物对紫外线敏感，且原菌不易定殖于植株穗部,导致穗部喷施的效果不及灌根处理.针对穗部喷药持效性弱的问题，今后可尝试炼化该菌的抗紫外线能力后进一步验证其持效性;灌根处理虽然防效较好，但与化学农药相比仍存在很大的差距,本试验中灌根处理只在抽穗初期进行了一次，今后可以通过在分蘖初期至扬花期增加灌根次数测试其是否能够提高药效，同时观察该菌在土壤中的定殖能力，为进一步分析其控制赤霉病发生的机理奠定基础.赤霉病菌会造成小麦穗部空瘪、籽粒发红发黑、千粒重低，从而降低结实率.本研究表明，与穗部喷洒原液或发酵液相比，灌根处理后小麦产量的增幅最大，千粒重比对照增加8.83%,理论产量增产率为45.21%.笔者田间观察发现，用多粘类芽抱杆菌DY04灌根处理后，灌浆期小麦籽粒外壳部分虽然有红褐色病斑,但后期受到控制并未影响内部健康籽粒；而穗部喷洒原液或发酵液后,灌浆后期外壳带菌麦粒并不能被有效控制，赤霉病菌仍向内部发展,从而降低了籽粒品质.有关灌根处理对小麦赤霉病的防治机理值得深入研究.致谢:衷心感谢苏妍、黄继平、洪红升、葛桂梅、刘友等同事对该试验给予的帮助.参考文献[1]李正辉，向晶晶,陈婧鸿，等.小麦赤霉病拮抗菌的分离与鉴定[J].麦类作物学报,2007,27(1):149-152.[2]韩青梅，曹丽华.小麦赤霉病的生物防治研究进展[J].麦类作物学报,2003,23(3):128-131.[3]成丽霞，彭兵，李天金，等.一株具有广谱抗真菌活性细菌菌株的分离鉴定及拮抗物的理化特性[J].微生物学通报,2009,36(3):365-370.[4]STURZ A V,CHRISTIE B R,N0WAK J.Baterial endophytes：potential role in developing sustainable systems of crop production[J].Critical Reviews in Plant Sciences,2000,19(1):1-30.[5]刘珂欣，辛寒晓,范学明，等.多粘类芽抱杆菌的固态发酵工艺及其对水稻恶苗病的防治作用[J].山东农业科学,2018,50(10):105-111.[6]何斐,张忠良，崔鸣，等.生防放线菌剂对魔芋根域微生物区系的影响[J].应用与环境生物学报,2015,21(2):221-227.・26・福建农林大学学报(自然科学版)第51卷[7]SALME T,NINA G,GERHART E H,et al.Paenibacillus polymyxa invades plant roots and forms biofilms[J].Appl EnvironMicrobl,2005,71(11)：7292-7300.[8]田宇曦，闵勇，杨自文，等.多粘类芽抱杆菌研究进展[J].湖北农业科学,2017,56(18):3401-3404,3409.[9]李舒清.多粘类芽抱杆菌SQR-21中fus基因簇特征研究及基因组分析[D].南京:南京农业大学,2013.[10]张楠,陈岩,王丽丽，等.多粘类芽胞杆菌对植物土传病害的防控及促生长作用研宄进展[J].微生物学杂志,2017,37(5):91-97.[11]LIN M Z,JIN M F,XU K,et al.Phosphate-solubilizing bacteria improve the phytoremediation efficiency of Wedelia trilobatafor Cu-contaminated soil[J].Int J Phytoremediation,2018,20(8):813-822.[12]RAZA W,YANG W,SHEN Q R.Paenibacillus polymyxa:antibiotics,hydrolytic enzymes and hazard assessment[J].Journal of Plant Pathology,2008,90(3):419-430.[13]孙光忠，刘元明,彭超美，等.多粘类芽抱杆菌对小麦赤霉病田间防治效果研究[J].农药科学与管理,2016,37(7):45-47.[14]刘振华，井长勤,周晨妍，等.生防细菌多粘类芽抱杆菌多糖研究进展[J].上海农业学报,2015,31(4):146-150.[15]王刘庆，王秋影,廖美德，等.多粘类芽抱杆菌生物特性及其机理研究进展[J].中国农学通报,2013,29(11):158-163.[16]CH0IS K,PARX S Y,KIMR,et al.Identification and functional analysis of the fusaricidin biosynthetic gene of Paenibacilluspolymyxa E681[J].Biochem Biophys Res Commun,2008,365(1)：89-95.[17]KIM S G,JE0N Y H.A plant growth promoting rhizobacterium,Paenibacillus polymyxa strain GBR-1,suppresses root-knotnematode[J].Bioresour Technol,2008,99(8):3016-3023.[18]张亮，盛浩，袁红，等.多粘类芽抱杆菌LRS-1对辣椒疫霉病害根际土壤细菌多样性的影响[J].土壤通报,2020,51(2):358-363.[19]LI X Z,RUI J,XI0NG J B,et al.Functional potential of soil microbial communities in the maize rhizosphere[}/0L].PLoS0NE,2014,9(11):el12609[2021-06-03].https：///ehosMpdfviewer/pdfviewer?vid=1&sid= 565c0ef2-b483-4fef-b49d-a2b81ed8eefe%40redis.[20]WANG Q,MA Y,WANG G,et al.Integration of biofumigation with antagonistic miroorganism can control Phytophthora blightof pepper plants by regulating soil bacterial community structure[J].European Journal of Soil Biology,2014,61(5):58-67. [21]金美芳，丁可武,林茂兹，等.多粘类芽抱杆菌S960抑制尖抱镰刀菌的活性物质分离纯化[J].安徽农业大学学报,2020,47(5):798-804.[22]林茂兹，金美芳，邹虹.多粘类芽抱杆菌S960菌株发酵条件优化[J].福建师大福清分校学报,2015(5)：6-11.[23]李妮,李明雄，雷润，等.多粘芽抱杆菌属孔雀绿脱色菌产脱色酶的条件研究[J].四川大学学报(自然科学版)，2009,46(6):1882-1886.[24]王剑，王楠，高观朋，等.200亿芽抱/g枯草芽抱杆菌可湿性粉剂的研制[J].农药,2010,49(7)：486-489.[25]邓云，江文清，苏妍，等.利用感染赤霉病菌的大麦粒诱导分离土壤中拮抗菌的方法:202010365702.5[P].2020-05-18.[26]宫安东.镰刀菌和黄曲霉生防菌的分离及拮抗机理研究[D].武汉:华中农业大学,2015.[27]农业部农药检定所生测室.农药田间药效试验准则(三)[M].北京：中国标准出版社,2004:161-164.[28]周涛，满文曾,吴晓营，等广谱抑菌性多粘芽抱杆菌的筛及其细菌素理化特征[J].食品工业科技,2019,40(24):99-103.[29]申顺善，张涛，王娟，等.多粘类芽抱杆菌HK18-8对辣椒炭疽病菌的抑制作用及其定殖能力[J].园艺学报,2019,46(3)：499-507.[30]李鹏翔，王莘，刘瑞军.一株拮抗人参灰霉病菌和黑斑病菌的细菌鉴定[J].吉林农业大学学报,2013,35(5)：516-519.[31]张淑梅，沙长青,赵晓宇，等.一株抗真菌内生多粘芽抱杆菌的分离鉴定及对水稻恶苗病菌的抑制作用[J].中国生物工程杂志,2010,30(2)：84-88.[32]王笑颖，孟成生，雷白时.大丽轮枝菌拮抗细菌多粘芽抱杆菌7-4菌株的筛选与鉴定[J].湖北农业科学,2011,50(9)：1797-1800.[33]张忠良，刘东平,潘培培，等.多粘类芽抱杆菌(Paenibacillus polymyxa)K18-5不同悬浮液处理对黄瓜枯萎病抑制作用的影响[J].河南农业大学学报,2019,53(5)：724-730.(责任编辑:杨郁霞)。
烟草青枯病拮抗芽孢杆菌的筛选、鉴定及其抑菌活性初探刘伟;刘鹏;沈小英;安天赐;成巨龙;安德荣【摘要】[目的]从不同烟区健康烟草的根际土壤样品中筛选对烟草青枯病具有较强拮抗作用的芽孢杆菌,为防治烟草青枯病提供生防资源.[方法]随机从福建龙岩、四川德昌、陕西汉中等地健康烟草根际土壤中采集30份土壤样品,采用平板稀释法从中分离芽孢杆菌,以烟草青枯病菌为靶标菌筛选拮抗芽孢杆菌,并通过培养特性、菌体形态、生理生化特征分析及16S rDNA序列分析,对筛选的拮抗芽孢杆菌菌株进行鉴定;采用温室盆栽试验,测定拮抗芽孢杆菌的促生作用、定殖能力和抑菌活性.[结果]从健康烟草根际土壤中分离得到1株抗烟草青枯病菌活性较好的菌株LW-4,经鉴定其为甲基营养型芽孢杆菌Bacillus meth ylotrophicus.LW-4菌悬液对烟草青枯病菌的防治效果为70.37％,其可定殖于烟草根际土壤,具有良好的定殖能力.LW-4对烟草有明显的促生作用;用饱和度为25％的硫酸铵获得的LW-4抑菌物质对烟草青枯病菌的抑菌活性较高,抑菌圈直径达37.82 mm.[结论]菌株LW-4在烟草青枯病防治中具有潜在的利用价值.【期刊名称】《西北农林科技大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2014(042)002【总页数】8页(P123-130)【关键词】烟草青枯病;拮抗芽孢杆菌;定殖能力;促生作用;防治效果【作者】刘伟;刘鹏;沈小英;安天赐;成巨龙;安德荣【作者单位】西北农林科技大学植物保护学院/旱区作物逆境生物学国家重点实验室,陕西杨凌712100;吉林农业大学农学院,吉林长春130118;西北农林科技大学植物保护学院/旱区作物逆境生物学国家重点实验室,陕西杨凌712100;西北农林科技大学植物保护学院/旱区作物逆境生物学国家重点实验室,陕西杨凌712100;中国烟草总公司陕西省烟草研究所,陕西西安710061;西北农林科技大学植物保护学院/旱区作物逆境生物学国家重点实验室,陕西杨凌712100【正文语种】中文【中图分类】S435.72烟草青枯病是由青枯劳尔氏菌(Ralstonia solanacearum)引起的一种土传病害[1]。
