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A(分离胶缓冲液)100mlB(浓缩胶缓冲液)100ml

果蔬成分生化分析———萝卜和盘菜的成分分析——12生本 董芳芳 12112314107引言：果蔬是我们生活中很常见的食物，大多数果蔬中含有维生素

C、总糖、原还糖、蛋白质等多种有机物。这些成分对植物的生理活动起到很大的作用，同时也是我们人体所需的营养物质，不同种类的果蔬中这些成分的含量是不同的。本实验选取萝卜和盘菜作为研究对象，对其维生素C、总糖、原还糖、蛋白质含量及过氧化物酶活性进行分析，通过实验了解萝卜和盘菜在这些成分上含量的不同，并掌握滴定法、蒽酮比色法、考马斯亮兰法、聚丙烯酰胺凝胶电泳法等实验方法。1、实验材料：市售新鲜的萝卜和盘菜

2、实验试剂和仪器

2,1果蔬中维生素C的含量测定试剂：1%草酸溶液2%草酸溶液、维生素C标准溶液、氧化型0.1%2,6-二氯酚靛酚溶液仪器：微量滴定管及架、台秤、50ml量筒、1ml及10ml吸管、100ml锥形瓶、剪刀、滤纸2.2果蔬中总糖及还原糖含量的测定 试剂：蒽酮试剂、标准葡萄糖溶液（0.1mg/ml）、6ml/molHCI溶液、20%NaOH溶液 仪器：吸管1.0(×2) 5.0ml(×1) 0.1ml(×1) 0.2ml(×1) 0.5ml(×3)试管1.5CM×15CM(×7)、分光光度计、水浴锅、电子分析天平、电炉、容量瓶（100ml×1）、玻璃漏斗、量筒、三角烧瓶、研钵2.3果蔬中蛋白质含量试剂：标准蛋白质溶液、考马斯亮兰G-250染料试剂0.05mol/LTris-HCl缓冲液仪器:分光光度计、漩涡混合器、试管16支2.4果蔬中过氧化物酶分析试剂： C(浓缩胶贮液)100mlD(浓缩胶贮液)100mlE核黄素100mlF 蔗糖100ml电极缓冲液100ml(用时稀释10倍)封板胶（加热煮沸）样品提取液染色液前沿指示剂 仪器：垂直板电泳槽、直流稳压稳流电泳仪、微量进样器、高速离心机、量筒、烧杯、玻璃棒、培养皿、分光光度计、研钵、恒温水浴锅、容量瓶、吸管3、实验材料和方法

3.1果蔬中维生素C含量的测定称取20..0g萝卜和盘菜芽放入研钵中研磨成匀浆后过滤，用少量2%草酸溶液洗涤，并稀释到一定体积吸取1ml维生素C标准溶液放入锥形瓶中，加9ml1%草酸溶液，摇匀，用染料液滴定至微红色保持15S不褪色即为终点，记下所用染料的体积，算出1ml染料相当于多少mg维生素C。吸取10.0ml样品液放入锥形瓶中，同上操作进行滴定，做两份求平均。维生素C含量 m = ×100 = 每百克样品中含维生素C毫克数V×CWm：每100克样品中含维生素C毫克数V：滴定样品液所用去染料液（2，6-二氯酚靛酚）容积（mL）。C：1mL染料液相当于维生素C的质量（mg/mL，由操作3计算得出）。W：10mL样品稀释液中含有样品的质量数（g）。

3.2果蔬中总糖及还原糖的测定3.2.1葡萄糖标准曲线的制作 012345标准葡萄糖溶液/ml00.10.20.30.40.5蒸馏水1.00.90,80.70.60.5置冰水浴中15min蒽酮试剂4.04.04.04.04.04.0煮沸10S,冷却后试问放置10S在620nm处比色A620nm0.0000.1940.1650.4060.5670.719取6支试管按上表配置溶液，并进行分光光度测定，以吸光度为纵坐标，各标准溶液浓度（mg/ml）为横坐标作标准曲线3.2.2样品中还原糖的提取和测定分别称其1g萝卜和盘菜，在研钵中研磨成匀浆，转入锥形瓶中，并用约30ml蒸馏水洗涤研钵，洗涤液并入锥形瓶瓶中于50℃水浴中保温约0.5h(使还原糖浸出)，冷却后定容至100ml.过滤，吸取1ml滤液于试管中，置冰水浴5min,加入蒽酮试剂4.0ml于620nm处进行比色，在标准曲线上得出样品液中还原糖的含量3.2.3样品中总糖的提取、水解和测定分别称其1g萝卜和盘菜，在研钵中研磨成匀浆，转入锥形瓶中，并用约30ml蒸馏水洗涤研钵，洗涤液并入锥形瓶瓶中，向锥形瓶中加入6mol/L盐酸10ml，搅拌均匀后在沸水浴中水解0.5h,冷却后用20%NaOH溶液中和至中性，再用蒸馏水定容至100ml，过滤，吸取1ml滤液于试管中，置冰水浴5min,加入蒽酮试剂4.0ml于620nm处进行比色，在标准曲线上得出样品液中还总糖的含量3.3果蔬中蛋白质含量的测定3.3.1蛋白质标准曲线的绘制

012345100ug/ml牛血清蛋白溶液/ml00.20.40.60.81.0蒸馏水/ml1.00.80.60.40.20考马斯亮蓝液/ml5.05.05.05.05.05.0取6支试管配置上述溶液，摇匀后放置2min,在595nm下比色，以吸光度为纵坐标，各标准蛋白质含量（ug）为横坐标，绘制标准曲线3.3.2样品的制备分别称取1g萝卜和盘菜置于冰浴上的研钵内，加入1mlH2O研磨成匀浆，转入离心管，用2ml水洗涤研钵并将洗涤液转入离心管，注意豆芽要在电子天平上用石英砂进行质量调平，3500rpm离心15-20min,离心后其上清液即为蛋白质提取液3.3.3样品测定取上述提取液1.0ml，加入5.0ml考马斯亮蓝试剂，摇匀，放置5min，在595nm下比色，记录数据，在标准曲线上得出对应蛋白质的浓度，再乘以稀释倍数，即为每克鲜果蔬中蛋白质的微克数3.4果蔬中过氧化物酶的分析3.4.1过氧化物酶同工酶的分离3.4.1.1安装电泳槽安装好电泳槽后，用煮沸的琼脂封底，等琼脂凝固后，灌入刚配好的分离胶至短板侧2-3cm处为止，并用微量注射器注射入一约3mm的水层，带分离胶凝固后，用滤纸吸干覆 盖在分离胶上面的水层，灌入刚配置好的浓缩胶，插入梳子，带凝固后小心取出梳子，导入电极缓冲液并没过样品槽3.4.1.2样品制备和点样分别称取1g萝卜和盘菜置于冰浴上的研钵中研磨成匀浆，置于离心管中，研钵用少量提取液洗涤，洗涤液并入离心管中，以1400r/min的转速离心15min.用微量注射器分别吸取20ul、40ul、50ul在浓缩胶上层的槽中点样，点样完之后在丄槽液中滴加2-3滴溴酚蓝3.4.1．3电泳和剥胶接通电源后，把电流调至10mA，样品进入分离胶后加大到30mA,维持恒流。待指示染料下行到到距胶板末端1cm处即可停止电泳，关闭电源。取出胶板，去掉胶套用微量注射器向胶板中射入少量水后即可掀开胶板，用尺子测量蓝色带到分离胶顶部的距离，去掉浓缩胶，把剩下的分离胶小心放入培养皿中，想培养皿中倒入刚配好的染色液，并立即置于黑暗处染色，带染色后用尺子测量各酶带的距离，记录数据3.4.2过氧化物酶活性测定取3支比色皿，于一支加入1ml磷酸缓冲液和3ml反应混合液作为对照。另2支分别加入反应混合液3mml和萝卜酶液1ml.立即开启秒表计时。于470nm处进行比色，每隔1min读数一次（连读5min,取平均值）4、实验数据记录及结果计算

4.1果蔬中维生素C含量的测定4.1.1数据记录 待测液次数萝卜盘菜11.301.1521.301.0531.45（舍去）1.10平均消耗量(ml)1.301.10材料重量（g）20.020.0

4.1.2结果计算100g萝卜中维生素C的含量M=10.8mg100g盘菜中维生素C的含量M=12.8mg

4.2果蔬中总糖及还原糖含量测定4.2.1数据记录----葡萄糖标准曲线

012345标准葡萄糖浓度(mg/ml)00.010.020.030.040.05吸光值0.0000.1440.4210.4180.5500.683

样品 盘菜还原糖萝卜还原糖盘菜总糖萝卜总糖吸光值0.460.270.610.334.2.2结果计算1g盘菜中还原糖的质量分数W=0.34%1g盘菜中总糖的质量分数W=0.405%1g萝卜中还原糖的质量分数W=0.2%1g萝卜中总糖的质量分数W=0.216%

4.3果蔬中蛋白质含量的测定4.3.1数据记录-----------蛋白质标准曲线

012345标准蛋白质含量/ug020406080100吸光值0.0000.1350.2210.3370.3710.456

样品 对照盘菜盘菜吸光值0.0000.4120.3644.3.2结果计算每克盘菜中蛋白质含量=193.21ug每克萝卜中蛋白质含量=646ug

4.4果蔬中过氧化物酶分析4.4.1数据记录------过氧化物酶同工酶分离 分离胶顶端到蓝带的距离L=7.2cm盘菜：

第一条同工酶的距离/cm2.1第二条同工酶的距离/cm3.2

萝卜：第一条同工酶的距离/cm2.0第二条同工酶的距离/cm3.3

4.4.2结果计算盘菜：Rf1=0.292 Rf2=0.444萝卜：Rf1=0.278 Rf2=0.458

4.5过氧化物酶活性的测定4.5.1数据记录

编号1234567对照组0000000盘菜1.0071.5261.6381.7001.7391.7851.821萝卜-0.1360.0420.2280.3590.4480.5110.549

4.5.2结果计算盘菜：过氧化物酶活力=272

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标本溶血对生化检验结果影响对策论文

标本溶血对生化检验结果影响对策论文

试论标本溶血对生化检验结果的影响与对策【中图分类号】r 446 【文献标识码】a 【文章编号】1672－3783(2011)11－0260－01【摘要】标本溶血是临床生化检验中最常见的一种干扰和影响因素。

是由于各种原因如抽血时负压过大、水浴箱中温度偏高或离心分离血清时速率过高等造成红细胞破坏，胞内物质进入血清，使血清呈红色而出现的一种现象。

本文就标本溶血对生化检验结果的影响及预防策进行论述。

【关键词】标本溶血；生化检验；预防对策标本溶血是由于各种原因如抽血时负压过大、水浴箱中温度偏高或离心分离血清时速率过高等造成红细胞破坏，胞内物质进入血清，使血清呈红色而出现的一种现象。

由于红细胞内成分进入血清，势必会对某些生化检验结果产生影响，是临床生化检验中最常见的一种干扰和影响因素。

1 溶血产生的原因引起溶血产生的常见原因有以下几种:(1)采血过程操作不当:操作者抽血时将止血带扎得过紧，瘀血时间过长，抽血时负压过大；采血过程中因抽血时未擦干消毒液，抽血不顺，反复拍打穿刺部位；从血肿处采血，血液注入真空管过快或产生气泡；直接从输液处放血；血加入抗凝管后剧烈振荡混匀等原因致标本溶血；(2)检验过程操作不当:水浴箱中温度偏高；标本离心时速率过快；离心管和套管底部有硬物使红细胞过度挤压产生溶血；(3)医疗器械质量不过关:标本试管质量不合格；注射器和容器不干燥、不清洁；采血针质量差或密封不好等原因均可造成标本发生溶血现象。

2 标本溶血对检验结果的影响及原因分析溶血使血细胞的一些组分释放进入血清或血浆，从而导致检验结果失去准确性，影响疾病的诊断和治疗。

溶血后检验结果增高幅度非常明显的有血清tbil(血清总胆红素)、dbil(直接胆红素)、tp(总蛋白)、alb(清蛋白)、ast(天冬氨酸氨基转移酶)、ldh(乳酸脱氢酶)、ua(尿酸)，分析原因为红细胞中含有大量的酶如ldh、ast 等，且含量较高，红细胞破坏后，含量较高的这些酶释放到血清中，势必引起血清中这些酶的浓度增高；红细胞大量破坏而释放大量血红蛋白中的球蛋白可造成tp、alb测定值增高；同时血红素为红色有色物质，这种红色对比色分析产生正干扰，虽可用标本空白或两点比色法等得以部分消除，但由于其增加了光的吸收，对一些波长相近的终点比色试验还是造成一定的正干扰；血红素中的正铁离子可被测定试剂中的一些氧化剂如亚硝酸钠氧化成高铁血红素成为黄褐色，对两点法造成一定的正干扰。

生化、制药专业毕业论文文献综述综述

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微污染物-微生物活性的微流控芯片直接检测1. 研究的目的和意义环境监控已越来越为人们所需要，这就要求有合适的实时检测设备。

微流控芯片（Microfluidic Chip）将化学、生物、医学等领域所涉及的样品的选择、制备、反应、分离、检测等基本操作单元集成到一个几平方厘米（甚至更小）的微芯片上，通过微通道结构来控制流体流动，从而完成不同的化学或生物反应过程，并对其产物进行分析，它为生化分析新局面的开创提供了一个新的研究平台。

通俗点，就是将实验室搬到微芯片上，微流控芯片为环境监控提供了一种合适的分析监测设备。

本文介绍了以色谱纸为基材制作了纸基微流控芯片的基本概况、芯片的发展现状、芯片的制作、芯片检测方法，并将纸基微流控和微污染物-微生物的活性相结合，对微污染物-微生物活性的微流控芯片直接检测进行了初步研究。

2. 微流控芯片的基本概况一种新兴的芯片技术——微流控芯片技术以其快速分析、低消耗、微型化和自动化等特点发展非常迅速。

微流控芯片（又称芯片实验室）是一种以在微米尺度空间对流体进行操控为主要特征的科学技术。

它具有将化学和生物实验室的基本功能微缩到一个几平方厘米芯片上的能力，已经显示了重要的应用前景。

该技术是在分析化学领域发展起来的，它以分析化学为基础，以微机电加工技术、微流体驱动或者控制、检测技术为依托，以微通道网路为结构特征，以化学和生命科学为主要应用对象，把整个实验室的功能集成到芯片上，而且制作简便，作为一种新兴的科学技术，微流控研究已经涉及化学、生物学、工程学和物理学等诸多领域，学科交叉性强，分析化学则是其第一轮也是最直接的一个应用领域[1]。

近年来，微流控研究发展迅速，技术创新层出不穷，应用领域不断拓宽。

3. 微流控芯片的发展现状微型全分析系统（Miniaturized Total Analysis Systems,μ-TAS）的概念是1990年Manz和Widmer等人首次提出来的，目前已经发展为世界上最先进的科学技术之一。

生物科学专业毕业论文范文(通用)

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生物科学专业毕业论文范文（通用）摘要：关键词：栀子;阿朴类胡萝卜素;藏花素;八氢番茄红素合成酶;基因表达1、材料和方法1.1材料和试剂栀子(Gardenia jasminoides)植株培养于广东药学院。

采集栀子成熟叶片和花后 16 周的栀子果实，果肉为橙色。

所有材料贮存于–80℃。

CreatorTMARTTMcDNA 文库构建试剂盒购自 Clontech公司。

Primescript one step RT-PCR 试剂盒购自TaKaRa 大连公司。

藏花素-1 (Crocin-1)的对照品购于 Sigma-Aldrich 公司。

乙腈、甲醇为色谱纯，其它生化试剂等为分析纯。

1.2藏花素-1含量的测定以改良的 HPLC测定栀子叶片和果实中藏花素-1 (Crocin-1)的含量。

叶片和果实在液氮中研磨后以 50% (V/V)的甲醇-水溶液提取，在超声处理 30 min 后以 10000 g离心 10 min，取上清液在–20℃下贮存。

HPLC 分析时，上清液以0.45 μm滤膜过滤，以 DiamonsilTMC18 (2) 柱(250 mm 4.6 mm, 5 μm)(Dikma 公司，中国)分析，梯度洗脱。

仪器为 Waters 2995 HPLC 仪(Waters 公司 , 美国)，配备 2996 光电二极管阵列检测器检测。

数据分析 1 Crocin 的生物合成途径。

IPP：异戊烯焦磷酸 ; DMAPP：二甲基丙烯焦磷酸;GPP：香叶基焦磷酸;GGPP：香叶基香叶基焦磷酸。

Fig. 1 Biosynthesis pathway of crocin. IPP: Isopentenyl diphosphate; DMAPP: Dimethylallyl diphosphate; GPP: Geranyl diphosphate; GGPP:Geranylgeranyl pyrophosphate.第5期 441以 Empower 2 软件完成。

临床生化检验质量控制措施论文

临床生化检验质量控制措施论文

临床生化检验的质量控制措施【摘要】目的探讨和研究临床生化检验的质量控制措施。

方法对我院检验科近年来出现的质量控制方面的一些问题进行了汇总和回顾性分析，探讨和研究防范对策。

结果在细致的操作和严格的防范措施下，将偏差的可能降到了最低。

结论做好严格的质量控制措施是保证临床生化检验准确性的必要条件，应当予以重视并学习。

【关键词】临床医学；生化检验；质量控制doi：10.3969/j.issn.1004-7484（x）.2013.06.732 文章编号：1004-7484（2013）-06-3462-02对于临床诊断和治疗措施的制定，生化检验所提供的具体信息是必不可缺的，而且随着近年来科技的进步和医学技术的发展，临床诊断和治疗也越来越依赖于临床检验所提供的依据，这也就进一步的凸显了临床检验医学的重要性。

而这之中，如何做好质量控制措施，严格控制生化检验的准确性是目前临床上的一大重点，如何利用已有的设备为临床诊断和治疗提供精确、客观的数据，提高检验质量是我们需要研究的课题，就此，笔者就我院近年来临床检验科所出现的一些问题进行了汇总和回顾性分析，现报道如下。

1 全面质量控制的内容在进行标本分析前的质量控制内容包括有患者的血液标本采集、标本的储存以及运送过程等。

在这个过程中应当注意的是：1、清晰的在检验申请单上注明检查对象、检查项目、疾病诊断、标本编号等，确保不出现误差，对于存在疑问的检验申请单应当及时与临床医师进行联系，对于不清晰的地方进行询问，以免出现误差，另外对于一些重点病例或疑难重症患者则应当咨询临床医师，及时进行沟通了解才能更好的保证标本质量；2、采集和存放标本应当注意认真、轻缓，防止标本出现污染、溶血或水分蒸发等因素导致检查结果的偏差；3、在进行标本采集前应当要求患者暂时停止服用药物，避免血清中的药物残留对检验结果造成偏差，所以建议标本采集时间应当控制在清晨患者未服药之前；4、为了避免患者的饮食、剧烈运动以及昼夜节律的变化对机体造成的影响干扰到检验结果，因此应当严格控制好标本采集时间，并且在采集前一天应当通知患者第二天保持空腹进行抽血等。