血栓与止血一般检验 PPT课件

活化部分凝血活酶时间测定（APTT）
一、原理：在37℃条件下，以激活剂激活因子Ⅺ、Ⅻ，以 磷脂（部分凝血活酶）代替血小板提供凝血的催化表面， 在Ca2+参与下，观察血浆凝固所需时间。是内源性系统较 敏感和常用的筛选试验 二、操作方法 1、标本的收集与处理 用0.109mol/L(3.2%)的枸椽酸盐 做抗凝剂,收集全血,血浆与抗凝剂的比例9:1.将此抗凝血 2500r/min,离心10min。 2、试验操作 激活剂、血浆、钙溶液以1：1：1比例混合， 具体操作按仪器、试剂要求进行。
三、试验技巧 1、做好两种值的质控，质控结果不在要求范围内， 应检查仪器、质控物、试剂有效期等，更正 后重做 2、试剂溶解后不能冰冻，标本应无凝块（微小凝 块可致测量时间缩短，自动催化激活所有因子；当 凝块逐渐增大时，消耗凝血因子，使测定时间结果 延长）。 3、抗凝管：要用无菌最好是一次性真空管，应用 塑料管或硅化的玻璃管。 4、若RBC压积异常，应用公式纠正抗凝剂的用量 =0.00185×血液(mi) ×(100%－Hct)
内源性系统
凝血过程模式图
FⅪ
外源性系统 血管损伤 组织因子
炎性反应
FⅫ
FⅫa
Ca2+
FⅦ
细胞因子
FⅪa
FⅦa-TF FⅨ Fⅹ Fⅴ
Ca2+ FⅩ
FⅨa FⅧa
Ca2+
Fg FⅡa
FⅡa FⅧ FⅡ
Fⅹa
Fⅴa Ca2+
Fg降解物
血栓与止血筛选试验
一、一期止血筛选试验的应用
一期止血是指血管壁和血小板异常所引起的
四、临床意义 1、APTT延长：遗传性缺乏（PT正常）见于因子Ⅷ、Ⅸ、 Ⅺ、Ⅻ缺乏。或高分子释放酶原和前激态释放酶原缺乏。 获得性缺乏见于肝脏疾病、消耗性凝血病、血循环中抗凝 物的存在（抗凝血酶的存在）、肝素和口服抗凝治疗期间。 2、APTT缩短：高凝状态和血栓性疾病、妊娠高血压综合症 和肾病综合症。

活化部分凝血活酶时间测定

（activated partial thromboplastin time，APTT）
【原理】活化部分凝血活酶时间测定是在受检血 浆中加入APTT试剂（接触因子活化剂和部分磷脂） 和Ca2+后，观察其凝固时间。反映内源性凝血系统 较好的筛选试验。 【参考值】 手工法：32～43秒，较正常对照延 长10秒以上为异常。 【临床意义】
血栓与止血的一般检查
第一节 概述 出血（bleeding) 止血（hemostasis) 凝血（blood coagulation)
血栓形成（thrombosis)
血栓（thrombus) 出血、血栓性疾患的发病机制可概括为：①血管 壁的结构或功能异常；②血小板量的减少、增多或 质的异常；③凝血因子含量减低、增高或分子结构 异常；④抗凝机制或纤溶机制减弱。
(三)纤维蛋白溶解综合征 包括原发性纤溶和继发性纤溶两种。 1．筛选试验 FDP和D-二聚体 （1）FDP和D-二聚体均正常：表示纤溶活性正常， 临床出血与纤溶无关。 （2）FDP阳性，D-二聚体阴性：多数为原发性纤 溶症或FDP假阳性如肝病、术后大出血、重症DIC、 纤溶初期等。 （3）FDP阴性，D-二聚体阳性：多数为继发性纤 溶症或FDP假阴性如DIC、血栓形成和溶栓治疗等。 （4）FDP和D-二聚体均阳性：见于继发性纤溶， 如DIC和溶栓治疗等。
发病早期凝血系统功能亢进，高凝状态/血小板聚集 和血栓形成;其后消耗大量凝血因子和继发性纤溶亢进。
临床表现为出血、栓塞、微循环障碍及溶血等。 诊断根据病人的临床资料和实验室检查综合判断。
（1）筛选实验:同时有下列三项或以上异常。 ①血小板＜100×109/L或进行性下降（但肝病、白血 病则要求血小板＜50×109/L﹚。 ②血浆纤维蛋白原含量＜1.5g/L（但白血病及其他恶 性肿瘤＜1.8g/L，肝病＜1.0g/L﹚，或进行性下降，或 ＞4g/L。 ③3P试验阳性或血浆FDP＞20mg/L（肝病时FDP＞ 60mg/L），或D-二聚体水平升高或阳性。 ④PT缩短或延长3秒以上（肝病时延长5秒以上） ， APTT缩短或延长10秒以上，或呈动态性变化。

第四节 血栓与止血常用筛检试验
2020/12/11
[内源性途径]
正常凝血过程（瀑布学说）
[外源性途径]
胶原等带负电荷表面
组织损伤释放
PKa PK XII——————XIIa HMWK （凝血旁路）
组织因子（III）
XI
XIa
IX
IXa
IIa Ca2+
VIII--------------- VIIIa
3. 质量保证--检测中
① 测定 试剂的准备、时间的观察要严格按操作
规程进行。
② 组织凝血活酶试剂质量
标准品：人脑凝血活酶（67/40 ） （British comparative thromboplastin, BCT）
新参考品：BCT/253（人脑或胎盘制剂） RBT/79（兔和兔-猴组织混合制剂）
第四节 血栓与止血常用筛检试验
2020/12/11
3. 质量保证--检测中
② 组织凝血活酶试剂质量
试剂与仪器要配套，要用标有国际敏感指数 （international sensitivity index, ISI）的试剂。 ISI 表示标准品组织凝血活酶与每批组织凝血 活酶PT校正曲线的斜率，ISI值接近1.0，表示试 剂愈敏感。由试剂供应商提供。
保证了检测的 工法高
定
准确性
第四节 血栓与止血常用筛检试验
2020/12/11
3. 质量保证 （与PT相同）
影响因素
① 激活剂 白陶土、硅藻土、鞣花酸等 ② 部分凝血活酶（磷脂） 兔脑组织
一般选用FⅧ，FⅨ和FⅪ的血浆浓度为 200~250U/L时灵敏的试剂。
第四节 血栓与止血常用筛检试验
2020/12/11

(依K因子：因子Ⅱ 、Ⅶ 、Ⅸ 、Ⅹ ）
三.抗凝系统：
细胞抗凝作用 体液抗凝作用： ❖ AT-Ⅲ ：体内最主要的生理抗凝活性物质。 ❖ 蛋白C和蛋白S系统。
四.纤溶系统
第三章 血栓与止血检测
第二节 血栓与止血检测
❖ 机体的止血与凝血过程牵涉到多个系统的多个 环节，因此相关的检测项目也及其复杂。
[参考值]31～43s ，超过正常对照10s以上即为异常
第三章 血栓与止血检测
[临床意义]
① APTT延长：APTT是内源凝血因子缺乏最可靠的筛选试验。 主要用于发现轻型的血友病。可检出因子Ⅷ：C水平低于
25%甲型血友病。 结果延长也见于因子Ⅸ（血友病乙）、 Ⅺ和Ⅻ缺乏症； 当共同途径的凝血酶原、纤维蛋白原及因子Ⅴ、Ⅹ缺乏时
第三章 血栓与止血检测
一.血管壁检测
2.毛细血管脆性试验(毛细血管抵抗力试验、束 臂试验，CRT)
[原理] 在上臂给静脉及毛细血管外加“标准压力”、增加
血管负荷，观察前臂一定范围内皮肤出血点数量的方法。 主要反映毛细血管结构和功能，也与血小板质和量有关。
[参考值] 5CM 8min 成年男性低于5个出血点； 儿童和成年女性低于10个出血点。
1.血浆硫酸鱼精蛋白副凝固试验（3P试验） [原理]纤维蛋白原在凝血酶作用下释放出A肽和B 肽后转变成纤维蛋白单体（FM)， FM具有自行 聚合呈肉眼可见的纤维絮状或胶冻状的特性。如 发生继发纤溶时，存在纤维蛋白降解产物FbDP， 可与FM形成可溶性复合物，而硫酸鱼精蛋白具 有解离析出FM的能力，FM自行聚合形成肉眼可 见的纤维状物，称为3P试验阳性。
第三章 血栓与止血检测
[临床意义]
a.病理性CRT阳性见于： 毛细血管壁有缺陷的疾病：如遗传性出血性毛细血