东北虎幼体血清蛋白及胆汁酸的测定与分析

收稿日期:2008-04-10东北虎幼体血清蛋白及胆汁酸的测定与分析张红绪1,王莉1,周恒峰2,李领义3,李琳1,段如冰1(1.河南师范大学生命科学学院,河南新乡453007;2.新乡市动物园;3.新乡市第一人民医院)摘要:用H I TACH I7600 20全自动生化分析仪对13只东北虎幼体进行了总蛋白、白蛋白、球蛋白、前白蛋白及胆汁酸5项生化指标的测定,实验数据经SPSS软件统计分析。

其结果为:总蛋白含量66.06 6.80g/L,白蛋白含量34.19 2.51g/L,球蛋白含量31.89 4.46g/L,前白蛋白含量13.22 11.64g/L,胆汁酸含量4.48 3.89 m o l/ L。

东北虎幼体雌雄个体间5项生化指标均无显著差异(P>0.05)。

东北虎幼体与成体间,总蛋白、白蛋白、球蛋白含量均呈极显著差异(P<0.01)。

东北虎幼体与华南虎幼体间,总蛋白、球蛋白含量呈显著差异(P<0.05);白蛋白含量无显著差异(P>0.05)。

关键词:东北虎幼体;血清蛋白;胆汁酸中图分类号:Q959.838;Q461 文献标识码:A 文章编号:1000-7083(2008)05-0910-03Deter m ination and Analysis of Seru m Proteins and B ile A cid ofPanthera ti g ris amureusisZ HANG H ong xu1,WANG L i1,Z HOU H eng feng2,LI L i n g y i3,LI Lin1,DUAN Ru b i n g1(1.Co llege of L ife Sciences,H enan N o r m al U niversity,X i nx i ang,H enan P rovince453007,Ch i na;2.X inx iang Z oo;3.X i nx iang F irst People sH o spita l)Abstrac t:F ive bioche m ica l i nd ices of13Pant hera ti gr is a mureusis young i ndi v iduals have been m eas u red by H ITA C H I 7600 20au t om ated che m i stry ana l y zer and then ana l y zed by SPSS.So m e obta i ned data show tha t tota l prote i n i s66.06 6. 80g/L,a l bu m i n34.19 2.51g/L,g l obu lin31.89 4.46g/L,prea l bu m i n13.22 11.64g/L and b ile ac i ds4.48 3.89 mo l/L.There are no s i gnificant d ifferences i n a ll va l ues bet ween m a l e and fe m a le P.t.a mureusis(P>0.05).The si gnificant d ifferences(P<0.01)ex ist i n tota l prote i n,a l bum i n and g lobuli n bet w een young and adu lt P.t.amureusis.In add iti on,t here are si gn ifi cant differences(P<0.05)i n total pro tein and g l obu li n w hil e no d iffe rences i n albu m i n be t w een young P.t.a m ure us is and young Pan t hera ti gris a m oy ensis.K ey word s:young Pant hera ti gr is amureusis;se ru m pro tein;bile ac i d东北虎Pant hera ti gr is a mureusis隶属食肉目猫科豹属虎种东北虎亚种。

主要分布在中国东北部的小兴安岭、完达山和长白山等地,俄罗斯远东地区和朝鲜半岛(许宪祝等, 1997)。

1993年被世界野生动物基金会确定为世界濒危物种之首(赵广英等,1995)。

东北虎为珍稀动物,实验取材困难,为研究工作的深入开展带来很多不便。

迄今为止,国内外关于东北虎幼体血清蛋白的研究报道甚少,其样本量均在4~8只之间(张锡然等,1993;胡新波,1994;赵广英等,1995;许宪祝等,1997)且部分实验长达数年(赵广英等,1995)。

本研究在1个月内完成了13只健康东北虎幼体5项生化指标的测定。

其中东北虎幼体前白蛋白和胆汁酸的含量至今尚未见文献报道。

本实验结果对东北虎的生长、发育、繁殖及疾病诊治等方面的研究具有重要的参考价值,同时对研究猫科动物间遗传及进化关系等提供理论依据。

1 材料1.1 动物来源所测13只东北虎幼体分别来自于河南省新乡市、商丘市、濮阳市和沁阳市的动物园内圈养繁殖的纯种虎,雄性5只,雌性8只。

外观检查活动无异常,被毛光泽,无外伤,无明显的消化及呼吸系统症状,年龄在2~6月龄。

表1 东北虎幼体性别、月龄及体重情况项目12345678910111213性别!!!!!!!!月龄(月)4 3.16 3.16 3.16 3.11 3.11 2.26 2.26 2.26 3.2336体重(kg)253832343235272527302624401.2 血液标本制备捕捉幼虎后于后肢股静脉采血。

全血用乙二胺四乙酸二钠(EDTA 2N a)作抗凝剂,血清标本清晰,无溶血现象。

2 方法2.1 测定9105项生化指标由H ITACH I7600 20型(日本)全自动生化分析仪测定。

2.2 药品及试剂双缩脲终点法测定总蛋白含量;溴甲酚绿法测定白蛋白含量;前白蛋白测定试剂盒(北京首医临床医学科技中心,免疫比浊法),总胆汁酸酶循环法检测试剂盒(四川省麦克科技有限责任公司)。

2.3 数据处理用SPSS软件对实验数据进行统计分析。

t 检验中作为参照的数据分别为东北虎成体(许宪祝等,1997)、华南虎幼体(张锡然等,1993)、猎豹幼体(夏述忠等,2001)。

3 结果3.1 东北虎幼体雌雄间5项指标测定结果东北虎幼体5项生化指标测定结果见表2。

5项生化指标在东北虎雌、雄性幼体间无显著差异(P>0.05)。

表2 东北虎血清五项指标的测定结果检测项目雌雄性雄性雌性总蛋白TP(g/L)66.06 6.80(52.9~77.4)65.48 5.35(58.3~73.0)66.43 7.90(52.9~77.4)白蛋白ALB(g/L)34.19 2.51(29.6~38.3)34.30 2.43(32.3~38.3)34.13 2.73(29.6~38.1)球蛋白GLO(g/L)31.89 4.46(23.2~39.3)31.18 3.26(26.0~34.7)32.33 5.24(23.2~39.3)前白蛋白P A(g/L)13.22 11.64(0~41.0)17.44 15.22(3.2~41.0)10.58 8.90(0~28.4)胆汁酸TBA( m ol/L)4.48 3.89(0.9~16.1)6.48 5.56(1.9~16.1)3.23 1.90(0.9~6.1)注:括号内是实验中原始数据的范围,统计结果为平均值 标准差的形式3.2 东北虎幼体与东北虎成体比较结果总蛋白和白蛋白含量,东北虎幼体小于成体,均呈极显著差异(P<0.01);球蛋白含量东北虎幼体大于成体,呈极显著差异(P<0.01)。

见表3。

3.3 东北虎幼体与华南虎幼体比较结果总蛋白、白蛋白及球蛋白含量,东北虎幼体均高于华南虎幼体。

二者总蛋白、球蛋白含量呈显著差异(P<0.05),白蛋白含量无显著差异(P>0.05)。

见表3。

3.4 东北虎幼体与猎豹幼体比较结果总蛋白和白蛋白含量,东北虎幼体高于猎豹,二者总蛋白含量无显著差异,白蛋白含量呈极显著差异(P<0.01);球蛋白含量东北虎幼体低于猎豹,呈极显著差异(P<0.01)。

见表3。

表3 东北虎幼体与东北虎成体、华南虎幼体、体猎豹幼体的比较结果检测项目东北虎幼体东北虎成体华南虎幼体猎豹幼体总蛋白TP(g/L)66.06 6.80(52.9~77.4)73.6 12.6**(57.1~90.3)61.7*(56.0~69.0)62.27 3.82(55~69)白蛋白ALB(g/L)34.19 2.51(29.6~38.3)46.5 3.2**(42.7~52.0)33.6(31.0~36.0)14.36 1.21**(12~16)球蛋白GLO(g/L)31.89 4.46(23.2~39.3)27.1 13.1**(12.8~46.5)28.1*(22.0~33.0)47.91 2.70**(43~53) 注:华南虎幼体的测定结果只有平均值,无标准差;*表示差异显著P<0.05,**表示极显著差异P<0.014 讨论所测13只东北虎幼体血清白蛋白、球蛋白含量及A/G 比值较为一致,变动范围不大。

这说明该实验中东北虎幼体营养状况良好且无消耗性疾病发生。

从表2可看出,测定的5项指标,东北虎幼体雌雄间均无显著差异(P>0.05)。

其中,总蛋白、白蛋白及球蛋白含量雌雄间无差异性的结果与凌铭德等(1998)、肖向红等(1998)报道的华南虎和狼的情况相同。

该实验中总蛋白、白蛋白及球蛋白含量平均值及变动范围,同张锡然等及胡新波报道的基本相同。

关于东北虎幼体前白蛋白和胆汁酸的研究未见文献报道,本实验首次测定。

前蛋白含量与胆汁酸含量,雌雄间均无显著差异(P>0 05)。

前白蛋白(PA)由肝细胞合成,其半衰期很短,仅约12h。

因此,测定其在血浆中的浓度对于了解蛋白质的营养不良、肝功能不全,比之白蛋白和转铁蛋白具有更高的敏感性。

胆汁酸(T B A)是胆汁中的主要成分,是胆固醇经肝组织代谢的最终产物。

在人的疾病诊断中,血清白蛋白(A)和总胆红素(TB I L)能反映肝脏的合成和代谢功能,但多在病情较重时才发生变化,并易受其它因素的影响。

而相关研究显示血清PA及PA、TBA的联合检测对于检测肝脏方面的疾病更为敏感,在病情较轻时就可以检测出机体器官的异常。