漆酶的研究进展及其应用
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第10卷第4期2012年7月生物加工过程Chinese Journal of Bioprocess Engineering Vol.10No.4Jul.2012doi :10.3969/j.issn.1672-3678.2012.04.015收稿日期:2011-05-03基金项目:国家高技术研究发展计划(863计划)资助项目(2009AA02Z209);国家自然科学基金资助项目(21106165;21176241)作者简介:王锋(1979—),男,江苏镇江人,博士,助理研究员,研究方向:微生物发酵;刘春朝(联系人),研究员,E-mail :czliu@home.ipe.ac.cn 漆酶及其应用王锋1,刘英1,汪印2,许光文2,刘春朝1(1.中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室,北京100190;2.中国科学院过程工程研究所多相复杂系统国家重点实验室,北京100190)摘要:结合当今该领域的最新研究进展,综述了漆酶来源、结构、作用机制、介体系统及其在水相和非水相中的应用,以期为漆酶催化性能的进一步研究提供一定的借鉴和参考。
关键词:漆酶;催化;废水处理;水相体系;非水相机体系中图分类号:Q814.2文献标志码:A文章编号:1672-3678(2012)04-0070-07Laccase and its applicationsWANG Feng 1,LIU Ying 1,WANG Yin 2,XU Guangwen 2,LIU Chunzhao 1(1.National Key Laboratory of Biochemical Engineering ,Institute of Process Engineering ,Chinese Academy of Sciences ,Beijing 100190,China ;2.National Key Laboratory of Multiphase Complex System ,Institute of Process Engineering ,Chinese Academy of Sciences ,Beijing 100190,China )Abstract :Laccases are multicopper oxidases.It has received the widespread attention because of non-specific oxidation ability.On the basis of the latest research in this field ,the paper summarized source of laccase ,structure ,mechanism of action ,mediator and its application in aqueous system and non-aqueous system so as to provide a reference for further improvement of the laccase catalysis.Key words :laccase ;catalysis ;wastewater treatment ;aqueous system ;non-aqueous system 漆酶是一种含铜的多酚氧化酶,和植物中的抗坏血酸氧化酶、哺乳动物的血浆铜蓝蛋白同属于蓝色多铜氧化酶的家族[1]。
漆酶的结构与催化反应机理漆酶是天然漆主要成分之一,含量约为10%。
存在于天然漆的含氮物质中,俗称生漆蛋白质、氧化酶。
是天然漆在常温下干燥时不可缺少的天然有机催化剂。
不溶于水,也不溶于通用有机溶剂,而溶于漆酚。
含氮物质接触乙醇后,能不可逆地从生漆中析出。
漆酶是一种氧化酶(能与分子氧起作用),而不是过氧化酶,漆酶能受HCN的影响,而过氧化酶则不受其影响。
漆酶可促进多羟基酚及多氨基苯的氧化,而不能促进单酚的氧化。
因漆酶的催化氧化作用,可以促进漆酚的氧化聚合,从而形成干固的膜。
漆酶对下述物质敏感:过氧化氢、氢氰酸、羟胺、硫化氢、氰化钾、重氮化钾(或钠)等。
漆酶在其他植物(土豆、蘑菇、苹果)中也有发现。
结构[2]典型的漆酶有三个结构域,其中T1铜离子位于结构域3、三铜离子中心位于结构域1和结构域3之间,此外还有结构域2,主要起联结作用以及与底物的结合作用。
但也有报道发现仅存在两个结构域(结构域1和结构域3)的漆酶蛋白,并且该蛋白质展现出较高的pH 稳定性和漆酶的其它氧化还原特性。
人们习惯上称蓝铜为T1铜离子,这个铜离子是人们通过光谱学的手段最早发现的铜离子。
T1位点的几何结构与普通的金属蛋白铜位点的几何结构有所不同,它是一个扭曲的四面体,通过半胱氨酸形成一个S-Cu健,此外还有两个组氨酸(HiS)的N原子以及甲硫氨酸的S原子成健。
催化氧化机理[2]漆酶的催化氧化是非常复杂的。
一方面,由于漆酶同过氧化酶和其它多酚氧化之间作用底物的相似性,比如现在经常被用作真菌漆酶的特征底物的丁香醛连氮和ABTS(2 ,2-连氮-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)),但是实际上过氧化酶也能够催化氧化它们;不过相对这些酶来说,漆酶反应过程中并不产生有害的过氧化氢和活性氧(ROS),但同时产生醌或半醌等强抗氧化剂,是非常绿色的反应。
许多报道为漆酶催化氧化的反应,经常缺乏进行它们之间有区别的实验报道。
不过,现在已经有一些学者注意到了这个问题的复杂性。
漆酶基因异源表达及其酶活性的研究进展刘晓庆;那日;郭九峰【摘要】近年来由于漆酶在生物漂白和农作物秸秆利用等方面具有广阔的应用前景,对漆酶的研究越来越受到国内外学者的重视.然而,自然界漆酶的产量和酶活较低,难以适应工业化生产需求.此外,漆酶的产酶效率低,成本高.实现漆酶的异源高效表达是解决这一问题的有效途径.目前,国内外已有多种来源的漆酶基因被成功克隆,并在不同的宿主细胞中实现异源表达,但迄今为止漆酶基因异源袁达结果仍然不理想,离真正实现漆酶的高效表达还有一定距离.【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2016(000)001【总页数】4页(P18-21)【关键词】漆酶;宿主细胞;异源表达;基因克隆;酶活性【作者】刘晓庆;那日;郭九峰【作者单位】内蒙古大学物理科学与技术学院,内蒙古呼和浩特010021;内蒙古大学自治区离子束生物工程重点实验室,内蒙古呼和浩特010021;内蒙古大学自治区离子束生物工程重点实验室,内蒙古呼和浩特010021;内蒙古大学自治区离子束生物工程重点实验室,内蒙古呼和浩特010021【正文语种】中文【中图分类】S188漆酶(laccase,Ec1.10.32)属于含铜的多酚氧化酶,能有效降解自然界中木质素等复杂有机物。
真菌和植物中都可以分泌漆酶,少数的昆虫和细菌也可以分泌漆酶,而真菌是漆酶的主要生产者。
它通过获得O2对苯酚物质进行催化作用,而生成物中仅有水。
漆酶是一种不可多得的环保型氧化酶。
漆酶是参与自然界木质素循环与利用的重要酶之一。
漆酶对富含木质素的农作物残渣的有效降解作用不仅可以减少秸秆焚烧带来的环境问题,而且可以提高青贮饲料的品质和利用率,对与木质素结构相似的污染物也有明显的降解能力。
据统计,漆酶有作用底物250多种[1]1。
漆酶的底物多样性决定了它是一种多功能氧化酶。
它在工业、农业及食品工业都有着极其广泛的应用。
近年来研究表明,漆酶在生物技术方面也有重要的作用,可用于生物传感器与生物检测。
食用菌产漆酶能力的比较及漆酶性能的研究的开题
报告
标题:食用菌产漆酶能力的比较及漆酶性能的研究
一、研究背景
漆酶是一种重要的酶类,对于化学品制备、皮革加工、纤维素处理
等工业领域具有广泛的应用,同时,在环境修复、食品加工等领域也有
一定的应用价值。
因此,漆酶的研究具有重要的理论和应用价值。
目前,已经有很多研究着眼于寻找能产生漆酶的菌株和研究漆酶的性能。
二、研究目的
本研究旨在比较不同食用菌株产漆酶的能力,并研究其漆酶的性能,为漆酶的产业化、工业应用提供一定的理论基础。
三、研究内容和方法
1、实验组成
本研究将选择几种常见的食用菌(如蘑菇、黑木耳、金针菇等),
对其进行培养和分离,筛选出产漆酶的菌株,并进行比较分析。
2、菌株筛选方法
首先,将每种食用菌菌丝接种于含有特定营养成分的培养基中,待
菌丝生长至成熟时,收集培养基液进行分析。
按照一定的生物化学试验
方法操作,检测液体中的漆酶含量。
通过比较不同菌株产漆酶能力的强
弱程度,筛选出其中产酶能力较好的菌株,并进行后续实验。
3、漆酶性能研究
对筛选出的菌株进行漆酶性能分析,包括酶催化作用的反应速率常数、温度敏感性等性能。
四、研究意义和预期成果
本研究将比较分析不同食用菌株产漆酶的能力,为漆酶的高效产业化提供基础研究支持。
同时,研究漆酶的性能,有助于了解和掌握该酶的特点和应用领域,有望为食品加工、检测和环境修复等领域提供新的解决方案。
预期成果:筛选出产酶能力较好的菌株,确定其漆酶的性能,并得出一定的结论,为后续的漆酶产业化和应用提供理论和实验基础支持。