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HPLC法测定雪上一枝蒿中雪上一枝蒿甲素含量的方法改进

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中医研究２０１４年第１期　

ＨＰＬＣ法测定雪上一枝蒿中雪上一枝蒿甲素含量　

的方法改进　

陈晓兰　，吴玉梅　，林亚平　，魏文珍　，刘毅２徐剑　

（１．贵阳中医学院，贵州贵阳５５０００２；２．贵阳市食品药品检验检测中心，贵州贵阳５５０００３）　

【摘　要】　目的改进雪上一枝蒿药材中雪上一枝蒿甲素的ＨＰＬｃ含量测定方法，为雪上一枝蒿的进一步研究奠　定基础。方法在文献研究的基础上，结合预试验，采／￣７０％乙醇回流提取雪上一枝蒿药材，用甲醇溶解提取物，并　

以Ｋｒｏｍａｓｉｌ　Ｃ１８色谱柱（１５０　ｍｍｘ４．６　ｍｍ，５　ｍ），乙腈一磷酸盐缓冲液（ｐＨ＝７．３）（１８：８２）￣流动相，流速为１．０　ｍＬ・　ｍｉｎ－１．检测波长为１９９　ｎｍ；柱温为３０￣Ｃ。结果采用本含量测定方法，雪上一枝蒿甲素的线性范围为０．２０８－　４．１７０　ｇ（ｒ：０．９９９９），平均回收率分别为９９．６％。结论该方法简化了文献报道的前处理过程，操作简便、准确、重复　

性良好．可为进一步研究其质量控制方法提供参考。　【关键词】　雪上一枝蒿；雪上一枝蒿甲素；含量测定方法的改进　【基金项目１国家自然科学基金：基于“治疗窗”的雪上一枝蒿微乳经皮给药系统的构建与评价。课题编号：　８１２６０６４６：贵州省科学技术基金项目，课题编号：黔科合Ｊ字［２０１２１２０６６号；贵州省中医药管理局项目，课题编号：　

ＱＺＹＹ２０１　１—５８。　【中图分类号】Ｒ２８４　【文献标识码】Ａ　【文章编号】１００７—４２４４（２０１４）０１—０４９—３　Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｂｕｌｌａｔｉｎｅ　Ａ　ｉｎ　Ａｃｏｎｉｔｕｍ　Ｂｒａｃｈｙｐｏｄｕｍ　Ｄｉｅｌｓ　ｂｙ　ＨＰＬＣ　

ＣＨＥＮ　Ｘｉａｏ－ｌａｎ，ＷＵ　Ｙｕ—ｍｅｉ，ＬＩＮ　Ｙａ—ｐｉｎｇ＊，ＷＥＩ　Ｗｅｎ—ｚｈｅｎ，ＬＩＵ　Ｙｉ，ＸＵ　Ｊｉａｎ　

ｆＧｕｉｙａｎｇ　ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｇｕｉｙａｎｇ　５５０００２，Ｃｈｉｎａ）　【关键词】Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｉｍｐｒｏｖｅ　ａ　ＨＰＬＣ　ｍｅｔｈｏｄ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　Ｂｕｌｌａｔｉｎｅ　Ａ　ｉｎ　Ａｃｏｎｉｔｕｍ　Ｂｒａｃｈｙｐｏｄｕｍ．ａｎｄ　ｌａｙ　ｔｈｅ　ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ　ｆｏｒ　Ａｃｏｎｉｔｕｍ　Ｂｒａｃｈｙｐｏｄｕｍ　ｔｏ　ｆｕｒｔｈｅｒ　ｓｔｕｄｙ．Ｍｅｔｈｏｄ　Ｏｎ　ｔｈｅ　ｂａｓｉｓ　ｏｆ　ｌｉｔｅｒａｔｕｒｅｓ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｔｅｓｔ．Ｔｈｅ　ｍｅｄｉｃｉｎａｌ　ｍａｔｅｒｉａｌｓ　ｗｅｒｅ　ｉｓｏｌａｔｅｄ　ｂｙ　７０％ｅｔｈａｎｏｌ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｗａｓ　ｄｉｓｓｏｌｖｅｄ　ｂｙ　ｍｅｔｈａｎｏ１．Ａ　Ｋｒｏ－　

ｍａｓｉｌ　Ｃ１８　ｃｏｌｕｍｎ（１５０　ｍｍｘ４．６　ｍｍ，５　ｍ）ｗａｓ　ｕｓｅｄ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｍｏｂｉｌｅ　ｐｈａｓｅ　ｃｏｎｓｉｓｔｅｄ　ｏｆ　ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ　ａｎｄ　ｐｈｏｓｐｈａｔｅ　ｂｕｆｉｅｒ（ｐＨ　ｏｆ　７．３）（１８：８２）．Ｔｈｅ　ｆｌｏｗ　ｒａｔｅ　ｗａｓ　１．０　ｍＬ・ｍｉｎ一１．Ｔｈｅ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ　ｗａｓ　ｓｅｔ　ａｔ　１９９　ｎｍ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ｃｏｌ—　ｕｍｎ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｗａｓ　３０℃．Ａ　ＨＰＬＣ　ｍｅｔｈｏｄ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　Ｂｕｌｌａｔｉｎｅ　Ａ．　Ｒｅｓｕｌｔ　Ｕｓｅ　ｔｈｅ　ｍｅｔｈ０ｄ　ｆｏｒ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ，Ｔｈｅ　ｃａｌｉｂｒａｔｉｏｎ　ｃｕｒｖｅ　ｗａｓ　ｌｉｎｅａｒ（ｒ＝Ｏ．９９９　９）ｉｎ　ｔｈｅ　ｒａｎｇｅ　ｏｆ　０．２０８　５－４．１７　ｌｘｇ　ｆｏｒ　Ｂｕｌｌａｔｉｎｅ　Ａ　

，ｔｈｅ　ａｖｅｒａｇｅ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｗａｓ　９９．６％．Ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　Ｂｕｌｌａｔｉｎｅ　Ａ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｍｅｄｉｃｉｎａｌ　ｍａｔｅｒｉａｌ　ｉｓ　ａｂｏｕｔ　４．６６　ｍｇ・ｇ一１．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｔｈｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｓｉｍｐｌｉｆｉｅｓ　ｔｈｅ　ｐｒｅｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｐｒｏｃｅｓｓ　ｒｅｐｏｒｔｅｄ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｌｉｔｅｒａｐｔｕｅ．Ｔｈｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｉｓ　ｓｉｍｐｌｅ，　

ａｃｃｕｒａｔｅ　ｗｉｔｈ　ｇｏｏｄ　ｒｅｐｒｏｄＵＣｉｂｉｌｉｔｙ，ａｎｄ　ｍａｙ　ｐｒｏｖｉｄｅ　ｔｈｅ　ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｆｕｒｔｈｅｒ　ｓｔｕｄｙ　ｉｔｓ　ｑｕａｌｉｔｙ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｍｅｔｈｏｄ．　

【Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ】Ａｃｏｎｔｕｍ　ｂｒａｃｈｙｐｏｄｕｍ；Ｂｕｌｌａｔｉｎｅ　Ａ；Ｉｍｐｒｏｖｅ　ｏｆ　ａ　ＨＰＬＣ　ｍｅｔｈｏｄ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　

雪上一枝蒿系毛茛科植物乌头属（Ａｃｏｎｉｔｕｍ）雪上　收载于１９９６年版《云南药品标准》，多个中药制剂中均　

一枝蒿（Ａｃ０ｎｉｔｕｍ　ｂｒａｃｈｙｐｏｄｕｍ　Ｄｉｅ１ｓ．）的干燥块根，别　有使用。雪上一枝蒿主要含有生物碱类成分。其药理作　

名有一枝蒿和铁棒锤等，主要分布在云南东北部、西北　用广泛，具有活血、镇痛、抗炎等作用，有大毒。但其主　

部及四川西南部，野生于海拔３．１　Ｋｍ一４．１　Ｋｍ的高山　要有效成分的含量测定方法报道很少且前处理较　草地、多石山坡，是云南和贵州地区民间习用的药材，　杂。本文采用７０％乙醇回流提取雪上一枝蒿药材，用　

４９　医学前沿２０１４年第１期　

醇溶解提取物，ＨＰＬＣ测定其主要有效成分雪上一枝蒿　

甲素的含量，结果表明该方法提取时间短且提取完全，　操作简便，准确，重复性良好，可为进一步研究其质量　

和开发新的产品奠定基础。　

１材料　

岛津ＬＣ一２０Ａ高效液相色谱仪；岛津ＳＰＤ一２０Ａ紫　外检测器；ＬＣ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ色谱工作站。　雪上一枝蒿甲素对照品（中国药品生物制品检定　

所。批号１０８９５—２００４０４）。　样品：取购自昆明市宇斯药业有限责任公司，经贵阳中　

医学院王祥培教授鉴定为毛茛科植物乌头属（Ａｃｏｎｉ．　

ｔｕｍ）短柄乌头（Ａｃｏｎｉｔｕｍ　ｂｒａｃｈｙｐｏｄｕｍ　Ｄｉｅｌｓ．）的干燥块　根。　试剂：乙腈、甲醇为色谱纯，其他所用试剂均为分　析纯。　

２方法与结果　

２．１色谱条件　

色谱柱为Ｋｒｏｍａｓｉｌ　Ｃ１８柱（１５０　ｍｍｘ４．６　ｍｍ，５　ｍ）；流动相为乙腈一磷酸盐缓冲溶液（ｐＨ　７．３）（１８：８２）；　

流速为１．０　ｍＬ・ｍｉｎ一１：检测波长为１９９　ｎｍ；柱温为３０　ｏＣ；进样量为１０　Ｌ。　

２．２溶液的配制　２．２．１对照品溶液的制备精密称取雪上一枝蒿甲素对　

照品４．１７　ｍｇ，置于１０　ｍＬ量瓶中，加甲醇溶解并稀释　至刻度，摇匀。再精密吸取上述对照品溶液３　ｍＬ，置于　

５　ｍＬ量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，制成每１　ｍＬ　中含有雪上一枝蒿甲素１２５．１　ｇ的对照品溶液。　

２．２．２供试品溶液的制备精密称取雪上一枝蒿药材　粉末约１．０　ｇ，置于１５０　ｍＬ圆底烧瓶中，精密加人７０％　

乙醇５０　ｍＬ，水浴加热回流提取２　ｈ，滤过，残渣用７０％　乙醇振摇洗涤３次，每次１０　ｍＬ，合并滤液，滤液于８０　

℃水浴上挥干后用甲醇溶解并定容至５０　ｍＬ量瓶中，　

超声５　ｍｉｎ，用微孔滤膜（０．４５　ｍ）滤过，取滤液，即得。　２．３专属性试验　

分别取空白溶剂、对照品溶液、样品溶液注入液相　

色谱仪中，色谱条件同前，进样１０　Ｌ，测定，结果表明　

５０　雪上一枝蒿甲素分离良好，且在出峰处无干扰，见图　

１。　图１雪上一枝蒿甲素　

【空白溶剂（Ａ）、雪上一枝蒿甲素对照品（Ｂ）和样品（ｃ）】　

２．４标准曲线及线性范围　精密吸取雪上一枝蒿甲素对照品溶液（０．４１７　ｍｇ・　

ｍＬ一１）适量，分别以甲醇制成含雪上一枝蒿甲素０．０２０　

８５，０．０４１　７，０．０８３　４，０．１２５　１，０．２０８　５，０．４１７　ｍｇ・ｍＬ一１　的对照品溶液。按样品测定项下的色谱条件测定，进　

样量为１０　，以对照品的进样量（Ｉｘｇ）为横坐标，色谱　峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程Ｙ＝６９２　

１０６　Ｘ一２　５４６－３，ｒ＝０．９９９　９。雪上一枝蒿甲素在０．２０８　

５～４．１７０　ｇ线性关系良好。　２．５精密度试验　

取对照品溶液，按上述色谱条件连续进样６次，每　次进样量１０　Ｌ，记录色谱峰面积，计算得的ＲＳＤ为　

０．８３％。表明仪器精密度良好。　２．６稳定性试验　

取雪上一枝蒿供试品溶液按上述色谱条件分别于　０，２，４，６，８，１０，１２，２４　ｈ进样分析，记录色谱峰面积，计　算峰面积在２４　ｈ内的ＲＳＤ为１．８％，表明供试品溶液　

在２４　ｈ内稳定性良好。　

２．７重复性试验　精密称取同一批号雪上一枝蒿药材粉末约１．０　ｇ，　

照供试品溶液的制备项下制备供试品溶液，平行试验６　

份，在上述色谱条件下进样分析，计算雪上一枝蒿甲素　的含量，其ＲＳＤ为１．２％，结果表明该方法重复陛良好。　

２．８加样回收率试验　

精密称取已知含量的雪上一枝蒿药材粉末９份．　各０．５

　ｇ。每三份分别加入低、中、高３个不同质量浓度　的雪上一枝蒿甲素对照品溶液，照供试品溶液的制备　项下制备样品溶液，在上述色谱条件下进样分析，结果　

见表１。　表１加样回收率　

称样量儋　样品中音量，ｍｇ　加入量／ｍｇ　测得量／ｎａｇ　回收率，％　平均值，％　ＲＳＤ／％　０．５０２　１　２．３４０　８　２．４２８　８　４．７５６　０　９９－４　０．５０１　２　２．３３６　６　２．４２８　８　４．６５１　３　９５－３　０．５０１　０　２．３３５　７　２．４２８　８　４．７１９　７　９８．２　０．５０１　１　２．３３６　１　２．６９１　０　４．９８８　６　９８．６　９９．６　２．７　０．５ｏ０　８　２．３３４　７　２．６９１　０　４．９８８　４　９８．６　０．５０２　０　２．３４０　３　２．６９１　０　５．１３１　２　１０３．７　０．５０１　０　２．３３５　７　３．１０９　６　５．３７９　１　９７．９　０．５０１　８　２．３３９　４　３．１０９　６　５．５２６　８　１０２．５　０．５０２　２　２．３４１　３　３．１０９　６　５．５２８　６　１０２．５　

２．９样品的含量测定　

取３批雪上一枝蒿药材约１．０　ｇ，精密称定，按供试　

品溶液制备方法制备，得供试品溶液。并按上述含量测　定方法分别测定其雪上一枝蒿甲素的含量，见表２。　

表２雪上一枝蒿样品中雪上一枝蒿甲素的质量分数测定　

Ｎｏ．　批号　雪上一枝蒿甲素（ｍｇ・ｇ一１１　

１　１２１００１　４．６６　

２　１２１１０５　４．７ｌ　

３　１２１１２８　４．６３　

３讨论　

３．１检测波长的选择　

通过对峰面积及峰形等的比较，雪上一枝蒿甲素　在１９９　ａｍ波长处的峰面积最大，吸收最完全，且干扰　

小，因此选择１９９　ｎｍ为本试验的检测波长。　３．２色谱柱的选择　

在试验过程中曾选用过Ｂｏｓｔｏｎ　Ｂｏｓｃｈｒｏｍ　ＯＤＳ、Ｄｉ．　ａｍｏｎｓｉｌ　Ｃ　１　８柱等，但分离效果都不理想。后来所选用　

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新疆一枝蒿药材高效液相色谱指纹图谱研究

新疆一枝蒿药材高效液相色谱指纹图谱研究

新疆一枝蒿药材高效液相色谱指纹图谱研究

贺飞;侯桂萍;仲婕;阿布力米提·伊力;阿吉艾克拜尔·艾萨

【期刊名称】《医药导报》

【年(卷),期】2010(29)7

【摘 要】目的 研究新疆一枝蒿药材的高效液相色谱指纹图谱,为科学评价及有效控制其质量提供可靠方法.方法 色谱柱:Inertsil ODS- 3柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相为甲醇-0.2%的甲酸水溶液,梯度洗脱;流速:1 mL·min-1;检测波长:245 nm;柱温:32 ℃.结果 该方法可使新疆一枝蒿中各成分得到较好的分离,并根据检测结果确定了14个共有指纹峰.结论 该指纹图谱检测方法简便、重复性好,可作为新疆一枝蒿药材质量控制的重要方法.

【总页数】4页(P854-857)

【作 者】贺飞;侯桂萍;仲婕;阿布力米提·伊力;阿吉艾克拜尔·艾萨

【作者单位】中国科学院新疆理化技术研究所,乌鲁木齐,830011;中国科学院研究生院,北京,100039;新疆西域药业有限公司,乌鲁木齐,830011;中国科学院新疆理化技术研究所,乌鲁木齐,830011;中国科学院新疆理化技术研究所,乌鲁木齐,830011;中国科学院新疆理化技术研究所,乌鲁木齐,830011

【正文语种】中 文

【中图分类】R282.7;R927

【相关文献】 1.新疆一枝蒿氨基酸的高效液相色谱分析 [J], 白红进;赵小亮;万英

2.新疆一枝蒿药材人工种植品种与野生品种的差异性分析 [J], 蔡晓翠;顾政一;贺金华;张瑞萍;毛艳;康雨彤

3.新疆一枝蒿药材的研究 [J], 方险峰;

4.新疆一枝蒿药材双波长HPLC指纹图谱的研究 [J], 张逸凡;鲍凤霞;夏振江;尚靖

5.高效液相色谱法测定新疆一枝蒿中一枝蒿酮酸的含量 [J], 马成;杨敏;张烜;堵年生

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雪上一枝蒿规范化生产标准操作规程(SOP)草案研究

雪上一枝蒿规范化生产标准操作规程(SOP)草案研究

雪上一枝蒿规范化生产标准操作规程(SOP)草案研究

杨涛;杨少华;陈翠;杨丽云;李培清

【摘 要】为规范化云南道地药材雪上一枝蒿的生产,以保证产品的质量,参照国家药品监督管理局颁布实施的《中药材生产质量管理规范》有关要求和内容,种质、产地环境要求、生产管理和加工、质量要求以及包装、储存、运输等多方面对雪上一枝蒿的整个生产过程做出统一的规定和要求,以适应云南东北部、西北部高寒山区雪上一枝蒿生产的需求,对规范雪上一枝蒿生产、保证药材质量有较好的指导价值.

【期刊名称】《云南农业科技》

【年(卷),期】2013(000)005

【总页数】4页(P38-41)

【关键词】雪上一枝蒿;规范化;标准操作规程

【作 者】杨涛;杨少华;陈翠;杨丽云;李培清

【作者单位】云南省农业科学院药用植物研究所,云南昆明650205;云南省农业科学院高山经济植物研究所,云南丽江674100;云南省农业科学院高山经济植物研究所,云南丽江674100;云南省农业科学院高山经济植物研究所,云南丽江674100;会泽县科技局,云南会泽654200

【正文语种】中 文

雪上一枝蒿为毛茛科乌头属植物短柄乌头（A－conitum brachypodum Diels），主要分布在云南省及四川省，为1974年版、1996年版《云南省药品标准》及1977年《中华人民共和国药典》收载品，云南省道地药材。雪上一枝蒿具有消炎止痛，祛风除湿的功效，可治疗跌打损伤、骨折、风湿骨痛、牙痛、疮疡肿毒、毒蛇咬伤等 [1，2]，在云南、四川民间广为流传和使用，疗效显著；目前在雪上一枝蒿伤湿止痛膏、雪上一枝蒿止痛搽剂、雪上一枝蒿片等多种制剂中为主药。随着雪上一枝蒿的开发，市场需求量日益增加。近年云南会泽、东川、丽江等地已开展栽培，形成了一定规模。为进一步推广和规范种植雪上一枝蒿，保证雪上一枝蒿药材产品质量和产量，结合近几年的研究及生产实践经验，初步制定雪上一枝蒿规范化生产标准操作规程（SOP）草案，为云南雪上一枝蒿主产区规范化种植提供技术参考与指导。

雪上一枝蒿功效与作用

雪上一枝蒿功效与作用

雪上一枝蒿功效与作用

雪上一枝蒿为毛茛科植物短柄乌头、展毛短柄乌头、曲毛短柄乌

头、宣威乌头、小白撑、铁棒锤、伏毛铁棒锤等的块根。主产于云南、

四川等地。夏末秋初采挖，晒干。经水泡或童尿制后，漂净，切片用。

【药性】苦、辛，温。有大毒。归肝经。

【功效】袪风湿，活血止痛。

【应用】

1.疼痛证。本品辛散温通，性猛善走，能袪风湿，活血脉，尤擅

止痛，为治疗多种疼痛的良药。常用于风湿痹痛、神经痛、牙痛、跌打

伤痛、术后疼痛及癌肿疼痛等。可单用研末服，或泡酒外擦，或制成注

射剂用。

2.疮疡肿毒，虫蛇咬伤。本品能以毒攻毒，活血止痛，可单用泡

酒外擦，治疮疡肿毒，毒虫及毒蛇咬伤、蜂叮等。

【用法用量】研末服，0.02～0.04g。外用,适量。

【使用注意】内服须经炮制并严格控制剂量，孕妇、老弱、小儿

及心脏病、溃疡病患者忌服。

【现代研究】

1.化学成分：雪上一枝蒿含雪上一枝蒿甲、乙、丙、丁、戊、

己、庚素，乌头碱，次乌头碱，3-去氧乌头碱，3-乙酰乌头碱，雪乌

碱，丽鲁碱，准葛尔乌头碱，欧乌头碱等。

2.药理作用：雪上一枝蒿甲、乙、丙、丁素均有镇痛作用，伏毛

铁棒锤总生物碱的镇痛作用较强;3-乙酰乌头碱是一种不成瘾镇痛剂，对

炎性肿胀、渗出及棉球肉芽增生等均有明显的抑制作用;伏毛铁棒锤总

碱具有较强的局部麻醉作用;雪上一枝蒿对蛙心有近似洋地黄样作用，

其所致心功能障碍，可被阿托品拮抗;一枝蒿甲、乙对心呈乌头碱样作

HPLC法测定复方一枝蒿速释微丸中(<em>R,S</em>)-告依春、一枝蒿酮酸、靛玉红的含量

HPLC法测定复方一枝蒿速释微丸中(R,S)-告依春、一枝蒿酮酸、靛玉红的含量

Journal of Pharmaceutical 药物分析杂志

Chinese·142· 药物分析杂志Chin J Pharm Anal 2017,37(1)

HPLC法测定复方一枝蒿速释微丸中（R，S）-告依春、 一枝蒿酮酸、靛玉红的含量*

姜雯1，于宁2，金小越1，何承辉2，邢建国2**（1.新疆医科大学第六附属医院，乌鲁木齐830000；2.新疆维吾尔自治区药物研究所，乌鲁木齐830004）

摘要　目的：建立同时测定复方一枝蒿速释微丸中（R，S）-告依春、一枝蒿酮酸、靛玉红3种化学成分含量的高效液相色谱方法。方法：采用Shim-pack ODS色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），流动相为乙腈（A）- 0.5 %磷酸水溶液（B），梯度洗脱（0~15 min，3%A→10%A；15~20 min，10%A→35%A；20~35 min，35%A），检测波长为245 nm（0~20 min，检测（R，S）-告依春）和289 nm（25~35 min，检测靛玉红和一枝蒿酮酸），流速 1.0 mL·min-1，柱温30 ℃。结果：（R，S）-告依春、靛玉红、一枝蒿酮酸质量浓度分别在3.904~54.656 μg·mL-1（r=0.999 5）、3.064~42.896 μg·mL-1（r=0.999 3）和7.264~101.696 μg·mL-1（r=0.999 6）范围内呈良好线性关系；复方一枝蒿速释微丸中3种有效成分的平均回收率（n=3）分别为99.27%~100.14%（RSD<1.2%），99.16%~99.72%（RSD<1.4%），99.39%~99.81%（RSD<1.7%）。3批样品中（R，S）-告依春、靛玉红、一枝蒿酮酸3个成分的含量测定结果分别为0.343 5~0.350 1、0.190 7~0.199 9、0.887 2~0.895 6 mg·g-1。结论：方法学验证结果表明，本法可为复方一枝蒿速释微丸多指标质量评价及控制提供科学依据。关键词：复方一枝蒿速释微丸；板蓝根；大青叶；一枝蒿；（R，S）-告依春；一枝蒿酮酸；靛玉红；高效液相色谱法中图分类号：R 917 文献标识码：A 文章编号：0254-1793（2017）01-0142-06doi：10.16155/j.0254-1793.2017.01.19