人类岩藻糖基转移酶5特异性分布及其在精细胞的表达与定位

3-岩藻糖基乳糖标准品概述及解释说明1. 引言1.1 概述本文旨在对3-岩藻糖基乳糖标准品进行全面的概述和解释说明。

随着科学技术的快速发展，生物医学领域对高纯度、高质量的标准品需求日益增加。

作为一种常用的糖类分析标准品，3-岩藻糖基乳糖标准品在实验室、生物医学领域以及食品工业和药品制造业中具有重要意义。

1.2 文章结构本文共分为五个部分。

引言部分将首先提供对文章整体内容进行概述，明确文章目标和结构。

随后，将依次对3-岩藻糖基乳糖标准品的定义和特性、制备与测定方法以及其在实验室、生物医学领域以及食品工业和药品制造业中的重要性与意义进行详细阐述。

最后，文章将总结主要观点和发现结果，并提出未来发展方向。

1.3 目的本文旨在通过对3-岩藻糖基乳糖标准品进行综合概述和解释说明，帮助读者全面了解该标准品的定义、特性、制备与测定方法，以及其在各领域中的重要性与意义。

通过本文的阐述，读者将能够更好地理解和应用3-岩藻糖基乳糖标准品，从而推动相关领域的科学研究和技术发展。

2. 3-岩藻糖基乳糖标准品的定义和特性：2.1 定义：3-岩藻糖基乳糖标准品是一种用于检测和分析食品、药品以及生物医学领域中的岩藻糖含量的参考物质。

岩藻糖是一种重要的天然寡糖，具有多种生物活性和医学价值。

为了保证分析结果的准确性和可靠性，科学家们开发出了这种标准品，用作实验室中对比分析样本时的基准。

2.2 特性：3-岩藻糖基乳糖标准品具有以下特性：a) 高纯度：该标准品经过精心制备，并经过严格纯化处理，确保其中不含杂质或其他干扰物质。

高纯度的标准品可以提供可靠、稳定的基线数据。

b) 稳定性：由于长期储存可能会导致分子结构改变或降解，3-岩藻糖基乳糖标准品采用适当的保存条件，如低温冷冻或真空封存等方式进行保存，以保持其稳定性和活性。

c) 可溶性：为了方便使用，3-岩藻糖基乳糖标准品具有很好的溶解性。

它可以在水或其他常见的溶剂中轻松溶解，使实验人员能够更加方便地进行测定和分析。

黄鳝α-L-岩藻糖苷酶基因克隆及其在雌雄个体间的表达分析王道;廖高鹏;肖亚梅【摘要】The alpha-l-fucosidase-1(FUCA1) is a member of the glycosyl hydrolase family and plays an im-portant role in the catabolism of glycoproteins , glycolipids and other bioactive macromoleculesreactions .To further explore the functions of FUCA1 in fish reproductive development , the FUCA1 gene has been isolated from ricefield eel for the first time , and comparative analyses of their gene sequences have been conducted by means of online software SMART .It is shown that gene amino acid sequence of the FUCA1 contains three transmembrane domains and four low copy areas .Its specificity of gonadal tissues has also been examined by RT-PCR, which reveals that the expression level of FUCA1 in the ovary is higher than that in the testis of ricefield eel .It is therefore claimed that the FUCA1 gene may be involved in the regulationof sex reversal in ricefield eel .%FUCA1是糖基水解酶家族的成员之一，参与糖蛋白、糖脂等生物活性大分子的分解代谢反应．为了进一步了解α-L-岩藻糖苷酶在鱼类生殖发育中的功能，首次分离了黄鳝FUCA1基因，利用在线软件SMART对所克隆出来的FUCA1基因部分核苷酸序列及其推导的氨基酸序列进行对比分析，其结果表明该序列包含了3个跨膜结构域和4个低拷贝区域．通过RT-PCR检测了FUCA1在黄鳝性腺组织特异性表达状况， FUCA1基因在黄鳝雌性性腺中的表达量高于在雄性性腺的表达量．FUCA1基因在黄鳝雌雄个体间的差异性表达表明，FUCA1基因可能参与黄鳝性逆转生殖发育调控．【期刊名称】《湖南师范大学自然科学学报》【年(卷),期】2013(000)004【总页数】5页(P69-73)【关键词】黄鳝;性逆转;FUCA1【作者】王道;廖高鹏;肖亚梅【作者单位】湖南师范大学生命科学学院，教育部蛋白质化学和鱼类发育生物学重点实验室，中国长沙 410081;湖南师范大学生命科学学院，教育部蛋白质化学和鱼类发育生物学重点实验室，中国长沙 410081;湖南师范大学生命科学学院，教育部蛋白质化学和鱼类发育生物学重点实验室，中国长沙 410081【正文语种】中文【中图分类】Q786;S917岩藻多糖降解酶主要包括3种酶：岩藻多糖酶、α-L-岩藻糖苷酶和硫酸酯酶．α-L-岩藻糖苷酶是一种催化含岩藻糖基的糖蛋白、糖脂等生物活性大分子水解酶的溶酶体酸性水解酶，主要负责水解岩藻多糖糖苷键的非还原末端的L-岩藻糖残基，释放出岩藻糖[1]，广泛分布于人体和动物的组织细胞、血液和体液中[2-4]．FUCA1(α-L-岩藻糖苷酶-1)属于糖基水解酶29家族的一员．FUCA1作为一种同型四聚体，负责水解和减少在各种组织中的糖蛋白的部分碳水化合物．研究证实α-L-岩藻糖苷酶基因是小鼠性腺发育的相关基因，小鼠精子顶体中的N-乙酰基-葡萄糖胺苷酶，被证明参与精卵识别[5]．黄鳝(Monopterus albus)，属于硬骨鱼纲(Osteichthyes)，合鳃目(Synbranchiformes)，为温带淡水鱼类，拥有复杂的生殖发育过程．黄鳝从受精卵发育到首次性成熟时是雌性个体，随后逐渐地发育为雄性个体，中间的过渡时期为雌雄同体．黄鳝从雌到雄的转变过程被称为性逆转．黄鳝这种独特的天然生理现象使它成为研究鱼类性别控制机理的一种重要动物．本研究选用黄鳝(Monopterus albus)为研究材料，研究FUCA1基因在鱼类不同生殖发育阶段中的分化表达模式，以进一步了解和发现岩藻糖苷酶基因在黄鳝性逆转调控中的作用，为探究鱼类的性别决定机制提供新线索．1 材料与方法1.1 试验材料从湖南省长沙市水产批发市场购买实验用黄鳝．选取已经达到性成熟阶段的雌、雄黄鳝(雌雄各3尾)，用解剖刀断头放血后，迅速用镊子摘取黄鳝的雌、雄性腺组织，并且用液氮处理后，冻存于-80 ℃的冰箱中备用．1.2 主要试剂FUCA1特异引物由上海生物工程公司合成；总RNA提取试剂盒E.Z.N.A Total RNA KitⅡ购自Omega公司；反转录试剂盒RevertAid First strand cDNA Sythesis Kit购自Fermentas 公司；SMARTer RACE cDNA Amplification Kit试剂盒购自Clontech公司；UniQ-10柱式DNA胶回收试剂盒购自上海生物工程公司；PCR Mix 购自北京天根生化科技有限公司；pMD18-T载体购自Takara公司．1.3 试验方法1.3.1 黄鳝FUCA1基因cDNA克隆首先从黄鳝卵巢组织中用RNA提取试剂盒得到总RNA，然后根据反转录试剂盒(RevertAid First strand cDNA Sythesis Kit)做反转录反应以获取模板cDNA．根据NCBI的genebank中已经报道的人FUCA1基因(GenBank accession number: nm000147.4 )和鼠FUCA1(GenBank accession number: nm024243.4)共同的保守区，用软件Primer premier 5.0设计一对简并引物E-1和E-2(E-1：5′-TCGGGATTTGGTTGGTG-3′，E-2：5′-CTGGCAAGCTCTGTGGC-3′)．再以cDNA为模板，选用正负引物进行PCR扩增反应，PCR反应总体积为20 μL (灭菌water 7 μL，2×Taqmix溶液10 μL，cDNA模板1 μL，正负引物各1μL)．PCR反应条件：94 ℃预热 5 min；94 ℃ 30 s，55 ℃ 30 s，72 ℃ 2 min，进行35 个循环；72 ℃ 延伸10 min，最后4 ℃保存．用1.6%的琼脂糖凝胶进行电泳检测目的条带，用小刀迅速切下目的条带，回收纯化、克隆后送上海生工公司测序．3′端RACE方法的扩增：根据已经获得的黄鳝FUCA1基因的中间片段设计特异引物F3OP和F3IP(F3OP：5′-AGTGCTGCTGGAACGGAAATGAC-3′，F3IP：5′-TGTTGGACCGCAGCCAGC-3′)．使用试剂盒SMARTer RACE cDNA Amplification Kit获取3′的cDNA，吸取1 μL作为模板，用F3OP和10×UPM混合引物(long 0.4 μmol/L 5′-CTAATACGACTCACTATAGGGCAAGCAGTGGTATCAACGCAGAGT-3′，short2 μmol/L：5′-CTAATACGACTCACTATAGGGC-3′)进行PCR扩增反应，PCR总体积20 μL (灭菌water 7 μL，2×Taqmi x溶液10 μL，cDNA模板1 μL,正负引物各1 μL)，PCR反应条件:94 ℃预热5 min；94 ℃ 30 s，72 ℃ 2 min，5 个循环；94 ℃ 30 s，61 ℃ 30 s ，72 ℃ 2 min，5个循环；94 ℃ 30 s，62 ℃ 30 s，72 ℃ 2 min，25个循环；72 ℃延伸10 min，4 ℃保存．为了提高扩增条带的特异性，将得到的PCR产物稀释45倍，用移液器取1 μL为模板，然后用引物F3IP和NUP(10 μmol/L：5′-AAGCAGTGGTATCAACGCAGAGT-3′)进行PCR扩增反应，总体积20 μL ，PCR反应条件：94 ℃预热5 min；94 ℃ 30 s，60 ℃ 30 s，72 ℃ 2 min，30个循环；72 ℃延伸10 min，4 ℃保存．用1.5%的琼脂糖凝胶电泳扫胶，用小刀快速切下目的条带，克隆后送上海生工公司测序．1.3.2 RT-PCR检测FUCA1基因的表达已经达到性成熟的黄鳝被断头放血数分钟后，立即用镊子摘取2种不同的性腺组织：卵巢和精巢．用OMEGA公司的总RNA提取试剂盒提取不同性腺组织的总RNA．根据先前已经克隆出来的黄鳝FUCA1基因的核苷酸序列用Primer premier 5.0软件设计mRNA水平上所需要的表达引物E-1、E-2(表1)．进行PCR反应总体积为20 μL (2×Taqmix溶液10 μL，water 6 μL，cDNA模板2 μL，正负特异引物各1 μL)．PCR反应条件：94 ℃预热5 min；94 ℃ 30 s，55 ℃ 30 s，72 ℃ 2 min，进行35 个循环；72 ℃ 延伸10 min，4 ℃ 保存．最后用1.5%的琼脂糖凝胶进行电泳，检测目的条带，以β-actin为实验内参．表1 PCR表达引物及其引物序列Tab.1 The primers and their sequences of PCR引物primer引物序列primer sequencesE-15'-TCGGGATTTGGTTGGTG-3'E-25'-CTGGCAAGCTCTGTGGC-3'β-actin(+)5'-CCGTGACCTGACTGACTACCTC-3'β-actin(-)5'-ATACCGCAAGATTCCATACCC-3'2 结果2.1 黄鳝FUCA1基因核苷酸和氨基酸序列采用从黄鳝性腺提取的总RNA进行RT-PCR．按照已经报道的人FUCA1基因(GenBank accession number: nm000147.4)和鼠FUCA1基因(GenBank accession number: nm024243.4)保守序列设计简并引物E-1和E-2．用引物E-1和E-2扩增出FUCA1部分基因片段，获得1 200左右的DNA带，克隆后酶切鉴定、测序，序列长度为1 175 bp序列(图1)．利用在线软件SMART对本实验所克隆出来的FUCA1基因部分序列进行对比分析，其结果表明该序列包含了3个跨膜结构域(图2)．图1 黄鳝FUCA1基因核苷酸及蛋白质序列Fig.1 FUCA1 gene nucleotide andamino acid sequence of ricefield eel cDNA图2 SMART软件分析图Fig.2 SMART software analysis chart2.2 FUCA1在黄鳝雌雄性腺组织mRNA表达水平检测结果提取黄鳝的卵巢、精巢，先后进行了3次重复的RT-PCR实验，检测了FUCA1基因在不同组织中的表达，并使用生物软件GEL-PRO对3次PCR产物的凝胶图进行了半定量灰度分析.PCR扩增图谱显示，FUCA1基因可在黄鳝的精巢和卵巢组织中检测到，其在卵巢中的mRNA的表达量高于在精巢组织(图3)．图3 FUCA1基因在黄鳝2种不同组织中mRNA水平的表达(1.精巢；2.卵巢)Fig.3 The mRNA expression of FUCA1 in ricefield eel different tissues(1.testis;2.ovary)3 讨论目前哺乳动物的Sry基因、鸡的Dmrt1基因、青鳉Dmy基因和爪蟾Dm-w基因被认为是脊椎动物性别决定的关键基因，研究人员通过分析比对这些脊椎动物的外显子-内含子基因结构，有趣地发现，青鳉的Dmrt1、Dmy和爪蟾的Dm-w、Dmrt1基因都含有非编码型的第一外显子，而小鼠和鸡的Dmrt1却没有 [6]．黄鳝是一类雌性先熟的雌雄同体鱼类，其性别发育方向为单方向进行，随着卵巢的败育，逐渐过渡到雄性发育[ 7-8]．20世纪90年代初，刘建康在研究黄鳝繁殖习性中首次报道了黄鳝的性逆转现象[9]．但是到目前为止，我们对其性逆转的分子发育机制还不甚了解．最新实验研究表明，动物的性别决定是一个由多基因共同调控的复杂过程．在人和哺乳动物性别决定机制方面，位于Y染色体上的Sry基因被认为是性别决定的关键基因[10-11]．周荣家等以人Sry基因序列合成PCR引物，以黄鳝DNA为模板进行PCR扩增，并经随机引物法DIG标记的人Sry基因探针进行Southern印迹杂交，结果表明黄鳝基因组存在人的Sry同源基因[12]．在黄鳝的基因组以及cDNA中克隆了两个Sox9基因，这两个基因在黄鳝3种性腺中的表达图式一致，但是特异地出现在具有双向分化潜能的性腺上皮的外侧，这提示了它们在黄鳝性反转的性腺分化中有着重要的作用[13-14]．此家族的Sox17基因主要在黄鳝的3种性腺、脑、脾中表达，表明可能参与黄鳝性逆转[15]．商璇等也发现核糖体蛋白93不但具有管家基因的功能，还涉及参与了调控性腺分化等发育过程[16]．在黄鳝的不同发育时期，荧光定量技术显示了芳香化酶基因P450arom 和P45011β表达量存在差异，进一步说明类固醇在黄鳝性逆转过程中起着重要作用[17]．Dmrt1b基因是目前为止唯一一个硬骨鱼类中发现的，在青鳉鱼中起性别决定的基因．研究表明黄鳝中Dmrt1基因在成体性腺中特异表达，且在性逆转的过程中逐渐升高，说明该基因可能在性反转的过程中有重大的作用[18]．黄鳝性腺发育过程中，吕道远等用RNA反义探针原位杂交技术，对vasa基因的表达也进行了研究，结果显示黄鳝的雄性生殖细胞可能起源于雌性阶段卵巢被膜中的原始生殖细胞[19]．在线虫和果蝇中，vasa基因缺失会导致阻碍卵子正常功能，精子受阻也发生在vasa基因被敲除的小鼠中[20]．本实验室之前研究工作证实ERK和JNK在黄鳝卵原细胞和精原细胞均有表达，提示在黄鳝卵母细胞发育成熟过程中，ERK和JNK可能起着重要的调控作用[21]．根据陈丽莉等报道JNK1基因在黄鳝雌性性腺组织中的表达量要远远高于雄性性腺组织中的表达量，而JNK3基因在金鱼和斑马鱼雌、雄性腺中的表达结果是精巢组织中有显著的表达，而在卵巢中未检测到[22]．所有这些都提示着：JNKs家族参与了鱼类的性别决定和性腺发育的调控过程[23]．鱼类的FUCA1基因研究甚少，FUCA1基因在黄鳝中卵巢的表达量高于精巢，提示FUCA1基因与黄鳝的性逆转可能有密切关联．同时FUCA1还能够造成SSEA的表达量的降低，推测FUCA1可能是调控SSEA的关键酶．肖亚梅等用免疫组化对黄鳝雌雄性腺SSEA的组织细胞定位，表明SSEA在黄鳝雄性性腺中的表达量高于在雌性性腺中的[23]．在黄鳝自然性逆转过程中，是否通过α-L-岩藻糖苷酶这种聚糖途径对下游的靶基因SSEA的表达调节来控制其生殖发育呢？α-L-岩藻糖苷酶在黄鳝性逆转过程中的作用机制有待于更加深入的研究．参考文献：[1] 单瑞芬,吴茜茜,蔡敬民.岩藻多糖降解酶的研究进展[J].安徽农业科学,2012,40(19):9996-9997.[2] 王春新,谢国强.血清α-L岩藻糖的研究及其临床应用[J].医学检验进修杂志, 1998,5(4):151-152.[3] TAKESHITA H, YASUDA T, NADANO D, et al. Genetically polymorphic alpha-L-fucosidase(FUCA1)isozymes detected in blood plasma[J].Hum Genet, 1994,94(3):224-230.[4] CORDERO O J, MERINO A, BUGIA B, et al. Cell surface human alpha-L-fucosidase[J].Eur J Biochem, 2001,268(11):3321-3331.[5] AVILES M, ABASCAL L, CASTELLS M T, et al. Immunocytochemical localization andbiochemical characterization of a novel plasma membrane-associated,neutral pH opt-imum ailpha-l-fucosidase from rat testis and epdidymal spermatozoa[J].Biochem J, 1996,318(3):821-831.[6] MAWARIBUCHI S, YOSHIMOTO S, OHASHI S, et al. Molecular evolution of vertebrate sex-determining genes[J].Chromosome Res, 2012,20(1):139-151.[7] 肖亚梅.黄鳝繁殖生物学研究[J].湖南师范大学自然科学学报, 1995,18(4):45-51.[8] 肖亚梅,刘筠.黄鳝由间性发育转变为雄性发育的细胞生物学研究[J].水产学报, 1995,19(4):297-301.[9] 刘建康,顾国彦.鳝鱼初生雌雄同体现象之研究[J].国立中央研究动植物研究所丛刊, 1944,15(16):16-19.[10] KOOPMAN P, GUBBAY J, VIVIAN N, et al. 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Aromatase (P450arom) and 11beta-hydroxylase (P45011β) genes are differentially expressed during the sex inversion process of the protogynous rice field eel, monopterusablus[J].Fish Physiol Biochem, 2009,35(3):511-518.[18] NANDA I, KONDO M, HORNUNG U, et al. A duplicated copy of DMRT1 in sex-determing region of the Y chromosome of the medaka, Oryzias latipes[J].Proc Natl Acad Sci USA, 2002,99(18):11778-11783. [19] 吕道远,宋平,陈云贵,等.黄鳝性腺自然逆转过程中vasa基因的表达分析[J].动物学报, 2005,51(3):469-475.[20] WYLIE C. Germ cells[J].Curr Opin Genet, 2000,10(4):410-413.[21] 陈丽莉,肖亚梅,刘文彬,等.ERK/JNK在黄鳝雌、雄发育阶段生殖腺中的表达和定位[J].动物学报, 2007,53(2):325-331.[22] 陈丽莉,邹立军,熊振,等.JNK3基因在金鱼和斑马鱼不同发育时期胚胎与成体不同组织中的分化表达[J].水产学报, 2011,35(2):110-117.[23] XIAO Y M, CHEN LL, LIU J, et al. JNK1 downregulation is associated with sex reversal of the ricefield eel[J].J Exp Zool(Mol Dev Evol),2010,314(3):242-256.。

岩藻糖基转移酶8fut8敲除
岩藻糖基转移酶8FUT8是一种重要的酶，它在植物中起着关键的作用。

敲除（knockout）是一种常见的遗传学实验方法，通过该方法可以使目标基因在细胞或生物体中失去功能，从而研究该基因的功能。

敲除8FUT8基因可以对植物的生物学特性产生重要影响。

首先，敲除8FUT8基因可能会影响植物的糖基化模式。

岩藻糖作为一种重要的糖基化产物，参与了植物细胞壁的合成和结构。

因此，敲除8FUT8基因可能导致植物细胞壁的结构和性质发生变化，进而影响植物的生长发育和抗逆能力。

其次，敲除8FUT8基因可能会影响植物的生物学特性。

糖基化修饰在植物的生长发育、信号传导、抗病性等方面发挥重要作用，因此敲除8FUT8基因可能会影响植物的生长发育过程，甚至影响植物的生殖能力和适应环境的能力。

此外，敲除8FUT8基因还可能对植物的互作关系产生影响。

植物通过糖基化修饰调节细胞间信号传导和与其他生物的互作关系，因此敲除8FUT8基因可能会影响植物与其他生物的互作关系，如与共生菌根真菌的共生关系等。

总之，敲除岩藻糖基转移酶8FUT8基因可能对植物的生物学特性产生多方面的影响，包括糖基化模式、生长发育特性、抗逆能力以及与其他生物的互作关系等。

这些影响的具体表现需要通过实验研究进一步验证和探究。

浅谈哺乳动物乳腺生物反应器的研究现状及应用摘要：应用生产乳腺生物反应器可以获得高效、安全、足量的人类重组蛋白、药用蛋白及其目的蛋白为人类社会作出积极的贡献。

本文在述乳腺生物反应器概念的基础上，介绍了乳腺生物反应器的原理及其应用，指出乳房生物反应器优缺点、存在的问题并展望了乳腺生物反应器前景。

关键词：哺乳动物; 乳腺生物反应器; 应用自从1987年Gordon等报道以转基因小鼠的乳汁表达分泌人组织纤维酶原激活剂(tPA)以来。

转基因动物的研究进入了一个新的发展时期, 成为生物技术研究中最具活力和产业化前景的热点研究领域。

目前,研究对象已从家畜及试验动物扩展到了人;研究内容也从动物的育种扩展到生产药用珍稀蛋白[l, 2〕。

其中以乳腺生物反应器生产有生物活性的多肤产品,是一种全新的生产模式,具有生物活性稳定、成本低、质量高、生产周期短、经济效益高等优点。

本文就动物乳腺生物反应器的操作流程、应用、优点、存在的问题及其国内外研究进展和产业化现状作一综述。

1.动物乳腺生物反应器及其原理动物乳腺生物反应器技术是指利用动物乳腺特异性表达的启动子元件构建转基因动物, 指导外源基因在乳腺中表达, 并从转基因动物的乳中获取重组蛋白。

由于这一特异表达方式安全、可靠, 且不对家畜造成伤害, 因此转基因动物最理想的表达部位和表达场所以乳腺最佳。

目前已成功的在绵羊、山羊乳腺中表达了人凝血因子IX、a ,抗胰蛋白酶和人尿激酶等。

动物乳腺生物反应器技术是指利用动物乳腺特异性表达的启动子元件构建转基因动物,指导外源基因在乳腺中表达, 并从转基因动物的乳中获取重组蛋白。

由于这一特异表达方式安全、可靠, 且不对家畜造成伤害,因此转基因动物最理想的表达部位和表达场所以乳腺最佳。

目前已成功的在绵羊、山羊乳腺中表达了人凝血因子IX、a , 抗胰蛋白酶和人尿激酶等。

泌生产目的产品进人乳中。

乳腺生物反应器成功的关键在于乳腺组织特异性表达载体构建的合理性和有效性, 这包括外源基因在活体动物乳叶中分泌表达, 表迭是否具消组织特异性, 表达水平及其蛋白是否具有全部的生物学活性目前, 国外一般采用各乳球蛋白(BLG)、酸性乳清蛋白(wAP)、俘一酪蛋白的启动子及部分内含子进行乳腺特异性表达的调控;采用基因组DNA或小基因替代cDNA,以提高基因表达水平;采用YAC 携带大容量的外源基因和侧翼顺序,消除基因的位置效应图。

肝病患者检测血清胆碱脂酶及a—L—岩藻糖苷酶、5'—核苷酸酶的临床意义作者：刘绪刚来源：《中外女性健康研究》2015年第04期【摘要】目的：探讨肝病患者血清胆碱脂酶（CHE）及a-L-岩藻糖苷酶（AFU）、5'核苷酸酶（5'-NT）水平变化及其临床意义。

方法：检测148例肝病患者（急性肝炎62例，慢性肝炎39例，肝硬化32例，肝癌15例）及100例健康者血清CHE、AFU、 5'-NT及丙氨酸氨基转移酶（ALT）含量。

结果：各种肝病患者CHE血清含量均低于健康对照而AFU、5'-NT及ALT血清含量均明显高于健康对照组。

结论：CHE、AFU、5'-NT及ALT的联合检测对各类肝病均有很高的诊断价值和临床意义。

【关键词】肝病；CHE、AFU、5'-NT及ALT的联合检测肝脏损害的原因比较复杂，当肝脏受到各种因素的损害时，肝脏的细胞和肝功能都受到一定程度的损害。

CHE是在肝脏合成后迅速释放进入血浆中，各种肝病CHE的活性相活性下降，因此，被当做是评估肝细胞合成功能的灵敏指标。

5'-NT广泛分布在肝脏和各种组织中，由特异性，因此，其具有较大的临床诊断价值；而AFU是一种溶酶体酸性水解酶，主要存在于血清中，并且其分布范围涉及人体组织细胞/血液和体液中。

另外，AFU还参与含岩藻糖苷的糖蛋白中，当出现正常肝细胞的变性坏死现象时，摄取和清除糖苷酶的功能都会受到影响，或者促使肿瘤细胞合成糖苷酶的功能亢进，从而引发血清中的AFU活性含量剧增。

1 资料与方法1.1 一般资料选取2013年1～12月在我院接受治疗的148例肝病患者作为研究对象，其中急性肝炎62例，男性患者42例，女性患者30例；慢性肝炎39例，男性患者22例，女性患者17例；肝硬化32例，男18例，女14例；肝癌15例，男9例，女6例。

选取同一时期在我院进行健康检查的健康者作为对照组，对照组中健康者的乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）阴性，其中男性59例，女性41例，1.2 标本采集两组常规饮食，叮嘱患者和对照组健康者均在采集前一天晚上晚饭后禁食，于第二天早晨在其空腹状态下采集静脉血，并且在2小时内分离血清，然后当日完成测定。

核心岩藻糖基化与肝癌发生发展的关系肝癌是最常见且死亡率较高的恶性肿瘤之一，如果能早期发现，存活率可高达50％，但是肝癌因早期缺乏特异的临床症状，多数被诊断时都已处于晚期，导致存活率仅有2-7％。

因此，发现新的标志物对肝癌的早期诊断很有意义。

随着基因组学和蛋白质组学及生物信息学的研究发展，近来糖组学受到越来越多人的关注，已经在肝癌患者的血清中观察到核心岩藻糖基化的改变、外臂岩藻糖、唾液酸化增加和聚糖分支，其中核心岩藻糖基化是最常见且目前研究最多的一种糖基化方式。

一、什么是核心岩藻糖基化核心岩藻糖基化被认为是糖蛋白糖链合成的终末反应，可参与构成某些重要黏附分子的糖链结构，承载着很多生物学和病理学的功能，在肿瘤转移方面起重要作用。

核心岩藻糖在α-l，6岩藻糖基转移酶（FUT-8）的作用下，α-1,6-岩藻糖转移至N-乙酰葡糖胺的N-联聚糖的五糖核心的葡糖胺（GlcNAc），能与扁豆凝集素（LCA）结合，存在于0cATP、整连蛋白等多种糖蛋白中。

异常核心岩藻糖基化在人类的病理过程中随处可见，包括肿瘤的发生和转移。

二、核心岩藻糖基化与肝癌发生发展的关系糖基化研究方法早已被用来发现肝癌的生物标志物，对于肝癌来说，相比于单独的甲胎蛋白（AFP），附加α-1,6核心岩藻糖化单糖的AFP是一个更敏感的指标，被称为AFP-L3。

证据表明，核心岩藻糖化形式的AFP特异性为94％，而单独的AFP仅具有82％的特异性。

但是，这种结果并不稳定，受到多种因素的影响。

虽然它们可以被用来显著提高检测的特异性，但是，这些基团均与蛋白质相连，限制了其所提供的信息，例如，总AFP的灵敏度为70％，该值并不能通过检测核心岩藻糖基化型来提高，也就是说岩藻糖基仅仅是总AFP蛋白水平的糖基的一个子集，因此灵敏度并不一定能改进。

最初将糖组学和蛋白质组学相结合，用患有肝癌的土拨鼠模型，以凝集素为基础分析糖蛋白，并用生物标记确定了若干蛋白。

从患有肝癌的土拨鼠的血清中和患有肝癌的人血清中发现了一种核心岩藻糖基化蛋白质，即高尔基体蛋白73（GP73）。

植物n糖基化岩藻糖-概述说明以及解释1.引言1.1 概述概述部分的内容:植物中的糖基化是一种重要的糖生物学修饰过程，它在植物的生长发育、逆境胁迫响应、疾病抗性和植物-病原体互作等方面发挥着重要的作用。

作为一种常见的糖基化修饰，岩藻糖（fucose）在植物中被广泛存在并参与许多生命过程的调控。

岩藻糖是一种六碳的糖类分子，具有独特的结构和生物活性。

它可以通过一系列酶的催化作用在植物细胞中合成，并与蛋白质、脂质和多糖等分子进行特异性的结合。

这种糖基化修饰的特异性结合通常与许多生物过程息息相关，包括植物细胞的信号传导、细胞壁的形成和植物免疫系统的激活等。

在植物细胞的信号传导中，岩藻糖修饰的蛋白质可以通过与特定配体的结合而发挥调节作用。

例如，一些岩藻糖修饰的受体蛋白质可以识别并结合特定的激素信号，从而触发一系列的信号转导过程。

此外，岩藻糖修饰的蛋白质还可以参与细胞壁的形成和细胞外基质的稳定。

在植物的免疫系统中，岩藻糖修饰的多糖被认为是一种重要的识别分子，用于识别和防御外来病原体。

研究表明，一些病原体可以通过改变它们在寄主植物上的岩藻糖修饰模式来干扰植物的免疫响应，进而促进它们的侵染和繁殖。

因此，了解植物中岩藻糖修饰的调控机制对于揭示植物免疫系统的工作原理以及疾病的防控具有重要意义。

综上所述，植物中的岩藻糖基化修饰是一种重要的糖生物学过程，它参与调控植物的生长发育、逆境胁迫响应、疾病抗性和植物-病原体互作等方面。

深入研究岩藻糖修饰的合成、识别和调控机制将有助于我们更好地理解植物的生命过程，并为植物育种和疾病防控提供有效的策略。

1.2文章结构文章结构部分是用来介绍文章的整体结构和框架，能够让读者对接下来的内容有一个清晰的预期和理解。

在这篇文章中，我们按照以下方式进行组织和阐述：首先，引言部分将概述植物n糖基化和岩藻糖的相关背景和意义。

我们将简要介绍植物n糖基化是指植物中蛋白质的糖基化修饰过程，而岩藻糖则是一种重要的糖基化产物。