LO2细胞争议形态特征：L - 02细胞建系鉴定于190年（叶秀珍等，190)。
该细胞是一株正常肝细胞系，具有典型的肝细胞形态学特征，可用于多种实验研究。
2）细胞传代：如果细胞密度达0%-90%，即可进行传代培养。
1、对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的*培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞，*脱落后吸出，在1000RPM条件下离心-10分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
PS：若收到2ml小管细胞，收到细胞后，用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内，严格无菌操作；将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿，加入5ml左右*培养基混匀，放入培养箱过夜培养后查看细胞密度：若密度未超过0%，换液继续培养，视情况传代或者冻存。
若密度超过0%，可直接进行传代（方法同上）。
2、对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心-10分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。
贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，进行离心收集，1000RPM条件下离心-10分钟，去除上清，按冻存数量加入血清及DMSO，冻存比例为90%FBS+10%DMSO。
第1篇一、实验目的本次细胞传代实验的主要目的是掌握哺乳动物细胞的原代培养与传代培养的基本操作过程，了解细胞传代培养的基本原理，为生物技术在医学上的应用打下基础。
二、实验原理细胞培养技术是生物学研究的重要手段，通过模拟体内生理条件，在人工培养条件下使细胞生存、生长、繁殖或传代。
细胞培养技术具有以下优点：1. 直接观察活细胞，便于进行实验研究。
2. 避免了体内实验时的许多复杂因素。
3. 可提供大量生物性状相同的细胞作为研究对象。
4. 耗费少，比较经济。
细胞培养可分为原代培养和传代（继代）培养。
原代培养是指直接从体内获取的组织细胞进行首次培养；传代培养是指原代培养的细胞增殖达到一定密度后，将细胞分散后转移到另一个或几个容器中进行扩大培养。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：哺乳动物细胞、培养瓶、培养皿、离心管、移液器、无菌操作台、超净台、酒精、紫外线灯、显微镜等。
2. 实验仪器：CO2培养箱、恒温培养箱、离心机、显微镜等。
四、实验步骤1. 原代细胞培养：（1）取一定量的组织细胞，用胰蛋白酶或胶原蛋白酶消化。
（2）将消化后的细胞用PBS缓冲液清洗，去除残留的消化酶。
（3）将细胞接种到培养瓶中，放入CO2培养箱培养。
（4）观察细胞生长情况，待细胞贴壁生长至约80%时，进行传代。
2. 细胞传代：（1）将培养瓶中的细胞用PBS缓冲液清洗，去除残留的培养液。
（2）用胰蛋白酶或胶原蛋白酶消化细胞。
（3）将消化后的细胞用PBS缓冲液清洗，去除残留的消化酶。
（4）用移液器将细胞悬液转移至新的培养瓶中，加入新鲜培养基。
（5）放入CO2培养箱培养。
五、实验结果与分析1. 细胞生长情况：（1）原代细胞在培养瓶中生长，细胞贴壁良好。
（2）传代后的细胞生长旺盛，细胞密度逐渐增加。
2. 细胞形态：（1）原代细胞呈梭形、三角形等，细胞核清晰可见。
（2）传代后的细胞形态与原代细胞相似，细胞核清晰可见。
六、实验总结1. 通过本次实验，我们掌握了哺乳动物细胞的原代培养与传代培养的基本操作过程。
