云南高背鲫鱼不同组织同工酶分析

白甲鱼不同组织同工酶的组织特异性研究

作者：王红叶，张娟，蔡焰值，等

来源：《湖北农业科学》 2011年第23期

王红叶１，２，张 娟１，２，蔡焰值２，卢 涛３，秦晓燕３

（１． 华中师范大学生命科学学院，武汉 ４３００７９；２． 湖北省水产科学研究所，武汉 ４３００７１；

３． 湖北省秭归县渔政船检港监管站，湖北 秭归 ４４３６００）

摘要：采用聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳，对白甲鱼（Ｏｎｙｃｈｏｓｔｏｍａ ｓｉｍａ）的脑、眼、心脏、肝脏、肾脏和肌肉６种组织的乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）、酯酶（ＥＳＴ）和苹果酸脱氢酶（ＭＤＨ）３种同工酶进行了初步研究。结果表明，不同组织中３种同工酶均存在比较明显的组织特异性。Ｌｄｈ－ＡＢ３和Ｌｄｈ－Ｂ４在脑、眼、心脏和肾脏４种组织中均优势表达，Ｌｄｈ－Ａ４和Ｌｄｈ－Ａ３Ｂ在肾脏和肌肉中优势表达；ＥＳＴ同工酶在肝脏中酶带条数最多且活性最强，在眼和肌肉中活性最弱；ＭＤＨ同工酶在肝脏和肾脏中只存在上清液型（ｓ－ＭＤＨ），但活性较强。

关键词：白甲鱼（Ｏｎｙｃｈｏｓｔｏｍａ ｓｉｍａ）；同工酶；组织特异性

中图分类号：Ｑ９５９．４６＋８；Ｑ５５

文献标识码：Ａ

文章编号：0439－８114（２０11）23－4912-04

Ｓｔｕｄｙ ｏｎ Ｉｓｏｚｙｍｉｃ Ｔｉｓｓｕｅ Ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ ｏｆ Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ Ｔｉｓｓｕｅｓ ｉｎ Ｏｎｙｃｈｏｓｔｏｍａ ｓｉｍａ

ＷＡＮＧ Ｈｏｎｇ－ｙｅ１，２，ＺＨＡＮＧ Ｊｕａｎ１，２，ＣＡＩ Ｙａｎ－ｚｈｉ２，ＬＵ Ｔａｏ３，ＱＩＮ Ｘｉａｏ－ｙａｎ３

（１． Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ， Ｈｕａｚｈｏｎｇ Ｎｏｒｍａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｗｕｈａｎ ４３００７９， Ｃｈｉｎａ；

２． Ｆｉｓｈｅｒｉｅｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｈｕｂｅｉ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ， Ｗｕｈａｎ ４３００７１， Ｃｈｉｎａ；

线鳞型黄金鲫（框鳞镜鲤♀×红鲫♂）mtDNA及同工酶的遗传分析

作者：杨晶晶，张妍，张文术，陈玮彤，金万昆，陈成勋，董仕

来源：《河北渔业》 2015年第9期

杨晶晶1，张妍1，张文术1，陈玮彤1，金万昆2，陈成勋3，董仕1

（1.天津师范大学生命科学学院，天津市动植物抗性重点实验室，天津 300387；

2.天津市换新水产良种场，天津 301500；3.天津农学院水产学院，天津 300384）

摘要：对全鳞型黄金鲫和线鳞型黄金鲫的mtDNA D-loop及其邻近区段进行PCR扩增并测序，并检测了两种类型黄金鲫肌肉的GPI和LDH同工酶。1尾黄金鲫（全鳞型）获得了碱基排列顺序清晰的1348 bp的片段，2尾黄金鲫（全鳞型）尾为1351 bp，3尾黄金鲫（均为线鳞型）为1349 bp。应用MEGA6.0软件与GenBank上的3个鲤鱼（KC292935、KC292936和X61010.1）和3个鲫鱼（KC292946、KC292947和KC292948）相应区段比较结果表明，6尾黄金鲫与鲤鱼和鲫鱼的遗传距分别为0.011和0.095，鲤鱼与鲫鱼的遗传距为0.097。GPI与LDH两种同工酶谱显示两种类型黄金鲫均具有来自鲤鲫双方的遗传物质。结果表明，全鳞型与线鳞型黄金鲫均符合母本为鲤鱼、父本为鲫鱼的遗传特征，推测线鳞型黄金鲫母本鳞被的基因型应为SSNn、SsNn或ssNn，父本应为SSnn，线鳞型黄金鲫鳞被的基因型应为SSNn或SsNn。

关键词：黄金鲫；鳞被；基因型；mtDNA；碱基序列；同工酶

基金项目：国家科技基础条件平台：水产种质资源平台（2014DKA30470）；天津市星火计划项日“黄金鲫良种繁育及健康养殖技术示范”（09ZHXHNC05100）；国家星火计划项日“黄金鲫工厂化育苗及健康养殖技术示范”（2010GA610007）；天津市农业科技示范推广项日“黄金鲫良种繁育及健康养殖技术推广”（201001010）；国家级科技计划项日“水产品健康养殖、加工与质量安个控制产业化示范”（2013G A610003）。

第8章 同工酶分析技术 由于酶是基因编码的产物，它在电场中迁移率的改变反映了酶蛋白的大小构形和肽链氨基酸的序列变化，即编码DNA顺序上的变化，所以可通过分析酶谱的变化来获得我们所需要的遗传信息。在酶谱分析中，等位酶是常用的分析工具。等位酶（Allozyme）是“等位基因酶” 的简称，是从同工酶中派生出来的，它与同工酶既有区别又有联系。同工酶是催化同一生化反应的、但在电场中的运动性质有所不同的同种酶的不同表现形式。这是由于构成蛋白质亚基的氨基酸组成和顺序有所不同而造成的。这一概念是广义的，它包括不同基因座位和同一基因座位

的不同等位基因所编码的同一种酶，以及转录后酶变体的所有电泳后的表现型。近期文献所提到的同工酶则是狭义的，仅指由不同基因座位所编码的同一种酶的不同形式。由于多数酶的不同形式是共显性的，一个基因座位上两个或多个等位基因是能表达的，它们所编码的多肽链在凝胶上作为酶基因的表现型都能显示出谱带而被看见，因此可将它们作为遗传学研究对象。以

下将介绍同工酶分析的一些技术和方法。

8.1 淀粉胶电泳的技术和方法

电泳有很多种支持介质，其中淀粉是最容易使用的一种。由于淀粉凝胶孔径的大小和蛋白

质分子相近，因此它提供了一个很好的分子筛。同时每一块胶都可以切成几片进行不同酶系统

的染色，因而节约时间、人力、物力和财力。淀粉胶电泳不需要任何复杂的装备，所有必须的

装备都能在实验室找到。而且，与聚丙烯酰胺比较，淀粉是无毒的，最重要的一点是，淀粉胶

上显色的结果和聚丙烯酰胺胶显色的结果一样好，多数时候甚至更好。

8.1.1 淀粉胶的制备

8.1.1.1 水解淀粉

进口水解淀粉价格昂贵。我们实验室用自己水解的淀粉（除淀粉酶用进口淀粉或者聚丙烯

酰胺胶外），进行蛋白质和酶的电泳，其效果一般都比较理想。水解方法如下：

器具：三角烧瓶（5 000ml），真空泵，布氏漏斗（5 000ml，直径25～30cm）和布氏漏斗同

直径的圆形滤纸，37℃烘箱，移液管。

草鱼同工酶的组织分布及遗传结构分析

姜建国;熊全沫;姚汝华

【期刊名称】《华南理工大学学报（自然科学版）》

【年(卷),期】1997(000)012

【摘 要】采用聚丙烯酰胺垂直板状连续电泳的方法，对草鱼（Ｃｔｅｎｏｐｏｈａｒｙｎｇｏｄｏｎｉｄｅｌｕｓ）的脑（Ｂ）、晶体（Ｅ）、心脏（Ｈ）、肾脏（Ｋ）、肝脏（Ｌ）、肌肉（Ｍ）等六种组织进行了十一种同工酶（α－ＡＭＹ，ＥＳＴ，ＧＯＴ，Ｇ３ＰＤ，Ｇ６ＰＤ，ＩＤＨ，ＬＤＨ，ＭＤＨ，ＭＥ，ＰＯＸ，ＳＯＤ）的电泳研究，并对各种酶的同工酶位点及酶谱表型进行了分析，其中α－ＡＭＹ和ＰＯＸ还未见报道。结果表明α－ＡＭＹ，ＥＳＴ，Ｇ３ＰＤ，ＬＤＨ，ＭＤＨ，ＭＥ，ＰＯＸ，ＳＯＤ存在不同程度的组织特异性，ＧＯＴ和Ｇ６ＰＤ则无明显组织差异。对草鱼的α－ＡＭＹ，Ｇ３ＰＤＹ和ＰＯＸ的遗传基础、亚基组成及ＬＤＨ特殊的酶谱表达模式等问题进行了讨论。

【总页数】1页(P105)

【作 者】姜建国;熊全沫;姚汝华

【作者单位】华南理工大学生物工程系;武汉大学生命科学院

【正文语种】中 文

【中图分类】TQ9

【相关文献】 1.三种鯻科鱼类同工酶组织特异性及群体遗传结构分析 [J], 张健东;何国清;陈刚;汤保贵;潘传豪;周晖;黄建盛

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