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超高效液相色谱-串联质谱法结合固相萃取净化测定牛奶中阿苯达唑及其主要代谢物残留量贺习文，雷浩，赵雪宁，马川，高勤叶，李易轩（陕西秦云农产品检验检测股份有限公司，渭南 714000）中图分类号：TS252.1 文献标识码：A 文章编号：1004-4264（2022）01-0047-05DOI: 10.19305/ki.11-3009/s.2022.01.013开放科学(资源服务)标识码(OSID)微信扫描二维码听独家语音介绍与作者在线交流摘 要：本研究基于超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）结合固相萃取净化技术，建立了阿苯达唑（ABZ）、阿苯达唑砜（ABZSN）、阿苯达唑亚砜（ABZSX）的定量分析方法，用以监控牛奶及其制品的质量安全。
牛奶样品经过1%乙酸乙腈溶液提取后，提取液经氮气吹干，用碳酸盐缓冲溶液溶解后，使用C18固相萃取柱净化。
将净化液注入超高效液相色谱系统，经C18反向色谱柱分离，以可加热电喷雾离子源（H-ESI）正离子扫描模式下多反应监测（MRM），以浓度和峰面积外标法定量。
结果表明，3种目标化合物的线性关系良好，相关系数（R2）≥0.9987，检出限（LOD）为0.5μg/kg，定量限（LOQ）为2μg/kg，回收率在90.8%~101.2%之间，日内及日间变异系数均≤2.14%。
本研究填补了牛奶中ABZ及其代谢物检测方法的空白，实现了牛奶中3种目标化合物的准确定量分析，为牛奶及其制品的质量监测提供了理论和技术支撑。
关键词：超高效液相色谱-串联质谱；阿苯达唑及其代谢物；牛奶；固相萃取技术阿苯达唑（ABZ）是一种咪唑衍生物类广谱驱虫药物，可用于驱除蛔虫、蛲虫、绦虫、鞭虫、钩虫、粪圆线虫等，凭借“高效低毒”的药理性成为最主要的驱肠道线虫药物，在全世界范围内被广泛使用[1,2]。
ABZ在人和动物体内通过肝粒酶转化成阿苯达唑砜（ABZSN）和阿苯达唑亚砜（ABZSX）。
ABZSN为主要杀虫成分，可对肠道线虫选择性及不可逆性地抑制寄生虫肠壁细胞胞浆微管系统的聚合，阻断其对多种营养和葡萄糖的摄取吸收，导致虫体内源性糖原耗竭，并抑制延胡索酸还原酶系统，阻止三磷酸腺苷的产生，致使虫体无法生存和繁殖[3~5]。
效研究[７－８],而胆酸及其衍生物检测方法主要以动物胆汁和中成药为研究对象,通常有H P L CＧE L S D法[９]㊁H P L CＧC A D法[１０]和H P L CＧM S/M S法[１１].H P L CＧE L S D法专属性强,H P L CＧC A D法定量准确,适用于样品中高含量胆酸定量检测,但色谱法灵敏度低,易出现假阳性问题,不能实现痕量检测.文献[１２]报道了液质联用法测定鸡蛋中的药物残留,却未见鸡蛋中胆酸及其衍生物残留的相关研究.药物残留的前处理方式有液液萃取㊁固相萃取和Q u E C h E R S法等[１３－１５],通过式固相萃取是一种新型样品净化方式,已被广泛应用于食品基质.研究拟以鸡蛋为研究对象,以胆酸(C A)㊁去氧胆酸(D C A)和去氢胆酸(D H C A)为目标物,样品经甲醇提取后,采用P R i M E H L B净化,以建立U P L CＧM S/M S法检测鸡蛋中的胆酸及其衍生物的方法,以期为鸡蛋中胆酸及其衍生物的快速筛查和确证提供依据.１㊀材料与方法１．１㊀材料对照品C A(C A S:８１Ｇ２５Ｇ４)㊁D C A(C A S:８３Ｇ４４Ｇ２)和D H C A(C A S:８３Ｇ４４Ｇ２):含量均＞９８％,上海安谱科学仪器有限公司;P r i M E H L B固相萃取柱:６０m g/３m L,美国W a t e r s 公司;甲醇㊁乙腈㊁甲酸:色谱纯,上海安谱科学仪器有限公司;氨水:分析纯,国药集团化学试剂有限公司;水为超纯水.１．２㊀仪器与设备超高效液相色谱 串联质谱联用仪:V a n q u i s h U P L CＧT S Q Q u a n t i s型,配H E S I,美国T h e r m oS c i e n t i f i c 公司;分析天平:S E C U R A２２５DＧ１C N型,精度为０．０１m g,德国S a r t o r i u s公司;分析天平:M E２０４E型,精度为０．１m g,瑞士M e t t l e r T o l e d o公司;高速冷冻离心机:J X NＧ２６型,美国B e c k m a nC o u l t e r 公司;平行浓缩仪:M６４型,北京莱伯泰科仪器股份有限公司.１．３㊀方法１．３．１㊀标准溶液配制㊀分别精密称取C A㊁D C A和D H C A约１０m g,甲醇溶解并定容至１０m L,混匀,配制成质量浓度为１．０m g/m L的标准储备液,用２０％甲醇 ０．１％氨水溶液(体积分数)稀释为标准系列溶液.１．３．２㊀样品前处理㊀鸡蛋均质后,精密称取２g(精确至０．１m g)至５０m L离心管中,加入１０m L甲醇,振荡提取１５m i n,１００００r/m i n离心３m i n,重复提取１次,合并上清液.取３m L上清液过P r i M E H L B固相萃取柱,取２m L上清液４５ħ氮吹至近干,残渣用１．０m L体积分数为２０％甲醇 ０．１％氨水溶液复溶,过０．２２μm微孔滤膜,供U P L CＧM S/M S测定.１．３．３㊀液相色谱条件及质谱条件优化㊀选取C８和C１８色谱柱(５０mmˑ２．１mm,３．０μm),比较不同色谱柱的分离效果;对比研究不同流动相体系对目标化合物的分离度和响应度,并研究目标化合物的溶剂效应,梯度洗脱程序:０~０．５m i n,８０％A;０．５~１．０m i n,８０％~１０％A;１．０~４．０m i n,１０％A;４．０~４．１m i n,１０％~０％A;４．１~７．０m i n,９０％A;柱温３０ħ;流速０．２m L/m i n;进样体积５μL.在可加热电喷雾离子源(H E S I)下,喷雾电压２５００V;离子传输管温度３５０ħ;鞘气压４．５８L/m i n;辅助气压７．９７L/m i n,反吹气１．５L/m i n,通过标准物质优化胆酸类药物质谱参数.１．３．４㊀方法学研究㊀采用标准添加法,在空白鸡蛋基质中添加适量浓度的胆酸及其衍生物混合标准溶液,经前处理后测定,以胆酸及其衍生物峰面积信噪比S/Nȡ３的最低浓度为检出限,峰面积信噪比S/Nȡ１０的浓度为定量限.在空白鸡蛋中添加３个不同浓度的胆酸及其衍生物混合标准溶液进行回收率试验,每个浓度进行３个样品平行试验,重复３次,计算批间R S D.１．３．５㊀样品测定㊀应用试验建立的方法对市售３０批次鸡蛋样品进行胆酸类药物及其衍生物检测.２㊀结果与分析２．１㊀色谱条件优化选取T h e r m o H y p e r s i l G O L D C８(１００mmˑ２．１mm,３μm)和T h e r m o H y p e r s i l G O L D C１８(１００mmˑ２．１mm,３μm)比较２种不同类型色谱柱对胆酸及其衍生物的响应值和分离效果的影响.结果表明,在以水 甲醇为流动相,梯度洗脱的条件下,C８色谱柱保留能力较C１８色谱柱的弱,T h e r m o H y p e r s i lG O L DC８(１００mmˑ２．１mm,３μm)色谱柱的分离度较差,而T h e r m oH y p e r s i l G O L DC１８(１００mmˑ２．１mm,３μm)色谱柱的峰形较好,分离度高,响应度高,能够实现快速高效检测目的,因此选择T h e r m o H y p e r s i l G O L D C１８(１００mmˑ２．１mm,３μm)色谱柱.当甲醇为有机流动相时,响应度约为乙腈的２倍,因此选择甲醇为有机流动相.当无机流动相为０．１％氨水溶液时,胆酸化合物的响应度约为甲醇 ０．１％甲酸水溶液的１０倍,当无机流动相中氨水浓度逐步增加时,胆酸化合物的响应度逐步减低,因此选择的最佳流动相为甲醇 ０．１％氨水溶液(体积分数)为流动相.试验还比较了甲醇㊁５０％甲醇水溶液 ０．１％氨水溶液(体积分数)㊁２０％甲醇水溶液 ０．１％氨水溶液(体积分数)溶解混合标准溶液的溶剂效应.结果表明,以甲醇为９３|V o l．３９,N o．１２周艳华等:U P L CＧM S/M S检测鸡蛋中胆酸及衍生物溶剂的D H C A出现２个色谱峰,以５０％甲醇 ０．１％氨水溶液(体积分数)为溶剂的C A出现严重拖尾峰,因此选择２０％甲醇 ０．１％氨水溶液(体积分数)为溶剂溶解标准品和复溶溶剂.２．２㊀质谱条件优化分别将１．０μg/m L的C A㊁D C A㊁D H C A标准品溶液经过流动泵直接输入质谱仪,通过相对分子质量进行S I M扫描,切换正负离子扫描模式扫描,结果表明C A㊁D C A和D H C A在E S I－模式下具有最高响应的[MＧH]－准分子离子峰.C A具有类固醇结构,具有１个羧基和３个羟基,D C A和D H C A是由羟基去氢离子或去氧离子形成,在E S I－模式下C A㊁D C A㊁D H C A侧链的羧基脱氢电离为RＧC O O－.分别确定C A㊁D C A㊁D H C A母离子的m/z为４０７．４５,３９１．４５,４０１．３５,通过S R M优化扫描,确定碰撞电压和透镜电压等质谱参数,在最优质谱参数条件下S R M扫描得到多个子离子,选择响应最强的２个子离子作为定量定性依据,得到了优化后的质谱条件.胆酸及其衍生物的质谱检测参数见表１,在最优色谱条件和质谱条件下,胆酸类及其衍生物标准溶液定量离子色谱图如图１所示.表１㊀胆酸类药物质谱参数T a b l e１㊀M S p a r a m e t e r s o f c h o l i c a c i da n a l y t e s 化合物定性离子对定量离子对碰撞电压/e V透镜电压/V C A４０７．４５＞３４３．３７５４０７．４５＞３４３．３７５３３．２２１９１４０７．４５＞２８９．２９２３８．２８１９１D C A３９１．４５＞３４５．３７５３９１．４５＞３４５．３７５３３．０１１８１３９１．４５＞３４３．３７５３８．５７１８１D H C A４０１．３５＞３３１．３２１４０１．３５＞３３１．３２１２３．０４１５９４０１．３５＞２４９．２３８２９．８５１５９图１胆酸类药物及衍生物定量离子质量色谱图F i g u r e１㊀Q u a n t i t a t i v e i o n c h r o m a t o g r a mo f c h o l i c a c i da n a l y t e s２．３㊀前处理条件优化选择乙腈㊁甲醇㊁１％甲酸 乙腈(体积分数)㊁０．１％氨水 乙腈(体积分数)㊁甲醇 乙腈(V甲醇ʒV乙腈为１ʒ１)作为提取剂,比较提取效果.结果表明,上述提取剂提取D H C A时,回收率均符合要求.当以乙腈㊁１％甲酸 乙腈(体积分数)㊁０．１％氨水 乙腈(体积分数)作为提取剂时,C A和D C A回收率ɤ３０％;当以甲醇 乙腈(V甲醇ʒV乙腈为１ʒ１)为提取剂时,C A和D C A回收率ɤ５０％;当以甲醇为提取剂时,C A和D C A回收率符合要求,因此选择甲醇为鸡蛋中胆酸及衍生物的提取剂.鸡蛋基质复杂,含有丰富的蛋白质和脂肪,净化处理可有效提高其检测准确度.试验选用P R i M E H L B固相萃取柱净化提取液,净化后溶液透明清澈,氮吹后无明显干物质,表明除杂明显,净化效果明显.P R i M E H L B固相萃取柱可去除鸡蛋提取液中９５％以上的蛋白和磷脂等基质干扰物,相比传统H L B固相萃取柱,P R i M E H L B固相萃取柱无需活化㊁平衡㊁淋洗等步骤,净化时间由５０m i n缩短至５m i n,大大提高了检验效率.复溶溶剂选择２０％甲醇 ０．１％氨水溶液(体积分数),可有效减少溶剂效应,且不会溶解脂类物质,有效减少了基质干扰.２．４㊀方法学研究２．４．１㊀线性范围㊀分别精密量取混合标准使用液,用２０％甲醇 ０．１％氨水溶液(体积分数)稀释成质量浓度分别为１,２,５,１０,２０,５０n g/m L的混合标准工作液,以特征定量离子质量色谱峰面积为纵坐标,标准溶液质量浓度为横坐标,绘制标准曲线.由表２可知,C A㊁D C A和D H C A在质量浓度为０．２~５００．０n g/m L范围内线性关系良好,R２＞０．９９９.２．４．２㊀检出限和定量限㊀采用标准添加法,在空白鸡蛋基质中添加适量浓度的胆酸及其衍生物混合标准溶液,经前处理后测定,以胆酸及其衍生物峰面积信噪比S/Nȡ３的最低浓度为检出限,峰面积信噪比S/Nȡ１０表２㊀胆酸类药物线性方程及相关系数T a b l e２㊀L i n e a r e q u a t i o na n d c o r r e l a t i o n c o e f f i c i e n to f c h o l i c a c i da n a l y t e s化合物线性范围/(n g m L－１)回归方程R２C A０．２~５００．０Y＝２３９１．５５X－４９０９．９４０．９９９７D C A０．２~５００．０Y＝５２２６．４８X－１２３４３．６０．９９９７D H C A０．２~５００．０Y＝５４７１．２３X－１４２２６．２０．９９９６０４安全与检测S A F E T Y&I N S P E C T I O N总第２６６期|２０２３年１２月|的浓度为定量限.结果表明,C A ㊁D C A 和D H C A 的检出限为１．０μg /k g ,定量限为３．３μg /k g.２．４．３㊀精密度和准确度㊀在空白鸡蛋中添加３个不同浓度的胆酸及其衍生物混合标准溶液进行回收率试验,计算R S D ,结果见表３.由表３可知,C A 为１~１０μg /k g 浓度范围内回收率为９３．７％~９９．１％,R S D 在３．５％~９．２％;D C A 在１~１０μg /k g 浓度范围内回收率为９５．４％~１０２．５％,R S D 为３．４％~６．６％;D H C A 在１~１０μg /k g 浓度范围内回收率为９５．７％~９８．５％,R S D 为１．８％~３．７％;加标回收率和R S D 均符合中国兽药残留检测技术规范要求.表３㊀不同浓度胆酸类药物加标回收率和精密度T a b l e ３㊀A v e r a ge r e c o v e r i e s a n d p r e c i s i o n s of c h o l i c a c i da n a l yt e s (n ＝６)化合物１．０μg /k g回收率/％R S D /％３．０μg /k g回收率/％R S D /％１０．０μg /k g回收率/％R S D /％C A９３．７９．２９８．５６．２９９．１３．５D C A９５．４４．８９７．３６．６１０２．５３．４D H C A９５．７３．７９５．８１．８９８．５２．７２．４．４㊀实际样品测定㊀应用试验建立的方法对市售的３０批次鸡蛋样品进行胆酸类药物及其衍生物的检测,结果表明:鸡蛋中未检出D C A 和D H C A ,２８批次样品中均检出C A ,１５批次样品中C A 含量＜１０．０μg /k g ,最低含量为１．０６μg /k g ,１３批次样品中C A 含量＞１０．０μg /k g ,最高含量为１２８μg /k g.３㊀结论研究建立了U P L C ＧM S /M S 同时测定鸡蛋中胆酸及其衍生物的检测分析方法,该方法前处理简单高效,灵敏度和准确度高,可为鸡蛋中胆酸㊁去氧胆酸和去氢胆酸提供定量定性方法.研究将胆酸及其衍生物的检测范围扩展至鸡蛋基质,通过检测发现不同鸡蛋中胆酸含量存在较大差异,高含量胆酸鸡蛋中胆酸来源是内源性还是饲料添加后残留仍需进一步研究.参考文献[1]JOYCE S A,MACSHARRY J,CASEY P G,et al.Regulation ofhost weight gain and lipid metabolism by bacterial bile acid modification in the gut[J].Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of 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u ,F u ji a n ３５０００８,C h i n a )摘要:目的:设计一种基于计算机视觉技术结合深度学习模型的新方法检测八角粉的掺假情况.方法:采集不同掺假比例八角粉的原始图像,利用预处理和数据增强技术获得图像集合.随后构建S q u e e z e N e t 深度学习模型,并与支持向量机(s u p p o r t v e c t o rm a c h i n e ,S VM )㊁K Ｇ邻近学习(K Ｇn e a r e s t n e i g h b o rl e a r n i n g,K N N )㊁随机森林(r a n d o mf o r e s t ,R F )㊁梯度提升树(g r a d i e n t b o o s t i n g tr e e ,G B T )和多层感知器(m u l t i l a y e r p e r c e p t r o n ,M L P )５种机器学习模型进行比较.结果:５种机器学习模型的最高准确度仅为６６．３７％,而S q u e e z e N e t 模型的准确度为９９．４２％.结论:深度学习分类模型性能相较于传统机器学习分类模型更为优越,识别效果良好且样品无需预处理.关键词:八角;掺伪鉴别;深度学习;视觉技术;S q u e e z e N e t 模型A b s t r a c t :O b je c t i v e :T h i s s t u d y a i m s t o d e s i g n a n o v e l a p p r o a c h ,u t i l i z i n g c o m p u t e r v i s i o n c o m b i n i n g w i t hd e e p l e a r n i n g ,f o r r a pi d d e t e r m i n a t i o nt h ea d u l t e r a t i o ni ns t a ra n i s e p o w d e r ．M e t h o d s :C o l l e c t e d t h eo r i g i n a l i m a g e so fs t a ra n i s e p o w d e rw i t hv a r y i n ga d u l t e r a t i o n r a t i o s ．E m p l o y i n g p r e p r o c e s s i n g a n d d a t a e n h a n c e m e n t t e c h n i q u e s ,a n i m a g e d a t a s e t w a s c u r a t e d ．S ub s e q u e n t l y ,a S q u e e z e N e t m o d e l w a sc o n s t r u c t ed a n d c o m p a re dw i t hf i v e m a c h i n e l e a r n i ng m o d e l s ,i n c l u d i n g S u p p o r t V e c t o rM a chi n e (S VM ),K ＧN e a r e s tN e i g h b o rL e a r n i n g (K N N ),R a n d o m F o r e s t (R F ),G r a d i e n t B o o s t i n g T r e e (G B T ),a n d M u l t i l a y e rP e r c e p t r o n (M L P )．R e s u l t s :T h e h i g h e s ta c c u r a c ya c h i e v e db y t h e f i v em ac h i n e l e a r n i n g m ode l sw a so n l y ６６．３７％,w h i l e t h ea c c u r a c y of t h eS q u e e z e N e t m o d e lw a s９９．４２％．T h e r e s u l t ss h o w e dt h a tS q u e e z e N e t m o d e l w a s b e t t e rt h a nt h e s e m a c h i n e l e a r n i ng m o d e l si ni d e n t i f y i n g th ea d u l t e r a t i o ni ns t a r a n i s e p o w d e r ．C o n c l u s i o n :T h e p r o p o s e dd e t e c t i o n m e t h o db a s e d o n c o m p u t e r v i s i o n c o m b i n i n g w i t h S qu e e z e N e t m o d e l c a n e f f e c t i v e l y i d e n t i f y t h ea d u l t e r a t i o ni ns t a ra n i s e p o w d e r ．T h i s m e t h o d i s e a s y t o o p e r a t e ,a n d p r o v i d e s a n o v e l t e c h n i qu e f o r t h e r a pi dd e t e c t i o no f f o o d a d u l t e r a t i o n ．K e yw o r d s :s t a ra n i s e p o w d e r ;a d u l t e r a t i o ni d e n t i f i c a t i o n ;d e e p l e a r n i n g ;v i s u a l t e c h n o l o g y ;S qu e e z e N e tm o d e l 八角属于五味子科,其果实呈八角星状,盛产于越南东部和中国西南部,被用于多种烹饪过程以改善食材风味.八角所含的莽草酸具有良好的抗病毒作用,是生产抗甲型和乙型流感药物奥司他韦的重要前体物质[１－２].此外,八角还拥有多种具备生物活性的化合物,具有抗菌㊁抗氧化㊁杀虫㊁消炎和祛痰等功效[３－４].目前,针对八角果实掺假的问题已有研究报道,如V e r m a a k 等[５]采用短波红外高光谱成像技术结合化学计量学方法,识别中国八角中含有神经毒性化合物的日本八角,获取了９２０~２５１４n m 范围光谱建立偏最小二乘判别分析(p a r t i a l l e a s ts q u a r e sd i s c r i m i n a n ta n a l y s i s ,P L S ＧD A )模型,该模型对日本八角和中国八角的识别率分别达到９８．４２％和９７．８５％,表明短波红外高光谱成像可有效识别八角果实质量;Z h a n g 等[６]开发了一种基于DN A 条形码方式检测八角等多种香辛料掺假,通过对比纯样品与检测物的I T S ２和p s b A Ｇt r n H 序列的差异性可有效鉴别八角及多种香辛料掺假;S h e n 等[７]通过电离与轨道阱高分辨率质谱检测八角果实和凉茶饮品掺假,该方法无需预处理任何样品即可于短时间内检测八角果实和凉茶饮品中存在的茴香苷,并可检测掺假率低于１％的凉茶２４F O O D &MA C H I N E R Y 第３９卷第１２期总第２６６期|２０２３年１２月|作者简介:胡水英(１９８０ ),女,河南牧业经济学院讲师,硕士.E Ｇm a i l :p i n ga n s h u n l i ３１３６＠１６３．c o m 收稿日期:２０２３Ｇ０３Ｇ１７㊀㊀改回日期:２０２３Ｇ０９Ｇ２６D O I :１０．１３６５２/j ．s p j x ．１００３．５７８８．２０２３．６００５９[文章编号]１００３Ｇ５７８８(２０２３)１２Ｇ００６５Ｇ０５网络直播营销中的食品安全监管问题与治理F o o d s a f e t y m a n a g e m e n t i no n l i n e l i v eb r o a d c a s tm a r k e t i n g胡水英HUS h u i y i n g(河南牧业经济学院工商管理学院,河南郑州㊀４５００００)(C o l l e g e o f B u s i n e s sA d m i n i s t r a t i o no f H e n a nU n i v e r s i t y o f A n i m a lH u s b a n d r ya n dE c o n o m i c s ,Z h e n gz h o u ,H e n a n ４５００００,C h i n a )摘要:采用文献调研㊁案例分析等方法总结了当前网络直播营销市场的发展现状,指出了直播营销市场存在的食品安全问题,分析了直播电商中的食品安全事故案例.针对这些问题,提出应加强直播内容审核㊁加大监管力度㊁疏通消费者投诉渠道和加速相关立法进程等专项治理策略;对网络营销中自制食品可采取孵化器的形式予以辅导㊁支持和投资,促使其向正规化生产转化.关键词:网络直播;电商;食品安全;自制食品;孵化器A b s t r a c t :L i t e r a t u r er e s e a r c h a n d c a s e a n a l ys i s w e r e u s e d t o s u mm a r i z e t h e d e v e l o p m e n t s t a t u s o f o n l i n e l i v e s t r e a m i n g m a r k e t i n g m a r k e t ,a n a l y z et h ec a s e so f f o o ds a f e t y a c c i d e n t s i n l i v e s t r e a m i n g e Ｇc o mm e r c e ,a n d s u mm a r i z e t h e f o o d s a f e t y p r o b l e m si n c u r r e n tl i v e s t r e a m i n g eＧc o mm e r c e ．G o v e r n a n c e s t r a t e g i e sw e r e p r o p o s e d ,s u c h a s s t r e n g t h e n i n gt h e r e v i e wo f l i v e c o n t e n t ,s t r e n g t h e n i n g s u p e r v i s i o n ,u n b l o c k i n g c o n s u m e r c o m p l a i n t c h a n n e l s a n d a c c e l e r a t i n g r e l e v a n t l e g i s l a t i v e p r o c e s s e s ．F o r t h e p r o b l e mo f h o m e m a d e f o o d i nn e t w o r km a r k e t i n g,i t c a n b e c o u n s e l e d ,s u p p o r t e d a n d i n v e s t e d i n t h e f o r mo f a n i n c u b a t o r t o p r o m o t e i t s t r a n s f o r m a t i o n t o f o r m a l p r o d u c t i o n ．K e yw o r d s :w e b c a s t i n g ;e Ｇc o mm e r c e ;f o o d s a f e t y ;h o m e m a d e f o o d ;i n c u b a t o r网络直播营销是一种新兴电子商务模式,其在当前较为成熟的移动互联网技术和自媒体社交环境的支撑下正处于高速发展中.网络直播营销是指一些知名网络主播依靠自身粉丝流量在直播平台售卖商品,将自身流量转化为营销的行为.直播营销具有时间短,内容趣味性强,促销折扣力度大,营销收益变现快等诸多优点[１],深受商家和消费者喜爱,吸引了庞大的用户群体,商业资源不断涌入直播营销市场.中国的直播营销兴起于２０１６年,并在２０１６ ２０２２年经历了 野蛮 式增长.据调查[２],２０２０年中国网络直播电商消费市场规模达到９６１０亿元,预期２０２２年市场规模进一步上升至１５０００亿元左右;２０２１年中国直播电商相关企业注册量为２１７９１家,同比增长２２８．１％,同年中国在线直播用户规模达６．３５亿人,同比增长８．２％,如此庞大且增长迅速的市场规模极为有效地推动了中国经济的发展.但 野蛮 增长的市场势必会带来很多负面问题,如直播过程的虚假宣传问题㊁食品安全问题㊁商品质量问题㊁售后纠纷问题等,当前很多学者也针对这些问题进行了研究,如直播电商中的商品虚假宣传治理[３－４]㊁直播流量造假规制[５－６]㊁假冒伪劣商品治理[７－８]㊁消费者权益保障[９－１０]等.朱辉等[１１－１２]研究了网络直播营销中的食品安全监管难题,提出建立监管责任制度㊁监管与预防并举㊁加强执法强度㊁施行常态化抽检㊁建立信用评价机制㊁发挥群众监督效率等策略.费威等[１３]使用数学模型分析了网络直播食品营销过程中不同品牌商和不同主播之间的契合度,分析如何搭配才能使合作效益最大化.史彦泽等[１４]分析了网络直播营销过程中的消费者购买意愿的影响因素.徐博等[１５－１７]则是对网络直播营销过程中的虚假宣传问题和刑法问题进行了针对性的研究.由此可见,当前的研究问题在于:①大多以电商全品类为研究对象,而对网络直播营销中的食品安全问题的关注较少;②研究集中于消费者的行为和购买意愿㊁存在的问题以及政府监管策略,但网络食品安全涉及整个产业链,仅依靠政府监管是不够的.文章将研究如何融合政府㊁平台㊁商家㊁消费者等各主体进行共同治理.１㊀网络直播营销存在的食品安全问题１．１㊀夸大食品功效和虚假宣传现象明显当前网络直播营销中存在较多的食品虚假宣传问５６F O O D &MA C H I N E R Y 第３９卷第１２期总第２６６期|２０２３年１２月|。
重组蛋白质药物HPLC肽图分析
重组蛋白质药物是通过生物技术手段，尤其是基因重组技术生产的蛋白质药物。
这类药物具有高度特异性和活性，能够对目标分子产生精确的药理作用。
由于它们是基于生物过程制备的，因此其纯度、稳定性和结构完整性是关键的质量属性。
为确保这些药物的安全性和疗效，对其进行精确、可靠的分析和质量控制是至关重要的。
肽图分析也称肽图指纹分析，是一种标准的蛋白质研究方法，其在蛋白类药物分析中极为重要。
通过肽图分析，明晰酶解后肽段具体分布情况，这对于蛋白类药物的深入研究也具有重要意义。
此外，肽图分析非常适合验证序列和识别序列变异，如点突变。
HPLC肽图分析是一种用于分析和表征重组蛋白质药物的关键技术。
它利用高效液
相色谱（HPLC）来分离蛋白质的肽段，从而为我们提供有关蛋白质的氨基酸序列、修饰和结构的重要信息。
通过肽图分析，可以确保蛋白质药物在生产过程中的一致性和稳定性，同时也有助于确认产品是否受到污染或降解。
生物制品表征HPLC肽图分析示意图。
百泰派克生物科技（BTP），采用CNAS和ISO9001双重认证质量控制体系管理实验室，为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务。
我们基于公司自有的高效
液相色谱仪和液质联用仪，建立了HPLC肽图和HPLC质量肽图分析平台，可以为您提供直接的HPLC肽图/HPLC质量肽图分析服务和完整的方法学建立&验证&转让服务。
欢迎免费咨询！
百泰派克生物科技重组蛋白质药物表征内容。
★论著★重组蛋白药物C末端不同长度氨基酸序列的质谱分析*李萍，赵永强，薛燕，刘锋，刘炳玉，何昆，王红霞（国家生物医学分析中心，北京100850）摘要目的：基于本实验室已建立的溴化氰裂解蛋白质C末端方法结合优化后的质谱检测技术，对C末端长度分别为2 37个氨基酸，相对分子质量在200 5000的8个重组蛋白药物进行检测。
方法：（1）针对重组蛋白药物的不同状态（SDS－PAGE、干粉或溶液）分别进行C末端胶内或溶液裂解；（2）质谱检测，正离子方式，雾化气为氮气，碰撞气体为氩气。
源温80ħ，锥孔电压50V，MCP检测器电压为2.15kV。
结果：8个重组蛋白药物的C末端全部成功检测出，且基本为基峰。
结论：建立的重组蛋白药物C末端测序联用方法应用于实际药物的检测具有很高的实用价值和学术意义。
关键词：溴化氰裂解；ESI－MS/MS质谱技术；C末端测序中图分类号：R917文献标识码：A文章编号：0254－1793（2011）06－1003－05Mass spectrometry analysis of recombinant protein drugswith C－terminal amino acid sequence of different lengths*LI Ping，ZHAO Yong－qiang，XUE Yan，LIU Feng，LIU Bing－yu，HE Kun，WANG Hong－xia（National Center of Biomedical Analysis，Beijing100850，China）Abstract Objective：Based on the method established by cyanogen bromide cleavage of proteins C－terminal com-bined with the optimized mass spectrometry in our laboratory，detection of C－terminal lengths of2to37amino acids，relative molecular mass200－5000of the8recombinant protein drugs．Methods：（1）For different states of recombinant protein drugs（SDS－PAGE，dry powder or solution）to C terminal cleavage in gel or solution，respec-tively．（2）Mass spectrometry detection，positive ion mode，atomization gas was nitrogen，collision gas was argon，source temperature80ħ，cone voltage50V，MCP detector voltage of2.15kV．Results：All of C－terminal of the8 recombinant protein drugs successfully detected as the base peak．Conclusions：The established C－terminal se-quencing method of the recombinant protein was applied to the actual drugs testing，have high practical value and academic significance．Key words：cyanogen bromide cleavage；ESI－MS/MS technique；C－terminal sequenceing随着基因工程和重组蛋白药物工程的发展，越来越多的重组蛋白药物不断研发并走向市场。
第52卷分析化学（FENXIHUAXUE）研究报告第3期2024年3月ChineseJournalofAnalyticalChemistry380~388
DOI:10.19756/j.issn.0253-3820.231122
基于液相色谱-质谱联用技术的重组人生长激素低丰度产品相关物质结构表征
刘海龙1,2冯佳2张金亮1,2王舒越2刘锋2张飞飞2孙丹丹2焉梦寒2杨新2王英武*1,21（吉林大学生命科学学院，长春130023）2（长春金赛药业有限责任公司，长春130012）
摘要重组人生长激素（Recombinanthumangrowthhormone，rhGH）是一种采用基因工程技术在大肠杆菌中表达的蛋白质药物，广泛用于治疗儿童及成人生长激素缺乏症等多种疾病。在rhGH药物工艺开发与生产过程中，可能产生多种产品相关物质，对药物质量构成潜在影响。因此，对rhGH主成分及产品相关物质进行深入的结构表征和合理的质量控制对保障药品质量具有重要意义。《欧洲药典》收录了用于rhGH产品相关物质质量控制的反相高效液相色谱方法，以及高丰度色谱峰的结构鉴定信息，但对于低丰度产品相关物质的结构分析并没有详细记载。本研究采用反相高效色谱与液相色谱-质谱联用技术，成功分离并鉴定了rhGH产品中的3种低丰度产品相关物质。研究结果表明，rhGH低丰度产品相关物质普遍含有多种修饰或
罕见修饰，包括N99和N149双位点脱酰胺、N端缺失两个氨基酸同时N149脱酰胺、Q122脱酰胺、N端氨基甲
酰化和N端丁二酰化，其中首次在rhGH中发现N端丁二酰化修饰。本研究对rhGH产品相关物质进行了深入表征，为rhGH药物的研发和工艺改进提供了依据。
关键词重组人生长激素；结构表征；产品相关物质；翻译后修饰；液相色谱-质谱联用
生长激素（Growthhormone，GH）是一种由人脑垂体前叶分泌的蛋白质激素，可与生长激素受体结合，诱导胰岛素样生长因子1（Insulin-likegrowthfactor，IGF-1）分泌，从而促进人体骨骼的生长发育。1958年，Raben等[1]首次从人脑垂体中提取人生长激素（Humangrowthhormone，hGH），用于治疗生长激
