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大鼠TBI后急性期下丘脑-垂体-肾上腺轴损害和功能改变的意义研究解析

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中华生物医学工程杂志2016年8月第22卷第4期ChinJBiomedEng，August2016，Vol.22，No.4·论著·

大鼠TBI后急性期下丘脑⁃垂体⁃肾上腺轴损害和功能改变的意义研究

刘先进高岩生孙青芳【摘要】目的探讨重型颅脑创伤（TBI）大鼠急性期下丘脑⁃垂体⁃肾上腺轴损害和功能改变对神经功能、学习记忆功能的影响作用。方法选取成年健康雄性SD大鼠60只，随机分为假手术组、模型组和地塞米松组各20只，模型组和地塞米松组大鼠采用Feeney法制备大鼠TBI模型，地塞米松组大鼠与伤后10min、24、48、72h腹腔注射地塞米松0.6mg/kg，其余2组给予等量生理盐水处理，分别检测并比较3组大鼠伤后3、12、24、72h的外周血皮质酮、促肾上腺皮质激素（ACTH）水平及神经细胞凋亡情况的变化，并观察3组大鼠伤后1、7d的神经功能评分、伤后第7天的水迷宫实验结果差异。结果模型组和地塞米松组大鼠伤后不同时间外周血皮质酮、促肾上腺皮质激素水平、水迷宫潜伏期和神经细胞凋亡程度较假手术组均有明显升高（P<0.05），但地塞米松组伤后外周血皮质酮、促肾上腺皮质激素水平明显高于模型组（P<0.05），水迷宫潜伏期和神经细胞凋亡程度明显低于模型组（P<0.05）；模型组和地塞米松组大鼠伤后不同时间水迷宫实验象限百分率较假手术组均有明显降低（P<0.05），但地塞米松组伤后水迷宫实验象限百分率明显高于模型组（P<0.05）。结论TBI大鼠急性期下丘脑⁃垂体⁃肾上腺功能发生改变，皮质酮与ACTH水平升高，这可能与神经功能、学习记忆功能损害具有一定的关系。【关键词】创伤,神经系统；地塞米松；大鼠,Sprague⁃Dawley

Significanceofchangesinhypothalamic⁃pituitary⁃adrenalaxisdamageandfunctionafterTBIinratsLiuXianjin*，GaoYansheng，SunQingfang.*DepartmentofNeurosurgery，ZhumadianCentralHospital，Zhumadian，Henan463000，ChinaCorrespondingauthor：LiuXianjin，Email：medicalliu@163.com【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheeffectofacute⁃phasehypothalamic⁃pituitary⁃adrenalaxisdamageandfunctiononneurologicalfunction，andlearningandmemoryattheacutephaseinratswith

severetraumaticbraininjury（TBI）.MethodsSixtyhealthymaleadultSDratswererandomlydividedintoshamoperationgroup，modelgroupandDexamethasonegroup（n=20each）.ThemodelgroupandDexamethasonegroupweretreatedwithFeeneymethod，andtheratTBImodelswereestablished.TheDexamethasonegroupwasinjectedwith0.6mg/kgDexamethasoneintraperitoneallyat10min，24，48and72hoursafterinjury.Theothertwogroupsweretreatedwithequalvolumeofnormalsaline.Thechangesonthelevelsofperipheralbloodcorticosterone，adrenocorticotropichormone（ACTH）andneuronalapoptosisat3，12，24and72hoursaftertheinjuryweremeasuredandcomparedamongthethreegroups.Thedifferencesintheneurologicalscoresat1and7daftertheinjury，andthefindingsofthewatermazetestat7daysaftertheinjuryweredetermined.ResultsThelevelsofperipheralbloodcorticosterone，ACTH，watermazelatency，andneuronalapoptosisatthedifferenttimepointsaftertheinjuryinthemodelgroupandDexamethasonegroupweresignificantlyincreased（P<0.05）.ThelevelsofperipheralbloodcorticosteroneandACTHaftertheinjuryintheDexamethasonegroupweresignificantlyhigherthanthoseinthemodelgroup（P<0.05），whereasthewatermazelatencyandneuronalapoptosisweresignificantlylowerthanthose

DOI：10.3760/cma.j.issn.1674⁃1927.2016.04.003作者单位：463000河南驻马店，驻马店市中心医院神经外二科（刘先进、高岩生）；上海交通大学医学院附属瑞金医院神经外科（孙青芳）通信作者：刘先进，Email：medicalliu@163.com

··278万方数据中华生物医学工程杂志2016年8月第22卷第4期ChinJBiomedEng，August2016，Vol.22，No.4

急性重型颅脑创伤（traumaticbraininjury，TBI）通常为外力打击造成的较为严重的脑组织挫伤，现阶段临床上对于重型颅脑损伤的研究已逐渐开始关注神经⁃内分泌系统的变化。部分学者认为，下丘脑⁃垂体⁃肾上腺轴作为神经⁃内分泌系统的重要组成部分，通过参与血液动力学的稳定以及应激反应的调控，进而参与到重型颅脑损伤后急性期机体应激过程［1］。足够的皮质醇激素是机体能平稳度过急性应激期的重要保证，而TBI患者多数存在不同程度的肾上腺皮质功能代偿不足，进而影响患者恢复期神经系统相关功能［2⁃3］。本研究重在探讨重型颅脑创伤（traumaticbraininjury，TBI）大鼠急性期下丘脑⁃垂体⁃肾上腺轴损害和功能改变对神经功能、学习记忆功能的影响作用，为能有效处理颅脑损伤急性期体内应激变化奠定理论基础，现报道如下。1材料与方法1.1实验动物选取成年健康雄性SD大鼠60只，大鼠体重300~350g，由东南大学医学部动物实验中心提供，动物许可证号：SCX2014011，SPF级；编号后采用随机数字表法分为假手术组、模型组和地塞米松组各20只，模型组和地塞米松组大鼠制备TBI模型。各组大鼠均自由进食进水、12h光照时间、22~25℃环境下喂养。1.2造模方法采用Feeney法建立大鼠TBI模型，打击器由撞杆、下落锤、外周套管三部分组成，水合氯醛10mg/kg腹腔内注射麻醉大鼠，仰卧位固定头部，矢状切开头皮，于人字缝前房和中线旁左侧2mm钻开小孔，扩大骨窗为5mm×5mm，击锤质量40g，沿外周套管从25mm高处自由落下，造成左侧大脑半球局部脑组织挫裂伤。石蜡封闭骨窗，缝合头皮。1.3实验方法伤后10min、24、48、72h腹腔注射地塞米松0.6mg/kg，其余两组给予等量生理盐水处理，于股静脉采血，分离血清，测定外周血皮质酮、促肾上腺皮质激素水平、神经细胞凋亡情况。1.4观察指标

分别检测并比较3组大鼠伤后3、12、24、72h的外周血皮质酮、促肾上腺皮质激素（ACTH）水平及神经细胞凋亡的变化，并观察3组大鼠伤后1、7、14d的神经功能评分、伤后第7、14d的Morris水迷宫实验结果差异（逃避潜伏期、象限百分率）。神经功能评分方法采用mNSS评分标准，（1）提尾反射（正常0分、最高3分）；（2）行走测试（正常0分、最高3分）；（3）感觉测试（正常0分、最高2分）；（4）平衡测试（正常0分、最高6分）；（5）反射测试、反射运动（正常0分、最高4分）；当缺少一项或动物不能完成任何一项得1分，得分越高，神经功能越差。Morris水迷宫实验：将安全岛置放于水迷宫（N、

S、E、W）四个象限中的任何一个，加水至高过安全

岛1cm，水温22~25℃，跟踪记录大鼠由其他3个象限寻找安全岛的距离、轨迹及潜伏期，如果90s内未能找到安全岛，记录潜伏期为90s。1.5外周血皮质酮、促肾上腺皮质激素水平及神经

细胞凋亡情况测定外周血皮质酮、促肾上腺皮质激素水平采用免疫发光法测定（南京凯基生物科技有限公司试剂盒），使用日本日立公司Immunlife全自动生化检测仪器。神经细胞凋亡采用TUNEL法检测（TUNEL法原位细胞凋亡检测试剂盒，上海麦约尔生物技术有限公司），根据试剂盒说明书进行操作，并镜下于损伤部位周边任意选取6个视野，分析阳性细胞染色数量和细胞总数。1.6统计学方法

所有数据采用SAS9.0软件包中处理，计量资料采用x±s表示，组间两两比较采用SNK⁃q检验，多组

inthemodelgroup（P<0.05）.ThepercentageofwatermazequadrantatdifferenttimepointsaftertheinjuryinthemodelgroupandDexamethasonegroupwassignificantlylowerthanthatintheshamoperationgroup

（P<0.05），whereasthepercentageofwatermazequadrantaftertheinjuryintheDexamethasonegroupwassignificantlyhigherthanthatinthemodelgroup（P<0.05）.ConclusionChangesinthehypothalamic⁃

pituitary⁃adrenalaxisfunctionattheacutephaseinratswithTBIarefoundthatthelevelsofcorticosteroneandACTHareincreased.Itmayberelatedtothedamageofneurologicalfunction，andlearningandmemory.

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《2024年丁苯酞对Aβ致大鼠学习记忆损伤的影响及机制研究》范文

《2024年丁苯酞对Aβ致大鼠学习记忆损伤的影响及机制研究》范文

《丁苯酞对Aβ致大鼠学习记忆损伤的影响及机制研究》篇一一、引言近年来，随着人口老龄化的加剧，阿尔茨海默病（AD）的发病率逐渐上升，已成为全球范围内的重大公共卫生问题。

AD的主要病理特征是脑内β-淀粉样蛋白（Aβ）异常沉积所导致的神经元损伤和认知功能下降。

丁苯酞作为一种具有广泛应用前景的神经保护药物，其对Aβ致大鼠学习记忆损伤的干预作用及其机制值得深入研究。

本文旨在探讨丁苯酞对Aβ致大鼠学习记忆损伤的影响及机制，以期为AD的治疗提供新的思路和实验依据。

二、材料与方法1. 实验动物与分组选用健康成年SD大鼠，随机分为正常对照组、Aβ模型组、丁苯酞治疗组。

2. Aβ模型制备及药物治疗通过向大鼠脑内注射Aβ肽段制备AD模型，丁苯酞治疗组在模型制备后给予丁苯酞药物治疗。

3. 学习记忆能力检测采用Morris水迷宫、避暗等行为学实验检测各组大鼠的学习记忆能力。

4. 脑组织标本处理及检测指标取脑组织标本进行切片、免疫组化等处理，检测神经元损伤、突触结构变化等指标。

三、结果1. 丁苯酞对Aβ致大鼠学习记忆损伤的影响与正常对照组相比，Aβ模型组大鼠学习记忆能力明显下降；而丁苯酞治疗组大鼠学习记忆能力得到显著改善。

Morris水迷宫、避暗等行为学实验结果表明，丁苯酞能够显著提高Aβ致学习记忆损伤大鼠的空间认知能力和记忆能力。

2. 丁苯酞对Aβ致神经元损伤的影响免疫组化结果显示，Aβ模型组大鼠脑内神经元损伤明显，而丁苯酞治疗组神经元损伤程度减轻。

丁苯酞能够降低Aβ引起的神经元凋亡和坏死，减轻脑内炎症反应。

3. 丁苯酞的作用机制通过检测脑内突触结构、神经递质等指标，发现丁苯酞能够促进突触形成和突触传递，改善神经元之间的信息传递。

此外，丁苯酞还能够调节脑内相关基因的表达，抑制Aβ的生成和沉积。

四、讨论本研究表明，丁苯酞能够显著改善Aβ致大鼠学习记忆损伤，减轻神经元损伤和脑内炎症反应。

其作用机制可能与促进突触形成和传递、调节相关基因表达、抑制Aβ生成和沉积等方面有关。

rhorock通路在创伤性脑损伤后神经再生中的作用机制

rhorock通路在创伤性脑损伤后神经再生中的作用机制

组织学根据； ②通过分子生物学手段（PCR）测定对照组及实验组大鼠大脑皮层、下丘脑、 垂体、脑干、损伤处及其周边脑细胞中Rho、ROCK、NF-κB、神经营养因子、 NOGO-A、等的基因表达水平；
取大鼠大脑中动脉（MCA）做Rho激酶活性、MLCP活性、MLCK活性及MLC磷
酸化水平测定。
实验方法



6. Zhou Q, Gensch C, Liao JK.Rho-associated coiled-coil-forming kinases (ROCKs): potential targets for the treatment of atherosclerosis and vascular disease.Trends Pharmacol Sci. 2011,32(3):167-173.
为轻、中、重三组。于伤后0.5、6、12、24、48、72h断头取血，开颅取脑，进行如下实验：
实验方法
①免疫组化和电镜观测Rho、ROCK、NF-κB、神经营养因子、NOGO-A等在对照 组（假手术组）及实验组（颅脑损伤动物模型组）SD大鼠大脑皮层、下丘
脑、垂体、脑干、损伤处及周边区脑组织中的分布特征和定位规律，以寻找
元。我国每年约有10万人死于TBI，其中，因车祸死亡约 5万人，这一数字也呈上升趋势。
立论依据
本课题为国家自然基金项目-“创伤性脑损伤的神经源性机 制及其干预实验研究”的后续研究，着重讨论Rho/Rock 通路在TBI后神经源性炎症和神经再生修复中的作用机制, 探索新的干预措施，从新角度探求脑创伤后神经修复的 新治疗策略和方案。
（3）Rho激酶抑制剂通过干预Rho/ROCK信号转导通路，对减 轻TBI的严重程度、促进神经再生和功能恢复方面能起一定 作用，为临床治疗TBI提供新思路和新方法。 （4）成果以论文形式发表
热应激对兔下丘脑-垂体-睾丸轴NMB及其受体基因表达和睾酮分泌的影响

热应激对兔下丘脑-垂体-睾丸轴NMB及其受体基因表达和睾酮分泌的影响

热应激对兔下丘脑-垂体-睾丸轴NMB及其受体基因表达和睾酮分泌的影响1. 引言1.1 研究背景热应激是机体在外界环境温度升高或其他压力作用下，产生的一种生理反应。

过高的温度会对机体内部稳态产生一定影响，导致生理功能紊乱。

兔作为常见的实验动物之一，其内分泌系统对热应激的反应十分敏感。

兔下丘脑-垂体-睾丸轴是控制雄性兔生殖功能的重要通路，其中神经肽NMB及其受体在调控睾丸功能和雄性激素分泌中发挥着重要作用。

研究表明，热应激能够显著影响兔下丘脑-垂体-睾丸轴的功能，导致NMB及其受体基因表达水平的改变，进而影响睾酮的合成和分泌。

深入探究热应激对NMB及其受体基因表达和睾酮分泌的影响机制，对于揭示热应激对兔生殖系统的影响机制具有重要意义。

本文旨在系统性地研究热应激对兔下丘脑-垂体-睾丸轴的影响，探讨热应激对NMB及其受体基因表达及睾酮分泌的调控机制，为进一步深入了解热应激对生殖系统的影响提供理论基础。

本研究将探讨实验结果在临床应用中的前景，为生殖疾病的治疗和预防提供新的思路和方法。

的展开将在接下来的篇幅中详细呈现。

1.2 研究目的研究的目的是探究热应激对兔下丘脑-垂体-睾丸轴NMB及其受体基因表达和睾酮分泌的影响机制，揭示热应激对生殖系统功能的调控作用。

通过深入研究热应激对NMB基因表达和受体基因表达的调控机制，探讨其对睾酮分泌的影响，为解决热应激导致的生殖系统功能紊乱问题提供理论基础和实验依据。

通过研究热应激对睾丸功能的影响，探讨热应激对生殖系统疾病的发病机制，为临床疾病的预防和治疗提供新思路和方法。

通过此研究，可以深入了解热应激对生殖系统的影响机制，为保护和促进人类健康提供重要的科学依据。

1.3 意义本研究的意义在于深入探讨热应激对兔下丘脑-垂体-睾丸轴的影响机制，为进一步理解热应激在生殖系统调节中的作用提供重要参考。

通过研究NMB及其受体基因表达在热应激条件下的变化，可以揭示热应激对生殖系统信号传导的调控机制，为相关疾病的治疗提供新思路。

丁苯酞通过下调NF-κB_信号通路抑制细胞焦亡减轻大鼠肾缺血-_再灌注损伤

丁苯酞通过下调NF-κB_信号通路抑制细胞焦亡减轻大鼠肾缺血-_再灌注损伤

第14卷 第4期2023年7月Vol. 14 No.4Jul. 2023器官移植Organ Transplantation ·论著·丁苯酞通过下调NF-κB 信号通路抑制细胞焦亡减轻大鼠肾缺血-再灌注损伤张瑞波 申开文 王强 袁强 沈俊【摘要】 目的 探讨丁苯酞对大鼠肾缺血-再灌注损伤（IRI ）的作用机制。

方法 将40只SD 大鼠随机分为假手术组（Sham 组）、模型组（IRI 组）、NF-κB 抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸酯（PDTC ）组、丁苯酞低剂量组（NBP-L 组）及丁苯酞高剂量组（NBP-H 组），每组8只。

检测各组大鼠血清肌酐（Scr ）、血清胱抑素C （Cys-C ）、血尿素氮（BUN ）和血清白细胞介素（IL ）-1β、IL-18水平，苏木素-伊红（HE ）染色观察各组肾组织病理损伤情况，采用蛋白质印迹法和免疫组织化学法检测肾组织中炎症因子、核因子（NF ）-κB 信号通路及细胞焦亡相关蛋白表达水平。

结果 与Sham 组比较，IRI 组肾组织损伤较为严重，Scr 、Cys-C 、BUN 和血清IL-1β、IL-18水平均升高，蛋白质印迹法结果显示NOD 样受体蛋白（NLRP3）、Gasdermin D （GSDMD ）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（Caspase ）-1、IL-18、IL-1β、NF-κB p65、p-NF-κB p65蛋白相对表达量均增加，免疫组织化学染色结果显示NF-κB p65、p-NF-κB p65、IL-1β、IL-18和NLRP3 蛋白表达均增多。

与IRI 组比较，PDTC 组、NBP-L 组和NBP-H 组肾组织的损伤程度均减轻，Scr 、Cys-C 、BUN 和血清IL-18、IL-1β水平均下降，蛋白质印迹法结果显示NLRP3、GSDMD 、Caspase-1、IL-1β、IL-18、NF-κB p65、p-NF-κB p65蛋白表达DOI: 10.3969/j.issn.1674-7445.2023.04.010基金项目：贵州省卫生健康委科学技术基金（gzwkj2021-220）；国家自然科学基金培育项目 [gyfynsfc （2020）-30]；贵州医科大学附属医院2022年博士科研启动基金（gyfybsky-2022-31）作者单位：550004 贵阳，贵州医科大学附属医院泌尿外科作者简介：张瑞波（ORCID: 0009-0009-3056-7298），硕士研究生，肾移植相关缺血-再灌注损伤与保护，Email:****************通信作者：沈俊（ORCID: 0000-0003-1208-5833），博士，副主任医师，肾移植相关缺血-再灌注损伤与保护，Email:***************.cn结构式摘要HE 染色观察肾组织病理学改变免疫组化染色检测炎症因子、 NF-κB 信号通路及细胞焦亡相关蛋白IRISham 组IRI 组PDTC 组NBP-H 组丁苯酞或PTDC 或0.9%氯化钠注射液NBP-L 组蛋白质印迹法检测炎症因子、 NF-κB 信号通路及细胞焦亡相关蛋白Scr 、BUN 、Cys-C 水平检测IL-1β、IL-18水平检测·540·第14卷器官移植肾脏缺血-再灌注损伤（ischemia-reperfusion injury ，IRI ）通常由器官移植、肾部分切除手术、败血症等引起，如不及时采取有效措施加以预防，很容易发展为急性肾损伤，导致病死率上升[1-6]。