土壤硝态氮的测定
- 格式：docx
- 大小：12.87 KB
- 文档页数：4
土壤硝态氮的测定
A 紫外分光光度法
1、方法提要
土壤浸出液中的NOj，在紫外分光光度计波长 210nm处有较高吸 光度，而浸出液中的其它物质，除 OH-、CO32-、HCO3-、NO2-和有机
质等外，吸光度均很小。将浸出液加酸中和酸化，即可消除 OH-、 CO32-、HCO3-的干扰。NO2-—般含量极少，也很容易消除。因此，用 校正因数法消除有机质的干扰后，即可用紫外分光光度法直接测定 NO3-的含量。
待测液酸化后，分别在 210nm 和 275nm 处测定吸光度。 A210 是 NO3-和以有机质为主的杂质的吸光度； A275只是有机质的吸光度，因
为”。3-在275nm处已无吸收。但有机质在 275nm处的吸光度比在 210nm 处的吸光度要小 R 倍，故将 A275 校正为有机质在 210nm 处应有 的吸光度后，从 A210中减去，即得NO3-在210nm处的吸光度(△ A)。
2、 适用范围
本方法适用于各类土壤硝态氮含量的测定。
3、 主要仪器设备
3.1 紫外—可见分光光度计；
3.2 石英比色皿；
3.3往复式或旋转式振荡机，满足 180r/min ±20r/min 的振荡频率或 达到相同效果；
3.4 塑料瓶： 200mL 。
4、 试剂
4.IH2SO4溶液(1 : 9):取10mL浓硫酸缓缓加入 90mL水中。 4.2氯化钙浸提剂[c（CaCl2）=0.01mol • L-1]:称取2.2g氯化钙
（CaCl2 • 6H20,化学纯）溶于水中，稀释至 1L。
4.3硝态氮标准贮备液[p （N）=100mg • L-1]:准确称取0.7217g经 105〜110C烘2h的硝酸钾（KNOa,优级纯）溶于水，定容至1L,存放于 冰箱中。
4.4硝态氮标准溶液[p （N）=10mg • L-1]:测定当天吸到10.00mL硝 态氮标准贮备液于 100mL 容量瓶中用水定容。
5、操作步骤
称取 10.00g 土壤样品放入 200mL 塑料瓶中,加入 50mL 氯化钙浸 提剂，盖严瓶盖，摇匀，在振荡机上于 20 C〜25 C振荡30min（180r/min ±
20r/min） ,干过滤。
吸取 25.00mL 待测液于 50mL 三角瓶中,加 1.00mL1 : 9 H2SO4 溶 液酸化,摇匀。用滴管将此液装入 1cm 光径的石英比色槽中,分别在 210nm和275nm处测读吸光值（A210和A275），以酸化的浸提剂调节仪器 零点。以NOj的吸光值（△ A）通过标准曲线求得测定液中硝态氮含量。 空白测定除不加试样外,其余均同样品测定。
NO3-的吸光值（△ A）可由下式求得：
△ A= A 210- A 275 X R
式中R为校正因数，是土壤浸出液中杂质 （主要是有机质）在210nm
和 275nm 处的吸光度的比值。其确定方法为:
A210是波长210nm处浸出液中NO3-的吸收值（A210硝）与杂质（主要是
有机质 ）的吸收值 （A 210 杂）的总和,即 A210= A210 硝+ A210 杂,得出 A210 杂= A
210- A 210 硝。选取部分土样用酚二磺酸法测得 NO3-—N 的含量后,根
据土液比和紫外法的工作曲线，即可计算各浸出液应有的 A210硝值，即 可得出 A210 杂。
A275是浸出液中杂质(主要是有机质)在275nm处的吸收值 個为
NO 3-在该波长处已无吸收)，它比A210杂小R倍，即A210杂=R • A275，得 出校正因数R=A 210杂/ A 275 0
各不同区域可根据多个土壤测定 R值的统计平均值，作为其他土
壤测试NO3-— N的校正因数，其可靠性依从于被测土壤的多少，测定 的土壤越多，可靠性越大。
标准曲线的绘制：分别吸取 10mg • L-1NO3-— N标准溶液0、
1.00、2.00、4.00、6.00、8.00mL ,用氯化钙浸提齐1」定容至 50mL，即卩
为0、0.2、0.4、0.8、1.2、1.6mg/L的标准系列溶液。各取 25.00mL于
50mL三角瓶中，分别加1mL1 : 9 H2SO4溶液摇匀后测 A210,计算A210 对NO3「一N浓度的回归方程，或者绘制工作曲线。
6、计算结果
土壤硝态氮， mg・ kg-1= (N)VD m
式中：p (N)—查标准曲线或求回归方程而得测定液中 NO3-— N的
质量浓度，mg • L-1;
V —浸提剂体积，mL(50mL);
D—浸出液稀释倍数，或不稀释则
m—土壤质量， go
7、注释
⑴土壤硝态氮含量一般用新鲜样品测定，如需以硝态氮加铵态氮 反映无机氮含量，则可用风干样品测定。
⑵一般土壤中N0»含量很低，不会干扰 NOj的测定。如果N02-
含量高时，可用氨基磺酸消除 (HNO2 + NH2SO3H = N2 + H2SO4 + H2。)，它
在210nm处无吸收，不干扰 N03-测定。 D=1 ; ⑶浸出液的盐浓度较高，操作时最好用滴管吸取注入槽中，尽量
避免溶液溢出槽外，污染槽外壁，影响其透光性。
⑷大批样品测定时，可先测完各液 （包括浸出液和标准系列溶液）
的 A210 值，再测 A 275值，以避免逐次改变波长所产生的仪器误差。
⑸如需同时测定土壤 NH4+ — N，可选用2 mol • L-1KCI或1
mol • L-1NaCI溶液制备待测液。但 2 mol • L-1KCI溶液本身在210nm处 吸光度较高，因此同时测定土壤 NH4+— N 和 NO3-— N 时，可选用吸光 度较小的1 mol • L-1NaCI溶液为浸提剂。
⑹如果吸光度很高（A > 1时），可从比色槽中吸出一半待测液，再 加一半水稀释，重新测读吸光度，如此稀释直至吸光度小于 0.8。再按
稀释倍数，用氯化钙浸提剂将浸出液准确稀释测定。
⑺根据北京和河北石灰性 15 个土壤样品的测定结果，校正因素 （R）
的平均值为 3.6，不同土类的 R 值略有差异，各地可根据主要土壤情况 进行校验，求出当地土壤的 R 值。
