HPLC法测定复方葛根片中葛根素的含量

医药杂志２０１４年Ｏ３月第３１卷第Ｏ３期Ｐｒａｃ　Ｊ　Ｍｅｄ＆Ｐｈａｒｍ．Ｖｏｌ　３１—２０１４－０３　Ｎｏ．０３　

条件所制得的含片各项指标均符合要求。且其制备工艺简　

单．适合于工业化大生产，具有良好的开发应用前景。　３＿３含量测定方法咽炎宁含片以玄参为君药，而玄参中哈　

巴苷、哈巴俄苷为其指标成分，故以哈巴苷、哈巴俄苷的含量　

作为控制制剂质量的指标。样品处理方法简单，精密度高、重　

现性好。　

药　学　・２４１－　

【参考文献】　『１］国家药典委员会．中华人民共和国药典２０１０年版一部［Ｓ］．北　京：中国医药科技出版社．２０１０．　『２］刘石林，向建南。吕守本．从甜菊叶中提取和精制甜菊苷的方法　

［Ｊ］．蚌埠医学院杂志，１９９５，２０（６）：４２５．　ｆ２０１３—０７—２９收稿，２０１３—０８—２５修回］　［本文编辑：羡秋盛］　

ＨＰＬＣ法测定复方葛根片中葛根素的含量　

王利娜．范莉莉．张正臣　

［关键词］　葛根素；高效液相色谱法（ＨＰＬＣ）；含量测定　

【中图分类号】Ｒ９２７．２　［文献标识码】Ｂ　

复方葛根片是由解放军第３７１医院研制制剂，被收载于　

《中国人民解放军医疗机构制剂规范｝２００２年版（增补本）第　

２Ｏ页。该药是由葛根、茵陈、丹参、延胡索组成，具有活血化　

瘀，和气镇痛，生津养心的作用。用于治疗冠心病、心绞痛、心　

肌梗死。方中葛根含有有效成分葛根素，为更好地控制药品　

的质量，有关测定葛根素含量的文献很多，但是复方葛根片　

中常见的测定成分为丹参酮ⅡＡ。笔者试用ＨＰＬＣ法测定复　

方葛根片中的葛根素的含量＿ｌ＿５】。　

１仪器和试药　

检测仪器：岛津ＬＣ—ＩＯＡＴ高效液相色谱仪，ＳＰＤ—ＩＯＡ紫　

外检测器；Ｎ２０００色谱工作站。试剂：甲醇、乙醇为色谱纯；磷　

酸为分析纯：水为二次重蒸水。药品：葛根素对照品购自中国　

药品生物制品检定所，批号：１１０７５２—２００５１１。复方葛根片由　

解放军３７１医院制剂室提供，批号：２０１２０６１２。　

２方法与结果　

２．１测定波长的选择　以甲醇一０．１％磷酸溶液（２５：７５）流动　

相为溶剂，在２００～３００　ｎｍ范围内对葛根素对照品进行扫描，　

结果在２５０　ａｍ处有最大吸收，故检测波长选定为２５０　ｎｍ。　

２．２流动相的选择根据文献报道及《中国药典》中采用的　流动相，比较了甲醇一０．１％磷酸溶液（２５：７５）；甲醇一０．０５％磷　

酸溶液（２５：７５），并设定柱温为３０℃，根据上述两种流动相的　试验结果，认为流动相①较理想，分离效果比较好，保留时　

间适中。经调整，将色谱条件和系统适用性试验确定为：色谱　

柱：Ｃ１８（１５０　Ｌｘ４．６）；流动相：甲醇一０．１％磷酸（２５：７５）；流速　

１．０　ｍｌ／ｍｉｎ；检测波长２５０　Ｙｌｍ；柱温３０℃；进样量ｌ０　ｌ，理论　

塔板数按葛根素峰计算应不低于１０００。色谱图见１～３。　

２．３线性范围、最小检出量　将葛根素对照品制成不同浓　

度的溶液，分别进样１０　ｌ，以峰面积（Ｙ）对进样浓度（ｘ，ｍｇ／　

ｍ１）进行线性回归，回归方程为ｙ＝２Ｅ＋０７ｘ一３１８６２，相关系数　

Ｒ＝０．９９９７，结果表明，葛根素浓度在１２．６～７５．６￣ｇ／ｍｌ范围内，　峰面积与浓度线性关系良好，见表１。　

取线性关系试验项下的１号溶液．精密量取２　ｍｌ，置　

１０　ｍｌ量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，精密量取１０　ｌ，　

［作者单位］４５３０００河南新乡，解放军３７１医院（王利娜，范莉莉，张　正臣）　０　Ｊ　２　３　４　５　６　７　８　９　１０　ｌＩ　ｌ２　１３　Ｉ４　１５　ｌ６　１７　Ｉ８　Ｉ９　２０　２ｌ　２２　２３　２４　２５　２６　２７　２８　２９　３０　时问ｆ　ｍｌｎ）　图１葛根素对照品色谱图　

时ｌ１日ｆ　ｌ　）　图２复方葛根片样品色谱图　

０　ｌ　２　３　４　５　６　７　８　９　ｌＩ】ｌ１　ｌ２　ｊ，Ｊ４】５　Ｉ＾Ｊ７　Ｉ８　Ｊ９　２ｆ１　２１　２２　２３　２４　２５　２６　２７　２８　２９　时阀ｔ¨ｍ）　图３缺葛根阴性样品色谱图　

表１　葛根素线性关系考察　

序号　

浓度（Ｘ，　ｇ／ｍ１）　１２．６　２５．２　３７．８　５０．４　６３　７５．６　

峰面积（Ｙ）　２７５１５４　５２７７３１　８３５４６３　１１４０６１７　１４２５７７１

　１７１０９０４　・２４２・　医药杂志２０１４年０３月第３１卷第０３期Ｐｒａｃ　Ｊ　Ｍｅｄ＆Ｐｈａｒｍ．Ｖｏｌ　３１，２０１４—０３　Ｎｏ．０３　

分别注入液相色谱仪，测定，色谱图中，信噪比１０：１．所以最　

小检出量＜２．５２　Ｉｘｇ／ｍｌ。　

２．４溶液的制备　

２．４．１对照品溶液的制备取葛根素对照品适量，精密称定　

置量瓶中，加３０％乙醇溶液制成４０　ｇ／ｍｌ的溶液，即得。　

２．４．２供试品溶液的制备取装量差异下的葛根素片适量．　

研细，取约１　ｇ，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入３０％乙　

醇溶液５０ｍｌ，密塞，称定重量，超声处理（功率１６０Ｗ，频率　

５０　Ｈｚ）３０ｍｉｎ，放冷，再称定重量，用３０％乙醇溶液补足减失　

的重量，摇匀，取上清液，滤过，取续滤液，即得。。　

２．５精密度试验取线性关系项下３号对照品溶液，精密　

量取１０　ｌ，重复进样６次，记录峰面积。结果ＲＳＤ为０．９１％，　

表明在此试验条件下精密度良好。　２．６　重复性试验　精密称取同一批供试品（批号：　

２０１２０６１２，按“２．４．２”项下方法制备供试品溶液，测定峰面积．　

计算得供试品中葛根素含量的平均值为９．２７　ｍｇ／片．ＲＳＤ为　

０．９５％。　

２．７稳定性试验取同一批供试品溶液（批号：２０１２０６１２），　

分别于１、２、３、４、５、６、７、８　ｈ进样，测定峰面积，葛根素峰面　积的ＨＳＤ为０．９９％，结果表明供试品溶液在８　ｈ内基本稳　

定。　

２．８　回收率试验　取已知含量的同一批供试品（批号：　

２０１２０６１２）６份，每份约Ｏ．５　ｇ，精密称定，精密加入０．１２６　ｍｇ／　

ｍ１的对照品溶液７５　ｍ１．按供试品溶液的制备方法操作．测　

定其含量，并计算回收率，结果见表２。葛根素的平均回收率　

为９９．８％，ＨＳＤ％为１．１４％　２．９样品含量测定结果　取批号为２０１２０６１２、２０１２０６１３、　

２０１２０６１４的３批复方葛根片样品，分别进行含量测定，结果　见表３。　

由以上结果可知，此含量测定方法可运用于复方葛根片　

药　学　表２加样回收率试验结果　

批号　２０１２０６ｌ２　２０１２０６１３　２０ｌ２０６１４　

的含量测定。　

３讨论　

本实验建立了ＨＰＬＣ法测定复方葛根片中葛根素的含　

量，处理方法简单，测定结果准确可靠，重复性好，不受其他　

成分干扰，可用于复方葛根片的质量控制。　

【参考文献】　

［１］曾祥群．葛根总黄酮提取工艺［　食品科技，２０００，２１（３１）：３３－３４．　【２］郭建平．薄层扫描法测定葛根提取物及制剂中葛根素的含量【Ｊ］．　中草药，１９９６，２７（４）：２１７．　［３】陈斌．ＨＰＬＣ法测定葛根中的葛根素和大豆甙［Ｊ］．食品科学，　

２００１，２２（４）：６４－６７．　［４］沙世炎，徐礼桑．中草药有效成分分析［Ｍ】．北京：人民卫生出版　社．１９９２．２８．　［５］王北婴．中药新药研制与申报【Ｍ】．北京：中国中医药出版社，　

１９９５．７５．　［２０１３—０９一ｌ１收稿，２０１３—１０—０６修回】　【本文编辑：羡秋盛】　

灵丹草口服液中洋艾素薄层鉴别和含量测定　

范　莹，吕　凌，谢宜名　

［关键词］灵丹草１２Ｉ服液；洋艾素；鉴别；含量测定；高效液相色谱；薄层色谱　

［中图分类号］Ｒ９２７．２：Ｒ２８２．７　［文献标识码］Ｂ　

灵丹草口服液为笔者所在疗养院自制中药单方制剂，方　

中灵丹草性辛、苦，寒，有毒，归肺经；其有效成分为洋艾素，　

具有清热解毒、止咳祛痰的功效。现代药理试验证明灵丹草　

具有抗病原微生物、抗感染、祛痰、抗肿瘤、对幽门螺杆菌的　

体外抑菌作用、镇痛等药理活性：该草药民间应用广泛，主要　

用于治疗上呼吸道感染、扁桃腺炎、咽喉炎、口腔炎、支气管　

炎、疟疾、痈肿疥疮等　。为了控制该制剂的质量，保证临床　

［作者单位］２６６０７１山东青岛，济南军区青岛第一疗养院（范莹）；　２５００１４山东济南，山东省中医药研究院（吕凌）；２６６００３山东青岛，　青岛大学医学院附属医院（谢宜名）　用药安全有效．本文主要介绍灵丹草口服液中的洋艾素鉴别　

及含量测定，为建立一个完整、科学的质量评价方法提供依　

据　］。　

１　材料　Ａｇｉｌｅｎｔ　１２００高效液相色谱仪（配备Ｇ１３２２Ａ脱气机，　

Ｇ１３１１Ａ四元泵。Ｇ１３２９Ａ自动进样仪，Ｇ１３１６Ａ柱温箱，　

Ｇ１３１５Ｄ　ＤＡＤ二极管阵列检测器，Ａｇｉｌｅｎｔ化学工作站）；　

ＢＴ１２５Ｄ型电子天平（赛多利斯科学仪器有限公司）；ＺＦ—Ｉ型　

三用紫外分析仪（上海顾村电光仪器厂）；硅胶Ｇ薄层板（青　

岛海洋化工厂分厂）；洋艾素对照品（由中国药品生物制品检