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黑参中人参皂苷Rg3的含量测定

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［Keywords］ black ginseng； ginsenoside-Ｒg3 ； HPLC
黑参为五加科植物人参 Panax ginseng C. A. Mey 经过九蒸九晒等炮制工艺加工而成的一种继红参之 后的人参新加工炮制品，目前还没有被 《中华人民 共和国药典》 所记载，黑参最早产于韩国，经过九 蒸九晒等炮制工艺加工而成［1］。近几年我国也在对 黑参进行开发研究，黑参比生晒参、红参有更强的 生物活性，如抗炎、抗氧化、增强免疫功能、降血 糖、抗肿瘤等［2］。人 参 皂 苷 Ｒg3 属 于 稀 有 皂 苷，是 黑参的主要成分，具有明显的生理活性，因此建立 人参皂苷 Ｒg3 的含量测定方法，为黑参资源的质量 控制和开发应用提供参考。
［关键词］ 黑参； 人参皂苷 Ｒg3 ； 高效液相色谱法 ［中图分类号］ Ｒ284. 1； Ｒ282. 71 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1673-4890（ 2019） 03-0323-05 doi： 10．13313 / j．issn．1673-4890．20180825002
Determination of Ginsenoside-Ｒg3 in Black Ginseng ZHU Lian-lian，LUAN Xiao-ning，DOU De-qiang*
College of Pharmacy，Liaoning University of Traditional Chinese Medicine，Dalian Liaoning 116600，China
［Abstract］ Objective： An HPLC method was established and validated for the determination of ginsenoside-Ｒg3 in black ginseng. Methods： Ginsenoside-Ｒg3 in black ginseng was determined by HPLC with Thermo column（ 4. 6 mm×250 mm， 5 μm） as stationary phase and acetonitrile-water in gradient elution mode as mobile phase. Ｒesults： The content of ginsenosideＲg3 in different batches of black ginseng was significantly different. The average content of ginsenoside-Ｒg3 was 1. 236 5 mg·g－1， the lowest was 0. 368 7 mg·g－1 ，and the highest was 2. 500 7 mg·g－1 ，with a difference of 6. 8 times. Conclusion： The method for determination of the ginsenoside-Ｒg3 content of in the black ginseng by HPLC was established，and different batches of samples were measured. The difference of ginsenoside-Ｒg3 content in different batches was obvious，the results provided a theoretical basis for the quality control and development and utilization of black ginseng.
1. 2 试药 人参皂苷 Ｒg3 对照品 （ 中国食品药品检定研究
院，批号： 110804-200603） ； 三氯甲烷（ 天津市科密 欧化学试剂有限公司） ； 液相用乙腈、甲醇均为色谱 纯； 水为超纯水。
1 材料
1. 1 仪器 万分之一分析天平（ Acculab 型，Sartorius group，
德国） ； 十万分之一分析天平（ CP225D 型，Sartorius group，德国） ； 电热鼓风干燥箱 （ 202-1 型，上海阳 光实验仪器有限公司） ； 高速万能粉碎机（ 武义县屹 立工具有限公司） ； 称量瓶（ 规格： 40 × 25） ； Agilent 1100 series 高效液相色谱仪； KQ-250DE 超声波清洗 器（ 昆山市超声仪器有限公司） ； 恒温水浴锅（ HH-S 型，巩义市予华仪器有限公司） 。
△ ［基金项目］ * ［通信作者］
国家自然科学基金（ 81773858） 窦德强，教授，研究方向： 中药药效（ 性） 物质基础及新药开发研究； E-mail： deqiangdou@来自126. com·323·
2019 年 3 月 第 21 卷 第 3 期
中国现代中药 Mod Chin Med
Mar. 2019 Vol. 21 No. 3
2019 年 3 月 第 21 卷 第 3 期
中国现代中药 Mod Chin Med
Mar. 2019 Vol. 21 No. 3
·基础研究·
黑参中人参皂苷 Ｒg3 的含量测定△
朱连连，栾晓宁，窦德强*
辽宁中医药大学 药学院，辽宁 大连 116600
［摘要］ 目的： 建立黑参中人参皂苷 Ｒg3 的含量测定方法。方法： 利用高效液相色谱法，采用 Thermo 色谱柱 （ 250 mm×4. 6 mm，5 μm） ，以乙腈-水为流动相梯度洗脱，测定黑参中人参皂苷 Ｒg3 含量。结果： 研究表明，不同批 次黑参中人参皂苷 Ｒg3 的含量差别明显，平均含量为 1. 236 5 mg·g－1 ，最低含量为 0. 368 7 mg·g－1 ，最高含量为 2. 500 7 mg·g－1 ，相差 6. 8 倍。结论： 建立了黑参中人参皂苷 Ｒg3 含量的测定方法，对不同批次样品进行测定后发 现，人参皂苷 Ｒg3 含量差别明显，为黑参的质量控制和开发利用提供参考。

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紫外分光光度法测定人参及三七中总皂苷含量

紫外分光光度法测定人参及三七中总皂苷含量

1
线性范围
反应温度和反应时间的影响
将人参总皂苷2浓
?
仪器和试剂
° 2∞
硫酸在设定的温度下反应 定时取样 测定 型和
⁄ ≅
型紫外 可
∀ 人参总
处的吸光度 ∀ 至吸光度不再升高 即可认为 反 应 已 达 完全 ∀ 结果在
2 3
见分光光度计 超声波清洗器 ⁄ 大孔吸附树脂 天津 骨胶厂 ∀ 装入玻璃层析柱 皂苷和人参 皂 苷 所 对照品 中国药品生物制品检定
3 3 3 4
蒸干 以浓硫酸溶解残渣并定容至
处的吸光度值 扣除空白样
∀
品的吸光度 代入线性方程 计算出样品中的人参总皂 计含量 见表 取 加入
∀
大孔树脂2 ∂ 法也可用于人参蜂王浆 !双宝素等 本方法的原理也适用于分析糖类和苷类 ∀ 我 们
收稿日期
加样回收率考察
粒双宝素胶囊 研匀 精 人参总皂苷 以人参皂苷 次 结果
口服液中人参总皂苷含量测定 ∀ 用此法分析过人参多糖及地黄中梓醇含量 结果满意 ∀
密称取 计 见表
按样品测定方法项下操作 重复测定
和 取已经在
ε 条件下 人参总皂苷彻
底反应所需的时间分别为 稳定性考察 苷反应液定时测其 在 内保持恒定 ∀
2 4
和
ε 水浴
∀
的人参总皂
正丁醇 !乙醇 !浓硫酸均为分析纯 ∀ 红参 !生晒参均采 自 吉 林 西 洋 参 为 美 国 进 口 三
处的吸光度值 结果 精密称取 红参于 和
七采自云南 双宝素胶囊 正大青春宝药业有限公司 ∀
2 5
即可将人参皂苷提净 ∀ 精密称取约 样品于具塞锥形
验
加入量
测得量
回收率
平均回收 率
HPLC法测定人参毛状根及不同人参样品中9种人参皂苷的含量

HPLC法测定人参毛状根及不同人参样品中9种人参皂苷的含量

ＣＨＥＮ Ｌｉｎｇ ，ＬＩ Ｃｈｕｎｙａｎ ，ＷＡＮＧ Ｚｈｅｎｇ ，ＪＩＡ Ｍ ｉｎ ，ＨＡＮ Ｔ ｉｎｇ （Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｏｇｎｏｓｙ ，Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ ，Ｓｅｃｏｎｄ Ｍ ｉｌｉｔａｒｙ Ｍ ｅｄｉｃａｌ Ｕ ｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ，Ｓｈａｎｇｈａｉ ２００４３３ ，Ｃｈｉｎａ）
１ 仪器与试药
１ ．１ 仪器 Ａｇｉｌｅｎｔ １２００ 高效液相色谱仪 （美国 Ａｇｉｌｅｎｔ 公司） ，配有在线脱气机 、四元泵 、自动进样 器 、柱温箱和二极管阵列检测器 （ＤＡＤ ） ；ＨＹＧ-Ａ 全 温摇瓶柜（江苏太仓） ；ＳＷ-ＣＪ-１Ｄ 超净工作台（苏州 净化） ；ＹＸＱ-ＬＳ-７５Ｓ Ⅱ 立式压力蒸汽灭菌器 （上海 博讯） ；Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ ＢＳ １１０Ｓ 万分之一电子天平（德国 Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ 公司） 。 １ ．２ 药品和试剂 人参皂苷标准品 （纯度 ＞ ９８％ ， 成都曼斯特有限公司 ） ；工业用甲醇 （上海思炯化工 科技有限公司） ；色谱乙腈 （上海国药集团化学试剂 公司） ；娃哈哈纯净水 （杭州娃哈哈集团有限公司） ； ０ ．４５ μｍ 微孔滤器（ＦＩＮ Ｅ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｌ ｔｄ ．） 。 人参主 根 、须根 、叶 、花和果取自吉林省通化市栽培的 ４ 年 人参 ，经第二军医大学秦路平教授鉴定为五加科植 物人参 。 人参饮片 （批号 ：１５０５０６ ，上海雷允上药业 有限公司） 。 人参毛状根由中南大学生命科学学院 医学遗传学国家重点实验室诱导并筛选获得 。 人参 毛状根在 １／２Ｍ Ｓ 培养基中悬浮培养 ，每 ３０ ｄ 继代 １ 次 ，在转速为 １３５ ｒ ／ｍｉｎ 的摇床上暗培养 ，温度
（２５ ± ２） ℃ 。
２ 方法与结果
２ ．１ 溶液的配制 ２ ．１ ．１ 标准品溶液 精密称取人参皂苷 Ｒｇ１ ４０ ｍｇ 溶于 １０ ｍｌ 甲醇 ；人参皂苷 Ｒｂ１ ２０ ｍｇ 溶于５ ｍｌ甲 醇 ；人参皂苷 Ｒｅ ４０ ｍｇ 溶于 ２ ｍｌ 甲醇 ；人参皂苷 Ｒｃ ２０ ｍｇ 溶于 ２ ｍｌ 甲醇 ；人参皂苷 Ｒｇ２ ８ ｍｇ 溶于 １０ ｍｌ 甲醇 ；人参皂苷 Ｒｈ２ ３５ ｍｇ 溶于 １０ ｍｌ 甲醇 ； 人参皂苷 Ｒｇ３ ２ ．５ ｍｇ 溶于 １０ ｍｌ 甲醇 ；人参皂苷 Ｒｂ２ ５０ ｍｇ 溶于 １０ ｍｌ 甲醇 ；人参皂苷 Ｒｄ ２０ ｍｇ溶 于 ２ ｍｌ 甲醇 。 得到上述各标准品母液 ，而后 ，精密 量取稀释后的母液各 ５０ μｌ ，即得混合标准品溶液 ， 置于４ ℃ 冰箱保存 。 ２ ．１ ．２ 样品溶液 精密称取 ０ ．５ ｇ 已干燥至恒重 的各样品粉末 （过 ２４ 目筛 ） ，加入 ２５０ ｍｌ 甲醇 ，于 ５５ ℃ 水浴恒温回流提取 １ ｈ ，过滤提取液 ，滤渣重复 提取 ２ 次 ，用适量体积的溶剂洗涤残渣 ，合并滤液 ， ６０ ℃ 减压浓缩 ，定容至 ５ ｍｌ ，用 ０ ．４５ μｍ 微孔滤膜 过滤 ，取续滤液作为供试品 。 ２ ．２ 色 谱 条 件 采 用 反 相 高 效 液 相 色 谱 Ｃ１８ 柱 （Ｚｏｒｂａｘ ＳＢ Ｃ１８ 柱 ，４ ．６ ｍｍ × ２５０ ｍｍ ，５ μｍ ） ，保 护柱 Ｅｘ ｔｅｎｄ-Ｃ１８ 柱 （４ ．６ ｍｍ × １２ ．５ ｍｍ ，５ μｍ ） ；检 测波长 ：２０３ ｎｍ ；柱温 ：３５ ℃ ；进样量 ：２０ μｌ ，流速 ： １ ．０ ｍｌ／ｍｉｎ ；以乙腈-水为流动相 ，梯度洗脱程序见 表 １ ，对照品及样品的 ＨＰＬＣ 图见图 １ 。
HPLC法同时测定人参皂苷Rb1、Rc、Rd、Rg3、CK和Rh2

HPLC法同时测定人参皂苷Rb1、Rc、Rd、Rg3、CK和Rh2

HPLC法同时测定人参皂苷Rb1、Rc、Rd、Rg3、CK和Rh2李东霄;常景玲;梁刚;李水水【期刊名称】《激光生物学报》【年(卷),期】2011(20)1【摘要】目的:建立高效液相色谱法同时测定人参皂苷Rb1、Rc、Rd、Rg3、CK和Rh2的方法.方法:采用ODSC18(4.6 mm×150 mm)色谱柱,流动相乙腈-0.05%磷酸水,梯度洗脱,流速1 Ml/min,检测波长203 nm,柱温35 ℃.结果:人参皂苷Rb1、Rc、Rd、Rg3、CK和Rh2分离效果良好,线性关系良好,相对标准偏差和回收率符合2010年版中华人民共和国药典要求.结论:本方法简便、准确、稳定、重现性好,可用于上述人参皂苷的含量测定.%Objective:To determine the content of ginsenoside Rb1, Rc, Rd, Rg3, CK and Rh2 simultaneously by HPLC. Methods:The samples were separated on an ODS C18(4.6 mm × 150 mm) column using acetonitrile-0. 05 ％ phosphoric acid solution as the mobile phase, with the gradient elution at a flow of 1.0 mL/min and 35 ℃ column temperature. The wavelength of the detector was set at 203 nm. Results: A good separation effect can be reached for ginsenoside Rb1, Rc, Rd, Rg3,CK and Rh2 which showed a good linear relationship between the peak area and the concentration of standard samples. The relative standard deviation (RSD) is good to meet the standard of pharmacopoeia of PRC. Conclusion:The method is simple, accurate, with a good reproducibility. Itcan be applied to qualitative and quantitative analysis of ginsenoside Rb1, Rc, Rd, Rg3, CK and Rh2.【总页数】8页(P87-93,107)【作者】李东霄;常景玲;梁刚;李水水【作者单位】河南科技学院生命科技学院,河南,新乡,453003;河南科技学院生命科技学院,河南,新乡,453003;河南科技学院生命科技学院,河南,新乡,453003;河南科技学院生命科技学院,河南,新乡,453003【正文语种】中文【中图分类】Q815【相关文献】1.HPLC法测定西洋参果浆及其发酵液中人参皂苷—Rg3、Rh2的含量 [J], 刘桂艳;刘墨祥;于连贵;杨献文;张春红2.HPLC法测定酶转化生产人参皂苷Rh2的含量 [J], 蒋磊;赵寿经;梁彦龙;李军华3.RP-HPLC同时测定西洋参总皂苷转化产物中人参皂苷Rh1、Rg3和Rh2的含量[J], 张泰;袁萍;茅仁刚;张华4.人参皂苷Rb1、Rg3、Rh2抗肿瘤作用与机制概况 [J], 姜卫卫;刘嘉5.HPLC法测定红参总皂苷中人参皂苷-Rh2的含量 [J], 张天斌;丁长江;李绪文;孟勤因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

高效液相色谱法测定人参超微粉中人参皂苷的含量

高效液相色谱法测定人参超微粉中人参皂苷的含量

高效液相色谱法测定人参超微粉中人参皂苷的含量皂苷类是人参的主要成分和药效成分，采用高效液相色谱法可准确测定人参中各皂苷类成分，本文主要介绍采用液相色谱测定在超微粉碎技术下得到不同粒度的粉末中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1的含量。

标签：高效液相色谱法，人参，人参皂昔本品为五加科植物人参Pana：c ginseng C.A.Mey.的干燥根和根茎。

它具有大补元气，补脾益肺，生津养血，安神益智等之功效。

临床用于体虚欲脱，肺虚气喘，肢冷脉微，脾虚食少，口渴少津，内热消渴，气血不足等[1]。

皂苷类成分是人参的主要活性物质和药效成分，因此提高它的提取率就可增强其生物利用率，以下将介绍同一批次的人参，在样品经过振动磨型超微粉碎机粉碎后得到不同粒度的粉体的皂苷含量进行测量[2]。

1 实验仪器与材料1.1 实验仪器AEL-200电子天平（沈阳龙腾电子称量仪器有限公司），AB204-N精密分析天平（METTLER TOLEDO），Agilent 1260型HPLC（Agilent Technologies），TKCD-1006超声波清洗仪（南昌科昌达超声波设备厂），Heal Force final Filter 超纯水機（上海浦东分析仪器设备厂），HH-4数显恒温水浴锅（常州国华电器有限公司），SQW-25系列超微粉碎机（山东济南三清易辰）。

1.2 实验材料人参皂苷标准品Rb1，Re，Rg1：中国药品生物制品检定所；乙腈（HPLC）。

1.3 样品制备同一批次人参（吉林省长白山）：人参粗粉（过40目筛）；人参样品经过超微振动磨型得到粒径分别为76.006～86.348 μm、29.963～30.025 μm、25.088～25.488 μm、22.163 μm。

1.4 对照品溶液的制备取人参皂苷Rg1对照品、人参皂苷Rg1对照品、人参皂苷Rg1对照品适量，精密称定，加甲醇定容；分别精密量取上述对照品溶液各1 mL，置于同一10 mL 容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。